DE10240452A1

DE10240452A1 - New (hetero)aryl-guanidine or -amidine compounds, are potent and selective urokinase-plasminogen activator inhibitors, useful for treating tumors or metastasis formation

Info

Publication number: DE10240452A1
Application number: DE2002140452
Authority: DE
Inventors: Stefan Dr.rer.nat. Sperl
Original assignee: Wilex AG
Current assignee: Heidelberg Pharma AG
Priority date: 2002-09-02
Filing date: 2002-09-02
Publication date: 2004-03-11

Abstract

(Hetero)aryl-guanidine or -amidine compounds (I) are new. (Hetero)aryl-guanidine or -amidine compounds of formula (I) are new. Ar = aromatic or heteroaromatic ring system; E = H2N-C(=NH)-NH- or H2N-C(=NH)-; or Ar+E = fused heteroaromatic group of formula (i) or (ii); Z' = O, NH or CO; B' = SO2, C(R3)2, NR3 or NH; R2 = halo, C(R6)3, C2(R6)5, OC(R6)3 or OC2(R6)5; X1 = NR13R4, OR3, SR3, COOR3, CONR3R4 or COR5; X4 = CO, NH or CH2; W = N, CR3 or CR6; X5 = CH, CR3, CR6 or N; R3 = H or organic group; R13 = -R15-(Y)n-X3-R7 or -R15-(Y)n-NH-CO-CH(R10)-N(R1)-R11; R1 = H; alkyl, alkenyl, alkynyl, aryl or heteroaryl (all optionally substituted (os)); or COOR3, CONR3R4 or COR5; X3 = NH, NR4, O, S, CO, COO, CONH or CONR4; Y = C(R8)2, NH or NR3; R4 = H; or alkyl, alkenyl or alkynyl (all os); R5 = H, alkyl, alkenyl, alkynyl, carboxy-alkyl, carboxy-alkenyl, carboxy-alkynyl, carboxy-aryl, carboxy-heteroaryl, -(CO)NR3R4 or COOR3 (where the alkyl, aryl and heteroaryl moieties are os); R6 = H or halo (especially F); R7 = H; alkyl, alkenyl, alkynyl, aryl or heteroaryl (all os); or COR9; R8 = H; or alkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, alkaryl, heteroaralkyl or bi- or polycyclic residue (all os); R9 = H; or alkyl, alkenyl, alkynyl, aryl or heteroaryl (all os); R10 = -C(R1)2)q-X3-R5; R11 = H, COR12, CON(R12)2, COOR12 or preferably SO2R12; R12 = H; or alkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, heteroaryl, cycloalkyl, aralkyl, alkaryl, heteroaralkyl or bi- or polycyclic residue (all os); R15 = C=X2, NR3 or C(R3)2; X2 = NH, NR4, O or S; n = 0-2; m = 0-5; and p, q = 1-5.

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft neue selektive Inhibitoren des Urokinase-Plasminogenaktivators (uPA, EC 3.4.21.31) sowie deren Verwendung als therapeutische Wirkstoffe zur Behandlung von Urokinase assoziierten Erkrankungen, wie z.B. maligne Tumore und Metastasierung.The present invention relates to new selective inhibitors of the urokinase plasminogen activator (uPA, EC 3.4.21.31) and their use as therapeutic agents for the treatment of urokinase associated diseases such as e.g. malignant tumors and metastasis.

Der Plasminogenaktivator von Urokinase-Typ (uPA) spielt eine Schlüsselrolle bei der Tumorinvasion und Metastasenbildung (Schmitt et al., J. Obst. Gyn. 21 (1995), 151-165). uPA wird in verschiedenen Arten von Tumorzellen überexprimiert (Kwaan, Cancer Metastasis Rev. 11 (1992), 291-311) und bindet an den Tumor-assoziierten uPA-Rezeptor (uPA-R), wo die Aktivierung von Plasminogen zu Plasmin stattfindet. Plasmin ist in der Lage, verschiedene Komponenten der extrazellulären Matrix (ECM) wie Fibronectin, Laminin und Kollagen Typ IV abzubauen. Es aktiviert auch einige andere ECM-abbauende Enzyme, insbesondere Matrix-Metalloproteinasen. Hohe Mengen an Tumor-assoziiertem uPA korrelieren mit einem höheren Metastasierungsrisiko für Krebspatienten (Stephens et al., Breast Cancer Res. & Treat. 52 (1998), 99-111). Eine Hemmung der proteolytischen Aktivität von uPA ist daher ein guter Ansatzpunkt für eine anti-metastatische Therapie.The urokinase-type plasminogen activator (uPA) plays a key role in tumor invasion and metastasis formation (Schmitt et al., J. Fruit. Gyn. 21: 151-165 (1995). uPA comes in different types overexpressed by tumor cells (Kwaan, Cancer Metastasis Rev. 11 (1992), 291-311) and binds the tumor-associated uPA receptor (uPA-R) where activation from plasminogen to plasmin takes place. Plasmin is able various components of the extracellular matrix (ECM) such as fibronectin, To break down laminin and collagen type IV. It also activates some other ECM-degrading enzymes, especially matrix metalloproteinases. High levels of tumor-associated uPA correlate with a higher risk of metastasis for cancer patients (Stephens et al., Breast Cancer Res. & Treat. 52 (1998), 99-111). A Inhibition of uPA proteolytic activity is therefore a good one Starting point for an anti-metastatic therapy.

Ein gemeinsames Merkmal vieler bekannter synthetischer uPA-Inhibitoren ist ein basischer Rest, der Amidino- oder Guanidino-Gruppen enthält, und an Asp¹⁸⁹ in der S1-Spezifitätstasche von uPA binden kann und dort als Arginin-Mimetikum wirkt (Spraggon et al., Structure 3 (1995), 681-691). Die meisten der bekannten Inhibitoren sind jedoch nicht selektiv für uPA, sondern hemmen auch andere Serinproteasen wie Trypsin, Thrombin, Plasmin oder Gewebs-Plasminogenaktivator (tPA).A common feature of many known synthetic uPA inhibitors is a basic residue which contains amidino or guanidino groups and can bind to Asp ¹⁸⁹ in the S1 specificity pocket of uPA and acts there as an arginine mimetic (Spraggon et al., Structure 3: 681-691 (1995). However, most of the known inhibitors are not selective for uPA, but also inhibit other serine proteases such as trypsin, thrombin, plasmin or tissue plasminogen activator (tPA).

p-Aminobenzamidin ist ein moderat selektiver uPA-Inhibitor mit einer Hemmkonstante von 82 μM. Billstroem et al. (Int. J. Cancer 61 (1995), 542-547) konnten eine deutliche Abnahme der Wachstumsrate von DU 145 Tumoren (eine Prostata-Adenokarzinom-Zellinie) in SCID Mäusen bei oraler Verabreichung in einer Tagesdosis von 125 bis 250 mg p-Aminobenzamidin/kg/Tag zeigen. Die Nebenwirkungen waren vernachlässigbar gering.p-aminobenzamidine is a moderate selective uPA inhibitor with an inhibition constant of 82 μM. Billström et al. (Int. J. Cancer 61 (1995), 542-547) could clearly Decrease in the growth rate of DU 145 tumors (a prostate adenocarcinoma cell line) in SCID mice with oral administration in a daily dose of 125 to 250 mg Show p-aminobenzamidine / kg / day. The side effects were negligible low.

Einige monosubstituierte Phenylguanidine haben sich als wirksame und selektive uPA Inhibitoren in vitro erwiesen. Diese kleinen Moleküle zeigen Inhibierungskonstanten im Mikromolarbereich, sie binden jedoch nur in der S1 Tasche von uPA (Yang et al., J. Med. Chem. 33 (1990), 2956-2961). Biologische Untersuchungen mit diesen Verbindungen wurden nicht durchgeführt.Some monosubstituted phenylguanidines have proven to be effective and selective uPA inhibitors in vitro. These little molecules show inhibition constants in the micromolar range, but they bind only in the S1 pocket by uPA (Yang et al., J. Med. Chem. 33 (1990), 2956-2961). Biological studies with these compounds have been made not done.

