DE19511126A1 - Substrate cell layers, e.g. for transplantation - Google Patents

Substrate cell layers, e.g. for transplantation

Info

Publication number
DE19511126A1
DE19511126A1 DE1995111126 DE19511126A DE19511126A1 DE 19511126 A1 DE19511126 A1 DE 19511126A1 DE 1995111126 DE1995111126 DE 1995111126 DE 19511126 A DE19511126 A DE 19511126A DE 19511126 A1 DE19511126 A1 DE 19511126A1
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
cell
cell layer
layer
cells
substrate
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Ceased
Application number
DE1995111126
Other languages
German (de)
Inventor
Barbara Dr Wilke
Ruediger Von Dr Versen
Adalbert Dr Rakow
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
DIZG DEUTSCHES INST fur ZELL
Original Assignee
DIZG DEUTSCHES INST fur ZELL
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by DIZG DEUTSCHES INST fur ZELL filed Critical DIZG DEUTSCHES INST fur ZELL
Priority to DE29520965U priority Critical patent/DE29520965U1/en
Priority to DE1995111126 priority patent/DE19511126A1/en
Publication of DE19511126A1 publication Critical patent/DE19511126A1/en
Ceased legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
    • C12N5/0602—Vertebrate cells
    • C12N5/0625—Epidermal cells, skin cells; Cells of the oral mucosa
    • C12N5/0629—Keratinocytes; Whole skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N1/00—Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
    • A01N1/02—Preservation of living parts
    • A01N1/0236—Mechanical aspects
    • A01N1/0263—Non-refrigerated containers specially adapted for transporting or storing living parts whilst preserving, e.g. cool boxes, blood bags or "straws" for cryopreservation
    • A01N1/0273—Transport containers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N1/00—Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
    • A01N1/02—Preservation of living parts
    • A01N1/0278—Physical preservation processes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61F—FILTERS IMPLANTABLE INTO BLOOD VESSELS; PROSTHESES; DEVICES PROVIDING PATENCY TO, OR PREVENTING COLLAPSING OF, TUBULAR STRUCTURES OF THE BODY, e.g. STENTS; ORTHOPAEDIC, NURSING OR CONTRACEPTIVE DEVICES; FOMENTATION; TREATMENT OR PROTECTION OF EYES OR EARS; BANDAGES, DRESSINGS OR ABSORBENT PADS; FIRST-AID KITS
    • A61F2/00—Filters implantable into blood vessels; Prostheses, i.e. artificial substitutes or replacements for parts of the body; Appliances for connecting them with the body; Devices providing patency to, or preventing collapsing of, tubular structures of the body, e.g. stents
    • A61F2/02—Prostheses implantable into the body
    • A61F2/14—Eye parts, e.g. lenses, corneal implants; Implanting instruments specially adapted therefor; Artificial eyes
    • A61F2/16—Intraocular lenses
    • A61F2/1613—Intraocular lenses having special lens configurations, e.g. multipart lenses; having particular optical properties, e.g. pseudo-accommodative lenses, lenses having aberration corrections, diffractive lenses, lenses for variably absorbing electromagnetic radiation, lenses having variable focus
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/0068—General culture methods using substrates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61F—FILTERS IMPLANTABLE INTO BLOOD VESSELS; PROSTHESES; DEVICES PROVIDING PATENCY TO, OR PREVENTING COLLAPSING OF, TUBULAR STRUCTURES OF THE BODY, e.g. STENTS; ORTHOPAEDIC, NURSING OR CONTRACEPTIVE DEVICES; FOMENTATION; TREATMENT OR PROTECTION OF EYES OR EARS; BANDAGES, DRESSINGS OR ABSORBENT PADS; FIRST-AID KITS
    • A61F2/00—Filters implantable into blood vessels; Prostheses, i.e. artificial substitutes or replacements for parts of the body; Appliances for connecting them with the body; Devices providing patency to, or preventing collapsing of, tubular structures of the body, e.g. stents
    • A61F2/0077—Special surfaces of prostheses, e.g. for improving ingrowth
    • A61F2002/0086—Special surfaces of prostheses, e.g. for improving ingrowth for preferentially controlling or promoting the growth of specific types of cells or tissues
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2533/00—Supports or coatings for cell culture, characterised by material
    • C12N2533/50—Proteins
    • C12N2533/54—Collagen; Gelatin

Abstract

Substrate cell layers contg. new collagen-contg. or gel-like carrier or amnion or a cellular dermis as substrate and a layer of cultured cells are new. Also claimed is a transport system for cell layers consisting of a non-breakable external housing and an inner space which contains loose intermediate floors for storage of the cell layers (which are fixed by stamping) and, in addn. to nutrient medium, a heating source for temp. regulation and a controllable CO2 inlet.

