DE19954357C2 - Composition containing heteropolysaccharide and pearl-shaped cross-linked polysaccharide, and their use for medical / cosmetic purposes - Google Patents

Composition containing heteropolysaccharide and pearl-shaped cross-linked polysaccharide, and their use for medical / cosmetic purposes

Info

Publication number
DE19954357C2
DE19954357C2 DE1999154357 DE19954357A DE19954357C2 DE 19954357 C2 DE19954357 C2 DE 19954357C2 DE 1999154357 DE1999154357 DE 1999154357 DE 19954357 A DE19954357 A DE 19954357A DE 19954357 C2 DE19954357 C2 DE 19954357C2
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
composition according
component
composition
che
pearl
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
DE1999154357
Other languages
German (de)
Other versions
DE19954357A1 (en
Inventor
Klaus Laeschke
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
COSMEDICA CONSULTING GmbH
Original Assignee
COSMEDICA CONSULTING GmbH
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by COSMEDICA CONSULTING GmbH filed Critical COSMEDICA CONSULTING GmbH
Priority to DE1999154357 priority Critical patent/DE19954357C2/en
Publication of DE19954357A1 publication Critical patent/DE19954357A1/en
Application granted granted Critical
Publication of DE19954357C2 publication Critical patent/DE19954357C2/en
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Fee Related legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08—Anti-ageing preparations
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/72—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic macromolecular compounds
    • A61K8/73—Polysaccharides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/72—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic macromolecular compounds
    • A61K8/73—Polysaccharides
    • A61K8/735—Mucopolysaccharides, e.g. hyaluronic acid; Derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08L—COMPOSITIONS OF MACROMOLECULAR COMPOUNDS
    • C08L5/00—Compositions of polysaccharides or of their derivatives not provided for in groups C08L1/00 or C08L3/00
    • C08L5/02—Dextran; Derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08L—COMPOSITIONS OF MACROMOLECULAR COMPOUNDS
    • C08L5/00—Compositions of polysaccharides or of their derivatives not provided for in groups C08L1/00 or C08L3/00
    • C08L5/08—Chitin; Chondroitin sulfate; Hyaluronic acid; Derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08L—COMPOSITIONS OF MACROMOLECULAR COMPOUNDS
    • C08L5/00—Compositions of polysaccharides or of their derivatives not provided for in groups C08L1/00 or C08L3/00
    • C08L5/12—Agar or agar-agar, i.e. mixture of agarose and agaropectin; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
    • A61K2800/59—Mixtures
    • A61K2800/594—Mixtures of polymers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/80—Process related aspects concerning the preparation of the cosmetic composition or the storage or application thereof
    • A61K2800/91—Injection

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Materials For Medical Uses (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft eine Zusammensetzung, die sowohl eine hochmolekulare Verbindung eines Heteropo­ lysaccharids als auch perlenförmiges quervernetztes Poly­ saccharid enthält sowie ein Verfahren zur Herstellung ei­ ner derartigen Zusammensetzung und Verwendungen von der­ artigen Zusammensetzungen bzw. Verfahrensprodukten als Arzneimittel und/oder als Medizinprodukt bzw. zur Her­ stellung eines Arzneimittels und/oder Medizinprodukts.The present invention relates to a composition which is both a high molecular compound of a heteropo lysaccharides as well as pearl-shaped cross-linked poly contains saccharide and a method for producing egg ner such composition and uses of the like compositions or process products as Medicines and / or as a medical device or for manufacture provision of a drug and / or medical device.

Durch ihre Anwendung in der biochemischen und molekular- biologischen Forschung sind dreidimensional vernetzte Po­ lysaccharide, die durch Quervernetzung von linearen Ma­ kromolekülen, z. B. von Dextran, erhalten werden, seit langem bekannt und marktüblich. Derartige Produkte werden bspw. unter den Bezeichnungen Sephadex® (quervernetzte Makromoleküle von Dextran), bzw. Sepharose®, wobei es sich hierbei um quervernetzte Polysaccharidketten von mo­ difizierter Agarose handelt, von Pharmacia Fine Chemicals Company (Pharmacia Gelhydration: Theory and Practice, Hans I. Lund, Uppsala, Schweden, 1985) vertrieben. Through their application in biochemical and molecular biological research are three-dimensionally networked buttocks lysaccharides, which are obtained by crosslinking linear Ma cromolecules, e.g. B. of dextran, have been obtained since long known and customary in the market. Such products will e.g. under the names Sephadex® (cross-linked Macromolecules of dextran), or Sepharose®, where it cross-linked polysaccharide chains from mo Distinguished Agarose is from Pharmacia Fine Chemicals Company (Pharmacia Gel Hydration: Theory and Practice, Hans I. Lund, Uppsala, Sweden, 1985).  

Die Quervernetzung von Dextranen erfolgt mit Epichlorhy­ drin, wodurch Sephadex® als perlenförmiges Gel vorliegt. Aufgrund ihrer großen Anzahl an Hydroxylgruppen sind der­ artige Gele extrem hydrophil. Das Gel weist eine Vielzahl von Poren auf, deren Größe vom Vernetzungsgrad abhängig ist. Aus diesem Grund eignet sich Sephadex® bspw. als Ma­ trix für Ionenaustauscher, wobei funktionelle Gruppen, wie z. B. Diethylaminoethyl- oder Diethyl-2- hydroxydpropylaminoethyl-, Carboxymethyl- oder Sulfopro­ pyl-Gruppen als Ladungsträger in die Matrix, je nach An­ wendungserfordernissen, eingeführt werden können. Im ge­ ladenen Zustand kann Sephadex® als Ionenaustauscher in der biochemischen Forschung, z. B. zur Trennung und/oder Reinigen von Proteinen verwendet werden.Cross-linking of dextrans is done with Epichlorhy in it, making Sephadex® a pearl-shaped gel. Because of their large number of hydroxyl groups like gels extremely hydrophilic. The gel has a variety pores, the size of which depends on the degree of crosslinking is. For this reason, Sephadex® is suitable, for example, as a Ma trix for ion exchangers, where functional groups, such as B. Diethylaminoethyl- or Diethyl-2- hydroxydpropylaminoethyl, carboxymethyl or sulfopro pyl groups as charge carriers in the matrix, depending on the type application requirements can be introduced. In the ge charged state, Sephadex® can act as an ion exchanger biochemical research, e.g. B. for separation and / or Protein purification can be used.

Bei Sepharose® handelt es sich gleichfalls um perlenför­ mige Materialien, allerdings auf der Basis modifizierter Agarose, die bspw. in der Chromatographie, insbesondere bei der Gelchromatographie oder als inerte Matrix bei der Affinitätschromatographie, verwendet werden können. Auch für Sepharose® gilt, daß die Polysaccharidketten zu einem dreidimensionalen Netzwerk verknüpft sind.Sepharose® is also pearl-like materials, but based on modified Agarose, for example in chromatography, in particular in gel chromatography or as an inert matrix in the Affinity chromatography, can be used. Also for Sepharose®, the polysaccharide chains form one three-dimensional network are linked.

Aber auch in Hinblick auf ihre Eignung für kosmetische und/oder medizinische Zwecke sind die Eigenschaften von Dextranperlen untersucht worden. Bspw. wurden Dextranper­ len, nämlich die DEAE-Sephadex® von Pharmacia (Piscataway, NJ, USA), als Hauptkomponente bei der subku­ tanen Gewebeauffüllung eingesetzt (Eppley et al., Annals of Plastic Surgery, Vol. 32, No. 5, S. 463-468, 1994). Zwar erwies sich in dieser Studie am Tiermodell, daß beim Einsatz derartiger Dextranperlen keine Entzündungsreak­ tionen beobachtet werden konnten und sich sogar ein Fi­ broblastenwachstum mit entsprechender Proliferation ein­ stellen konnte, jedoch war gleichwohl nur ein mäßiger re­ generativer und hautauffüllender Effekt nach subkutaner Verabreichung der Sephadexperlen zu beobachten. But also in terms of their suitability for cosmetic and / or medical purposes are the characteristics of Dextran beads have been studied. For example. became dextran len, namely the DEAE-Sephadex® from Pharmacia (Piscataway, NJ, USA), as the main component at subku tanen tissue filling used (Eppley et al., Annals of Plastic Surgery, Vol. 32, No. 5, pp. 463-468, 1994). In this study on the animal model it turned out that the Use of such dextran beads no inflammatory craze tion could be observed and even a fi broblast growth with corresponding proliferation was able to ask, but was nevertheless only a moderate re Generative and skin filling effect after subcutaneous Observe administration of Sephade pearls.  

