DE1944493C

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Publication number: DE1944493C
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Unter den Pentiten hat man den Xylit bezüglich seiner physiologischen Wirkungen und seiner Verwendung in beträchtlichem Ausmaß untersucht. Xylit ist bekanntlich ein normales Stoffwechselzwischenprodukt im Uronsäurezyklus, der einer der Stoff- wechselwege zu im lebenden Körper gebildeten Zucker darstellt. Somit besitzt Xylit eine wichtige Funktion im Zuckerstoffwechsel und hat sehr wichtige physiologische Bedeutung. So ist es z. B. bekannt, daß Xylit in den Zellen auch ohne Insulin absorbiert wird und daß er, so wie er ist, im Gewebe des lebenden Körpers assimiliert wird, ohne daß eine Phosphorylierung notwendig ist. Aus diesen Gründen kann er mit hoher Wirksamkeit verwendet werden. Es konnte ferner bewiesen werden, daß Xylit verwendet werden kann, ohne daß der Blutzuckerwert erhöht wird und daß er starke Einflüsse gegen die Wirkung von Ketonen zeigt. Auf Grund dieser Eigenschaften des Xylits wird er für die medikamentöse Behandlung von Diabetes-Patienten verwendet. Er findet ferner eine weite Verwendung als Zuckertransfusionsflüssigkeit, wenn eine chirurgische Operation vorgenommen wird. Es hat sich auch erwiesen, daß Xylit zur Behandlung der Gelbsucht günstig beiträgt. Schließlich kann man den Xylit noch als Süßstoff' für Diabetes-Patienten einsetzen. Aus den angeführten Gründen wird wahrscheinlich der Xylit in Zukunft weite Verbreitung finden.Among the pentites, xylitol has been extensively studied for its physiological effects and uses. Xylitol is known to be a normal metabolic intermediate in the uronic acid cycle, which is one of the pathways to sugar formed in the living body represents. Thus, xylitol has an important function in the sugar metabolism and is of very important physiological importance. So it is B. known that xylitol in is absorbed by cells even without insulin and that it is absorbed as it is in the tissues of the living body is assimilated without the need for phosphorylation. For these reasons, he may be high Effectiveness can be used. It has also been shown that xylitol can be used without that the blood sugar level is increased and that it shows strong influences against the action of ketones. on Because of these properties of xylitol, it is used in the drug treatment of diabetes patients used. It also finds wide use as a sugar transfusion fluid when surgical Operation is performed. It has also been shown that xylitol can be used to treat jaundice contributes favorably. Finally, you can use the xylitol as a sweetener for diabetes patients. From the For the reasons given, xylitol is likely to find widespread use in the future.

Bezüglich der Eignung von Ribit und Arabit liegen nicht so viel Arbeiten vor, doc.i kann man annehmen, daß auch hier eine ähnlicVie Weiterentwicklung wie bei Xylit stattfindet.There is not so much work on the suitability of Ribit and Arabit, doc.i can be assumed, that here, too, a similar development as with Xylitol takes place.

Bis jetzt stellt man den Xylit aus D-Xylose als Ausgangsstoff dar, indem man diese mit Wasserstoff in Gegenwart eines Reduktionskatalysators unter erhöhtem Druck hydriert. Neben den chemischen Synthesen für Xylit wurde von Onishi und Suzuki in Agr. Biol. Chem., Vol. 30, S. 1139 (1966), berichtet, daß die Pentite auch mikrobiologisch hergestellt werden können. Hierzu sind z. B. Hefen, wie Candida, Pichia, Hansenula, Torulopsis oder Monilia, geeignet. Weitere Arbeiten über die Herstellung und den Stoffwechsel von Pentiten richteten sich auf den Einsatz von Hefen, Schimmelpilzen und Fungi imperfecti. Dagegen bezieht sich die vorliegende Erfindung auf ein Verfahren zur Herstellung von Pentiten aus Pentose, das Mikroorgiinismen der Art Corynebacterium, die bakteriologisch von den Hefen, Schimmelpilzen und Fungi imperfecti verschieden ist, verwendet.Until now, the xylitol from D-xylose has been represented as a starting material by mixing it with hydrogen Hydrogenated in the presence of a reducing catalyst under elevated pressure. Besides the chemical syntheses for xylitol was by Onishi and Suzuki in Agr. Biol. Chem., Vol. 30, p. 1139 (1966), reports, that the pentite can also be produced microbiologically. For this purpose are z. B. yeasts such as Candida, Pichia, Hansenula, Torulopsis or Monilia, are suitable. Further Work on the production and metabolism of pentiten focused on the use of yeast, Molds and Fungi imperfecti. In contrast, the present invention relates to a method for the production of pentites from pentose, the microorganisms of the species Corynebacterium, which is bacteriologically different from yeasts, molds and Fungi imperfecti.

