DE19505518A1

DE19505518A1 - Compsn for treating malaria, hepatitis B, cancer and opportunistic infections

Info

Publication number: DE19505518A1
Application number: DE19505518A
Authority: DE
Inventors: Ina Dr Levi
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 1995-02-10
Filing date: 1995-02-10
Publication date: 1996-08-14

Abstract

Compsn for treating malaria, hepatitis B, cancer opportunistic infections contains benzoic acid or its derivs. (A). (A) is pref. p-hydroxybenzoic acid or its derivs.

Description

Die Erfindung betrifft Mittel und pharmazeutische Zubereitungen, die zur Bekämpfung von parasitären und viralen Erkrankungen, wie Malaria, Hapatitis-B-Infektionen oder systemischen opportunistischen Infektionen oder von Krebserkrankungen geeignet sind.The invention relates to agents and pharmaceutical preparations for combating parasitic and viral diseases such as malaria, hapatitis B infections or systemic opportunistic infections or cancer.

Zur Behandlung von Malaria, an der gegenwärtig jährlich mehr als 100 Millionen Menschen erkranken, wird das in höheren Dosen zu verabreichende Chloroquin, ein Chinolin-Derivat, gegen die Malaria tertiana eingesetzt. Bei resistenter Malaria tropica kommt vor allem eine Kombination von Pyrimethamin und Sulfadoxin zur Anwendung und bei Unwirksamkeit auf das Alkaloid Chinin oder auf Mefloquin ständig neue Substanzen. Die Bekämpfung der Hepatitis-B-Infektion, deren ursächliche Behandlung nicht möglich ist, erfolgt durch die passive Immunisierung. Für Risikogruppen ist eine vorbeugende Impfung mit antigen-(HBsAg-)haltigem Serum möglich. So werden zum Beispiel von führenden Firmen Impfstoffe hergestellt, die entweder attenuierte Viren oder isolierte gentechnisch hergestellte virale Antigene enthalten (Behring-Werke-Mitteilung: Virus Hepatiden, Hepatitis B, Mai 1988; Mitteilung: Röteln, Juli 1988). Im grundegenommen haben sich die Impfstoffe in den letzten 10 bis 15 Jahren nicht viel verändert. Überwiegend werden Lebendimpfstoffe, Totvakzine oder Toxoide verwendet (Roitt, I.M.: Essential Immunology, Blackwall, Oxfort 1980; Schuster, G.: Virus und Viruskrankheiten, Ziemsen Verlag 1988).For the treatment of malaria, currently more than 100 million annually People get sick, the chloroquine to be administered in higher doses becomes a Quinoline derivative, used against malaria tertiana. With resistant malaria tropica a combination of pyrimethamine and sulfadoxine is used and new substances are constantly added if the alkaloid quinine or mefloquine are ineffective. Combating hepatitis B infection, the causal treatment of which is not possible is done by passive immunization. For risk groups, this is preventive Vaccination with serum containing antigen (HBsAg) possible. For example, from Leading companies manufactured vaccines that are either attenuated viruses or isolated contain genetically engineered viral antigens (Behring-Werke communication: Virus Hepatids, Hepatitis B, May 1988; Communication: Rubella, July 1988). Essentially vaccines haven't changed much in the past 10 to 15 years. Live vaccines, dead vaccines or toxoids are predominantly used (Roitt, I.M .: Essential Immunology, Blackwall, Oxfort 1980; Schuster, G .: Virus and viral diseases, Ziemsen Verlag 1988).

