DE19818938A1 - A therapeutic composition for killing cancer cells and single celled infectious organisms - Google Patents
A therapeutic composition for killing cancer cells and single celled infectious organismsInfo
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Abstract
Description
Die Erfindung betrifft den Bereich medizinische Mikrobiologie, Immunologie, Onkologie, Virologie und Endocrinologie. Sie kann als ein therapeutisches Präparat gegen Krebs und viele andere Erkrankungen verwendet werden, die durch virale und einzellige Erreger hervorgerufen werden. Außerdem kann sie auch gegen Erkrankungen des Endokrin und anderer Systeme verwendet werden. Diese Erkrankungen werden durch eine Störung der Funktionen von einem Gen oder von einer Gruppe von Genen, die für die Herstellung oder die Kontrolle von Enzymen, Hormonen oder Rezeptoren die zu diesen Hormonen in der Zielzelle zuständig sind, verursacht.The invention relates to the field of medical microbiology, immunology, oncology, Virology and endocrinology. It can be used as a therapeutic preparation against cancer and Many other diseases are used by viral and unicellular pathogens are caused. It can also be used against endocrine disorders and other systems can be used. These disorders are caused by a disorder of the Functions of a gene or of a group of genes that are responsible for the production or the control of enzymes, hormones or receptors related to these hormones in the Target cell are responsible.
Die existierenden Verfahren zur Bekämpfung von viralen und einzelligen Krankheitserreger (d. h. prokaryotische und eukaryotische Krankheitserreger) sind Präparate, wie z. B. AZT, Ribovirin, Cyclovir oder Penicillin, die nicht nur auch Erreger wirken, sondern auch viele Gegenanzeigen und Nebenwirkungen haben. Der Grund dafür ist die Struktur der Präparate, die wie eine relativ nicht komplizierte chemische Formel aufgebaut sind. Wenn solch ein Stoff in den Organismus gelingt, stört er den Stoffwechsel.The existing methods for combating viral and unicellular pathogens (i.e. prokaryotic and eukaryotic pathogens) are preparations such as B. AZT, Ribovirin, cyclovir or penicillin, which not only act as pathogens, but also many Have contraindications and side effects. The reason for this is the structure of the preparations, which are structured like a relatively uncomplicated chemical formula. If such a substance If it gets into the organism, it disrupts the metabolism.
Die proteinartigen Präparate, nämlich immunglobulinartige Präparate haben weniger Nebenwirkungen und Gegenanzeigen als die oben erwähnten chemisch relativ einfach aufgebauten Präparate. The proteinaceous preparations, namely immunoglobulin-like preparations, have fewer Side effects and contraindications are relatively simple chemically than those mentioned above built preparations.
Monoklonale Antikörper und Immuntoxine reagieren nur auf ein bestimmtes Antigen; auf andere Substanzen reagieren sie nicht.Monoclonal antibodies and immunotoxins only respond to a specific antigen; on other substances do not react.
Einer der ersten Schritte bei dem Übergang zu den proteinartigen Präparaten ist die Erschaffung der monoklonalen Antikörper (siehe C. Milstein, G. Köhler, N. Jerne; Nobelpreis für Medizin, 1984). Dafür werden Myelomzellen mit Lymphozythen (B- oder Plasmazellen) hybridisiert. Das Produkt sind die monoklonale Antikörper, die verschieden Anwendungen haben, wie z. B. in der Krebstherapie (siehe Spektrum der Wissenschaft: Immunsystem S. 88-89). Der nächste Schritt ist die Verbesserung der monoklonalen Antikörper dadurch, daß sie mit bestimmten Zellgiften (z. B. Rizin) gekoppelt werden; die entstehenden Immuntoxine binden sich an die Krebszellen und vernichten sie, ohne dabei normale Körperzellen zu schaden (siehe Spektrum der Wissenschaft: Immunsystem S. 204-213). Monoklonale Antikörper und Immuntoxine werden meistens in der Krebstherapie verwendet.One of the first steps in the transition to proteinaceous preparations is that Creation of monoclonal antibodies (see C. Milstein, G. Köhler, N. Jerne; Nobel Prize for medicine, 1984). For this myeloma cells with lymphocytes (B or plasma cells) hybridizes. The product are the monoclonal antibodies that have different uses have, such as B. in cancer therapy (see spectrum of science: immune system Pp. 88-89). The next step is to improve monoclonal antibodies by: coupled with certain cell toxins (e.g. ricin); the resulting immunotoxins bind to the cancer cells and destroy them without damaging normal body cells (see spectrum of science: immune system pp. 204-213). Monoclonal antibodies and Immunotoxins are mostly used in cancer therapy.