Description

Die Erfindung betrifft gezüchtete Zellschichten, Verfahren zu ihrer Herstellung und ein Transportsystem für Zellschichten, wie Haut-Transplantationsgewebe, die unter definierten Bedingungen vom Gewinnungs- zum Einsatzort gelangen müssen.The invention relates to cultured cell layers, processes for their production and a Transport system for cell layers, such as skin graft tissue, under defined conditions must come from the extraction to the place of use.

Seitdem Bell und Mitarbeiter partiell in vitro rekonstruierte Gewebe der Lederhaut gewonnen hatten (Bell et al., Proc. Natl. Acad. Sci. 76 (1979) 1274), sind die Verfahren zur Gewinnung von Hautgewebe ständig weiterentwickelt worden. Zuerst hatten Green und Mitarbeiter auch die Züchtung von Keratinocyten über einen längeren Zeitraum beschrieben (Green, H. et al., Proc. Natl. Acad.Sci. 76 (1979) 5665): Die Epidermisschicht entwickelte sich unter Bildung eines drei bis fünf Zellen dicken Gewebes sehr schnell. Diese Gewebe, bei Patienten transplantiert, differenzierten sich in situ weiter. Patienten mit schweren Verbrennungen konnten mit diesem Verfahren gerettet werden (G. Gallico et al., New England J. Med., 311 (1984) 448). Mit dem Green-Verfahren (US-(PS-Patentschrift) 4456687) kann aus einer Biopsie von 2 cm² innerhalb von drei Wochen ein Quadratmeter Epidermis gewonnen werden.Since then, Bell and co-workers have partially reconstructed dermis tissues in vitro (Bell et al., Proc. Natl. Acad. Sci. 76 (1979) 1274) are the methods for the extraction of skin tissue have been continuously developed. First had green and co-workers also grew keratinocytes over an extended period of time (Green, H. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. 76 (1979) 5665): Die Epidermal layer developed to form a three to five cell thick Fabric very quickly. These tissues, transplanted in patients, differentiated continue in situ. Patients with severe burns could use this procedure be saved (G. Gallico et al., New England J. Med., 311 (1984) 448). With the Green method (US (PS patent) 4456687) can be obtained from a biopsy of 2 cm² a square meter of epidermis can be obtained within three weeks.

Die Herstellung des Gewebes und sein Transport zum Einsatzort ist mit einer Reihe technischer Probleme verbunden. Einen besonderen Raum nehmen dabei die Trägermaterialien ein, die einen Transport des Gewebes und die Transplantation auf den Patienten ermöglichen müssen. Deshalb sind vielfältige Trägermaterialien vorgeschlagen worden, auf biologischer und auf synthetischer Grundlage. Gemäß DD 2 97 678 wird ein biologisches Trägermaterial beschrieben, das aus einer Mischung von Plasmaproteinkonzentrat und Calciumthrombin besteht. Andere Vorschläge bestehen in der Verwendung von Bindegewebszellen (DE 38 29 183), Mischtransplanten aus Eigenhaut und Leichenhaut (DE 35392709), Kadaver-Allotransplantaten, Xeno­ transplantaten von Schweinehaut, künstlicher Haut, Kollagenen oder Kunststoffen, wie thermoplastischen Copolyestern (DE 26 51 685, 37 16 907, 37 11 699, 41 27 570; WO 92 10 6179, 91 116 010; US 52 82 859, 51 47 401, 48 88 291, 48 83 487, 46 42 118).The production of the fabric and its transport to the place of use is with a number technical problems. They take up a special space Carrier materials that are used to transport tissue and transplant must enable the patient. That is why there are diverse carrier materials have been proposed on a biological and synthetic basis. According to DD 2 97 678 describes a biological carrier material which consists of a mixture of Plasma protein concentrate and calcium thrombin exist. Other suggestions are in the use of connective tissue cells (DE 38 29 183), mixed transplants Own skin and corpse skin (DE 35392709), carcass allografts, Xeno grafts of pig skin, artificial skin, collagens or plastics, such as thermoplastic copolyesters (DE 26 51 685, 37 16 907, 37 11 699, 41 27 570; WO 92 10 6179, 91 116 010; US 52 82 859, 51 47 401, 48 88 291, 48 83 487, 46 42 118).

