DE112018001593T5 - METHOD FOR PRODUCING A FRESH CHLORELLA DRINK AND USE OF THE FRESH CHLORELLA DRINK - Google Patents

METHOD FOR PRODUCING A FRESH CHLORELLA DRINK AND USE OF THE FRESH CHLORELLA DRINK Download PDF

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Abstract

Es werden ein Herstellungsverfahren und eine Anwendung für einen frischen Chlorella -Trank bereitgestellt. Das erfindungsgemäße Herstellungsverfahren zeichnet sich durch die sterile Kultivierung von Chlorella und eine schnelle Wärmebehandlung der gefrorenen Chlorella aus, um die Kultivierungszeit ohne Zellvariationen von Chlorella zu verkürzen, um Schwermetalle in Chlorella zu reduzieren und um die Anwendbarkeit in einer Antikrebsbehandlung zu erreichen.

Figure DE112018001593T5_0000
A manufacturing method and application for a fresh Chlorella drink are provided. The production method according to the invention is characterized by the sterile cultivation of chlorella and a rapid heat treatment of the frozen chlorella in order to shorten the cultivation time without cell variations of chlorella, to reduce heavy metals in chlorella and to achieve applicability in an anti-cancer treatment.
Figure DE112018001593T5_0000

Description

GEBIET DER ERFINDUNGFIELD OF THE INVENTION

Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf ein Verfahren zur Herstellung eines frischen Chlorella - Tranks, insbesondere auf ein Verfahren zur Herstellung eines frischen Chlorella - Tranks durch eine sterile Kultivierung. Die vorliegende Erfindung betrifft auch einen mittels der Methode erhaltenen frischen Chlorella - Trank, insbesondere einen frischen Chlorella- Trank, der Chlorella ohne Zellvariationen enthält. Die vorliegende Erfindung bezieht sich ferner auf die Verwendung des frischen Chlorella- Tranks, insbesondere dessen Verwendung in der Behandlung von Krebs.The present invention relates to a method for producing a fresh Chlorella potion, in particular to a method for producing a fresh Chlorella potion by sterile cultivation. The present invention also relates to a fresh chlorella potion obtained by the method, in particular a fresh chlorella potion containing chlorella without cell variations. The present invention further relates to the use of the fresh chlorella potion, particularly its use in the treatment of cancer.

BESCHREIBUNG DES STANDS DER TECHNIKDESCRIPTION OF THE PRIOR ART

Chlorella ist Plankton. Wenn die Konzentration von Chlorella in einer Population übermäßig hoch ist, werden sich Chlorella - Zellen einer Autolyse unterziehen, um für die Chlorella - Population ein sehr gutes Überlebens- und Zuchtumfeld aufrechtzuerhalten. Jedoch werden die autolytischen Chlorella - Zellen auch schädliche Stoffe und Gerüche bilden. Da Chlorella eine äußerst nahrhafte natürliche Substanz für andere Spezies ist, wird Chlorella in natürlichen Umgebungen häufig zum Wirt für andere Spezies. Wenn Chlorella - Zellen von einem Parasiten befallen sind, werden sie unvorhersehbare Zellvariationen durchlaufen. Zusätzlich kann Chlorella Schwermetalle, Pestizide, chemische Giftstoffe, polychlorierte Biphenyle, Dioxin, Strahlung und andere Toxine effektiv absorbieren. Da sich Toxine in Chlorella- Zellen ansammeln, werden die Zellen selbst ebenfalls mutieren.Chlorella is plankton. If the concentration of chlorella in a population is excessively high, chlorella cells will undergo autolysis in order to maintain a very good survival and breeding environment for the chlorella population. However, the autolytic Chlorella cells will also produce harmful substances and smells. Because chlorella is an extremely nutritious natural substance for other species, chlorella often becomes the host for other species in natural environments. If a parasite infects chlorella cells, they will go through unpredictable cell variations. In addition, Chlorella can effectively absorb heavy metals, pesticides, chemical toxins, polychlorinated biphenyls, dioxins, radiation and other toxins. As toxins accumulate in Chlorella cells, the cells themselves will also mutate.

Untersuchungen zufolge können planktonische Algen nicht in schnellen Strömen leben und sich reproduzieren. Wie in 3 gezeigt ist, baut das herkömmliche Kultivierungsverfahren für Chlorella auf eine starke Wasserströmungsumwälzung, Fermentationskultur und die Offenbeckenkultur (die Luftkultur), um die Chlorella - Zellen in Suspension zu halten, wobei sich die Chlorella - Zellen, wenn die Wasserströmung ruhig ist, absetzen und absterben werden. Demzufolge haben die Chlorella - Zellen der kommerziellen Chlorella - Produkte Zellveränderungen durchlaufen und sind nicht mehr in der ursprünglichen Form. Zusätzlich wird jede der nachfolgenden Bedingungen, wie beispielsweise eine Wärmebehandlung bei einer Temperatur höher als 50 °C, im wasserlosen Zustand (Sprühtrocknung oder Gefriertrocknung), ein Zellwandaufschluss bei einer hohen Temperatur, die Lagerung bei einer Temperatur höher als 0 °C für mehr als 6 Stunden und ein Stillstehen für mehr als 2 Stunden, dazu führen, dass sich Chlorella - Zellen absetzen oder Veränderungen der Chlorella- Zellen auftreten. Darüber hinaus wurde die quantitative Obergrenze für den Schwermetallgehalt in Chlorella-Produkten gemäß den Chinesischen Nationalen Standards (CNS) in Taiwan von weniger als 5 ppm auf weniger als 20 ppm abgeändert. Somit haben sich die Chlorella- Zellen, die durch das herkömmliche Chlorella-Kultivierungsverfahren erhalten werden, verändert und sind mit Umweltgiften kontaminiert.Studies have shown that planktonic algae cannot live and reproduce in rapid currents. As in 3rd is shown, the conventional cultivation method for Chlorella relies on strong water flow circulation, fermentation culture and the open basin culture (the air culture) to keep the Chlorella cells in suspension, whereby the Chlorella cells will settle and die when the water flow is calm . As a result, the Chlorella cells of the commercial Chlorella products have undergone cell changes and are no longer in their original form. In addition, each of the following conditions, such as heat treatment at a temperature higher than 50 ° C, in the waterless state (spray drying or freeze drying), cell wall disruption at a high temperature, storage at a temperature higher than 0 ° C for more than 6 Hours and a standstill for more than 2 hours cause chlorella cells to settle or changes in chlorella cells to occur. In addition, the quantitative upper limit for heavy metal content in Chlorella products according to the Chinese National Standards (CNS) in Taiwan has been changed from less than 5 ppm to less than 20 ppm. Thus, the chlorella cells obtained by the conventional chlorella cultivation method have changed and are contaminated with environmental toxins.

