DE2638089C2 - Lipase preparations with improved effects - Google Patents

Lipase preparations with improved effects

Info

Publication number
DE2638089C2
DE2638089C2 DE19762638089 DE2638089A DE2638089C2 DE 2638089 C2 DE2638089 C2 DE 2638089C2 DE 19762638089 DE19762638089 DE 19762638089 DE 2638089 A DE2638089 A DE 2638089A DE 2638089 C2 DE2638089 C2 DE 2638089C2
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
weight
percent
lipase
parts
acid
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired
Application number
DE19762638089
Other languages
German (de)
Other versions
DE2638089A1 (en
Inventor
Wolfgang Dr. 6000 Frankfurt Gretscher
Helmut Dr. 6450 Hanau Orth
Herward Dr. 6384 Schmitten Schindler
Günter Dr. 6000 Frankfurt Steinmetz
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Evonik Operations GmbH
Original Assignee
Degussa GmbH
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Degussa GmbH filed Critical Degussa GmbH
Priority to DE19762638089 priority Critical patent/DE2638089C2/en
Priority to DE19762660932 priority patent/DE2660932C2/en
Priority to FR7725374A priority patent/FR2362863A1/en
Priority to GB3525577A priority patent/GB1546328A/en
Publication of DE2638089A1 publication Critical patent/DE2638089A1/en
Application granted granted Critical
Publication of DE2638089C2 publication Critical patent/DE2638089C2/en
Expired legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/96Stabilising an enzyme by forming an adduct or a composition; Forming enzyme conjugates
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14Hydrolases (3)
    • C12N9/16Hydrolases (3) acting on ester bonds (3.1)
    • C12N9/18Carboxylic ester hydrolases (3.1.1)
    • C12N9/20Triglyceride splitting, e.g. by means of lipase
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)

Description

3 43 4

zae, Rhizopus delemar, Aspergillusarten wie Aspergillus 545/546, und Band 13, Seite 356). Insbesondere handeltzae, Rhizopus delemar, Aspergillus species such as Aspergillus 545/546, and Volume 13, page 356). In particular, acts

niger, Aspergillus oryzae oder Welchia perfringens, My- es sich um ein Aluminiumhydroxyd-Gel, welches durchniger, Aspergillus oryzae or Welchia perfringens, My- it is an aluminum hydroxide gel, which by

cotorula npolyrica, Candida cyclindracea, Geotrichum Fällung von Aluminiumsalz-Lösungen (zum Beispielcotorula npolyrica, Candida cyclindracea, Geotrichum Precipitation of aluminum salt solutions (for example

candidum. Vorzugsweise handelt es sich um Lipase Sulfat-Lösungen) mit Ammoniumcarbonat oder Natri-candidum. They are preferably lipase sulfate solutions with ammonium carbonate or sodium

nicht-tierischen Ursprungs. 5 umcarbonat und Trocknen des Filterkuchens erhaltenof non-animal origin. 5 umcarbonate and drying of the filter cake obtained