Gegenstand der Erfindung ist daher ein Verfahren zur Herstellung von Pentiten durch mikrobiologische Umwandlung von Pentosen, das dadurch gekennzeichnet ist., daß man für die Umwandlung Stämme von Corynebacterium Nr. 208 oder Abarten dieser Stämme, die zu derselben Gattung gehören und welche die charakteristischen Eigenschaften haben, daß sie zum Wachstum Thiamin benötigen und Glukonsäure assimilieren, verwendet.The invention therefore relates to a process for the production of pentiten by microbiological Conversion of pentoses, which is characterized in that, for the conversion, strains of Corynebacterium No. 208 or varieties of these strains belonging to the same genus and which the have characteristic properties that they require thiamine for growth and assimilate gluconic acid.

Das Verfahren der Erfindung ist mit einem beachtlichen technischen Fortschritt gegenüber den chemischen Verfahren zur Herstellung von Xylit verbunden, da bei dem Verfahren der Erfindung kein Hydrierung*- katalysator und kein überdruck notwendig ist. Viel· mehr kann dieses in einer einfachen Vorrichtung bei milden Reaktionsbedingungen durchgeführt werden.The process of the invention is associated with a considerable technical advance over the chemical processes for the production of xylitol, since in the process of the invention no hydrogenation * catalyst and no excess pressure is necessary. A lot· moreover, this can be carried out in a simple device under mild reaction conditions.

Der Stamm Corynebacterium Nr. 208 wurde aus Erde isoliert. Die bakteriologischen Eigenschaften sind mi den bekannlgemachten Unterlagen der japanischen Patentanmeldung 24 468 beschrieben. Der verwendete Stamm Corynebacterium Nr, 208 wurde unter der Hinterlegungsnummer FERM-P Nr, 128 bej dem »Fermentation Research Institute, Agency of Industrial Science & Technology« hinterlegt. Die zu der Art Corynebacterium gehörenden Mikroorganismen sind dadurch charakterisiert, daß sie zu ihre τι Wachstum Thiamin benötigen und Glukonsäure assimilieren. Corynebacterium No. 208 strain was isolated from soil. The bacteriological properties are described in the known documents of Japanese patent application 24,468. The strain used, Corynebacterium No. 208, has been deposited with the Fermentation Research Institute, Agency of Industrial Science & Technology under the depository number FERM-P No. 128. The microorganisms belonging to the species Corynebacterium are characterized in that they require thiamine for their growth and assimilate gluconic acid.

Ein zur Züchtung geeigneter Nährboden enthält Salze der Glukonsäure, wie die Kalium-, Natrium- und Calciumsalze als Kohlenstoffquelle, Pentose, Ammoniumsalze, wie Ammoniumsulfat, Ammoniumchlorid, Ammoniumnitrat, und Ammoniumlactat als Stickstoffquelle, sowie anorganische Salze, wie Kaliumdihydrogenphosphat und Magnesiumsulfat, Der Nährboden wird mit Thiamin oder einer Thiamin enthaltenden Quelle, wie Maisquellflüssigkeit, Fleisch- oder Hefeextrakt, vermischt. Das Thiamin oder die Thiamin enthaltende Quelle muß dem Nährboden in einer solchen Menge zugesetzt werden, wie sie für ein maximales Wachstum des Stamms von Corynebacterium notwendig ist, um das Pentit anzusammeln. Es ist auch möglich, das Pentit in dem Nährboden mit hoher Leistung anzusammeln, indem man die Menge der Glukonsäure und der Pentose, wie D-Xylose, D-Ribose oder L-Arabinose, die dem Nährboden zugesetzt werden, kontrolliert und auch dadurch, daß man die Mengen der Zusatzstoffe, die Züchtungsbedingungen und die Zeitwahl der Zugabe der Hilfsstoffe entsprechend einstellt.A culture medium suitable for cultivation contains salts of gluconic acid, such as potassium, sodium and Calcium salts as a carbon source, pentose, ammonium salts such as ammonium sulfate, ammonium chloride, Ammonium nitrate and ammonium lactate as a nitrogen source, as well as inorganic salts such as potassium dihydrogen phosphate and magnesium sulfate, the nutrient medium is mixed with thiamine or a source containing thiamine such as corn steep liquor, meat or yeast extract. The thiamine or thiamine-containing source must be the nutrient medium in such Amount to be added as it is necessary for maximum growth of the strain of Corynebacterium in order to accumulate the pentitol. It is also possible to accumulate the pentitol in the medium with high efficiency by increasing the amount of Gluconic acid and pentose, such as D-xylose, D-ribose or L-arabinose, which are added to the nutrient medium, controlled and also by the fact that the amounts of additives, the cultivation conditions and the choice of time for the addition of the auxiliaries accordingly adjusts.

