DE19836905A1 - Verfahren nach Missel zur Keimzahlbestimmung in der Luft an Arbeitsplätzen - Google Patents
Verfahren nach Missel zur Keimzahlbestimmung in der Luft an ArbeitsplätzenInfo
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Abstract
Zur Überwachung der Arbeitsschutzmaßnahmen an keimbelasteten Arbeitsplätzen ist eine rasche, eindeutige Beurteilung der Keimbelastung nach Art, Ausmaß und Dauer erforderlich. Bisher eingesetzte Verfahren eignen sich nicht zur Ermittlung von Emissionsverläufen bei schwankenden Keimkonzentrationen. Das vereinfachte Verfahren stellt durch Korrelation der Ergebnisse von Staubpartikelmessungen und Keimzahlbestimmungen in der Luft an Arbeitsplätzen eine preiswerte, einfache und schnelle Methode dar. DOLLAR A Zur separaten Aufnahme der Meßwerte für Partikel- und Keimzahlen kommt eine Kombination existierender Meßgeräte zum Einsatz. Die feste, lineare Abhängigkeit der Keimzahlen, die in den an Arbeitsplätzen emittierten Stäuben enthalten sind, von Partikelzahlen bestimmter keimrelevanter Größenfraktionen wird in Form von einer Eichgeraden dargestellt. Die Validität des zur Berechnung der Keimzahlen ermittelten Verhältnisses zwischen Keimzahlen und Partikelzahlen ist zu jedem Zeitpunkt des Meßintervalls mit einfachen Mitteln überprüfbar. DOLLAR A Die Anwendung des Verfahrens erfolgt z. B. zur Bestimmung von Häufigkeit des Auftretens und Dauer von Maximalbelastungen an keimbelasteten Arbeitsplätzen und zur Überwachung der Effektivität von Arbeitsschutzmaßnahmen, z. B. lüftungstechnischen Einrichtungen.
Description
Die Erfindung bezieht sich auf die repräsentative Beurteilung der Belastungssituation an Ar
beitsplätzen, an denen häufig erhöhte Konzentrationen von Mikroorganismen in der Luft fest
stellbar sind. In hohen Konzentrationen und bei längerfristigem Kontakt können Mikroorga
nismen in der Atemluft die Gesundheit der Arbeitnehmer beeinträchtigen. Um die Arbeits
schutzmaßnahmen an keimbelasteten Arbeitsplätzen überwachen zu können, ist daher eine
rasche und eindeutige Beurteilung der Keimbelastung nach Art, Ausmaß und Dauer erforder
lich.
Die Vorgehensweise zur Bestimmung nachteiliger Stoffe in der Luft am Arbeitsplatz wird in
den Technischen Regeln für Biologische Arbeitsstoffe (TRBA) geregelt. Diese Technischen
Regeln geben den Stand der sicherheitstechnischen, arbeitsmedizinischen, hygienischen und
arbeitswissenschaftlichen Anforderungen zum Umgang mit biologischen Arbeitsstoffen wie
der und werden vom Bundesministerium für Arbeit und Sozialordnung im Bundesarbeitsblatt
bekanntgegeben. In der TRBA 430 ist beispielsweise die Bestimmung von Schimmelpilzspo
ren in der Luft geregelt:
Nach dem Stand der Technik kann die quantitative Bestimmung der Keimkonzentrationen im
Luftstaub beispielsweise mit dem sogenannten Personengetragenen Probenahmesystem
(PGP) nach dem Berufsgenossenschaftlichen Institut für Arbeitssicherheit in Sankt Augustin
(BIA) erfolgen. Das Meßverfahren PGP arbeitet nach dem Filtrationsprinzip. Hierbei wird ein
bestimmtes Luftvolumen mittels einer Pumpe durch einen Filter gesaugt, dessen Porendurch
messer so klein gewählt ist, daß sich die Pilzsporen quantitativ darauf abscheiden. Bei relativ
niedrigen Pilzsporenkonzentrationen können die beaufschlagten Filter direkt auf Nährmedien
aufgelegt und im Brutschrank inkubiert werden. Die sich auf den Filtern entwickelnden Ko
lonien werden ausgezählt. Dieses als Direkte Filtrationsmethode bezeichnete Verfahren ist bei
hohen Keimkonzentrationen nicht mehr einsetzbar, da die Filter trotz kurzer Probenahmezei
ten mit Mikroorganismen überladen werden.
Bei hohen Keimkonzentrationen in der Luft oder langen Probenahmezeiten werden daher die
Stäube von den beaufschlagten Filtern in einer Flüssigkeit abgelöst. Von der erhaltenen
Stammlösung wird eine Verdünnungsreihe hergestellt. Ein bestimmtes Volumen der einzelnen
Verdünnungsstufen wird auf Nährmedien ausgespatelt, diese werden bebrütet und die aus
Einzelzellen heranwachsenden Kolonien ausgezählt. Der Vorteil dieser Vorgehensweise, die
als Indirekte Methode bezeichnet wird, liegt in der Ermöglichung langer Probenahmezeiten.
