DE102013203839B4 - Method for analyzing a blood sample and associated hematology system - Google Patents

Method for analyzing a blood sample and associated hematology system Download PDF

Info

Publication number
DE102013203839B4
DE102013203839B4 DE201310203839 DE102013203839A DE102013203839B4 DE 102013203839 B4 DE102013203839 B4 DE 102013203839B4 DE 201310203839 DE201310203839 DE 201310203839 DE 102013203839 A DE102013203839 A DE 102013203839A DE 102013203839 B4 DE102013203839 B4 DE 102013203839B4
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
blood sample
proportion
leukocytes
differential analysis
parameter
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
DE201310203839
Other languages
German (de)
Other versions
DE102013203839A1 (en
Inventor
Jan van den Boogaart
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Siemens Healthcare Diagnostics Products GmbH
Siemens Healthcare Diagnostics GmbH Germany
Original Assignee
Siemens Healthcare Diagnostics Products GmbH
Siemens Healthcare Diagnostics GmbH Germany
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Siemens Healthcare Diagnostics Products GmbH, Siemens Healthcare Diagnostics GmbH Germany filed Critical Siemens Healthcare Diagnostics Products GmbH
Priority to DE201310203839 priority Critical patent/DE102013203839B4/en
Priority to PCT/EP2014/052778 priority patent/WO2014135349A1/en
Publication of DE102013203839A1 publication Critical patent/DE102013203839A1/en
Application granted granted Critical
Publication of DE102013203839B4 publication Critical patent/DE102013203839B4/en
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/26—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase
    • C12Q1/28—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase involving peroxidase
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
    • G01N33/5094—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for blood cell populations
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
    • G01N33/57407—Specifically defined cancers
    • G01N33/57426—Specifically defined cancers leukemia

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Ecology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

Im Rahmen der Analyse einer Blutprobe (7) ist vorgesehen, einen ersten Teil (22) der Blutprobe (7) einer ersten Differentialanalyse (A1) in Hinblick auf die Peroxidase-Aktivität der Leukozyten zu unterziehen, und einen zweiten Teil (37) der Blutprobe (7) einer zweiten Differentialanalyse (A2) in Hinblick auf die Strukturierung der Leukozyten zu unterziehen. Dabei wird ein Warnhinweis (W) erzeugt, wenn nach Maßgabe der beiden Differentialanalysen (A1, A2) der Anteil (%PP) der peroxidase-positiven Leukozyten in der Blutprobe (7) den Anteil (%PMN) der polymorphkernigen Granulozyten in anomaler Weise übersteigt und wenn nach Maßgabe der zweiten Differentialanalyse (A2) der Anteil (%BLAST) der unreifen, mononukliden Leukozyten in anomaler Weise erhöht ist.As part of the analysis of a blood sample (7), provision is made to subject a first part (22) of the blood sample (7) to a first differential analysis (A1) with regard to the peroxidase activity of the leukocytes, and a second part (37) of the blood sample (7) to undergo a second differential analysis (A2) with regard to the structuring of the leukocytes. A warning (W) is generated if, according to the two differential analyzes (A1, A2), the proportion (% PP) of peroxidase-positive leukocytes in the blood sample (7) exceeds the proportion (% PMN) of polymorphonuclear granulocytes in an abnormal manner and if, according to the second differential analysis (A2), the proportion (% BLAST) of immature, mononuclidal leukocytes is abnormally increased.

Description

Die Erfindung bezieht sich auf ein Verfahren zur Analyse einer Blutprobe. Die Erfindung bezieht sich des Weiteren auf ein zugehöriges Hämatologie-System, d. h. auf eine Vorrichtung zur automatischen Durchführung des Verfahrens.The invention relates to a method for analyzing a blood sample. The invention further relates to an associated hematology system, i. H. to a device for automatically carrying out the method.

Automatisierte Blutanalysen werden in der Medizintechnik in zunehmendem Maße eingesetzt, um einfach und schnell – beispielsweise im Rahmen von Vorsorgeuntersuchungen – erste Anzeichen für mögliche Bluterkrankungen, insbesondere Malaria, Leukämie, etc. auffinden zu können.Automated blood analyzes are increasingly used in medical technology in order to quickly and easily - for example in the context of screening - to find the first signs of possible blood diseases, especially malaria, leukemia, etc.

Eine besondere Leukämieform ist die sogenannte Akute Promyelozyten-Leukämie (auch als APL oder M3-Leukämie bezeichnet), die durch eine Translokation t(15; 17) der Gene 15 und 17 gekennzeichnet ist. Das Krankheitsbild dieser Leukämieform zeichnet sich durch das vielfach vermehrte Auftreten von Blasten mit einer ausgeprägten Granulation aus, wie sie typisch für Promyelozyten ist. Durch Überproduktion dieser noch nicht ausentwickelten Leukozyten (weißen Blutkörperchen) werden die übrigen zellulären Blutbestandteile, insbesondere die Erythrozyten (rote Blutkörperchen) und Thrombozyten (Blutplättchen), aber auch die ausentwickelten Leukozyten in starkem Maße zurückgedrängt. Hierdurch kommt es zu Anämie (Blutarmut) sowie zu mitunter lebensgefährlichen Blutgerinnungsstörungen.A particular type of leukemia is the so-called acute promyelocytic leukemia (also referred to as APL or M3 leukemia) which is characterized by a translocation t (15; 17) of genes 15 and 17. The clinical picture of this form of leukemia is characterized by the frequently increased occurrence of blasts with pronounced granulation, as is typical of promyelocytes. Overproduction of these as yet undeveloped leukocytes (white blood cells) greatly restricts the remaining cellular blood components, in particular the erythrocytes (red blood cells) and platelets (platelets), but also the developed leukocytes. This causes anemia (anemia) as well as life-threatening blood coagulation disorders.

Bei frühzeitiger Erkennung einer APL bestehen gute Heilungschancen. Die frühzeitige Erkennung einer APL wird allerdings wesentlich erschwert durch die sehr geringe Prävalenz dieses Krankheitsbildes (ca. 2–3 Fälle pro 1 Mio. Personen und Jahr) sowie die vergleichsweise große Variation im Erscheinungsbild der auftretenden Promyelozyten. Nur vergleichsweise wenige medizinischen Spezialisten verfügen über hinreichende Erfahrung, um APL zu erkennen und fehlersicher zu diagnostizieren.Early detection of an APL has good chances of recovery. The early detection of an APL is, however, much more difficult due to the very low prevalence of this disease (about 2-3 cases per 1 million persons per year) and the comparatively large variation in the appearance of the promyelocytes occurring. Only a relatively small number of medical specialists have sufficient experience to recognize APL and diagnose it with fail-safe.

Aus dem Benutzerhandbuch Siemens Healthcare Diagnostics: „ADVIA® 2120/2120i Hematology Systems – Operator's Guide”, Tarrytown, New York (USA), 2010 (067D0157-01 Rev. C, 2010-04) ist bekannt, eine Blutprobe einer Differentialanalyse in Hinblick auf die Peroxidase-Aktivität der Leukozyten zu unterziehen. Im Rahmen dieser Differentialanalyse werden Anteilsparameter (nämlich der Anteil %NEUT der neutrophilen Granulozyten und der Anteil %EOS der eosinophilen Granulozyten) bestimmt, die für den Anteil der peroxidase-positiven Leukozyten in der Blutprobe charakteristisch sind.From the user Siemens Healthcare Diagnostics' ADVIA ® 2120 / 2120i Hematology System - Operator's Guide, "Tarrytown, New York (USA), 2010 (067D0157-01 Rev. C, 2010-04) is known, a blood sample of a differential analysis in terms to undergo the peroxidase activity of leukocytes. In this differential analysis, particle parameters (namely, the% NEUT percentage of neutrophil granulocytes and the% EOS content of eosinophilic granulocytes) are determined, which are characteristic of the percentage of peroxidase-positive white blood cells in the blood sample.

Weiterhin ist bekannt, eine Blutprobe einer Differentialanalyse in Hinblick auf die Strukturierung der Leukozyten zu unterziehen, wobei anhand dieser Differentialanalyse ein Anteilsparameter %PMN bestimmt wird, der für den Anteil derpolymorphkernigen Granulozyten in der Blutprobe charakteristisch ist. Außerdem wird anhand der letztgenannten Differentialanalyse ein Anteilsparameter %BLAST bestimmt, der für den Anteil der unreifen, mononukliden Leukozyten in der Blutprobe charakteristisch ist.Furthermore, it is known to subject a blood sample to a differential analysis with regard to the structuring of the leukocytes, with the aid of this differential analysis determining a percentage parameter% PMN which is characteristic of the proportion of polymorphonuclear granulocytes in the blood sample. In addition, a percentage parameter% BLAST, which is characteristic of the proportion of immature, mononuclide leukocytes in the blood sample, is determined from the latter differential analysis.

Gemäß dem vorstehend genannten „Operator's Guide” wird ein Flag gesetzt, wenn der Anteil %NEUT + %EOS der peroxidase-positiven Leukozyten in der Blutprobe den Anteil %PMN der polymorphkernigen Granulozyten um mehr als einen ersten Schwellwert von 5% übersteigt.According to the above-mentioned "Operator's Guide", a flag is set if the proportion% NEUT +% EOS of the peroxidase-positive leukocytes in the blood sample exceeds the proportion% PMN of the polymorphonuclear granulocytes by more than a first threshold of 5%.

Ein anderes Flag wird gesetzt, wenn der Anteil %BLAST der unreifen, mononukliden Leukozyten einen zweiten Schwellwert von 5% übersteigt.Another flag is set if the% BLAST fraction of the immature, mononucleated leukocytes exceeds a second threshold of 5%.

Beide Flags sind in dem „Operator's Guide” als möglicher Hinweis auf Leukämie offenbart.Both flags are disclosed in the "Operator's Guide" as a possible indication of leukemia.

Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, ein Verfahren zur Blutanalyse anzugeben, das auf einfache, insbesondere einfach automatisierbare, schnelle und möglichst fehlersichere Weise die Gewinnung erster Anzeichen für eine mögliche APL ermöglicht. Der Erfindung liegt weiterhin die Aufgabe zugrunde, ein zur Durchführung des Verfahrens besonders geeignetes Hämatologie-System anzugeben.The invention has for its object to provide a method for blood analysis, which allows easy, in particular easy to automate, fast and fail-safe as possible way to obtain the first signs of a possible APL. The invention is further based on the object of specifying a particularly suitable for carrying out the method hematology system.

Bezüglich des Verfahrens wird die Aufgabe erfindungsgemäß gelöst durch die Merkmale des Anspruchs 1 sowie – unabhängig hiervon – durch die Merkmale des Anspruchs 3. Bezüglich des Hämatologie-Systems wird die Aufgabe erfindungsgemäß gelöst durch die Merkmale des Anspruchs 11. Vorteilhafte und teils für sich gesehen erfinderische Ausgestaltungsformen und Weiterentwicklungen der Erfindung sind in den Unteransprüchen und der nachfolgenden Beschreibung dargelegt.With regard to the method, the object is achieved according to the invention by the features of claim 1 and - independently thereof - by the features of claim 3. With regard to the hematology system, the object is achieved by the features of claim 11. Advantageous and partly inventive in itself Embodiments and further developments of the invention are set forth in the subclaims and the description below.

Das erfindungsgemäße Verfahren beruht auf einer vergleichenden Auswertung zweier verschiedener Differentialanalysen einer Blutprobe. Der Begriff „Differentialanalyse” bezeichnet hierbei allgemein eine Messung, bei der die analysierten Blutpartikel in Hinblick auf eine bestimmte quantitative oder qualitative Eigenschaft, beispielsweise die Zellgröße, untersucht und differenziert werden. Die Blutpartikel können hierbei auch nach mehreren Eigenschaften (beispielsweise Zellgröße und Strukturierung, d. h. Struktur der Zelle oder des Zellkerns) in Kombination untersucht und entsprechend mehrdimensional differenziert werden. Das Ergebnis der Differenzierung ist eine Verteilung der analysierten Blutpartikel über der untersuchten Eigenschaft bzw. den untersuchten Eigenschaften. Durch die Differenzierung können hierbei verschiedene Arten von Blutpartikeln unterschieden werden. Dies erlaubt wiederum die Bestimmung der relativen Häufigkeit, mit der die verschiedenen Blutpartikelarten in der Blutprobe vorkommen.The method according to the invention is based on a comparative evaluation of two different differential analyzes of a blood sample. The term "differential analysis" generally refers to a Measurement in which the analyzed blood particles are examined and differentiated with regard to a specific quantitative or qualitative property, for example cell size. In this case, the blood particles can also be investigated in combination according to several properties (for example cell size and structuring, ie structure of the cell or of the cell nucleus) and correspondingly multidimensionally differentiated. The result of the differentiation is a distribution of the analyzed blood particles over the investigated property (s). By differentiating different types of blood particles can be distinguished. This, in turn, allows the determination of the relative frequency with which the different types of blood particles occur in the blood sample.

Verfahrensgemäß wird die Blutprobe (genauergesagt ein erster Teil der Blutprobe) einer ersten Differentialanalyse unterzogen, bei der die Peroxidase-Aktivität der Leukozyten untersucht wird. Im Rahmen dieser ersten Differentialanalyse werden somit die Peroxidase-Aktivität oder eine hiermit korrelierte Größe als Kriterium für die Differenzierung der Leukozyten in der Blutprobe herangezogen.According to the method, the blood sample (more precisely a first part of the blood sample) is subjected to a first differential analysis in which the peroxidase activity of the leukocytes is examined. In the context of this first differential analysis, therefore, the peroxidase activity or a size correlated therewith is used as a criterion for the differentiation of the leucocytes in the blood sample.

In einer zweiten Differentialanalyse wird die Blutprobe (genauergesagt ein zweiter Teil der Blutprobe) im Hinblick auf die Strukturierung (d. h. die Zellgröße, die Zelldichte und Zellstruktur bzw. Zellkernstruktur) der Leukozyten untersucht. Im Rahmen der zweiten Differentialanalyse werden die Leukozyten der Blutprobe somit nach Maßgabe einer Strukturierungsinformation differenziert.In a second differential analysis, the blood sample (more specifically, a second part of the blood sample) is examined for the patterning (i.e., cell size, cell density, and cell structure) of the leukocytes. In the context of the second differential analysis, the leukocytes of the blood sample are thus differentiated according to structuring information.

Verfahrensgemäß wird dabei ein Warnhinweis erzeugt, wenn nach Maßgabe der beiden Differentialanalysen der Anteil der peroxidase-positiven Leukozyten in der Blutprobe den Anteil der polymorphkernigen Granulozyten in anomaler Weise übersteigt und wenn nach Maßgabe der zweiten Differentialanalyse der Anteil der unreifen, mononukliden Leukozyten in anomaler Weise erhöht ist. Als „peroxidase-positiv” werden hierbei diejenigen Leukozyten bezeichnet, die einen signifikanten Anteil an dem Enzym Peroxidase beinhalten und somit eine signifikante Peroxidase-Aktivität aufweisen. Die polymorphkernigen Granulozyten werden durch die neutrophilen und eosinophilen Granulozyten gebildet. Die Gruppe der unreifen, mononukliden Leukozyten wird durch die Blasten sowie diejenigen Leukozyten gebildet, die nach Maßgabe der zweiten Differentialanalyse von Blasten ununterscheidbar sind. Hierunter fallen im APL-positiven Blut insbesondere ein Teil der krankhaft vermehrten Promyelozyten. Eine anomale Erhöhung des jeweiligen Anteils der peroxidase-positiven Leukozyten bzw. der unreifen mononukliden Leukozyten wird dabei vorzugsweise durch Vergleich des jeweiligen Anteils mit einem vorgegebenen Schwellwert festgestellt.According to the method, a warning is generated when, according to the two differential analyzes, the proportion of peroxidase-positive leukocytes in the blood sample exceeds the proportion of polymorphonuclear granulocytes in an anomalous manner and when increased according to the second differential analysis, the proportion of immature, mononuclide leukocytes in an anomalous manner is. The term "peroxidase-positive" refers to those leucocytes which contain a significant proportion of the enzyme peroxidase and thus have a significant peroxidase activity. The polymorphonuclear granulocytes are formed by the neutrophilic and eosinophilic granulocytes. The group of immature, mononucleated leukocytes is formed by the blasts as well as those leucocytes that are indistinguishable from blasts according to the second differential analysis. These include, in particular, part of the pathologically increased promyelocytes in the APL-positive blood. An abnormal increase in the respective proportion of the peroxidase-positive leucocytes or the immature mononuclide leukocytes is preferably determined by comparing the respective proportion with a predetermined threshold value.

Der Warnhinweis wird als sensorisch (insbesondere optisch, akustisch und/oder haptisch) wahrnehmbares Signal und/oder als Dateninhalt (zum Beispiel als Textnachricht) erzeugt.The warning is generated as a sensible (in particular visually, acoustically and / or haptically) perceptible signal and / or as data content (for example as a text message).

Die Erfindung geht von der Überlegung aus, dass die das Krankheitsbild einer APL prägenden Promyelozyten aufgrund hoher Ähnlichkeit mit anderen Blutpartikeln weder allein in der ersten Differentialanalyse noch allein in der zweiten Differentialanalyse eindeutig differenzierbar sind, dass aber diese Ähnlichkeit der krankhaften Promyelozyten mit anderen Blutpartikeln in den beiden Analysearten unterschiedlich ausgeprägt ist. So bilden die Promyelozyten in der ersten Differentialanalyse aufgrund ähnlicher Peroxidase-Aktivität ein Mischsignal mit den polymorphkernigen Granulozyten (d. h. den ausgereiften neutrophilen und eosinophilen Granulozyten). In der zweiten Differentialanalyse bilden die Promyelozyten dagegen aufgrund ähnlicher Kernstruktur ein Mischsignal mit den Blasten. Erkanntermaßen lassen sich die Promyelozyten dabei anhand der Koinzidenz dieser beiden Eigenschaften deutlich von anderen Blutpartikeln unterscheiden, so dass durch die vergleichende Auswertung der ersten und zweiten Differentialanalyse die im Falle einer APL krankhaft erhöhte Promyelozyten-Häufigkeit besonders einfach, gleichzeitig aber mit besonders hoher Sensitivität und Spezifität erkennbar ist.The invention is based on the consideration that the promyelocytes which characterize the clinical picture of an APL are clearly differentiable neither alone in the first differential analysis nor in the second differential analysis because of high similarity with other blood particles, but that this similarity of the diseased promyelocytes with other blood particles in the two types of analysis is different. Thus, in the first differential analysis, the promyelocytes form a mixed signal with the polymorphonuclear granulocytes (i.e., mature neutrophil and eosinophilic granulocytes) due to similar peroxidase activity. In the second differential analysis, however, the promyelocytes form a mixed signal with the blasts due to similar nuclear structure. The promyelocytes can be clearly differentiated from other blood particles on the basis of the coincidence of these two properties, so that in the case of an APL pathologically increased promyelocytic frequency is particularly simple, but at the same time with particularly high sensitivity and specificity by the comparative evaluation of the first and second differential analysis is recognizable.