Die Gewinnung der in Betracht kommenden Lipasen wird (Gehalt an Al2Oj nicht weniger als 47%, yorzugserfolgt in der hierfür bekannten Weise und ist beispiels- weise 50—60%). Der pH einer 4%igen (Gewicht/Voluweise angegeben in Ulimanns Encyclopädie der techni- men) Suspension in COy-freiem Wasser soll nicht über sehen Chemie, Band 7 (1956), Seite 391—397,406—411 10,0 liegen. Solche Aluminiumhydroxid-Gele sind zum oder in Bulletin de la Societe de Chimie Biologique 1966, io Beispiel unter der Bezeichnung »Teg« im Handel
48 Nr. 6, Seiten 747—770 und 1968, 50 Nr. 11, Seiten Bei der hochdispersen Kieselsäure handelt es sich um 2179—2182. Beispielsweise wird eine Püzlipase entspre- eine Kieselsäure, die durch Hydrolyse von Siliciumtetrachend Bulletin de la Societ6 de Chiime Biologique 1966, chferid in der Wasserstoff-Flamme erhalten wird (Aero-48 Nr. 6, Seite 747 ff. wie folgt erhalten: Das nach Ab- sil). beispielsweise hat eine solche Kieselsäure folgende trennung des Myzels aus Kulturen yon Pilzsporenerhai- is Kenngrößen: Oberfläche (m2/g) nach BET: 50—225, teneFfltrat wird im Vakuum bei 30&C konzentriert, zen- vorzugsweise 120—225 beziehungsweise 170—225; trifugiert und aus der oberen Schicht nach Verdünnung mittlere Größe der Primärteilchen in Millimikron: das Enzym mit Aceton bei 0°C gefällt und im Vakuum 12—30, vorzugsweise 12—16; Schüttgewicht (normale getrocknet. Zur weiteren Reinigung wird in Wasser su- Ware) in g/Liter: ca. 60; Stampfvolumen (normale Ware spendiert, zentrifugiert, SO4-Ionen durch Zusatz von 20 nach DiN 53 194) in ml/IÜö g: 15ÖÖ—20ÖÖ, vorzugswei-Bariumchlorid ausgefällt, das Enzym wiederum mit Ace- se 1700—2000; pH-Wert (nach DIN 53 200) in 4%iger ton ausgefällt und der so erhaltene Rückstand nach Auf- wässeriger Dispersion: 34—4,3, vorzugsweise 3,6—4,3.
lösen in destilliertem Wasser über eine mit Calcium be- Die Dialkylpolysiloxane sind bekannt und im Handel ladene Austauschsäule XE64 bei pH 4,7 aufgebracht erhältlich und werden nach den üblichen Verfahren er- und durch eine CalciumacetatlösungJbei pH 5,7 eluiert 25 halten, beispielsweise durch Polymerisation von Silico-Aus dem Eluat wird nach Einstellen auf pH 6 mit ver- nen oder durch Hydrolyse und chemische Kondensation dünntem Ammoniak das Enzym mit Aceton gefällt und von einer oder mehreren hydrolisierbaren Siliconverdas so erhaltene Produkt durch Suspension in deminera- bindungen der allgemeinen Formel R2S1X2, wobei R ei-Iisiertem Wasser nochmals über eine Sephadexsäule ne niedere Alkylgruppe mit 1—3 Kohlenstoffatomen, G25 Chromatographen. Aus dem so erhaltenen Eluat 30 vorzugsweise 1 —3 C-Atomen ist und X ein Halogenwird durch Gefriertrocknung (-700C) die Lipase als atom (beispielsweise Chlor) oder eine niedere Alkoxy-Pulver erhalten. gruppe darstellt Beispiele für solche Ausgangsverbin-
The lipases in question are obtained (Al 2 Oi content not less than 47%, preference is given in the manner known for this and is, for example, 50-60%). The pH of a 4% strength (weight / volume indicated in Ulimann's Encyclopadie der technical) suspension in COy-free water should not be overlooked Chemie, Volume 7 (1956), pages 391-397, 406-411, 10.0. Such aluminum hydroxide gels are commercially available at or in Bulletin de la Societe de Chimie Biologique 1966, io example under the name "Teg"
48 No. 6, pages 747-770 and 1968, 50 No. 11, pages The highly disperse silica is 2179-2182. For example, a Püzlipase corresponds to a silica which is obtained by hydrolysis of Siliciumtetrachend Bulletin de la Societ6 de Chiime Biologique 1966, chferid in the hydrogen flame (Aero-48 No. 6, page 747 ff. As follows: The according to Ab - sil). For example, such silica has the following separation of the mycelium from cultures yon is Pilzsporenerhai- characteristics: surface area (m 2 / g) according to BET: 50-225, teneFfltrat in vacuo at 30 C concentrated cen- preferably 120-225 or 170- 225; centrifuged and from the upper layer after dilution mean size of the primary particles in millimicrons: the enzyme precipitated with acetone at 0 ° C and in a vacuum 12-30, preferably 12-16; Bulk weight (normal dry. For further cleaning, water is used for su- ware) in g / liter: approx. 60; Tamped volume (normal goods donated, centrifuged, SO4 ions by adding 20 according to DIN 53 194) in ml / 10 g: 15 – 20, preferably barium chloride precipitated, the enzyme again with acetate 1700-2000; pH value (according to DIN 53 200) precipitated in 4% clay and the residue thus obtained after aqueous dispersion: 34-4.3, preferably 3.6-4.3.
The dialkylpolysiloxanes are known and commercially available exchange column XE64 applied at pH 4.7 and are obtained by the usual methods and eluted by a calcium acetate solution at pH 5.7, for example by polymerization After adjusting to pH 6 with ammonia or thin ammonia through hydrolysis and chemical condensation, the enzyme is precipitated from the eluate with acetone and one or more hydrolyzable silicones are converted into the product obtained by suspension in demineral compounds of the general formula R2S1X2, with purified water again over a Sephadex column ne lower alkyl group with 1-3 carbon atoms, G25 chromatograph. Preferably from the thus obtained eluate 30 1 -3 carbon atoms and a halogen is by freeze-drying (-70 0 C) obtained as X, the lipase atom (e.g., chlorine) or a lower alkoxy powder. group represents examples of such output compounds

Besonders auffällig ist die stabilisierende Wirkung bei düngen sind Dimethyldichlorsilan, Diäthyldichlorsilan,The stabilizing effect of fertilizers is particularly noticeable: dimethyldichlorosilane, diethyldichlorosilane,

einer Lipase aus Rhizopusarten, insbesondere Rhizopus Dimethyldiäthoxysilan, Methyläthyldichlorsiian, Dibu-a lipase from Rhizopus species, in particular Rhizopus dimethyl diethoxysilane, methyl ethyl dichloride, dibu-

arrhizus. Gemäß dem oben angegebenen Verfahren aus 35 tyldichlorsilan, Dihexylchlorsilan, Äthylbutyldiäthoxysi-arrhizus. According to the method given above from 35 tyldichlorosilane, dihexylchlorosilane, Äthylbutyldiäthoxysi-

BuIL Soc Chim. BioL 1966, Seite 747 ff. wird beispiels- lan und ähnliche.BuIL Soc Chim. BioL 1966, page 747 ff. Is exemplified and the like.