Das Diuretikum Amilorid ist ein selektiver uPA-Inhibitor (Ki, uPA = 7 μM), der die Bildung von Lungenmetastasen nach i.v. Inokulation von Ratten-Brustadenokarzinomzellen verhindert (Kellen et al., Anticancer Res. 8 (1988), 1373-1376). Einige Derivate von 3-Amidino-phenylalanin haben sich ebenfalls als wirksame Inhibitoren von Serinproteasen erwiesen, diese Verbindungen weisen jedoch im allgemeinen nur eine geringe Selektivität für uPA auf (Stürzebecher et al., J. Med. Chem. 40 (1997), 3091–3099; Stürzebecher et al., J. Enzyme Inhib. 9 (1995), 87-99).The diuretic amiloride is a selective one uPA inhibitor (Ki, uPA = 7 μM), which leads to the formation of lung metastases after i.v. Inoculation of rat breast adenocarcinoma cells prevented (Kellen et al., Anticancer Res. 8 (1988), 1373-1376). Some derivatives of 3-amidino-phenylalanine have also been found these compounds have been shown to be effective inhibitors of serine proteases however, generally have only a low selectivity for uPA (Stürzebecher et al., J. Med. Chem. 40 (1997), 3091-3099; Sturzbecher et al., J. Enzyme Inhib. 9 (1995), 87-99).

Bekannte uPA-Inhibitoren sind Derivate von Benzo[b]thiophen-2-carboxamidin (B428 und B623: K_i, uPA = 0,32 bzw. 0,07 μM; US-Patent 5,340,833). Rabbani et al. (Int. J. Cancer 63 (1995), 840-845) sowie Xing et al. (Cancer Res. 57 (1997), 3585-3593) konnten nach Verabreichung von 4-Iod-benzo[b]-thiophen-2-carboxamidin (B428) eine Abnahme des Tumorwachstums und der Metastasenbildung in einem syngenen Modell für Ratten-Prostatakarzinom bzw. Maus-Mammakarzinom zeigen. Letztere Untersuchungen zeigten eine weitere Abnahme des Primärtumorwachstums bei gemeinsamer Verabreichung von B428 mit dem Antiöstrogen Tamoxifen.Known uPA inhibitors are derivatives of benzo [b] thiophene-2-carboxamidine (B428 and B623: K _i , uPA = 0.32 and 0.07 μM; US Pat. No. 5,340,833). Rabbani et al. (Int. J. Cancer 63 (1995), 840-845) and Xing et al. (Cancer Res. 57 (1997), 3585-3593) were able to decrease tumor growth and metastasis after administration of 4-iodo-benzo [b] -thiophene-2-carboxamidine (B428) in a syngeneic model for rat prostate cancer or Show mouse breast cancer. The latter studies showed a further decrease in primary tumor growth when B428 was co-administered with the anti-estrogen tamoxifen.

Die deutsche Patentanmeldung 199 40 389.9 schlägt die Verwendung von Arylguanidin- und insbesondere Phenylguanidin-Derivaten als selektive uPA-Inhibitoren vor. Diese Verbindungen enthalten einen weiteren Substituenten am aromatischen Ringsystem, vorzugsweise in Para-Position zur Guanidingruppe, der eine gegebenenfalls substituierte Methylengruppe gefolgt von Wasserstoffdonor/Akzeptorfunktionalitäten enthält. Aufgrund dieses Substitutionsmusters weisen die Verbindungen eine besonders hohe Wirksamkeit und Selektivität für uPA auf. Von diesen Verbindungen wird angenommen, dass sie als Arginin-Mimetikum mit dem Aminosäurerest Asp¹⁸⁹ in der S1-Tasche von uPA wechselwirken und eine Wechselwirkung mit der S2- und/oder S3-Tasche von uPA eingehen können.German patent application 199 40 389.9 suggests the use of arylguanidine and especially phenylguanidine derivatives as selective uPA inhibitors. These compounds contain a further substituent on the aromatic ring system, preferably in the para position to the guanidine group, which contains an optionally substituted methylene group followed by hydrogen donor / acceptor functionalities. Because of this substitution pattern, the compounds have a particularly high potency and selectivity for uPA. These compounds are believed to act as an arginine mimetic with the amino acid residue Asp ¹⁸⁹ in the S1 pocket of uPA and to interact with the S2 and / or S3 pocket of uPA.

Die deutsche Patentanmeldung 100 13 715.6 beschreibt weitere Aryl-Guanidin-Derivate, die eine noch spezifischere Wechselwirkung mit uPA, insbesondere mit den Aminosäureresten Gln¹⁹² und/oder Ser ²¹⁴ eingehen können. Diese Verbindungen enthalten neben der Guanidin-Gruppe einen weiteren Substituenten am aromatischen Ringsystem, der eine gegebenenfalls substituierte Methylengruppe gefolgt von einer Wasserstoffdonor-, einer Wasserstoffakzeptor- und wiederum einer Wasserstoffdonorfunktionalität enthält.German patent application 100 13 715.6 describes further aryl guanidine derivatives, which has an even more specific interaction with uPA, in particular with the amino acid residues Gln¹⁹² and / or Ser ²¹⁴ can enter into. Contain these connections in addition to the guanidine group, another aromatic substituent Ring system, which is an optionally substituted methylene group followed by a hydrogen donor, a hydrogen acceptor and again contains hydrogen donor functionality.

Die internationale Patentanmeldung WO 00/04954 beschreibt Arylamidin-Derivate, insbesondere Amidinophenylalanin-Derivate als Urokinaseinhibitoren.The international patent application WO 00/04954 describes arylamidine derivatives, in particular amidinophenylalanine derivatives as urokinase inhibitors.

Eine Aufgabe der vorliegenden Erfindung war die Bereitstellung neuer hochselektiver und hochaktiver Inhibitoren des Urokinase-Plasminogenaktivators.An object of the present invention was to provide new, highly selective and highly active inhibitors of the urokinase plasminogen activator.

Diese Aufgabe wird erfindungsgemäß gelöst durch die Verwendung von Verbindungen der allgemeinen Formel I

worin
Ar ein aromatisches oder heteroaromatisches Ringsystem bedeutet,
E

bedeutet oder Ar und E zusammen einen Rest

bilden, worin Z O, NH oder C=O und X⁴ C=O, HN oder CH₂ sein kann und W N, CR³ oder CR⁶ und X⁵ CH, CR³, CR⁶ oder N sein kann,
B -SO₂-, -CR³ ₂-, -NR³- oder -NH- bedeutet,
X¹ NR¹³R⁴, OR³, SR³, COOR³, CONR³R⁴ oder COR⁵ bedeutet,
R¹ H, einen gegebenenfalls substituierten Alkyl-, Alkenyl-, Alkinyl-, Aryl-, Heteroarylrest oder COOR³, CONR³R⁴ oder COR⁵ bedeutet,
R² Halogen, C(R⁶)₃, C₂(R⁶)₅, OC(R⁶)₃ oder OC₂(R⁶)₅ bedeutet, R³ H oder einen beliebigen organischen Rest bedeutet,
R¹³ eine Gruppe der allgemeinen Formel (IIa) oder (IIb) bedeutet,