Hierzu wird anhand der ersten Differentialanalyse ein erster Anteilsparameter (nachfolgend als %PP bezeichnet) bestimmt, der für den Anteil der peroxidase-positiven Leukozyten in der Blutprobe charakteristisch ist. Im gesunden Blut sind erfahrungsgemäß insbesondere die neutrophilen Granulozyten sowie die eosinophilen Granulozyten peroxidase-positiv. Der erste Anteilsparameter (%PP) wird daher bestimmt, indem diejenigen Blutpartikel der Blutprobe gezählt werden, die hinsichtlich ihrer gemessenen Peroxidase-Aktivität in einem normalerweise (d. h. im APL-negativen Blut) von den neutrophilen und eosinophilen Granulozyten eingenommenen Bereich eines Peroxidasefärbungs-Zytogramms (kurz: Perox-Zytogramm) liegen. Insbesondere wird hierzu die Blutprobe mittels eines herkömmlichen Hämatologie-Systems analysiert, wobei die von diesem Gerät für den Anteil der neutrophilen Granulozyten (%NEUT) und den Anteil der eosinophilen Granulozyten (%EOS) ermittelten Werte addiert werden (%PP = %NEUT + %EOS).For this purpose, the first differential parameter (hereinafter referred to as% PP), which is characteristic of the proportion of peroxidase-positive leukocytes in the blood sample, is determined on the basis of the first differential analysis. In healthy blood, experience has shown that especially the neutrophilic granulocytes and the eosinophilic granulocytes are peroxidase-positive. The first fractional parameter (% PP) is therefore determined by counting those blood particles of the blood sample which, in terms of their measured peroxidase activity, are normally (ie in the APL-negative blood) occupied by the neutrophils and eosinophils of a peroxidase staining cytogram ( short: perox cytogram). In particular, the blood sample is analyzed by means of a conventional hematology system, whereby the values determined by this device for the proportion of neutrophilic granulocytes (% NEUT) and the proportion of eosinophilic granulocytes (% EOS) are added (% PP =% NEUT +%). EOS).

Anhand der zweiten Differentialanalyse wird ein zweiter Anteilsparameter (nachfolgend als %PMN bezeichnet) bestimmt, der für den Anteil der polymorphkernigen Granulozyten in der Blutprobe charakteristisch ist, also für den Anteil der reifen neutrophilen und eosinophilen Granulozyten. Based on the second differential analysis, a second component parameter (hereinafter referred to as% PMN) is determined, which is characteristic for the proportion of polymorphonuclear granulocytes in the blood sample, that is for the proportion of mature neutrophil and eosinophilic granulocytes.

Aus dem ersten Anteilsparameter (%PP) und dem zweiten Anteilsparameter (%PMN) wird – insbesondere durch Subtraktion des zweiten Anteilsparameters von dem ersten Anteilsparameter – ein dritter Anteilsparameter (nachfolgend als %IG bezeichnet) bestimmt (%IG = %PP – %PMN), der charakteristisch für den Anteil der unreifen (noch nicht vollständig ausdifferenzierten) Granulozyten in der Blutprobe ist. Dieser dritte Anteilsparameter (%IG) wird erkanntermaßen im Blut eines APL-Patienten wesentlich durch die anomal vermehrten Promyelozyten beeinflusst.From the first share parameter (% PP) and the second share parameter (% PMN), a third share parameter (hereinafter referred to as% IG) is determined (in particular by subtraction of the second share parameter from the first share parameter) (% IG =% PP -% PMN) which is characteristic of the proportion of immature (not yet fully differentiated) granulocytes in the blood sample. This third proportion parameter (% IG) is recognized to be significantly influenced by the abnormally proliferated promyelocytes in the blood of an APL patient.

Anhand der zweiten Differentialanalyse wird schließlich noch ein vierter Anteilsparameter bestimmt, der für den Anteil der unreifen, mononukliden Leukozyten in der Blutprobe charakteristisch ist. Im gesunden Blut wird dieser Anteil maßgeblich von den in der Blutprobe enthaltenen Blasten bestimmt. Zur Bestimmung des vierten Anteilsparameters, und somit des Maßes für den Anteil an unreifen, mononukliden Leukozyten in der Blutprobe werden daher diejenigen Blutpartikel oder Blutproben gewählt, die hinsichtlich ihrer gemessenen Strukturierung in einem Bereich eines Strukturierungs-Zytogramms liegen, der normalerweise (d. h. im APL-negativen Blut) von den gewöhnlicherweise vorhandenen Blasten eingenommen wird. Insbesondere wird in diesem Sinne als vierter Anteilsparameter derjenige Wert herangezogen, den ein herkömmliches Hämatologie-System als Anteil der Blasten (%BLAST) in der Blutprobe ausgibt. Erkanntermaßen wird dieser Wert (%BLAST) im Blut eines APL-Patienten maßgeblich durch die krankhaft vermehrten Promyelozyten geprägt.On the basis of the second differential analysis finally a fourth share parameter is determined, which is characteristic of the proportion of immature, mononuclide leukocytes in the blood sample. In healthy blood, this proportion is largely determined by the blasts contained in the blood sample. To determine the fourth particle parameter, and thus the measure of the proportion of immature, mononuclide leucocytes in the blood sample, those blood particles or blood samples are selected which, in terms of their measured structuring, are within a range of a structuring cytogram which is normally (ie in the APL). negative blood) from the commonly existing blasts. In particular, in this sense, the fourth parameter used is the value which a conventional hematology system outputs as a proportion of the blasts (% BLAST) in the blood sample. It is known that this value (% BLAST) in the blood of an APL patient is significantly influenced by the pathologically increased promyelocytes.

Gemäß einer ersten Variante des erfindungsgemäßen Verfahrens gemäß Anspruch 1 werden der dritte Anteilsparameter (%IG) mit einem ersten Schwellwert (nachfolgend als S1 bezeichnet), und der vierte Anteilsparameter (%BLAST) mit einem zweiten Schwellwert (nachfolgend S2) verglichen. Dabei wird der Warnhinweis erzeugt, wenn der dritte Anteilsparameter (%IG) den ersten Schwellwert überschreitet und wenn der vierte Anteilsparameter (%BLAST) den zweiten Schwellwert überschreitet.According to a first variant of the method according to the invention, the third component parameter (% IG) is compared with a first threshold value (hereinafter referred to as S1) and the fourth component parameter (% BLAST) with a second threshold value (hereinafter S2). The warning is generated when the third share parameter (% IG) exceeds the first threshold and when the fourth share parameter (% BLAST) exceeds the second threshold.

Der Warnhinweis wird mit anderen Worten bei Erfüllung der Bedingung
%IG > S1 und %BLAST > S2
ausgelöst.The warning message is in other words when the condition is met
% IG> S1 and% BLAST> S2
triggered.

Der erste Schwellwert (S1) ist dabei derart vorgegeben, dass er einem Anteil der unreifen Granulozyten in der Blutprobe zwischen 50% und 70% (50% ≤ S1 ≤ 70%), vorzugsweise zwischen 55% und 65% (55% ≤ S1 ≤ 65%), und insbesondere 60% (S1 = 60%) entspricht. Der zweite Schwellwert (S2) ist derart vorgegeben, dass er einem Anteil der unreifen, mononukliden Leukozyten in der Blutprobe zwischen 10% und 30% (10% ≤ S2 ≤ 30%), vorzugsweise zwischen 15% und 25% (15% ≤ S2 ≤ 25%), und insbesondere 20% (S2 = 20%) entspricht.The first threshold value (S1) is predetermined in such a way that it allows a proportion of the immature granulocytes in the blood sample to be between 50% and 70% (50% ≦ S1 ≦ 70%), preferably between 55% and 65% (55% ≦ S1 ≦ 65%), and in particular 60% (S1 = 60%). The second threshold value (S2) is predetermined such that it is between 10% and 30% (10% ≤ S2 ≤ 30%), preferably between 15% and 25% (15% ≤ S2%) of the immature, mononuclide leukocytes in the blood sample ≤ 25%), and in particular 20% (S2 = 20%).

Der Warnhinweis wird somit in besonders geeigneter Dimensionierung des obigen Schwellwertvergleichs bei Erfüllung der Bedingung
%IG > 60% und %BLAST > 20%
ausgelöst.The warning is thus in a particularly suitable dimensioning of the above threshold comparison when the condition
% IG> 60% and% BLAST> 20%
triggered.

Eine zweite Variante des erfindungsgemäßen Verfahrens gemäß Anspruch 3 unterscheidet sich dahingehend von der vorstehend beschriebenen Verfahrensvariante, dass anstelle des vierten Anteilsparameters (%BLAST) eine gewichtete Summe aus dem dritten Anteilsparameter (%IG) und dem vierten Anteilsparameter (%BLAST) mit dem zweiten Schwellwert (hier als S2' bezeichnet) verglichen wird. Der erste Schwellwert (hier als S1' bezeichnet) wird analog zu der vorstehend beschriebenen Verfahrensvariante mit dem dritten Anteilsparameter (%IG) verglichen, wobei dieser erste Schwellwert (S1') hier vorzugsweise aber niedriger angesetzt ist als bei der vorstehend beschriebenen Verfahrensvariante. Bei gleichzeitiger Überschreitung beider Schwellwerte (S1', S2') wird wiederum der Warnhinweis erzeugt. Beispielsweise wird der Warnhinweis also bei Erfüllung der Bedingung
%IG > S1' und (%BLAST + F·%IG) > S2'
ausgelöst, wobei der Parameter F ein geeignet zu wählender Wichtungsfaktor ist.A second variant of the method according to claim 3 differs from the method variant described above in that instead of the fourth share parameter (% BLAST) a weighted sum of the third share parameter (% IG) and the fourth share parameter (% BLAST) with the second threshold (referred to herein as S2 '). The first threshold value (referred to here as S1 ') is compared with the third component parameter (% IG) analogously to the method variant described above, although this first threshold value (S1') is preferably set lower here than in the method variant described above. If both threshold values (S1 ', S2') are exceeded at the same time, the warning is generated again. For example, the warning will be at fulfillment of the condition
% IG> S1 'and (% BLAST + F ·% IG)>S2'
triggered, wherein the parameter F is a suitable weighting factor to be selected.