Für die Zugabe der Pentose zu dem Nährboden kann man bei dem Verfahren der Erfindung die nachstehenden Methoden anwenden:The following methods can be used to add the pentose to the culture medium in the process of the invention:

1. Die Glukonsäure und die Pentose werden dem Nährboden zu der Zeit zugesetzt, wenn die Züchtung begonnen wird, worauf die Kultivierung durchgeführt wird.1. Gluconic acid and pentose are added to the medium at the time when cultivation is started, followed by cultivation is carried out.

2. Ein Glukonsäure als Kohlenstoffquelle enthaltender Nährboden wird mit dem Bakterienstamm beimpft, worauf nach der Vermehrung der Bakterien die Pentose entweder auf einmal oder schrittweise dem Kulturmedium zugesetzt wird und die Kultivierung fortgeführt wird.2. A nutrient medium containing gluconic acid as a carbon source is inoculated with the bacterial strain, which is followed by the proliferation of the bacteria the pentose is added to the culture medium either all at once or gradually and the cultivation is continued.

Nach Vervollständigung der Kultivierung wird die erhaltene Kulturbrühe zur Abtrennung der Bakterien zentrifugiert oder filtriert. Das Filtrat wird zur Behandlung von proteinartigen Substanzen behandelt und unter Unterdruck zu einem Konzentrat eingedampft. Das Konzentrat wird mit heißem Äthanol konzentriert. Der erhaltene Extrakt wird mit einem stark basischen Anionenaustauscherharz (einem Styrol-Divinylbenzol-Copolymeren, von Röhm & Haas Co. unter dem Warenzeichen AMBERLlTE IRA-401 oder lRA-400 — eine Hydroxylart — erhältlich) behandelt, um die restliche Pentosc von dem Pentitprodukt abzutrennen. Der rohe Pentit wird durch Umkristallisieren in Äthanol gereinigt. Der Pentit wird analysiert; der Schmelzpunkt und die spezifische Drehung werden bestimmt. Die erhaltenen Ergebnisse sind in der Tabelle zusammengestellt.After the completion of the cultivation, the obtained culture broth is used to separate the bacteria centrifuged or filtered. The filtrate is treated for the treatment of proteinaceous substances and evaporated under vacuum to a concentrate. The concentrate is concentrated with hot ethanol. The extract obtained is treated with a strongly basic anion exchange resin (a styrene-divinylbenzene copolymer, from Röhm & Haas Co. under the Trademarks AMBERLlTE IRA-401 or IRA-400 - a type of hydroxyl - available) treated to separate the remaining pentosc from the pentitol product. The crude pentitol is purified by recrystallization from ethanol. The pentit is analyzed; the melting point and the specific rotation are determined. The results obtained are shown in the table.

Ferner wurden die IR-Spektren des Pentitprodukts, welches durch Verwendung von Corynebacterium Nr. 208 erhalten worden war, und von Xylose, Ribosc und L'Arabinose aufgenommen.Furthermore, the IR spectra of the pentitol product, which was obtained by using Corynebacterium No. 208 and from Xylose, Ribosc and L'Arabinose added.