Die erste Aufgabe der Erfindung ist die Erschaffung eines starken Präparates gegen Krebs virale und einzellige Erreger. Das Präparat muß weniger Nebenwirkungen und Gegenanzeigen als bisherige Präparate haben. Dieses Präparat ist ein Proteinkomplex der einen Immungobulin, und zwar einen monoklonalen Antikörper besitzt. Es ist viel wirksamer und anwendungsbreiter als Immuntoxine.The first object of the invention is to create a strong anti-cancer preparation viral and unicellular pathogens. The preparation has fewer side effects and contraindications than previous preparations. This preparation is a protein complex of an immunobulin, and that has a monoclonal antibody. It is much more effective and broader in application as immunotoxins.
Die erste Aufgabe der Erfindung wird dadurch gelöst, daß ein Bakteriophage oder ein anderer Virus durch eine genmanipulative Weise mit einem monoklonalen Antikörper gekoppelt wird. Dieses Produkt bekommt den Namen: Aggressiver Antikörper-Phag Komplex (AAPK). Der Komplex ist für die Bekämpfung der viralen und einzelligen Erreger sowie der Bekämpfung von Krebszellen bestimmt. Dieser Komplex enthält im Kopf eine Mixtur aus DNA, die er, bei der Interalction seines monoklonalen Antikörpers mit dem Antigen in das Antigen injiziert. Die DNA-Mixtur besteht aus Transpsonen (z. B. SINES, LINES) und ist für eine Mutation und für eine Zerstörung des Genoms vorn Antigen bestimmt. The first object of the invention is achieved in that a bacteriophage or another Virus is coupled with a monoclonal antibody by a genetic manipulation. This product is named: Aggressive Antibody-Phag Complex (AAPK). Of the Complex is for the fight against viral and unicellular pathogens as well as the fight determined by cancer cells. This complex contains a mixture of DNA in the head, which it, at the interalction of its monoclonal antibody with the antigen injected into the antigen. The DNA mixture consists of transpsons (e.g. SINES, LINES) and is for a mutation and destined for the destruction of the genome by the antigen.
Die Mutationen der Genomen von Krebszellen, die durch Injektionen der Transposonen erzeugt werden, verhindern die weitere Teilung dieser Zellen (siehe Molecular Cell Biology, H.Lodish, D. Baltimore, A. Berk u. a., third edition, S. 1238-1239). Heute erzeugt man diese Mutationen der DNA dadurch, daß eine Schwellung gezielt bestrahlt wird.The mutations in the genomes of cancer cells caused by transposon injections prevent the further division of these cells (see Molecular Cell Biology, H.Lodish, D. Baltimore, A. Berk u. a., third edition, pp. 1238-1239). Today you create them DNA mutations by targeting a swelling.
Die Synthese des Komplexes AAPK geschieht in Baktenen wie z. B. den E. Colis. Die Technik dieser Synthese ist die Recombinant-DNA-Technology. Der Komplex, d. h. das Endprodukt der Synthese besteht aus zwei Teilen, die in zwei verschieden Gefäßen (6.1 und 6.2) erzeugt werden. Dann werden diese zwei Teile, d. h. Produkt 1 und Produkt 2 im dritten Gefaß 6.3 gemischt. Dabei entsteht das Endprodukt. Der erste Teil, d. h. das Produkt 1 ist der Kopf des Phages. Die DNA des Kopfes wird in den Plasmid eines Bakteriums 7 implantiert. Das Bakterium 7 befindet sich im Gefäß 6.1 Der Kopf des Phages ist mit der DNA der Transposonen gefüllt. Diese DNA befindet sich im Milieu mit den Bakterien und ist durch die Technik PCR (Polymerase Chain Reaction) vervielfältigt. Das Protein des Kopfes gerinnt und schließt die DNA im Milieu in sich um. Der zweite Teil, d. h. Produkt 2 ist der Schwanz des Phages, der mit einem monoklonalen Antikörper gekoppelt ist.The synthesis of the complex AAPK takes place in bacteria such as B. the E. Colis. The technique of this synthesis is the recombinant DNA technology. The complex, ie the end product of the synthesis, consists of two parts that are generated in two different vessels ( 6.1 and 6.2 ). Then these two parts, ie product 1 and product 2 are mixed in the third vessel 6.3 . This creates the end product. The first part, ie the product 1, is the head of the phage. The DNA of the head is implanted in the plasmid of a bacterium 7 . Bacteria 7 is located in vessel 6.1. The head of the phage is filled with the DNA of the transposons. This DNA is in the environment with the bacteria and is reproduced using the PCR (polymerase chain reaction) technique. The protein in the head coagulates and encloses the DNA in the environment. The second part, ie product 2, is the tail of the phage, which is coupled to a monoclonal antibody.