In geeigneter Dimensionierung dieses alternativen Schwellwertvergleichs ist der erste Schwellwert (S1') derart vorgegeben, dass er einem Anteil der unreifen Granulozyten in der Blutprobe zwischen 25% und 35% (25% ≤ S1' ≤ 35%), und insbesondere 30% (S1' = 30%) entspricht. Der zweite Schwellwert (S2') wird dagegen vorzugsweise derart vorgegeben, dass er zwischen 20% und 30% (20% ≤ S2' ≤ 30%), insbesondere 27% (S2' = 27%) der Summe des vierten Anteilsparameters (%BLAST) und des mit dem Wichtungsfaktor (F) gewichteten dritten Anteilsparameters (%IG) entspricht. Der Wichtungsfaktor (F) ist hierbei zweckmäßigerweise in einem Bereich zwischen 0,25 und 0,30 (0,25 ≤ S2' ≤ 30%) gewählt, und liegt insbesondere bei 0,27 (S2' = 0,27).In a suitable dimensioning of this alternative threshold value comparison, the first threshold value (S1 ') is predetermined so as to be between 25% and 35% (25% ≦ S1' ≦ 35%), and in particular 30% (S1), of a proportion of immature granulocytes in the blood sample '= 30%). The second threshold value (S2 '), on the other hand, is preferably set such that it is between 20% and 30% (20% ≤ S2' ≤ 30%), in particular 27% (S2 '= 27%) of the sum of the fourth component parameter (% BLAST ) and with the weighting factor (F) weighted third share parameter (% IG). The weighting factor (F) is expediently chosen in a range between 0.25 and 0.30 (0.25 ≦ S2 '≦ 30%), and is in particular 0.27 (S2' = 0.27).

Der Warnhinweis wird hierbei somit in besonders geeigneter Dimensionierung des obigen Schwellwertvergleichs bei Erfüllung der Bedingung
%IG > 30% und (%BLAST + 0,27·%IG) > 27%
ausgelöst.The warning is thus in a particularly suitable dimensioning of the above threshold comparison when fulfilling the condition
% IG> 30% and (% BLAST + 0.27 ·% IG)> 27%
triggered.

In zweckmäßiger Ausführung des Verfahrens beruht die erste Differentialanalyse auf einer Messung der jeweiligen Lichtabsorption der analysierten Leukozyten nach einer Peroxidase-Färbung. Die Stärke der Lichtabsorption oder eine hieraus abgeleitete Größe werden hierbei als Maß für die Peroxidase-Aktivität herangezogen. Die Peroxidase-Färbung erfolgt bevorzugt in an sich bekannter Weise durch zelluläre Peroxidase-Aktivität und Umsetzung mit 4-Chlor-1-Naphtol, wie sie an sich beispielsweise in WO 2012/084963 A1 beschrieben ist.In an expedient embodiment of the method, the first differential analysis is based on a measurement of the respective light absorption of the analyzed leukocytes after peroxidase staining. The intensity of light absorption or a quantity derived therefrom are used here as a measure of the peroxidase activity. The peroxidase staining is preferably carried out in a manner known per se by cellular peroxidase activity and reaction with 4-chloro-1-naphthol, as per se, for example, in US Pat WO 2012/084963 A1 is described.

In einer zweckmäßigen Ausgestaltungsvariante wird im Zuge der ersten Differentialanalyse aus der jeweiligen Vorwärtslichtstreuung der Leukozyten zusätzlich ein Maß für die Zellgröße abgeleitet. Als Vorwärts(licht)streuung oder Kleinwinkelstreuung wird dabei das Streulicht verstanden, dass durch einzelne Blutpartikel unter einem kleinen Winkel von typischerweise 2–3° gegenüber der Achse des ungestreuten Lichtstrahls emittiert wird. Bekanntermaßen wird die Stärke der Vorwärtsstreuung dabei maßgeblich von der Zellgröße beeinflusst. Die analysierten Leukozyten werden dabei vorzugsweise in einem Zytogramm als Verteilung über der Absorptionsstärke sowie gegebenenfalls der Vorwärtsstreuung (oder über daraus jeweils abgeleiteten Maßen für die Peroxidase-Aktivität bzw. die Zellgröße) angetragen.In an expedient embodiment variant, a measure of the cell size is additionally derived in the course of the first differential analysis from the respective forward light scattering of the leukocytes. As forward (light) scattering or small-angle scattering is meant the scattered light that is emitted by individual blood particles at a small angle of typically 2-3 ° with respect to the axis of the unscattered light beam. As is known, the intensity of the forward scattering is significantly influenced by the cell size. The analyzed leukocytes are preferably applied in a cytogram as a distribution over the absorption strength and optionally the forward scattering (or derived therefrom respectively measures for the peroxidase activity or the cell size).

Die zweite Differentialanalyse beruht in zweckmäßiger Ausführung des Verfahrens vorzugsweise auf einer Messung der durch die analysierten Leukozyten verursachten Seitwärtslichtstreuung, wobei die Stärke der Seitwärtslichtstreuung oder eine hieraus abgeleitete Größe als Maß für die Zellstrukturierung (Zelldichte und Zellkernstruktur) herangezogen werden. Als Seitwärts(licht)streuung oder Großwinkelstreuung wird hierbei das Streulicht verstanden, dass durch einzelne Blutpartikel unter einem großen Winkel von typischerweise 5–15° gegenüber der Achse des ungestreuten Lichtstrahls emittiert wird. Bekanntermaßen wird die Stärke der Seitwärtsstreuung dabei maßgeblich von der Strukturierung der Blutpartikel beeinflusst, wobei in die Strukturierung – wie vorstehend erwähnt – die Dichte der Zelle und die Form des Zellkerns eingehen.The second differential analysis is based in a convenient embodiment of the method preferably on a measurement of the caused by the analyzed leukocytes sideways light scattering, the strength of the sideways light scattering or derived therefrom size as a measure of cell structuring (cell density and nuclear structure) are used. As lateral (light) scattering or large-angle scattering is meant here the scattered light emitted by individual blood particles at a large angle of typically 5-15 ° with respect to the axis of the unscattered light beam. As is known, the intensity of the sideward scattering is decisively influenced by the structuring of the blood particles, wherein the structuring - as mentioned above - enters into the density of the cell and the shape of the cell nucleus.

In einer zweckmäßigen Ausgestaltungsvariante wird auch im Rahmen der zweiten Differentialanalyse zusätzlich aus der jeweiligen Vorwärtsstreuung der Leukozyten ein Maß für die Zellgröße abgeleitet. Die analysierten Leukozyten werden dabei vorzugsweise in einem Zytogramm als Verteilung über der Seitwärtsstreuung und gegebenenfalls der Vorwärtsstreuung (oder über hieraus jeweils abgeleiteten Maßen für die Strukturierung bzw. die Zellgröße) angetragen.In an expedient embodiment variant, a measure of the cell size is additionally derived from the respective forward scattering of the leukocytes also in the context of the second differential analysis. The analyzed leukocytes are preferably applied in a cytogram as a distribution over the sideways scattering and optionally the forward scattering (or via this derived measures for the structuring or the cell size).

In einer vorteilhaften Ausführung des Verfahrens werden die die Erythrozyten der Blutprobe (genauer des ersten Teils der Blutprobe) im Zuge der ersten Differentialanalyse lysiert.In an advantageous embodiment of the method, the erythrocytes of the blood sample (more precisely, the first part of the blood sample) are lysed in the course of the first differential analysis.

Im Zuge der zweiten Differentialanalyse werden vorzugsweise die Erythrozyten und Thrombozyten sowie alle Leukozyten der Blutprobe (genauer des zweiten Teils der Blutprobe) mit Ausnahme der basophilen Granulozyten lysiert.In the course of the second differential analysis, preferably the erythrocytes and platelets as well as all leukocytes of the blood sample (more precisely the second part of the blood sample) are lysed with the exception of the basophilic granulocytes.

Ein besonderer Vorteil des Verfahrens besteht dabei darin, dass für die erste Differentialanalyse und die zweite Differentialanalyse auf gängige Methoden zurückgegriffen werden kann, die bei herkömmlichen Hämatologie-Systemen in der Regel bereits implementiert sind. Insbesondere werden die erste Differentialanalyse und die zweite Differentialanalyse vorzugsweise mittels eines ADVIA 2120i-Hämatologie-System der Fa. Siemens AG durchgeführt. Für die erste Differentialanalyse wird hierbei die an sich bekannte Peroxidase-Methode des ADVIA 2120i genutzt. Für die zweite Differentialanalyse wird vorzugsweise die an sich bekannte Basophil-Methode des ADVIA 2120i genutzt. Das erfindungsgemäße Analyseverfahren kann hierbei besonders einfach durch eine vom Aufwand her geringfügige Erweiterung der Auswertungsalgorithmen des an sich herkömmlichen Hämatologie-Systems realisiert werden.A particular advantage of the method is that for the first differential analysis and the second differential analysis common methods can be used, which are usually already implemented in conventional hematology systems. In particular, the first differential analysis and the second differential analysis are preferably carried out by means of an ADVIA 2120i hematology system from Siemens AG. For the first differential analysis, the known peroxidase method of the ADVIA 2120i is used. For the second differential analysis, the known Basophil method of the ADVIA 2120i is preferably used. In this case, the analysis method according to the invention can be realized particularly simply by an expansion of the evaluation algorithms of the conventional hematology system, which is small in terms of outlay.

Die vorstehend beschriebenen Verfahrensschritte können im Rahmen der Erfindung – soweit kausal möglich – gleichzeitig oder in beliebiger Reihenfolge nacheinander durchgeführt werden. Insbesondere können die erste Differentialanalyse und zweite Differentialanalyse gleichzeitig oder in beliebiger Reihenfolge nacheinander durchgeführt werden. Des Weiteren können die Anteilsparameter des Verfahrens unter Berücksichtigung der gegebenen Kausalitäten in beliebiger Reihenfolge bestimmt und mit den vorgegebenen Schwellwerten verglichen werden.Within the scope of the invention, the method steps described above can be carried out simultaneously or in any desired sequence, as far as is possible. In particular, the first differential analysis and second differential analysis may be performed simultaneously or in any order be carried out in succession. Furthermore, the component parameters of the method can be determined taking into account the given causalities in any order and compared with the predetermined threshold values.