F i g. 1 zeigt das IR-Spektrum von Xylit, der nach dem Verfahren der Erfindung erhallen wurde;F i g. 1 shows the IR spectrum of xylitol after obtained the method of the invention;

F i g. 2 zeigt das IR-Spektrum von Ribit, der nach dem Verfahren der Erfindung erhalten worden war;F i g. 2 shows the IR spectrum of Ribit, which after obtained by the method of the invention;

Fig. 3 zeigt das IR-Spektrum von L-Arabit, der nach dem Verfahren der Erfindung erhalten worden war.Fig. 3 shows the IR spectrum of L-arabitol, the obtained by the method of the invention.

In jedem Diagramm stellt die Kurve I das Infrarotspektrum der Testprobe, die nach dem Verfahren der Erfindung erhalten wurde, und die Kurve II das Infrarotsprektrum einer im Handel erhältlichen Standardprobe dar.In each diagram, curve I represents the infrared spectrum of the test sample obtained by the method of the invention, and curve II the infrared spectrum a commercially available standard sample.

Die Werte in Tabelle I und die in den F i g. 1 bis 3The values in Table I and those in FIGS. 1 to 3

angegebenen Spektren zeigen, daß der durch Verwendung von Corynebacterium Nr. 208 und von Xylose, Ribose oder L-Arabinose erhaltene Pentit ein echter Xylit, Ribit bzw. L-Arabit ist.indicated spectra show that by using Corynebacterium No. 208 and xylose, Ribose or L-arabinose pentitol obtained is a real xylitol, ribitol or L-arabitol.

Eigenschaften der PentiteProperties of the Pentite Elementar-
analysc -)Elementary-
analysc -) NS. ^a>NS. ^a > PemitPemit Schmelzpunkt C C)
bestimmt ] berichtete Werte')Melting point CC)
determined] reported values') C = 39,62
H - 7,88
C 39,52
H 8,08
Γ 39,52
H 7,73C = 39.62
H - 7.88
C 39.52
H 8.08
Γ 39.52
H 7.73 Xylit Xylitol 92,5 bis 93 92,5 bis 93,5
101 bis 102 \ 101 bis 102
101 bis 102 \ 101 bis 102
I92.5 to 93 92.5 to 93.5
101 to 102 \ 101 to 102
101 to 102 \ 101 to 102
I. Ribit Ribit —761-761 L-Arabit L-arabitol

') Schmelzpunkte nach Onishi und Suzuki (1966) in Agr. Biol. Chem. Vol. 30. S. 11.W.') Melting points according to Onishi and Suzuki (1966) in Agr. Biol. Chem. Vol. 30. S. 11.W.

^!) Die angegebenen Werte wurden mit den theoretischen Werten von CaHi-O-, verglichen, wobei hervorging, dall C = Vj.41 " « und H = 7,89·/». ^! ) The stated values were compared with the theoretical values of CaHi-O-, whereby it emerged that C = Vj.41 "" and H = 7.89 · / ».

^:l) In dieser Spalte sind die Werte angegeben, die bei einer 7,lprozentigen Konzentralion der Testproben, aufgelöst in einer gesättigten Boraxlösung, bestimmt wurden. ^{: l} ) This column shows the values which were determined with a 7.1 percent concentration of the test samples dissolved in a saturated borax solution.

Die Erfindung wird in den Beispielen erläutert. Es wird ersichtlich, daß, obgleich die Beispiele unter Verwendung von Corynebacterium Nr. 208 durchgeführt wurden, das Verfahren der Erfindung durch Verwendung der morphologischen und physiologischen Abarten von Corynebacterium Nr. 208 modifiziert werden kann. Das gleiche gilt für die Stämme von Corynehacterium-Arten, die dadurch charakterisiert sind, daß sie zu ihrem Wachstum Thiamin benötigen und GKikonsäure assimilieren. Die Erfindung schließt somit derartige Modifizierungen insoweit mit ein, als sich die Erfindung auf die Verwendung von Bakterien zur Herstellung und Ansammlung von Pentiten in einem Kulturmedium, welches Thiamin und Glukonsäure enthält, bezieht. Es wird ferner ersichtlich, daß Corynebacterium Nr. 208 die Fähigkeit besitzt. Pentosen in Pentite umzuwandeln, da die Beispiele zeigen, daß drei Pentosen in die entsprechenden Pentite umgewandelt werden, ohne daß eine Veränderung der in dem Nährboden enthaltenen Komponenten und auch der Kultivierungsbedingungen erfolgt.The invention is illustrated in the examples. It will be seen that, although using the examples of Corynebacterium No. 208 by using the method of the invention the morphological and physiological varieties of Corynebacterium No. 208 can be modified can. The same applies to the strains of Corynehacterium species which are characterized in that they need thiamine for their growth and assimilate GKikonic acid. The invention thus concludes such modifications insofar as the invention relates to the use of bacteria for production and accumulation of pentites in a culture medium containing thiamine and gluconic acid, relates. It is also seen that Corynebacterium No. 208 has the ability. Pentoses in pentite to convert, since the examples show that three pentoses are converted into the corresponding pentites, without a change in the components contained in the nutrient medium and also in the cultivation conditions he follows.