Die chemotherapeutische Behandlung von Tumorerkrankungen erfolgt vor allem mit Hilfe zytostatischer Mittel, die zur Hemmung der Entwicklung und Vermehrung von Tumorzellen beitragen sollen. Neuere Ergebnisse mit virusmodifizierten tumorspezifischen Vakzinen bringen neue Hoffnung in die Krebsbekämpfung (Schirmacher, V. : DE-PS 38 06 565 vom 14.09.89). In dieser Patentschrift (PS) wird auf die Wirkung der BCG als Vakzine hingewiesen (Beispiel 3), wenn man sie mit Newcastle- Diseas-Virus inkubierten, autologen und inaktivierten Tumorzellen mischt.The chemotherapeutic treatment of tumor diseases is mainly carried out with Help cytostatic agents that inhibit the development and proliferation of Tumor cells are said to contribute. Recent results with virus modified tumor-specific vaccines bring new hope in the fight against cancer (Schirmacher, V.: DE-PS 38 06 565 from 09/14/89). In this patent specification (PS) is based on the effect of the BCG as a vaccine (Example 3), if you use Newcastle Diseas virus mixes incubated, autologous and inactivated tumor cells.

Unter den Begriff der systemischen opportunistischen Infektionen fallen üblicherweise Infektionen durch die Erreger Mycobacterium tuberculosis (und atypische Mykobakterien), Salmonellen, Toxoplasma gondii, Cryptosporidium, Isospora belli, Strongyloides, Pneumocystis carinii, Candida, Cryptococcus neoformans, Aspergillus fumigatus, Cytomegalie-Virus, Herpex-simplex-Virus, Papova-Virus und Varicella-Zoster-Virus.The term systemic opportunistic infections usually includes Infections caused by Mycobacterium tuberculosis (and atypical mycobacteria), Salmonella, Toxoplasma gondii, Cryptosporidium, Isospora belli, Strongyloides, Pneumocystis carinii, Candida, Cryptococcus neoformans, Aspergillus fumigatus, Cytomegaly virus, Herpex simplex virus, Papova virus and Varicella zoster virus.

Es ist ferner beschrieben worden, daß Präparationen, die aus Moorschlamm oder Torf gewonnen werden, Wirksubstanzen zur Behandlung von parasitären oder viralen Erkrankungen enthalten (WO 94/18957; DE 43 16 347). Darin wird auch die pharma zeutische Anwendbarkeit von Substanzen genannt, die im Torf enthalten sind, z. B. aus der Reihe der Gerbstoffe, etwa Tannine (Hydroxybenzoesäureester enthaltend) oder von Catechinen (3-Hydroxyflavanolen) zur Behandlung von Leberaffektionen (DE-OS 22 06 570) oder zum Schutz der Magenschleimhaut (DE-OS 36 03 576, 36 03 277). Auch die aus Moorextrakt gewonnenen Alkalisalze von Huminsäure sind zur Behandlung von viralen Erkrankungen vorgeschlagen worden, z. B. der durch Herpes-Viren verursachten Bläschenkrankheit (DE-OS 38 30 333).It has also been described that preparations made from mud or Peat can be obtained, active substances for the treatment of parasitic or viral Contain diseases (WO 94/18957; DE 43 16 347). The pharma called the applicability of substances contained in the peat, e.g. B. from the series of tannins, such as tannins (containing hydroxybenzoic acid esters) or of Catechins (3-hydroxyflavanols) for the treatment of liver affections (DE-OS 22 06 570) or to protect the gastric mucosa (DE-OS 36 03 576, 36 03 277). Also the alkaline salts of humic acid obtained from moor extract are used to treat viral diseases have been proposed, e.g. B. caused by herpes viruses Blister disease (DE-OS 38 30 333).

Mit der DE-OS 38 32 799 (vom 29.03.90) schließlich ist eine Schrift bekanntgeworden, die Acetylsalicylsäure und verwandte Verbindungen für die direkte Bekämpfung von Viren und damit verbundenen Erkrankungen, insbesondere zur Behandlung von viralen Infekten der Atemwege (Influenzaviren), zum Inhalt hat.Finally, with DE-OS 38 32 799 (dated March 29, 1990) a publication has become known, acetylsalicylic acid and related compounds for the direct control of viruses and related diseases, especially for the treatment of viral infections of the respiratory tract (influenza viruses).

Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, Wirkstoffe zu finden, die zur Bekämpfung von Malaria, Hepatitis-B-Infektionen, Krebserkrankungen und systemischen opportunistischen Infektionen geeignet sind. Erfindungsgemäß wird die Aufgabe dadurch gelöst, daß Benzoesäuren und ihre Derivate - als chemische Individuen, im Gemisch miteinander oder mit anderen wirksamen Stoffen oder Stoffgemischen - Verwendung finden. Es hat sich überraschenderweise herausgestellt, daß die aus den erfindungsgemäßen Mitteln hergestellten pharmazeutischen Zubereitungen ausgezeichnete pharmakologische Eigenschaften, insbesondere antiparasitäre und antivirale, aufweisen.The invention has for its object to find active ingredients for combating Malaria, hepatitis B infections, cancers and systemic opportunistic Infections are suitable. According to the invention the object is achieved in that Benzoic acids and their derivatives - as chemical individuals, in a mixture with each other or with other effective substances or mixtures of substances. It has surprisingly, it turned out that from the agents according to the invention manufactured pharmaceutical preparations excellent pharmacological Properties, in particular antiparasitic and antiviral, have.

Unter Benzoesäuren werden neben der Stammverbindung vor allem die Hydroxy benzoesäuren verstanden, einschließlich der Gallensäuren, die Acylverbindungen, z. B. Acetylsalicylsäure; unter Derivaten der Benzoesäuren vor allem die Ester (Benzoate), insbesondere die Alkyl- (C1 bis C7), vor allem Methyl-, Ethyl-, Propyl-, Butyl- und die Benzylester, die Aminosalicylsäuren und ihre Derivate, die Alkoxybenzoate, wie ihre Alkylyl- und Benzamidoalkoxybenzoate sowie die physiologisch verträglichen Salze dieser Benzoesäuren und ihrer Derivate. In addition to the parent compound, benzoic acids are primarily hydroxyl understood benzoic acids, including the bile acids, the acyl compounds, e.g. B. Acetylsalicylic acid; among derivatives of benzoic acids, especially the esters (benzoates), especially the alkyl (C1 to C7), especially methyl, ethyl, propyl, butyl and the Benzyl esters, the aminosalicylic acids and their derivatives, the alkoxybenzoates such as theirs Alkylyl- and Benzamidoalkoxybenzoate as well as the physiologically compatible salts of these benzoic acids and their derivatives.

Unter "andere wirksame Stoffe" fallen bekannte Pharmaka, deren Wirksamkeit durch eine gemeinsame Verwendung mit den erfindungsgemäß bereitgestellten Stoffen verstärkt wird sowie Torfprodukte gemäß WO 94/18957.Well-known pharmaceuticals fall under "other active substances", their effectiveness a common use with the substances provided according to the invention is reinforced as well as peat products according to WO 94/18957.

Ein bevorzugtes erfindungsgemäßes Stoffgemisch ist dadurch gekennzeichnet, daß es durch Wasserdampfdestillation von Moortorf erhalten wird, wenn der Destillierrückstand mit Natronlauge aufgeschlossen, die Suspension zentrifugiert, der Überstand neutralisiert und das Präzipitat - gewonnen durch erneute Zentrifugation, genannt AAR - mit Benzoesäuren (BS) und ihren Derivaten (BS-D) versetzt wird.A preferred mixture of substances according to the invention is characterized in that it obtained by steam distillation of peat when the distillation residue digested with sodium hydroxide solution, the suspension centrifuged, the supernatant neutralized and the precipitate - obtained by centrifugation again, called AAR - with Benzoic acids (BS) and their derivatives (BS-D) is added.

Ein bevorzugtes Stoffgemisch - AAR/PHB - besteht aus dem Torfprodukt, das mit p- Hydroxybenzoesäure (PHB) versetzt wird - es besteht ausschließlich aus in der Natur vorkommenden Stoffen.A preferred mixture of substances - AAR / PHB - consists of the peat product, which with p- Hydroxybenzoic acid (PHB) is added - it consists exclusively of in nature occurring substances.