Das erfindungsgemäße Hämatologie-System umfasst eine erste Analyseeinheit zur automatischen Durchführung der ersten Differentialanalyse sowie eine zweite Analyseeinheit zur automatischen Durchführung der zweiten Differentialanalyse. Darüber hinaus umfasst das Hämatologie-System eine Steuereinheit, die programmtechnisch und/oder schaltungstechnisch zur automatischen Durchführung des erfindungsgemäßen Verfahrens, insbesondere in einer der vorstehend beschriebenen Verfahrensvarianten eingerichtet ist.The hematology system according to the invention comprises a first analysis unit for automatically performing the first differential analysis and a second analysis unit for automatically performing the second differential analysis. In addition, the hematology system comprises a control unit, which is set up in terms of programming technology and / or circuitry for automatically carrying out the method according to the invention, in particular in one of the method variants described above.

Die Steuereinheit ist dabei insbesondere durch einen Steuerrechner gebildet, in dem die Funktionalität zur automatischen Durchführung des Verfahrens in Form einer Steuersoftware implementiert ist. Anstelle eines einzigen Steuerrechners können im Rahmen der Erfindung auch mehrere Rechner vorgesehen sein, auf die verschiedene Bestandteile der Steuersoftware verteilt sind.The control unit is formed in particular by a control computer, in which the functionality for the automatic implementation of the method is implemented in the form of a control software. Instead of a single control computer, several computers can be provided within the scope of the invention, to which various components of the control software are distributed.

Nachfolgend werden Ausführungsbeispiele der Erfindung anhand einer Zeichnung näher erläutert. Darin zeigen:Embodiments of the invention will be explained in more detail with reference to a drawing. Show:

1 in einem grob schematisch vereinfachten Blockschaltbild ein Hämatologie-System zur Analyse einer Blutprobe, 1 in a roughly schematically simplified block diagram of a hematology system for analyzing a blood sample,

2 in einem schematisch vereinfachten Flussdiagramm ein von dem Hämatologie-System gemäß 1 automatisch durchgeführtes Verfahren, 2 in a schematically simplified flowchart according to the hematology system according to 1 automatically performed procedure,

3 ein im Zuge des Verfahrens von dem Hämatologie-System erstelltes Perox-Zytogramm einer auf einer Messung der Lichtabsorption nach Peroxidase-Färbung sowie der Vorwärtslichtstreuung beruhenden ersten Differentialanalyse für eine Blutprobe eines gesunden Patienten, 3 a peroxytogram of a hematology system peroxytogram of a first differential analysis for a blood sample of a healthy patient based on measurement of light absorption after peroxidase staining and forward light scattering;

4 ein im Zuge des Verfahrens von dem Hämatologie-System erstelltes Baso-Zytogramm einer auf einer Messung der Vorwärts- und Seitwärtslichtstreuung beruhenden zweiten Differentialanalyse für die Blutprobe des gesunden Patienten, 4 a Baso-Cytogram of a second differential analysis for the blood sample of the healthy patient based on a measurement of the forward and side-light scattering in the course of the procedure by the hematology system,

5 in Darstellung gemäß 3 das Perox-Zytogramm der ersten Differentialanalyse für eine Blutprobe eines APL-Patienten, und 5 in illustration according to 3 the peroxytogram of the first differential analysis for a blood sample of an APL patient, and

6 in Darstellung gemäß 4 das Baso-Zytogramm der zweiten Differentialanalyse für die Blutprobe des APL-Patienten. 6 in illustration according to 4 the baso-cytogram of the second differential analysis for the blood sample of the APL patient.

Einander entsprechende Teile und Größen sind in allen Figuren stets mit gleichen Bezugszeichen versehen.Corresponding parts and sizes are always provided with the same reference numerals in all figures.

Das in 1 dargestellte (Hämatologie-)System 1 umfasst eine erste Analyseeinheit, die nachfolgend als (Perox-)Analyseeinheit 2 bezeichnet ist, zur Durchführung einer ersten Differentialanalyse A1. Das System 1 umfasst weiterhin eine zweite Analyseeinheit, die nachfolgend als (Baso-)Analyseeinheit 3 bezeichnet ist, zur Durchführung einer zweiten Differentialanalyse A2. Das System 1 umfasst darüber hinaus eine Steuereinheit in Form eines (Steuer- und Auswerte-)Rechners 4. Das Hämatologie-System 1 umfasst schließlich einen Bildschirm 5 als Ausgabeschnittstelle. Der Bildschirm 5 ist vorzugsweise als Touch-Screen ausgebildet und dient dabei auch als Eingabeschnittstelle zur Aufnahme von Nutzereingaben.This in 1 illustrated (hematology) system 1 comprises a first analysis unit, hereinafter referred to as (perox) analysis unit 2 is designated for performing a first differential analysis A1. The system 1 further comprises a second analysis unit, hereinafter referred to as (baso) analysis unit 3 is designated for carrying out a second differential analysis A2. The system 1 furthermore includes a control unit in the form of a (control and evaluation) computer 4 , The hematology system 1 finally includes a screen 5 as output interface. The screen 5 is preferably designed as a touch screen and also serves as an input interface for receiving user input.

In 1 ist ferner ein in das Hämatologie-System 1 eingesetzter Probenbehälter 6 mit einer zu analysierenden Blutprobe 7 dargestellt.In 1 is also in the hematology system 1 inserted sample container 6 with a blood sample to be analyzed 7 shown.

Der Probenbehälter 6 ist in eingesetztem Zustand fluidisch mit den Analyseeinheiten 2 und 3 verbunden, so dass Teilvolumina der Blutprobe 7 mittels einer nicht explizit dargestellten Fördereinheit – insbesondere einer Ansaugvorrichtung - aus dem Probenbehälter 6 entnommen und mittels eines Scherventils jeweils einer beiden Analyseeinheiten 2 bzw. 3 zugeführt werden können.The sample container 6 is fluid in the inserted state with the analysis units 2 and 3 connected, so that partial volumes of the blood sample 7 by means of a not explicitly shown conveyor unit - in particular a suction device - from the sample container 6 taken and by means of a shear valve in each case a two analysis units 2 respectively. 3 can be supplied.

Innerhalb jeder der beiden Analyseeinheiten 2 und 3 wird das jeweilige Teilvolumen einer Reaktionskammer zugeführt und dort in nachfolgend näher beschriebener Weise mit Reagenzien versetzt. Das derart vorbehandelte Teilvolumen wird anschließend jeweils in einem Durchfluss-Zytometer analysiert.Within each of the two analysis units 2 and 3 the respective sub-volume is fed to a reaction chamber and mixed there with reagents in the manner described in more detail below. The partial volume pretreated in this way is then analyzed in each case in a flow cytometer.

Die Perox-Analyseeinheit 2 nutzt dabei ein Durchfluss-Zytometer zur Messung der Lichtabsorption durch einzelne Blutpartikel nach einer Peroxidase-Färbung sowie zur Messung der Vorwärtslichtstreuung durch die analysierten Blutpartikel als Maß für die Zellgröße. The perox analysis unit 2 uses a flow cytometer to measure light absorption by individual blood particles after peroxidase staining and to measure forward light scatter by the analyzed blood particles as a measure of cell size.

Die Baso-Analyseeinheit 3 nutzt ein weiteres Durchfluss-Zytometer zur Messung der Seitwärtsstreuung und der Vorwärtsstreuung durch einzelne Blutpartikel als Maß für die Strukturierung der analysierten Blutpartikel (insbesondere als Maß für die Granularität und die Zellkernstruktur) bzw. als Maß für die Zellgröße.The Baso analysis unit 3 uses another flow cytometer to measure sideward scattering and forward scattering by individual blood particles as a measure of the structuring of the analyzed blood particles (especially as a measure of granularity and nuclear structure) or as a measure of cell size.

Alternativ zu der vorstehend beschriebenen Ausführung, bei der jede der beiden Analyseeinheiten 2 und 3 über ein eigenes Durchfluss-Zytometer verfügt, kann für beide Analyseeinheiten 2 und 3 ein gemeinsames Durchfluss-Zytometer vorgesehen sein, das beispielsweise vom Aufbau her dem in US 6,524,858 B1 offenbarten Durchfluss-Zytometer entspricht.Alternatively to the embodiment described above, in which each of the two analysis units 2 and 3 has its own flow cytometer, can be used for both analysis units 2 and 3 a common flow cytometer may be provided which, for example, is structurally the in US 6,524,858 B1 disclosed flow cytometer corresponds.

In beiden Ausführungsvarianten werden allerdings vorzugsweise unterschiedliche Lichterzeuger für die erste Differentialanalyse A1 und die zweite Differentialanalyse A2 herangezogen. So nutzt die erste Analyseeinheiten 2 im Rahmen der ersten Differentialanalyse A1 vorzugsweise eine Wolframlampe als Lichterzeuger, während die zweite Analyseeinheit 3 im Rahmen der zweiten Differentialanalyse A2 eine Laserdiode als Lichterzeuger heranzieht.In both embodiments, however, preferably different light generators are used for the first differential analysis A1 and the second differential analysis A2. So use the first analysis units 2 in the context of the first differential analysis A1, preferably a tungsten lamp as light generator, while the second analysis unit 3 in the context of the second differential analysis A2 uses a laser diode as a light generator.