X² NH, NR⁴, O oder S bedeutet,
X³ NH, NR⁴, O, S, CO, COO, CONH oder CONR⁴ bedeutet,
Y C(R⁸)₂, NH oder NR³ bedeutet,
R⁴ H oder einen verzweigt oder unverzweigten, gegebenenfalls substituierten Alkyl-, Alkenyl- oder Alkinylrest bedeutet,
R⁵ H, einen Alkyl-, Alkenyl-, Alkinyl-, Carboxy-alkyl-, Carboxy-akenyl-, Carboxyl-alkinyl-, Carboxy-aryl-, Carboxy-heteroaryl-, -(CO)NR³R⁴ oder -COO-R³ bedeutet, wobei die Alkyl-, Aryl- und Heteroarylreste gegebenenfalls substituiert sein können,
R⁶ jeweils unabhängig H oder Halogen, insbesondere F, ist,
R⁷ H oder einen gegebenenfalls substituierten Alkyl-, Alkenyl-, Alkinyl-, Aryl- oder Heteroarylrest oder -COR⁹ bedeutet,
R⁸ jeweils unabhängig H, oder einen verzweigten oder unverzweigten, gegebenenfalls substituierten Alkyl-, Alkenyl-, Alkinyl-, Aryl-, Heteroaryl-, Aralkyl-, Alkylaryl-, Heteroaralkyl-Rest oder/und einen substituierten oder unsubstituierten bi- oder polycyclischen Rest bedeutet,
R⁹ H oder einen verzweigten oder unverzweigten, gegebenenfalls substituierten Alkyl-, Alkenyl-, Alkinyl-, Aryl- oder/und Heteroarylrest bedeutet,
R¹⁰ ein Rest (C(R¹)₂)_o-X³R⁵ bedeutet,
R¹¹ H, einen Carbonylrest-CO-R¹², einen Carbonamidrest-CONR¹² ₂, einen Oxycarbonylrest -COO-R¹² oder besonders bevorzugt einen Sulfonylrest -SO₂R¹² bedeutet,
R¹² H, einen verzweigten oder unverzweigten, substituierten oder unsubstituierten Alkyl-, Alkenyl-, Alkinyl-, Aryl- oder Heteroarylrest oder einen substituierten oder unsubstituierten cyclischen Alkylrest oder einen substituierten oder unsubstituierten Aralkyl-, Alkylaryl- oder Heteroaralkylrest oder einen substituierten oder unsubstituierten bi- oder polycyclischen Rest bedeutet,
R¹⁵ C = X², NR³ oder CR³ ₂ darstellt,
n eine ganze Zahl von 0 bis 2 ist,
m eine ganze Zahl von 0 bis 5 ist,
o eine ganze Zahl von 1 bis 5 ist,
p eine ganze Zahl von 1 bis 5 ist, oder Salzen dieser Verbindungen zur Herstellung eines Mittels zur Hemmung des Urokinase-Plasminogenaktivators.This object is achieved according to the invention by using compounds of the general formula I.

wherein
Ar represents an aromatic or heteroaromatic ring system,
e

means or Ar and E together represent a remainder

form in which ZO, NH or C = O and X ^{4 can be} C = O, HN or CH ₂ and WN, CR ³ or CR ⁶ and X ^{5 can be} CH, CR ³ , CR ⁶ or N,
B denotes -SO ₂ -, -CR ³ ₂ -, -NR ³ - or -NH-,
X ¹ denotes NR ¹³ R ⁴ , OR ³ , SR ³ , COOR ³ , CONR ³ R ⁴ or COR ⁵ ,
R ^{1 is} H, an optionally substituted alkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, heteroaryl radical or COOR ³ , CONR ³ R ⁴ or COR ⁵ ,
R ^{2 is} halogen, C (R ⁶ ) ₃ , C ₂ (R ⁶ ) ₅ , OC (R ⁶ ) ₃ or OC ₂ (R ⁶ ) ₅ , R ^{3 is} H or any organic radical,
R ^{13 represents} a group of the general formula (IIa) or (IIb),

X ² denotes NH, NR ⁴ , O or S,
X ³ denotes NH, NR ⁴ , O, S, CO, COO, CONH or CONR ⁴ ,
YC (R ⁸ ) ₂ , NH or NR ³ means
R ^{4 is} H or a branched or unbranched, optionally substituted alkyl, alkenyl or alkynyl radical,
R ⁵ H, an alkyl, alkenyl, alkynyl, carboxy-alkyl, carboxy-akenyl, carboxyl-alkynyl, carboxy-aryl, carboxy-heteroaryl, - (CO) NR ³ R ⁴ or -COO -R ³ means, where the alkyl, aryl and heteroaryl radicals can be optionally substituted,
R ^{6 is} each independently H or halogen, in particular F,
R ⁷ H or an optionally substituted alkyl, alkenyl, alkynyl, aryl or heteroaryl radical or -COR ⁹ means
R ⁸ each independently represents H, or a branched or unbranched, optionally substituted alkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, alkylaryl, heteroaralkyl radical or / and a substituted or unsubstituted bi- or polycyclic radical means
R ⁹ denotes H or a branched or unbranched, optionally substituted alkyl, alkenyl, alkynyl, aryl or / and heteroaryl radical,
R ¹⁰ denotes a radical (C (R ¹ ) ₂ ) _o -X ³ R ⁵ ,
R ¹¹ denotes H, a carbonyl radical -CO-R ¹² , a carbonamide radical-CONR ¹² ₂ , an oxycarbonyl radical -COO-R ¹² or particularly preferably a sulfonyl radical -SO ₂ R ¹² ,
R ¹² H, a branched or unbranched, substituted or unsubstituted alkyl, alkenyl, alkynyl, aryl or heteroaryl radical or a substituted or unsubstituted cyclic alkyl radical or a substituted or unsubstituted aralkyl, alkylaryl or heteroaralkyl radical or a substituted or unsubstituted bi - or polycyclic radical means
R ^{15 represents} C = X ² , NR ³ or CR ³ ₂ ,
n is an integer from 0 to 2,
m is an integer from 0 to 5,
o is an integer from 1 to 5,
p is an integer from 1 to 5, or salts of these compounds to prepare an agent for inhibiting the urokinase plasminogen activator.

Die Verbindungen können als Salze, vorzugsweise als physiologisch verträgliche Säuresalze, z.B. als Salze von Mineralsäuren, besonders bevorzugt als Hydrochloride oder als Salze von geeigneten organischen Säuren vorliegen. Die Guanidiniumgruppe kann gegebenenfalls Schutzfunktionen tragen, die vorzugsweise unter physiologischen Bedingungen abspaltbar sind. Die Verbindungen können als optisch reine Verbindungen oder als Gemische von Enantiomeren oder/und Diastereoisomeren vorliegen.The connections can be made as Salts, preferably as physiologically acceptable acid salts, e.g. as salts of Mineral acids, particularly preferably as hydrochlorides or as salts of suitable organic acids available. The guanidinium group may have protective functions wear, which can preferably be split off under physiological conditions are. The connections can as optically pure compounds or as mixtures of enantiomers or / and diastereoisomers are present.

In den Verbindungen der allgemeinen Formel (I) ist Ar vorzugsweise ein aromatisches oder heteroaromatisches Ringsystem mit einem Ring.In the connections of the general Formula (I) Ar is preferably an aromatic or heteroaromatic Ring system with a ring.

Weiterhin bevorzugt sind Verbindungen, in denen Ar und E zusammen ein bicyclisches System bilden. Heteroaromatische Systeme enthalten bevorzugt ein oder mehrere O-, S- oder/und N-Atome. Ein bevorzugtes aromatisches Ringsystem ist ein Benzolring, bevorzugte heteroaromatische Ringsysteme sind Pyridinyl, Pyrimidinyl oder Pyrazinyl, insbesondere mit Stickstoff an Position z. Bevorzugte bicyclische Ringsysteme sind solche mit Stickstoff oder Sauerstoff an den Positionen Z oder W. Am meisten bevorzugt ist Ar ein Benzolring.Also preferred are compounds in which Ar and E together form a bicyclic system. Heteroaromatic Systems preferably contain one or more O, S or / and N atoms. A preferred aromatic ring system is a benzene ring, preferred heteroaromatic ring systems are pyridinyl, pyrimidinyl or pyrazinyl, especially with nitrogen at position z. Preferred bicyclic Ring systems are those with nitrogen or oxygen at the positions Z or W. Most preferably, Ar is a benzene ring.