Nachteile dieser Methode sind der zu betreibende materielle und labortechnische Aufwand,
der lange Zeitraum zwischen Probenahme und Vorliegen der Meßergebnisse und die lange
Probenahmedauer, die bei niedrigen Keimkonzentrationen nötig wird, um die zur Verdünnung
der auf den Filtern abgeschiedenen Keime um den Faktor 100 durch Ausspateln eines Teils
der Stammlösung zu ermöglichen.
Das über die TRBA 430 geregelte Meßverfahren hat sich aus verschiedenen Gründen gegen
über anderen Meßverfahren durchgesetzt. Zum einen erfüllt das verwendete Probenahmegerät
die in der EN 481 "Festlegung der Teilchengrößenverteilung zur Messung luftgetragener Par
tikel" genannten Kriterien. Weiterhin erfolgt die Probenahme netzunabhängig, was auch per
sonenbezogene Arbeitsplatzmessungen ermöglicht. Bei der Keimzahlbestimmung können
sowohl die Direkte als auch die Indirekte Methode angewendet werden, was den Einsatz bei
niedrigen und auch bei sehr hohen Keimkonzentrationen ermöglicht.
Jedoch können Emissionsverläufe bei schwankenden Keimkonzentrationen nur unzureichend
und mit großem labortechnischen Aufwand bestimmt werden. Dies gilt insbesondere für Ar
beitsplätze mit relativ niedrigen Schichtmittelwerten, die von kurzfristigen, hohen Emissions
spitzen herrühren. Der Grund hierfür liegt in den Arbeitswerten der Meßverfahren. Kommt die
Indirekte Methode an einem Arbeitsplatz mit durchschnittlich 10.000 Keimen/m3 zur Anwen
dung, beträgt die Mindestprobenahmedauer etwa 7 Minuten. Eine Angabe der Emissionsver
läufe in kleineren Zeitintervallen wäre in diesem Fall mit der Indirekten Methode also nicht
möglich. Die Verwendung der Direkten Methode ermöglicht die Untersuchung von ausge
prägten Emissionsspitzen ebenfalls nicht. Bei der kürzest möglichen Probenahmedauer von
einer Minute dürfen die Keimkonzentrationen nicht über 9.000/m3 liegen, da anderenfalls die
Filter mit Keimen überbelegt würden. Höhere Keimkonzentrationen können mit der Direkten
Methode nur grob abgeschätzt werden. Dies ist jedoch nur bis etwa 100.000 Keimen/m3 mög
lich. Mit steigender Keimzahl nehmen die Ungenauigkeiten infolge der Überbelegung mit
Mikroorganismen sehr stark zu.
Die beschriebenen, auf den oberen und unteren Nachweisgrenzen basierenden Schwierigkei
ten bei der Bestimmung von Keimkonzentrationen in der Luft an Arbeitsplätzen sind bei allen
im Einsatz befindlichen Probenahme- und Nachweisverfahren dieselben. Weder die in der
TRBA 430 festgeschriebenen Verfahren, noch alle anderen Bestimmungsmethoden, die auf
dem Nachweisprinzip der Kultivierung von Mikroorganismen basieren, sind also in der Lage,
Emissionsschwankungen hinreichend genau zu bestimmen. Biochemische oder mikroskopi
sche Methoden wären zwar grundsätzlich einsetzbar, sie sind jedoch aufgrund des hohen Ma
terial- und Zeitaufwands und den daraus resultierenden Kosten derzeit nicht als praktikabel
anzusehen.
Als Alternative ergibt sich daher allenfalls der Einsatz physikalischer Meßverfahren, mit de
nen die Bestimmung von Keimen indirekt über eine Staubmessungen (z. B. Partikelzählung)
versucht werden könnte. Die Möglichkeit der Anwendung derartiger Verfahren ist in der
TRBA 500 festgeschrieben. Voraussetzung ist, daß sich Korrelationen mit mikrobiologisch
erhobenen Befunden finden lassen und Messungen an Arbeitsplätzen möglich sind.