Auch um eine Beschleunigung der Wundheilung gegenüber dem natürlichen Heilungsverlauf zu erreichen, sind Dextran­ perlen mit positiv geladenen Oberflächen, neutralen oder negativ geladenen Oberflächen eingesetzt worden (Mustoe et al., Plastic and Reconstructive Surgery, Vol. 89, Nr. 5, S. 891-896, 1992).Also to accelerate wound healing compared to To achieve natural healing processes are dextran pearls with positively charged surfaces, neutral or negatively charged surfaces have been used (Mustoe et al., Plastic and Reconstructive Surgery, Vol. 89, No. 5, pp. 891-896, 1992).

Auch zahlreiche weitere Verbindungen sind zum Zwecke der Gewebeauffüllung zum Einsatz gekommen. Zu nennen wären hierbei insbesondere Silikonflüssigkeit und Silikonteil­ chen (Erlem, Aesthetic Plast. Surg. 1992; 16: 227-230), Teflonpaste (Lemperle und Hohler, in Hohler H., Plasti­ sche und Wiederherstellungschirurgie, Stuttgart: Schat­ tauer, 1975: 335), Paraffin (Barton et al., Textbook of Dermatology, Oxford: Blackwell, 1870-1, 1986) oder auch Kollagensuspensionen (Millikan, Journal Dermatol. Surg. Oncol. 1989; 15: 837-846). Eine dauerhafte Auffüllungswir­ kung konnte durch den Einsatz von Kollagensuspensionen allerdings nicht erreicht werden. Die anderen vorgenann­ ten Materialien riefen bei den betroffenen Patientenko­ horten häufig schwere Gegenreaktionen hervor. Auch Poly­ methylmethacrylat (PMMA) oder Hydroethylmethacrylat (HEMA) konnten die an injizierbare Implantate jeweils ge­ stellten Anforderungen nicht entsprechend erfüllen. Ins­ besondere waren regelmäßig Fremdkörperreaktionen mit ent­ zündlichem Charakter zu beobachten.Numerous other connections are also for the purpose of Fabric filling was used. To be mentioned in particular silicone fluid and silicone part chen (Erlem, Aesthetic Plast. Surg. 1992; 16: 227-230), Teflon paste (Lemperle and Hohler, in Hohler H., Plasti and reconstructive surgery, Stuttgart: Schat tauer, 1975: 335), paraffin (Barton et al., Textbook of Dermatology, Oxford: Blackwell, 1870-1, 1986) or also Collagen suspensions (Millikan, Journal Dermatol. Surg. Oncol. 1989; 15: 837-846). A permanent replenishment kung was able to use collagen suspensions however, cannot be achieved. The others above Materials called out to the affected patients often hear severe backlashes. Poly too methyl methacrylate (PMMA) or hydroethyl methacrylate (HEMA) were able to use the injectable implants not meet the requirements accordingly. in the special were regular foreign body reactions with ent watchable character.

Weiterhin wird seit langen als Gewebe auffüllendes Mate­ rial Hyaluronsäure eingesetzt. Zwar ruft diese keine all­ ergischen oder immunologischen Reaktionen hervor, doch wird durch den schnellen Abbau von implantierter Hyalu­ ronsäure verhindert, daß sich ein Langzeit-Effekt in Hin­ blick auf die Gewebeauffüllung einstellt.Furthermore, mate has been used as a fabric filling for a long time rial hyaluronic acid used. This does not call everyone ergic or immunological reactions, yes is due to the rapid breakdown of implanted Hyalu ronic acid prevents a long-term effect in Hin view of the fabric padding.

Um die Langzeit-Wirkung von Hyaluronsäure zu erhöhen, wurde mit der Verabreichung von modifizierter Hyaluron­ säure experimentiert. So wurden Tierexperimente mit quer­ vernetzten Hylanen, chemisch modifizierter Hyaluronsäure, in Hinblick auf deren Eignung als Material zur Gewebeauf­ füllung durchgeführt (Larsen et al., The 16th Annual Mee­ ting of the Society of Biomaterials, May 1990, Char­ leston, South Carolina, USA). Zwar handelt es sich um ein biokompatibles Produkt, doch sind die Langzeit-Effekte von Hylan-Gelen für die Gewebeauffüllung immer noch unbe­ friedigend.In order to increase the long-term effect of hyaluronic acid, the administration of modified hyaluronic acid was experimented with. For example, animal experiments with cross-linked hylans, chemically modified hyaluronic acid, were carried out with regard to their suitability as material for tissue replenishment (Larsen et al., The 16 th Annual Meeting of the Society of Biomaterials, May 1990, Charleston, South Carolina, UNITED STATES). Although it is a biocompatible product, the long-term effects of Hylan gels for tissue replenishment are still unsatisfactory.

Darüber hinaus wurde auch untersucht (M. Olenius, Klini­ sche Studie, Chirurgiezentrum, Stockholm, Schweden), ob stabilisierte Hyaluronsäure (unter der Handelsbezeichnung Restylane® (bei der Firma Q-Med AB) erhältlich) als Im­ plantat zur Beseitigung von Falten geeignet erscheint. Trotz einer gewissen stabilisierenden Wirkung durch den Einsatz von Restylane® werden hierdurch allenfalls mit­ telfristig die erwünschten Resultate erzielt.In addition, studies were also carried out (M. Olenius, Klini study, surgery center, Stockholm, Sweden), whether stabilized hyaluronic acid (under the trade name Restylane® (available from Q-Med AB) as Im plantat appears to be suitable for removing wrinkles. Despite a certain stabilizing effect by the The use of Restylane® is thereby at most achieved the desired results in the short term.

Die (1) (EP 0 150 796 B1) beschreibt mit basischen stickstoffhaltigen Gruppen modifizierte Polysaccharide, die als Zellkulturmikroträger verwendet werden. Schon auf Grund der vorhandenen Substitution bei diesen Polysacchariden ist eine Herleitung der vorliegenden Erfindung, die unmodifizierte Polysaccharide umfaßt, aus dieser Druckschrift nicht gegeben.(1) (EP 0 150 796 B1) also describes modified basic nitrogen-containing groups Polysaccharides used as cell culture microcarriers. Already because of the existing substitution in these Polysaccharides is a derivative of the present invention which includes unmodified polysaccharides, from this Documentation not given.

In der (2) (JP 04275300 A; Derwent Abstract Nr. 1992-286876 [46]) wird eine Zusammensetzung offenbart, die durch Kontatktieren von entfettetem Kolostrum oder Kolostrum- Molke mir vernetztem Dextran-Gel und anschließende Elution der absorbierten Fraktion mit Glucose erhalten wird. Die Zusammensetzung zeigt eine mitogene Aktivität. In dieser Druckschrift wird Dextran lediglich als Adsorbens verwendet, das nicht in der medizinisch wirksamen Fraktion enthalten ist. (2) kann demgemäß die vorliegende Erfindung nicht nahelegen.In (2) (JP 04275300 A; Derwent Abstract No. 1992-286876 [46]) a composition is disclosed which by contacting defatted colostrum or colostrum Whey with cross-linked dextran gel and subsequent elution of the absorbed fraction with glucose is obtained. The Composition shows mitogenic activity. In this Publication, dextran is only used as an adsorbent, that is not in the medically effective fraction. Accordingly, (2) cannot suggest the present invention.

Auch in der (3) (SU 1666457 A; Derwent Abstract 1992-164934 [20]) wird Dextran nur als Adsorbens zur Reinigung eines Pflanzenextrakts verwendet. Auch dies hat nichts mit der vorliegenden Erfindung gemeinsam.Also in (3) (SU 1666457 A; Derwent Abstract 1992-164934 [20]), dextran is only used as an adsorbent for cleaning of a plant extract used. This also has nothing to do with the present invention together.

In (4), (Ruike, Masatoshi et. al., Biosc. Biotechnol. Biochem. (1999), 63(2), 271-275) wird das Wassersorptions- und -trochnungsverhalten von vernetztem Dextran in vitro untersucht. Die Druckschrift gibt keinerlei Hinweis auf eine Verwendung in vivo.In (4), (Ruike, Masatoshi et. Al., Biosc.Biotechnol. Biochem. (1999), 63 (2), 271-275) the water sorption and drying behavior of cross-linked dextran in vitro examined. The document gives no indication of one Use in vivo.

Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist es daher, Zusam­ mensetzungen zur Verfügung zu stellen, die die Nachteile des Stands der Technik nicht aufweisen. Insbesondere sol­ len die vorgeschlagenen Zusammensetzungen als Implantate biokompatibel sein, Auffüllungseffekte über einen länge­ ren Zeitraum zeigen und keine Nebeneffekte oder Nebenwir­ kungen auftreten lassen.The object of the present invention is therefore, together to provide solutions that have the disadvantages of the prior art. In particular sol len the proposed compositions as implants be biocompatible, filling effects over a length Show period and no side effects or side effects allow to occur.

Diese Aufgabe wird durch eine Zusammensetzung gelöst, die ein Heteropolysaccharid als Komponente A und perlenförmi­ ges quervernetztes Polysaccharid, d. h. Polysaccharidper­ len, als Komponente B enthält. Derartige Zusammensetzun­ gen weisen einen gegenüber dem Stand der Technik überle­ genen dauerhaften Gewebeauffüllungseffekt auf, unterstüt­ zen das geschädigte Gewebe und vermeiden jedwede entzünd­ liche Reaktion. Insbesondere sind derartige Zusammenset­ zungen zwar aufgrund ihres längerfristig Gewebe auffül­ lenden Charakters vorteilhaft (geringere Anzahl an Be­ handlungswiederholungen), gleichwohl aber handelt es bei den auf einer erfindungsgemäßen Zusammensetzung beruhen­ den Implantaten nicht um Dauerimplantate, die bspw. nach Ablauf von Jahrzehnten unerwünschte Folgereaktionen beim Patienten hervorrufen könnten. Eine erfindungsgemäße Zu­ sammensetzung unterliegt demnach auch dem biologischen Abbau. Perlenförmig ist dabei so zu verstehen, daß die Komponente B als Perle ("Microbead") in der erfindungsge­ mäßen Zusammensetzung vorliegt. Typischerweise liegen die erfindungsgemäßen Zusammensetzungen als Suspensionen vor, die bevorzugt ein visko-elastisches Eigenschaften aufwei­ sen.This problem is solved by a composition that a heteropolysaccharide as component A and pearl-shaped cross-linked polysaccharide, d. H. Polysaccharidper len, contains as component B. Such a composition gen have a compared to the prior art permanent tissue replenishing effect, supports zen the damaged tissue and avoid any inflammation reaction. In particular, such compositions are tongues fill up because of their long-term tissue advantageous character (lower number of Be repetitions of action), but nevertheless it is about which are based on a composition according to the invention the implants are not permanent implants, e.g. after  Decades of undesirable subsequent reactions at Could cause patients. An according to the invention composition is therefore also subject to the biological Degradation. Pearl-shaped is to be understood so that the Component B as a pearl ("microbead") in the Invention moderate composition is present. Typically they are compositions according to the invention as suspensions, which preferably has visco-elastic properties sen.

Bevorzugt wird als Komponente B ein quervernetztes per­ lenförmiges Homopolysaccharid verwendet, also ein Makro­ molekül mit identischen Grundbausteinen. Besonders bevor­ zugt sind hydrierte perlenförmige Homopolysaccharide.A cross-linked per is preferred as component B. len-shaped homopolysaccharide used, i.e. a macro molecule with identical basic building blocks. Especially before hydrogenated pearl-shaped homopolysaccharides.

In einer besonders bevorzugten Ausführungsform handelt es sich bei der Komponente B um Dextranperlen, die typi­ scherweise durch Säurehydrolyse von Rohdextran bei 100°C und anschließender Fraktionierung erhalten werden. Bau­ stein von Dextran ist nahezu ausschließlich α-D-Glucose. Als Komponente B können aber auch Agaroseperlen einge­ setzt werden. Entsprechende perlenförmige Bestandteile der erfindungsgemäßen Zusammensetzung haben typischerwei­ se eine Partikelgröße zwischen 20 und 450 µm. Ganz beson­ ders bevorzugt sind Partikelgrößen zwischen 30 und 80 µm, die weder eine Migration im Gewebe zeigen noch eine Pha­ gozitierung hervorrufen. Im Rahmen der vorliegenden Er­ findung sind bspw. alle unter dem Handelsnamen Sephadex® (Pharmacia Biotech) vertriebenen Dextran-Perlen oder die unter dem Handelsnamen Sepharose® vertriebenen Agarose- Perlen als Komponente B verwendbar und in der erfindungs­ gemäßen Zusammensetzung ganz besonders bevorzugt.In a particularly preferred embodiment, it is component B is dextran beads, the typi usually by acid hydrolysis of raw dextran at 100 ° C and subsequent fractionation can be obtained. construction Dextran stone is almost exclusively α-D-glucose. However, agarose beads can also be used as component B. be set. Corresponding pearl-shaped components of the composition according to the invention typically have se a particle size between 20 and 450 microns. Very special particle sizes between 30 and 80 μm are preferred, which show neither a migration in the tissue nor a Pha cause gozitation. As part of the present Er are, for example, all under the trade name Sephadex® (Pharmacia Biotech) distributed dextran beads or the agarose sold under the trade name Sepharose® Beads can be used as component B and in the Invention according composition very particularly preferred.

Die erfindungsgemäße Zusammensetzung wird in einer bevor­ zugten Ausführungsform mindestens zwei verschiedene Kom­ ponenten B enthalten. So können beispielsweise in einer erfindungsgemäßen Zusammensetzung auch Sephadex®- und Se­ pharose®-Perlen als Komponenten B1 und B2 kombiniert werden oder auch verschiedenartige Sephadex®-Perlen, bei­ spielsweise Perlen mit unterschiedlicher Partikelgröße, in einer erfindungsgemäßen Zusammensetzung enthalten sein.The composition of the invention is in a before preferred embodiment at least two different com components B included. For example, in a composition according to the invention also Sephadex® and Se pharose® beads can be combined as components B1 and B2  or different types of Sephadex® beads, at for example beads with different particle sizes, contained in a composition according to the invention his.

Bevorzugt kommen solche Perlen als Komponente B zum Ein­ satz, die mit einer Komponente A, wie zuvor definiert, beschichtet sind. Die Schichtdicke kann variieren, wird aber typischerweise größer als 0,5 µm, bevorzugt zwischen 2 und 50 µm, je nach bspw. Partikelgröße der zu beschich­ tenden Perlen, sein. Die Schichtdicke sollte nicht mäch­ tiger als 1/4 des durchschnittlichen Partikeldurchmessers sein. Eine erfindungsgemäße Zusammensetzung kann die Kom­ ponente A ausschließlich als Beschichtung auf den Kompo­ nente-B-Perlen enthalten oder aber bevorzugt darüber hin­ aus mindestens eine Komponente A in nicht als Beschich­ tung dienender Art in der Zusammensetzung. Die Komponen­ te(n) A als Beschichtung der Perlen bzw. als nicht be­ schichtender Bestandteil der Zusammensetzung können iden­ tisch oder verschieden sein. Typischerweise wird Hyalu­ ronsäure als Beschichtung der Polysaccharid-Perlen und zudem frei, also in nicht beschichtender Form, in der Zu­ sammensetzung vorliegen.Such beads are preferably used as component B. set with a component A, as previously defined, are coated. The layer thickness can vary but typically larger than 0.5 µm, preferably between 2 and 50 µm, depending on the particle size, for example tendency pearls. The layer thickness should not be thin tiger than 1/4 of the average particle diameter his. A composition according to the invention can Com Component A exclusively as a coating on the compo nente-B beads contain or preferably above from at least one component A in not as coating serving in the composition. The composers te (n) A as coating of the beads or as not stratifying component of the composition can iden be table or different. Typically, Hyalu ronic acid as a coating of the polysaccharide beads and also free, i.e. in non-coating form, in the Zu composition.