example 1

In 500-ml-Erlenmeyer-Kolben wurden jeweils 100ml Nährboden gebracht. Der Nährboden enthielt 4,8% Kaliumglukonat, 4% L-Arabinosc, O,6°/o Ammoniumsulfat, 0,1 ⁿ/n Kaliumdiliydrogenphosphat, 0.05°/₉ Magnesiumsulfat und 0,3ⁿ/₀ Maisquellwasscr. Der Nährboden wurde auf einen pH-Wert um 6,5 bis 7,0 eingestellt. Die eingestellten Nährböden wurden sterilisiert und mit einer bestimmten Menge einer Bakterien enthaltenden Suspension inkubiert. Die Bakterien wurden durch 48s(ündige Kultivierung des Stammes Corynebaclerium Nr. 208 auf einem Bouillon-Agar-Schrägmedit.m gezüchtet. Die Bakterien wurden 12Tage bei 30"C kultiviert, wobei der sterilisierte Nährboden geschüttelt wurde. Hierauf wurde der in dem Nährboden enthalten L-Arabit papierchromatographisch nach dem Verfahren von West und R a ρ ο ρ ο r t bestimmt. Dabei wurde festgestellt, daß der Nährboden 10,0 mg L-Arabit pro ml Nährboden enthielt. Hierauf wurde die Kulturbrühe, die in sämtlichen Kolben ent halten war, gesammelt, wodurch 1OfH.) ml Kulturbrühe erhalten wurden. Diese wurde zur Abtrennung der Bakterien von der überstehenden Lösung zentrifugiert.100 ml of nutrient medium were placed in each of 500 ml Erlenmeyer flasks. The culture medium contained 4.8% potassium gluconate, 4% L-Arabinosc, O, 6 ° / o of ammonium sulfate, 0.1 ⁿ / n Kaliumdiliydrogenphosphat, 0.05 ° / ₉ magnesium sulfate and 0.3 ^N / ₀ Maisquellwasscr. The nutrient medium was adjusted to a pH of around 6.5 to 7.0. The set culture media were sterilized and incubated with a certain amount of a suspension containing bacteria. The bacteria were cultured for 48 s (extensive cultivation of the strain Corynebaclerium No. 208 on a broth agar slant medium. The bacteria were cultured for 12 days at 30 ° C., during which the sterilized nutrient medium was shaken. The L contained in the nutrient medium was then shaken -Arabit determined by paper chromatography according to the method of West and R a ρ ο ρ ο rt. It was found that the culture medium contained 10.0 mg L-arabitol per ml culture medium. The culture broth was then collected by centrifugation to separate the bacteria from the supernatant solution.

Die überstehende Lösung wurde zur Entfernung von proteinartigen Substanzen mit Zinksulfat behandelt und hierauf durch Zugabe von Natriumhydroxid neutraü siert. Die neutralisierte überstehende Lösung wurde zentrifugiert. Die überstehende Lösung wurde eingedampft und unter vermindertem D.nck konzentriert, bis das Wasser im wesentlichen entfernt war. Das erhaltene Konzentrat wurde mit heißem Äthanol extrahiert. Durch Behandlung mit einem Anionenaustauscher (einem Styrol-Divinylbonzol-Copolymeren) wurde ein roher L-Arabit fraktioniert. Der rohe L-Arabit wurde aus Äthanol umkristallisiert. Dabei wurden 5.1 g kristallisierter L-Arabit erhalten.The supernatant solution was treated with zinc sulfate to remove proteinaceous substances and then neutralized by adding sodium hydroxide. The neutralized supernatant solution was centrifuged. The supernatant solution was evaporated and concentrated under reduced pressure until the water was essentially removed. The received Concentrate was extracted with hot ethanol. By treatment with an anion exchanger (a styrene-divinylbonzene copolymer) a crude L-arabitol was fractionated. The raw L-arabitol was made recrystallized from ethanol. This gave 5.1 g of crystallized L-arabitol.