Um arbeitsplatzbezogene Keimmessungen durch Staubmessungen zu ersetzen oder zumindest
zu ergänzen stehen prinzipiell zwei unterschiedliche Vorgehensweisen zur Verfügung. Dies
sind gravimetrische Bestimmungsmethoden und elektronische Staubmeßgeräte. Bei den gra
vimetrischen Bestimmungsmethoden wird der in einem bestimmten Luftvolumen (durch Pum
pen angesaugte) vorhandene Staub auf Filtern gesammelt und sein Gewicht bestimmt. Die
Bestimmung der Keimkonzentrationen erfolgt aus dem Staub. Über die Berechnung der
Keimzahlen pro Gramm Staub kann die Keimkonzentration auf ein Volumen Raumluft bezo
gen werden. Bei gravimetrischen Bestimmungsmethoden werden relativ lange Probenahme
zeiten benötigt, um ausreichend große Staubmengen für die Auswertung zu erhalten. Perso
nenbezogene Probenahmen sind daher allenfalls bei sehr hohen Staubkonzentrationen an Ar
beitsplätzen möglich. Dies ist nur mit mehrstufigen Impaktoren oder Zyklonen realisierbar.
Generell ist die Keimzahlbestimmung aus Staub schwierig zu standardisieren und ungenau.
Hauptnachteil ist jedoch, daß aufgrund der langen Probenahmezeiten Konzentrationsverläufe
allenfalls in großen Intervallen bestimmt werden können.
Die üblicherweise für die Bestimmung von Staubkonzentrationen an Arbeitsplätzen eingesetz
ten elektronischen Staubmeßgeräte arbeiten nach dem Streulichtprinzip. Hierbei wird die von
der Anzahl und dem Durchmesser der Partikeln abhängige, unterschiedlich große Streuung
eines spezifischen Lichtstrahls in elektrische Signale transformiert. Die elektrischen Signale
können unter bestimmten Voraussetzungen in Staubkonzentrationen [mg/m3] umgerechnet
werden. Da diese Umrechnungen auf der Basis von Validierungen mit standardisierten Stäu
ben erfolgen, können diese Geräte lediglich zur Abschätzung der tatsächlich vorhandenen
Staubkonzentrationen in bekannten Arbeitsplatzatmosphären, wie z. B. dem Bergbau oder in
Bäckereien, eingesetzt werden. Die Möglichkeit der Durchführung von personenbezogenen
Arbeitsplatzmessungen und die Bestimmung von Konzentrationsverläufen ist bei diesen Gerä
ten grundsätzlich gegeben. Da jedoch nur bei höheren Staubkonzentrationen genügend elektri
sche Signale erzeugt werden, können sie bei relativ geringen Staubemissionen zur Bestim
mung von Konzentrationsverläufen an Arbeitsplätzen nicht verwendet werden. Die Bestim
mung der Partikelgrößenverteilung in den Stäuben ist nur beschränkt möglich, da bei den der
zeit im Einsatz befindlichen Meßgeräten nur wenige verschiedene Staubfraktionen parallel
erfaßt werden können.
Ähnlich unbefriedigend arbeiten Partikelzählgeräte, mit denen Partikelverteilungen in Stäu
ben bestimmt werden können. Diese Meßgeräte arbeiten ebenfalls nach dem Streulichtprinzip.
Es werden die Zahlen von bestimmten Partikelgrößen bzw. von Partikelgrößenbereichen in
einem Luftvolumen bestimmt. Partikelzählgeräte weisen sowohl bei sehr kleinen Partikeln als
auch im Falle hoher Staubkonzentrationen erhebliche Ungenauigkeiten auf. Die Meßergebnis
se verschiedener Partikelzählgeräte fallen bei Parallelversuchen üblicherweise mehr oder we
niger deutlich unterschiedlich aus. Partikelzahlen sind daher als "meßgerätspezifische
Schätzwerte" einzustufen. Die Vorteile von Partikelzählungen liegen in der hohen Sensitivität
sowie der Möglichkeit einer Staubcharakterisierung durch die gleichzeitige Zählung mehrerer
verschiedener Partikelgrößen. Durch die Möglichkeit der Begrenzung der Meßintervalle auf
bis zu eine Minute Meßdauer können zeitlich hoch aufgelöste Konzentrationsverläufe ermit
telt werden. Einige Partikelzählgeräte sind tragbar und somit für personenbezogene Messun
gen verwendbar.
In der Luft auftretende freie oder aggregierte Mikroorganismen unterliegen als sogenannte
Luftkeime den gleichen physikalischen Gesetzen, wie alle partikelförmigen Stoffe in der Luft.
Luftkeimmessungen könnten daher grundsätzlich als eine besondere Art der Staubpartikel
messung angesehen werden.
