DE1492018C - Vaccine for active immunization in the form of a water-in-oil emulsion - Google Patents
Vaccine for active immunization in the form of a water-in-oil emulsionInfo
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Description
Es ist seit langem bekannt, bei der Verabreichung von immunologischen Substanzen Adjuvantien zu verwenden. Dabei ist man bestrebt, solche Substanzen zu finden, die bei Zugabe zu einem Antigen oder einer anderen immunologischen Substanz die Wirksamkeit und das Vermögen zur Antikörperstimulierung zu potenzieren in der Lage sind. Es sind zahlreiche Adjuvantien bekannt, beispielsweise die Verwendung von Alaunausfällung von Antigenen, die Kombination gewisser spezieller Antigene, von denen einige die Aktivität der anderen in dem Gemisch potenzieren, die Verwendung von Calciumphosphat, insbesondere zur Potenzierung der Grippe-Antikörperbildung und zahlreiche andere. Es wurden auch schon solche Adjuvantien wie Tapioca, Calcium- oder Magnesiumsalze oder Tannin in Betracht gezogen, die bei Zugabe zu gewissen speziellen Antigenen den Antikörpertiter über denjenigen erhöhen würden, der erzielbar wäre, wenn das Antigen allein verabreicht wird. Die meisten dieser Mittel ergeben zwar zufriedenstellende .Wirkungen, wenn sie zusammen mit einem oder höchstens ein paar Antigenen verabreicht werden, doch konnte keines dieser Mittel mit Erfolg als Adjuvans mit allen immunologischen Substanzen zur Potenzierung der Antikörperempfindlichkeit, d. h. des Ansprechens der Antikörper, verwendet werden.It has long been known to use adjuvants in the administration of immunological substances. The aim is to find such substances that when added to an antigen or a the potency and ability to stimulate antibodies to another immunological substance are able to exponentiate. Numerous adjuvants are known, for example the use of Alum precipitation of antigens, the combination of certain special antigens, some of which reduce the activity the other in the mixture potentiate the use of calcium phosphate, especially for Potentiation of influenza antibody production and numerous others. Such adjuvants have also been used such as tapioca, calcium or magnesium salts or tannin are considered when adding to certain special antigens would raise the antibody titer above that which would be achievable if the antigen is administered alone. Most of these remedies produce satisfactory effects, if given together with one or at most a few antigens, it could none of these agents have been successful as adjuvants with all immunological substances for potentiating the Antibody sensitivity, d. H. the response of the antibodies.
Die bekannten Mittel schienen zwar zu einer zufriedenstellenden Lösung des Problems zu führen, da nur verhältnismäßig wenige Antigene zur Verwendung zur Immunisierung von Menschen und Tieren zur Verfügung standen, doch wird heute eine stets steigende Zahl von Antigenen zur Immunisierung und Prophylaxe verfügbar, und es besteht ein ständig wichtiger werdendes Bedürfnis, daß die Antigene zur Verabreichung in einer Einzeldosierungsform kombiniert werden. Um dies zu erreichen, ist es erforderlich, kleinere Mengen des Antigens zu verwenden, damit dieses in einem zur Verabreichung in einer Einzeldosierungsform ausreichend kleinen Volumen enthalten ist. Es besteht daher ein Bedürfnis nach einem Adjuvans, das für den Wirt verhältnismäßig nichttoxisch ist und die Antikörperempfindlichkeit gegenüber allen Antigenen potenziert und zusätzlich den Titer während längerer Zeitspanne aufrechterhält und somit den Wirt mit einer langer dauernden Immunität ausstattet.The known means seemed to lead to a satisfactory solution to the problem, since relatively few antigens for use in immunizing humans and animals Were available, but an ever increasing number of antigens for immunization and Prophylaxis is available, and there is an ever increasing need that the antigens be used Administration can be combined in a single dosage form. To achieve this it is necessary to Use smaller amounts of the antigen to allow this to be administered in a single dosage form sufficiently small volume is included. There is therefore a need for one Adjuvant that is relatively non-toxic to the host and that is antibody sensitive to it potentiates all antigens and additionally maintains the titer for a longer period of time and thus endowing the host with a longer lasting immunity.
Man hat auch schon Mineralölemulsionen verwendet, in die das Antigen in die wäßrige Phase eingebracht wurde. Dabei hat man aber festgestellt, daß das Mineralöl von dem Wirt nicht verarbeitet wird und daher carcinogen sein kann. Ersetzt man das toxisch wirkende Mineralöl durch Erdnußöl, so werden hierdurch die antigenen Eigenschaften der immunologischen Mittel nicht potenziert (Annual Review Microbiology, 1947, S. 297).Mineral oil emulsions in which the antigen is introduced into the aqueous phase have also been used would. However, it has been found that the host does not process the mineral oil and therefore can be carcinogenic. If the toxic mineral oil is replaced by peanut oil, so this does not potentiate the antigenic properties of the immunological agents (Annual Review Microbiology, 1947, p. 297).
In der britischen Patentschrift 888 180 wird darauf hingewiesen, daß Wasser-in-Öl-Dispersionen, die zum Impfen verwendet werden, deshalb ungeeignet sind, weil sie sehr häufig lokale Reaktionen an der Impfstelle verursachen. Die britische Patentschrift schlägt darum vor, nicht mehr die Wasser-in-Öl-Emulsionen, sondern Öl-in-Wasser-Emulsionen zu verwenden. Diese Öl-in-Wasser-Emulsionen verursachen nämlich nicht mehr die lokalen Reaktionen, wie sie bei den Wasserin-Öl-Emulsionen festgestellt worden sind. Aus einem Aufsatz von Freund und Mitarbeitern auf den Seiten 383 bis 398 des Journ. Irnrn., 60, 1948, geht hervor, daß bei Kaninchen, denen eine Öl-in-Wasser-Emulsion eingeimpft wurde, eine Verminderung der Antikörperbildung festgestellt wurde, im Gegensatz zu solchen Kaninchen, die mit einer Wasser-in-öl-Emulsion behandelt wurden.In British Patent 888 180 it is pointed out that water-in-oil dispersions used for Vaccinations are unsuitable because they very often cause local reactions at the vaccination site cause. The British patent therefore suggests no longer using water-in-oil emulsions, Instead of using oil-in-water emulsions. This is because these oil-in-water emulsions do not cause more the local reactions as they have been found in the water-in-oil emulsions. From a An essay by a friend and co-worker on the Pages 383 to 398 of the Journ. Irnrn., 60, 1948, goes found that rabbits inoculated with an oil-in-water emulsion showed a reduction in Antibody formation was detected in contrast to those rabbits that were treated with a water-in-oil emulsion were treated.
Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist es, einen Impfstoff zur aktiven Immunisierung in Form einer Wasser-in-Öl-Emulsion zur Verfugung zu stellen, welcher die vorgenannten Nachteile nicht aufweist, sondern eine Potenzierung des immunologischen Mittels bewirkt, und der außerdem eine gute Verträglichkeit mit dem Wirt hat.The object of the present invention is to provide a vaccine for active immunization in the form of a To provide water-in-oil emulsion, which does not have the aforementioned disadvantages, but a potentiation of the immunological agent causes, and which also has a good compatibility with the host.
Gegenstand der Erfindung ist ein Impfstoff zur aktiven Immunisierung in Form einer Wasser-in-Öl-Emulsion, gekennzeichnet durch 20 bis 75 Volumprozent eines pflanzlichen Öls, 2,5 bis 25 Volumprozent Mannidmonooieat, 0,5 bis 5 Volumprozent Aluminiummonostearat und eine ausreichende Menge Wasser oder wäßrige Lösung, um das Volumen auf 100% zu bringen, wobei in die wäßrige Phase vor der Emulgierung ein oder mehrere Antigene oder Allergene eingebracht wurden.The invention relates to a vaccine for active immunization in the form of a water-in-oil emulsion, characterized by 20 to 75 percent by volume of a vegetable oil, 2.5 to 25 percent by volume mannidmonooieate, 0.5 to 5 percent by volume aluminum monostearate and a sufficient amount of water or aqueous solution to bring the volume to 100%, being in the aqueous phase before emulsification one or more antigens or allergens have been introduced.
Der erfindungsgemäße Impfstoff kann durch Einbringen eines oder mehrerer Antigene oder Allergene in die wäßrige Phase einer Emulsion, deren ölige Phase ein pflanzliches öl, Mannidmonooleat und Aluminiummonostearat enthält, hergestellt werden.The vaccine according to the invention can be obtained by introducing one or more antigens or allergens into the aqueous phase of an emulsion, the oily phase of which is a vegetable oil, mannide monooleate and aluminum monostearate contains, are produced.
Zum Nachweis der fortschrittlichen Eigenschaften des erfindungsgemäßen Impfstoffes wurde der in der nachfolgenden Tabelle zusammengefaßte Versuch durchgeführt:To demonstrate the advanced properties of the vaccine according to the invention, the in The experiment summarized in the table below was carried out:
Meerschweinchen-Immunreaktion auf Adjuvansträger, der 600 CCA/Dose Influenza-Virus-Vaccine enthältGuinea Pig Immune Response to Adjuvant Carrier Containing 600 CCA / Dose Influenza Virus Vaccine
ImpfmaterialInoculation material
Geometrisches Mittel des Serum-HI-Titers für
die angegebenen MonateSerum HI titer geometric mean for
the specified months
A2/Jap./17O
0 I 1A2 / Jap. / 17O
0 I 1
A2/Taiwan
0 1A2 / Taiwan
0 1
B/Mass.
0 I 1B / Mass.
0 I 1
Adjuvant 65 (1) (Wasser-in-Öl-Emulsion) Adjuvant 65 (1) (water-in-oil emulsion)
Öl-in-Wasser-Emulsion (2) mit Aluminiummonostearat Oil-in-water emulsion (2) with aluminum monostearate
Öl-in-Wasser-Emulsion (3) ohne Aluminiummonostearat Oil-in-water emulsion (3) without aluminum monostearate
0 zu Beginn.0 at the beginning.
1 nach 1 Monat.1 after 1 month.
Die Impfung wurde wie folgt vorgenommen: Jeweils sechs Meerschweinchen mit einem Gewicht von jeweils 450 bis 500 g wurden intramuskulär mit 0,5 ecmThe vaccination was carried out as follows: Six guinea pigs each weighing 450 to 500 g each were intramuscularly with 0.5 ecm
1:64
1:7
1:71:64
1: 7
1: 7
1:1
1:11: 1
1: 1
1:15
1:21:15
1: 2
1:1 1:21: 1 1: 2
1:1
1:1
1:11: 1
1: 1
1: 1
1:49
1:8
1:301:49
1: 8
1:30
oder 1,0 ecm jeweils einmal geimpft. Allen Meerschweinchen wurde vor der Impfung und dann nach einem Monat Blut entnommen. Die einzelnen Serenor 1.0 ecm each vaccinated once. All guinea pigs was blood drawn before vaccination and then after one month. The individual serums
3 43 4
wurden auf den Antikörpertiter durch Bestimmung kann auch Konservierungsmittel und/oder Substanzen,have been determined to determine the antibody titer, preservatives and / or substances
der Hemagglutinations-Inhibierung (HI) untersucht. wie sie üblicherweise in Vaccinepräparate eingebrachtof hemagglutination inhibition (HI) was investigated. as they are usually incorporated into vaccine preparations
werden, enthalten.are included.
(1) Zusammensetzung der Wasser-in-Öl-Emulsion Das Antigen selbst kann in Form von gereinigtem (Adjuvant 65) 5 oder teilweise gereinigtem Antigen, das von Bakterien,(1) Composition of the water-in-oil emulsion The antigen itself can be in the form of purified (Adjuvant 65) 5 or partially purified antigen produced by bacteria,
42,97 °/o Erdnußöl Viren, Rickettsien oder deren Produkten stammt, oder42,97 ° / o peanut oil is derived from viruses, rickettsiae or their products, or
5.01 % Mannidmonooleat von Extrakten von Bakterien, Viren oder Rickettsien5.01% mannide monooleate from extracts of bacteria, viruses or rickettsiae
2.02 % Aluminiummonostearat vorliegen, oder das Antigen kann ein Allergen, wie 50,00 % wäßrige Vaccine beispielsweise Pollen, Staubarten, Schlacken oder2.02% aluminum monostearate may be present, or the antigen may be an allergen, such as 50.00% aqueous vaccine, for example pollen, types of dust, slag or
ίο Extrakte derselben sein, oder das Antigen kann inίο be extracts of the same, or the antigen can be in
(2) Zusammensetzung der Öl-in-Wasser-Emulsion Form eines Gifts oder Giftstoffs, der aus giftigen mit Aluminiummonostearat Insekten oder Reptilien stammt, vorliegen. In allen(2) Composition of the oil-in-water emulsion form of a poison or poison, made up of poisonous with aluminum monostearate originating from insects or reptiles. In all
