DE19940647A1 - Methods for the detection and quantification of biopolymers in a liquid - Google Patents
Methods for the detection and quantification of biopolymers in a liquidInfo
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Abstract
Description
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zum Nachweis und zur Quantifizierung von in einer Flüssigkeit befindlichen ersten Biopolymeren.The invention relates to a method for detection and Quantification of first in a liquid Biopolymers.
Nach dem Stand der Technik ist es bekannt, Polynukleotidse quenzen, wie DNA, durch voltammetrische Verfahren nachzuwei sen. Dazu wird in der US 5,312,572 vorgeschlagen, redoxaktive Moleküle der Lösung zuzusetzen. Diese Moleküle binden im Fal le der Hybridisierung an das aus den Polynukleotidsequenzen gebildete doppelsträngige Molekül. Das redoxaktive Molekül bewirkt ein meßbares Redoxsignal.It is known in the art to use polynucleotides sequences, such as DNA, can be detected by voltammetric methods sen. For this purpose, US 5,312,572 proposes redox-active Add molecules to the solution. These molecules bind in the fall le of hybridization to that from the polynucleotide sequences formed double-stranded molecule. The redox-active molecule causes a measurable redox signal.
Ein ähnliches Verfahren ist auch aus der US 5,871,918 be kannt.A similar method is also known from US 5,871,918 knows.
Aus der WO 96/01836 ist ein sogenannter Chip zum Nachweis von Polynukleotidsequenzen bekannt. Auf dem Chip sind eine Viel zahl miniaturisierter Reaktionskavitäten vorgesehen. In jedem der Reaktionskavitäten ist eine besondere Polynukleotidse quenz gebunden. Beim Eintauchen des Chips in die eine nachzu weisende Polynukleotidsequenz enthaltende Lösung kommt es zur Hybridisierung mit einer der besonderen Polynukleotidsequen zen. Die Hybridisierung wird mittels Fluoreszenz nachgewie sen.WO 96/01836 describes a so-called chip for the detection of Polynucleotide sequences known. There are a lot on the chip number of miniaturized reaction cavities provided. In each the reaction cavity is a special polynucleotide quenz bound. When dipping the chip into one pointing solution containing polynucleotide sequence Hybridization with one of the special polynucleotide sequences Zen. The hybridization is verified by means of fluorescence sen.
Auch die WO 95/12808 betrifft ein Nachweisverfahren mittels Chip. Dabei wird über den Chip nach Art einer Elektrode eine Spannung angelegt. Geladene in der Lösung befindliche Polynu kleotidsequenzen können damit an der Oberfläche des Chips bzw. an den dort vorgesehenen miniaturisierten Reaktionsgefä ßen angereichert werden. WO 95/12808 also relates to a detection method using Chip. Here, a chip is placed over the chip like an electrode Voltage applied. Loaded polynu in solution Kleotide sequences can thus be found on the surface of the chip or on the miniaturized reaction vessels provided there be enriched.
Die Verfahren nach dem Stand der Technik sind aufwendig. Sie erfordern den Zusatz besonderer redoxaktiver Moleküle oder das Vorsehen aufwendig herzustellender Chips. Eine exakte Quantifizierung der nachzuweisenden Biopolymere ist mit den bekannten Verfahren nicht möglich. Es ist meist eine optische Detektion erforderlich. Das erhöht den apparativen Aufwand.The prior art methods are complex. she require the addition of special redox-active molecules or the provision of complex chips. An exact one Quantification of the biopolymers to be detected is with the known methods not possible. It is mostly an optical one Detection required. This increases the expenditure on equipment.
Aufgabe der Erfindung ist es, die Nachteile nach dem Stand der Technik zu beseitigen. Es soll insbesondere ein möglichst einfach und kostengünstig durchführbares Verfahren zum Nach weis und zur Quantifizierung von in einer Flüssigkeit befind lichen Biopolymeren angegeben werden.The object of the invention is to overcome the disadvantages of the prior art of technology to eliminate. In particular, it should be as possible simple and cost-effective procedure for after white and for the quantification of in a liquid Liche biopolymers are specified.