Besonders bevorzugt sind Verbindungen mit den Strukturelementen

Connections with the structural elements are particularly preferred

In den Verbindungen der allgemeinen Formel (I) sind in dem Ringsystem Ar die Substituenten B und E, z.B. NHC(NH)NH₂ (Guanidino) oder NH₂CNH (Amidino) vorzugsweise in Meta- oder Para-Position und besonders bevorzugt in Para-Position zueinander angeordnet. Darüber hinaus kann Ar noch ein oder mehrere weitere von Wasserstoff verschiedene Substituenten R² enthalten. Vorzugsweise ist die Anzahl der Substituenten R² 0, 1, 2 oder 3, besonders bevorzugt 0 oder 1 und am meisten bevorzugt 0, R² kann Halogen, C(R⁶)₃, C₂(R⁶)₅, OC(R⁶)₃ oder OC₂(R⁶)₅ bedeuten, wobei R⁶ jeweils unabhängig H oder Halogen, insbesondere F ist. Bevorzugte Beispiele für R² sind Halogenatome (F, Cl, Br oder I), CH₃, CF₃, OH, OCH₃ oder OCF₃.In the compounds of the general formula (I) in the ring system Ar the substituents B and E, for example NHC (NH) NH ₂ (guanidino) or NH ₂ CNH (amidino) are preferably in the meta or para position and particularly preferably in para -Position to each other. Ar can also contain one or more further substituents R ² other than hydrogen. The number of substituents R ² is preferably 0, 1, 2 or 3, particularly preferably 0 or 1 and most preferably 0, R ² can be halogen, C (R ⁶ ) ₃ , C ₂ (R ⁶ ) ₅ , OC (R ⁶ ) ₃ or OC ₂ (R ⁶ ) ₅ , where R ^{6 is} each independently H or halogen, in particular F. Preferred examples of R ² are halogen atoms (F, Cl, Br or I), CH ₃ , CF ₃ , OH, OCH ₃ or OCF ₃ .

Die erfindungsgemäßen Verbindungen, enthaltend eine Guanidinogruppe, sind durch eine hohe Selektivität ausgezeichnet.The compounds of the invention containing a guanidino group, are distinguished by a high selectivity.

Für die Inhibitoraktivität ist der Substituent B von Bedeutung. Vorzugsweise wird B aus -SO₂-, -NR³-, -NH- oder/und -CR³ ₂, insbesondere – CR¹ ₂- ausgewählt.The substituent B is important for the inhibitor activity. B is preferably selected from -SO ₂ -, -NR ³ -, -NH- or / and -CR ³ ₂ , in particular - CR ¹ ₂ -.

R¹ kann H oder ein gegebenenfalls substituierter Alkyl-, Alkenyl-, Alkinyl-, Aryl- oder/und Heteroarylrest oder COOR³, CONR³R⁴ oder COR⁵ sein. Soweit nicht anders angegeben, ist ein Alkylrest wie hierin verwendet, bevorzugt eine geradkettige oder verzweigte C₁-C₃₀-Alkylgruppe, bevorzugt eine C₁-C₁₀-Alkylgruppe, insbesondere eine C₁-C₄-Alkylgruppe, oder eine C₃-C₃₀ Cycloalkylgruppe, insbesondere eine C₃-C₈-Cycloalkylgruppe, die beispielsweise mit C₁-C₃-Alkoxy, Hydroxyl, Carboxyl, Amino, Sulfonyl, Nitro, Cyano, Oxo oder/und Halogen, aber auch mit Aryl- oder Heteroarylresten substituiert sein kann. Alkenyl- und Alkinylreste sind hierin, soweit nicht anders angegeben, vorzugsweise C₂-C₁₀-Gruppen, insbesondere C₂-C₄-Gruppen, die gegebenenfalls wie zuvor angegeben substituiert sein können. Aryl- und Heteroarylreste können beispielsweise mit C₁-C₆-Alkyl, C₁-C₃-Alkoxy-Hydroxyl, Carboxyl, Sulfonyl, Nitro, Cyano oder/und Oxo substituiert sein. Am meisten bevorzugt ist R¹ H.R ¹ can be H or an optionally substituted alkyl, alkenyl, alkynyl, aryl or / and heteroaryl rest or COOR ³ , CONR ³ R ⁴ or COR ⁵ . Unless otherwise stated, an alkyl radical as used herein is preferably a straight-chain or branched C ₁ -C ₃₀ -alkyl group, preferably a C ₁ -C ₁₀ -alkyl group, in particular a C ₁ -C ₄ -alkyl group, or a C ₃ - C ₃₀ cycloalkyl group, in particular a C ₃ -C ₈ cycloalkyl group, for example with C ₁ -C ₃ alkoxy, hydroxyl, carboxyl, amino, sulfonyl, nitro, cyano, oxo or / and halogen, but also with aryl or heteroaryl radicals can be substituted. Unless stated otherwise, alkenyl and alkynyl radicals are preferably C ₂ -C ₁₀ groups, in particular C ₂ -C ₄ groups, which can optionally be substituted as indicated above. Aryl and heteroaryl radicals can be substituted, for example, with C ₁ -C ₆ alkyl, C ₁ -C ₃ alkoxy hydroxyl, carboxyl, sulfonyl, nitro, cyano or / and oxo. Most preferably R ^{1 is} H.

X¹ steht bevorzugt für NR¹³R⁴.X ¹ preferably represents NR ¹³ R ⁴ .

R³ kann H oder einen beliebigen organischen Rest bedeuten. Bei dem organischen Rest handelt es sich insbesondere um einen Rest mit 1 bis 30 Kohlenstoffatomen. Dieser Rest kann gesättigt oder ungesättigt, linear, verzweigt oder cyclisch sein und gegebenenfalls Substituenten enthalten.R ³ can be H or any organic radical. The organic radical is in particular a radical with 1 to 30 carbon atoms. This radical can be saturated or unsaturated, linear, branched or cyclic and optionally contain substituents.

In einer besonders bevorzugten Ausführungsform stellt B die Gruppierung -SO₂- dar, sodass es sich um Sulfoverbindungen handelt. Die SO₂-Gruppe ist dabei isoster zur CH₂-Gruppe. Durch den Austausch der CH₂-Gruppe durch die isostere SO₂-Gruppe werden zusätzliche H-Brücken zu NH-Gruppen von Gly 193, Asp 194 und Ser 195 von Urokinase möglich, was zu einer weiteren Verbesserung der inhibitorischen Aktivität führt (vgl. 1).In a particularly preferred embodiment, B represents the group -SO ₂ -, so that it is sulfo compounds. The SO ₂ group is isosteric to the CH ₂ group. By replacing the CH ₂ group with the isosteric SO ₂ group, additional hydrogen bonds to NH groups of Gly 193, Asp 194 and Ser 195 of urokinase are possible, which leads to a further improvement in the inhibitory activity (cf. 1 ).