Für die Synthese dieses Produkts 2 wird die DNA des Schwanzes mit der DNA des monoklonalen Antikörpers durch Ligase verbunden. Die dadurch entstandene DNA wird in den Plasmid 8.1 des Bakteriums 7.1 implantiert. Dieses Bakterium 7.1 befindet sich im Gefäss 6.2. Danach werden die Produkte 1 und 2 z. B. durch eine Zentrifuge abgesondert und im Gefäss 6.3 gemischt. Dabei werden die Köpfe, die mit der DNA der Transposonen gefüllt sind, spontan mit den Schwänzen verbunden. Diese sind durch die Plattform 3.1 mit dem monoklonalen Antikörper verbunden und dadurch entsteht erst der Komplex oder das Endprodukt.For the synthesis of this product 2, the DNA of the tail is linked to the DNA of the monoclonal antibody by ligase. The resulting DNA is implanted in the plasmid 8.1 of the bacterium 7.1 . This bacterium 7.1 is in the vessel 6.2 . Then the products 1 and 2 z. B. secreted by a centrifuge and mixed in the vessel 6.3 . The heads, which are filled with the DNA of the transposons, are spontaneously connected to the tails. These are connected to the monoclonal antibody by means of the platform 3.1 , and this is the only way to form the complex or the end product.
Die spontane Verbindung von Köpfen mit Schwänzen in einer Flüssigkeit ist ein typischer Prozess, der in einem Bakterium geschieht, wenn dieses von einem Phag infiziert wird. The spontaneous connection of heads with tails in a liquid is a typical one Process that happens in a bacterium when it is infected by a phag.
Bei der Verwendung des Präparates wird folgendes Ergebniss erreicht:
When using the preparation, the following result is achieved:
- 1. Effektive Bekämpfung der Krebszellen, viraler und einzelliger Erreger1. Effective fight against cancer cells, viral and unicellular pathogens
- 2. Weniger Nebenwirkungen und Gegenanzeigen als bisherigen Präparate.2. Less side effects and contraindications than previous preparations.
Die zweite Aufgabe der Erfindung ist die Verbesserung der Methodik der Gentherapie dadurch, daß das therapeutische Gen durch den Organismus zu einer bestimmten Zelle oder Gruppe von Zellen transportiert werden kann.The second object of the invention is to improve the methodology of gene therapy in that the therapeutic gene by the organism to a particular cell or Group of cells can be transported.
Die zweite Aufgabe der Erfindung wird dadurch gelöst, daß ein Bakteriophage oder ein anderer Virus durch eine genmanipulative Weise mit einem Immunglobulin- Rezeptor (siehe Immunology, Immunopathology and Immunity, St. Sell, fourth edition, S. 182) gekoppelt wird. Dieses Produkt bekommt den Namen: Transportierender Rezeptor-Phag Komplex (TRPK). Der Komplex ist für den Transport des therapeutischen Gens durch den Organismus zu einer bestimmten Zelle oder Gruppe von Zellen bestimmt. Dieser Komplex enthält die DNA des therapeutischen Gens im Kopf, die er bei der Interaktion seines Rezeptors mit einer Zielzelle in diese Zielzelle injiziert. Dadurch werden die Funktionen der Zelle normalisiert.The second object of the invention is achieved in that a bacteriophage or a other virus through a genetic manipulation with an immunoglobulin receptor (see Immunology, Immunopathology and Immunity, St. Sell, fourth edition, p. 182). This product gets the name: Transporting Receptor-Phag Complex (TRPK). The complex is for the transport of the therapeutic gene through the organism to one specific cell or group of cells. This complex contains the DNA of the therapeutic gene in the head that he interacts with when his receptor interacts with a target cell injected this target cell. This normalizes the functions of the cell.