Die erfindungsgemäßen Mittel und pharmazeutischen Zubereitungen weisen ausgezeichnete Eigenschaften auf. Sie eignen sich als antiparasitäre, antivirale tumorhemmende und systemische opportunistische Infektionen beeinflussende Arzneimittel. Sie finden als chemische Individuen, im Gemisch miteinander oder mit anderen wirksamen Stoffen oder Stoffgemischen Anwendung.The agents and pharmaceutical preparations according to the invention have excellent properties. They are suitable as anti-parasitic, antiviral tumor inhibiting and systemic opportunistic infections influencing Drug. You find them as chemical individuals, in a mixture with each other or with other effective substances or mixtures of applications.

Die Erfindung soll nachfolgend näher erläutert werden, ohne auf die - wegen der Vielzahl möglicher Kombinationen - in den Ausführungsbeispielen genannten Verbindungen und Stoffgemischen beschränkt zu sein.The invention will be explained in more detail below, without - because of the large number possible combinations - connections mentioned in the exemplary embodiments and Mixtures to be limited.

Embodiments Example 1: AAR

Moortorf wird einer Wasserdampfdestillation unterworfen und der Rückstand mit Natronlauge aufgeschlossen (gem. WO 94/18957, Beispiel 1 mit 10-25 Gew.-% NaOH bezogen auf den Rückstand und 5 bis 100 minütigem Erhitzen bis zum Sieden). Nach der Zentrifugation wird der Überstand neutralisiert (mit HCl) und das Präzipitat mit destilliertem Wasser gewaschen und das als AAR bezeichnete Produkt getrocknet. Peat is subjected to steam distillation and the residue with Sodium hydroxide solution (according to WO 94/18957, Example 1 with 10-25% by weight NaOH based on the residue and 5 to 100 minutes of heating to boiling). After Centrifugation neutralizes the supernatant (with HCl) and the precipitate with distilled water and dried the product called AAR.

Example 2 Antiparasitic effect

Das Produkt AAR aus Beispiel 1 wird in einer 1 bis 10%igen, vorzugsweise einer 5%igen p-Hydroxybenzoesäure(PHB)-Lösung gelöst (AAR/PHB-Lösung) und diese Lösung in vitro an erythrozytären Zellkulturen, die mit Plasmidium falciparum infiziert waren überprüft. AAR/PHB übt eine Hemmung auf die intraerytrozytäre Entwicklung der Malariaparasiten aus. Der Hemmeffekt ist mikroskopisch in allen drei Entwicklungsstadien der Plasmodien nachweisbar. Nach 3 Tagen sind - im Gegensatz zum Kontrollversuch ohne AAR/PHB - keine reifen Parasitenformen mehr zu finden.The product AAR from Example 1 is in a 1 to 10%, preferably a 5% p-Hydroxybenzoic acid (PHB) solution dissolved (AAR / PHB solution) and this solution in in vitro on erythrocytic cell cultures that were infected with Plasmidium falciparum checked. AAR / PHB inhibits intraerytrocytic development of the Malaria parasites. The inhibitory effect is microscopic in all three stages of development of the plasmodia detectable. After 3 days are - in contrast to the control attempt without AAR / PHB - no more mature parasite forms to be found.

Die Kulturen wurden über 8 Tage im Abstand von 24 Stunden analysiert. Alle drei Tage wurde ein Medienwechsel vorgenommen. Das nach den ersten drei Tagen neu hinzugesetzte Medium enthielt keine Wirksubstanz mehr.Cultures were analyzed at 8 hour intervals over 8 days. Every three days a change of media was made. That new after the first three days added medium no longer contained any active substance.

Ergebnis: Das Produkt AAR/PHB übt eine starke antiparasitäre Wirkung aus.Result: The product AAR / PHB has a strong anti-parasitic effect.

Example 2a

Wie Beispiel 2, jedoch unter alleiniger Verwendung von PHB.As example 2, but using only PHB.

Ergebnis: PHB übt eine deutlich antiparasitäre Wirkung aus.Result: PHB has a clearly anti-parasitic effect.

Example 2b

Wie Beispiel 2, jedoch unter Verwendung von AAR/PHB-ethylester.As example 2, but using AAR / PHB ethyl ester.

Ergebnis: AAR/PHB-ethylester übt eine deutlich antiparasitäre Wirkung aus.Result: AAR / PHB ethyl ester has a clearly antiparasitic effect.