Der datenübertragungstechnisch mit den Analyseeinheiten 2 und 3 verbundene Rechner 4 dient einerseits zur Steuerung der Analyseeinheiten 2 und 3 sowie andererseits zur Auswertung der von den Analyseeinheiten 2 und 3 erzeugten Messdaten D1 bzw. D2. Der Rechner 4 ist vorzugsweise aufgeteilt in ein PC(Personal Computer)-Board, das zumindest einen Großteil der Steuerfunktionen für die Analyseeinheiten 2 und 3 übernimmt und das in einem Gerätegehäuse der Analyseeinheiten 2 und 3 integriert ist, sowie in mindestens einen externen PC, der hauptsächlich die Auswertung der von den Analyseeinheiten 2 und 3 erzeugten Messdaten D1 und D2 übernimmt.The data transmission technology with the analysis units 2 and 3 connected computers 4 serves on the one hand to control the analysis units 2 and 3 and on the other hand for the evaluation of the analysis units 2 and 3 generated measurement data D1 and D2. The computer 4 is preferably split into a personal computer (PC) board that carries at least a majority of the control functions for the analysis units 2 and 3 takes over and that in a device housing of the analysis units 2 and 3 integrated, as well as in at least one external PC, which is mainly the evaluation of the analysis units 2 and 3 generated measured data D1 and D2 takes over.

Das in dem Rechner 4 implementierte Steuer- und Auswerteprogramm 8 umfasst hierfür ein – nachfolgend als (Perox-)Steuermodul 9 bezeichnetes – Software-Modul, das zur Ansteuerung der Analyseeinheit 2 und zur Aufbereitung der von dieser erzeugten Messdaten D1 eingerichtet ist. Das Steuer- und Auswerteprogramm 8 umfasst des Weiteren ein – nachfolgend als (Baso-)Steuermodul 10 bezeichnetes – Software-Modul, das zur Ansteuerung der Analyseeinheit 3 und zur Aufbereitung der von dieser erzeugten Messdaten D2 eingerichtet ist. Das Steuer- und Auswerteprogramm 8 umfasst schließlich ein – nachfolgend als (APL-)Modul 11 bezeichnetes – Software-Modul. Das APL-Modul 11 dient hierbei dazu, durch weitere Auswertung der von den Steuermodulen 9 und 10 aufbereiteten Messdaten gegebenenfalls Hinweise auf APL zu erkennen. Das APL-Modul 11 kann hierbei auch – separat von den übrigen vorstehend beschriebenen Teilen des Programms 8 – in einem eigenen Middleware-PC als Teil eines Regelwerks implementiert sein, das zur Erkennung bestimmter Krankheitsbilder sowie zur Alarmgebung bei Erkennung von Anzeichen eines bestimmten Krankheitsbildes dient.That in the calculator 4 implemented control and evaluation program 8th includes for this purpose - hereinafter referred to as (perox) control module 9 designated - software module used to control the analysis unit 2 and is set up for processing the measurement data D1 generated by the latter. The control and evaluation program 8th further includes a - hereinafter referred to as (baso) control module 10 designated - software module used to control the analysis unit 3 and is set up for processing the measurement data D2 generated by the latter. The control and evaluation program 8th finally includes a - hereinafter referred to as (APL) module 11 designated - software module. The APL module 11 serves here by further evaluation of the control modules 9 and 10 processed readings, if necessary, to identify clues to APL. The APL module 11 can also be - separately from the other parts of the program described above 8th - be implemented in a separate middleware PC as part of a set of rules that can be used to detect certain medical conditions and to alert you to signs of a specific condition.

Das Hämatologie-System 1 basiert in zweckmäßiger Ausführung auf dem Gerät ADVIA 2120i der Fa. Siemens. Dabei entsprechen die Perox-Analyseeinheit 2, die Baso-Analyseeinheit 3 sowie die zugehörigen Steuermodule 9 bzw. 10 hinsichtlich Aufbau und Funktion bereits vorhandenen Komponenten der herkömmlichen Bauform des ADVIA 2120i. Bei dem APL-Modul 11 handelt es sich dagegen um eine Software-Erweiterung, die nicht Bestandteil der herkömmlichen Steuer- und Auswertesoftware des ADVIA 2120i ist.The hematology system 1 is based on the device ADVIA 2120i from Siemens. This corresponds to the perox analysis unit 2 , the Baso analysis unit 3 as well as the associated control modules 9 respectively. 10 in terms of design and function already existing components of the conventional design of the ADVIA 2120i. In the APL module 11 On the other hand, it is a software extension that is not part of the ADVIA 2120i's conventional control and evaluation software.

Im Betrieb des Hämatologie-Systems 1 wird von dem APL-Modul 11 unter Rückgriff auf die Steuermodule 9 und 10 und die Analyseeinheiten 2 und 3 automatisch ein Verfahren durchgeführt, das anhand von 2 im Einzelnen beschrieben ist. Das Verfahren startet nach dem Einsetzen des Probenbehälters 6, der die zu analysierende Blutprobe 7 enthält und nach Abgabe eines entsprechenden Startbefehls durch einen Nutzer.In operation of the hematology system 1 is from the APL module 11 using the control modules 9 and 10 and the analysis units 2 and 3 automatically performed a procedure based on 2 is described in detail. The procedure starts after inserting the sample container 6 containing the blood sample to be analyzed 7 contains and after submission of a corresponding start command by a user.

Nach dem Verfahrensstart (Schritt 20) wird durch das Hämatologie-System 1 in einem Schritt 21 automatisch ein erster Teil 22 (1) der Blutprobe 7 aus dem Probenbehälter 6 entnommen und der Analyseeinheit 2 zugeführt.After the process start (step 20 ) is through the hematology system 1 in one step 21 automatically a first part 22 ( 1 ) of the blood sample 7 from the sample container 6 taken and the analysis unit 2 fed.

In der Analyseeinheit 2 wird der Teil 22 der Blutprobe 7 in einem Schritt 23 mit einem ersten Reagens versetzt, unter dessen Wirkung die Erythrozyten der Blutprobe 7 lysiert werden.In the analysis unit 2 becomes the part 22 the blood test 7 in one step 23 with a first reagent, under whose action the erythrocytes of the blood sample 7 be lysed.

Das erste Reagens hat enthält in einer geeigneten Zusammensetzung:

  • – Natriumdodecylsulfat, 0,36 mmol/L
  • – Sorbitol, 620 mmol/L
  • – Natriumchlorid, 8,35 mmol/L
  • – Formaldehyd, 5,7%
  • – BRIJ-35, 0,100 mmol\L
  • – Puffer
The first reagent contained in a suitable composition:
  • Sodium dodecyl sulfate, 0.36 mmol / L
  • - sorbitol, 620 mmol / L
  • Sodium chloride, 8.35 mmol / L
  • - formaldehyde, 5.7%
  • - BRIJ-35, 0.100 mmol \ L
  • - Buffer

Anschließend werden dem derart aufbereiteten Teil 22 der Blutprobe 7 in einem Schritt 24 ein 4-Chlor-1-Naphthol enthaltendes zweites Reagens, sowie – insbesondere gleichzeitig – in einem Schritt 25 ein Wasserstoffperoxid (H2O2) enthaltendes drittes Reagens zugesetzt.Subsequently, the thus prepared part 22 the blood test 7 in one step 24 a second reagent containing 4-chloro-1-naphthol, and - especially simultaneously - in one step 25 a third reagent containing hydrogen peroxide (H 2 O 2 ) was added.

Das in dem dritten Reagens enthaltene Wasserstoffperoxid wird durch das im Zytoplasma bestimmter Blutteilchen vorhandene Enzym Peroxidase umgesetzt in Wasser (H2O) und freien Sauerstoff (O*): H2O2 → H2O + O* The hydrogen peroxide contained in the third reagent is converted by the enzyme peroxidase present in the cytoplasm of certain blood particles into water (H 2 O) and free oxygen (O *): H 2 O 2 → H 2 O + O *

Durch Reaktion des freien Sauerstoffs mit 4-Chlor-1-Naphthol entsteht dabei ein dunkles Präzipitat in den Peroxidase enthaltenden Blutpartikeln. Dieses Präzipitat und die damit verbundene Einfärbung verursacht eine erhöhte Lichtabsorption dieser Blutpartikel, die mit der Peroxidase-Aktivität der betroffenen Blutpartikel korreliert ist.Reaction of the free oxygen with 4-chloro-1-naphthol gives rise to a dark precipitate in the peroxidase-containing blood particles. This precipitate and the associated coloration causes increased light absorption of these blood particles, which is correlated with the peroxidase activity of the affected blood particles.

Peroxidase-positive Blutpartikel (Blutpartikel mit hoher Peroxidase-Aktivität und entsprechend hoher Einfärbung) sind dabei insbesondere die neutrophilen und eosinophilen Granulozyten, aber auch die im Falle von APL krankhaft vermehrten Promyelozyten. Dagegen sind Lymphozyten und basinophile Granulozyten peroxidase-negativ und erfahren somit aufgrund mangelnder Peroxidase-Aktivität keine signifikante Einfärbung.Peroxidase-positive blood particles (blood particles with high peroxidase activity and correspondingly high coloration) are, in particular, the neutrophilic and eosinophilic granulocytes, but also the promyelocytes that are pathologically increased in the case of APL. In contrast, lymphocytes and basinophilic granulocytes are peroxidase-negative and thus undergo no significant coloration due to lack of peroxidase activity.

In einem Schritt 26 werden die mehr oder weniger eingefärbten Blutpartikel des Teils 22 der Blutprobe 7 im Durchfluss-Zytometer vereinzelt durch den Lichtstrahl der Wolframlampe geführt. Dabei wird einerseits die durch jedes der Blutpartikel beim Durchgang durch den Lichtstrahl verursachte Lichtabsorption gemessen. Andererseits wird die Vorwärtsstreuung gemessen, also die Stärke desjenigen Streulichts, das beim Durchgang des jeweiligen Blutpartikels in einen Winkel von beispielsweise 3° gegenüber der Propagationsrichtung des ungestreuten Lichtstrahls emittiert wird. Die Information über die Lichtabsorption und die Vorwärtsstreuung eines jeden analysierten Blutpartikels wird von der Analyseeinheit 2 im Rahmen der Messdaten D1 an das Steuermodul 9 übermittelt und von diesem in einem Perox-Zytogramm 27 (1) erfasst.In one step 26 become the more or less colored blood particles of the part 22 the blood test 7 isolated in the flow cytometer by the light beam of the tungsten lamp. On the one hand, the light absorption caused by each of the blood particles passing through the light beam is measured. On the other hand, the forward scattering is measured, that is to say the intensity of that scattered light which is emitted during the passage of the respective blood particle at an angle of, for example, 3 ° with respect to the propagation direction of the unscattered light beam. The information about the light absorption and the forward scattering of each analyzed blood particle is taken from the analysis unit 2 in the context of the measurement data D1 to the control module 9 transmitted and from this in a perox cytogram 27 ( 1 ) detected.