Die Aufgabe der Erfindung ist die Bestimmung der festen, linearen Abhängigkeit der Keim
zahlen, die in den an Arbeitsplätzen emittierten Stäuben enthalten sind, von Partikelzahlen
bestimmter keimrelevanter Größenfraktionen. Die Ergebnisse eigener lufthygienischer Unter
suchungen an Arbeitsplätzen in verschiedenen Bereichen der Abfallwirtschaft- und Entsor
gung, z. B. in Wertstoff und Müllsortieranlagen oder in Biokompostierungsanlagen, zeigten
weitgehend konstante Zusammensetzungen der Luftkeimflora. Untersuchungen anderer Ar
beitsgruppen ergaben, daß der Keimgehalt in dem Material, das in diesen Anlagen bearbeitet
wird (z. B. Biomüll oder Restmüll) weitgehend konstant in einer Größenordnung liegt. Die
Aufgabe der Bestimmung fester Korrelationen zwischen Keim- und Staubpartikelzahlen wird
erfindungsgemäß dadurch gelöst, daß die Abhängigkeit in Form einer Eichgeraden dargestellt
wird. Hierbei sind die Partikelzahlen als meßgerätbezogene Relativwerte anzusehen. Die
ermittelte mathematische Beziehung zwischen den Partikel- und den Keimzahlen in einer
Luftprobe kann zur Berechnung der Keimzahlen auf Partikelbasis dann so lange herangezogen
werden, wie sich die Partikelverteilung des untersuchten, luftgetragenen Staubs nicht ändert.
Die Luftkeimzahlen können in diesen Zeiträumen auf Partikelbasis optional einminütig oder
in längeren Meßintervallen errechnet werden. Die Validität des zur Berechnung der Keimzah
len ermittelten Verhältnisses zwischen Keimzahlen und Partikelzahlen ist zu jedem Zeitpunkt
des Meßintervalls mit einfachen Mitteln überprüfbar.
Für die Partikelzählung wird ein direktanzeigendes, tragbares Partikelzählgerät (z. B. Typ
1.105, Grimm, Ainring) verwendet. Dieses Gerät mißt die Partikelzahl in einminütigen Inter
vallen in sieben unterschiedlichen Partikelfraktionen zwischen 0,7 und 15 µm Teilchen
durchmesser. Für die Keimzahlbestimmung wird das standardisierte Meßverfahren nach
TRBA 430 (Bundesarbeitsblatt, 1997) eingesetzt. Meßprinzip ist hierbei die Indirekte Filtrati
onsmethode.
Für die Ermittlung der mathematischen Beziehung zwischen Keim- und Partikelzahlen müs
sen die Staubsammelköpfe des Partikelzählgeräts und des Keimsammelgeräts in gleicher Hö
he in etwa 5 cm Entfernung nebeneinander liegen. Dies ist notwendig, da an vielen Arbeits
plätzen durch unterschiedliche Arbeitsabläufe nicht nur zeitlich sondern auch räumlich eng
begrenzte Emissionsspitzen auftreten. Zur Ermittlung der Beziehung zwischen Keim- und
Partikelkonzentrationen werden beide Meßgeräte daher an einem Stativ fixiert.
Die Keim- und Partikelmessungen müssen exakt zeitgleich durchgeführt werden. Die Meßzeit
richtet sich nach den zu erwartenden Keimkonzentrationen in der Luft, sie muß die Nachweis
grenze des Keimmeßverfahrens deutlich überschreiten. Die Partikelzahlen werden durch Ein-
Minuten-Messungen aufgenommen. Die Eichkurve muß über einen Konzentrationsbereich
erstellt werden, der die Nachweisgenauigkeit der verwendeten Methode zur Keimzahlbestim
mung deutlich überschreitet. Dies ist eine zwingende Voraussetzung zur Ermittlung der Ab
hängigkeit der Keimzahlen von den gemessenen Partikelzahlen und deren Nichtbeachtung als
Ursache für den Mißerfolg anderer Arbeitsgruppen bei vergleichbaren Untersuchungen anzu
sehen. Die Messungen werden daher zu Zeiten durchgeführt, die durch den Arbeitsablauf be
dingt deutlich unterschiedliche Keim- und Partikelkonzentrationen in der Luft erwarten las
sen. Besonders günstig zur Messung niedriger Keim- und Staubkonzentrationen erwiesen sich
Messungen in Arbeitspausen. Keim- und Staubkonzentrationen im mittleren Bereich ergeben
sich, wenn Messungen in einer Arbeitspause begonnen und während des normalen Arbeitsbe
trieb eine Zeit fortgeführt werden. Relativ hohe Konzentrationen werden durch Messungen im
regulären Arbeitsbetrieb erzielt. Mit einer derartigen Meßstrategie kann der Meßaufwand zur
Ermittlung der Abhängigkeiten zwischen Partikel- und Keimkonzentrationen erheblich redu
ziert werden.
Die Meßdaten des Partikelzählgeräts werden in ein Datenverarbeitungsprogramm übertragen,
in dem alle im folgenden beschriebenen Rechenschritte enthalten sind. Die Meßdaten können
in Masken abgelegt und anschließend bearbeitet werden.