Example 3 Inhibition of hepatis B virus (HBV) replication in vitro

Die Untersuchung der antiviralen Wirksamkeit der AAR/PHB-Lösung (gem. Beispiel 2) gegen HBV erfolgte an der humanen mit dem HBV-Genom transfizierten Hepatomazellinie Hep G 2.2.15, in welcher das HBV-Genom stabil integriert ist. Die Zellinie produziert komplette HBV-Partikel und die Hepatitis-B-Antigene HBsAg und HBeAg (Sells et al., PMAS 1987, 84: 1005-1009; J. Virol. 1988, 62, 2836-2844).The investigation of the antiviral activity of the AAR / PHB solution (according to Example 2) HBV was carried out on the human hepatoma cell line transfected with the HBV genome Hep G 2.2.15, in which the HBV genome is stably integrated. The cell line produces complete HBV particles and the hepatitis B antigens HBsAg and HBeAg (Sells et al., PMAS 1987, 84: 1005-1009; J. Virol. 1988, 62, 2836-2844).

material and methods

Die Hep G 2.2.15 Zellinie wurde in Mix-Medium unter Zusatz von 300 mg/l Glutamin, 200 IE/ml Penicillin, 125 µg/ml Streptomycin, 200 µg/ml G 418 und 10% fötales Kälberserum (FKS) gezogen. Für die Hemmstofftestung wurden 24 Lochplatten (Firma Greiner) mit 3 × 10⁵ Zellen in 1 ml/Loch angelegt. Ca. 24 Stunden nach Einsaat (der Zellrasen war zu 90% bewachsen) wurde die zu untersuchende Lösung (jeweils 2 ml) in den Verdünnungen 1 : 1000 und 1 : 10000 im oben aufgeführten Medium zugegeben. Pro Verdünnungsstufe und Kontrolle wurden Vierfachansätze durchgeführt. Die Extrakte wurden im Mixmedium (ohne FKS) verdünnt. Die Lösungen wurden steril filtriert.The Hep G 2.2.15 cell line was in mixed medium with the addition of 300 mg / l glutamine, 200 IU / ml penicillin, 125 µg / ml streptomycin, 200 µg / ml G 418 and 10% fetal calf serum (FKS) pulled. For the inhibitor test, 24 perforated plates (Greiner) with 3 × 10⁵ Cells placed in 1 ml / well. Approx. 24 hours after sowing (the cell lawn was 90% overgrown) was the solution to be examined (2 ml each) in the dilutions 1: 1000 and 1: 10000 added in the medium listed above. Per dilution level and control, four-fold approaches were carried out. The extracts were in the mixed medium (without FCS) diluted. The solutions were filtered sterile.

Die Inkubation mit den Lösungen erfolgte insgesamt über 10 Tage, wobei am 4. Tag das Medium unter erneuter Zugabe der entsprechend verdünnten Lösungen gewechselt wurde. Die Zellen wurden am 10. Tag abtrypisiert, mit PBS gewaschen und bis zur DNA- Isolierung bei -20°C aufbewahrt.The incubation with the solutions was carried out for a total of 10 days, with the Medium changed with the addition of the correspondingly diluted solutions has been. The cells were trypyped on the 10th day, washed with PBS and up to DNA Insulation stored at -20 ° C.

Die antivirale Wirksamkeit der Lösungen auf die HBV-Replikation wurde durch Bestimmung der Virusantigene HBsAg und HBeAg mittels ELISA und der extrazellulären HBV-DNA in den Zellkulturüberständen sowie durch die Bestimmung der intrazellulären HBV-DNA in behandelten und unbehandelten Hep G 2.2.15-Zellen untersucht.The antiviral effectiveness of the solutions on HBV replication has been demonstrated Determination of the HBsAg and HBeAg virus antigens by means of ELISA and the extracellular HBV DNA in the cell culture supernatants and by determining the intracellular HBV-DNA examined in treated and untreated Hep G 2.2.15 cells.