Als Perox-Zytogramm 27 ist dabei allgemein eine Datenreihe bezeichnet, in der für jeden analysierten Blutpartikel die gemessene Lichtabsorption und die gemessene Vorwärtsstreuung (oder daraus jeweils abgeleitete Größen für die Peroxidase-Aktivität bzw. die Zellgröße) in einem zweidimensionalen Koordinatensystem zueinander in Beziehung gesetzt sind. Die Messdaten D1 werden von dem Steuermodul 9 hierbei bevorzugt in Form einer 2D-Punktwolke erfasst. Eine entsprechende graphische Darstellung des Perox-Zytogramms 27 ist exemplarisch in 3 dargestellt, wobei die Lichtabsorption/Peroxidase-Aktivität auf der Abszissenachse (x-Achse) und die Vorwärtsstreuung/Zellgröße auf der Ordinatenachse (y-Achse) angetragen sind. Alternativ hierzu kann das Steuermodul 9 die Messdaten D1 allerdings auch in anderer mathematischer Form, insbesondere in Form eines zweidimensionalen Histogramms erfassen.As a perox cytogram 27 is generally referred to as a data series in which the measured light absorption and the measured forward scatter (or respectively derived variables for the peroxidase activity or the cell size) for each analyzed blood particle are related to one another in a two-dimensional coordinate system. The measurement data D1 is from the control module 9 in this case preferably detected in the form of a 2D point cloud. A corresponding graphical representation of the perox cytogram 27 is exemplary in 3 in which the light absorption / peroxidase activity on the abscissa axis (x-axis) and the forward scatter / cell size on the ordinate axis (y-axis) are plotted. Alternatively, the control module 9 However, the measurement data D1 also in other mathematical form, in particular in the form of a two-dimensional histogram capture.

In einem Schritt 28 bestimmt das Steuermodul 9 mittels einer automatischen Populations- oder Clusteranalyse aus dem Perox-Zytogramm 27 sieben verschiedene Populationen 29 bis 35 von Messpunkten, die das Steuermodul 9 gemäß TAB 1 verschiedenen Blutpartikelarten zuordnet. Die gefundenen Populationen (Cluster von Messpunkten) werden dabei nach Maßgabe zweier gespeicherter Proben (nämlich einer normal gefärbten und einer schwach gefärbten Probe) zugeordnet. Zudem bestimmt das Steuermodul 9 gemäß TAB 1 zu jeder der – den Leukozyten zugerechneten – Populationen 31 bis 35 jeweils einen (Anteils-)Parameter, der die relative Häufigkeit der jeweiligen Leukozytenart in der Blutprobe 7 angibt. Population Blutpartikelart Anteilsparameter 29 Erythrozytenkerne und Rauschen - 30 Thrombozyten - 31 Lymphozyten und basophile Granulozyten %LYMPH + %BASO 32 Große peroxidase-negative Zellen %LUC 33 Monozyten %MONO 34 Neutrophile Granulozyten %NEUT 35 Eosinophile Granulozyten %EOS TAB 1 In one step 28 determines the control module 9 by means of an automatic population or cluster analysis from the perox cytogram 27 seven different populations 29 to 35 of measurement points that control the module 9 according to TAB 1 different types of blood particles assigns. The populations found (clusters of measuring points) are assigned in accordance with two stored samples (namely a normally colored and a weakly colored sample). In addition, the control module determines 9 according to TAB 1, for each of the 31-35 populations assigned to the leukocytes, one (proportion) parameter representing the relative abundance of each leukocyte species in the blood sample 7 indicates. population Blutpartikelart share parameters 29 RBC nuclei and noise - 30 platelets - 31 Lymphocytes and basophilic granulocytes % LYMPH +% BASO 32 Large peroxidase-negative cells LUC% 33 monocytes %MONO 34 Neutrophil granulocytes % NEUT 35 Eosinophilic granulocytes EOS% TAB 1

Die Anteilsparameter (%LYMPH + %BASO), %LUC, %MONO, %NEUT und %EOS sind dabei auf die Gesamtzahl der analysierten Leukozyten normiert, so dass sich diese Anteilsparameter zu 100% addieren. Die Populationen der Lymphozyten und der basophilen Granulozyten sind im Perox-Zytogramm 27 vermischt und somit nicht trennbar. Entsprechend können auch die jeweils zugehörigen Anteilsparameter %LYMPH und %BASO aus dem Perox-Zytogramm 27 nur in Summe bestimmt werden.The percentage parameters (% LYMPH +% BASO),% LUC,% MONO,% NEUT and% EOS are normalized to the total number of analyzed leucocytes, so that these percentage parameters add up to 100%. The populations of lymphocytes and basophilic granulocytes are in the peroxytogram 27 mixed and thus not separable. Correspondingly, the respectively associated share parameters% LYMPH and% BASO from the peroxytogram can also be used 27 only be determined in total.

In einem Schritt 36 wird durch das Hämatologie-System 1 automatisch ein zweiter Teil 37 (1) der Blutprobe 7 aus dem Probenbehälter 6 entnommen und der Analyseeinheit 3 zugeführt.In one step 36 gets through the hematology system 1 automatically a second part 37 ( 1 ) of the blood sample 7 from the sample container 6 taken and the analysis unit 3 fed.

In der Analyseeinheit 3 wird der Teil 37 der Blutprobe 7 in einem Schritt 38 mit einem vierten Reagens versetzt, unter dessen Wirkung sowohl die Erythrozyten der Blutprobe 7 als auch die Thrombozyten sowie alle Leukozyten mit Ausnahme der basophilen Granulozyten lysiert werden.In the analysis unit 3 becomes the part 37 the blood test 7 in one step 38 with a fourth reagent, under whose action both the erythrocytes of the blood sample 7 as well as the platelets and all leukocytes except the basophilic granulocytes are lysed.

Das vierte Reagens enthält in einer geeigneten Zusammensetzung

  • – Chlorwasserstoffsäure (Salzsäure), 9,000 mmol/L
  • – Phthalsäure, 21,49 mmol/L
  • – Konservierungsmittel
  • – Netzmittel
The fourth reagent contains in a suitable composition
  • Hydrochloric acid (hydrochloric acid), 9,000 mmol / L
  • Phthalic acid, 21.49 mmol / L
  • - preservative
  • - wetting agent

Der so vorbehandelte Teil 37 der Blutprobe 7 wird in einem Schritt 39 im Durchfluss-Zytometer vereinzelt durch den Lichtstrahl der Laserdiode geführt. Dabei wird einerseits die durch jedes der Blutpartikel beim Durchgang durch den Lichtstrahl verursachte Seitwärtsstreuung gemessen, also die Stärke desjenigen Streulichts, das beim Durchgang des jeweiligen Blutpartikels in einen Winkel von beispielsweise 15° gegenüber der Propagationsrichtung des ungestreuten Lichtstrahls emittiert wird. Andererseits wird – analog zu Schritt 26 – wiederum die durch die analysierten Blutpartikel jeweils verursachte Vorwärtsstreuung gemessen. Die Information über die Seitwärtsstreuung und die Vorwärtsstreuung eines jeden analysierten Blutpartikels wird von der Analyseeinheit 3 im Rahmen der Messdaten D2 an das Steuermodul 10 übermittelt und von diesem in einem Baso-Zytogramm 40 (1) erfasst.The pretreated part 37 the blood test 7 gets in one step 39 isolated in the flow cytometer by the light beam of the laser diode. In this case, on the one hand, the sideways scattering caused by each of the blood particles as they pass through the light beam is measured, that is to say the intensity of that scattered light which is emitted at the passage of the respective blood particle at an angle of, for example, 15 ° with respect to the propagation direction of the unscattered light beam. On the other hand - analogous to step 26 - Again measured by the analyzed blood particles each forward scattering. The information about the sideways scattering and the forward scattering of each analyzed blood particle is provided by the analysis unit 3 in the context of the measured data D2 to the control module 10 transmitted and from this in a Baso cytogram 40 ( 1 ) detected.

Als Baso-Zytogramm 40 ist dabei allgemein eine Datenreihe bezeichnet, in der für jeden analysierten Blutpartikel die gemessene Seitwärtsstreuung und die gemessene Vorwärtsstreuung (oder daraus jeweils abgeleitete Größen für die Strukturierung bzw. die Zellgröße) in einem zweidimensionalen Koordinatensystem zueinander in Beziehung gesetzt sind. Die Messdaten D2 werden von dem Steuermodul 10 wiederum bevorzugt in Form einer 2D-Punktwolke erfasst. Eine entsprechende graphische Darstellung des Baso-Zytogramms 40 ist exemplarisch in 4 dargestellt, wobei die Seitwärtsstreuung/Strukturierung auf der Abszissenachse (x-Achse) und die Vorwärtsstreuung/Zellgröße auf der Ordinatenachse (y-Achse) angetragen sind. Alternativ hierzu kann das Steuermodul 10 die Messdaten D2 wiederum auch in anderer mathematischer Form, insbesondere in Form eines zweidimensionalen Histogramms erfassen.As a baso-cytogram 40 is generally referred to as a data series in which, for each blood particle analyzed, the measured lateral scattering and the measured forward scattering (or the respectively derived sizes for the structuring or the cell size) are related to one another in a two-dimensional coordinate system. The measurement data D2 are from the control module 10 again preferably detected in the form of a 2D point cloud. A corresponding graphical representation of the Baso cytogram 40 is exemplary in 4 in which the sideward scattering / structuring on the abscissa axis (x axis) and the forward scattering / cell size on the ordinate axis (y axis) are plotted. Alternatively, the control module 10 the measured data D2 in turn also in other mathematical form, in particular in the form of a two-dimensional histogram capture.