KURZFASSUNG DER ERFINDUNGSUMMARY OF THE INVENTION

Angesichts dessen, dass die Kultivierungsdauer einer herkömmlichen Chlorella-Kultur zu lange ist und dass ein Erwärmen und Zellwandaufschluss dazu führen, dass sich die Chlorella - Zellen verändern, degenerieren, Umweltgifte enthalten, ausfallen und absterben, besteht die Aufgabe der vorliegenden Erfindung in der Bereitstellung eines Verfahrens zur Herstellung eines frischen Chlorella -Tranks mittels einer sterilen Kultivierung, dem Einfrieren und einer schnellen Erwärmung danach, um die Kultivierungszeit ohne Veränderungen der Chlorella- Zellen zu verkürzen und um den Schwermetallgehalt gering zu halten.In view of the fact that the cultivation time of a conventional chlorella culture is too long and that heating and cell wall disruption lead to the chlorella cells changing, degenerating, containing environmental toxins, failing and dying, the object of the present invention is to provide a Process for producing a fresh Chlorella drink by means of sterile cultivation, freezing and rapid heating afterwards in order to shorten the cultivation time without changes in the Chlorella cells and to keep the heavy metal content low.

Um die vorstehende Aufgabe zu lösen, stellt die vorliegende Erfindung ein Verfahren zur Herstellung eines frischen Chlorella -Tranks bereit, welches als Schritte umfasst:

  • Steriles Züchten und Rühren von Chlorella in einer Kultur für nicht länger als 3 Tage bis die Konzentration von Chlorella oberhalb von 0,05 Gew.-% liegt, wobei die Chlorella innerhalb von 6 Stunden geerntet wird, um eine geerntete Kultur zu erhalten;
  • Schnelles Abkühlen der geernteten Kultur auf unterhalb von 1°C aber nicht bis zu einem gefrorenen Zustand, wobei die abgekühlte geerntete Kultur danach zentrifugiert wird und steriles Wasser zur abgekühlten geernteten Kultur hinzugefügt wird, um eine Chlorella - Suspension zu erhalten, bei welcher die Konzentration an Chlorella zwischen 2,5 mg/ml und 12,5 mg/ml beträgt; und
  • Einfrieren und Stehenlassen der Chlorella- Suspension bei einer Temperatur unterhalb 0°C für 12 Stunden bis 24 Stunden bis diese vollständig gefroren ist und anschließendes Erhöhen der Temperatur auf 40°C bis 50°C innerhalb von 10 Minuten, um den frischen Chlorella- Trank zu erhalten.
To achieve the above object, the present invention provides a method for producing a fresh Chlorella drink, which comprises as steps:
  • Sterile growing and stirring of chlorella in a culture for no longer than 3 days until the concentration of chlorella is above 0.05% by weight, the chlorella being harvested within 6 hours to obtain a harvested culture;
  • Rapidly cool the harvested culture to below 1 ° C but not to a frozen state, after which the cooled harvested culture is centrifuged and sterile water is added to the cooled harvested culture to obtain a chlorella suspension at which the concentration increases Chlorella is between 2.5 mg / ml and 12.5 mg / ml; and
  • Freeze and let the Chlorella suspension stand at a temperature below 0 ° C for 12 hours to 24 hours until it is completely frozen and then raise the temperature to 40 ° C to 50 ° C within 10 minutes to add the fresh Chlorella potion receive.

Vorzugsweise ist Chlorella eine Chlorella pyrenoidosa.Chlorella is preferably a Chlorella pyrenoidosa.

Vorzugsweise beträgt die Durchflussrate zum Umrühren der Kultur während des Schritts zum sterilen Züchten und Rühren von Chlorella in einer Kultur zwischen 3 m/min und 20 m/min.Preferably, the flow rate for stirring the culture during the step of sterile growing and stirring chlorella in a culture is between 3 m / min and 20 m / min.

Vorzugsweise wird während des Schritts zum sterilen Züchten und Rühren von Chlorella in einer Kultur zur Erleichterung der Kohlenstoffaufnahme durch Chlorella Licht bereitgestellt und das Umrühren der Chlorella unterbrochen sobald der pH-Wert der Kultur 6,8 erreicht, wobei die Chlorella stationär ist und in der Kultur suspendiert (ohne Ausfällung); und wobei dann das Umrühren fortgesetzt wird bis der pH-Wert der Kultur mehr als 7,0 beträgt, um die Kohlenstoffaufnahme von Chlorella zu erleichtern. Preferably, during the step of sterile growing and stirring chlorella in a culture to facilitate carbon uptake by chlorella, light is provided and stirring of the chlorella is stopped as soon as the pH of the culture reaches 6.8, the chlorella being stationary and in the culture suspended (without precipitation); and then stirring continues until the pH of the culture is greater than 7.0 to facilitate chlorella carbon uptake.

Vorzugsweise kann die Temperatur in dem Schritt des Einfrierens und Stehenlassens der Chlorella - Suspension zum kompletten Gefrieren bei einer Temperatur unterhalb 0°C für 12 Stunden bis 24 Stunden und dem anschließenden Erhöhen der Temperatur auf 40°C bis 50°C innerhalb von 10 Minuten, um den frischen Chlorella - Trank zu erhalten, mittels Mikrowellen oder Infrarotstrahlung erhöht werden.Preferably, the temperature in the step of freezing and leaving the chlorella suspension to freeze completely at a temperature below 0 ° C for 12 hours to 24 hours and then raising the temperature to 40 ° C to 50 ° C within 10 minutes, to obtain the fresh chlorella potion, use microwaves or infrared radiation.