Auf Luftvolumina bezogene Keimkonzentrationen sind als Integrale über die Zeitintervalle
der Probenahme zu verstehen. Für jedes Zeitintervall einer Keimmessung kann die entspre
chende (mittlere) Konzentration aller acht, in Ein-Minuten-Intervallen aufgenommenen Parti
kelfraktionen, errechnet werden (Abb. 1, linke Spalte). Um die Ergebnisse aufeinander fol
gender Staub- und Keimmessungen rechnerisch in einen Zusammenhang bringen zu können,
ist eine Vergleichbarkeit der untersuchten Stäube zwingend vorausgesetzt. Schließlich soll
eine Aussage darüber erfolgen, jeder wievielte Partikel im untersuchten Staub, statistisch ge
sehen, ein Keim ist. Die Vergleichbarkeit mehrerer Staubproben wird über die Partikelvertei
lung im untersuchten Feinstaub geprüft. Hierzu wird der prozentuale Anteil von jeder der acht
Partikelfraktionen an der gemessenen Gesamtpartikelzahl bestimmt (Abb. 1, rechte Spalte).
Die so erhaltene Partikelverteilung im Staub muß längerfristig konstant bleiben (Prüfung der
Vergleichbarkeit der Staubzusammensetzung und statistische Datenbearbeitung siehe unten).
Ist eine vergleichbare Partikelverteilung im Feinstaub bei aufeinander folgenden Messungen
gegeben (wie im Falle der beiden Messungen in Abb. 1), können die jeweiligen Keimzahlen
mit den entsprechenden, gemittelten Partikelzahlen in einer Eichgeraden zusammengefügt
werden. Welche Partikelfraktion jeweils die höchste Korrelation aufweist, ist unterschiedlich
und abhängig von der Größe der im untersuchten Staub zahlenmäßig dominierenden Mikroor
ganismenarten sowie den beprobten Arbeitsplätzen. Beispielsweise liegen im Falle der Be
stimmung von Schimmelpilzsporen-Konzentrationen die am höchsten korrelierenden Fraktio
nen, der ungefähren Größe der Mehrheit der Schimmelpilzsporen entsprechend, in dem Be
reich von 1 bis 5 µm. Bei Bakterien wiederum, die an von Arbeitnehmern bearbeitetem Mate
rial in großer Zahl haften (z. B. Biomüll), liegen die höchsten Korrelationen im allgemeinen in
Staubfraktionen mit größeren Partikeldurchmessern (10 bis 15 µm). Es wird diejenige Parti
kelfraktion zur Erstellung der Eichgeraden verwendet, die die höchste Korrelation mit den
Keimzahlen aufweist.
In Abb. 2 sind die Ergebnisse von sieben zeitgleich durchgeführten Keim- und Partikelmes
sungen, die in einer Eichgerade zusammengefügt werden sollen, aufgelistet. In der unteren
Zeile ist die Korrelationswahrscheinlichkeit von jeder der acht Partikelfraktionen mit den
Keimzahlen angegeben. Die Ergebnisse der beiden Messungen aus Abb. 1 sind in dieser Ta
belle enthalten.
In der unmittelbaren Nähe von Emissionsquellen oder im Falle einer mechanischen bzw.
durch Luftbewegungen verursachten Aufwirbelung von Staub, kann es zu kurzfristigen, si
gnifikanten Schwankungen in der Partikelverteilung kommen. Die aufgenommenen Daten
müssen dann im Vorfeld der Berechnung der Keimzahlen bearbeitet werden. Bei kurzfristi
gen, ausgeprägten Schwankungen in der Partikelverteilung können die aufgenommenen Parti
kelzahlen nicht für die Berechnung der Keimzahlen herangezogen werden, wenn diese mit
erhöhten Partikelzahlen einher gehen. Dies würde die Gefahr von Falschaussagen bergen.
Als zuverlässiges Kriterium sowohl zur Beurteilung der Vergleichbarkeit von Staubzusam
mensetzungen als auch zum Aufspüren von Ausreißern, erwies sich die Prüfung, ob der pro
zentuale Anteil der Partikelfraktion mit 0,75 bis 1,0 µm Durchmesser an der Gesamtpartikel
zahl über das gesamte Meßintervall normalverteilt ist. Im Idealfall ist dieser Wert konstant,
die Streuung der Werte sollte jedoch zumindest einer Normalverteilung folgen. Zunächst wird
die Häufigkeit aller prozentualen Anteile dieser Fraktion während des zu prüfenden (und be
messenen) Zeitintervalls, die Spannweite und die Standardabweichung bestimmt. Anschlie
ßend erfolgt die Prüfung auf Normalverteilung mit dem Schnelltest nach David und Mitarbei
tern. Liegt eine Normalverteilung vor, werden diejenigen Einzelmessungen als Ausreißer er
achtet, die am Rande außerhalb der Gauß'schen Kurve liegen (im Beispiel die Werte über 37
und unter 23 in Abb. 3.1). Als Ausreißer erachtete Messungen werden eliminiert und die
Werte mit den beiden Messungen vor bzw. nach dem zu eliminierten Wert interpoliert.