Detection of HBV DNA in the cell culture supernatant

Der Nachweis der HBV-DNA erfolgte durch Slot-Blot-Hybridisierung mit gentechnisch hergestellter HBV-DNA, radioaktiv markiert mit alpha-^32p dATP durch random priming (Eur. J. Clin. Microbiol. 5, 330, 1986). 25 µl des Zellkulturbestandes wurde mit NaOH/NaCl versetzt und in Doppelbestimmung auf Membranfilter aufgetragen und hybridisiert. Bei jeder Hybridisierung wurden Standardproben von 0,1, 0,3, 1,0, 3,0, 10, 30, 100 und 300 pg/ml HBV-DNA mitgeführt. Zur Autoradiographie (ca. 8 h) wurde der Röntgenfilm HS 11 und Verstärkerfolie (extrarapid) benutzt.The HBV-DNA was ^detected by slot blot hybridization with genetically engineered HBV-DNA, radioactively labeled with alpha- ^32p dATP by random priming (Eur. J. Clin. Microbiol. 5, 330, 1986). 25 µl of the cell culture stock was mixed with NaOH / NaCl and applied in duplicate to membrane filters and hybridized. Standard samples of 0.1, 0.3, 1.0, 3.0, 10, 30, 100 and 300 pg / ml HBV-DNA were carried with each hybridization. The X-ray film HS 11 and intensifying screen (extra rapid) were used for autoradiography (approx. 8 h).

Die Nachweisgrenze liegt bei Einsatz einer ^32p-markierten HBV-DNA mit einer spezifischen Aktivität von ca. 1 × 10⁹ dpm/µg DNA um 3 × 10⁵ HBV-Genome/ml (das entspricht ca. 1 pg HBV-DNA).The detection limit is when using a ^32p- labeled HBV-DNA with a specific activity of approx. 1 × 10⁹ dpm / µg DNA by 3 × 10⁵ HBV genomes / ml (this corresponds to approx. 1 pg HBV-DNA).

Detection of the extrachromosomal HBV DNA

Zur Isolierung und Analyse der extrachromosomalen HBV-DNA wurde die bei -20°C aufbewahrte Zellsuspension zentrifugiert. Das Sediment wurde anschließend in Proteinase-K-Lösung (20 mM Tris-DCl, pH 8,0, 20 mM EDTA, 1% 5 DS und 1 mg/ml Proteinase K) suspendiert. Nach Inkubation (3 h/37°C) wurde die DNA durch Behandlung mit Phenol/CHCl₃ und CHCl₃/Ethanol isoliert. Nach Agarosegelelektrophorese (1%iges Gel, 1,5 h/60 V) erfolgte der Southern-Blot (Nylonfilter, PallBiodyne) und anschließend die Slot-Blot-Hybridisierung - wie zuvor beschrieben. For the isolation and analysis of the extrachromosomal HBV-DNA the at -20 ° C stored cell suspension centrifuged. The sediment was then in Proteinase K solution (20 mM Tris-DCl, pH 8.0, 20 mM EDTA, 1% 5 DS and 1 mg / ml Proteinase K) suspended. After incubation (3 h / 37 ° C) the DNA was treated isolated with phenol / CHCl₃ and CHCl₃ / ethanol. After agarose gel electrophoresis (1% Gel, 1.5 h / 60 V), the Southern blot (nylon filter, PallBiodyne) and then the Slot blot hybridization - as previously described.

HBsAG and HBeAg expression

Die Zellkulturüberstände wurden in den Verdünnungen 1 : 50 in den ELISA-Kits der Firma Sorin Biomedika auf HBsAg und HBeAg untersucht.Cell culture supernatants were diluted 1:50 in the company's ELISA kits Sorin Biomedika examined for HBsAg and HBeAg.