Der Lebend-Lagerfähigkeit und der Aufrechterhaltung der koloniebildenden Effektivität von Epithelzellschichten widmet sich die EP 507849 (US 5100676, WO 91/11100, DE 69100748). Darin wird die Aufbewahrung der Zellschicht (z. B. Keratinocyten) in einem physiologisch verträglichen Medium, das Aufbringen der kohäsiven Schicht auf ein nicht anhaftendes Substrat, die Verpackung als Verband für Hautwunden und die Aufbewahrung als Kühlpackung für einen Zeitraum bis zu 26 Stunden beschrieben.Live shelf life and maintenance of colony-forming effectiveness EP 507849 (US 5100676, WO 91/11100, DE. is devoted to epithelial cell layers 69100748). This includes the storage of the cell layer (e.g. keratinocytes) in one  physiologically acceptable medium, the application of the cohesive layer on a non adhesive substrate, the packaging as a dressing for skin wounds and the Storage as a cool pack for a period of up to 26 hours is described.

Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, neue Zellschichten und ein Transportsystem für Zellschichten zu entwickeln. Die Aufgabe wurde dadurch gelöst, daß biologische und/oder nichtbiologische Trägermaterialien als nicht anhaftende Substrate zur Bildung von Zellschichten eingesetzt werden, insbesondere neue kollagenhaltige oder gelartige Träger sowie Amnion oder azelluläre Dermis. Auf diese Träger werden die zur Schichtbildung vorgesehenen Zellen gebracht und in einem Nährmedium gezüchtet. Als Zelltypen finden erfindungsgemäß Epithelzellen (Keratinozyten), Knorpelzellen (Chondrozyten), Fibroblasten, Endothelzellen oder tierische Zellen Anwendung. Geeignete Nährmedien sind vor allem solche Kulturlösungen, die Aminosäuren, Fettsäuren, Puffersalze, Spurenelemente und Vitamine enthalten, ebenso bekannte Nährmedien, wie MEM oder Ham F 12, aber auch das Zellkulturmedium MCDB 153.The invention has for its object new cell layers and a transport system to develop for cell layers. The problem was solved in that biological and / or non-biological carrier materials as non-adherent substrates for the formation of Cell layers are used, especially new collagen-containing or gel-like Carrier as well as amnion or acellular dermis. On these carriers are the Stratification cells are brought and grown in a nutrient medium. As According to the invention, cell types find epithelial cells (keratinocytes), cartilage cells (Chondrocytes), fibroblasts, endothelial cells or animal cells application. Suitable nutrient media are above all those culture solutions, the amino acids, Contain fatty acids, buffer salts, trace elements and vitamins, also known ones Culture media such as MEM or Ham F 12, but also the cell culture medium MCDB 153.