Diese Aufgabe wird durch die Merkmale des Anspruchs 1 gelöst. Zweckmäßige Ausgestaltungen ergeben sich aus den Merkmalen der Ansprüche 2-14.This object is solved by the features of claim 1. Appropriate configurations result from the features of claims 2-14.
Nach Maßgabe der Erfindung wird zum Nachweis und zur Quanti
fizierung von in einer Flüssigkeit befindlichen ersten Biopo
lymeren ein Verfahren vorgeschlagen, wobei zweite zu den
nachzuweisenden ersten Biopolymeren eine spezifische Affini
tät besitzende Biopolymere an die Oberfläche einer ersten
Elektrode gebunden sind und wobei die erste und mindestens
eine zweite Elektrode mit der Flüssigkeit im Kontakt sind,
mit folgenden Schritten:
In accordance with the invention, a method is proposed for the detection and quantification of first biopolymers in a liquid, second biopolymers having a specific affinity for the first biopolymers to be detected being bound to the surface of a first electrode and the first and at least a second electrode is in contact with the liquid, with the following steps:
- a) Anlegen einer Spannung und/oder eines Stroms über der ersten und der zweiten Elektrode unda) Applying a voltage and / or a current across the first and second electrodes and
- b) Messung einer durch die Anlagerung der ersten Biomolekü le an die zweiten Biomoleküle bedingten Änderung der Spannung und/oder des Stroms.b) measurement of one by the attachment of the first biomolecule le to the second biomolecule-related change in Voltage and / or current.
Das vorgeschlagene Verfahren ist einfach und schnell durch führbar. Das Vorsehen besonderer redoxaktiver Moleküle ent fällt. Es ist insbesondere auch eine Quantifizierung der in der Flüssigkeit enthaltenden nachzuweisenden ersten Biopoly mere möglich.The proposed procedure is quick and easy feasible. The provision of special redox-active molecules ent falls. In particular, it is also a quantification of the in the liquid to be detected first biopoly possible.
Die angelegte Spannung bzw. der Strom können veränderlich sein.The applied voltage or current can vary his.
Beim Schritt lit. b kann ein Gleichspannungssignal gemessen werden, wobei die Messung vorteilhafterweise als zyklovoltam metrische Messung geführt wird. In diesem Fall werden die Re doxprozesse der an den zweiten Biopolymeren angelagerten er sten Biopolymere und der Faradayische Elektronentransfer durch die Oberfläche der ersten Elektrode bei einer vorgege benen Spannung oder in einem vorgegebenen Spannungsbereich genutzt.At step lit. b can measure a DC voltage signal be, the measurement advantageously as cyclovoltam metric measurement is performed. In this case, the Re DOX processes of those attached to the second biopolymer most biopolymers and Faraday electron transfer through the surface of the first electrode at a given one voltage or within a specified voltage range used.
Zum Nachweis und zur Quantifizierung des ersten Biopolymers wird vorteilhafterweise der gemessene Strom bzw. die gemesse ne Spannung über der Zeit aufgetragen und mindestens über ei nem Peak integriert. Die Integration erfolgt zweckmäßigerwei se unter Abzug des Untergrunds. Aus dem sich bei der Integra tion ergebenden Wert kann die durch die Anlagerung der ersten Biopolymere übertragene Ladungsmenge ermittelt werden. Daraus läßt sich auf die Zahl der angelagerten ersten Biopolymere schließen. Es ist eine Eichung möglich. Die Konzentration der nachzuweisenden ersten Biopolymere in der Flüssigkeit kann bestimmt werden. Das vorgeschlagene Verfahren ist besonders einfach, weil hier - wie bei der herkömmlichen zyklischen Voltammetrie - nur zwischen der ersten Elektrode und einer Referenzelektrode zyklisch eine lineare Spannungsrampe durch fahren wird. Der Stromfluß kann über eine dritte Elektrode bzw. eine Gegenelektrode gemessen werden. Beim Auftragen des gemessenen Stroms bzw. der gemessenen Spannung über der Zeit sind charakteristische Peaks beobachtbar, die der Anlagerung bzw. Adsorption sowie einer Desorption der ersten Biopoymere zugeordnet werden können.For the detection and quantification of the first biopolymer the measured current or the measured is advantageously ne voltage plotted against time and at least over egg integrated into a peak. The integration is conveniently done deducting the surface. From which at Integra tion resulting from the addition of the first Biopolymers transferred charge amount can be determined. Out of it can be counted on the number of attached first biopolymers conclude. Calibration is possible. The concentration of first biopolymers to be detected in the liquid be determined. The proposed method is special simply because here - like the conventional cyclical Voltammetry - only between the first electrode and one Cyclically through a linear voltage ramp will drive. The current can flow through a third electrode or a counter electrode can be measured. When applying the measured current or measured voltage over time characteristic peaks are observable, those of the attachment or adsorption and desorption of the first biopolymers can be assigned.