weise eine Lipase mit einer Aktivität von 8 800 000 Ein- Hierbei wird beispielsweise das hydrolysierbare SiIiheiten/g (Bestimmung mittels einer Olivenemulsion) er- con unter definierten Bedingungen mit Wasser umgehalten. Diese Lipase stellt ein reines Produkt dar und ist setzt und so ein Polysiloxan mit der gewünschten Viskohauptsächlich dadurch gekennzeichnet, daß sie zwei 40 sität erhaltea Das bevorzugte Polysiloxan ist Dimethyl-Optimum-pH besitzt, das eine um pH 7, das andere um polysiloxan.wise a lipase with an activity of 8,800,000 units. Here, for example, the hydrolyzable solids / g (Determination using an olive emulsion) ercon held in water under defined conditions. This lipase is a pure product and is mainly a polysiloxane with the desired viscosity characterized in that it maintains two 40 sity. The preferred polysiloxane is dimethyl optimum pH one around pH 7, the other around polysiloxane.

pH 3,5. Sie verhält sich sowohl in der Papierelektropho- Beispielsweise handelt es sich um ein Material mitpH 3.5. It behaves in the paper electropho- For example it concerns a material with

rese, in der Polyacrylamidgelelektrophorese als auch in dem Freinamen Simethicon. Dieses Material besteht imrese, in polyacrylamide gel electrophoresis as well as in the generic name Simethicon. This material consists of

der Chromatographie an Sephadexsäulen wie ein einzi- wesentlichen aus Dimethylpolysiloxan und 4 bis 4V2 Ge-the chromatography on Sephadex columns like a single essential one made of dimethylpolysiloxane and 4 to 4V2

ges Protein und nähert sich in ihrer Wirkungsweise ins- 45 wichtsprozent eines Siliciumdioxid-Aerogels. So besitzttotal protein and its mode of action approximates 45 percent by weight of a silicon dioxide airgel. So owns

besondere auf Triglyceride der Pankreas-Lipase (weite- beispielsweise das Silicon-Fließmittel dieser Mischung,special on triglycerides of pancreatic lipase (for example the silicone superplasticizer of this mixture,

re Eigenschaften siehe Bull. Soc. Chim. Biol. 1966, 48 welche von der Dow Corning Chemical Company her-For properties see Bull. Soc. Chim. Biol. 1966, 48 which are made by the Dow Corning Chemical Company

Nr. 6, Seiten 756—766). Eine Aktivitätssteigerung dieser gestellt wird, ein Molekulargewicht zwischen 14 000No. 6, pages 756-766). An increase in activity of this is made, a molecular weight between 14,000

Lipase kann durch eine weitere Reinigung über eine und 21 000, einen Siliciumgehalt von 37,3 bis 38,5%, eineLipase can by further purification over one and 21,000, a silicon content of 37.3 to 38.5%, one

Sephadexkolonne G 100 (in destilliertem Wasser) erhal- 50 Viskosität bei 25° C von 300 bis 600 centistokes (es), eineSephadex column G 100 (in distilled water) obtained 50 viscosity at 25 ° C from 300 to 600 centistokes (es), a

ten werden, wonach man ein Produkt erhält mit einer Dichte bei 25°C von 0,965 bis 0,970 und einen Bre-th, after which a product is obtained with a density at 25 ° C of 0.965 to 0.970 and a Bre-

Aktivität von 11000000 Einheiten/g (siehe Bull. Soc. chungsindex n? von 1403 ±0,002.Activity of 11000000 units / g (see Bull. Soc. Chung index n? Of 1403 ± 0.002.

Chim. Biol. 1968,50Nr. 11, Seiten 2179—2182). Das mittlere Molgewicht der DialkylpolysiloxaneChim. Biol. 1968,50 No. 11, pages 2179-2182). The average molecular weight of the dialkylpolysiloxanes

Das erfindungsgemäße Stabilisierungsmittel bewirkt liegt vorzugsweise zwischen 14 000 und 30 0G0, beieine Verbesserung der Haltbarkeit von Lipase beim Zu- 55 spielsweise bei ca. 24 000. Die Viskosität der Dialkylposammenbringen und/oder Mischen mit Zusätzen, wie sie lysiloxane kann beispielsweise zwischen 900—1100 cp für Enzym-Handelspräparate üblich sind, insbesondere (25°C) liegen: vorzugsweise „liegt sie zwischen solchen mit oberflächenaktiven Eigenschaften wie akti- 950—1050 cp. Der Anteil an Niederpolymeren (bis zu ve Tonerde, Aluminiumhydroxyd, Aluminiumoxyd, einem Molgewicht von 700) soll gering sein und unter hochdisperse Kieselsäure (Aerosil), Magnesiumcarbo- 60 0,5% liegen.The stabilizing agent effect of the invention is preferably between 14,000 and 30 ° G0, one Improvement of the shelf life of lipase at, for example, approx. 24,000. Bringing the viscosity of the dialkylposam and / or mixing with additives, such as lysiloxane, for example between 900-1100 cp are customary for commercial enzyme preparations, in particular (25 ° C.): preferably “it is between those with surface-active properties such as active 950-1050 cp. The proportion of low polymers (up to ve alumina, aluminum hydroxide, aluminum oxide, a molecular weight of 700) should be low and below highly disperse silica (Aerosil), magnesium carbonate 60 0.5%.