Vorzugsweise beträgt die Einfriertemperatur in dem Schritt des Einfrierens und Stehenlassens der Chlorella - Suspension zum kompletten Gefrieren bei einer Temperatur unterhalb 0°C für 12 Stunden bis 24 Stunden und dem anschließenden Erhöhen der Temperatur auf 40°C bis 50°C innerhalb von 10 Minuten, um den frischen Chlorella - Trank zu erhalten, zwischen -1°C und -21°C.The freezing temperature in the step of freezing and allowing the chlorella suspension to freeze completely is preferably at a temperature below 0 ° C. for 12 hours to 24 hours and the subsequent increase in temperature to 40 ° C. to 50 ° C. within 10 minutes, to get the fresh chlorella potion, between -1 ° C and -21 ° C.

Vorzugsweise beträgt der Zeitraum zur Temperaturerhöhung in dem Schritt des Einfrierens und Stehenlassens der Chlorella - Suspension zum kompletten Gefrieren bei einer Temperatur unterhalb 0°C für 12 Stunden bis 24 Stunden und dem anschließenden Erhöhen der Temperatur auf 40°C bis 50°C innerhalb von 10 Minuten, um den frischen Chlorella - Trank zu erhalten, zwischen 3 Minuten und 10 Minuten.The time period for the temperature increase in the step of freezing and leaving the chlorella suspension to freeze completely is preferably at a temperature below 0 ° C. for 12 hours to 24 hours and the subsequent increase in temperature to 40 ° C. to 50 ° C. within 10 Minutes to get the fresh chlorella potion, between 3 minutes and 10 minutes.

Die vorliegende Erfindung stellt ferner einen frischen Chlorella -Trank bereit, der durch das vorab beschriebene Verfahren erhalten wird und welcher Chlorella enthält, die die ursprüngliche gesundmachende Wirkung für Organismen beibehält. Vergleicht man herkömmliche Chlorella-Produkte mit dem frischen Chlorella-Trank der vorliegenden Erfindung, so gibt es folgende deutliche Unterschiede: 1. Die herkömmlichen Chlorella- Produkte weisen einen unangenehmen Geruch auf, wohingegen der frische Chlorella -Trank der vorliegenden Erfindung gut schmeckt und ohne Gerüche ist. 2. Der frische Chlorella -Trank kann durch den menschlichen Körper vollständig aufgenommen werden ohne dass in der Fertigung ein Arbeitsgang zum Zellwandaufschluss erfolgt, wohingegen die herkömmlichen Chlorella - Produkte nicht vom menschlichen Körper verdaut werden können, wenn sie nicht mittels eines Zellwandaufschlusses behandelt wurden. 3. Der Gehalt des Chlorella- Wachstumsfaktors (CGF) des durch das erfindungsgemäße Verfahren erhaltenen frischen Chlorella-Tranks ist in der Regel zweimal so hoch wie der von herkömmlichen Chlorella - Produkten. 4. Die Effizienz von Chlorophyll bleibt in dem frischen Chlorella -Trank erhalten; dementgegen ist die Effizienz von Chlorophyll bei den herkömmlichen Chlorella-Produkten nach der Hochtemperaturwärmebehandlung verringert.The present invention further provides a fresh chlorella potion obtained by the above-described method and containing chlorella which maintains the original health-giving effect for organisms. Comparing conventional Chlorella products with the fresh Chlorella drink of the present invention, there are the following significant differences: 1. The conventional Chlorella products have an unpleasant smell, whereas the fresh Chlorella drink of the present invention tastes good and has no odors is. 2. The fresh Chlorella drink can be completely absorbed by the human body without a cell wall disruption process in production, whereas the conventional Chlorella products cannot be digested by the human body if they have not been treated by cell wall disruption. 3. The chlorella growth factor (CGF) content of the fresh chlorella potion obtained by the process according to the invention is generally twice as high as that of conventional chlorella products. 4. The efficiency of chlorophyll is retained in the fresh Chlorella drink; on the other hand, the efficiency of chlorophyll in conventional Chlorella products is reduced after the high-temperature heat treatment.

Gemäß der vorliegenden Erfindung wurde der Chlorella-Wachstumsfaktor (CGF) gemäß CNS Nr. 4202, Kategorie Nr. N5134 essbare Grünalgen, gemessen und die Menge des CGF wurde anhand der 4,5 -Sektion des Algenheißwasserextraktwerts bestimmt, wobei die Indexwerte des durch das erfindungsgemäße Verfahren erhaltenen frischen Chlorella -Tranks 3,8 bis 4,9 betrugen.According to the present invention, the chlorella growth factor (CGF) was measured according to CNS No. 4202, category No. N5134 edible green algae, and the amount of the CGF was determined from the 4.5 section of the algae hot water extract value, the index values being those obtained by the invention Fresh chlorella potion obtained from the process were 3.8 to 4.9.

Gemäß CNS Nr. 4202, Kategorie Nr. N5134 essbare Grünalgen, betrug die Menge an Chlorophyll bei dem durch das erfindungsgemäße Verfahren erhaltenen frischen Chlorella-Tranks 3800 mg% bis 4900 mg%.According to CNS No. 4202, category No. N5134 edible green algae, the amount of chlorophyll in the fresh Chlorella potion obtained by the process according to the invention was 3800 mg% to 4900 mg%.

Die vorliegende Erfindung bezieht sich ferner auf eine Verwendung des vorab genannten frischen Chlorella -Tranks in der Herstellung einer pharmazeutischen Zusammensetzung für die Behandlung von Krebs, wobei die pharmazeutische Zusammensetzung, die den frischen Chlorella -Trank beinhaltet, einem Subjekt verabreicht wird, um eine Antikrebswirkung zu erzielen.The present invention further relates to use of the aforementioned fresh Chlorella drink in the manufacture of a pharmaceutical composition for the treatment of cancer, the pharmaceutical composition containing the fresh Chlorella drink being administered to a subject to have an anti-cancer effect achieve.