In einer bevorzugten Ausführungsform handelt es sich bei der Komponente A um ein verzweigtes oder unverzweigtes Heteropolysaccharid, insbesondere um ein Glycosaminogly­ can, ganz besonders um ein Heteropolysaccharid aus den Zuckern D-Glucuronsäure und N-Acetyl-D-Glucosamin, die β(1→3)-glycosydisch miteinander verbunden sind. Ein sol­ ches aus den vorgenannten Bestandteilen bestehendes Disaccharid dient dabei als Grundbaustein der mit der nächsten gleichartigen Einheit vorzugsweise β(1→4)- glycosydisch verbunden ist. Bevorzugt handelt es sich bei dem verzweigten Heteropolysaccharid um eine Substanz nicht tierischen Ursprungs (synthetisch hergestellt), aber auch Heteropolysaccharide tierischen Ursprungs können im Rahmen der vorliegenden Erfindung Verwendung fin­ den. Die Komponente A hat typischerweise ein Molekularge­ wicht zwischen 0,8 mio und 3,5 mio Da, insbesondere zwi­ schen 0,8 und 1,6 mio Da, kann im entsprechenden Anwen­ dungsfall aber auch deutlich mehr als 3,5 mio Da, nämlich bis zu 7 mio Da aufweisen. Der Wassergehalt der einzuset­ zenden Komponente A beträgt bevorzugt weniger als 10 Gew.-%. Ihr Hexosamin-Gehalt liegt typischerweise zwi­ schen 40 und 60 Gew.-%. Der pH-Wert von 1% der Trocken­ substanz der Komponente A liegt bevorzugt zwischen 6 und 8.In a preferred embodiment, it is component A is a branched or unbranched Heteropolysaccharide, especially a glycosaminogly can, especially a heteropolysaccharide from the Sugar D-glucuronic acid and N-acetyl-D-glucosamine, which β (1 → 3) -glycosydically linked. A sol ches consisting of the aforementioned components Disaccharide serves as the basic building block of the next similar unit preferably β (1 → 4) - is glycosydically linked. It is preferably the branched heteropolysaccharide around a substance not of animal origin (synthetically produced), but also heteropolysaccharides of animal origin can  in the context of the present invention use fin the. Component A typically has a molecular weight weight between 0.8 million and 3.5 million Da, especially between 0.8 and 1.6 million Da, can be used in the corresponding application but also significantly more than 3.5 million Da, namely up to 7 million Da. The water content of the insert Component A is preferably less than 10% by weight. Their hexosamine content is typically between between 40 and 60% by weight. The pH of 1% of the dry Substance of component A is preferably between 6 and 8th.

Ganz besonders bevorzugt als Komponente A ist Hyaluron­ säure, die entweder synthetisch hergestellt oder tieri­ schen Ursprungs ist. Typischerweise wird die Hyaluronsäu­ re als Na-Salz vorliegen, wobei der Na-Gehalt bevorzugt unterhalb von 10 Gew.-% und ganz besonders bevorzugt un­ terhalb von 6 Gew.-% liegt. Hierbei kann es sich um die physiologische Form der Hyaluronsäure handeln oder aber auch um chemisch modifizierte, ggf. chemisch stabilisier­ te Hyaluronsäure, etwa sogenannte Hylan-Gele, z. B. das unter der Bezeichnung Restylane® (Q-Med AB) im Handel er­ hältliche Produkt, oder um Derivate der Hyaluronsäure. Hierbei handelt es sich dann typischerweise um Kreuzver­ netzung von Hyaluronsäuremolekülen. Bei dieser in einer erfindungsgemäßen Zusammensetzung verwendbaren, kreuzver­ netzten Hyaluronsäure kann es sich bspw. um Rofilan® (RMI BV, Breda) oder um Produkte von Biomatix, Inc. handeln.Hyaluron is very particularly preferred as component A. acid that is either synthetic or tieri origin. Typically, the hyaluronic acid re are present as Na salt, the Na content being preferred below 10% by weight and very particularly preferably un is below 6% by weight. This can be the act physiological form of hyaluronic acid or else also around chemically modified, possibly chemically stabilized te hyaluronic acid, such as so-called Hylan gels, e.g. B. that under the name Restylane® (Q-Med AB) product available, or derivatives of hyaluronic acid. This is typically a cross ver wetting of hyaluronic acid molecules. This one usable composition according to the invention, cross ver wetted hyaluronic acid can, for example, be Rofilan® (RMI BV, Breda) or products from Biomatix, Inc.

Die Komponente A in einer erfindungsgemäßen Zusammenset­ zung wird bevorzugt in einem Konzentrationsbereich von 0,1 g/100 ml bis 10 g/100 ml der erfindungsgemäßen Zusam­ mensetzung liegen, ganz besonders bevorzugt zwischen 0,5 g/100 ml und 3 g/100 ml (bezogen auf ein Endvolumen von 100 ml der erfindungsgemäßen Gesamtzusammensetzung). Eine erfindungsgemäße Zusammensetzung wird die Komponente B in einem Konzentrationsbereich von typischerweise 1 g/100 ml bis 10 g/100 ml der Zusammensetzung enthalten, typischerweise wird der Konzentrationsbereich zwischen 2 g/100 ml und 5 g/100 ml liegen (gleichfalls bezogen auf ein Endvo­ lumen von 100 ml der erfindungsgemäßen, zu verabreichen­ den Gesamtzusammensetzung). Eine erfindungsgemäße Zusam­ mensetzung wird typischerweise einen pH-Wert zwischen 6 und 8, insbesondere zwischen 6,5 und 7,5 aufweisen.Component A in a composition according to the invention is preferred in a concentration range of 0.1 g / 100 ml to 10 g / 100 ml of the composition according to the invention composition, very particularly preferably between 0.5 g / 100 ml and 3 g / 100 ml (based on a final volume of 100 ml of the total composition according to the invention). A composition according to the invention, component B in a concentration range of typically 1 g / 100 ml typically contain up to 10 g / 100 ml of the composition  the concentration range is between 2 g / 100 ml and 5 g / 100 ml (also based on an end vo lumen of 100 ml of the invention to administer the overall composition). Together Typically a pH value between 6 and 8, in particular between 6.5 and 7.5.

Gleichzeitig kann eine erfindungsgemäße Zusammensetzung auch weitere Bestandteile enthalten. Hierbei wären beson­ ders Träger kationischer oder anionischer funktioneller Gruppen zu nennen, die typischerweise auf der perlenför­ migen Komponente B aufgebracht sind. In diesem Zusammen­ hang kommen insbesondere Träger von Diethylaminoethyl- Gruppen, Diethyl-2-hydroxypropylaminoethyl-Gruppen, Car­ boxymethyl-Gruppen und/oder Sulfopropyl-Gruppen in Be­ tracht. Die funktionellen Gruppen können somit, je nach Anforderungsprofil, positive oder negative Ladungen in eine erfindungsgemäße Zusammensetzung einführen. Eine er­ findungsgemäße Zusammensetzung kann also neutrale, posi­ tiv oder negativ geladene Komponente-B-Perlen aufweisen. Weiterhin wird bevorzugt, daß mindestens ein Chondroitin­ sulfat in der Zusammensetzung enthalten ist. Als ein be­ vorzugter Bestandteil in einer erfindungsgemäßen Zusam­ mensetzung ist daher auch Dermatansulfat zu nennen. Dar­ über hinaus sind auch ein oder mehr Proteoglycan(e) als Bestandteil in einer erfindungsgemäßen Zusammensetzung bevorzugt.At the same time, a composition according to the invention also contain other ingredients. Here would be special ders carrier cationic or anionic functional To name groups that are typically based on the pearl component B are applied. In this together In particular, carriers of diethylaminoethyl Groups, diethyl-2-hydroxypropylaminoethyl groups, Car boxymethyl groups and / or sulfopropyl groups in Be costume. The functional groups can, depending on Requirement profile, positive or negative charges in introduce a composition according to the invention. A he composition according to the invention can therefore neutral, posi tiv or negatively charged component B beads. It is further preferred that at least one chondroitin sulfate is included in the composition. As a be preferred ingredient in a composition according to the invention The composition of dermatan sulfate is therefore also to be mentioned. Dar in addition, one or more proteoglycan (s) are as Ingredient in a composition according to the invention prefers.

Weiterhin ist auch ein Verfahren zur Herstellung einer Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1-18, insbeson­ dere zu deren Verwendung als Gewebeauffüller, Gegenstand der vorliegenden Erfindung. Ein solches Verfahren ist charakterisiert durch (a1) die Zugabe von Tyrode-Lösung zu quervernetzten Polysaccharidperlen, insbesondere zu Dextranperlen (Komponente B), und (a2) dem Quellenlassen des gemäß (a1) erhaltenen Ansatzes zur Herstellung einer entsprechenden Polysaccharidsuspension bei Raumtempera­ tur. Furthermore, a method for producing a Composition according to one of Claims 1-18, in particular for their use as fabric fillers, subject of the present invention. Such a procedure is characterized by (a1) the addition of Tyrode solution to cross-linked polysaccharide beads, in particular to Dextran beads (component B), and (a2) swelling of the approach obtained according to (a1) for producing a corresponding polysaccharide suspension at room temperature door.  