nat, Aluminiumsalzen (Aluminiumtrisilikate, Alumini- Silica-Gel ist eine aktive Kieselsäure, die zum Beispielnat, aluminum salts (aluminum trisilicates, aluminum-silica gel is an active silica which, for example

umphosphat), Dialkylpolysiloxane, SilicageL Kieselgur aus 5 ΐημ—4 mm großen Körnern besteht Die innereumphosphat), Dialkylpolysiloxane, SilicageL Kieselguhr consists of 5 ΐημ — 4 mm large grains The inner

und ähnliche. Gesamtoberfläche von 1 g Silical-Gel kann zum Beispieland similar. Total surface area of 1 g of silica gel can for example

Unter dem Begriff »aktive Tonerde« werden pulver- 400—800 m3 groß sein (siehe Römpp, Chemie-Lexikon,Under the term "active alumina" powder 400-800 m 3 will be large (see Römpp, Chemie-Lexikon,

förmige Oxyde, Oxydhydrate, Hydroxyde und basische 65 1966, Band IV, 5915—5916; Ulimanns Encyclopädie dershaped oxides, hydrated oxides, hydroxides and basic 65 1966, Volume IV, 5915-5916; Ulimann's Encyclopedia of the

Salze des Aluminiums verstanden, die nicht weniger als technischen Chemie, Band 15 (1964), Seiten 716—732).Salts of aluminum understood, the no less than technical chemistry, Volume 15 (1964), pages 716-732).

40% AI3O3 enthalten (siehe Ulimanns Encyclopädie der Vorzugsweise liegt die Korngröße zwischen 5—100 πιμ,40% AI3O3 contain (see Ulimann's Encyclopedia of Preferably the grain size is between 5-100 πιμ,

technischen Chemie, dritte Auflage, Band 4, Seiten vorzugsweise 10—50 mu. Das verwendete Siliciumdio-technical chemistry, third edition, volume 4, pages preferably 10-50 mu. The silicon dioxide used

xid hat -beispielsweise eine Oberfläche von 100—250 m2/g, vorzugsweise 150—200 m2/g. Der Wassergehalt liegt beispielsweise bei 0,5—2%, vorzugsweise zwischen 0,7—1,5%. Die Herstellung des Süiciumdioxids kann nach bekannten Verfahren erfolgen, wie durch Einwirkung von Schwefelsäure auf Wasserglas oder durch Hydrolyse von SiCU (siehe beispielsweise US-Patent 30 86 851, DE-AS 1163 784, DE-AS 12 10 421, DE-AS 11 50 955).xid has a surface area of 100-250 m 2 / g, preferably 150-200 m 2 / g, for example. The water content is, for example, 0.5-2%, preferably between 0.7-1.5%. The silicon dioxide can be produced by known processes, such as by the action of sulfuric acid on water glass or by hydrolysis of SiCU (see, for example, US Pat. No. 3,086,851, DE-AS 1163 784, DE-AS 12 10 421, DE-AS 11 50 955).

Die lipasehaltigen Präparate können darüber hinaus to noch weitere Enzyme enthalten, zum Beispiel proteolytisch wirksame Enzyme und Amylasen (zum Beispiel Proteasen und Amylasen, wie sie beispielsweise in Enzymkonzentrationen aus Aspergillus-Arten wie Aspergillusparasiticus vorliegen). . ·The preparations containing lipase can also be used to contain other enzymes, for example proteolytically active enzymes and amylases (for example Proteases and amylases, such as those present, for example, in enzyme concentrations from Aspergillus species such as Aspergillus parasiticus). . ·

Die Herstellung der Präparate erfolgt durch Vermischen der Lipase mit dem erfindungsgemäßen Stabilisierungsmittel sowie gegebenenfalls weiteren üblichen Zusätzen in hierfür üblichen Mischern und Homogenisienaigsgeräten (zum Beispiel Taumelmischer, Zwangs- mischer).The preparations are produced by mixing the lipase with the stabilizing agent according to the invention and, if appropriate, other customary ones Additions to the usual mixers and homogenization devices (for example tumble mixers, forced mixer).

Beispielexample

Ein Gewichtsteil Lipase wird mit 20 Gewichtsteilen Aluminiumhydroxyd-Gel (getrocknet) und 30 Teilen Süßmolkenpulver in einem Mörser fein zerrieben und vermischt (Temperatur 200C). Hierbei tritt ein Aktivitätsverlust der Lipase von 15—20% ein.One part by weight of lipase is finely ground in a mortar and mixed with 20 parts by weight of aluminum hydroxide gel (dried) and 30 parts of sweet whey powder (temperature 20 ° C.). This results in a loss of activity of the lipase of 15-20%.

Wird das Süßmolkenpulver weggelassen und durch 30 Gewichtsteile Lactose ersetzt, dann zeigt sich, daß nach dem Vermischen gegenüber der Mischung mit dem Süßmolkenpulver hingegen ein Aktivitätsverlust von rund 40% eingetreten istIf the sweet whey powder is omitted and replaced by 30 parts by weight of lactose, it is found that after mixing, however, a loss of activity compared to the mixture with the sweet whey powder of around 40% has occurred

Wird ein Gewichtsteil Lipase mit 20 Gewichtsteilen Aluminiumhydroxyd-Gel (getrocknet) ohne einen weiteren Zusatz bei 200C in einem Mörser zerrieben und vermischt, so tritt ebenfalls ein Aktivitätsverlust von rund 40Vi ein.If a part by weight of lipase triturated with 20 parts by weight aluminum hydroxide gel (dried) without a further additive at 20 0 C in a mortar and mixed, so also a loss of activity occurs approximately 40Vi.