Gemäß der vorliegenden Erfindung bezieht sich der hierin verwendete Begriff „Behandlung von Krebs“ auf die Behandlung, Unterdrückung oder Linderung von Krebs.In accordance with the present invention, the term "treatment of cancer" as used herein refers to the treatment, suppression or relief of cancer.

Vorzugsweise wird eine therapeutisch wirksame Menge für den frischen Chlorella-Trank anhand des Gewichts an fester Chlorella, die in dem frischen Chlorella -Trank enthalten ist, pro Kilogramm Körpergewicht des Subjekts berechnet und liegt zwischen 10 mg/kg und 200 mg/kg.Preferably, a therapeutically effective amount for the fresh chlorella potion is calculated based on the weight of solid chlorella contained in the fresh chlorella potion per kg body weight of the subject and is between 10 mg / kg and 200 mg / kg.

Gemäß der vorliegenden Erfindung bezieht sich der hierin verwendete Begriff „therapeutisch wirksame Menge“ auf eine Dosierung, welche wirksam ist, um das Fortschreiten einer Krebserkrankung innerhalb eines geforderten Zeitraums abzuschwächen oder zu unterbinden. Gemäß der vorliegenden Erfindung ist die therapeutisch wirksame Menge die Menge, die bewirkt, dass das Wachstum eines Brusttumors verlangsamt oder unterbunden wird oder sogar den Tod des Brusttumors induzieren kann, wobei diese, wie durch die vorliegende Erfindung veranschaulicht ist, dadurch bestimmt wird, dass die pharmazeutische Zusammensetzung, die zur Linderung oder Hemmung eines Brusttumors wirksam ist und den frischen Chlorella -Trank in einer bestimmten Menge enthält, verabreicht wird und das Tumorvolumen innerhalb eines bestimmten Zeitraums gemessen wird.In accordance with the present invention, the term "therapeutically effective amount" as used herein refers to a dosage which is effective to attenuate or prevent the progression of cancer within a required period of time. According to the present invention, the therapeutically effective amount is the amount that causes the growth of a breast tumor to be slowed down or stopped, or even to induce the death of the breast tumor, which, as illustrated by the present invention, is determined by that pharmaceutical composition which is effective for the relief or inhibition of a breast tumor and contains the fresh chlorella drink in a certain amount, is administered and Tumor volume is measured within a certain period of time.

Vorzugsweise beinhaltet die Rezeptur der pharmazeutischen Zusammensetzung eine Flüssigkeit, aber ist nicht darauf beschränkt.Preferably, the formulation of the pharmaceutical composition includes, but is not limited to, a liquid.

Für den frischen Chlorella -Trank, der durch das Verfahren der vorliegenden Erfindung ohne das Durchlaufen einer Fermentation oder Freilandkultur hergestellt wird, ist nicht nur die Kultivierungsdauer verkürzt, sondern auch die Menge der in dem frischen Chlorella -Trank enthaltenen Schwermetalle reduziert. Zusätzlich unterbindet das erfindungsgemäße Verfahren mit einer geringen Fließgeschwindigkeit, dass sich die Chlorella - Zellen absetzen, wobei außerdem keine Zellveränderungen von Chlorella auftreten. Das erfindungsgemäße Verfahren beinhaltet keine Arbeitsgänge zum Zellwandaufschluss bei einer hohen Temperatur, zum Sprühtrocknen mit einer Wärmebehandlung bei einer hohen Temperatur oder zum Gefriertrocknen bei einer sehr niedrigen Temperatur, wodurch unterbunden wird, dass die Chlorella - Zellen Zellveränderungen durchlaufen, und dazu führt, dass der durch das Verfahren erhaltene frische Chlorella -Trank nicht nur mehr Chlorella -Wachstumsfaktor und Chlorophyll enthält, sondern auch eine Antikrebswirkung hat.For the fresh Chlorella drink produced by the process of the present invention without undergoing fermentation or field culture, not only is the cultivation time shortened but also the amount of heavy metals contained in the fresh Chlorella drink is reduced. In addition, the process according to the invention prevents the chlorella cells from settling with a low flow rate, and in addition there are no cell changes in chlorella. The method according to the invention does not include any operations for cell wall disruption at a high temperature, for spray drying with a heat treatment at a high temperature or for freeze drying at a very low temperature, thereby preventing the Chlorella cells from undergoing cell changes and causing the cell to undergo changes The fresh chlorella potion obtained not only contains more chlorella growth factor and chlorophyll, but also has an anti-cancer effect.

FigurenlisteFigure list

  • 1 ist ein Flussdiagramm eines Verfahrens zur Herstellung eines frischen Chlorella -Tranks gemäß der vorliegenden Erfindung; 1 Figure 12 is a flow diagram of a process for making a fresh Chlorella drink according to the present invention;
  • 2A ist ein Histogramm der Tumorgrößen, welche an dem 15. Tag gemessen wurden, an dem der durch das erfindungsgemäße Verfahren erhaltene frische Chlorella -Trank, der zur Inhibierung von Krebszellen verwendet wurde, verabreicht wurde; 2A Fig. 3 is a histogram of tumor sizes measured on the 15th day on which the fresh chlorella potion obtained by the method of the invention used to inhibit cancer cells was administered;
  • 2B ist ein Histogramm der Tumorgrößen, welche an dem 22. Tag gemessen wurden, an dem der durch das erfindungsgemäße Verfahren erhaltene frische Chlorella -Trank, der zur Inhibierung von Krebszellen verwendet wurde, verabreicht wurde; und 2 B Fig. 3 is a histogram of tumor sizes measured on the 22nd day on which the fresh chlorella potion obtained by the method of the invention used to inhibit cancer cells was administered; and
  • 3 ist ein Flussdiagramm des herkömmlichen Verfahrens zur Herstellung eines Chlorella - Produkts. 3rd Fig. 10 is a flowchart of the conventional process for producing a Chlorella product.