Eine weitere Ausgestaltung besteht darin, phasensensitiv ein Wechselstromsignal zu messen. Die Anlagerung der ersten Bio polymere an die an der ersten Elektrode endständig gebundenen zweiten Biopolymere verursacht eine Änderung der durch die Anlagerung und Abstoßung der geladenen Biopolymere bedingten Doppellagenkapazität. Die vorgeschlagene phasensensitive Mes sung ermöglicht die Ermittlung des kapazitiven Anteils des Wechselstromsignals. Die Kenntnis des kapazitiven Anteils läßt auf die Konzentration des nachzuweisenden ersten Biopo lymers in der Flüssigkeit schließen.Another embodiment is phase-sensitive Measure AC signal. The deposit of the first bio polymers to those bound to the first electrode second biopolymers caused a change in through the Accumulation and rejection of the charged biopolymers Double layer capacity. The proposed phase sensitive measurement solution enables the determination of the capacitive portion of the AC signal. Knowing the capacitive portion leaves on the concentration of the first biopo to be detected Close lymers in the liquid.
Es ist in diesem Zusammenhang möglich, das Wechselstromsignal einem zyklischen Gleichstromsignal aufzuprägen. Nach einer weiteren Ausgestaltung des Verfahrens wird die Impedanz ge messen, indem die voltammetrischen Signale bei variierender Frequenz gemessen werden. Das ermöglicht eine unmittelbare Quantifizierung des Bedeckungsgrades mit nachzuweisenden er sten Biopolymeren auf der Oberfläche der ersten Elektrode.It is possible in this context, the AC signal a cyclic DC signal. After a further embodiment of the method, the impedance is ge measure by the voltammetric signals with varying Frequency can be measured. That enables an immediate Quantification of the degree of coverage with verifiable most biopolymers on the surface of the first electrode.
Vorteilhaft ist es, vor dem Schritt lit. a die ersten Biopo lymere durch Anlegen einer Spannung und/oder eines Stroms an der Oberfläche der ersten Elektrode anzureichern. Besonders wirkungsvoll ist die Anreicherung, wenn dabei zyklisch umge polt wird. Dadurch werden nicht zu den zweiten Biopolymeren komplementäre Moleküle von der Oberfläche abgestoßen.It is advantageous to have lit. a the first biopo polymers by applying a voltage and / or a current enrich the surface of the first electrode. Especially Enrichment is effective when cyclically reversed is poled. This does not make it the second biopolymer complementary molecules repelled from the surface.
Nach einem weiterem Ausgestaltungsmerkmal ist vorgesehen, daß die erste Elektrode mit dem daran angereicherten ersten Bio molekülen aus der Flüssigkeit entfernt und, ggf. nach Ausfüh ren eines Waschschritts, zur Messung mit einer definierten Meßlösung in Kontakt gebracht. Dadurch können störende Ein flüsse durch in der Flüssigkeit eventuell befindliche weitere elektrochemisch wirksame Spezies weitgehend unterdrückt wer den. Es findet gewissermaßen eine der Messung vorgeschaltete Aufreinigung statt.According to a further design feature, it is provided that the first electrode with the enriched first bio molecules removed from the liquid and, if necessary, after execution ren a washing step, for measurement with a defined Solution brought into contact. This can cause annoying on flows through others that may be in the liquid electrochemically active species largely suppressed who the. In a way, it finds one upstream of the measurement Purification instead.