43,0 % Erdnußöl Fällen liegen die Antigene in der Form vor, in der ihreIn 43.0% peanut oil cases, the antigens are in the form in which theirs
2,0 °/o Aluminiummonostearat toxischen oder virulenten Eigenschaften vermindert2.0% aluminum monostearate reduces toxic or virulent properties
2,0 % Sorbitanmonooleat 15 oder zerstört sind, und die bei Einführung in einen2.0% sorbitan monooleate 15 or destroyed, and when introduced into one
3,0% Sorbitanmonooleat (Äthylenoxid)20 geeigneten Wirt entweder aktive Immunität durch3.0% sorbitan monooleate (ethylene oxide) 20 suitable host either through active immunity
50,0 °/o wäßrige Vaccine Erzeugung von Antikörpern gegen die speziellen50.0% aqueous vaccine production of antibodies against the special
Mikroorganismen, den Extrakt oder die Produkte vonMicroorganisms, the extract or the products of
(3) Zusammensetzung der Öl-in-Wasser-Emulsion Mikroorganismen, die bei der Herstellung des Anti-(3) Composition of the oil-in-water emulsion Microorganisms that are involved in the production of the
45,0 % Erdnußöl 20 gens verwendet wurden, ergeben, oder im Falle von45.0% peanut oil 20 gens were used, or in the case of
2,0 % Sorbitanmonooleat Allergenen die Symptome der Allergie durch das2.0% sorbitan monooleate allergens relieve the symptoms of the allergy due to the
^ 3,0 0/0 Sorbitanmonooleat (Äthylenoxid)20 spezielle Allergen lindern. Die Antigene können ent-Alleviate ^ 3.0 0/0 sorbitan (ethylene oxide) 20 specific allergen. The antigens can
j 50,0 °/o wäßrige Vaccine. weder einzeln oder in Kombination verwendet werden, j 50.0 ° / o aqueous Vaccine. are not used individually or in combination,
beispielsweise können multiple Bakterienantigene ver-for example, multiple bacterial antigens can
Die erfindungsgemäßen Emulsionen leiten den elek- 25 wendet werden, multiple Virenantigene, multiple
irischen Strom nicht. Rickettsienantigene, multiple Bakterien- oder Viren-Der Brechpunkt bei Einbringen in allmählich erhitz- toxoide, multiple Allergene, oder Kombinationen betes
Wasser liegt über 8O0C, und die Emulsion kann liebiger der vorstehenden Produkte können in der
560CfUr zumindest 1 Woche und 37°C für zumindest wäßrigen Phase der erfindungsgemäßen Adjuvans-2
Wochen ohne Abtrennung der wäßrigen Phase aus- 30 Zusammensetzung kombiniert werden. Antigene von
halten. Die Zusammensetzung ist außerdem zumindest besonderer Bedeutung stammen von Bakterien, wie
4 Monate bei 37°G und bei 4° C ohne Anzeichen eines beispielsweise H. pertussis, Leptospira pomona und
Brechens stabil. Die Emulsion bricht auch nicht in icterohaemorrhagiae, S. typhosa, S. paratyphi A & B,
Öl- und Wasserphasen nach Zentrifugieren bei Ge- C. diphtheriae, C. tetani, C. botulinum, C. perfringens,
schwindigkeiten bis zu 2000 UpM während 1 Stunde 35 C. feseri und andere Gasgangraenbakterien, B. anthra-
und ergibt nicht mehr als 20 °/0 überschüssige Ölphase eis, P. pestis, P. multoeida, V. cholerae u. dgl.; aus
nach einem solchen Zentrifugieren. Die Teilchengröße Viren, wie beispielsweise Poliovirus (multiple Typen),
der inneren Phase, d. h. der Wasserphase, beträgt Adenovirus (multiple Typen), Para-Influenza-Virus
weniger als 100 Mikron, und die Viskosität der ge- (multiple Typen), Masern, Mumps, respiratorischer
samten Emulsion liegt zwischen 2Ö00 und 8500 cP 40 Syncytial-Virus, Influenza (verschiedene Typen), Shipbei
Prüfung in einem Brookfield-Viskosimeter unter ping fever-Virus (SF 4), westliche und östliche Equine
Verwendung einer Spindel Nr. 2 bei 5 UpM. Diese Encephalomyelitis, Japanische B. Encephalomyelitis,
Spezifikationen finden sich jedoch nicht in allen Russische Frühjahr - Sommer - Encephalomyelitis,
) erfindungsgemäßen Emulsionen, da Abänderungen Schweinecholeravirus, Newcastle-disease-Virus, Hühderselben
vorgenommen werden können, ohne die 45 nerpest, Rabies, Katzen- und Hundefieber u. dgl.
wertvollen Eigenschaften des Adjuvansträgers zu Viren, aus Rickettsien, wie epidemischer und endezerstören,
mischer Typhus oder anderen Gliedern der Fleck-Bei Verwendung der erfindungsgemäßen Adjuvans- fiebergruppe, aus verschiedenen Spinnen- und Schlan-Zusammensetzung
als Träger für eine immunologische gengiften oder irgendeinem der bekannten Allergene,
Substanz bringt man das Antigen (oder die Antigene) 50 beispielsweise aus Ambrosiapflanzen, Hausstaub, Polin
die wäßrige Phase vor der Zugabe der wäßrigen lenextrakten, Graspollen u. dgl.
Phase zu dem pflanzlichen öl bei der oben beschriebe- Jedes pflanzliche Öl, von dem bekannt ist, daß es
nen Arbeitsweise ein. Das immunologische Mittel sich zur Verwendung in injizierbaren Präparaten
wird vorteilhafterweise in gereinigter oder konzentrier- eignet und das die Spezifikationen der US Pharmater
Form verwendet, doch kann es auch in jedem 55 copeia oder National Formulary erfüllt, kann in den
anderen gewünschten wäßrigen Medium, wie beispiels- erfindungsgemäßen Adjuvans-Zusammensetzungen
weh:e in Form einer Vaccine, in der es normalerweise verwendet werden, öle, die bei der Herstellung dieser
verabreicht wird, oder gelöst in einer eingestellten Zusammensetzungen mit Erfolg verwendet wurden,
Salzlösung, physiologischen Salzlösung, phosphat- sind Erdnußöl, Maisöl, Olivenöl, Sesamöl, Chaulgepufferten
Salzlösung, in Gewebekulturflüssigkeiten, 60 moograöl, Baumwollsamenöl, öl süßer Mandeln und
wie beispielsweise Eagle Basal Media [Science (1959), Persisches öl. Andere pflanzliche öle, von denen be-Bd.
130, S. 432, H. Eagle]; Medium 199 [Proc. kannt ist, daß sie in injizierbaren Präparaten ver-Soc.
