DE2313599A1 - STERILIZATION OF BACITRACIN - Google Patents

STERILIZATION OF BACITRACIN

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DE2313599A1 DE19732313599 DE2313599A DE2313599A1 DE 2313599 A1 DE2313599 A1 DE 2313599A1 DE 19732313599 DE19732313599 DE 19732313599 DE 2313599 A DE2313599 A DE 2313599A DE 2313599 A1 DE2313599 A1 DE 2313599A1
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Description

Commercial Solvents CorporationTerre Haute, Indiana/USACommercial Solvents Corporation Terre Haute, Indiana / USA

Sterilisierung von Bacitracin. 2313 599Bacitracin sterilization. 2313 599

Die Erfindung bezieht sich auf die Sterilisierung von Bacitracin. Die Erfindung bezieht sich insbesondere auf ein Verfahren zur SterilisIcrung von Bacitracin und dessen Salzen durch Strahlung.The invention relates to the sterilization of bacitracin. The invention particularly relates to on a process for the sterilization of Bacitracin and its salts by radiation.

Bacitracin, einschließlich seiner Zink-und Mangansalze ist ein nützliches Antibiotikum bei topischer oder enteritiseher Verabreichung beim Menschen und den Tieren. Es ist auch als wachstumsförderndes Mittel in Tiernahrung vielt verbreitet. Für all diese und Insbesondere die therapeutischen Verwendungen ist es wesentlich, daß das Produkt von Verunreinigungen durch Virusstämme und Mikroorganismen, die mit Bacitracin nicht verträglich sind, frei ist. Früher wurde das Material durch Erhitzen unter Vacuum bei 120 C während 24 Stunden und nachfolgende Entfernung des Vacuums und geschlossenes Erhitzen bei llo- 12o°C während 96 Sunden sterilisiert. Bacitracin ist jedoch hitzezersetzlich und die Sterilisieruiigsstufe führt zu einer erheblichen Verminderung der Wirkung.Bacitracin, including its zinc and manganese salts, is a useful antibiotic for topical or enteritis Administration to humans and animals. It is also widely used as a growth enhancer in pet food spread. For all these and in particular the therapeutic uses, it is essential that the product of Contamination by virus strains and microorganisms, which are incompatible with bacitracin is free. Previously the material was removed by heating under vacuum at 120 ° C. for 24 hours and then removing the vacuum and closed heating at 100-12 ° C for 96 hours sterilized. However, bacitracin is heat decomposable and the sterilization step results in a substantial reduction the effect.

Es ist bekannt, beispielsweise durch J.Controulis, CA. Lawrence, und L.E. Brownell, J.Am.Pharm. Assoc. XLIII, No.2, Seiten 65-69 (Februar 1954) gewisse pharmazeutische Zubereitungen mit Gammastrahlung zu sterilisieren und es ist \\>eiter bekannt, beispielsweise durch J.A.Knowlton, G.R.Mahn und J.W. Ranftl, Nucleonics, November 1955, Volume 11, Nummer 11, Selten 64-66, Mikroorganismen mit Betastrahlung zu zerstören. Jedoch ruft eine Strahlungsdosis, die ausreichend hcüh ist um die Sterilisierung zu bewirken, normalerweise unerwünschte physikalische Veränderungen inIt is known, for example, from J.Controulis, CA. Lawrence, and L.E. Brownell, J. Am. Pharm. Assoc. XLIII, No.2, Pages 65-69 (February 1954) to sterilize certain pharmaceutical preparations with gamma radiation and it is Well known, for example from J.A.Knowlton, G.R.Mahn and J.W. Ranftl, Nucleonics, November 1955, Volume 11, Number 11, rare 64-66, microorganisms with beta radiation to destroy. However, a dose of radiation that is high enough to effect sterilization causes usually undesirable physical changes in

309886/1062 " 2 "309886/1062 " 2 "

in dem Produkt hervor. Beispielsweise werden einige Proteine durch durch Polymerisierung infolge der Strahlung inactiviert. Bacitracin ist jedoch ein Polypeptid und besitzt somit einen Proteincharakter. Somit war zu erwarten, daß es durch Strahlung nachteilig beeinflusst wird und dies ist auch tatsächlich gezeigt worden.in the product. For example, some proteins are made through polymerization as a result of radiation inactivated. Bacitracin, however, is a polypeptide and thus has a protein character. So it was to be expected that it is adversely affected by radiation and this has in fact been shown.

Die Erfindung hat sich die Aufgabe gestellt ein Sterilisierungsverfahren für Bacitracin und dessen pharmazeutisch geeignete Salze zurVerfügung zu stellen.The invention has the task of a sterilization process for bacitracin and its pharmaceutical to provide suitable salts.