R¹³ stellt eine Gruppe der Formel (IIa) oder (IIb)

dar. In Formel (IIa) bedeutet R¹⁵ C = X² oder CR³, wobei X² NH, NR⁴, O oder S ist und X³ NH, NR⁴, O, S, CO, COO, CONH oder CONR⁴. Y stellt C(R⁸)₂, NH oder NR³ dar. R⁴ wiederum bedeutet H oder einen verzweigten oder unverzweigten, gegebenenfalls substituierten Alkyl-, Alkenyl- oder Alkinylrest. R⁷ bedeutet H oder einen gegebenenfalls substituierten Alkyl-, Alkenyl-, Alkinyl-, Aryl- oder Heteroarylrest oder -COR⁹, wobei R⁹ wiederum H oder einen verzweigten oder unverzweigten, gegebenenfalls substituierten Alkyl-, Alkenyl-, Alkinyl-, Aryl- oder/und Heteroarylrest darstellt.R ¹³ represents a group of the formula (IIa) or (IIb)

In formula (IIa) R ^{15 is} C = X ² or CR ³ , where X ^{2 is} NH, NR ⁴ , O or S and X ^{3 is} NH, NR ⁴ , O, S, CO, COO, CONH or CONR ⁴ , Y represents C (R ⁸ ) ₂ , NH or NR ^3. R ⁴ in turn represents H or a branched or unbranched, optionally substituted alkyl, alkenyl or alkynyl radical. R ⁷ denotes H or an optionally substituted alkyl, alkenyl, alkynyl, aryl or heteroaryl radical or -COR ⁹ , where R ⁹ in turn is H or a branched or unbranched, optionally substituted alkyl, alkenyl, alkynyl, aryl or or / and heteroaryl radical.

Bevorzugt stellt R¹³ eine Gruppe der Formel (IIb) dar.R ¹³ preferably represents a group of the formula (IIb).

R⁸ ist bevorzugt Wasserstoff oder (CH₂)_m-OH, besonders bevorzugt H. R¹⁰ stellt einen Rest (CRR¹)₂)_o-X³R⁵ dar. In diesem Fall ist R¹ besonders bevorzugt Wasserstoff, X³ besonders bevorzugt Sauerstoff, R⁵ besonders bevorzugt Wasserstoff und o besonders bevorzugt 1.R ⁸ is preferably hydrogen or (CH ₂ ) _m -OH, particularly preferably H. R ¹⁰ represents a radical (CRR ¹ ) ₂ ) _o -X ³ R ^5. In this case R ^{1 is} particularly preferably hydrogen, X ³ particularly preferably oxygen, R ⁵ particularly preferably hydrogen and o particularly preferably 1.

R¹¹ stellt besonders bevorzugt einen Sulfonylrest -SO₂-R¹² dar, wobei R¹² bevorzugt ein Aralkylrest, insbesondere ein Benzylrest ist. In einer besonders bevorzugten Ausführungsform ist der Benzylrest an meta- und/oder para-Position und Halogen substituiert, am meisten bevorzugt mit Cl^–. In einer weiteren bevorzugten Ausführungsform ist R¹² ein Adamantyl- oder Kampferrest.R ¹¹ particularly preferably represents a sulfonyl radical -SO ₂ -R ¹² , where R ^{12 is} preferably an aralkyl radical, in particular a benzyl radical. In a particularly preferred embodiment, the benzyl radical is substituted at the meta and / or para position and halogen, most preferably with Cl ^- . In a further preferred embodiment, R ^{12 is} an adamantyl or camphor residue.

R¹⁵ stellt besonders bevorzugt einen Carbonylrest-CO, Aminrest-NR³- oder/und Alkylrest-CR³ ₂, bevorzugt -CR¹ ₂- und am meisten bevorzugt -CH₂-dar. Verbindungen, in denen R¹⁵ CH₂ darstellt, zeichnen sich insbesondere durch eine einfache Synthese aus. Da diese Position nicht in die Bildung von H-Brücken mit der Urokinase involviert ist, kann anstelle eines Carbonyls ohne weiteres eine CH₂-Gruppe vorhanden sein, ohne dass damit ein Verlust an inhibitorischer Aktivität verbunden wäre.R ¹⁵ is particularly preferably a carbonyl group-CO, amine group-NR ³ - and / or alkyl-CR ³ _2, preferably -CR ¹ ₂ -, and most preferably -CH ₂ -dar. Compounds in which R ^{15 represents} CH ₂ are distinguished in particular by a simple synthesis. Since this position is not involved in the formation of H-bonds with the urokinase, a CH ₂ group can easily be present instead of a carbonyl without this being associated with a loss of inhibitory activity.

Weiterhin bevorzugt sind Verbindungen, welche als Baustein eine nicht natürliche Aminosäure enthalten, welche insbesondere den Rest R¹⁰ ausmacht. Weiterhin bevorzugt sind Azaverbindungen mit der Gruppierung NH-NH, in denen z. B. Y = NH und n = 1 (Verbindungen der Formel IIb).Also preferred are compounds which contain a non-natural amino acid as a building block, which in particular makes up the radical R ¹⁰ . Also preferred are aza compounds with the grouping NH-NH, in which, for. B. Y = NH and n = 1 (compounds of formula IIb).

Weiterhin bevorzugt sind Verbindungen, in denen X' die Bedeutung

hat.Also preferred are compounds in which X 'has the meaning

Has.

Am meisten bevorzugt sind die Verbindungen N-[2-(4-Guanidinobenzolsulfonylamino)-ethyl]-3-hydroxy-2-phenylmethansulfonylaminopropionamid Hydrochlorid, Bz-SO₂-(D)-Ser-(Aza-Gly)-4-Guanidinobenzylamid Hydrochlorid oder N-(4-Guanidino-benzyl)-2-(3-hydroxy-2-phenylmethan-sulfonylamino-propionylamino)-4-phenyl-butyramid Hydrochlorid.Most preferred are the compounds N- [2- (4-guanidinobenzenesulfonylamino) ethyl] -3-hydroxy-2-phenylmethanesulfonylaminopropionamide hydrochloride, Bz-SO ₂ - (D) -Ser- (Aza-Gly) -4-guanidinobenzylamide hydrochloride or N- (4-guanidino-benzyl) -2- (3-hydroxy-2-phenylmethane-sulfonylamino-propionylamino) -4-phenyl-butyramide hydrochloride.

Die Verbindungen der allgemeinen Formel (I) können beispielsweise wie in den Syntheseschemata in 2a, b und c am Beispiel der besonders bevorzugten Verbindungen gezeigt, hergestellt werden.The compounds of general formula (I) can, for example, as in the synthesis schemes in 2a . b and c shown using the example of the particularly preferred compounds.

Die erfindungsgemäßen Urokinaseinhibitoren können gegebenenfalls zusammen mit geeigneten pharmazeutischen Hilfs- oder Trägerstoffen zur Herstellung von Arzneimitteln oder in der Diagnostik verwendet werden. Dabei ist eine Verabreichung in Kombination mit anderen Wirkstoffen, z.B. anderen Urokinaseinhibitoren, wie etwa Antikörpern oder/und Peptiden, aber auch mit Chemotherapeutika und Zytostatika oder/und zytostatischen Wirkstoffen möglich.The urokinase inhibitors according to the invention can, if appropriate together with suitable pharmaceutical auxiliaries or carriers used for the manufacture of drugs or in diagnostics. It is an administration in combination with other active ingredients, e.g. other urokinase inhibitors, such as antibodies or / and Peptides, but also with chemotherapy and cytostatics and / or cytostatic Active substances possible.