AUSFÜHRLICHE BESCHREIBUNG DER BEVORZUGTEN AUSFÜHRUNGSFORMENDETAILED DESCRIPTION OF THE PREFERRED EMBODIMENTS

Die vorliegende Erfindung wird unter Bezugnahme auf die begleitenden Beispiele ausführlicher beschrieben, um deren Gattungen und technischen Merkmale deutlicher aufzuzeigen, was jedoch nicht als eine Beschränkung des Umfangs der vorliegenden Erfindung interpretiert werden soll.The present invention will be described in more detail with reference to the accompanying examples in order to more clearly demonstrate the genres and technical features thereof, but this should not be interpreted as a limitation on the scope of the present invention.

Herstellungsbeispiel 1: Herstellung des frischen Chlorella -TranksProduction Example 1: Production of the fresh Chlorella drink

Unter Bezugnahme auf 1 umfasst das Verfahren zur Herstellung eines frischen Chlorella -Tranks gemäß der vorliegenden Erfindung die folgenden Schritte:

  1. (1) Bereitstellen von Chlorella, wobei die Chlorella eine Chlorella pyrenoidosa ist;
  2. (2) Steriles Züchten und Rühren der Chlorella in einer Kultur, wobei eine Kohlenstoffquelle gefilterte sterile Luft umfasst, wobei die Wasserströmungsrate zum Bewegen der Kultur nicht schneller als 20 Meter pro Minute ist, und wobei durch Licht die Kohlenstoffaufnahme durch Chlorella begünstigt werden soll, wobei das Umwälzen der Chlorella unterbrochen wird, wenn der pH-Wert der Kultur 6,8 erreicht, wobei die Chlorella stationär ist und in der Kultur suspendiert (ohne Ausfällung); und wobei wieder mit dem Umrühren begonnen wird bis der pH-Wert der Kultur mehr als 7,0 beträgt, um die Kohlenstoffaufnahme durch Chlorella zu begünstigen. Die Kultivierungsdauer zum Erhalt einer geernteten Kultur ist nicht länger als 3 Tage. Sobald die Konzentration der Kultur (die feste Chlorella in der Kultur) oberhalb 0,05% bezogen auf das Gewicht beträgt, wird die Chlorella- Kultur innerhalb von 6 Stunden geerntet, um eine geerntete Kultur zu erhalten; ansonsten wird eine Autolyse von Chlorella erfolgen.
  3. (3) Schnelles Abkühlen der geernteten Kultur auf weniger als 1°C (nicht gefroren) und Entfernen des Mediums durch sterile Zentrifugation, wobei nach dem Waschen mit sterilem Wasser bei der gleichen Temperatur dieses Wasser entfernt wird und erneut steriles Wasser hinzugefügt wird, sodass die Menge an fester Chlorella quantitativ 5% beträgt, um eine Chlorella- Suspension zu erhalten; und
  4. (4) Lagern der Chlorella - Suspension bei -20°C für 24 Stunden und anschließendes Auftauen der gefrorenen Chlorella - Suspension bei 40°C bis 50°C innerhalb von 10 Minuten mittels Mikrowellen oder Infrarotstrahlung, sodass die Chlorella - Zellen sich nicht reproduzieren können und kein zusätzlicher Zellwandaufschluss mithilfe einer Wärmebehandlung bei hoher Temperatur, mechanischen oder chemischen Methoden notwendig ist, um die Verdaubarkeit und Absorption von Chlorella nach dem Konsum durch einen Menschen zu fördern. Die Chlorella - Suspension wird mit sterilem Wasser auf eine geeignete Konzentration verdünnt, um den frischen Chlorella -Trank zu erhalten, wobei der frische Chlorella -Trank schnell bei -20°C zur Lagerung eingefroren wird. (Nach 4 Jahren klinischer Untersuchungen bezüglich der Aufnahme von Chlorella haben die Ergebnisse gezeigt, dass die Wirksamkeit von Chlorella allmählich abnimmt und verlorengeht, wenn Chlorella im nicht-gefrorenen Zustand gelagert wird.)
With reference to 1 The method of making a fresh Chlorella drink according to the present invention comprises the following steps:
  1. (1) providing chlorella, the chlorella being a chlorella pyrenoidosa;
  2. (2) Sterile growing and stirring of the chlorella in a culture, a carbon source comprising filtered sterile air, the water flow rate for moving the culture is not faster than 20 meters per minute, and wherein light is to promote chlorella carbon uptake, wherein the circulation of the chlorella is stopped when the pH of the culture reaches 6.8, the chlorella being stationary and suspended in the culture (without precipitation); and again stirring until the pH of the culture is greater than 7.0 to promote chlorella carbon uptake. The cultivation period for maintaining a harvested culture is not longer than 3 days. Once the concentration of the culture (the solid chlorella in the culture) is above 0.05% by weight, the chlorella culture is harvested within 6 hours to obtain a harvested culture; otherwise chlorella will undergo autolysis.
  3. (3) Rapidly cool the harvested culture to less than 1 ° C (not frozen) and remove the medium by sterile centrifugation. After washing with sterile water at the same temperature, this water is removed and sterile water is added again so that the The amount of solid chlorella is 5% quantitatively to obtain a chlorella suspension; and
  4. (4) Store the Chlorella suspension at -20 ° C for 24 hours and then thaw the frozen Chlorella suspension at 40 ° C to 50 ° C within 10 minutes using microwaves or infrared radiation so that the Chlorella cells cannot reproduce and no additional cell wall disruption using high temperature heat treatment, mechanical or chemical methods is necessary to promote digestibility and absorption of chlorella after human consumption. The Chlorella suspension is diluted with sterile water to a suitable concentration to obtain the fresh Chlorella drink, the fresh Chlorella drink being quickly frozen at -20 ° C for storage. (After 4 years of clinical studies regarding the Chlorella ingestion has shown the results that the effectiveness of Chlorella gradually diminishes and is lost when Chlorella is stored in the non-frozen state.)