Unabhängig von den unter (a) zusammengefaßten Verfahrens­ schritten (a1) und (a2) wird ein Hyaluronsäuregel in ei­ nem erfindungsgemäßen Verfahren dadurch hergestellt (Bestandteil (b) des Verfahrens), daß hochmolekulares He­ teropolysaccharid (Komponente A), insbesondere Hyaluron­ säure, zur Tyrode-Lösung unter Einrühren hinzugegeben wird (b1) und in einem Verfahrensschritt (b2) man diesen gemäß (b1) erhaltenen Ansatz ausgelieren läßt. Das Ausge­ lieren dauert mindestens zwei und typischerweise zwischen 8 und 12 Stunden. Die gemäß (a2) erhaltene Polysaccharid­ suspension (Komponente B) wird auf Raumtemperatur erwärmt und unter Rühren dem gemäß (b2) erhaltenen Gel (Komponente A) solange zugesetzt, bis eine homogene, graue und zähfließende Suspension entstanden ist.Regardless of the procedure summarized under (a) steps (a1) and (a2) is a hyaluronic acid gel in egg nem manufactured according to the invention (Component (b) of the method) that high molecular weight He teropolysaccharide (component A), especially hyaluron acid, added to the Tyrode solution with stirring becomes (b1) and in a process step (b2) one obtained according to (b1) can wear out. The Ausge it takes at least two and typically between 8 and 12 hours. The polysaccharide obtained according to (a2) suspension (component B) is warmed to room temperature and with stirring the gel obtained in (b2) (Component A) added until a homogeneous, gray and viscous suspension has formed.

Eine erfindungsgemäße Zusammensetzung bzw. ein einer er­ findungsgemäßen Zusammensetzung entsprechendes Produkt eines oben beschriebenen Verfahrens Herstellung derselben findet als Arzneimittel und/oder als Medizinprodukt bzw. zur Herstellung eines Arzneimittels und/oder als Medizin­ produkts Verwendung. Insbesondere bevorzugt ist die Ver­ wendung einer solchen Zusammensetzung bzw. eines einer solchen Zusammensetzung entsprechenden Verfahrensprodukts zur Gewebeauffüllung. Die Gewebeauffüllung kann dabei kosmetischen und/oder medizinischen Zwecken dienen. Unter einem kosmetischen Zweck wird bspw. die Verwendung zur Auffüllung der Dermis bei Hautfaltenbildung, insbesondere im Gesichtsbereich, oder beim plastochirurgischen Ein­ griff verstanden. Für die Anwendung im medizinischen Be­ reich ist es ganz besonders bevorzugt, eine derartige Zu­ sammensetzung zur Wundversorgung bzw. Beschleunigung der Wundheilung oder bspw. auch zur Behandlung von Inkonti­ nenzstörungen und Reflux bzw. grundsätzlich bei alters- oder krankheitsbedingter Dystrophie des Haut- oder Mus­ kelgewebes einzusetzen.A composition according to the invention or a one composition according to the invention corresponding product of a method described above, producing the same takes place as a drug and / or as a medical device or for the manufacture of a medicament and / or as medicine product use. Ver is particularly preferred use of such a composition or one process composition corresponding to such composition for tissue filling. The tissue filling can serve cosmetic and / or medical purposes. Under For example, the use for Filling the dermis with skin wrinkles, in particular in the face area, or during plastic surgery gripped understood. For use in medical applications rich it is very particularly preferred to have such a composition for wound care or acceleration of Wound healing or, for example, also for the treatment of incontinence nence disorders and reflux or basically in or disease-related skin or muscular dystrophy insert tissue.

Erfindungsgemäße Zusammensetzungen optimieren die für Im­ plantate erforderlichen Materialcharakteristika. Während die Perlen den Gewebe auffüllenden Langzeit-Effekt bedingen, erweist sich die Hyaluronsäure, die auch als physio­ logischer Bestandteil der extrazellulären Matrix auf­ tritt, als ideales Transportmittel für die Perlen mit visko-elastischen und pseudoplastischen Eigenschaften. Gleichzeitig ist die Hyaluronsäure auch für begleitende positive Effekte, nämlich bspw. für Regeneration und Durchfeuchtung, verantwortlich, so daß eine erfindungsge­ mäße Zusammensetzung einen deutlich synergistiyschen Ef­ fekt auf Grund der Kombination mindestens einer Komponen­ te A und mindestens einer Komponente B aufweist.Compositions according to the invention optimize those for Im plantate required material characteristics. While the beads cause the long-term effect to fill up the fabric,  Hyaluronic acid, which is also known as physio logical component of the extracellular matrix occurs as an ideal means of transport for the pearls visco-elastic and pseudoplastic properties. At the same time, the hyaluronic acid is also for accompanying ones positive effects, namely for regeneration and Moisturization, responsible, so that a erfindungsge moderate composition a clearly synergistic Ef perfect due to the combination of at least one component te A and at least one component B.

Die vorliegende Erfindung betrifft auch Verfahren zur Ge­ webeauffüllung unter Verwendung der erfindungsgemäßen Zu­ sammensetzungen. Diese Verfahren können sowohl für kosme­ tische Zwecke eingesetzt werden als auch zur medizini­ schen Behandlung, beispielsweise bei Inkontinenz- Patienten dienen. Insbesondere kommt durch ein erfin­ dungsgemäßes Verfahren die Beseitigung von allen auf der­ maler Dystrophie (z. B. Verlust der extrazellulären Matrix oder Kollagenabbau) beruhenden ästhetischen Beeinträchti­ gungen bzw. die Behandlung von medizinischen Erkrankungen und/oder Störungen, die auf entsprechender Ätiologie be­ ruhen, in Betracht. Derartige kosmetische oder medizini­ sche Verfahren sind charakterisiert durch das Bereitstel­ len einer erfindungsgemäßen Zusammensetzung und nachfol­ gender subkutaner Injektion einer derartigen Zusammenset­ zung. Vorzugsweise wird hierzu eine 30 GA Nadel verwen­ det. Eine erfindungsgemäße Zusammensetzung, insbesondere in Form einer Suspension, wird für die kosmetischen An­ wendung bspw. im Bereich der Nasolabialfalte oder der Glabella punktuell oder nach der "ziehenden" Injektion­ stechnik appliziert.The present invention also relates to methods for Ge web filling using the Zu according to the invention sammensetzungen. These procedures can be used for both cosme table purposes are used as well as for medical purposes treatment, for example for incontinence Serve patients. In particular comes through an invent procedure according to the removal of all on the Painful dystrophy (e.g. loss of extracellular matrix or collagen breakdown) based on aesthetic impairments conditions or the treatment of medical diseases and / or disorders that are based on appropriate etiology rest. Such cosmetic or medicinal The procedures are characterized by the availability len a composition according to the invention and successor gender subcutaneous injection of such a composition Zung. A 30 GA needle is preferably used for this det. A composition according to the invention, in particular in the form of a suspension, is used for cosmetic purposes application in the area of the nasolabial fold or the Glabella selectively or after the "pulling" injection technology applied.

Die vorliegende Erfindung wird durch die nachfolgende Ausführungsbeispiele näher erläutert.The present invention is illustrated by the following Exemplary embodiments explained in more detail.

1. Herstellung einer erfindungsgemäßen Zusammensetzung1. Preparation of a composition according to the invention

Tyrode-Lösung dient als Basis für eine erfindungsgemäße Zusammensetzung, die Sephadexperlen und Hyaluronsäure enthält.Tyrode solution serves as the basis for an inventive Composition, the Sephadexperlen and hyaluronic acid contains.