Die Aufgabe, ein Transportsystem für Zellschichten zu entwickeln, wurde durch einen Transportbehälter gelöst, der aus einer bruchsicheren Außenverkleidung und einem Innenraum besteht, der lose Zwischenböden zur Lagerung der Zellschichten enthält - wobei die Zwischenböden durch Stempel fixiert werden - und der - neben dem Nährmedium - Heizquellen zur Temperaturregelung und eine steuerbare CO₂-Zufuhr enthält. Die Außenverkleidung besteht vorzugsweise aus Edelmetall, die Isolierung des Behälters aus Kunststoff, vorzugsweise aus Polystyrol. Als Heizquellen sind Batterien bzw. aufladbare Akkumulatoren vorgesehen. Dieses Transportsystem, eine Kombination aus bekannten und aus neuen Teilen, eignet sich für bekannte wie für die erfindungsgemäßen Zellschichten, die aus einer Substrat-Zellschicht-Einheit bestehen wobei als Substrat neue kollagenhaltige oder gelartige Träger sowie Amnion oder azelluläre Dermis und als zur Schichtbildung vorgesehene Zelltypen Epithelzellen (Keratinozyten), Knorpelzellen (Chondrozyten), Fibroblasten, Endothelzellen oder tierische Zellen Anwendung finden. Es hat sich überraschenderweise herausgestellt, daß die mit dem erfindungsgemäßen Transportsystem möglichen Transportbedingungen ein Anwachsen der Zellschichten garantieren und die Koloniebildung der Zellen in vivo auf der Wunde weder behindern noch beeinträchtigen. Sie ermöglichen lange Transportzeiten und das Einhalten der gewünschten Innentemperatur von 5 bis 40°C und für z. B. Epithelzellen aus Keratinozyten von 20 bis 37°C. Das Transportsystem ist zum Transport biologischer Materialien, die lebende Zellen enthalten, geeignet - z. B. patienteneigenen Materials für autogene, von Fremdmaterialien für allogene Transplan­ tationen wie auch xenogener Materialien.The task of developing a transport system for cell layers was met by a Transport container solved, which consists of a shatterproof outer panel and a Interior consists of loose shelves for storing the cell layers - whereby the intermediate floors are fixed by stamps - and the - next to the Culture medium - heating sources for temperature control and a controllable CO₂ supply contains. The outer lining is preferably made of precious metal, the insulation of the Container made of plastic, preferably made of polystyrene. Batteries are the heat sources or rechargeable batteries are provided. This transport system, a combination from known and from new parts, is suitable for known as for the cell layers according to the invention, which consist of a substrate-cell layer unit where as a substrate new collagen or gel-like carriers and amnion or acellular dermis and epithelial cells as cell types intended for layer formation (Keratinocytes), cartilage cells (chondrocytes), fibroblasts, endothelial cells or animal cells find application. Surprisingly, it turned out that the possible transport conditions with the transport system according to the invention guarantee growth of the cell layers and colony formation of the cells in vivo do not interfere with or affect the wound. They allow for a long time Transport times and compliance with the desired internal temperature from 5 to 40 ° C and for z. B. epithelial cells from keratinocytes from 20 to 37 ° C. The transport system is suitable for transporting biological materials containing living cells - e.g. B.  patient's own material for autogenous, foreign material for allogeneic transplan as well as xenogenic materials.

Die Erfindung soll anhand von Ausführungsbeispielen näher erläutert werden.The invention will be explained in more detail with the aid of exemplary embodiments.

AusführungsbeispieleEmbodiments Beispiel 1: ZellschichtenExample 1: Cell layers

Allgemeine Vorschrift. Auf ein Substrat in einem Nährmedium wird unter üblichen Bedingungen ein die spätere Zellschicht bildender Zelltyp gesät, kultiviert und durch Vermehrung zur Substrat-Zell­ schicht gebracht.General rule. Under normal conditions, a substrate in a nutrient medium becomes the later one Cell layer-forming cell type sown, cultivated and by multiplication to the substrate cell brought shift.

Beispiel 1aExample 1a

Gem. Beispiel 1 wird das kollagenhaltige Trägermaterial Opragen mit Keratinozyten zu einer Opragen-Keratinozyten-Zellschicht gezüchtet.According to Example 1, the collagen-containing carrier material Opragen with keratinocytes an Opragen keratinocyte cell layer.

Beispiel 1bExample 1b

Gem. Beispiel 1a wird eine Amnion-Keratinozyten-Zellschicht gebildet.According to Example 1a, an amniotic keratinocyte cell layer is formed.

Beispiel 1cExample 1c

Gem. Beispiel 1a wird aus einer azellulären Dermis als Substrat eine Azellulärdermis-Ke­ ratinozyten-Zellschicht gebildet.According to Example 1a, an acellular dermis nucleus is transformed from an acellular dermis as a substrate Ratinocyte cell layer formed.