Gehen Ausreißer in der Staubzusammensetzung mit niedrigen Partikelzahlen einher, müssen
die Meßwerte nicht eliminiert werden, da eine Überschätzung der tatsächlichen Keimzahlen
nicht erfolgt. Große Schwankungen treten bei sehr niedrigen Gesamtpartikelzahlen, das heißt
an der Nachweisgrenze des Partikelzählgeräts, auf (siehe Streuung der Prozentwerte um die
Partikelzahl 0 in Abb. 3.2). Treten Ausreißer in der Staubzusammensetzung bei hohen Ge
samtpartikelzahlen auf, dürfen die entsprechenden Meßwerte in keinem Fall zur Berechnung
der Keimzahlen herangezogen werden, da die Möglichkeit besteht, daß die tatsächlichen
Keimzahlen überschätzt werden.
Die Vorgehensweise zum Aufspüren von Ausreißern in der Staubzusammensetzung ist in
Abb. 3.1 und 3.2 dargestellt. Als Ausreißer würden hier lediglich die drei mit Pfeilen markier
ten Werte eliminiert werden.
Oftmals werden hohe Staubpartikelkonzentrationen durch Wasserdampf in der beprobten Luft
vorgetäuscht. Korrelationen mit Keimen sind unter derartigen Bedingungen nur schwer zu
finden. Tritt Wasserdampf im Laufe einer Messung nur sporadisch auf, können Spitzen in der
Partikelemission, die mit den Wasserdampfemissionen zeitlich zusammenfallen, eliminiert
und die Werte interpoliert werden. Um diese Vorgehensweise zu ermöglichen, wird die Luft
feuchtigkeit am Partikelzählgerät kontinuierlich in Ein-Minuten-Intervallen aufgezeichnet.
An Arbeitsplätzen, an denen zeitweise Emissionen von Dieselmotoren auftreten, ist das be
schriebene Verfahren nicht mehr einsetzbar. Die groben Rußpartikel können von dem ver
wendeten Partikelzählgerät nicht erfaßt werden. Statt dessen werden hohe Feinstaubkonzen
trationen vorgetäuscht. Spitzenweise Rußemissionen können jedoch unter Zuhilfenahme eines
weiteren Meßgeräts, welches grobe Staubpartikel über 15 µm Durchmesser erfassen kann,
aufgezeichnet werden. Als Meßgerät hierfür kann das Staubmeßgerät Respicon (Hund, Wetz
lar) zum Einsatz kommen.
An Arbeitsplätzen an denen die Partikel des emittierten Feinstaubs nicht normalverteilt sind
und wenn Emissionsspitzen nicht zu beobachten sind, ist der Einsatz dieses Verfahrens nicht
möglich.
In Abb. 4.1 ist eine Eichgerade, die mit den Partikelzahlen mit 2 bis 3 µm Durchmesser ermit
telt wurde, abgebildet (Zahlenwerte siehe Abb. 2). Die Steigung der Geraden in der Form y =
ax+b gibt das Verhältnis zwischen Pilzsporen und Partikelzahlen wieder. Die Korrelation
beträgt hier 89,3 Prozent. Mit dieser Wahrscheinlichkeit kann demnach angenommen werden,
daß hier, statistisch gesehen, jeder 35. Partikel eine Pilzspore ist. Dieser Wert ist von vielen
Faktoren abhängig, erweist sich jedoch besonders im Falle biologischer Arbeitsstoffe als ar
beitsplatzspezifisch und längerfristig konstant.
Der Zahlenwert b in der Formel y = ax+b ist von großer Bedeutung. Er gibt eine Aussage dar
über, ab welcher Partikelzahl in der Luft die erste Pilzspore nachweisbar ist. Der Wert gibt die
arbeitsplatzspezifische "Hintergrundbelastung" mit nicht sporenbelastetem Staub wieder. Die
ser Wert weist eine schwächer ausgeprägte Konstanz als der Faktor a auf und muß an Ar
beitsplätzen mit erhöhten Staubkonzentrationen an jedem Meßtag überprüft werden.
Die ermittelte feste mathematische Beziehung zwischen Keimen einerseits und Partikeln einer
bestimmten Größenfraktion andererseits wird als Grundlage zur Berechnung der Keimzahlen
aus Partikelzahlen herangezogen. Die Meßintervalle können entsprechend dem Ziel der Mes
sungen beliebig groß gewählt werden, kürzestens jedoch eine Minute. Dieser Umstand ergibt
sich aus den einminütig aufgenommenen Partikelzahlen. Die auf diese Weise ermittelten
Konzentrationsverläufe von den Messungen aus Abb. 2 sind in Abb. 4.2 dargestellt.