Example 2

In 500-ml-Erlenmeyer-Kolben wurden 100 ml Nährboden gebracht. Der Nährboden cnthielt2,4%Kaliumglukonat. 4°/o D-Ribose, 0,6°/„ Ammoniumsulfat, 0,1 °/₀ Ksliumdihydrogenphosphat. 0,05% Magnesiumsulfat und 0.3% Maisquellwassc. Der Nährboden wurde auf einen pH-Wert von 6.5 eingestellt. Die eingestellten Nährböden v/iirden sterilisiert und unter Schütteln 9 Tage mit dein Stamm Corynebacterium Nr. 208 bei 30 C beimpft. Cs wurde festgestellt, daß der Nährboden pro ml 9,2 mg Ribit enthi.lt. Die in100 ml of nutrient medium were placed in 500 ml Erlenmeyer flasks. The medium contained 2.4% potassium gluconate. 4 ° / o D-ribose, 0.6 ° / "ammonium sulfate, 0.1 ° / ₀ Ksliumdihydrogenphosphat. 0.05% magnesium sulfate and 0.3% corn steep liquor c. The nutrient medium was adjusted to a pH of 6.5. The set culture media are sterilized and inoculated with your strain Corynebacterium No. 208 at 30.degree. C. for 9 days with shaking. It was found that the nutrient medium contained 9.2 mg of ribitol per ml. In the

5;, sämtlichen Kolben enthaltene Kiilturbrühe wurde gesammelt, wodurch 1000 ml Kulturbrühe erhalten wurden. Diese wurde in der gleichen Weise wie im Beispiel 1 behandelt, wodurch 4,6 kg kristallisierter Ribit erhalten wurden.5;, all flasks contained Kiiltur broth was collected, whereby 1000 ml of culture broth was obtained. This was done in the same way as in the example 1 to obtain 4.6 kg of crystallized ribitol.

Example 3

In SOO-ml-Erlcnmcycr-Kolben wurden 100 ml Nährboden gebracht. Der Nährboden enthielt 2,4%Kaliumglukonat, 7% D-Xylose, 0,6% Ammoniunisulfat. 6s 0,1 %Kaliumdihvdrogcnphosphal.0.05"/„Magnesiumsulfat und 0.3% Maisqucllwasser Der Nährboden wurde auf einen pH-Wert von 6,5 einpestclii. 100 ml des eingestellten Nährbodens wurden sterilisiert und100 ml of culture medium were placed in 50 ml Erlcnmcycr flasks brought. The nutrient medium contained 2.4% potassium gluconate, 7% D-xylose, 0.6% ammonium sulfate. 6s 0.1% potassium dihydrogen phosphide 0.05 "/" magnesium sulfate and 0.3% corn steeping water. The nutrient medium was injected to a pH of 6.5. 100 ml of the set nutrient medium were sterilized and

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unter Schütteln 14 Tage mit dem Stamm Corynebacterium Nr. 208 bei 30 C beimpft. Is wurde festgestellt, daß der Nährboden 28,4 mg Xylit pro ml Nährboden enthielt. Die erhaltene Kulturbrühe, die in sämtlichen Kolben enthalten war, wurde gesammeil. Das Ganze wurde in der gleichen Weise wie im Heispiel 1 behandelt, wodurch 15,8g kristallisierter Xylit erhalten wurden.with shaking for 14 days with the strain Corynebacterium No. 208 inoculated at 30 C. It was found that the culture medium contains 28.4 mg xylitol per ml culture medium contained. The culture broth obtained in all Piston was included, was collected. The whole thing was treated in the same way as in Example 1, whereby 15.8g of crystallized xylitol was obtained.