Beispiele 1 ff.Examples 1 ff.

gem. Beispiel 1 bis 1c werden gebildet:
Opragen-Chondrozyten-Zellschicht
Opragen-Fibroblasten-Zellschicht
Opragen-Endothel-Zellschicht
Amnion-Chondrozyten-Zellschicht
Amnion-Fibroblasten-Zellschicht
Amnion-Endothel-Zellschicht
Azellulärdermis-Chondrozyten-Zellschicht
Azellulärdermis-Fibrobasten-Zellschicht
Azellulärdermis-Endothel-Zellschicht
Gel-Keratinozyten-Zellschicht
Gel-Chondrozyten-Zellschicht
Gel-Fibroblasten-Zellschicht
Gel-Endothel-Zellschicht
Tierzell-Keratinozyten-Zellschicht
Tierzell-Cho ndrozyten-Zellschicht
Tierzell-Fibroblasten-Zellschicht
Tierzell-Endothel-Zellschicht.acc. Examples 1 to 1c are formed:
Opragen chondrocyte cell layer
Opragen fibroblast cell layer
Opragen endothelial cell layer
Amnion chondrocyte cell layer
Amnion fibroblast cell layer
Amnion endothelial cell layer
Azellular dermis chondrocyte cell layer
Acellular dermis fibroblast cell layer
Azellular dermis endothelial cell layer
Gel keratinocyte cell layer
Gel chondrocyte cell layer
Gel fibroblast cell layer
Gel endothelial cell layer
Animal cell keratinocyte cell layer
Animal cell chondrocyte cell layer
Animal cell fibroblast cell layer
Animal cell endothelial cell layer.

Beispiel 2: TransportbehälterExample 2: Transport container

Fig. 1 Fig. 1

BezugszeichenlisteReference list

1 Außenverkleidung
2 Zwischenböden
3 Stempel
4 CO₂-Zufuhr
5 Heizquellen 1 outer panel
2 shelves
3 stamps
4 CO₂ supply
5 heating sources

Der Transportbehälter besteht aus einer bruchsicheren Außenverkleidung und einem Innenraum, der lose Zwischenböden zur Lagerung der Zellschichten enthält - die durch Stempel fixiert werden - und der - neben dem Nährmedium - Heizquellen zur Temperaturregelung und eine steuerbare CO₂-Zufuhr enthält. Die Außenverkleidung besteht vorzugsweise aus Edelmetall, die Isolierung des Behälters aus Kunststoff, vorzugsweise aus Polystyrol. Als Heizquellen sind Batterien bzw. aufladbare Akkumulatoren vorgesehen.The transport container consists of an unbreakable outer casing and a Interior that contains loose shelves for storing the cell layers - through Stamps are fixed - and - in addition to the nutrient medium - heating sources for Contains temperature control and a controllable CO₂ supply. The outer cladding consists preferably of precious metal, the insulation of the container from plastic, preferably made of polystyrene. Batteries or rechargeable batteries are suitable as heating sources Accumulators provided.

Dieses Transportsystem, eine Kombination aus bekannten und aus neuen Teilen, eignet sich für bekannte wie für die erfindungsgemäßen Zellschichten, die aus einer Substrat-Zell­ schicht-Einheit bestehen, wobei als Substrat neue kollagenhaltige oder gelartige Träger sowie Amnion oder azelluläre Dermis und als zur Schichtbildung vorgesehene Zelltypen Epithelzellen (Keratinozyten), Knorpelzellen (Chondrozyten), Fibroblasten Endothelzellen oder tierische Zellen Anwendung finden.This transport system, a combination of known and new parts, is suitable are known as for the cell layers according to the invention, which consist of a substrate cell  Layer unit consist, with new collagen-containing or gel-like as substrate Carrier and amnion or acellular dermis and as intended for layer formation Cell types epithelial cells (keratinocytes), cartilage cells (chondrocytes), fibroblasts Endothelial cells or animal cells are used.