Die Arzneimittel können bei Menschen und Tieren topisch, oral, rektal oder parenteral, z.B. intravenös, subkutan, intramuskulär, intraperitoneal, sublingual, nasal oder/und inhalativ, z.B. in Form von Tabletten, Dragees, Kapseln, Pellets, Suppositorien, Lösungen, Emulsionen, Suspensionen, Liposomen, Inhalationssprays oder transdermalen Systemen, wie Pflastern, verabreicht werden.The medicines can be used for Humans and animals topically, orally, rectally or parenterally, e.g. intravenously, subcutaneously, intramuscularly, intraperitoneal, sublingual, nasal and / or inhalation, e.g. in shape of tablets, coated tablets, capsules, pellets, suppositories, solutions, Emulsions, suspensions, liposomes, inhalation sprays or transdermal ones Systems such as plasters can be administered.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen sind zur Bekämpfung von Krankheiten geeignet, die mit einer pathologischen Überexpression von uPA oder/und Urokinase-Plasminogenaktivatorrezeptor (uPAR) assoziiert sind. Sie sind beispielsweise in der Lage, hocheffizient das Wachstum oder/und die Ausbreitung der malignen Tumoren sowie die Metastasierung von Tumoren zu hemmen. Dabei können die uPA-Inhibitoren gegebenenfalls zusammen mit anderen Tumormitteln oder mit anderen Behandlungsarten, z.B. Bestrahlung oder chirurgischen Eingriffen, eingesetzt werden. Weiterhin sind die erfindungsgemäßen Inhibitoren auch für andere uPA-assoziierte oder/und uPAR-assoziierte Erkrankungen wirksam.The compounds of the invention are for combating Diseases suitable with pathological overexpression of uPA and / or urokinase plasminogen activator receptor (uPAR) are associated. For example, you are able to highly efficiently grow or / and the spread of the malignant tumors as well as the metastasis inhibit of tumors. You can the uPA inhibitors, if necessary, together with other tumor agents or with other types of treatment, e.g. Radiation or surgical Interventions, used. Furthermore, the inhibitors according to the invention also for other uPA-associated and / or uPAR-associated diseases effective.

Erfindungsgemäße uPA-Inhibitoren sind vorzugsweise dadurch gekennzeichnet, daß sie mindestens einen zweifach, vorzugsweise mindestens einen fünffach und besonders bevorzugt einen mindestens 10-und bis zu 1.000-fach geringeren K_i-Wert für uPA gegenüber tPA, Plasmin oder/und Thrombin aufweisen. Weiterhin ist bemerkenswert, dass die erfindungsgemäßen Verbindungen die Blutgerinnung nur geringfügig beeinflussen, da sie für eine effektive Hemmung von Thrombin, Plasmin und Faktor Xa zu hohe K_i-Werte haben.The uPA inhibitors according to the invention are preferably characterized in that they have at least two, preferably at least five and particularly preferably an at least 10 and up to 1,000 times lower K _i value for uPA compared to tPA, plasmin and / or thrombin. It is also noteworthy that the compounds according to the invention have only a slight influence on blood coagulation, since they have K _i values which are too high for effective inhibition of thrombin, plasmin and factor Xa.

Die erfindungsgemäßen Substanzen der Formel (I) können in Kombination mit physiologisch wirksamen Substanzen eingesetzt werden, z.B. mit Radiomarkierungen oder mit zytotoxischen Mitteln, z. B. Chemotherapeutika wie cis-Platin oder 5-Fluor-uracil, oder Peptiden. Weiterhin können die Substanzen auch in die Membran von Trägervesikeln, z.B. Liposomen, eingebaut werden oder/und zusammen mit in den Trägervesikeln eingeschlossenen Wirksubstanzen, z.B. zytotoxischen Mitteln, wie etwa Doxorubicin, verabreicht werden.The substances of the formula (I) according to the invention can used in combination with physiologically active substances e.g. with radiolabels or with cytotoxic agents, z. B. chemotherapeutic agents such as cis-platinum or 5-fluorouracil, or Peptides. Can continue the substances also into the membrane of carrier vesicles, e.g. liposomes be installed and / or together with enclosed in the carrier vesicles Active substances, e.g. cytotoxic agents such as doxorubicin, be administered.

Durch die Erfindung wird ein Verfahren zur Urokinasehemmung bei Lebewesen, insbesondere bei Menschen, durch Verabreichung einer wirksamen Menge mindestens einer Verbindung der allgemeinen Formel (I) bereitgestellt. Die Dosierung der Verbindung liegt üblicherweise im Bereich von 0,01 bis 100 mg/kg Körpergewicht pro Tag. Die Dauer der Behandlung hängt von der Schwere der Erkrankung ab und kann von einer einmaligen Gabe bis zu einer mehrwöchigen oder sogar mehrmonatigen Behandlung, die gegebenenfalls in Intervallen wiederholt werden kann, reichen.The invention provides a method for urokinase inhibition in living beings, especially in humans Administration of an effective amount of at least one compound of the general formula (I). The dosage of the compound usually lies in the range of 0.01 to 100 mg / kg body weight per day. The duration the treatment depends depends on the severity of the disease and can be a one-off Give up to a few weeks or even multi-month treatment, which may be at intervals can be repeated, sufficient.

Schließlich betrifft die Erfindung neue basische Phenylalaninderivate der allgemeinen Formel (I).Finally, the invention relates new basic phenylalanine derivatives of the general formula (I).

Die Erfindung soll durch die folgenden Beispiele und die beigefügten Figuren näher erläutert werden.The invention is intended to be accomplished by the following Examples and the attached Figures closer explained become.

1 zeigt die Wechselwirkungen zwischen erfindungsgemäßen Inhibitoren, in denen B eine SO₂-Gruppe darstellt mit Urokinase. Zu sehen sind die ausbildeten Wasserstoffbrücken zwischen der SO₂-Gruppe und den NH-Gruppen im Grundgerüst der Urokinase von Gly 193, Asp 194 und Ser 195. 1 shows the interactions between inhibitors according to the invention, in which B represents a SO ₂ group with urokinase. The hydrogen bonds formed between the SO ₂ group and the NH groups in the basic structure of the urokinase of Gly 193, Asp 194 and Ser 195 can be seen.

2a zeigt ein Syntheseschema zur Herstellung der besonders bevorzugten Verbindung ST-550, 2b ST-544 und 2c ST-568. Die Verbindungen der Formel (I) können gemäß diesem allgemeinen Reaktionsschema, ausgehend von p-Amino-benzylamin, hergestellt werden. In 2 bedeutet Z die Schutzgruppe Benzyloxycarbonyl und Boc die Schutzgruppe tert-Butyloxycarbonyl. 2a shows a synthetic scheme for the preparation of the particularly preferred compound ST-550, 2 B ST-544 and 2c ST-568th The compounds of formula (I) can be prepared according to this general reaction scheme, starting from p-amino-benzylamine. In 2 Z means the protective group benzyloxycarbonyl and Boc the protective group tert-butyloxycarbonyl.

Beispiel 1:Example 1:

Synthesebeschreibung N-[2-(4-Guanidino-benzenesulfonylamino)-ethyl]-3-hydroxy-2-phenylmethansulfonylamino-propionamide Hydrochloride [ST-568]Synthesis description N- [2- (4-guanidino-benzenesulfonylamino) -ethyl] -3-hydroxy-2-phenylmethanesulfonylamino-propionamide Hydrochloride [ST-568]