Die Erfindung hat sich insbesondere die Aiifgabe gestellt ein Sterilisierungsverfahren für Bacitracin und dessen pharmazeutisch geeigneten Seife durch Strahlung zur Verfügung zu stellen.The invention has set itself the task in particular a method of sterilizing bacitracin and its pharmaceutically acceptable soap by radiation to provide.

Andere Aufgabenstellungen der Erfindung gehen aus der nachfolgenden Beschreibung hervor.Other objects of the invention will become apparent from the description below.

Durch die Erfindung wird ein Verfahren zur Sterilisierung von ^Bacitracin und dessen pharmazeutisch geeigneten Salzen zur Verfügung gestellt das dadurch gekennzeichnetThe invention provides a method for the sterilization of ^ bacitracin and its pharmaceutically suitable Salts made available that characterized

44th

ist, daß man dieses bzw. diese etwa 5 "X 10 bis etwa 5 x rads Strahlung.aus einer Gammastrahlungsquelle oder einer Betastrahlungsquelle unterwirft.is that you get this or these about 5 "X 10 to about 5 x rads radiation. from a gamma radiation source or a Subject to beta radiation source.

Die für die Durchführung der Erfindung geeignete Strahlung kann entweder Gammastrahlung oder Betastrahlung darstellen. Eine geeignete Quelle der Gammastrahlung· stellt Cobalt 60 Isotop dar. Ausrüstungen für den Gebrauch von 60~ sind im Handel erhältlich. Vorzugsweise sollte dieseThe radiation suitable for practicing the invention can be either gamma radiation or beta radiation represent. A suitable source of gamma radiation is Cobalt 60 isotope. Equipment for the use of 60 ~ are commercially available. Preferably this should

h fi Ausrüstung fähig sein 5 x 10 bis 5 x 10 rads ( ein rad ist definiert als 100 erg/Gramm) in einem verhältnismäßig kurzem Zeitraum zur Verfügung zu stellen<, Betastrahlung kann durch Jegliche geeigneten Quellen, zur Verfugung gestell* h fi equipment to be able to provide 5 x 10 to 5 x 10 rads (one rad is defined as 100 erg / gram) in a relatively short period of time <, beta radiation can be made available by any suitable source *

30 98 86/TO8 2 - ~ 5 "30 98 86 / TO8 2 - ~ 5 "

werden. Mehrere Modelle sind im Handel erhältlich und für die Durchführung der vorliegenden Erfindung geeignet.will. Several models are commercially available and suitable for practicing the present invention.

Vorzugsvreise wird das Bacitracin in dem versiegelten Verkaufseinheitsbehälter verpackt und sodann der Strahlung unterworfen. Dieses bleibt sidann steril für unbegrenzte Zeit bis das Siegel zerbrochen wird.Bacitracin is preferred in the sealed Packaged sales unit container and then subjected to radiation. This then remains sterile for an unlimited period of time Time until the seal is broken.

Pharmazeutisch geeignete Salze (oder Komplexe) von Bacitracin sind bekannt. Die Wichtigsten stellen die Zink- und Mangansalse dar. Das erfindungsgemäße Verfahren ist jedoch nicht auf diese Salze beschränkt und kann mit jeglichem Salz durchgeführt werden.Pharmaceutically acceptable salts (or complexes) of bacitracin are known. The most important are the Zinc and manganese salts represent. The inventive method however, it is not limited to these salts and can be carried out with any salt.

Die Erfindung hat in vollkommener1 überraschender Meise gezeigt, daß Bacitracin durch eine Strahlungsintensität sterilisiert werden kann, die unter denjenigen liegt die zur Inaktivierung von Bacitracin führt. Es mußte nämlich angenommen werden, däß Strahlung die zur Zerstörung von Viren und Mikroorganismen führt auch zur Zerstörung des Bacitracins oder zu dessen wesentlicher Beeinträchtigung führen müßte. Jedoch führt die Strahlung innerhalb der angegebenen Grenzen zur. wirksamen Sterilisierung von Bacitracin ohne dieses merklich zu inaktivieren.The invention has been shown in perfect 1 Meise surprising that bacitracin can be sterilized by a radiation intensity that is lower than those leading to the inactivation of bacitracin. It had to be assumed that radiation which leads to the destruction of viruses and microorganisms would also have to lead to the destruction of the bacitracin or to its substantial impairment. However, the radiation leads to within the specified limits. effective sterilization of bacitracin without noticeably inactivating it.

Die Erfindung wird durch die nachfolgenden Beispiele veranschaulicht, die jedoch keine Einschränkung darstellen.The invention is illustrated by the following examples, which, however, are not restrictive.