Die Synthese des TRPK ist ähnlich der Synthese des AAPK, aber mit folgenden Unterschieden:
The synthesis of the TRPK is similar to the synthesis of the AAPK, but with the following differences:
- 1. Im Milieu des ersten Gefäßes (6.1) befindet sich die DNA des therapeutischen Gens, die auch durch die Technik PCR vervielfältigt ist. Das erste Produckt ist der Kopf des Phages, der mit der DNA des therapeutischen Gens gefüllt.1. In the environment of the first vessel ( 6.1 ) is the DNA of the therapeutic gene, which is also reproduced by the PCR technique. The first product is the head of the phage, which is filled with the DNA of the therapeutic gene.
- 2. Die DNA des Schwanzes wird durch Ligase mit der DNA eines Rezeptors zu einer bestimmten Zelle verbunden. Die dadurch entstandene DNA wird in den Plasmid 8.1 des Bakteriums 7.1 implantiert. Das Bakterium 7.1 befindet sich im Gefäß 6.2.Danach werden die beiden Produkte (1 und 2) auch abgesondert und im Gefäß 6.3 gemischt. Das Endprodukt ist der Phag, der durch die Plattform 3.1 mit dem Immunglobulin-Rezeptor verbunden ist.2. The DNA of the tail is linked to the DNA of a receptor to a specific cell by ligase. The resulting DNA is implanted in the plasmid 8.1 of the bacterium 7.1 . The bacterium 7.1 is located in the vessel 6.2. Then the two products (1 and 2) are also separated and mixed in the vessel 6.3 . The end product is the phag, which is connected to the immunoglobulin receptor by platform 3.1 .
In der Fig. 1 ist der Aggressive Antikörper-Phag Komplex dargestellt. Der AAPK kann dadurch vereinfacht werden, daß (short) immunogenic amino acid polymers 4B (Fig. 1b) statt dem monoklonalen Antikörper ersetzt werden können. In diesem Falle wird die DNA des immunogenic amino aeid Polymer statt der DNA C des monoklonalen Antikörpers in der Genkarte B und C (Fig. 4) ersetzt (siehe Fig. 1b).In Fig. 1 the Aggressive antibody phage complex is shown. The AAPK can be simplified by replacing (short) immunogenic amino acid polymers 4B ( FIG. 1b) instead of the monoclonal antibody. In this case, the DNA of the immunogenic amino acid polymer is replaced instead of the DNA C of the monoclonal antibody in gene map B and C ( FIG. 4) (see FIG. 1b).
In der Fig. 2 ist der Transportierende Rezeptor-Phag Komlex dargestellt. In FIG. 2 the transporting receptor phage Complex not shown.
In der Fig. 3 ist schematisch die Genkarte A des Kopfes vom Phag dargestellt.In Fig. 3 the gene map A of the head of the phag is shown schematically.
In der Fig. 4 ist schematisch die Genkarte B und C/D des Schwanzes (B) mit dem monoklonalen Antikörper (C) oder mit dem Immunglobulin-Rezeptor (D), dargestellt.In FIG. 4, the genetic map B and C / D of the tail (B) with the monoclonal antibody (C) or with the immunoglobulin receptor (D) is shown schematically.
In der Fig. 5 ist schematisch der Plasmid 8 dargestellt; dieser enthält die Genkarte A des Kopfes 2 (Fig. 3).In FIG. 5, the plasmid 8 is shown schematically; this contains the gene map A of the head 2 ( Fig. 3).
In der Fig. 5.1 ist das Gefäss 6.1 mit Bakterien 7 dargestellt, die das Produkt 1 herstellen: den Kopf 2, der mit der DNA 1.1/1.2 vom Milieu des Gefässes 6.1 gefüllt ist. Diese DNA kann Antisense, Transposonen, therapeutischen Gens usw. sein.In Fig. 5.1 the vessel is shown with bacteria 6.1 7, which produce the product 1: the head 2, which is / 1.2 filled with the DNA from the environment of the vessel 1.1 6.1. This DNA can be antisense, transposons, therapeutic gene, etc.