Exptl. Biol. and Med., Bd. 73, S. 1 (1950), J. F. wendbar sind, können selbstverständlich an Stelle
Morgan und Mitarbeiter] u. dgl., oder in anderen jedes beliebigen dieser pflanzlichen öle verwendet
Medien, in denen der Organismus gezüchtet worden 65 werden.The emulsions according to the invention conduct the elec- tricity, multiple virus antigens, multiple Irish currents do not. Rickettsienantigene, multiple bacterial or viral The breaking point, when introduced into gradually erhitz- toxoids, multiple allergens or combinations betes water is above 8O 0 C, and the emulsion may liebiger of the above products can be in the 56 0 CfUr is at least 1 week, 37 ° C for at least the aqueous phase of the adjuvant according to the invention - 2 weeks without separating the aqueous phase from the composition. Keep antigens out. The composition is also at least of particular importance derived from bacteria, such as 4 months at 37 ° G and at 4 ° C with no signs of e.g. H. pertussis, Leptospira pomona and vomiting stable. The emulsion also does not break into icterohaemorrhagiae, S. typhosa, S. paratyphi A & B, oil and water phases after centrifugation at Ge C. diphtheriae, C. tetani, C. botulinum, C. perfringens, speeds up to 2000 rpm during 1 hour feseri 35 C. and anthracene other Gasgangraenbakterien, B., and does not result in more than 20 ° / 0 excess oil phase ice, P. pestis, P. multoeida, V. cholerae u., etc .; off after such centrifugation. The particle size of viruses such as poliovirus (multiple types), the inner phase, i.e. the water phase, adenovirus (multiple types), para-influenza virus is less than 100 microns, and the viscosity of the ge (multiple types), measles, Mumps, respiratory velvet emulsion is between 2000 and 8500 cP 40 syncytial virus, influenza (various types), ship when tested in a Brookfield viscometer under ping fever virus (SF 4), western and eastern equine using a No. 2 spindle 5 rpm. These encephalomyelitis, Japanese B. encephalomyelitis, specifications are not found in all Russian spring-summer encephalomyelitis, ) emulsions according to the invention, since modifications to pig cholera virus, Newcastle disease virus, chicken same can be made without the 45 nerpest, rabies, feline and dog fever and the like. Valuable properties of the adjuvant carrier to viruses, from rickettsiae, such as epidemic and end-destroying, mixed typhus or other members of the stain-When using the adjuvant fever group according to the invention, from various spider and snake compositions as a carrier for an immunological gene poison or any of the known allergens, substance, the antigen (or the antigens) 50 are brought, for example, from ragweed plants, house dust, polin the aqueous phase before the addition of the aqueous oil extracts, grass pollen and the like.
Phase to the vegetable oil as described above- Any vegetable oil known to work. The immunological agent suitable for use in injectable preparations is advantageously in a purified or concentrated form and which uses the specifications of the US Pharmater Form, but it can also be used in any other desired aqueous medium, such as - adjuvant compositions according to the invention hurt: e in the form of a vaccine, in which it is normally used, oils that are administered in the preparation of this, or dissolved in a set composition, saline solution, physiological saline solution, phosphate are peanut oil , Corn oil, olive oil, sesame oil, chaul-buffered saline, in tissue culture fluids, moogra oil, cottonseed oil, sweet almond oil and such as, for example, Eagle Basal Media [Science (1959), Persian oil. Other vegetable oils, of which be vol. 130, p. 432, H. Eagle]; Medium 199 [Proc. is known that they are ver-Soc. Exptl. Biol. And Med., Vol. 73, p. 1 (1950), JF, can of course be substituted for Morgan et al.] And the like, or in other media used in any of these vegetable oils in which the organism is grown turned 65.
sein kann, wie beispielsweise angebrütetem Ei-, Sind Antigene in die neue erfindungsgemäße, wiemay be, such as incubated egg, are antigens in the new invention, such as
amniotischem, allantoischem oder Dottersack-Mate- oben hergestellte Adjuvans-Zusammensetzung ein-amniotic, allantoic or yolk sac mate- the adjuvant composition prepared above
rial u. dgl., zugegeben werden. Die wäßrige Phase gebracht, so wird in dem Wirt nach Verabreichungrial and the like. The aqueous phase brought so will be in the host after administration
eine Antikörperempfindlichkeit hervorgerufen, die in ihrer Art adjuvansähnlich ist.elicited an antibody sensitivity that is adjuvant-like in nature.
Die folgenden Beispiele, die erfindungsgemäße Adjuvans-Zusammensetzungen zeigen, die sich zur Verwendung bei der Herstellung von Vaccinen eignen, in die irgendeines der obenerwähnten Antigene einzeln oder in Kombination eingebracht ist, erläutern die Erfindung, ohne sie zu beschränken.The following examples show the adjuvant compositions of the invention show suitable for use in the manufacture of vaccines in which any of the above-mentioned antigens individually or is introduced in combination, explain the invention without restricting it.
VolumprozentVolume percentage
Erdnußöl 30,0Peanut oil 30.0
Mannidmonooleat 5,0Mannide monooleate 5.0
Aluminiummonostearat 1,4Aluminum monostearate 1.4
Phosphatgepufferte Salzlösung 63,6Phosphate Buffered Saline 63.6
Das Mannidmonooleat wird zu dem Erdnußöl zugesetzt und mittels eines Hängerührers gründlich vermischt. Aluminiummonostearat wird langsam unter Rühren zu dem bivalenten Erdnußöl-Mannidmonooleat-Träger zugegeben, und das homogene Gemisch wird dann langsam unter Rühren auf etwa 1200C erhitzt, um eine gründliche Dispersion des Aluminiummonostearats in dem bivalenten Ölträger zu gewährleisten. Man läßt das homogene Gemisch auf Zimmertemperatur (20 bis 300C) abkühlen, wonach die wäßrige Phase langsam in das Gemisch unter Rühren unter Verwendung eines mechanischen Rührers mit Geschwindigkeitsregelung eingebracht wird, um die Emulsion zu bilden. Die so gebildete Emulsion hat die folgenden Eigenschaften:The mannide monooleate is added to the peanut oil and mixed thoroughly using an overhead stirrer. Aluminum monostearate is added slowly with stirring to the bivalent peanut-mannide monooleate carrier, and the homogeneous mixture is then slowly heated with stirring to about 120 0 C to produce a thorough dispersion to ensure the Aluminiummonostearats in the bivalent oil carrier. The homogeneous mixture is allowed to cool to room temperature (20-30 ° C.), after which the aqueous phase is slowly introduced into the mixture with stirring using a mechanical stirrer with speed control to form the emulsion. The emulsion thus formed has the following properties:
Stabile Tröpfchen in Wasser beiStable droplets in water at
Zimmertemperatur jaRoom temperature yes
Brechpunkt der Emulsion >95°CBreaking point of the emulsion> 95 ° C
Elektrische Leitfähigkeit negativElectrical conductivity negative
Prozent Ölphase, gebildet beiPercent oil phase, formed at
200 UpM während 45 Minuten .. keine Trennung200 rpm for 45 minutes .. no separation
2000 UpM während 45 Minuten .. keine Trennung2000 rpm for 45 minutes .. no separation
Viskosität* ausgezeichnetViscosity * excellent
* Der Viskositätswert stellt die Fließgeschwindigkeit durch eine 27-gauge-Nadel dar.* The viscosity value determines the flow rate a 27-gauge needle.