4-Nitrophenylsulfonylchlorid (1) wird in einem inerten organischen Lösungsmittel (z. B. Dichlormethan) unter Zugabe einer organischen Base mit N-Z-Diaminoethan Hydrochlorid (2) zur Verbindung 3 umgesetzt. Katalytische Hydrierung von 3 an einem Pd-Aktivkohle-Katalysator wandelt die Nitrogruppe zum korrespondierenden Amin um und spaltet zugleich die Z-Schutzgruppe ab (4). Die Aminoethylgruppe von Verbindung 4 lässt sich mit in der Peptidchemie üblichen Kupplungsreagenzien (z.B. PyBOP, HBTU oder DCC und HOBt) zusammen mit Z-(D)-Ser(tBu)-OH zum entsprechenden Amid 5 umsetzen. Die Umsetzung zum vollgeschützten Intermediat 6 erfolgt mit einem geeigneten Guanidinylierungsreagens wie z.B. N,N'-Bis(tert-butoxycarbonyl)-1H-pyrazol-1-carboxamidin. Anschließende Abspaltung der Z-Schutzgruppe durch katalytische Hydrierung am Pd-Aktivkohle-Katalysator (7) und Umsetzung mit Benzylsulfonylchlorid in einem inerten organischen Lösungsmittel (z.B. Dichlormethan) unter Zugabe einer organischen Base liefert das vollgeschützte Produkt B. Die Abspaltung der Schutzgruppen (BOC und t-Butylether) erfolgt durch Lösen der Verbindung 8 in Säure (z.B. Trifluoressigsäure oder 4M HCl_g) in Dioxan), wodurch das korrespondierende Salz der Zielverbindung N-(2-(4-Guanidino-benzenesulfonylamino)-ethyl]-3-hydroxy-2-phenylmethanesulfonylamino-propionamide (9) erhalten wird.4-nitrophenylsulfonyl chloride (1) is in an inert organic solvent (e.g. dichloromethane) with the addition of an organic base with NZ-diaminoethane hydrochloride (2) to give compound 3. Catalytic hydrogenation of 3 on a Pd activated carbon catalyst converts the nitro group to the corresponding amine and at the same time cleaves the Z protecting group (4). The aminoethyl group of compound 4 can be converted to the corresponding amide 5 with Z- (D) -Ser (tBu) -OH using coupling reagents customary in peptide chemistry (eg PyBOP, HBTU or DCC and HOBt). The conversion to fully protected intermediate 6 is carried out using a suitable guanidinylation reagent such as N, N'-bis (tert-butoxycarbonyl) -1H-pyrazole-1-carboxamidine. Subsequent removal of the Z protective group by catalytic hydrogenation on the Pd activated carbon catalyst (7) and reaction with benzylsulfonyl chloride in an inert organic solvent (for example dichloromethane) with the addition of an organic base provides the fully protected product B. The removal of the protective groups (BOC and t -Butyl ether) is carried out by dissolving compound 8 in acid (for example trifluoroacetic acid or 4M HCl _g ) in dioxane), as a result of which the corresponding salt of the target compound N- (2- (4-guanidino-benzenesulfonylamino) ethyl] -3-hydroxy-2 -phenylmethanesulfonylamino-propionamide (9) is obtained.

Beispiel 2:Example 2:

Synthesebeschreibung Bz-SO₂-(D)-Ser-(Aza-Gly)-4-Guanidinobenzylamid Hydrochlorid [ST-544]Synthesis description Bz-SO ₂ - (D) -Ser- (Aza-Gly) -4-guanidinobenzylamide hydrochloride [ST-544]

Die Aminomethylgruppe des Edukts 4-Aminobenzylamin (10) wird zunächst mit einer geeigneten Schutzgruppe versehen, etwa durch Umsetzen von 10 mit Chlorameisensäurebenzylester oder Z-OSu zu Verbindung 11. Die Umsetzung mit einem geeignet geschützten Guanidinylierungsreagens wie z.B. N,N'-Bis(tert-butoxy-carbonyl)-1 H-pyrazol-1-carboxamidin liefert Verbindung 12, deren Z-Schutzgruppe durch katalytische Hydrierung an einem Pd-Aktivkohle-Katalysator abgespalten werden kann (13). Die somit freigesetzte Aminofunktion wird unter Kühlung und Zugabe von einem Äquivalent organischer Base mit Triphosgen (einem festen und somit weniger giftigen Phosgenersatz) und anschließend in situ mit Benzylcarbazat zu Verbindung 14 (Z-AzaGly-4-(N,N'-Bis-BOC-Guanidinobenzyl)amid] umgesetzt. Die Z-Schutzgruppe wird wie für Verbindung 13 beschrieben durch Hydrieren abgespalten (15) und mit Z-(D)-Ser(tBu)-OH und in der Peptidchemie üblichen Kupplungsreagenzien (z.B. PyBOP, HBTU oder DCC und HOBt) zum Amid 16 umgesetzt. Die Z-Schutzgruppe wird erneut katalytisch abgespalten (17) und das resultierende freie Amin mit Benzylsulfonylchlorid in einem inerten organischen Lösungsmittel (z.B. Dichlormethan) unter Zugabe einer organischen Base zum korrespondierenden Sulfonamid 18 umgesetzt. Die Abspaltung der verbliebenen Schutzgruppen erfolgt durch Reaktion in saurer Lösung (z.B. in Trifluoressigsäure oder in 4M HCl_g/Dioxan) zum entsprechenden Salz der Zielverbindung Bz-SO₂-(D)-Ser-(Aza-Gly)-4-Guanidinobenzylamid (19).The aminomethyl group of the educt 4-aminobenzylamine (10) is first provided with a suitable protective group, for example by reacting 10 with benzyl chloroformate or Z-OSu to give compound 11. The reaction with a suitably protected guanidinylation reagent such as N, N'-bis (tert -butoxy-carbonyl) -1 H-pyrazole-1-carboxamidine provides compound 12, the Z-protecting group of which can be removed by catalytic hydrogenation on a Pd activated carbon catalyst (13). The amino function thus released is converted into compound 14 (Z-AzaGly-4- (N, N'-Bis-BOC) with cooling and addition of one equivalent of organic base with triphosgene (a solid and thus less toxic phosgene substitute) and then in situ with benzyl carbazate -Guanidinobenzyl) amide] The Z-protecting group is split off as described for compound 13 by hydrogenation (15) and with Z- (D) -ser (tBu) -OH and coupling reagents common in peptide chemistry (eg PyBOP, HBTU or DCC) and HOBt) to give the amide 16. The Z-protecting group is cleaved again catalytically (17) and the resulting free amine is reacted with benzylsulfonyl chloride in an inert organic solvent (for example dichloromethane) with the addition of an organic base to the corresponding sulfonamide 18. The cleavage of the remaining Protecting groups are formed by reaction in acidic solution (for example in trifluoroacetic acid or in 4M HCl _g / dioxane) to give the corresponding salt of the target compound Bz-SO ₂ - (D) -Ser- (aza- Gly) -4-guanidinobenzylamide (19).

Beispiel 3:Example 3:

Synthesebeschreibung N-(4-Guanidino-benzyl)-2-(3-hydroxy-2-phenylmethane-sulfonylamino-propionylamino)-4-phenyl-butyramide Hydrochlorid [ST-550]Synthesis description N- (4-guanidino-benzyl) -2- (3-hydroxy-2-phenylmethane-sulfonylamino-propionylamino) -4-phenyl-butyramide Hydrochloride [ST-550]

4-Aminobenzylamin (20) wird mit Z-(L)_-Homophenylalanin und in der Peptidchemice üblichen Kupplungsreagenzien (z.B. PyBOP, HBTU oder DCC und HOBt) zum Amid 21 umgesetzt. Durch katalytische Hydrierung an einem Pd-Aktivkohle-Katalysator wird die Z-Schutzgruppe abgespalten (22) und die freie Aminogruppe wie für 21 beschrieben mit Z-(D)-Ser(tBu) OH zum Amid 23 umgesetzt. Die Umsetzung mit einem geeignet geschützten Guanidinylierungsreagens wie z.B. N,N'-Bis(tert-butoxycarbonyl)-1H-pyrazol-1-carboxamidin liefert Verbindung 24. Die N-terminale Z-Schutzgruppe wird wie für 22 beschrieben abgespalten und die resultierende Verbindung 25 mit Benzylsulfonylchlorid zum Sulfonamid 26 umgesetzt. Im letzten Schritt werden die verbliebenen Schutzgruppen in saurem Medium (z.B. in Trifluoressigsäure oder in 4M HCl_g/Dioxan) zum entsprechenden Salz der Zielverbindung 27 abgespalten.4-aminobenzylamine (20) is converted to amide 21 with Z- (L) _- homophenylalanine and coupling reagents customary in peptide chemistry (eg PyBOP, HBTU or DCC and HOBt). The Z protective group is split off by catalytic hydrogenation on a Pd activated carbon catalyst (22) and the free amino group is converted to the amide 23 with Z- (D) -Ser (tBu) OH as described for 21. Reaction with a suitably protected guanidinylation reagent such as N, N'-bis (tert-butoxycarbonyl) -1H-pyrazole-1-carboxamidine gives compound 24. The N-terminal Z protecting group is cleaved off as described for 22 and the resulting compound 25 implemented with benzylsulfonyl chloride to sulfonamide 26. In the last step, the remaining protective groups are split off in an acidic medium (for example in trifluoroacetic acid or in 4M HCl _g / dioxane) to give the corresponding salt of target compound 27.