  • a) Für die Zubereitung der Tyrodelösung (Endvolumen 6,0 l) werden in einem ersten Ansatz 48 g Natriumchlo­ rid, 1,2 g Calciumchlorid × 2H2O, 1,2 g Kaliumchlo­ rid, 0,6 g Magnesiumchlorid × 6H2O, 0,3 g Natrium­ dihydrogenphosphat, und 6,0 g Glucose × 1H2O abgewo­ gen und anschließend mit 5 kg sterilem Wasser ver­ setzt und unter Rühren gelöst. In einem separaten zweiten Ansatz werden 6,0 g Natriummonohydrogencar­ bonat eingewogen und anschließend in 500 ml sterilem Wasser gelöst. Die Natriummonohydrogencarbonat- Lösung wird gewichtskontrolliert in Portionen zu ma­ ximal je 5,0 g zum ersten Ansatz unter Rühren hinzu­ gegeben. Hierbei wird der sich ergebende pH-Wert kontinuierlich beobachtet. Die Zugabe der Lösung des zweiten Ansatzes wird beendet, sobald ein pH-Wert von 7,0 in dem Lösungsgemisch aus zweitem und erstem Ansatz erreicht ist. Durch Zugabe von weiterem Was­ ser wird das Lösungsgemisch auf ein Gesamtvolumen von 6000 ml erhöht. Dieses Gemisch wird anschließend mindestens 10 Minuten gerührt und steril filtriert.a) For the preparation of the Tyrode solution (final volume 6.0 l) 48 g sodium chloride, 1.2 g calcium chloride × 2H 2 O, 1.2 g potassium chloride, 0.6 g magnesium chloride × 6H 2 O , 0.3 g sodium dihydrogen phosphate, and 6.0 g glucose × 1H 2 O weighed out and then mixed with 5 kg of sterile water and dissolved with stirring. In a separate second batch, 6.0 g of sodium monohydrogen carbonate are weighed out and then dissolved in 500 ml of sterile water. The sodium monohydrogen carbonate solution is added in a weight-controlled manner to portions of a maximum of 5.0 g each to the first batch with stirring. The resulting pH is continuously monitored. The addition of the solution of the second batch is ended as soon as a pH of 7.0 in the mixed solution from the second and first batch is reached. By adding further water, the solution mixture is increased to a total volume of 6000 ml. This mixture is then stirred for at least 10 minutes and sterile filtered.
  • b) Vor der Zugabe der Sephadexperlen zum gemäß (a) er­ haltenen Lösungsgemisch, werden die Sephadexperlen gewaschen. Hierzu werden 50 g Sephadex® Superfine G75 (synthetisch hergestellt und erhältlich bei Pharmacia Biotech) eingewogen und in ein steriles Glasgefäß überführt. 2,0 l sterile 0,1 N NaOH-Lösung werden in das Gefäß hinzugegeben und das Gefäß mit einem sterilen Stopfen verschlossen. Der erhaltene Ansatz wird mehrfach geschwenkt und anschließend für die Dauer von 24 Stunden ohne mechanische Einwirkung aufbewahrt. Während dieses Zeitraums stellt sich ei­ ne Phasentrennung ein, wobei sich ein Überstand von ca. 300 ml ergibt. Dieser Überstand wird mit einem Schlauch abgesaugt, wobei zu beachten ist, daß das Gel, das sich während der Lagerung abgesetzt hat, nicht abgesaugt wird. Ein dem abgesaugten Volumen entsprechendes Volumen von sterilem Wasser (1. Waschschritt) wird zum Gel hinzugegeben und gleich­ falls nach vorsichtigem mehrmaligem Schwenken für 24 Stunden abgelagert. Die Entnahme des Überstands und anschließende Zugabe von sterilem Wasser wird in zwei weiteren Waschschritten (2. und 3. Wasch­ schritt) analog wiederholt. Schließlich wird in ei­ nem 4. Waschschritt anstelle von sterilem Wasser die Tyrode-Lösung der Gelphase zugegeben, für 24 Stunden aufbewahrt und anschließend abgesaugt. Dieser Wasch­ schritt wird noch einmal wiederholt (5. Wasch­ schritt) und ein entsprechendes Volumen Tyrode- Lösung nach dem Absaugen abermals ergänzt. Nach dem fünften Waschschritt wird der pH-Wert ermittelt und ein Sollwert von ungefähr pH = 7,0 eingestellt. Die nunmehr erhaltene Suspension wird über eine Glasfilternutsche gegeben und der größte Teil der Tyrode-Llösung vom Gel entfernt. Ungefähr 931 g des von der Tyrode-Lösung weitgehend befreiten Gels wer­ den eingewogen und bis zu dessen Weiterverwendung im Kühlschrank gelagert.b) Before the addition of the Sephadexper to according to (a) er holding solution mixture, the Sephadexperlen washed. For this, 50 g of Sephadex® Superfine G75 (synthetically manufactured and available from Pharmacia Biotech) weighed and into a sterile Transferred glass jar. 2.0 L sterile 0.1 N NaOH solution are added to the vessel and the vessel with sealed with a sterile stopper. The received one Approach is pivoted several times and then for the duration of 24 hours without mechanical action kept. During this period, ne phase separation, with a supernatant of gives about 300 ml. This supernatant is with a Vacuumed hose, it should be noted that the  Gel that has settled during storage is not suctioned off. One of the extracted volume appropriate volume of sterile water (1st Wash step) is added to the gel and immediately if after careful repeated swiveling for 24 Hours deposited. The removal of the supernatant and subsequent addition of sterile water is in two further washing steps (2nd and 3rd wash step) repeated analogously. Finally, in egg nem 4th washing step instead of sterile water Tyrode solution added to the gel phase for 24 hours stored and then vacuumed. That wash step is repeated again (5th wash step) and a corresponding volume of Tyrode Solution added after suction. After this fifth washing step, the pH is determined and a setpoint of approximately pH = 7.0 is set. The suspension now obtained is over a Given a glass filter and most of the Tyrode solution removed from the gel. Approximately 931 g of Gels who were largely freed from the Tyrode solution weighed in and pending use in Stored in refrigerator.
  • c) Schließlich werden zur Herstellung einer Hyaluron­ säure-Lösung 462,0 ml sterile Tyrode-Lösung vorge­ legt und langsam mit Hilfe eines Blattrührers ge­ rührt. In kleinen Portionen wird ein Ansatz von 7,0 g Hyaluronsäure, als Na-Salz, (synthetisch herge­ stellt und erhältlich bei Kraeber GmbH & Co, 25474 Ellerbeck, Deutschland) unter langsamem Rühren der vorbereiteten Tyrode-Lösung zugegeben. Nach der Zu­ gabe wird die Hyaluronsäure noch eine Stunde gerührt und über Nacht stehen gelassen.c) Finally, to make a hyaluronic acid acid solution pre-selected 462.0 ml sterile Tyrode solution and slowly using a blade stirrer stir. A batch of 7.0 g is added in small portions Hyaluronic acid, as Na salt, (synthetic herbal provides and available from Kraeber GmbH & Co, 25474 Ellerbeck, Germany) while slowly stirring the prepared Tyrode solution added. After the Zu the hyaluronic acid is stirred for another hour and left overnight.
  • d) In einem letzten Verfahrensschritt werden die zuvor gemäß (b) und (c) erhaltenen Komponenten zusammenge­ führt. Zur Herstellung einer subkutan injizierbaren, erfindungsgemäßen, Gewebe auffüllenden Zusammensetzung wird nunmehr die Sephadex-Suspension (auf Raum­ temperatur erwärmt, ca. 931,0 g) der über Nacht zu einem festen Gel erstarrten Hyaluronsäure zugesetzt und dieser Gesamtansatz für die Dauer von 30 bis 60 Minuten langsam gerührt, bis eine homogene, graue, zähfließende Suspension entstanden ist. Der pH-Wert dieser Suspension sollte zwischen 6,8 und 7,2 lie­ gen. Etwaige pH-Abweichungen können durch die Zugabe von eingestellter wäßriger NaOH- oder HCl-Lösung korrigiert werden. Das so erhaltene Produkt weist ca. 3,5 g Sephadex G75 SF, 96 g Tyrode-Lösung und 0,5 g Hyaluronsäure pro 100 ml Endprodukt auf. Es kann als Suspension in sterilen Einwegspritzen (z. B. 1 ml Spritzen) zur subkutanen Anwendung beim Men­ schen eingesetzt werden.d) In a last process step, the previous Components obtained according to (b) and (c) together leads. To make a subcutaneously injectable inventive fabric filling composition  the Sephadex suspension (on room temperature warmed, approx. 931.0 g) to overnight added to a solid gel of solidified hyaluronic acid and this overall approach for the duration of 30 to 60 Minutes slowly stirred until a homogeneous, gray, viscous suspension has arisen. The pH this suspension should be between 6.8 and 7.2 Any pH deviations can be caused by the addition of adjusted aqueous NaOH or HCl solution Getting corrected. The product thus obtained has approx.3.5 g Sephadex G75 SF, 96 g Tyrode solution and 0.5 g hyaluronic acid per 100 ml end product. It can be used as a suspension in sterile disposable syringes (e.g. 1 ml syringe) for subcutaneous use in men be used.
2. Physiologische Unbedenklichkeit einer gemäß 1. her­ gestellten Zusammensetzung2. Physiological harmlessness according to 1 provided composition

Die positiven Effekte einer erfindungsgemäßen Zusam­ mensetzung haben sich auch im Rahmen entsprechender Tierexperimente an der Ratte bestätigt. Hierzu wurde nach Desinfektion und Oberflächenanästhesie eine Zu­ sammensetzung, wie gemäß 1. erhalten, subkutan in den Nasolabialbereich der Ratte injiziert (2 × auf­ einander folgend). Zur Injektion wurde eine 30 GA- Nadel verwendet. Die Applikation erfolgte durch In­ jektionen nach der "ziehenden" Injektionstechnik oder punktuell.The positive effects of a combination according to the invention have also changed within the framework Animal experiments on the rat confirmed. This was done after disinfection and surface anesthesia an additional composition as obtained in 1. subcutaneously in the nasolabial area of the rat (2 × on following each other). A 30 GA Needle used. The application was made by In injections after the "pulling" injection technique or selectively.