Vergleichsbeispiel 1: Herstellung von herkömmlichen Chlorella - ProduktenComparative Example 1: Production of conventional Chlorella products

Bezugnehmend auf 3 sind die konventionellen Verfahren zur Herstellung der herkömmlichen Chlorella - Produkte eine Fermentationskultur und eine Offenbeckenkultur von Chlorella zur Bildung einer herkömmlichen Chlorella - Suspension, wobei die Kohlenstoffquelle für die Fermentationskultur Glukose ist, wobei die Rührgeschwindigkeit zwischen 50 U/min und 100 U/min beträgt, und wobei die Kultivierungsdauer zwischen 5 Tagen und 10 Tagen beträgt. Dadurch sind die aus der Fermentationskultur resultierenden Chlorella - Zellen gänzlich nicht die planktonischen Algen, sondern Chlorella -Varianten, die ausfallen und absterben sobald das Rühren eingestellt wird. Die Kohlenstoffquelle für die Offenbeckenkultur ist Essigsäure, die Wasserströmungsrate durch Rühren ist schneller als 10 m/s und die benötigte Kultivierungsdauer beträgt 2 Wochen bis 8 Wochen. Die Chlorella - Zellen, die durch Offenbeckenkultur erhalten werden, sind ebenfalls die Chlorella -Varianten, die ausfallen und absterben sobald das Rühren eingestellt wird. Des Weiteren führt die Offenbeckenkultur zu einer Akkumulation von Umweltgiften und einer Bakterienkontamination.Referring to 3rd the conventional methods for producing the conventional Chlorella products are a fermentation culture and an open-cell culture of Chlorella to form a conventional Chlorella suspension, the carbon source for the fermentation culture being glucose, the stirring speed being between 50 rpm and 100 rpm, and the cultivation period is between 5 days and 10 days. As a result, the chlorella cells resulting from the fermentation culture are not entirely the planktonic algae, but chlorella variants, which fail and die as soon as stirring is stopped. The carbon source for open-cell culture is acetic acid, the water flow rate by stirring is faster than 10 m / s and the cultivation time required is 2 weeks to 8 weeks. The Chlorella cells, which are obtained by open-cell culture, are also the Chlorella variants, which fail and die as soon as the stirring is stopped. Furthermore, the open-basin culture leads to an accumulation of environmental toxins and bacterial contamination.

Die herkömmliche Chlorella - Suspension, die durch die Fermentationskultur oder die Offenbeckenkultur erhalten wird, durchläuft danach eine Zentrifugation und einen Zellwandaufschluss, um ein Chlorella - Konzentrat zu erhalten, wobei die Zellwandzerstörung bei einer Temperatur von 115°C bis 125°C durchgeführt wird, welche die Wirksamkeit gegen Krebs von Chlorella vollständig zerstört.The conventional chlorella suspension obtained by the fermentation culture or the open cell culture then undergoes centrifugation and cell wall disruption to obtain a chlorella concentrate, the cell wall destruction being carried out at a temperature of 115 ° C to 125 ° C, which the effectiveness against cancer of chlorella completely destroyed.

Das Chlorella-Konzentrat wird nach dem Zellwandaufschluss außerdem sprühgetrocknet oder gefriergetrocknet, um ein Chlorella-Pulver zu bilden, wobei die Sprühtrocknungstemperatur zwischen 155°C und 180°C beträgt, welche die Wirksamkeit gegen Krebs von Chlorella vollständig zerstört.The chlorella concentrate is also spray dried or freeze dried after cell wall disruption to form a chlorella powder, the spray drying temperature being between 155 ° C and 180 ° C, which completely destroys the anti-cancer activity of Chlorella.

Vergleichsbeispiel 1 wendet eine Offenbeckenkultur an und das mittels Sprühtrocknung erhaltene Chlorella - Pulver wird als Gruppe a bezeichnet, wobei das mittels Gefriertrocknung erhaltene Chlorella - Pulver als Gruppe b bezeichnet wird, und wobei der im Herstellungsbeispiel 1 hergestellte frische Chlorella -Trank als Gruppe c bezeichnet wird.Comparative Example 1 employs an open-basin culture and the chlorella powder obtained by spray drying is referred to as group a, the chlorella powder obtained by freeze-drying is referred to as group b, and the fresh chlorella drink produced in preparation example 1 is referred to as group c .

Beispiel 1: der frische Chlorella -Trank zur Anwendung in der Behandlung von KrebsExample 1: the fresh Chlorella potion for use in the treatment of cancer

24 BALB/c Mäuse (5 Wochen alte weibliche Mäuse) wurden in vier Gruppen unterteilt: Kontrollgruppe, Gruppe A, Gruppe B und Gruppe C. Brustkrebszellen des MDA-MB-231-Typs (1×106 - Zellen/100 µl, verdünnt mit PBS) wurden am Tag 0 des orthotopen Modells in die Brustdrüse von jeder Maus injiziert. Sobald der Tumor am Tag 4 auf 58 mm3 angewachsen war, wurden jeweils die nachfolgenden Dosierungen in das Futter gemischt und alle 6 Stunden angewendet: der Kontrollgruppe wurde zweimal am Tag (1 ml/kg bei jedem Mal) 1 ml PBS pro Kilogramm Körpergewicht der Maus verabreicht, die Gruppe A wurde zweimal am Tag (10 mg/kg bei jedem Mal) mit 10 mg pro Kilogramm Körpergewicht der Maus des als Gruppe a bezeichneten Chlorella -Pulvers gefüttert, die Gruppe B wurde zweimal am Tag (10 mg/kg bei jedem Mal) mit 10 mg pro Kilogramm Körpergewicht der Maus des als Gruppe b bezeichneten Chlorella-Pulvers gefüttert und 1 ml pro Kilogramm Körpergewicht der Maus an frischem Chlorella -Trank, der als Gruppe c bezeichnet wird (die Konzentration der Gruppe c ist 10 mg/ml), wurde zweimal am Tag (1 ml/kg bei jedem Mal) an die Gruppe C verfüttert. Die Volumen der Tumore wurden jeweils an Tag 15 und Tag 22 gemessen.24 BALB / c mice (5 week old female mice) were divided into four groups: control group, group A , Group B and group C. . Breast cancer cells of the MDA-MB-231 type (1 × 10 6 cells / 100 μl, diluted with PBS) were injected into the mammary gland of each mouse on day 0 of the orthotopic model. As soon as the tumor had grown to 58 mm 3 on day 4, the following doses were mixed into the feed and applied every 6 hours: the control group was given 1 ml PBS per kg body weight twice a day (1 ml / kg each time) Mouse was administered, group A was fed twice a day (10 mg / kg each time) with 10 mg per kilogram of mouse body weight of the chlorella powder referred to as group a, group B was fed twice a day (10 mg / kg at each time) with 10 mg per kilogram of mouse body weight of the chlorella powder referred to as group b and 1 ml per kilogram of mouse body weight with fresh chlorella drink referred to as group c (the concentration of group c is 10 mg / ml) was fed to group C twice a day (1 ml / kg each time). The volumes of the tumors were measured on day 15 and day 22, respectively.