Die obigen Bestandteile wurden nach der Arbeitsweise von Beispiel 1 vermischt und in eine Emulsion übergeführt. Die so gebildete Emulsion hatte die folgenden Stabilitätseigenschaften:The above ingredients were mixed according to the procedure of Example 1 and formed into an emulsion convicted. The emulsion thus formed had the following stability properties:
Stabile Tröpfchen in Wasser beiStable droplets in water at
Zimmertemperatur jaRoom temperature yes
Brechpunkt der Emulsion 92° CBreaking point of the emulsion 92 ° C
Elektrische Leitfähigkeit negativElectrical conductivity negative
Prozent ölphase, gebildet beiPercent oil phase, formed at
200 UpM während 45 Minuten .. keine Trennung 2000 UpM während 45 Minuten .. <alsl%200 rpm for 45 minutes .. no separation 2000 rpm for 45 minutes .. <thanl%
Trennung Viskosität ausgezeichnetSeparation viscosity excellent
VolumprozentVolume percentage
Erdnußöl 45,5Peanut oil 45.5
Mannidmonooleat 2,5Mannide monooleate 2.5
Aluminiummonostearat 2,0Aluminum monostearate 2.0
Phosphatgepufferte Salzlösung 50,0Phosphate Buffered Saline 50.0
Die obigen Bestandteile wurden nach der im Beispiel 1 beschriebenen Arbeitsweise vermischt und in eine Emulsion übergeführt. Die so gebildete Emulsion hatte die folgenden Stabilitätseigenschaften:The above ingredients were mixed according to the procedure described in Example 1 and in transferred to an emulsion. The emulsion thus formed had the following stability properties:
Stabile Tröpfchen in Wasser beiStable droplets in water at
Zimmertemperatur jaRoom temperature yes
Brechpunkt der Emulsion >95°CBreaking point of the emulsion> 95 ° C
Elektrische Leitfähigkeit negativElectrical conductivity negative
Prozent Ölphase, gebildet beiPercent oil phase, formed at
200 UpM während 45 Minuten .. keine Trennung200 rpm for 45 minutes .. no separation
2000 UpM während 45 Minuten .. keine Trennung2000 rpm for 45 minutes .. no separation
Viskosität ausgezeichnetExcellent viscosity
3535
VolumprozentVolume percentage
Erdnußöl 23,0Peanut oil 23.0
Mannidmonooleat 25,0Mannide monooleate 25.0
Aluminiummonostearat 2,0Aluminum monostearate 2.0
Phosphatgepufferte Salzlösung 50,0Phosphate Buffered Saline 50.0
4040
VolumprozentVolume percentage
Erdnußöl 35,0 4S Peanut oil 35.0 4S
Mannidmonooleat 5,0Mannide monooleate 5.0
Aluminiummonostearat 1,6Aluminum monostearate 1.6
Phosphatgepufferte Salzlösung 58,4Phosphate Buffered Saline 58.4
Die obigen Bestandteile wurden nach der im Beispiel 1 beschriebenen Arbeitsweise vermischt und in eine Emulsion übergeführt. Die so gebildete Emulsion hatte die folgenden Stabilitätseigenschaften:The above ingredients were mixed according to the procedure described in Example 1 and in transferred to an emulsion. The emulsion thus formed had the following stability properties:
Stabile Tröpfchen in Wasser beiStable droplets in water at
Zimmertemperatur jaRoom temperature yes
Brechpunkt der Emulsion >95°CBreaking point of the emulsion> 95 ° C
Elektrische Leitfähigkeit negativElectrical conductivity negative
Prozent ölphase, erzeugt beiPercent oil phase, generated at
200 UpM während 45 Minuten .. keine Trennung200 rpm for 45 minutes .. no separation
2000 UpM während 45 Minuten .. keine Trennung2000 rpm for 45 minutes .. no separation
Viskosität ausgezeichnetExcellent viscosity
VolumprozentVolume percentage
Erdnußöl 65,0Peanut oil 65.0
Mannidmonooleat 5,0Mannide monooleate 5.0
Aluminiummonostearat 2,8Aluminum monostearate 2.8
Phosphatgepufferte Salzlösung 27,2Phosphate Buffered Saline 27.2
5555
60 Die obigen Bestandteile wurden nach der im Beispiel 1 beschriebenen Arbeitsweise vermischt und in ( eine Emulsion übergeführt. Die so gebildete Emulsion hatte die folgenden Stabilitätseigenschaften: 60 The above ingredients were mixed according to the procedure described in Example 1, and transferred in an emulsion (the emulsion so formed had the following stability properties.:
Stabile Tröpfchen in Wasser beiStable droplets in water at
Zimmertemperatur jaRoom temperature yes
Brechpunkt der Emulsion >95°CBreaking point of the emulsion> 95 ° C
Elektrische Leitfähigkeit negativElectrical conductivity negative
Prozent Ölphase, gebildet bei
200 UpM während 45 Minuten .. keine Trennung 2000 UpM während 45 Minuten .. <als 1%Percent oil phase, formed at
200 rpm for 45 minutes .. no separation 2000 rpm for 45 minutes .. <than 1%
Trennung Viskosität ausgezeichnetSeparation viscosity excellent
VolumprozentVolume percentage
Erdnußöl 44,5Peanut oil 44.5
Mannidmonooleat 5,0Mannide monooleate 5.0
Aluminiummonostearat 0,5Aluminum monostearate 0.5
Phosphatgepufferte Salzlösung 50,0Phosphate Buffered Saline 50.0
Die obigen Bestandteile wurden nach der im Beispiel 1 beschriebenen Arbeitsweise vermischt und in eine Emulsion übergeführt. Die so gebildete Emulsion hatte die folgenden Stabilitätseigenschaften:The above ingredients were mixed according to the procedure described in Example 1 and in transferred to an emulsion. The emulsion thus formed had the following stability properties:
Stabile Tröpfchen in Wasser beiStable droplets in water at
Zimmertemperatur jaRoom temperature yes
Brechpunkt der Emulsion 92° CBreaking point of the emulsion 92 ° C
Elektrische Leitfähigkeit negativElectrical conductivity negative
Prozent Ölphase, gebildet bei
200 UpM während 45 Minuten .. keine Trennung 2000 UpM während 45 Minuten .. <als 1 %Percent oil phase, formed at
200 rpm for 45 minutes .. no separation 2000 rpm for 45 minutes .. <than 1%
Trennung Viskosität ausgezeichnetSeparation viscosity excellent
VolumprozentVolume percentage
Erdnußöl 60,0Peanut oil 60.0
Mannidmonooleat 5,0Mannide monooleate 5.0
Aluminiummonostearat 5,0Aluminum monostearate 5.0
Phosphatgepufferte Salzlösung 30,0Phosphate Buffered Saline 30.0
Die obigen Bestandteile wurden nach der im Beispiel 1 beschriebenen Arbeitsweise vermischt und in eine Emulsion übergeführt. Die so gebildete Emulsion hatte die folgenden Stabilitätseigenschaften:The above ingredients were mixed according to the procedure described in Example 1 and in transferred to an emulsion. The emulsion thus formed had the following stability properties:
Stabile Tröpfchen in Wasser beiStable droplets in water at
Zimmertemperatur jaRoom temperature yes
Brechpunkt der Emulsion 93° CBreak point of the emulsion 93 ° C
Elektrische Leitfähigkeit negativElectrical conductivity negative
Prozent Ölphase, gebildet beiPercent oil phase, formed at
200 UpM während 45 Minuten .. keine Trennung 2000 UpM während 45 Minuten .. keine Trennung Viskosität ausgezeichnet200 rpm for 45 minutes .. no separation 2000 rpm for 45 minutes .. no separation Excellent viscosity
B e i sp i e 1 8Eg 1 8
VolumprozentVolume percentage
Erdnußöl 70,0Peanut oil 70.0
Mannidmonooleat 5,0Mannide monooleate 5.0
Aluminiummonostearat 3,0Aluminum monostearate 3.0
Phosphatgepufferte Salzlösung 22,0Phosphate Buffered Saline 22.0
Die obigen Bestandteile wurden nach der im Beispiel 1 beschriebenen Arbeitsweise vermischt und in eine Emulsion übergeführt. Die so gebildete Emulsion hatte die folgenden Stabilitätseigenschaften:The above ingredients were mixed according to the procedure described in Example 1 and in transferred to an emulsion. The emulsion thus formed had the following stability properties:
Stabile Tröpfchen in Wasser beiStable droplets in water at
Zimmertemperatur jaRoom temperature yes
Brechpunkt der Emulsion 920CBreaking point of the emulsion 92 ° C.