Die Transportbedingungen garantieren ein Anwachsen der Zellschichten und die Koloniebildung der Zellen in vivo auf der Wunde. Sie ermöglichen lange Transportzeiten und das Einhalten der gewünschten Innentemperatur von 5 bis 40°C und für z. B. Epithelzellen aus Keratinozyten von 20 bis 37°C. Das Transportsystem ist zum Transport biologischer Materialien, die lebende Zellen enthalten, geeignet - z. B. patienteneigenen Materials für autogene, von Fremdmaterialien für allogene Transplantationen wie auch xenogener Materialien.The transport conditions guarantee growth of the cell layers and the Colony formation of the cells in vivo on the wound. They enable long transport times and compliance with the desired internal temperature of 5 to 40 ° C and for z. B. Epithelial cells from keratinocytes at 20 to 37 ° C. The transport system is for Transport of biological materials containing living cells is suitable - e.g. B. patient's own material for autogenous, foreign material for allogeneic Transplants as well as xenogenic materials.

Claims (27)

1. Substrat-Zellschichten, enthaltend neue kollagenhaltige oder gelartige Träger sowie Amnion oder azelluläre Dermis als Substrat und eine Schicht aus gezüchteten Zellen.1. substrate cell layers containing new collagen-containing or gel-like carriers as well Amnion or acellular dermis as a substrate and a layer of cultured cells. 2. Substrat-Zellschichten nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß sie die zur Schichtbildung vorgesehenen Zelltypen Epithelzellen (Keratinozyten), Knorpelzellen (Chondrozyten), Fibroblasten, Endothelzellen oder tierische Zellen enthalten.2. substrate cell layers according to claim 1, characterized in that they for Layer formation provided cell types epithelial cells (keratinocytes), cartilage cells (Chondrocytes), fibroblasts, endothelial cells or animal cells. 3. Opragen-Keratinozyten-Zellschicht.3. Opragen keratinocyte cell layer. 4. Amnion-Keratinozyten-Zellschicht.4. Amnion keratinocyte cell layer. 5. Azellulärdermis-Keratinozyten-Zellschicht.5. Azellular dermis keratinocyte cell layer. 6. Opragen-Chondrozyten-Zellschicht.6. Opragen chondrocyte cell layer. 7. Opragen-Fibroblasten-Zellschicht.7. Opragen fibroblast cell layer. 8. Opragen-Endothel-Zellschicht.8. Opragen endothelial cell layer. 9. Amnion-Chondrozyten-Zellschicht.9. Amnion chondrocyte cell layer. 10. Amnion-Fibroblasten-Zellschicht.10. Amnion fibroblast cell layer. 11. Amnion-Endothel-Zellschicht.11. Amnion endothelial cell layer. 12. Azellulärdermis-Chondrozyten-Zellschicht.12. Azellular dermis chondrocyte cell layer. 13. Azellulärdermis-Fibrobasten-Zellschicht.13. Acellular dermis fibroblast cell layer. 14. Azellulärdermis-Endothel-Zellschicht.14. Azellular dermis endothelial cell layer. 15. Gel-Keratinozyten-Zellschicht.15. Gel keratinocyte cell layer. 16. Gel-Chondrozyten-Zellschicht.16. Gel chondrocyte cell layer. 17. Gel-Fibroblasten-Zellschicht.17. Gel fibroblast cell layer. 18. Gel-Endothel-Zellschicht.18. Gel endothelial cell layer. 19. Tierzell-Keratinozyten-Zellschicht.19. Animal cell keratinocyte cell layer. 20. Tierzell-Chondrozyten-Zellschicht.20. Animal cell chondrocyte cell layer. 21. Tierzell-Fibroblasten-Zellschicht.21. Animal cell fibroblast cell layer. 22. Tierzell-Endothel-Zellschicht.22. Animal cell endothelial cell layer. 23. Verfahren zur Herstellung von Substrat-Zellschichten, dadurch gekennzeichnet, daß auf ein Substrat in einem Nährmedium unter üblichen Bedingungen ein die spätere Zellschicht bildender Zelltyp gebracht, kultiviert und durch Vermehrung zur Substrat-Zell­ schicht gebracht wird.23. A method for producing substrate cell layers, characterized in that on a substrate in a nutrient medium under normal conditions the later Cell type forming cell layer brought, cultivated and by multiplication to the substrate cell layer is brought. 24. Verfahren zur Herstellung von Substrat-Zellschichten nach Anspruch 23, dadurch gekennzeichnet, daß als Substrate neue kollagenhaltige oder gelartige Träger sowie Amnion oder azelluläre Dermis eingesetzt, auf diese Träger die zur Schichtbildung vorgesehenen Zellen gebracht und in einem Nährmedium gezüchtet werden.24. A method for producing substrate cell layers according to claim 23, characterized characterized in that new collagenous or gel-like carriers as well as  Amnion or acellular dermis is used on these carriers to form layers provided cells and grown in a nutrient medium. 25. Verfahren nach Anspruch 23, dadurch gekennzeichnet, daß als Zelltypen Epithelzellen (Keratinozyten), Knorpelzellen (Chondrozyten), Fibroblasten Endothelzellen oder tierische Zellen Anwendung finden.25. The method according to claim 23, characterized in that as cell types Epithelial cells (keratinocytes), cartilage cells (chondrocytes), fibroblasts Endothelial cells or animal cells are used. 26. Transportsystem für Zellschichten, bestehend aus einer bruchsicheren Außenverkleidung und einem Innenraum, der lose Zwischenböden zur Lagerung der Zellschichten enthält - die durch Stempel fixiert werden - und der, neben dem Nährmedium, Heizquellen zur Temperaturregelung und eine steuerbare CO₂-Zufuhr enthält.26. Transport system for cell layers, consisting of a shatterproof Exterior cladding and an interior that has loose shelves for storing the Contains cell layers - which are fixed by stamps - and the, next to the Culture medium, heating sources for temperature control and a controllable CO₂ supply contains. 27. Transportsystem nach Anspruch 26, dadurch gekennzeichnet, daß es - als Kombination bekannter und neuer Teile - eine Außenverkleidung enthält, die vorzugsweise aus Edelmetall besteht und die Isolierung des Behälters aus Kunststoff vorzugsweise aus Polystyrol und als Heizquellen Batterien bzw. aufladbare Akkumulatoren vorgesehen sind.27. Transport system according to claim 26, characterized in that it - as Combination of known and new parts - an outer panel that contains preferably consists of precious metal and the insulation of the container made of plastic preferably made of polystyrene and batteries or rechargeable as heating sources Accumulators are provided.
DE1995111126 1995-03-19 1995-03-19 Substrate cell layers, e.g. for transplantation Ceased DE19511126A1 (en)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE29520965U DE29520965U1 (en) 1995-03-19 1995-03-19 Cell layers and transport system for cell layers
DE1995111126 DE19511126A1 (en) 1995-03-19 1995-03-19 Substrate cell layers, e.g. for transplantation