Beispiel I.,Example I.,

Jede von J>o Ampullen eines Volumens von 2oml wurden 1 g unsteriles Zink Bacitracin, die Probe mit 56.6 Einheiten/mg eingeführt. Die Schimmelpilzzählung ergab 220 Zellen pro Gramm und die bakterielle Zählung ergab l60 pro1 g of unsterile zinc bacitracin, the sample at 56.6 units / mg, was introduced into each of J> o ampoules of a volume of 2oml. The mold count was 220 cells per gram and the bacterial count was 160 per gram

309886/1062309886/1062

Gramm. 4 Ampullen wurden als Kontrolle zurückgehalten und die verbleibenden 16 Ampullen in je 4 Gruppen zu je 4 Ampullen aufgeteilt. Alle wurden mit vermischungsverhindernden Dichtungen versiegelt. Diese Gruppe wurde der Strahlung wie folgt unterworfen:Grams. 4 ampoules were retained as controls and the remaining 16 ampoules in 4 groups of 4 ampoules each divided up. All were sealed with anti-mix seals. This group was like the radiation is subject to:

4 Gruppe 1 1.25 x 10 rad Gruppe 2 5 χ 10 Gruppe J 2 χ ΙΟ5 Gruppe 4 8 χ 10-3 4 group 1 1.25 x 10 rad group 2 5 χ 10 group J 2 χ ΙΟ 5 group 4 8 χ 10- 3

Die Ampullen wurden zumindest einen Monat gelagert und sodann auf Sterilität, Zellenzahl., Sicherheit, Dünnschichtchromatographie durch bekannte Verfahren geprüft. Die Ergebnisse waren wie folgt:The ampoules were stored for at least a month and then checked for sterility, cell count, safety, thin layer chromatography checked by known methods. The results were as follows:

Sterilität, Zellen pro Gramm Wirkung Bakterien ' Schimmelpilz Einheit/mg Sterility, cells per gram effect bacteria ' mold unit / mg

+ 4o 56.7+ 4o 56.7

Sterilität, Zellen Bakterien ' Schimn Sterility, cells bacteria ' Schimn

Kontrolle + 4o 56.7Control + 4o 56.7

Gruppe 1 + · §4 53.7Group 1 + §4 53.7

Gruppe 2 4 51.3Group 2 4 51.3

Gruppe J -- - 54.4Group J - - 54.4

Gruppe 4 - - 55.6Group 4 - - 55.6

Alle behandelten Proben bestanden die Sicherheitsprüfung bei Mäusen. Das Dünnschichtchromatogramm zeigte keine merklichen Unterschiede infolge der Behandlung an. So wird angenommen, daß Gruppe 2 bei der Beschichtung (plating) mit dem Schimmelpilz verunreinigt worden war.All treated samples passed the mouse safety test. The thin layer chromatogram showed no noticeable differences as a result of the treatment. So it is assumed that group 2 in the coating (plating) was contaminated with the mold.

Beispiel II.,Example II.,

In je von 12 Ampullen einer Kapazität von 5o ml wurde eine 1 g Probe von unsterilem Bacitracin, die ProbeIn each of 12 ampoules with a capacity of 50 ml a 1 g sample of non-sterile bacitracin became the sample

309886/ 1062 - 5 -309886/1062 - 5 -

mit 59 Einheiten/mg, eingeführt. Eine Ampulle wurde als Kontrolle zurückgehalten und die Verbleibenden wurden der Gammastrahlung bei den folgenden Dosishöhen, nämlich jeweils 6.25 x IcP; I.25 x Io j und 2.5ο χ Io unterworfen. Sie wurden unmittelbar nach der Bestrahlung und erneut nach Lagerung während 6 Jahren bei 5 C untersucht. Die Ergebnisse- waren wie folgt:at 59 units / mg. One ampoule was withheld as a control and the remaining were subjected to gamma radiation at the following dose levels, namely 6.25 x IcP; I.25 x Io j and 2.5ο χ Io subject. They were examined immediately after the irradiation and again after storage for 6 years at 5 ° C. The results - were as follows:

Wirkung , Einheiten/mg Nach Stej??-J-_iMti Zellen/g Effect , units / mg According to Stej ?? - J-_iMti cells / g

Vor Nach 6 Jahren Nach ' After 6 years ago After '

Bestrahlung Bestrahlung Bestrahlung Bakterien Schimmel Irradiation Irradiation Irradiation Bacteria Mold

Nach β JahrenAfter β years

Kontrolle 59Control 59

6.25xlo5 59 57.56.25xlo 5 59 57.5

1.25xlo6 59 .56.Ο1.25xlo 6 59 .56.Ο

2.5OxIo6 59 53-22.5 OxIO 6 59 53-2

-- __ -__ - keineno pilzmushroom 50.550.5 SterilSterile keineno keineno 50.550.5 SterilSterile keineno keineno 44.344.3 SterilSterile keineno 44th 46.546.5 keineno

Der nach 6 Jahren gefundene Schimmelpilz v?ird auf die Verunreinigung mit Luft durch Herabfallen zurückgeführt, da sich bei der Probe die eine niedrigere Dosis der Bestrahlung erhielt keine Zählung ergab.The mold found after 6 years is attributed to the contamination with air by falling, there the sample that received a lower dose of irradiation did not count.