Die Validität der Methode zur indirekten Bestimmung der Konzentrationsverläufe von Kei
men über Partikelzahlen ist mit einfachen Mitteln überprüfbar. Der Mittelwert der auf Parti
kelbasis errechneten Keimzahl muß einer im gleichen Zeitintervall über die Kultivierung be
stimmten Keimzahl in etwa gleichen. Die Anforderungen an die Genauigkeit sind hierbei
nicht allzu groß, da das Verfahren zur Keimzahlbestimmung über die Kultivierung selbst
schon größere Ungenauigkeiten in sich birgt. So sind Abweichungen zwischen den errechne
ten und den über die Kultivierung bestimmten Keimzahlen von 100 bis 200 Prozent tolerier
bar. Dieser Prozentsatz ergibt sich aus Erfahrungswerten, die über die Genauigkeit der Keim
zahlbestimmung über die Kultivierung vorliegen.
Die Staub-charakteristische Konstante a der Gleichung y = ax stimmt an vielen Arbeitsplät
zen, an denen der gleiche oder derselbe biologische Arbeitsstoff bearbeitet wird, überein. Dies
ist zu erwarten, da der Anteil von Keimen an der Gesamtzahl der aus einem bestimmten bio
logischen Arbeitsstoff emittierten Partikel, statistisch gesehen, gleich sein muß. So kann an
verschiedenen Arbeitsplätzen dieselbe Eichgerade zur Errechnung der Keimzahlen verwendet
werden, wenn die Konstante a auch tatsächlich in der gleichen Größenordnung liegt. Es müs
sen dann lediglich die arbeitsplatzspezifischen "Nullwerte" (Faktor y) bestimmt und diese von
den gemessenen Partikelzahlen abgezogen werden. Die praktische Konsequenz ist, daß an
Arbeitsplätzen, an denen annähernd identische Konstanten a ermittelt wurden, nur die
"Nullwerte" b regelmäßig bestimmt werden müssen, um Konzentrationsverläufe auf Partikel
basis ermitteln zu können. Dies stellt aus meßtechnischer Sicht eine erhebliche Reduzierung
des zu leistenden Meßaufwands und eine erhebliche Kostenersparnis dar.
Die Anforderungen an die Genauigkeit der zur "Nullwertbestimmung" verwendeten Methode
sind weniger groß als bei der Bestimmung der Konstante a. Voraussetzung hierfür ist, daß der
Fehler konstant ist. Dies ist bei der Direkten Filtrationsmethode der Fall. Mit dieser Methode
fallen die Steigungsgeraden im allgemeinen zwar etwas steiler als bei der Indirekten Methode
aus (die Keimzahlen sind insgesamt niedriger, weil Keimaggregationen nicht aufgebrochen
werden), die "Nullpunkte" entsprechen sich jedoch bei der Direkten und der Indirekten Me
thode. Die Direkte Filtrationsmethode ist jedoch deutlich kostengünstiger, einfacher zu hand
haben und liefert schneller Ergebnisse.
Claims (8)
1. Verfahren zur Bestimmung von Keimkonzentrationen in Raum- und Außenluft aus Staub-
oder Staubpartikelkonzentrationen durch die Bestimmung der linearen Abhängigkeit der in
den emittierten Stäuben enthaltenen Keimkonzentrationen von Staub- bzw. Staubpartikel
konzentrationen gekennzeichnet durch wenigstens folgende Verfahrensschritte:
- a) mindestens dreifache zeitgleiche Messung von Keim- und Staub- bzw. Staubpartikel konzentrationen an Meßpunkten, wobei die Keimsammlung und die Partikelmessung in mindestens 1 cm Entfernung voneinander erfolgen muß und die Konzentrationen mindestens zweier unterschiedlicher Staubpartikel-Größenklassen bestimmt werden,
- b) Ermittlung der den Keimkonzentrationen im beprobten Meßintervall entsprechenden Partikelkonzentrationen durch gleich lange Probenahmezeiten bei den Partikel- und Keimmessungen oder durch Mittelwertbildung der in kürzeren Zeitintervallen gemes senen Partikel-Einzelmessungen,
- c) rechnerische Korrelation der Ergebnisse der parallel durchgeführten Keim- und Staub partikelkonzentrationsbestimmungen, wobei die Korrelationen sowohl bezüglich der Gesamtpartikelzahl als auch aller differenziell aufgenommenen Staubpartikel- Größenklassen mit Keimen ermittelt werden,
- d) Berechnung von Keimkonzentrationen aus den gemessenen Konzentrationen der Par tikel derjenigen Partikelfraktion, die Korrelationen mit Keimkonzentrationen mit min destens 0,50 aufweisen wobei als Umrechnungsfaktor das bei der Korrelation be stimmte statistische Verhältnis zwischen Partikel- und Keimkonzentrationen zugrunde liegt,
- e) Überprüfung der Validität der aus Partikelkonzentrationen errechneten Keimkonzen trationen durch Bestimmung des Mittelwerts der errechneten Keimkonzentrationen in einem Zeitintervall, das dem einer tatsächlich durchgeführten Keimmessung exakt ent spricht und Vergleich der erhaltenen Meßergebnisse, wobei die Anforderungen an die Genauigkeit in der Übereinstimmung der Befunde frei bestimmt werden können.