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE1995111126 DE19511126A1 (en) 1995-03-19 1995-03-19 Substrate cell layers, e.g. for transplantation

Publications (1)

Publication Number Publication Date
DE19511126A1 true DE19511126A1 (en) 1996-09-26

Family

ID=7757826

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE1995111126 Ceased DE19511126A1 (en) 1995-03-19 1995-03-19 Substrate cell layers, e.g. for transplantation

Country Status (1)

Country Link
DE (1) DE19511126A1 (en)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0918529A1 (en) * 1997-02-28 1999-06-02 Tseng, Scheffer C.G. Grafts made from amniotic membrane; methods of separating, preserving, and using such grafts in surgeries
DE102010012790A1 (en) * 2010-03-25 2011-09-29 Fraunhofer-Gesellschaft zur Förderung der angewandten Forschung e.V. Incubator device and method for its operation

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE8134412U1 (en) * 1981-11-26 1982-05-06 Schinkel, Otto, 3406 Bovenden CULTURAL VESSEL
GB2255571A (en) * 1991-04-10 1992-11-11 Bibby Sterilin Ltd Cell culture on silicone membranes, and wound models
US5266480A (en) * 1986-04-18 1993-11-30 Advanced Tissue Sciences, Inc. Three-dimensional skin culture system
WO1994004657A1 (en) * 1992-08-13 1994-03-03 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Bioactive material template for in vitro synthesis of bone tissue
US5326706A (en) * 1989-07-17 1994-07-05 Research Foundation Of State University Of New York Homeostatic organ preservation system