4545

§}§}

Claims (4)

1 2 und ungesättigter Fettsäuren. Die Fettsäurezusammen- Patentansprüche: Setzung (in Gewichtsprozent) ist beispielsweise folgen de: Buttersäure 2—8, vorzugsweise 3,6—5,5; Capron-1 2 and unsaturated fatty acids. The fatty acid composition: Settlement (in percent by weight) is, for example, the following: butyric acid 2-8, preferably 3.6-5.5; Capron 1. Lipase enthaltendes Enzympräparat, da- säure 1—3, vorzugsweise 1,5—2; Caprylsäure 0,1—2, durch gekennzeichnet, daß es, bezogen auf 5 vorzugsweise.0,5—l;CaprmsäureO,l—5, vorzugsweise 1 Gewichtsteil Lipase, als Stabilisierungsmittel 03— 24; Laurinsäure 1—5, vorzugsweise .2,0—2,6; My-10—50 Gewichtsteile einer Mischung enthält, die ristinsäure 5—15, vorzugsweise 9,5—12; Palmitinsäure sich aus folgenden Bestandteilen zusammensetzt: 25—40, vorzugsweise 28—38; Stearinsäure 1—15, vor-70—90 Gewichtsprozent Lactose; 8—20 Gewichts- zugsweisel,5—10; gesättigte Säuren über C« 1—4, vorprozent Molkenprotein; 0,1—3 Gewichtsprozent 10 zugsweise 2—3; Decensäure 0,05—04; Dodecensäure Milchfett; 0,1—5 Gewichtsprozent Molkenmineral- 0,05—04; Tetradecensäure 0,1—3; Hexadecensäure stoffe und 0,1—3 Gewichtsprozent Wasser. 1—7; Octadecensäuren 20—40, vorzugsweise 25—35;1. Enzyme preparation containing lipase, acid 1–3, preferably 1.5–2; Caprylic acid 0.1-2, characterized in that, based on 5, it is preferably 0.5-1; Capric acid 0.1-5, preferably 1 part by weight of lipase, as a stabilizing agent 03-24; Lauric acid 1-5, preferably 2.0-2.6; My-10-50 parts by weight of a mixture containing ristic acid 5-15, preferably 9.5-12; Palmitic acid consists of the following components: 25-40, preferably 28-38; Stearic acid 1-15, pre-70-90 percent by weight lactose; 8-20 weight gauge, 5-10; saturated acids above C «1—4, prepentent whey protein; 0.1-3 percent by weight 10, preferably 2-3; Decenoic acid 0.05-04; Dodecenoic acid Milk fat; 0.1-5 weight percent whey mineral - 0.05-04; Tetradecenoic acid 0.1-3; Hexadecenoic acid substances and 0.1-3% by weight of water. 1-7; Octadecenoic acids 20-40, preferably 25-35; 2. Präparat nach Anspruch 1, dadurch gekenn- Octadecadiensäure 1 —5; ungesättigte Säuren über Qg zeichnet, daß die Mischung Süßmolkenpulver ist 1—3.2. Preparation according to claim 1, characterized in that octadecadienoic acid 1-5; unsaturated acids over Qg draws that the mixture is sweet whey powder 1–3. 3. Verfahren zur Herstellung des Lipase enthal- 15 Unter Molkenmineralstoffe wird eine Mischung von tenden Enzympräparates nach Anspruch 1, dadurch Phosphaten, Citraten, Chloriden, Sulfaten υςρ- Carbonagekennzeichnet, daß man Lipase mit 10—50 Ge- ten des Natriums, Kaliums, Calciums, Magnesiums und wichtsteilen (bezogen auf 1 Gewichtsteil Lipase) ei- spurenweise des Eisens verstanden. Der Gehalt der Mener Mischung aus 70—90 Gewichtsprozent Lactose; taue in der Salzmischung in Gewichtsprozenten ist bei-8—20 Gewichtsprozent Molkenproieir.; 0,1—3 Gc- 20 spielsweise folgender: Natrium 2—8, vorzugsweise 4—5 wichtsprozent Milchfett; 0,1—5 Gewichtsprozent Gewichtsprozent; Kalium 10—30, vorzugsweise 15—20 Molkenmineralstoffe und 0,1—3 Gewichtsprozent Gewichtsprozent; Calcium 2—30, vorzugsweise 4—15 Wasser mischt Gewichtsprozent; Magnesium 04—3, vorzugsweise3. Process for the production of the lipase contained 15 whey minerals are a mixture of enzyme preparations according to claim 1, characterized in that phosphates, citrates, chlorides, sulfates and carbonage are characterized in that lipase with 10-50 parts of sodium, potassium, calcium , Magnesium and parts by weight (based on 1 part by weight of lipase) in trace amounts of iron. The content of the Mener mixture of 70-90 percent by weight lactose; thaw in the salt mixture in percent by weight is -8-20 percent by weight of whey; 0.1-3 Gc-20, for example, the following: Sodium 2-8, preferably 4-5 percent by weight milk fat; 0.1-5 percent by weight percent by weight; Potassium 10-30, preferably 15-20 whey minerals and 0.1-3 percent by weight percent by weight; Calcium 2-30, preferably 4-15, water mixes percent by weight; Magnesium 04-3, preferably 4. Verfahren nach Anspruch 3, dadurch gekenn- 