Elektrische Leitfähigkeit schwachWeak electrical conductivity
Prozent Ölphase, gebildet beiPercent oil phase, formed at
200 UpM während 45 Minuten .. keine Trennung 2000 UpM während 45 Minuten .. 10% Trennung Viskosität gut200 rpm for 45 minutes .. no separation 2000 rpm for 45 minutes .. 10% separation Viscosity good
VolumprozentVolume percentage
Erdnußöl 43,0Peanut oil 43.0
Mannidmonooleat 5,0Mannide monooleate 5.0
Aluminiummonostearat 2,0Aluminum monostearate 2.0
Phosphatgepufferte Salzlösung, enthaltend Influenza-Virus, polyvalent, Typen A und B einem Gehalt von insgesamt 500 CCA-Einheiten je ecm (einschließlich 200 CCA-Einheiten Typ A-2, Asiatischer Stamm, und 100 CCA-Einheiten von je A/Ann Arbor, A/PR 8 und B/Great Lakes je ecm) 50,0Phosphate-buffered saline solution, containing influenza virus, polyvalent, types A and B. a total content of 500 CCA units per ecm (including 200 CCA units Type A-2, Asian strain, and 100 CCA units of A / Ann Arbor, A / PR 8 and B / Great Lakes each ecm) 50.0
Die obigen Bestandteile wurden nach der im Beispiel 1 beschriebenen Arbeitsweise gemischt und in eine Emulsion übergeführt. Die so gebildete Emulsion hatte die folgenden Stabilitätseigenschaften:The above ingredients were mixed according to the procedure described in Example 1 and in transferred to an emulsion. The emulsion thus formed had the following stability properties:
Stabile Tröpfchen in Wasser beiStable droplets in water at
Zimmertemperatur jaRoom temperature yes
Brechpunkt der Emulsion 96°CBreaking point of the emulsion 96 ° C
Elektrische Leitfähigkeit negativElectrical conductivity negative
Prozent Ölphase, gebildet beiPercent oil phase, formed at
200 UpM während 45 Minuten .. keine Trennung 2000 UpM während 45 Minuten .. 9,7% Trennung Stabilität bei 4° C200 rpm for 45 minutes .. no separation 2000 rpm for 45 minutes .. 9.7% separation Stability at 4 ° C
während 36 Tagen ausgezeichnetexcellent for 36 days
Stabilität bei 25° CStability at 25 ° C
während 36 Tagen Spur vontrace of during 36 days
Aufrahmen
Stabilität bei 37° CCreaming
Stability at 37 ° C
während 36 Tagen Spur vontrace of during 36 days
AufrahmenCreaming
Stabilität bei 56° CStability at 56 ° C
während 36 Tagen 40% Aufrahmen mit
einer Spur von wäßriger40% creaming for 36 days
a trace of watery
Abscheidung
Beispiel 10Deposition
Example 10
Es wurden Emulsionen, wie im Beispiel 9 beschrieben, hergestellt, wobei jedoch das Erdnußöl durch Sesamöl, Maisöl, Olivenöl, Baumwollsamenöl, süßes Mandelöl, Persisches Öl und Chaulmoograöl, jeweils bei einer Konzentration von 43 Volumprozent, ersetzt wurde und wobei in jedem Falle eine stabile Wasser-in-Öl-Emulsion erhalten wurde, die die oben angegebenen NormenEmulsions were prepared as described in Example 9, except that the peanut oil was replaced by sesame oil, Corn oil, olive oil, cottonseed oil, sweet almond oil, Persian oil and Chaulmoogra oil, each with one Concentration of 43 percent by volume, was replaced and in each case a stable water-in-oil emulsion was obtained meeting the standards given above
für eine stabile Wasser-in-Öl-Emulsion erfüllen.for a stable water-in-oil emulsion.
Die in den obigen Beispielen beschriebenen Adjuvans-Zusammensetzungen oder Modifikationen von diesen können als Träger zur Herstellung injizierbarer Antigenpräparate verwendet werden. Da jedes beliebige der oben beschriebenen Antigene entweder allein oder in Kombination in die wäßrige Phase eingebracht werden kann, werden nur einige wenige typische Beispiele im folgenden für so hergestellte Vaccinen angegeben, um ihre Herstellung und das bei Verabreichung an Tiere erzielte Ansprechen auf das Adjuvans zu erläutern. Erschöpfende Beispiele zur Beschreibung jeder möglichen Vaccine werden nicht angeführt, da sonst die Ausführungen untragbar lang würden, ohne daß hierdurch ein erheblicher zusätzlicher Gewinn bezüglich des Verständnisses des Gebrauchs der Adjuvanspräparate erzielt würde.The adjuvant compositions described in the examples above or modifications of these can be used as carriers in the manufacture of injectable antigen preparations. Since any the above-described antigens either alone or in combination introduced into the aqueous phase can be, only a few typical examples are given below for vaccines manufactured in this way, their preparation and the response to the adjuvant obtained when administered to animals to explain. Exhaustive examples to describe every possible vaccine are not given because otherwise the explanations would be prohibitively long, without any significant additional gain regarding the understanding of the use of the adjuvant preparations would be achieved.