In den nachfolgenden histologischen Untersuchungen zeigte sich, daß über längere Zeiträume, sogar nach mehr als einem Jahr, keine entzündlichen Fremdkör­ perreaktionen beobachtet werden konnten. Nach 30 Ta­ gen waren die Dextranperlen in regelmäßigen Riesen­ zellformationen eingeschlossen. Neutrophile Zellen, als Indikator für etwaige entzündliche Reaktionen, konnten nicht detektiert werden. Ebenso war keiner­ lei Migration der "Microbeads" in das umliegende Ge­ webe festzustellen. In the subsequent histological examinations showed that over long periods of time, even after more than a year, no inflammable foreign matter per reactions could be observed. After 30 days The dextran beads were in regular giants cell formations included. Neutrophils, as an indicator of any inflammatory reactions, could not be detected. Nobody was like that either lei Migration of the "Microbeads" into the surrounding Ge webe to establish.  

3. Applikation beim Menschen3. Application in humans

Ebenso wie unter 2. wurde auch in die Hautfalte ei­ nes Probanden im nasolabialen Bereich eine Zusammen­ setzung gemäß 1. appliziert (2 × aufeinander fol­ gend). Abgesehen von einer Schwellung an der Ein­ stichstelle, die nach drei Tagen abgeklungen war, konnten keine störenden Reaktionen beobachtet wer­ den. Auch die positiven, im Tierexperiment festge­ stellten histologischen Befunde ließen sich beim Probanden bestätigen. Lymphatische Infiltrationen ließen sich nicht nachweisen. Dagegen war als Reak­ tion auf die Dextranperlen eine erwünschte Neubil­ dung von Kollagenfasern zu beobachten. Weder aller­ gische noch zytotoxikologische Reaktionen in den be­ handelten Hautpartien des Probanden waren festzu­ stellen. Nachuntersuchungen fanden von 3-6 Monate nach der Behandlung statt. Der Auffüllungseffekt im Bereich der Falten war zu diesem Zeitpunkt noch zu mehr als 80% vorhanden.Just as under 2., egg was also in the skin fold a subject in the nasolabial area setting according to 1. applied (2 × consecutive quietly). Except for a swelling at the one stitch that had subsided after three days, no disturbing reactions could be observed the. Also the positive ones, determined in the animal experiment histological findings were found in the Confirm subjects. Lymphatic infiltrations could not be proven. Against was as a reak tion on the dextran pearls a desired new look observed collagen fibers. Neither all still cytotoxicological reactions in the be acted skin areas of the test person were tight put. Follow-up examinations took place from 3-6 months after treatment. The filling effect in The area of the folds was still closed at this time more than 80% available.

Claims (20)

1. Zusammensetzung, dadurch gekennzeichnet, daß sie als Komponente A hochmolekulares verzweigtes oder unverzweigtes Heteropolysaccharid und als Komponente B perlenförmiges quervernetztes Homopolysaccharid, bei dem es sich um Dextran oder Agarose handelt, enthält.1. Composition, characterized in that it contains as component A high molecular weight branched or unbranched heteropolysaccharide and as component B bead-shaped crosslinked homopolysaccharide, which is dextran or agarose. 2. Zusammensetzung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß die Komponente B perlenförmig mit einer Partikelgröße von 20 bis 450 µm vorliegt.2. Composition according to claim 1, characterized in that component B pearl-shaped with a particle size of 20 to 450 µm is present. 3. Zusammensetzung nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, daß die Perlen der perlenförmigen Komponente B mit einem hochmolekula­ ren Heteropolysaccharid beschichtet sind.3. Composition according to claim 1 or 2, characterized in that the pearls of the pearl-shaped component B with a high molecular weight ren heteropolysaccharide are coated. 4. Zusammensetzung nach Anspruch 3, dadurch gekenn­ zeichnet, daß die Perlen der Komponente B mit Hya­ luronsäure beschichtet sind. 4. Composition according to claim 3, characterized records that the beads of component B with Hya luronic acid are coated.   5. Zusammensetzung nach einem der vorgenannten Ansprü­ che, dadurch gekennzeichnet, daß die Komponente A als Grundbaustein eine β(1→3)-glykosidische Verbin­ dung von D-Glucuronsäure und N-Acetyl-D-glucosamin aufweist.5. Composition according to one of the preceding claims che, characterized in that component A as a basic building block a β (1 → 3) glycosidic verb formation of D-glucuronic acid and N-acetyl-D-glucosamine having. 6. Zusammensetzung nach einem der vorgenannten Ansprü­ che, dadurch gekennzeichnet, daß die Komponente A nicht tierischen Ursprungs ist.6. Composition according to one of the preceding claims che, characterized in that component A is not is of animal origin. 7. Zusammensetzung nach einem der vorgenannten Ansprü­ che, dadurch gekennzeichnet, daß die Komponente A ein Molekulargewicht zwischen 0,8 mio und 3,5 mio Da hat.7. Composition according to one of the preceding claims che, characterized in that component A a molecular weight between 0.8 million and 3.5 million There has. 8. Zusammensetzung nach einem der vorgenannten Ansprü­ che, dadurch gekennzeichnet, daß die Komponente A Hyaluronsäure ist.8. Composition according to one of the preceding claims che, characterized in that component A Is hyaluronic acid. 9. Zusammensetzung nach einem der vorgenannten Ansprü­ che, dadurch gekennzeichnet, daß die Komponente A in einer Konzentration von 0,1 g/100 ml bis 5 g/100 ml und die Komponente B in einer Konzentration von 1 g/100 ml bis 10 g/100 ml in der Zusammensetzung vorliegt.9. Composition according to one of the preceding claims che, characterized in that component A in a concentration of 0.1 g / 100 ml to 5 g / 100 ml and component B in a concentration of 1 g / 100 ml to 10 g / 100 ml in the composition is present. 10. Zusammensetzung nach einem der vorgenannten Ansprü­ che, dadurch gekennzeichnet, daß sie einen Träger kationischer oder anionischer funktioneller Gruppen enthält.10. Composition according to one of the preceding claims che, characterized in that it is a carrier cationic or anionic functional groups contains. 11. Zusammensetzung nach Anspruch 10, dadurch gekenn­ zeichnet, daß die Träger funktionelle Gruppen aufweisen, wobei die funktionellen Gruppen ausgewählt sind aus der Gruppe, bestehend aus einer Diethyla­ minoethyl-Gruppe, Diethyl-2- hydroxypropylaminoethyl-Gruppe, Carboxymethyl- Gruppe und Sulfopropyl-Gruppe.11. The composition according to claim 10, characterized indicates that the carriers have functional groups,  with the functional groups selected are from the group consisting of a Diethyla minoethyl group, diethyl-2- hydroxypropylaminoethyl group, carboxymethyl Group and sulfopropyl group. 12. Zusammensetzung nach einem der vorgenannten Ansprü­ che, dadurch gekennzeichnet, daß sie mindestens ein Chondroitinsulfat enthält.12. Composition according to one of the preceding claims che, characterized in that it has at least one Contains chondroitin sulfate. 13. Zusammensetzung nach einem der vorgenannten Ansprü­ che, dadurch gekennzeichnet, daß sie Dermatansulfat enthält.13. Composition according to one of the preceding claims che, characterized in that it contains dermatan sulfate contains. 14. Zusammensetzung nach einem der vorgenannten Ansprü­ che, dadurch gekennzeichnet, daß sie mindestens ein Proteoglycan enthält.14. Composition according to one of the preceding claims che, characterized in that it has at least one Contains proteoglycan. 15. Verfahren zur Herstellung einer Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 14 zur Verwendung als Gewebeauffüller, gekennzeichnet durch
  • a) 
    • 1. Zugabe von Tyrode-Lösung zu querver­ netzten Polysaccharid-Perlen (Kompo­ nente B),
    • 2. Quellenlassen des gemäß (a1) erhalte­ nen Ansatzes,
  • b) 
    • 1. Zugabe von hochmolekularem Heteropoly­ saccharid (Komponente A) zu Tyrode- Lösung unter Einrühren,
    • 2. Ausgelierenlassen des gemäß (b1) er­ haltenen Ansatzes,
  • c) Zugabe der gemäß (a2) erhaltenen Suspension zu dem gemäß (b2) erhaltenen Gel unter Ein­ rühren.
15. A method for producing a composition according to any one of claims 1 to 14 for use as a fabric filler, characterized by
  • a)
    • 1. addition of Tyrode solution to cross-linked polysaccharide beads (component B),
    • 2.Source the approach obtained in (a1),
  • b)
    • 1. addition of high molecular weight heteropoly saccharide (component A) to Tyrode solution with stirring,
    • 2. Allowing the approach obtained according to (b1) to gelatinize,
  • c) adding the suspension obtained according to (a2) to the gel obtained according to (b2) with stirring.
16. Verfahren nach Anspruch 15, dadurch gekennzeichnet, daß die Komponente A Hyaluronsäure und die Kompo­ nente B Dextranperlen ist/sind. 16. The method according to claim 15, characterized in that component A hyaluronic acid and the compo nente B is / are dextran beads.   17. Verwendung einer Zusammensetzung nach einem der An­ sprüche 1 bis 14 oder einer Zusammensetzung, erhal­ ten aus einem Verfahren nach Anspruch 15 oder 16, als Arzneimittel und/oder als Medizinprodukt.17. Use of a composition according to one of the An say 1 to 14 or a composition, get from a method according to claim 15 or 16, as a drug and / or as a medical device. 18. Verwendung einer Zusammensetzung nach einem der An­ sprüche 1 bis 14 zur Gewebeauffüllung.18. Use of a composition according to one of the An sayings 1 to 14 for tissue filling. 19. Verwendung einer Zusammensetzung nach Anspruch 17 oder 18 zur Wundversorgung, zur Behandlung von In­ kontinenz und/oder zur Auffüllung der Dermis, ins­ besondere im Bereich von Hautfalten.19. Use of a composition according to claim 17 or 18 for wound care, for the treatment of In continence and / or for filling the dermis, ins especially in the area of skin folds. 20. Verfahren zur kosmetischen Beseitigung von Hautfal­ ten, dadurch gekennzeichnet, daß
  • a) eine Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 14 bereitgestellt wird, und
  • b) die Zusammensetzung subkutan injiziert wird.
20. A method for the cosmetic removal of skin folds, characterized in that
  • a) a composition according to any one of claims 1 to 14 is provided, and
  • b) the composition is injected subcutaneously.
DE1999154357 1999-11-11 1999-11-11 Composition containing heteropolysaccharide and pearl-shaped cross-linked polysaccharide, and their use for medical / cosmetic purposes Expired - Fee Related DE19954357C2 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE1999154357 DE19954357C2 (en) 1999-11-11 1999-11-11 Composition containing heteropolysaccharide and pearl-shaped cross-linked polysaccharide, and their use for medical / cosmetic purposes