In der Fig. 5.2 ist das Produkt 1 dargestellt: der Kopf 2 mit der DNA 1.1/1.2 vom Milieu.In Fig. 5.2, the product 1 is illustrated: the head 2 with the DNA 1.1 / 1.2 from the environment.
In der Fig. 6 ist der Plasmid 8.1 dargestellt; dieser enthält die Genkarte B und C/D, des Schwanzes 3 (Fig. 1, 2, 6.2), der durch die Plattform 3.1 (Fig. 1, 2) entweder mit einem monoklonalen Antikörper 4 (Fig. 1, 6.2) oder mit einem Immunglobulin-Rezeptor 5 (Fig. 2, 6.2) verbunden ist.The plasmid 8.1 is shown in FIG. 6; this contains the gene card B and C / D, the tail 3 ( Fig. 1, 2, 6.2), which through the platform 3.1 ( Fig. 1, 2) either with a monoclonal antibody 4 ( Fig. 1, 6.2) or with an immunoglobulin receptor 5 ( Fig. 2, 6.2) is connected.
In der Fig. 6.1 ist das Gefäss 6.2 mit Bakterien 7.1 dargestellt, die das Produkt 2 herstellen: den Schwanz 3, der durch die Plattform 3.1 (Fig. 1 und 2) mit dem monoklonalen Antikörper 4 oder mit dem Immunogiobulin-Rezeptor 5 verbunden ist.In Fig. 6.1 the vessel is depicted 6.2 with bacteria 7.1, which produce the product 2: the tail 3, which by the platform 3.1 (Fig. 1 and 2) is connected with the monoclonal antibodies 4, or the Immunogiobulin receptor 5 .
In der Fig. 6.2 ist das Produkt 2 dargestellt.In FIG. 6.2, the product 2 is shown.
In der Fig. 7 ist das Gefäss 6.3 dargestellt, wo die rein abgesonderten Produkten 1 und 2 gemischt werden. Dadurch entsteht das Endprodukt Aggressiver Antikörper-Phag Komplex (AAPK) oder Transportierender Rezeptor-Phag Komplex (TRPK).In Fig. 7 the vessel 6.3 is shown, where the purely separated products 1 and 2 are mixed. This creates the end product Aggressive Antibody-Phag Complex (AAPK) or Transporting Receptor-Phag Complex (TRPK).
Der Aggressive Antikörper-Phag Komplex (Fig. 1) enthält den Kopf 2, die DNA der Transposonen 1.1, den Schwanz 3, die Plattform 3.1 und den monoklonalen Antikörper 4. Bei der Interaktion vom monoklonalen Antikörper mit dem viralen, prokaryotischen, enkaryotischen, d. h. einzelligen oder krebszelligen Antigen, injiziert der Komplex die DNA der Transposonen 1.1, aus dem Kopf 2, durch den Schwanz 3 und die Plattform 3, in das Antigen. Das ist die Eigenschaft eines Phages oder eines Viruses, seine DNA, bei der Interaktion mit einer Zelle, in diese Zelle zu injizieren. Dadurch mutiert und zerstört die DNA 1.1 der Transposonen das Genom des Antigens. Danach scheint dieses Antigen keine Gefahr mehr für den Organismus zu haben.The aggressive antibody-phag complex ( FIG. 1) contains the head 2 , the DNA of the transposons 1.1 , the tail 3 , the platform 3.1 and the monoclonal antibody 4 . When the monoclonal antibody interacts with the viral, prokaryotic, enkaryotic, ie unicellular or cancerous antigen, the complex injects the DNA of the transposons 1.1 , from the head 2 , through the tail 3 and the platform 3 , into the antigen. It is the property of a phage or virus to inject its DNA into that cell when it interacts with a cell. As a result, the DNA 1.1 of the transposons mutates and destroys the genome of the antigen. After that, this antigen no longer appears to have any danger to the organism.