03—14 Gewichtsprozent; Eisen 0,01—0,1, vorzugsweizeichnet, daß man zur Herstellung des Präparats 25 se 0,02—0,08 Gewichtsprozent Innerhalb der Mischung nach Anspruch 2 als Stabilisierungsmittel Süßmol- kommen, bezogen auf ein Gewichtsteil Magnesium beikenpulver einsetzt spielsweise 3—8, vorzugsweise 5—7 Gewichtsteile Natrium, 2—15, vorzugsweise 4—8 Gewichtsteile Calcium4. The method according to claim 3, characterized in that 03-14 percent by weight; Iron 0.01-0.1, preferably wheat, that for the preparation of the preparation 25 se 0.02-0.08 percent by weight within the mixture According to claim 2, as a stabilizing agent, sweet molar, based on one part by weight of magnesium powder, uses, for example, 3-8, preferably 5-7 parts by weight of sodium, 2-15, preferably 4-8 parts by weight of calcium und 15—20, vorzugsweise 18—25 Gewichtsteile Kalium.and 15-20, preferably 18-25 parts by weight of potassium. 30 Der Gehalt an Säuren in Gewichtsprozenten in der Salzmischung ist beispielsweise folgender: Phosphatan-30 The content of acids in percent by weight in the Salt mixture is, for example, the following: Phosphate Die Erfindung betrifft das im Anspruch 1 angegebene ion (PO43-) 10—50, vorzugsweise 15 bis 25 Gewichts-Präparat und das Verfahren zu dessen Herstellung ge- prozent; Citratanion 10—30, vorzugsweise 15 bis 25 Gemäß Anspruch 3. Die Ansprüche 2 und 4 nennen Ausge- wichtsprozent; Chloridanion 10—20, vorzugsweise staltungen der Erfindung. 35 12—16 Gewichtsprozent; Sulfatanior» 2—8, vorzugswei-The invention relates to the ion (PO4 3 -) 10-50, preferably 15 to 25, weight preparation indicated in claim 1 and the method for its production per cent; Citrate anion 10-30, preferably 15 to 25 According to claim 3. Claims 2 and 4 name weight percent; Chloride anion 10-20, preferably embodiments of the invention. 35 12-16 percent by weight; Sulphate anior »2—8, preferably Iipase-Präparate haben technische Bedeutung und se 3—6 Gewichtsprozent; Carbonalanion 2—15, vorkönnen beispielsweise zur Fettspaltung verwandt wer- zugsweise 5—10 Gewichtsprozent; bezogen auf 1 g SuI-den. Ebenfalls können Lipase-Präparate zum Beizen bei fatanion kommen innerhalb der Mischung beispielsweider Gerbereivorbereitung Verwendung finden. se 2—5, vorzugsweise 24—3 Gewichtsteile Chlorida-Iipase preparations are of technical importance and are 3 to 6 percent by weight; Carbonal anions 2-15, for example, can be used for fat cleavage, preferably 5-10 percent by weight; based on 1 g suI-den. Lipase preparations can also be used for pickling at fatanion within the mixture, for example tannery preparation. se 2–5, preferably 24–3 parts by weight of chloride Die Handelsprodukte sind zum Zwecke der Standar- 40 nion,3—10,vorzugsweise4—6Gewichtsteile Phosphat-The commercial products are for the purpose of standard 40 nion, 3-10, preferably 4-6 parts by weight of phosphate disierung mit indifferenten Substanzen wie beispiels- anion, 3—10, vorzugsweise 4—6 Gewichtsteile Citratan-dizing with inert substances such as anion, 3–10, preferably 4–6 parts by weight of citrate weise Zucker, Stärke, Kieselgur usw. vermischt Diese ion und 04—2, vorzugsweise 0,8—14 Carbonatanion.wise sugar, starch, diatomaceous earth, etc. mixed this ion and 04-2, preferably 0.8-14 carbonate anion. Zusätze müssen als integrierende Bestandteile der Prä- Vorzugsweise werden als erfindungsgemäßes Stabili-Additives must be used as integral components of the pre- Preferably, as inventive stabilizer parate betrachtet werden. Es hat sich nun gezeigt, daß sierungsmittel 10—50 Gewichtsteile, insbesonderecan be viewed at the ready. It has now been found that surfactants contain 10-50 parts by weight, in particular Lipase häufig durch Zugabe solcher Zusatzstoffe insbe- 45 20—40 Gewichtsteile (bezogen auf 1 Gewichtsteil Lipa-Lipase, often by adding such additives, especially 45 20-40 parts by weight (based on 1 part by weight of lipase) sondere dann, wenn es sich um oberflächenaktive Stoffe se) Süßmolkenpulver verwendet Süßmolkenpulver istespecially when it comes to surface-active substances se) Sweet whey powder used is sweet whey powder handelt, eine