Beispiel 4:Example 4:

In vitro Hemmung von Urokinase und PlasminIn vitro inhibition of urokinase and plasmin

Zur Bestimmung der Inhibitoraktivität wurden 200 μl Tris-Puffer (0,05 mol/l, den Inhibitor enthaltend, 0,154 mol/l NaCl, pH 8,0), 25 μl Substrat (Pefachrome uPA, Pefachrome PL oder Pefabloc TH in H₂O; Pentapharm LTD, Basel, Schweiz) und 50 μl Urokinase (Calbiochem-Novabiochem GmbH, Bad Soden, Deutschland) bzw. eine entsprechende andere Protease, z.B. Plasmin oder Thrombin, 10 Minuten bei 30 °C inkubiert. Nach ca. 30 Minuten und 30 Zyklen wird die Absorption bei 405 nm mittels eines Mikroplate Reader (Mediators PHL, Aureon Biosystems, Wien, Österreich) bestimmt. Die K_i-Werte wurden nach Dixon durch lineare Regression mittels eines Computerprogramms ermittelt. Die K_i-Werte sind das Mittel aus mindestens drei Bestimmungen, die Standardabweichung lag unter 25 %.To determine the inhibitor activity, 200 μl Tris buffer (0.05 mol / l, containing the inhibitor, 0.154 mol / l NaCl, pH 8.0), 25 μl substrate (Pefachrome uPA, Pefachrome PL or Pefabloc TH in H ₂ O ; Pentapharm LTD, Basel, Switzerland) and 50 μl urokinase (Calbiochem-Novabiochem GmbH, Bad Soden, Germany) or a corresponding other protease, eg plasmin or thrombin, incubated at 30 ° C. for 10 minutes. After about 30 minutes and 30 cycles, the absorption at 405 nm is determined using a microplate reader (Mediators PHL, Aureon Biosystems, Vienna, Austria). The K _i values were determined according to Dixon by linear regression using a computer program. The K _i values are the average of at least three determinations standard deviation was less than 25%.

Claims

Use of compounds of general formula 1

where Ar is an aromatic or heteroaromatic ring system,

means or Ar and E together represent a remainder

form, where ZO, NH or C = O and X ^{4 can be} C = O, NH or CH ₂ and WN, CR ³ or CR ⁶ and X ⁵ = CH, CR ³ , CR ⁶ or N, B -SO ₂ -, -CR ³ ₂ -, -NR ³ - or -NH- means X ¹ NR ¹³ R ⁴ , OR ³ , SR ³ , COOR ³ , CONR ³ R ⁴ or COR ⁵ means R ¹ H, one if appropriate substituted alkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, heteroaryl or COOR ³ , CONR ³ R ⁴ or COR ⁵ , R ^{2 is} halogen, C (R ⁶ ) ₃ , C ₂ (R ⁶ ) ₅ , OC (R ⁶ ) ₃ or OC ₂ (R ⁶ ) ₅ , R ^{3 is} H or any organic radical, R ^{13 is} a group of the general formula (IIa) or (IIb),

X ^{2 is} NH, NR ⁴ , O or S, X ^{3 is} NH, NR ⁴ , O, S, CO, COO, CONH or CONR ⁴ , YC (R ⁸ ) ₂ , NH or NR ³ is R ^{4 is} H or represents a branched or unbranched, optionally substituted alkyl, alkenyl or alkynyl radical, R ^{5 is} H, an alkyl, alkenyl, alkynyl, carboxy-alkyl, carboxy-alkenyl, carboxyl-alkynyl, carboxy-aryl, Is carboxy-heteroaryl, - (CO) NR ³ R ⁴ or -COO-R ³ , where the alkyl, aryl and heteroaryl radicals can be optionally substituted, R ^{6 is} each independently H or halogen, in particular F, R ⁷ H or an optionally substituted alkyl, alkenyl, alkynyl, aryl or heteroaryl radical or -COR ⁹ , R ⁸ each independently denotes H, or a branched or unbranched, optionally substituted alkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, Heteroaryl, aralkyl, alkylaryl, heteroaralkyl radical or / and a substituted or unsubstituted bi- or polycyclic radical, R ^{9 is} H or a branched or u n-branched, optionally substituted alkyl, alkenyl, alkynyl, aryl or / and heteroaryl radical, R ^{10 is} a radical IC (R ¹ ) ₂ ) _o -X ³ R ⁵ , R ^{11 is} H, a carbonyl radical -CO-R ¹² , a carboanmide radical - CONR ¹² ₂ , an oxycarbonyl radical -COO-R ¹² or particularly preferably a sulfonyl radical -SO ₂ R, R ¹² H, a branched or unbranched, substituted or unsubstituted alkyl, alkenyl, alkynyl, aryl or heteroaryl radical or a substituted or unsubstituted cyclic alkyl radical or a substituted or unsubstituted aralkyl, alkylaryl or heteroaralkyl radical or a substituted or unsubstituted bi- or polycyclic radical, R ^{15 represents} C = X ² , NR ³ or CR ³ ₂ , n represents a is an integer from 0 to 2, m is an integer from 0 to 5, o is an integer from 1 to 5, p is an integer from 1 to 5, or salts of these compounds to prepare an agent for inhibiting the urokinase plasminogen activator.

Use according to claim 1, wherein Ar represents a benzene ring.

Use according to claim 2, wherein R ^{12 represents} a benzyl radical.

Use according to claim 2, wherein R ^{12 represents} an adamantyl or camphor residue.

Use according to any one of claims 2 to 4, wherein the substituents B and E are arranged in para position to each other.

Use according to any one of claims 1 to 5, wherein the compound N- [2- (4-guanidino-benzenesulfonylamino) ethyl] -3-hydroxy-2-phenylmethanesulfonylamino-propionamide hydrochloride, Bz-SO ₂ - (D) -Ser- (Aza-Gly) -4-guanidino-benzylamide hydrochloride or N- (4-guanidino-benzyl) -2- (3-hydroxy-2-phenylmethane-sulfonylamino-propionylamino) -4-phenyl-butyramide hydrochloride.

Use according to one of claims 1 to 6 for combating Diseases with pathological overexpression of urokinase or / and urokinase receptor are associated.

Use according to one of claims 1 to 7 for tumor control.

Use according to one of claims 1 to 8 for combating Metastasis.

Use according to any one of the preceding claims, wherein an oral, topical, rectal, parenteral, subcutaneous, intramuscular, intraperitoneal, Medicinal product that can be administered sublingually, nasally or by inhalation becomes.

Use according to any one of the preceding claims, wherein the agent in the form of tablets, coated tablets, capsules, pellets, suppositories, Solutions, Emulsions, suspensions, liposomes, inhalation sprays or transdermal ones Systems, such as plasters.

Compounds of formula I.

wherein Ar, X ¹ , R ² , B, E and m are as defined in claim 1.

N- [2- (4-guanidino-benzenesulfonylamino) ethyl] -3-hydroxy-2-phenylmethanesulfonylamino-propionamide hydrochloride, Bz-SO ₂ - (D) -Ser- (Aza-Gly) -4-guanidino-benzylamide hydrochloride or N- (4-guanidino-benzyl) -2- (3-hydroxy-2-phenylmethane-sulfonylamino-propionylamino) -4-phenyl-butyramide hydrochloride.

Method for inhibiting urokinase in living beings by administration an effective amount of at least one compound according to claim 12 or 13th

Method of inhibiting urokinase in humans by administration an effective amount of at least one compound according to claim 12 or 13th

Medicament containing a therapeutically active amount of Connection according to one of claims 12 or 13.