Beispiel 4Example 4

7,2 kg Kaliumglukonal, 0,6 g Ammoniumsulfat, 0,1 g Kaliumdihydrogenphosphat, 0,05 g Magnesiumsulfat, und 0,3 g Maisquellwasser wurden in einem 500-ml-Erlenmeyer-Kolben in 80 ml Wasser aufgelöst. Der erhaltene Nährboden wurde auf einen pH-Wert von 6.5 eingestellt. Der eingestellte Nährboden wurde sterilisiert und mit dem Stamm Corynebacterium Nr. 208 beimpft. Nach 2tägiger, unter Schütteln durchgeführter Kultivierung bei 30⁰C wurden dem Nährboden 20 g D-Xylose zugesetzt. Hierauf wurde das Volumen des Nährbodens auf 100 ml eingestellt und die Kultivierung 14 Tage weitergeführt. Es wurde festgestellt, daß der Nährboden 75,5 mg Xylit pro ml Nährboden enthielt.7.2 kg of potassium gluconal, 0.6 g of ammonium sulfate, 0.1 g of potassium dihydrogen phosphate, 0.05 g of magnesium sulfate, and 0.3 g of corn steep liquor were dissolved in 80 ml of water in a 500 ml Erlenmeyer flask. The nutrient medium obtained was adjusted to a pH of 6.5. The set nutrient medium was sterilized and inoculated with the Corynebacterium No. 208 strain. After 2 days of, carried out with shaking cultivation at 30 ⁰ C the culture medium, 20 g of D-xylose were added. The volume of the nutrient medium was then adjusted to 100 ml and cultivation was continued for 14 days. It was found that the culture medium contained 75.5 mg xylitol per ml culture medium.

Beispiel 5Example 5

7,2 g Kaliumglukonat, 0,6 g Ammoniumsulfat, 0,1 g Kaliumdihydrogenphosphat, 0,05 g Magnesiumsulfat und 0,3 mg Maisquellwiisser wurden in einem 500-inllirlenmeyer-Kolben in 80 ml Wasser aufgelöst. Der erhaltene Nährboden wurde auf einen pH-Wert von 6.5 eingestellt. Der eingestellte Nährboden wurde slerilisiert und mit dem Stamm Corynebacterium Nr. 208 beimpft. Nach 2täliger, unter Schütteln durchgeführter Kultivierung bei 30 C wurde dem Nährboden über einen Zeitraum von 4 Tagen in Einzelmengen von 5 g pro Tag D-Xylose zugesetzt. Das Volumen des Nßhrbodens wurde auf 100 ml eingestellt und die Kultivierung 14 Tage weitergeführt. Ls wurde festegstellt, daß der Nährboden pro ml 53,6 mg Xylit enthielt. 7.2 g of potassium gluconate, 0.6 g of ammonium sulfate, 0.1 g of potassium dihydrogen phosphate, 0.05 g of magnesium sulfate and 0.3 mg of corn swelling agent were dissolved in 80 ml of water in a 500-liter Enmeyer flask. The nutrient medium obtained was adjusted to a pH of 6.5. The set nutrient medium was sterilized and inoculated with the strain Corynebacterium No. 208. After cultivation at 30 ° C. for 2 days with shaking, D-xylose was added to the nutrient medium in individual amounts of 5 g per day over a period of 4 days. The volume of the nutrient medium was adjusted to 100 ml and cultivation was continued for 14 days. It was found that the nutrient medium contained 53.6 mg xylitol per ml.

Claims

Patentanspruch:Claim:

Verfahren zur Herstellung von Pentiten durch mikrobiologische Umwandlung von Pentosen, dadurch ge k e η η ze i c h η e t, daß man für die Umwandlung Stämme von Corynebacterium Nr. 208 oder Abarten dieser Stämme, die zu derselben Gattung gehören und welche die charakteristischen Eigenschaften haben, daß sie zum Wachstum Thiamin benötigen und Glukonsäure assimilieren, verwendet.Process for the production of pentites by microbiological conversion of pentoses, thereby ge k e η η ze i c h η e t that one for the conversion uses strains of Corynebacterium No. 208 or varieties of these strains belonging to the same genus and which have the characteristic properties that they require thiamine for growth and assimilate gluconic acid.

Hierzu 1 Blatt Zeichnungen1 sheet of drawings