Der Transportierende Rezeptor-Phag Komlex (Fig. 2) enthalt den Kopf 2, die DNA des therapeutischen Gens 1.2, den Schwanz 3, die Plattform 3.1 und den Immunglobulin-Rezeptor 5. Bei der Interaktion vom Immunglobulin-Rezeptor mit einem bestimmten Ligand (z. B. mit einer Zielzelle), injiziert der Komplex die DNA des therapeutischen Gens 1.2, aus dem Kopf 2, durch den Schwanz 3 und die Plattform 3, in das Ligand, d. h. in eine Zielzelle.The transporting receptor-phag complex ( FIG. 2) contains the head 2 , the DNA of the therapeutic gene 1.2 , the tail 3 , the platform 3.1 and the immunoglobulin receptor 5 . When the immunoglobulin receptor interacts with a specific ligand (e.g. with a target cell), the complex injects the DNA of the therapeutic gene 1.2 , from the head 2 , through the tail 3 and the platform 3 , into the ligand, ie into a target cell.
Dadurch gelingt das therapeutische Gen in diese Zielzelle bzw. kranke Zelle und normalisiert ihre Funktionen. Danach soll die Zelle gesund werden und das führt zur Genesung des ganzen Organismus. Nach der Injektion, d. h. nachdem die DNA herausinjiziert wird, migriert sie entlang der Zellmembrane zu einer Membranpore und gelingt durch diese Pore ins Zellplasma und dann in den Kern.As a result, the therapeutic gene succeeds in this target cell or diseased cell and normalizes their functions. After that, the cell should become healthy and this leads to recovery of the whole Organism. After the injection, i.e. H. after the DNA is injected out, it migrates along the cell membrane to a membrane pore and enters the cell plasma through this pore and then to the core.
Die leeren Komplexen, d. h. nachdem sie ihre DNA injiziert haben, werden (sie) vom Organismus abgebaut.The empty complexes, i.e. H. after injecting their DNA, the Organism degraded.
Die DNA A (Fig. 3) wird in den Plasmid 8 (Fig. 5) des Bakteriums 7 (Fig. 5.1) im Gefäss 6.1 implantiert, um das Produkt der DNA A, nämlich den Kopf 2 herzustellen.The DNA A ( FIG. 3) is implanted in the plasmid 8 ( FIG. 5) of the bacterium 7 ( FIG. 5.1) in the vessel 6.1 in order to produce the product of the DNA A, namely the head 2 .
Die DNAB und C/D (Fig. 4) wird in den Plasmid 8.1 (Fig. 6) des Bakteriums 7.1 (Fig. 6.1) im Gefäss 6.2 implantiert, um das Produkt der DNA B und C/D, nämlich den Schwanz 3 mit dem monoklonalen Antikörper 4 oder mit dem Immunglobulin Rezeptor 5 herzustellen.The DNAB and C / D ( FIG. 4) is implanted in the plasmid 8.1 ( FIG. 6) of the bacterium 7.1 ( FIG. 6.1) in the vessel 6.2 to contain the product of the DNA B and C / D, namely the tail 3 to produce the monoclonal antibody 4 or with the immunoglobulin receptor 5 .
Das Produkt 1 (Fig. 5.2) ist der Kopf 2 mit der DNA 1.1/1.2 und wird von Bakterien 7 hergestellt. The product 1 ( Fig. 5.2) is the head 2 with the DNA 1.1 / 1.2 and is produced by bacteria 7 .
Das Produkt 2 (Fig. 6.2.) ist der Schwanz 3 mit dem monoklonalen Antikörper 4 oder mit dem Immunglobulin-Rezeptor 5 (Fig. 1, 2, 5.2, 6.2) und wird von Bakterien 7.1 hergestellt. Im Gefäss 6.3 (Fig. 7) werden die Produkte 1 und 2 gemischt. Dadurch entsteht das Endprodukt (Fig. 1 oder Fig. 2).The product 2 ( Fig. 6.2.) Is the tail 3 with the monoclonal antibody 4 or with the immunoglobulin receptor 5 ( Fig. 1, 2, 5.2, 6.2) and is produced by bacteria 7.1 . Products 1 and 2 are mixed in vessel 6.3 ( FIG. 7). This creates the end product ( Fig. 1 or Fig. 2).
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R003 | Refusal decision now final | ||
SPC2 | Refusal decision in registration proceedings for a supplementary protection certificate (spc) |
Free format text: PRODUCT NAME: KEINE ANGABE Spc suppl protection certif: 122018000055 Filing date: 20180416 Expiry date: 20180429 |
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R003 | Refusal decision now final |
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