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE8134412U1 (en) * 1981-11-26 1982-05-06 Schinkel, Otto, 3406 Bovenden CULTURAL VESSEL
US5266480A (en) * 1986-04-18 1993-11-30 Advanced Tissue Sciences, Inc. Three-dimensional skin culture system
US5326706A (en) * 1989-07-17 1994-07-05 Research Foundation Of State University Of New York Homeostatic organ preservation system
GB2255571A (en) * 1991-04-10 1992-11-11 Bibby Sterilin Ltd Cell culture on silicone membranes, and wound models
WO1994004657A1 (en) * 1992-08-13 1994-03-03 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Bioactive material template for in vitro synthesis of bone tissue

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
93:281107 *
Biosis: 93:455063 *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0918529A1 (en) * 1997-02-28 1999-06-02 Tseng, Scheffer C.G. Grafts made from amniotic membrane; methods of separating, preserving, and using such grafts in surgeries
EP0918529A4 (en) * 1997-02-28 2003-02-05 Scheffer C G Tseng Grafts made from amniotic membrane; methods of separating, preserving, and using such grafts in surgeries
DE102010012790A1 (en) * 2010-03-25 2011-09-29 Fraunhofer-Gesellschaft zur Förderung der angewandten Forschung e.V. Incubator device and method for its operation
DE102010012790B4 (en) * 2010-03-25 2015-08-06 Fraunhofer-Gesellschaft zur Förderung der angewandten Forschung e.V. Incubator device and method for its operation

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Jones et al. A guide to biological skin substitutes
Boyce et al. Biologic attachment, growth, and differentiation of cultured human epidermal keratinocytes on a graftable collagen and chondroitin-6-sulfate substrate
Wei et al. Rabbit conjunctival and corneal epithelial cells belong to two separate lineages.
EP0020753B1 (en) Skin-equivalent
Hafemann et al. Use of a collagen/elastin-membrane for the tissue engineering of dermis
DE69626035T2 (en) A BIOLOGICAL MATERIAL CONTAINING AN EFFECTIVE CULTURE OF BONE MARROW STAMPS DIFFERENTIATED PARTIALLY OR COMPLETELY IN BINDING WEB CELLS, AND A THREE-DIMENSIONAL, BIODEGRADABLE AND BIODEGRADABLE MATRIX THAT CONSISTS OF A HYALURONIC ACID DERIVATIVE
CN102462864B (en) Novel method for constructing tissue engineering skin
AU699407B2 (en) Method for long term subculture of dermal papilla cells
DE69233029T2 (en) HUMAN MESENCHYM STEM CELLS FROM THE MARK AND MONOCLONAL ANTIBODIES SPECIFICALLY AGAINST THESE CELLS
EP1639099B1 (en) Method of isolating cells from umbilical cord
CA2351396A1 (en) Bioengineered tissue constructs and methods for producing and using them
US20040030406A1 (en) Tissue equivalent for transplantation and process for producing the same
Kangesu et al. A porcine model using skin graft chambers for studies on cultured keratinocytes
CA2000181A1 (en) Process for producing cultured epidermal sheet, product and method of use
DE10026789A1 (en) Cartilage replacement and process for its manufacture
DE10326750A1 (en) Making a cell preparation from an unfractionated cell mixture, useful e.g. for preparing cell or progenitor cell cultures, comprises damaging cells having a particular degree of maturation or differentiation
CN104263698A (en) Screening and culturing methods for large-scale preparation of human extracellular matrix from fibroblasts for clinical treatment level cellular therapy
CA2230263A1 (en) Reconstituted skin
CN107683148A (en) Skin renewal method
DE19511126A1 (en) Substrate cell layers, e.g. for transplantation
Doolin et al. Effects of microgravity on growing cultured skin constructs
DE19612998A1 (en) Cell layer prepn. and transport system for use in skin transplants
CN103893831B (en) A kind of organotypic artificial skin, its preparation method and application
EP3919607A1 (en) Multi-compartment container for culturing and surface multiplication of human autologous fibroblasts on a membrane carrier
Hakim et al. Use of biodegradable mesh as a transport for a cultured uroepithelial graft an improved method using collagen gel

Legal Events

Date Code Title Description
OM8 Search report available as to paragraph 43 lit. 1 sentence 1 patent law
8110 Request for examination paragraph 44
8131 Rejection