2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß anstelle von Staubmessungen
mittels Partikelzählgeräten Staubmeßgeräte, die Staubpartikel-Konzentrationen in der Luft
in Form elektrischer Signale ausgeben, wobei diese optional in Staubkonzentrationen um
gerechnet werden können oder Meßgeräte, die die Staubkonzentrationen in der Luft nicht
als Partikel pro Luftvolumen sondern als Massen pro Luftvolumen anzeigen, verwendet
werden.
3. Verfahren nach Anspruch 1 und 2, dadurch gekennzeichnet, daß die Staubpartikelmessun
gen- bzw. -zählungen und die Abscheidung der Keime kombiniert in einer und derselben
Sammel- und Meßvorrichtung erfolgen.
4. Verfahren nach Anspruch 1-3, dadurch gekennzeichnet, daß die Staubpartikelmessungen,
mit denen Korrelationen zwischen Keim- und Staubpartikeln ermittelt werden, nicht exakt
zeitgleich sondern zeitversetzt zu den Keimmessungen erfolgen.
5. Verfahren nach Anspruch 1-4, dadurch gekennzeichnet, daß die Gesamtpartikel-
Konzentrationen in der Luft mit Keimkonzentrationen korreliert werden.
6. Verfahren nach Anspruch 1-4, dadurch gekennzeichnet, daß vor Errechnung der Korrela
tionen zwischen den gemessenen Keim- und Partikelkonzentrationen eine Datenbearbei
tung der Partikelmeßwerte in Form einer Überprüfung der Konstanz der Partikelverteilung
während der durchgeführten Messungen erfolgt und Ergebnisse von Partikelmessungen, bei
denen sich die Partikelverteilung gegenüber dem überwiegenden Teil der Gesamtheit der
durchgeführter Partikelmessungen signifikant ändert zur Bestimmung von Korrelationen
zwischen Keim- und Partikelkonzentrationen nicht mit einbezogen sondern eliminiert wer
den.
7. Verfahren nach Anspruch 1-4, dadurch gekennzeichnet, daß vor Errechnung der Korrela
tionen zwischen den gemessenen Keim- und Partikelkonzentrationen eine Datenbearbei
tung der Partikelmeßwerte in Form einer Überprüfung der Konstanz der Partikelverteilung
während der durchgeführten Messungen erfolgt und Ergebnisse von Partikelmessungen, bei
denen sich die Partikelverteilung gegenüber dem überwiegenden Teil der Gesamtheit der
durchgeführter Partikelmessungen signifikant ändert zur Bestimmung von Korrelationen
zwischen Keim- und Partikelkonzentrationen nicht mit einbezogen sondern diese eliminiert
und die fehlenden Werte interpoliert werden.
8. Verfahren nach Anspruch 1-7, dadurch gekennzeichnet, daß die Berechnung von Keim
konzentrationen aus den gemessenen Partikelkonzentrationen erfolgt, wenn die Korrelation
zwischen Keimen und der Partikeln der Partikelfraktion, die zur Berechnung der Keimkon
zentrationen herangezogen wird, weniger als 0,50 beträgt.
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Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE9418434U1 (de) * | 1993-11-18 | 1995-01-19 | Siemens AG, 80333 München | Keimzahlbestimmungsanordnung für den klinischen Bereich |
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Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE9418434U1 (de) * | 1993-11-18 | 1995-01-19 | Siemens AG, 80333 München | Keimzahlbestimmungsanordnung für den klinischen Bereich |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
DIN-EN 481 (1993) * |
TZRBA 430 in: Bundesarbeitsblatt 1/1997, S.50-53 * |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE10030134A1 (de) * | 2000-06-20 | 2002-01-10 | Grimm Aerosol Technik Gmbh & C | Vorrichtung und Verfahren zur Bestimmung einer Konzentration von Mikroorganismen in einem Gas |
DE10030134B4 (de) * | 2000-06-20 | 2004-01-08 | Grimm Aerosol Technik Gmbh & Co. Kg | Vorrichtung und Verfahren zur Bestimmung einer Konzentration von Mikroorganismen in einem Gas |
CN108559702A (zh) * | 2018-04-19 | 2018-09-21 | 深圳达实智能股份有限公司 | 一种智慧医院的空气细菌浓度实时监测控制方法及其系统 |
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