starke Aktivitätsverminderung erfährt. ein gängiges Handelsprodukt und wird beispielsweiseacts, experiences a strong decrease in activity. a common commercial product and is for example Es wurde nun gefunden, daß diese Aktivitätsvermin- durch Sprühtrocknung von Molke (SCSmolke) hergederung in erheblich geringerem Maße eintritt, wenn sol- stellt (siehe Ulimanns Encyclopädie der technischen ehe lipasehaltigen Präparate zusätzliche 10—50 Ge- 50 Chemie, 12. Band^1960),Seite518).Siehe auch E.Wegewichtsteile, vorzugsweise 20—40 Gewichtsteile (bezo- lin, Netherlands Milk and Dairy Journal 5,263/73 (1951); gen auf 1 Gewichtsteil Lipase) einer Mischung enthal- S. G. Wiechers, ebenda 6,127/36 (1952); S. G. Wjechers, ten, die sich aus folgenden Bestandteilen zusammen- A. H. Willem, Nederlandse Centrale Org. voor Toegesetzt: 70—90%, vorzugsweise 82—86% Lactose; past-Natuurwetenschappelijk Onderzoek, DBP 8-20%, vorzugsweise 11-13% Molkenprotein; 55 8 19 194,1949; Food 23,166/71 (1954). 0,1 —3%, vorzugsweise 0,2—04% Milchfett; 0,1 -5%, Das verwendete Süßmolkenpulver stellt ein Gemisch vorzugsweise 1—2% Molkenmineralstoffe und aus 70—90%, vorzugsweise 82—86% Lactose, 8—20%, 0,1—3%, vorzugsweise 04—2% Wasser (%»Ge- vorzugsweise 11 —!3% Molkenprotein, 0,1—3%, vorwichtsprozente). zugsweise 0,2—04% Milchfett, 0,1—5%, vorzugsweiseIt has now been found that this activity reduction occurs to a considerably lesser extent through spray drying of whey (SCS whey) if it is (see Ulimann's Encyclopedia of Technical Before lipase-containing preparations an additional 10-50 Ge 50 Chemie, Volume 12, 1960), page 518). See also E. Weight parts, preferably 20-40 parts by weight (Bezlin, Netherlands Milk and Dairy Journal 5,263 / 73 (1951); gene to 1 part by weight of lipase) of a mixture containing S. G. Wiechers, ibid. 6,127 / 36 (1952); S. G. Wjechers, th, which is composed of the following ingredients - A. H. Willem, Nederlandse Centrale Org. voor Toegesetz: 70-90%, preferably 82-86% lactose; past-Natuurwetenschappelijk Onderzoek, DBP 8-20%, preferably 11-13% whey protein; 55 8 19 194.1949; Food 23, 166/71 (1954). 0.1-3%, preferably 0.2-04% milk fat; 0.1-5%, the sweet whey powder used is a mixture preferably 1-2% whey minerals and from 70-90%, preferably 82-86% lactose, 8-20%, 0.1-3%, preferably 04-2% water (% »Ge preferably 11-3% whey protein, 0.1-3%, weight percent). preferably 0.2-04% milk fat, 0.1-5%, preferably Unter Mölkenprotein oder Serumprotein versteht 60 1—2% Molkenmineralstoffe und 0,1—3%, vorzugsweiman die Proteine, die sich in der unterhitzten Milch nach se 04—2% Wasser dar (% bedeutet stets Gewichtspro-Ausfällung des Caseins (durch Elektroiyte, besonders zente).By whey protein or serum protein, 60 means 1-2% whey minerals and 0.1-3%, preferably the proteins that are in the heated milk after 04-2% water (% always means per-weight precipitation of the casein (by Elektroiyte, especially cents). Wasserstoffionen oder Lab) befinden. Dieses Milchse- Die zu stabilisierende Lipase kann tierischen oderHydrogen ions or rennet). This milk se- The lipase to be stabilized can be animal or rumprotein hat beispielsv/eise folgende Zusammenset- nicht-tierischen Ursprungs sein. Beispielsweise handeltRum protein has the following composition, for example, of non-animal origin. For example, acts zung: 55—65% ß\ und ^-Lactoglobuiin, 13—22% a- tion: 55-65% ß \ and ^ -lactoglobulin, 13-22% a- 65 es sich um Lipase aus Pankreas oder um Lipase aus65 it is lipase from pancreas or lipase from Lactalbulmin, 16—25% Immunglubuline und 3—4% Se- Pflanzen, beispielsweise aus Ricinusbohnen oder LipaseLactalbulmin, 16-25% immunoglobulins and 3-4% Se plants, for example from castor beans or lipase rumalbumin. aus Mikroorganismen, beispielsweise aus Pilzen wierum albumin. from microorganisms, for example from fungi such as Milchfett besteht aus den Triglyceriden gesättigter Rhizopus arrhizus, Rhizopus nigricans, Rhizopus ory-Milk fat consists of the triglycerides of saturated Rhizopus arrhizus, Rhizopus nigricans, Rhizopus ory-
DE19762638089 1976-08-24 1976-08-24 Lipase preparations with improved effects Expired DE2638089C2 (en)