Bezugnehmend auf 2A war die Wachstumsrate des Tumors von Gruppe C offensichtlich langsamer als diejenigen bei der Kontrollgruppe, Gruppe A und Gruppe B. Bezugnehmend auf 2B hat sich das Volumen des Tumors bei der Gruppe C verkleinert und ist geschrumpft, wohingegen diejenigen bei der Kontrollgruppe, Gruppe A und Gruppe B allesamt zugenommen haben.Referring to 2A The growth rate of the tumor of group C was apparently slower than that of the control group, group A and group B. Referring to FIG 2 B the volume of the tumor in group C has decreased and shrunk, whereas those in the control group, group A and group B have all increased.

Beispiel 2: Messung des Chlorella -Wachstumsfaktors (CGF)Example 2: Measurement of the Chlorella Growth Factor (CGF)

Der Chlorella -Wachstumsfaktor wurde CNS Nr. 4202, Kategorie Nr. N5134 essbare Grünalgen, entsprechend gemessen, sodass die Menge an CGF des frischen Chlorella -Tranks durch die 4,5 -Sektion des Algenheißwasserextraktwerts bestimmt wurde und mit dem Wert der ähnlichen Produkte verglichen wurde, die kommerziell erhältlich sind.The Chlorella growth factor was measured according to CNS No. 4202, Category No. N5134 edible green algae, so that the amount of CGF in the fresh Chlorella drink was determined by the 4.5 section of the algae hot water extract value and compared with the value of the similar products that are commercially available.

Drei kommerzielle Grünalgenproduktsorten: Sorte T, Sorte G und Sorte V sowie der erfindungsgemäße frische Chlorella -Trank wurden durch das vorstehende Verfahren vermessen und die erhaltenen Indexwerte waren 1,7 (Sorte T), 2,3 (Sorte G), 1,6 (Sorte V) und 3,8 bis 4,9 (der frische Chlorella -Trank der vorliegenden Erfindung). Somit zeigen diese Ergebnisse, dass der Betrag des Chlorella -Wachstumsfaktors für den frischen Chlorella -Trank, der mit dem erfindungsgemäßen Verfahren erhalten wird, mehr als das Zweifache von denjenigen für kommerziell erhältliche Grünalgenprodukte beträgt.Three commercial green algae product varieties: variety T, variety G and variety V and the fresh chlorella potion according to the invention were measured by the above method and the index values obtained were 1.7 (variety T), 2.3 (variety G), 1.6 ( Variety V) and 3.8 to 4.9 (the fresh chlorella potion of the present invention). Thus, these results show that the amount of the Chlorella growth factor for the fresh Chlorella drink obtained by the process according to the invention is more than twice that for commercially available green algae products.

Beispiel 3: Messung von ChlorophyllExample 3: Measurement of chlorophyll

Chlorophyll wird während einer unsachgemäßen Fertigung, Verarbeitung und Lagerung leicht zersetzt. Deshalb ist Chlorophyll repräsentativ für die Stabilität der Qualität von Chlorella. In diesem Beispiel wurde die Menge an Chlorophyll dem CNS Nr. 4202, Kategorie Nr. N5134 in essbaren Grünalgen, entsprechend gemessen und mit dem Wert der ähnlichen Produkte verglichen, die kommerziell erhältlich sind. Die Richtlinie nach CNS Nr. 4202, Kategorie Nr. N5134, erfordert, dass die Menge an Chlorophyll 1500 mg% oder mehr beträgt. Während die Menge an Chlorophyll für den frischen Chlorella -Trank 3800 mg% bis 4900 mg% betrug, war sie bei allen ähnlichen Produkten 2000 mg% oder weniger nach der Messung. Somit ist die Menge an Chlorophyll für den frischen Chlorella -Trank, der nach dem erfindungsgemäßen Verfahren hergestellt wird, mehr als das Zweifache von derjenigen für kommerziell erhältliche Grünalgenprodukte.Chlorophyll is easily broken down during improper manufacture, processing and storage. Therefore chlorophyll is representative of the stability of the quality of Chlorella. In this example, the amount of chlorophyll corresponding to CNS No. 4202, Category No. N5134 in edible green algae was measured and compared to the value of the similar products that are commercially available. The directive according to CNS No. 4202, category No. N5134, requires that the amount of chlorophyll be 1500 mg% or more. While the amount of chlorophyll for the fresh Chlorella drink was 3800 mg% to 4900 mg%, it was 2000 mg% or less after the measurement for all similar products. Thus, the amount of chlorophyll for the fresh Chlorella drink produced by the process according to the invention is more than twice that for commercially available green algae products.