In den folgenden Beispielen und Erörterungen bedeuten die Abkürzung »CCA« Hühnchenzellenagglutinin (Chick Cell Agglutinin), das nach der in J. Immunology, 45, S. 273 (1942), Hirst und Pickles, beschriebenen Methode bestimmt wird.In the following examples and discussions, the abbreviation "CCA" means chicken cell agglutinin (Chick Cell Agglutinin), which according to the in J. Immunology, 45, p. 273 (1942), Hirst and Pickles, described method is determined.
VolumprozentVolume percentage
Erdnußöl 53,75Peanut oil 53.75
Mannidmonooleat 1,25Mannide monooleate 1.25
Aluminiummonostearat 5,0Aluminum monostearate 5.0
Influenza-Virus-Vaccine, polyvalent, Typen A
und B, enthaltend insgesamt 500 CCA-Einheiten je ecm (einschließlich 200 CCA-Einheiten
Typ A-2, Asiatischer Stamm, 100 CCA-Einheiten von je A/Ann Arbor, A/PR8 und
B/Great Lakes je ecm) 40,0Influenza virus vaccine, polyvalent, type A
and B, containing a total of 500 CCA units per ecm (including 200 CCA units of type A-2, Asian strain, 100 CCA units of each A / Ann Arbor, A / PR8 and
B / Great Lakes per ecm) 40.0
Die obigen Bestandteile wurden nach praktisch der gleichen Arbeitsweise wie im Beispiel 1 vermischt und in eine Emulsion übergeführt. Es wurde festgestellt, daß sie die oben für eine stabile Wasser-in-Öl-Emulsion angeführten Normen erfüllt.The above ingredients were mixed and blended in practically the same procedure as in Example 1 converted into an emulsion. It was found to be the same as above for a stable water-in-oil emulsion listed standards met.
109 512/346109 512/346
ίοίο
Beispiel 12 VolumprozentExample 12 percent by volume
Erdnußöl 54,0Peanut oil 54.0
Mannidmonooleat 5,0Mannide monooleate 5.0
Aluminiummonostearat 1,0Aluminum monostearate 1.0
Influenza-Virus-Vaccine, polyvalent, Typen A und B, enthaltend insgesamt 500 CCA-Einheiten je ecm (einschließlich 200 CCA-Einheiten Typ A-2, Asiatischer Stamm, 100 CCA-Einheiten von je A/Ann Arbor, A/PR 8 undInfluenza virus vaccine, polyvalent, types A and B, containing a total of 500 CCA units per ecm (including 200 CCA units type A-2, Asian strain, 100 CCA units from each A / Ann Arbor, A / PR 8 and
B/Great Lakes je ecm) 40,0B / Great Lakes per ecm) 40.0
Die obigen Bestandteile wurden nach praktisch der gleichen Arbeitsweise wie im Beispiel 1 vermischt und in eine Emulsion übergeführt. Es wurde gefunden, daß die Emulsion den oben für eine stabile Wasser-in-Öl-Emulsion angegebenen Normen entspricht.The above ingredients were mixed and blended in practically the same procedure as in Example 1 converted into an emulsion. The emulsion was found to have the same characteristics as above for a stable water-in-oil emulsion corresponds to the specified standards.
Beispiel 13 VolumprozentExample 13 percent by volume
Erdnußöl 53,0Peanut oil 53.0
Mannidmonooleat 5,0Mannide monooleate 5.0
Aluminiummonostearat 2,0Aluminum monostearate 2.0
Influenza-Virus-Vaccine, polyvalent, Typen A und B, enthaltend insgesamt 500 CCA-Einheiten je ecm (einschließlich 200 CCA-Einheiten Typ A-2, Asiatischer Stamm, 100 CCA-Einheiten von je A/Ann Arbor, A/PR 8 und B/Great Lakes je ecm) 40,0Influenza virus vaccine, polyvalent, types A and B, containing a total of 500 CCA units per ecm (including 200 CCA units type A-2, Asian strain, 100 CCA units from A / Ann Arbor, A / PR 8 and B / Great Lakes each ecm) 40.0
Die obigen Bestandteile wurden nach praktisch der gleichen Arbeitsweise wie im Beispiel 1 gemischt und in eine Emulsion übergeführt. Es wurde gefunden, daß die Emulsion den oben für eine stabile Wasser-in-Öl-Emulsion angegebenen Normen entspricht.The above ingredients were mixed and matched by practically the same procedure as in Example 1 converted into an emulsion. It was found that the emulsion complies with the standards given above for a stable water-in-oil emulsion.
Beispiel 14 VolumprozentExample 14 percent by volume
Erdnußöl 52,0Peanut oil 52.0
Mannidmonooleat 5,0Mannide monooleate 5.0
Aluminiummonostearat 3,0Aluminum monostearate 3.0
Influenza-Virus-Vaccine, polyvalent, Typen A und B, enthaltend insgesamt 500 CCA-Einheiten je ecm (einschließlich 200 CCA-Einheiten Typ A-2, Asiatischer Stamm, 100 CCA-Einheiten von je A/Ann Arbor, A/PR 8 und B/Great Lakes je ecm) 40,0Influenza virus vaccine, polyvalent, types A and B, containing a total of 500 CCA units per ecm (including 200 CCA units type A-2, Asian strain, 100 CCA units from A / Ann Arbor, A / PR 8 and B / Great Lakes each ecm) 40.0
Die obigen Bestandteile wurden nach praktisch der gleichen Arbeitsweise wie im Beispiel 1 gemischt und in eine Emulsion übergeführt. Es wurde gefunden, daß die Emulsion den oben für eine stabile Wasser-in-öl-Emulsion angegebenen Normen entspricht.The above ingredients were mixed and matched by practically the same procedure as in Example 1 converted into an emulsion. The emulsion was found to have the same characteristics as above for a stable water-in-oil emulsion corresponds to the specified standards.
Beispiel 15 VolumprozentExample 15 percent by volume
Erdnußöl 43,0Peanut oil 43.0
Mannidmonooleat 5,0Mannide monooleate 5.0
3535
4040
4545
Aluminiummonostearat 2,0Aluminum monostearate 2.0
Phosphatgepufferte Salzlösung, enthaltend
660 CCA-Einheiten je ml an polyvalenter
Influenza-Virus-Vaccine (enthaltend 264 CCA-Einheiten A/asiatisch, 132 CCA-Einheiten
A/Ann Arbor, 132 CCA-Einheiten A/PR8,
132 CCA-Einheiten B/Great Lakes je ml) .. 50,0Containing phosphate buffered saline
660 CCA units per ml of polyvalent
Influenza virus vaccine (containing 264 CCA units A / Asian, 132 CCA units
A / Ann Arbor, 132 CCA units A / PR8,
132 CCA units B / Great Lakes per ml) .. 50.0
Die obigen Bestandteile wurden nach praktisch der gleichen Arbeitsweise wie im Beispiel 1 vermischt und in eine Emulsion übergeführt. Es wurde festgestellt, daß die Emulsion den oben für eine stabile Wasserin-Öl-Emulsion angegebenen Normen entspricht.The above ingredients were mixed and blended in practically the same procedure as in Example 1 converted into an emulsion. The emulsion was found to have the same characteristics as above for a stable water-in-oil emulsion corresponds to the specified standards.