Das zweite Biopolymer ist zweckmäßigerweise mit einem Ende kovalent oder über einen Linker an die Oberfläche der ersten Elektrode gebunden. Selbstverständlich können zur Bindung auch Spacermoleküle zwischengeschaltet sein. Die erste Elek trode ist zweckmäßigerweise aus einem der folgenden Materia lien hergestellt: Kunststoff, Keramik, Glas oder Metall. Ins besondere Polycarbonate und Gold haben sich als Elektrodenma terialien als besonders vorteilhaft erwiesen.The second biopolymer is advantageously with one end covalently or via a linker to the surface of the first Electrode bound. Of course, for binding spacer molecules can also be interposed. The first elec trode is expediently from one of the following materials lien manufactured: plastic, ceramic, glass or metal. Ins special polycarbonates and gold have become electrode dimensions materials proven to be particularly advantageous.
Unter den ersten und den zweiten Biopolymeren werden hier insbesondere Proteine, Peptide, DNA, RNA und dgl. verstanden. Das erste Biopolymer kann insbesondere eine zum zweiten Bio polymer komplementäre einzelstränige DNA oder RNA sein. Beim Schritt lit. b wird also vorzugsweise die durch die Hybridi sierung der vorgenannten Biopolymere bedingte Änderung der Spannung und/oder des Stroms gemessen.Among the first and second biopolymers are here especially understood proteins, peptides, DNA, RNA and the like. The first biopolymer can in particular be a second bio polymeric complementary single-stranded DNA or RNA. At the Step lit. b is therefore preferably the hybridi sation of the aforementioned biopolymers Voltage and / or current measured.
Das Verfahren wird anhand von Ausführungsbeispielen näher er läutert. Dazu zeigen dieThe method is explained in more detail using exemplary embodiments purifies. The show
Fig. 1 ein zyklisches Voltammogramm und Fig. 1 is a cyclic voltammogram and
Fig. 2 die Änderung des Wechselstroms aufgetragen über der Frequenz und Fig. 2 shows the change in the alternating current plotted against the frequency and
Fig. 3 eine schematische Ansicht eines Messaufbaus. Fig. 3 is a schematic view of a measurement setup.
Ein human growth hormon (HGH1) ist mit seinem 5'-Enden an ei ne aus Polycarbonat/Kohlefaser hergestellte ersten Elektrode E1 bzw. Arbeitselektrode gebunden. Die erste Elektrode E1 taucht in eine Lösung ein, die 5 fM/µl eines komplementären human growth hormons (HGH1 comp.), 80 mM TBE Puffer und 100 mM NaCl Leitsalz enthält.A human growth hormone (HGH1) has 5 'ends at the egg ne first electrode made of polycarbonate / carbon fiber E1 or working electrode bound. The first electrode E1 immersed in a solution containing 5 fM / µl of a complementary human growth hormones (HGH1 comp.), 80 mM TBE buffer and 100 mM Contains sodium chloride.