Claims (9)

Verfahren zur Herstellung eines frischen Chlorella - Tranks, welches als Schritte umfasst: steriles Züchten und Rühren von Chlorella in einer Kultur für nicht länger als 3 Tage bis die Konzentration von Chlorella mehr als 0,05 % nach Gewicht beträgt, Entnahme der Chlorella innerhalb von 6 Stunden, um eine geerntete Kultur zu erhalten; schnelles Abkühlen der geernteten Kultur auf unterhalb 1°C aber nicht bis zu einem gefrorenen Zustand, anschließendes Zentrifugieren der abgekühlten geernteten Kultur und Zugabe von sterilem Wasser zu der abgekühlten geernteten Kultur, um eine Chlorella - Suspension zu erhalten, in welcher die Konzentration von Chlorella zwischen 2,5 mg/ml und 12,5 mg/ml beträgt; und Einfrieren und Stehenlassen der Chlorella - Suspension bei einer Temperatur unterhalb 0°C für 12 Stunden bis 24 Stunden bis diese vollständig gefroren ist und anschließendes Erhöhen der Temperatur auf 40°C bis 50°C innerhalb von 10 Minuten, um den frischen Chlorella -Trank zu erhalten.A method of making a fresh Chlorella potion comprising the steps of: sterile growing and stirring Chlorella in a culture for no longer than 3 days until the concentration of Chlorella is more than 0.05% by weight, removing the Chlorella within 6 Hours to get a harvested crop; rapidly cooling the harvested culture to below 1 ° C but not to a frozen state, then centrifuging the cooled harvested culture and adding sterile water to the cooled harvested culture to obtain a chlorella suspension in which the concentration of chlorella is between 2.5 mg / ml and 12.5 mg / ml; and freezing and allowing the Chlorella suspension to stand at a temperature below 0 ° C for 12 hours to 24 hours until it is completely frozen, and then increasing the temperature to 40 ° C to 50 ° C within 10 minutes to obtain the fresh Chlorella drink to obtain. Verfahren nach Anspruch 1, bei welchem in dem Schritt des sterilen Züchtens und Rührens von Chlorella in einer Kultur eine Wasserflussrate zum Rühren der Kultur zwischen 3 m/min und 20 m/min beträgt.Procedure according to Claim 1 in which in the step of sterile growing and stirring chlorella in a culture, a water flow rate for stirring the culture is between 3 m / min and 20 m / min. Verfahren nach Anspruch 2, bei welchem in dem Schritt des sterilen Züchtens und Rührens von Chlorella in einer Kultur Licht bereitgestellt wird, um die Kohlenstoffaufnahme durch Chlorella zu erleichtern, wobei das Umrühren der Chlorella beendet wird, sobald der pH - Wert der Kultur 6,8 erreicht, wodurch die Chlorella stationär ist und in der Kultur suspendiert; wobei wieder mit dem Rühren begonnen wird bis der pH - Wert der Kultur oberhalb von 7,0 liegt, um die Kohlenstoffaufnahme der Chlorella zu erleichtern.Procedure according to Claim 2 in which in the step of sterile growing and stirring chlorella in a culture, light is provided to facilitate chlorella carbon uptake, the stirring of the chlorella being stopped when the pH of the culture reaches 6.8, whereby the Chlorella is stationary and suspended in the culture; stirring is continued until the pH of the culture is above 7.0 in order to facilitate the carbon uptake of the chlorella. Verfahren nach Anspruch 1, bei welchem in dem Schritt des Einfrierens und Stehenlassens der Chlorella - Suspension zum vollständigen Gefrieren bei einer Temperatur unterhalb 0°C für 12 Stunden bis 24 Stunden und dem anschließenden Erhöhen der Temperatur auf 40°C bis 50°C innerhalb von 10 Minuten zum Erhalten des frischen Chlorella -Tranks die Temperatur durch Mikrowellen oder Infrarotstrahlung erhöht wird.Procedure according to Claim 1 in which in the step of freezing and allowing the chlorella suspension to completely freeze at a temperature below 0 ° C for 12 hours to 24 hours and then raising the temperature to 40 ° C to 50 ° C within 10 minutes to obtain of the fresh chlorella drink the temperature is increased by microwaves or infrared radiation. Verfahren nach Anspruch 1, bei welchem in dem Schritt des Einfrierens und Stehenlassens der Chlorella - Suspension zum vollständigen Gefrieren bei einer Temperatur unterhalb 0°C für 12 Stunden bis 24 Stunden und dem anschließenden Erhöhen der Temperatur auf 40°C bis 50°C innerhalb von 10 Minuten zum Erhalten des frischen Chlorella -Tranks die Einfriertemperatur zwischen -1°C und -21°C liegt.Procedure according to Claim 1 in which in the step of freezing and allowing the chlorella suspension to completely freeze at a temperature below 0 ° C for 12 hours to 24 hours and then raising the temperature to 40 ° C to 50 ° C within 10 minutes to obtain of the fresh chlorella drink the freezing temperature is between -1 ° C and -21 ° C. Verfahren nach Anspruch 1, bei welchem in dem Schritt des Einfrierens und Stehenlassens der Chlorella - Suspension zum vollständigen Gefrieren bei einer Temperatur unterhalb 0°C für 12 Stunden bis 24 Stunden und dem anschließenden Erhöhen der Temperatur auf 40°C bis 50°C innerhalb von 10 Minuten zum Erhalten des frischen Chlorella -Tranks der Zeitraum zur Temperaturerhöhung zwischen 3 Minuten und 10 Minuten beträgt.Procedure according to Claim 1 in which in the step of freezing and allowing the chlorella suspension to completely freeze at a temperature below 0 ° C for 12 hours to 24 hours and then raising the temperature to 40 ° C to 50 ° C within 10 minutes to obtain of the fresh chlorella drink, the period for increasing the temperature is between 3 minutes and 10 minutes. Frischer Chlorella -Trank, der durch das Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 6 hergestellt ist.Fresh chlorella potion made by the method of any of the Claims 1 to 6 is made. Verwendung des frischen Chlorella -Tranks nach Anspruch 7 in der Herstellung einer pharmazeutischen Zusammensetzung zur Behandlung von Krebs, wobei die pharmazeutische Zusammensetzung, die den frischen Chlorella -Trank beinhaltet, einem Subjekt verbreicht wird, um eine Antikrebswirkung zu erzielen.Use of the fresh chlorella drink after Claim 7 in the manufacture of a pharmaceutical composition for the treatment of cancer, wherein the pharmaceutical composition containing the fresh chlorella drink is administered to a subject in order to achieve an anti-cancer effect. Verwendung nach Anspruch 8, bei welcher eine therapeutisch wirksame Menge des frischen Chlorella -Tranks 10 mg bis 200 mg an fester Chlorella pro Kilogramm Körpergewicht des Subjekts beträgt.Use after Claim 8 , in which a therapeutically effective amount of the fresh chlorella drink is 10 mg to 200 mg of solid chlorella per kilogram of body weight of the subject.
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