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE1999154357 DE19954357C2 (en) 1999-11-11 1999-11-11 Composition containing heteropolysaccharide and pearl-shaped cross-linked polysaccharide, and their use for medical / cosmetic purposes

Publications (2)

Publication Number Publication Date
DE19954357A1 DE19954357A1 (en) 2001-07-26
DE19954357C2 true DE19954357C2 (en) 2002-09-05

Family

ID=7928744

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE1999154357 Expired - Fee Related DE19954357C2 (en) 1999-11-11 1999-11-11 Composition containing heteropolysaccharide and pearl-shaped cross-linked polysaccharide, and their use for medical / cosmetic purposes

Country Status (1)

Country Link
DE (1) DE19954357C2 (en)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110719792A (en) * 2017-06-12 2020-01-21 高等美容技术公司 Leather filler

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0150796A2 (en) * 1984-01-28 1985-08-07 PFEIFER & LANGEN Cell culture microcarrier, process for preparing it and its use for culturing anchorage-dependent cells

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0150796A2 (en) * 1984-01-28 1985-08-07 PFEIFER & LANGEN Cell culture microcarrier, process for preparing it and its use for culturing anchorage-dependent cells
US4824946A (en) * 1984-01-28 1989-04-25 Pfeifer & Langen Cell culture microcarrier, method for preparing same and use thereof for cultivating anchorage-dependent cells

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CAPLUS-Abstr. 1999:169355 *
DERWENT-Abstr. 1992-164934/20 d. SU 1666457 *
DERWENT-Abstr. 1992-376306/46 d. JP 04275300 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110719792A (en) * 2017-06-12 2020-01-21 高等美容技术公司 Leather filler
US11389563B2 (en) 2017-06-12 2022-07-19 Advanced Aesthetic Technologies, Inc. Dermal filler
CN110719792B (en) * 2017-06-12 2022-09-20 高等美容技术公司 Leather filler

Also Published As

Publication number Publication date
DE19954357A1 (en) 2001-07-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE3752176T2 (en) Cross-linked esters of hyaluronic acid
DE3650776T2 (en) Polysaccharide esters and their salts
DE69118683T2 (en) METHYLPYRROLIDONCHITOSAN, METHOD FOR THE PRODUCTION THEREOF AND ITS USES
DE3607897C2 (en)
DE3520008C2 (en)
DE69306114T2 (en) USE OF ALGINATE IN SITU MODIFICATION TO PREVENT TISSUE ADHESION
DE3750710T2 (en) Esters of alginic acid.
DE60113121T3 (en) PREPARATION OF NETWORKED HYALURONIC ACID AND ITS HYDROGEL, PRODUCTS MANUFACTURED AND ITS USES
DE60030124T2 (en) HYALURONIC ACID ESTER FOR THE TREATMENT OF NORMOTROPHIC SKIN COLORS
DE60103894T2 (en) Sprayable wound care compositions
DE19839214C1 (en) Process for the production of spherical microparticles with a smooth surface which consist wholly or partly of at least one water-insoluble linear polysaccharide, and microparticles obtainable by this process and their use
DE602004002908T2 (en) Post-surgical antiadhesion layer consisting of carboxymethyl chitosan and carboxymethyl cellulose and their method of preparation
DE60123225T2 (en) CLATHRATE COMPLEXES BASED ON HYALURONIC ACID DERIVATIVES AND THEIR USE AS MEDICAMENTS
DE3788231T2 (en) COSMETIC AGENT AND COMPOSITION FOR TREATING THE SKIN.
DE102006054621A1 (en) Herbal extracts for HAS stimulation, in particular for HAS2 stimulation
EP0804245B1 (en) Collagen preparation for the controlled release of active substances
EP2253665A1 (en) Freeze-dried composition
DE69009748T2 (en) STABILIZED PREPARATIONS CONTAINING FGF.
DE69826119T2 (en) HETEROPOLYSACCHARIDE CONJUGATES, HALVINTERPENETRIEREN POLYSACCHARIDGELE AND METHOD FOR THE PRODUCTION THEREOF
DE69724923T2 (en) Low molecular weight fucans with anticoagulant, antithrombin and antithrombotic effects
EP2647649A1 (en) Hyaluronic acid gel, method for producing the hyaluronic acid gel and medical product with the hyaluronic acid gel
EP2170961A1 (en) Hyaluronic acid dispersion, production and use
DE19954357C2 (en) Composition containing heteropolysaccharide and pearl-shaped cross-linked polysaccharide, and their use for medical / cosmetic purposes
DE60116338T2 (en) A MIXTURE OF NON-SULFATED OLIGOSACCHARIDES BASED ON FUCOSE, A COSMETIC OR PHARMACEUTICAL COMPOSITION CONTAINING SUCH MIXTURE AND ITS USES IN COSMETICS AND PHARMACY
DE2719770C3 (en) Use of coagens in the manufacture of ophthalmic pharmaceutical compositions with slow release properties

Legal Events

Date Code Title Description
OP8 Request for examination as to paragraph 44 patent law
D2 Grant after examination
8364 No opposition during term of opposition
8339 Ceased/non-payment of the annual fee