Beispiel 16 VolumprozentExample 16 percent by volume
Erdnußöl 43,0Peanut oil 43.0
Mannidmonooleat 5,0Mannide monooleate 5.0
Aluminiummonostearat 2,0Aluminum monostearate 2.0
Gereinigte Poliomyelitis-Virus-Vaccine, trivalent,
Typen I, II und III mit einem Gehalt
von insgesamt 5 bis 6 γ [einschließlich 4,0 γ
Typ I (Parker) und 0,8 γ von je Typ II
(MEFI) und III (Saukett)] je ecm 50,0Purified Poliomyelitis Virus Vaccines, Trivalent, Types I, II and III with a grade
from a total of 5 to 6 γ [including 4.0 γ
Type I (Parker) and 0.8 γ of each type II
(MEFI) and III (Saukett)] each ecm 50.0
Die obigen Bestandteile wurden nach praktisch der gleichen Arbeitsweise wie im Beispiel 1 vermischt und in eine Emulsion übergeführt. Es wurde festgestellt, daß die Emulsion den oben für eine stabile Wasserin-Öl-Emulsion angegebenen Normen entspricht.The above ingredients were mixed and blended in practically the same procedure as in Example 1 converted into an emulsion. The emulsion was found to have the same characteristics as above for a stable water-in-oil emulsion corresponds to the specified standards.
Die Adjuvanswirkung der in den vorstehenden Beispielen beschriebenen Vaccinen wurde bei Tieren nach der folgenden Methode geprüft.The adjuvant effect of the vaccines described in the preceding examples was demonstrated in animals checked using the following method.
Doppelte Injektionen zur O-Zeit von 0,25 bis 1 ml wurden intramuskulär jedem von 10 bis 20 Albinomeerschweinchen,
Stamm Hartley, mit einem Gewicht von jeweils 450 bis 550 g verabreicht. In allen Versuchen
wurden verschiedene Blutproben in Abständen von 4, 8 und 12 Wochen entnommen, und ein abgemessener
Anteil der einzelnen Seren für jede Blutprobe wurde auf den Antikörpertiter nach der folgenden
Technik geprüft:
Für Influenza-AntikörperDouble injections at 0 time of 0.25 to 1 ml were given intramuscularly to each of 10 to 20 albino guinea pigs, Hartley strain, each weighing 450 to 550 g. In all experiments, different blood samples were taken at intervals of 4, 8 and 12 weeks, and a measured proportion of the individual sera for each blood sample was tested for the antibody titer using the following technique:
For influenza antibodies
Standard-Hämagglutinationsinhibierung (HI)-PrU-fung nach dem in J.A.M.A., 172, S. 1230 bis 1238 (1960), Jensen, Woodhour und Bailey, beschriebenen Verfahren.Standard hemagglutination inhibition (HI) test according to the method described in J.A.M.A., 172, pp. 1230 to 1238 (1960), Jensen, Woodhour and Bailey.
Die Ergebnisse wurden mit der Antikörperempfindlichkeit von Kontrollmeerschweinchen verglichen, die gleichzeitig mit 0,25 bis 1 ml phosphatgepufferter Salzlösung, die die Antigentestdosis enthielt, geimpft waren.The results were compared to the antibody sensitivity of control guinea pigs which were simultaneously inoculated with 0.25 to 1 ml of phosphate buffered saline containing the antigen test dose.
Die beobachteten Ergebnisse sind in den Tabellen I bis III zusammengestellt.The results observed are summarized in Tables I to III.
Meerschweinchen-Immunreaktion auf Adjuvansträger, der Influenza-Virus-Vaccine enthielt Dosis: 1,0 ml i. m. mit einem Gehalt von 200 CCA-Einheiten zum Tage »0«Guinea Pig Immune Response to Adjuvant Carrier Containing Influenza Virus Vaccines Dose: 1.0 ml i.p. m. with a content of 200 CCA units on day "0"
der
SerenNo.
the
Serums
der
SerenNo.
the
Serums
der
SerenNo.
the
Serums
305Yep
305
ArborAnn
Arbor
ArborAnn
Arbor
305Yep
305
ArborAnn
Arbor
Lakes
1739Great
Lakes
1739
Lakes
1739Great
Lakes
1739
Lakes
1739Great
Lakes
1739
305Yep
305
11 1211 12
Meerschweinchen-Immunreaktion auf Adjuvansträger, der Influenza-Virus-Vaccine enthielt Dosis: 0,5 ml i. m. mit einem Gehalt von 100 CCA-Einheiten zum Tage »0«Guinea Pig Immune Response to Adjuvant Carrier Containing Influenza Virus Vaccines Dose: 0.5 ml i.v. m. with a content of 100 CCA units on day "0"
ImpfmaterialInoculation material
Kontroll-Influenza-Vaccine (phosphatgepufferteControl influenza vaccine (phosphate-buffered
Salzlösung Saline solution
Adjuvans-Präparat von Beispiel 12 Adjuvant preparation of Example 12
Adjuvans-Präparat von Beispiel 13 Adjuvant preparation of Example 13
Adjuvans-Präparat von Beispiel 14 Adjuvant preparation of Example 14
Meerschweinchen-Immunreaktion auf Adjuvansträger, der polyvalente Influenza-Virus-Vaccine enthielt Dosis: 0,25 ml i. m. mit einem Gehalt von 62,5 CCA-Virus-Einheiten zum Tage »0«Guinea Pig Immune Response to Adjuvant Carrier Containing Influenza Virus Vaccines Dose: 0.25 ml i.v. m. with a content of 62.5 CCA virus units on day "0"
Geometrisches Mittel des Serum-HI-Titers für die angegebene WocheGeometric mean of the serum HI titer for the specified week
Vaccine Geometrisches Mittel des Serum-HI-Titers für 4 WochenVaccine Geometric Mean Serum HI titer for 4 weeks
A
Jap 305A.
Jap 305
Ann
ArborAnn
Arbor
Great Lakes 1739Great Lakes 1739
A PR8A PR8
Nr. der SerenNo. of serums
Kontroll-Influenza-Vaccine (phosphatgepufferte Salzlösung) Adjuvans-Präparat von Beispiel 9 Control Influenza Vaccine (Phosphate Buffered Saline) Adjuvant preparation from Example 9
3
973
97
158158
9
979
97
56 54856 548
18 2318 23
Claims (1)
Family
ID=
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