Eine Spannung wird linear mit einer Änderungsrate von 10 mV/s von 0 auf 1.3 V erhöht, dann zurück bis -1.3 V und schließlich wieder bis auf 0 V gefahren. Das dabei gemessene zyklische Voltammogramm ist in Fig. 1 gezeigt. Es sind zwei Peaks zu erkennen. Beim anodischen Potentialdurchlauf tritt ein erster Peak P1 bei U = 749.5 mV gegen Ag/AgCl auf, beim kathodischen Potentialdurchlauf ergibt sich ein zweiter Peak P2 bei U = - 864.3 mV gegen Ag/AgCl. Diese Peaks treten nur auf, wenn sich zu den auf der Oberfläche der Elektrode fixierten ersten Bio polymeren komplementäre zweite Biopolymere in der Lösung be finden. Die Peaks P1, P2 sind ausschließlich auf Redoxprozes se zurückzuführen, die im vorliegenden Beispiel durch Hybri disation von HGH1 mit HGH1 comp. bedingt sind. Der im anodi schen Bereich befindliche erste Peak P1 ist die Folge eines Redoxprozesses, der durch die Adsorption bzw. Anlagerung von HGH1 an HGH1 comp. bedingt ist. Der im kathodischen Bereich beobachtbare zweite Peak P2 kann mit der einer Desorption der hybridisierten Nukleinsäuren in Verbindung gebracht werden. Die zeitliche Integration des ersten Peaks P1 entspricht der durch die Elektrodenoberfläche transportierten Ladungsmenge. Daraus kann auf das Maß der Hybridisation auf der Oberfläche der ersten Elektrode geschlossen werden.A voltage is increased linearly with a change rate of 10 mV / s from 0 to 1.3 V, then back to -1.3 V and finally to 0 V again. The cyclic voltammogram measured here is shown in FIG. 1. Two peaks can be seen. During the anodic potential run, a first peak P1 occurs at U = 749.5 mV against Ag / AgCl, while the cathodic potential run results in a second peak P2 at U = - 864.3 mV against Ag / AgCl. These peaks only occur if there are second biopolymers complementary to the first biopolymer fixed on the surface of the electrode. The peaks P1, P2 are exclusively due to redox processes, which in the present example are hybridization of HGH1 with HGH1 comp. are conditional. The first peak P1 located in the anodic area is the result of a redox process which is caused by the adsorption or attachment of HGH1 to HGH1 comp. is conditional. The second peak P2 which can be observed in the cathodic region can be associated with that of a desorption of the hybridized nucleic acids. The temporal integration of the first peak P1 corresponds to the amount of charge transported through the electrode surface. The degree of hybridization on the surface of the first electrode can be concluded from this.
Es wird dieselbe Elektrode und Lösung wie im Beispiel 1 ver wendet.The same electrode and solution as in Example 1 are used turns.
Ein Gleichspannungsscan von 0 V bis 1 V gegen Ag/AgCl wird an gelegt und dieser Gleichspannung wird eine Wechselspannung von 250 Hz überlagert. Der Wechselstrom wird in einer Phasen verschiebung von 90° zur Wechselspannung gemessen. Ist die erste Elektrode mit zu den in der Lösung befindlichen nachzu weisenden ersten Biopolymeren komplementären zweiten Biopoly meren belegt, so ergibt sich der in Fig. 2 gezeigte ein Peak bei 250 mV. Dieser Peak ist durch eine Kapazitätsänderung be dingt, die durch den Transport negativer Ladungen an die Oberfläche der ersten Elektrode bei der Hybridisation hervor gerufen wird. Die Änderung in der Doppellagenkapazität resul tiert in einem kapazitiven Stromfluß, der durch phasensensi tive Messung des Wechselstromanteils detektiert werden kann. Die obere Kurve zeigt das Wechselstromsignal bei unbelegter erster Elektrode. Ein Peak ist hier nicht beobachtbar.A DC voltage scan from 0 V to 1 V against Ag / AgCl is applied and an AC voltage of 250 Hz is superimposed on this DC voltage. The alternating current is measured in a phase shift of 90 ° to the alternating voltage. If the first electrode is coated with second biopolymers which are complementary to the first biopolymers to be detected in the solution, the result shown in FIG. 2 is a peak at 250 mV. This peak is caused by a change in capacitance which is caused by the transport of negative charges to the surface of the first electrode during the hybridization. The change in the double-layer capacitance results in a capacitive current flow, which can be detected by phase-sensitive measurement of the AC component. The upper curve shows the AC signal when the first electrode is not used. A peak cannot be observed here.
In Fig. 3 ist schematisch der Meßaufbau gezeigt. In eine Flüssigkeit tauchen eine erste Elektrode E1, eine zweite Elektrode E2 und eine dritte Elektrode E3 ein. Die erste Elektrode E1 ist die Arbeitselektrode. Daran sind zweite Bio polymere, z. B. DNA, mittels eines Linkers kovalent gebunden. In der Flüssigkeit befinden sich erste Biopolymere (1), die komplementär zu den zweiten Biopolymeren (2) sind. Die zweite Elektrode (E2) dient als Gegenelektrode, die dritte Elektrode (E3) als Referenzelektrode.In Fig. 3 the measurement setup is shown schematically. A first electrode E1, a second electrode E2 and a third electrode E3 are immersed in a liquid. The first electrode E1 is the working electrode. There are second bio polymers, e.g. B. DNA, covalently bound by means of a linker. The liquid contains first biopolymers ( 1 ) that are complementary to the second biopolymers ( 2 ). The second electrode (E2) serves as the counter electrode, the third electrode (E3) as the reference electrode.