In drei parallel verlaufenden Versuchen wurde bei keiner der eingesetzten Verdünnungen von Extrakt-AAR/PHB ein signifikanter Einfluß auf die HBsAg-Expression beobachtet. Im Gegensatz dazu führten die Verdünnungen 1 : 100 und 1 : 1000 zu einer deutlich verminderten HBsAg-Expression. Der schwache Effekt vom Extrakt-AAR/PHB auf die freie virale DNA und der deutliche Effekt auf die HBeAg-Expression deutet darauf hin, daß AAR/PHB die Transkription bzw. Translation des HBV-Prägenoms hemmt. Die Lösung führt nur in der Verdünnung 1 : 100 zu einer verminderten HBsAg-Expression. Bei dieser Verdünnung wurde auch ein Einfluß auf die HBsAg-Expression beobachtet.In three parallel runs, none of the dilutions used of extract AAR / PHB a significant influence on HBsAg expression was observed. in the In contrast, the 1: 100 and 1: 1000 dilutions clearly resulted in one decreased HBsAg expression. The weak effect of the extract AAR / PHB on the free viral DNA and the clear effect on HBeAg expression suggests that AAR / PHB inhibits the transcription or translation of the HBV pregenome. The solution leads to a reduced HBsAg expression only in the dilution 1: 100. At this Dilution was also observed to influence HBsAg expression.

Determination of the cytotoxic properties of the solution AAR / PHB and 20 on the Hep. G 2.2.15 cells

Zur Beurteilung der Zytotoxität wurde die mikroskopische Betrachtung der Zellmorphologie und die Zählung der lebenden Zell in behandelten und unbehandelten Hep G 2.2.15-Zellen mit der Trypanaufschlußmethode herangezogen. In den eingesetzten Verdünnungen zeigten die beiden Extrakte keine toxische Wirkung auf die Hep G 2.2.15-Zelle.To assess the cytotoxicity, microscopic examination of the Cell morphology and the counting of living cells in treated and untreated Hep G 2.2.15 cells used with the trypan disruption method. In the dilutions used, the two extracts showed no toxic effect on the Hep G 2.2.15 cell.

Example 3a

Wie Beispiel 3, nur unter alleiniger Verwendung von PHB.As example 3, but only using PHB.

Ergebnis: Es wurden ähnliche Resultate wie im Beispiel 3 festgestellt.Result: Results similar to those in Example 3 were found.

Example 4: Cancer efficacy test 4a: AAR / PHB 4b: PHB 4c: benzyl benzoate

Die Stoffgemische/Substanzen 4a, 4b und 4c wurden hinsichtlich ihrer zytotoxischen Wirkung auf zwei permanente Zellinien untersucht. Sie zeigten eine - in der angegebenen Reihenfolge - deutliche inhibierende Wirkung in den Testsystemen.The substance mixtures / substances 4a, 4b and 4c were cytotoxic Effect on two permanent cell lines examined. They showed one - in the specified Sequence - significant inhibitory effect in the test systems.

Claims

1. Agent for the treatment of malaria, hepatitis B infections, cancer and systemic opportunistic infections containing benzoic acids and their derivatives.

2. Composition according to claim 1, characterized in that hydroxybenzoic acids - in particular p-hydroxybenzoic acid (PHB) - and their derivatives are used.

3. Composition according to claim 1 and 2, characterized in that benzoic acids and their Derivatives as chemical individuals, in a mixture with each other and / or with others effective substances or mixtures of substances can be used.

4. Composition according to claim 1 to 3, characterized in that as other active substances well-known pharmaceuticals and as mixtures of peat materials.

5. peat product according to claim 4, characterized in that it is caused by water vapor Distillation of peat is obtained when the distillation residue with sodium hydroxide solution disrupted, centrifuged the suspension, neutralized the supernatant and that as AAR designated sediment is obtained after renewed centrifugation.

6. peat product according to claim 5, characterized in that the AAR additionally Contains benzoic acids (BS) and their derivatives (BS-D) and mixtures of substances AAR / BS / BS-D available.

7. Mixtures of substances according to claim 6, characterized in that AAR additionally p- Contains hydroxybenzoic acid (PHB) and the mixture of substances AAR / PHB is present.

8. Composition according to claim 1 to 3, characterized in that there are mixtures of substances Claim 6 and 7 contains.

9. Pharmaceutical preparation for the treatment of malaria, hepatitis B infections, Cancers and systemic opportunistic infections containing agents according to claims 1 to 4 and 6 to 7.