Priority Applications (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE19762638089 DE2638089C2 (en) 1976-08-24 1976-08-24 Lipase preparations with improved effects
DE19762660932 DE2660932C2 (en) 1976-08-24 1976-08-24 Use of a mixture of 70-90% lactose, 8-20% whey protein, 0.1-3% milk fat, 0.1-5% whey minerals and 0.1-3% water (% = percent by weight) to stabilize enzyme preparations containing lipase
FR7725374A FR2362863A1 (en) 1976-08-24 1977-08-19 ENHANCED ACTION LIPASES PREPARATIONS AND IMPROVED MEDICAL PREPARATIONS CONTAINING LIPASES OF NON-ANIMAL ORIGIN
GB3525577A GB1546328A (en) 1976-08-24 1977-08-23 Non-animal lipase preparations with activity

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE19762638089 DE2638089C2 (en) 1976-08-24 1976-08-24 Lipase preparations with improved effects

Publications (2)

Publication Number Publication Date
DE2638089A1 DE2638089A1 (en) 1978-03-02
DE2638089C2 true DE2638089C2 (en) 1985-04-25

Family

ID=5986232

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE19762638089 Expired DE2638089C2 (en) 1976-08-24 1976-08-24 Lipase preparations with improved effects

Country Status (1)

Country Link
DE (1) DE2638089C2 (en)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2807090A1 (en) * 1978-02-20 1979-08-23 Degussa Lipase stabilisation in enzyme preparations - using animal globular proteins e.g. ovalbumin

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4944944A (en) * 1987-11-19 1990-07-31 Oklahoma Medical Research Foundation Dietary compositions and methods using bile salt-activated lipase
DE19735763A1 (en) * 1997-08-18 1999-02-25 Clariant Gmbh Detergents and cleaners
MY142014A (en) * 2004-04-08 2010-08-16 Nisshin Oillio Group Ltd A lipase powder, methods for producing the same and use thereof

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
NICHTS-ERMITTELT

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2807090A1 (en) * 1978-02-20 1979-08-23 Degussa Lipase stabilisation in enzyme preparations - using animal globular proteins e.g. ovalbumin

Also Published As

Publication number Publication date
DE2638089A1 (en) 1978-03-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE69332217T2 (en) Phospholipase A1, process for its preparation and use
EP0393725B1 (en) Process for activating genetically-engineered, heterologous eucaryotic proteins containing disulphide bridges after their expression in procaryotes
DE3013207C2 (en) Process for reducing the thermal stability of microbiological rennin
DE2926808A1 (en) PROTEASE PRODUCT WITH REDUCED ALLERGENIC EFFECT, PRODUCTION PROCESS AND DETERGENT
DE69128196T3 (en) ENZYME STABILIZATION
CH638241A5 (en) ENZYMPRAEPARAT WITH L-ALPHA-AMINOACYLAMIDASE ACTIVITY.
DE2229262B2 (en) Process for the isolation of a soluble soybean protein fraction
DE2117901A1 (en) Active baker's yeast and process for their production
Hashimoto et al. Studies on Xylanase from Trichoderma viride Part I. Isolation and Some Properties of Crystalline Xylanase
DE3046184C2 (en)
DE2638089C2 (en) Lipase preparations with improved effects
DE2807090C2 (en)
DE2424833C3 (en) Process for the production of maltose
DE2660932C2 (en) Use of a mixture of 70-90% lactose, 8-20% whey protein, 0.1-3% milk fat, 0.1-5% whey minerals and 0.1-3% water (% = percent by weight) to stabilize enzyme preparations containing lipase
US4472365A (en) Dicalcium phosphate dihydrate having improved monofluorophosphate compatibility and process for the preparation thereof
DE2638088C3 (en) Use of sugar whey powder
DE2614393C3 (en) Amino sugar derivatives and medicaments containing these compounds
US4497897A (en) Liquid proteinase concentrate and method for preparation
KR870009707A (en) Dicalcium phosphate dihydrate composition for fluorinated dentifrice and preparation method thereof and toothpaste containing same
EP0599344B1 (en) Process for the stabilization of proteins
CH641837A5 (en) BETA GALACTOSIDASE AND METHOD FOR THE PRODUCTION THEREOF.
EP0024345B1 (en) Process for the production of cholesterol esterase
DE2209833C3 (en) Manufacture of an amylase inhibitor
DE2408998A1 (en) PROCESS FOR PRODUCING A FRUCTAN-DEGRADING ENZYME
DE2807089A1 (en) Lipase stabilisation in pharmaceutical preparations - using globular animal proteins

Legal Events

Date Code Title Description
OGA New person/name/address of the applicant
8110 Request for examination paragraph 44
8172 Supplementary division/partition in:

Ref country code: DE

Ref document number: 2660932

Format of ref document f/p: P

Q171 Divided out to:

Ref country code: DE

Ref document number: 2660932

D2 Grant after examination
8364 No opposition during term of opposition
AH Division in

Ref country code: DE

Ref document number: 2660932

Format of ref document f/p: P

8320 Willingness to grant licences declared (paragraph 23)
8339 Ceased/non-payment of the annual fee