Das folgende Sequenzprotokoll gibt die Sequnez von HDH1 wie der. The following sequence listing gives the Sequnez of HDH1 as the.
Claims (14)
- a) Anlegen einer Spannung und/oder eines Stroms über der ersten (E1) und der zweiten Elektrode (E2) und
- b) Messung einer durch die Anlagerung der ersten Biopolyme re (1) an die zweiten Biopolymere (2) bedingten Änderung der Spannung und/oder des Stroms.
- a) applying a voltage and / or a current across the first (E1) and the second electrode (E2) and
- b) Measurement of a change in the voltage and / or the current caused by the attachment of the first biopolyme re ( 1 ) to the second biopolymer ( 2 ).
Kunststoff, Keramik, Glas, Metall.12. The method according to claim 11, wherein the first electrode (E1) is made of one of the following materials:
Plastic, ceramics, glass, metal.
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Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE10210051A1 (en) * | 2002-03-07 | 2003-10-09 | Siemens Ag | Device for the electrochemical detection of a nucleotide sequence, analysis cassette for such a device and method for producing such an analysis cassette |
| DE102004017750A1 (en) * | 2004-04-06 | 2005-10-27 | Flechsig, Gerd-Uwe, Dr. rer. nat. | Array of heatable electrodes and chemical and biochemical analysis |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE10329820B3 (en) * | 2003-06-26 | 2005-01-13 | Technische Universität Dresden | Biochip with cells, target DNA and electrodes connected to switching transistors, employs thin film transistor technology and organic semiconductor |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5312527A (en) * | 1992-10-06 | 1994-05-17 | Concordia University | Voltammetric sequence-selective sensor for target polynucleotide sequences |
| WO1998002399A1 (en) * | 1996-07-12 | 1998-01-22 | Wolf Bertling | Method and device for purifying and enriching molecules |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB9206671D0 (en) * | 1992-03-27 | 1992-05-13 | Cranfield Biotech Ltd | Electrochemical detection of dna hybridisation |
| US5871918A (en) * | 1996-06-20 | 1999-02-16 | The University Of North Carolina At Chapel Hill | Electrochemical detection of nucleic acid hybridization |
| US5567301A (en) * | 1995-03-01 | 1996-10-22 | Illinois Institute Of Technology | Antibody covalently bound film immunobiosensor |
-
1999
- 1999-08-26 DE DE19940647A patent/DE19940647C2/en not_active Expired - Fee Related
-
2000
- 2000-08-12 AT AT00962215T patent/ATE321884T1/en not_active IP Right Cessation
- 2000-08-12 WO PCT/DE2000/002757 patent/WO2001016361A2/en active IP Right Grant
- 2000-08-12 AU AU74029/00A patent/AU7402900A/en not_active Abandoned
- 2000-08-12 DE DE50012493T patent/DE50012493D1/en not_active Expired - Lifetime
- 2000-08-12 JP JP2001520906A patent/JP2003527574A/en active Pending
- 2000-08-12 CA CA002382898A patent/CA2382898A1/en not_active Abandoned
- 2000-08-12 EP EP00962215A patent/EP1208239B1/en not_active Expired - Lifetime
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5312527A (en) * | 1992-10-06 | 1994-05-17 | Concordia University | Voltammetric sequence-selective sensor for target polynucleotide sequences |
| WO1998002399A1 (en) * | 1996-07-12 | 1998-01-22 | Wolf Bertling | Method and device for purifying and enriching molecules |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE10210051A1 (en) * | 2002-03-07 | 2003-10-09 | Siemens Ag | Device for the electrochemical detection of a nucleotide sequence, analysis cassette for such a device and method for producing such an analysis cassette |
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