Beispiel III.,Example III.,

Ein Satz von Zink-Baeitracin wurde in vier Teile aufgeteilt. Ein Teil wurde als Kontrolle zurückgehalten derA set of zinc baeitracin was divided into four parts. Part was withheld as a control

5
zweite wurde 2 χ Io rads Gammastrahlung, die dritte5
the second became 2 χ Io rads gamma rays, the third

5 η 55 η 5

5.x Io und die vierte ο χ 10 rad ausgesetzt. Diese Materialien wurden durch bekannte Verfahren wie Dünnschichtchromatographie, UV Apsorption Spectrum, Glyoxal Reaktion, Bioautograph, anti-mikrobielles Spectrum, akute orale Toxizität bei weiblichen Mäusen, Hautreizungen und Augenreizung untersucht. Zwischen dem behandelten und Kontrollproben wurden keine merklichen Unterschiede entdeckt.5.x Io and the fourth ο χ 10 rad exposed. These Materials were determined by known methods such as thin layer chromatography, UV absorption spectrum, glyoxal reaction, Bioautograph, anti-microbial spectrum, acute oral toxicity studied in female mice, skin irritation and eye irritation. Between the treated and control samples no noticeable differences were found.

309886/1062309886/1062

Alle vier Proben wurden auf Sterilität geprüft. In keiner dieser Proben wurden Bakterien aufgefunden, während die Kontrollprobe einen Schimmelpilz (Species Aspergillus) in einer Menge von 76 Zellen pro g ergab. Die zweite Probe die die 2 χ ICK rad unterworfen wurde zeigte eine Sehirnrnelpilzmenge von einer Zelle in 2.5g> wobei diese auf Luftverunreinigung durch Herabfallen zurückgeführt wird.All four samples were checked for sterility. Bacteria were not found in any of these samples, while the control sample gave a mold (Species Aspergillus) in an amount of 76 cells per g. The second sample, which was subjected to the 2 χ ICK rads, showed an amount of cerebral fungus from one cell in 2.5g> which is attributed to air pollution from falling.

Beispiel IV.,Example IV.,

Der Versuch des Beispieles 1 wurde in allen wesentlichen Details mit Ausnahme daß Mangan- Bacitracin anstelle von Zink-Bacitracin verwendet wurde und die Strahlung etwa 1 χ Io rads betrug wiederholt. Das behandelte Mangan-Bacitracin ist steril.The experiment of Example 1 was carried out in all essential details with the exception that bacitracin manganese instead of zinc bacitracin was used and the radiation was about 1 χ Io rads repeatedly. The treated manganese bacitracin is sterile.

3 0988 6/10623 0988 6/1062

Claims (6)

Pat en tansprüchePatent claims 1. Sterilisierungsverfahren für Bacitracin und dessen pharmazeutisch geeignete Salze, dadurch g ;e kenn-ζ e i c h-η e t, daß man Bacitracin oder dessen t>harma-1. Sterilization process for bacitracin and its pharmaceutically acceptable salts, thereby g; e kenn-ζ e i c h-η e t that one bacitracin or its t> harma- 4 " 64 "6 zeutisch geeignete Salze etwa 5* 1° bis etwa 5 χ Io rad Gammastrahlung oder Betastrahlung aussetzt.Zeutisch suitable salts about 5 * 1 ° to about 5 χ Io rad Exposing gamma rays or beta rays. 2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch g e 1-c e η η zeichnet^ daß man Strahlung innerha.lh des Bereiches2. The method according to claim 1, characterized in that g e 1-c e η η draws ^ that there is radiation within the area cccc von 2 χ Io bis ο χ Io rad verwendet.used from 2 χ Io to ο χ Io rad. 5. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man als Strahlung Gammastrahlung verwendet.5. The method according to claim 1, characterized in that the radiation is gamma radiation used. 4. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch g e k e η η ζ e i c h η e t, daß man als Strahlung Betastrahlung verwendet. 4. The method according to claim 1, characterized in that g e k e η η ζ e i c h η e t that beta radiation is used as radiation. 5. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch g e k e η n- z e i c h η e t, daß man als Bacitracin Zink-Bacitracin verwendet.5. The method according to claim 1, characterized geke η n for calibration et η that bacitracin zinc bacitracin is used as. 6. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch g e k e η η zeichne t, daß man als Bacitracin Mangan-Bacitracin verwendet.6. The method according to claim 1, characterized in that g e k e η η draw t that you can call bacitracin manganese bacitracin used. 309886/1062309886/1062
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