In einem Schritt 41 bestimmt das Steuermodul 10 mittels automatischer Populations- oder Histogrammanalyse aus dem Baso-Zytogramm 40 sieben verschiedene Populationen 42 bis 48 von Messpunkten, die das Steuermodul 10 gemäß TAB 2 verschiedenen Blutpartikelarten zuordnet. Zudem bestimmt das Steuermodul 10 gemäß TAB 2 zu jeder der – den Leukozyten zugerechneten – Populationen 43 bis 45 und 48 einen (Anteils-)Parameter, der die relative Häufigkeit der jeweiligen Leukozytenart in der Blutprobe 7 abgibt. Population Blutpartikelart Anteilsparameter 42 Rauschen - 43 Blastkerne %BLAST 44 Mononuclide Leukozytenkerne (Kerne von Monozyten und Lymphozyten) %MN 45 Basophile Granulozyten %BASO 46 Mutmaßliche basophile Granulozyten - 47 Sättigungsbereich - 48 Polymorphe Granulozytenkerne (Kerne von neutrophilen und eosinophilen Granulozyten) %PMN TAB 2 In one step 41 determines the control module 10 by means of automatic population or histogram analysis from the Baso cytogram 40 seven different populations 42 to 48 of measuring points, the control module 10 according to TAB 2 different blood particle types assigns. In addition, the control module determines 10 according to TAB 2, for each of the populations 43 to 45 and 48 assigned to the leucocytes, a (proportion) parameter indicating the relative abundance of the respective leukocyte species in the blood sample 7 emits. population Blutpartikelart share parameters 42 sough - 43 Blast nuclei % BLAST 44 Mononuclide leukocyte nuclei (nuclei of monocytes and lymphocytes) % MN 45 Basophilic granulocytes BASO% 46 Suspected basophilic granulocytes - 47 saturation - 48 Polymorphic granulocyte nuclei (nuclei of neutrophilic and eosinophilic granulocytes) % PMN TAB 2

Dabei wird jeder Messpunkt (d. h. jede analysierte Zelle) in beispielhafter Ausführung des Verfahrens in einem von jeweils 50 Zählkanälen pro Zytogrammachse gezählt. Mittels Populationsanalyse werden dabei zunächst getrennte Populationen (Cluster von Messpunkten) ermittelt und mit mindestens einem hinterlegten Referenzmuster verglichen. Sofern die gefundenen Cluster hinsichtlich Position innerhalb des Zytogramms, Fläche oder Dichte deutlich von dem Referenzmuster abweichen, oder wenn nur ein Cluster identifiziert werden kann, werden die Populationen 42 bis 48 durch Histogrammanalyse bestimmt, insbesondere durch vorgegebene Gruppierung der Zählkanäle.Each measurement point (i.e., each cell analyzed) in an exemplary embodiment of the method is counted in one of every 50 count channels per cytogram axis. By means of population analysis, separate populations (clusters of measuring points) are first of all determined and compared with at least one stored reference pattern. If the clusters found differ significantly in position within the cytogram, area or density from the reference pattern, or if only one cluster can be identified, populations 42 to 48 are determined by histogram analysis, in particular by predetermined grouping of counting channels.

Die Anteilsparameter %BLAST, %MN, %BASO und %PMN sind dabei auf die Gesamtzahl der analysierten Leukozyten normiert, so dass sich diese Anteilsparameter zu 100% addieren. Die Populationen 42, 46 und 47 werden vernachlässigt.The percentage parameters% BLAST,% MN,% BASO and% PMN are normalized to the total number of analyzed leucocytes, so that these component parameters add up to 100%. Populations 42, 46 and 47 are neglected.

Die Differentialanalyse A2 (Schritte 36, 38–41) wird vorzugsweise gleichzeitig mit der Differentialanalyse A1 (Schritte 21, 23, 24–26, 28) durchgeführt.Differential analysis A2 (steps 36 . 38 - 41 ) is preferably simultaneously with the differential analysis A1 (steps 21 . 23 . 24 - 26 . 28 ) carried out.

Sobald die jeweilige Differentialanalyse A1, A2 abgeschlossen ist, übermittelt das zugehörige Steuermodul 9 bzw. 10 die jeweiligen Anteilsparameter %NEUT und %EOS bzw. %PMN und %BLAST an das APL-Modul 11.As soon as the respective differential analysis A1, A2 has been completed, the associated control module transmits 9 respectively. 10 the respective share parameters% NEUT and% EOS or% PMN and% BLAST to the APL module 11 ,

Das APL-Modul 11 berechnet nach Erhalt dieser Daten in einem Schritt 49 einen Anteilsparameter %PP, der der relativen Häufigkeit der peroxidase-positiven Leukozyten entspricht %PP = %NEUT + %EOS. GLG 1 The APL module 11 calculated after receiving this data in one step 49 a percentage parameter% PP corresponding to the relative abundance of peroxidase-positive leukocytes % PP =% NEUT +% EOS. GLG 1

Durch Subtraktion des Anteilparameters %PMN der polymorphkernigen Granulozyten von diesem Anteilsparameter %PP berechnet das APL-Modul 11 einen Anteilsparameter %IG, der der relativen Häufigkeit der unreifen Granulozyten (insbesondere den Promyelozyten) entspricht %IG = %PP – %PMN. GLG 2 By subtracting the proportion parameter% PMN of the polymorphonuclear granulocytes from this percentage parameter% PP, the APL module calculates 11 a percentage parameter% IG which corresponds to the relative abundance of the immature granulocytes (in particular the promyelocytes) % IG =% PP -% PMN. GLG 2

GLG 1 und 2 können dabei mathematisch zusammengefasst werden zu %IG = %NEUT + %EOS – %PMN, GLG 3 so dass die explizite Berechnung des Anteilsparameters %PP entfallen kann.GLG 1 and 2 can be summarized mathematically % IG =% NEUT +% EOS -% PMN, GLG 3 so that the explicit calculation of the share parameter% PP can be omitted.

In einem weiteren Schritt 50 prüft das APL-Modul 11, ob der Anteilsparameter %IG einen ersten Schwellwert S1 überschreitet (%IG > S1). Dieser erste Schwertwert S1 ist hierbei im dargestellten Beispiel auf 60% festgesetzt. Des Weiteren prüft das APL-Modul 11, ob der Anteilsparameter %BLAST einen zweiten Schwellwert S2 überschreitet (%BLAST > S2). Dieser zweite Schwellwert S2 ist hierbei im dargestellten Beispiel auf 20% festgesetzt.In a further step 50 checks the APL module 11 whether the share parameter% IG exceeds a first threshold S1 (% IG> S1). This first sword value S1 is set here in the example shown to 60%. Furthermore, the APL module checks 11 whether the percentage parameter% BLAST exceeds a second threshold S2 (% BLAST> S2). This second threshold S2 is set here in the example shown to 20%.

Wenn wenigstens eine dieser beiden Bedingungen nicht erfüllt ist (N), beendet das APL-Modul 11 das Verfahren (Schritt 51).If at least one of these two conditions is not met (N), the APL module terminates 11 the procedure (step 51 ).

Wenn dagegen beide Bedingungen erfüllt sind (Y), also im Fall
%IG > 60% UND %BLAST > 20%,
gibt das APL-Modul 11 in einem Schritt 52 einen Warnhinweis W (1) aus, der die analysierte Blutprobe 7 in für den Nutzer eindeutig wahrnehmbarer Weise als APL-verdächtig kennzeichnet und springt dann zum Verfahrensende (Schritt 51).If, on the other hand, both conditions are satisfied (Y), in the case
% IG> 60% AND% BLAST> 20%,
gives the APL module 11 in one step 52 a warning W ( 1 ), which analyzes the analyzed blood sample 7 marked as APL-suspicious in clearly perceptible for the user and then jumps to the end of the process (step 51 ).

Die obige Bedingung weist eine hohe Spezifität von nahezu 100% auf. Die Wahrscheinlichkeit, eine APL-negative Probe fälschlicherweise als APL-positiv zu klassifizieren, ist somit vernachlässigbar gering. Allerdings hat sich gezeigt, dass bei Test der obigen Bedingung ein geringes Risiko besteht, APL-positive Proben nicht zu erkennen und fälschlicherweise als APL-negativ zu klassifizieren. The above condition has a high specificity of almost 100%. The probability of mistakenly classifying an APL-negative sample as APL-positive is therefore negligible. However, it has been shown that when testing the above condition, there is little risk of not recognizing APL-positive samples and misclassifying them as APL-negative.

In einer alternativen Ausführung des Verfahrens wird in Schritt 50 ein zweiter Schwellwert S2' mit einer gewichteten Summe der Anteilsparameter %IG und %BLAST verglichen (%BLAST + F·%IG). Ein – im Vergleich zu dem Schwellwert S1 niedriger angesetzter – erster Schwellwert S1' wird weiterhin mit dem Anteilsparameter %IG verglichen. Der erste Schwellwert S1' ist hierbei auf 30% festgesetzt. Der zweite Schwellwert S2' ist auf 27% bei einem Wichtungsfaktor F von 0,27 festgesetzt.In an alternative embodiment of the method is in step 50 a second threshold value S2 'is compared with a weighted sum of the percentage parameters% IG and% BLAST (% BLAST + F ·% IG). A first threshold value S1 ', which is lower than the threshold value S1, is furthermore compared with the percentage parameter% IG. The first threshold value S1 'is set at 30%. The second threshold value S2 'is set at 27% with a weighting factor F of 0.27.

Bei der vorstehend beschriebenen Verfahrensvariante wird in Schritt 50 somit die Bedingung %IG > 30% UND (%BLAST + 0,27·%IG) > 27%, geprüft.In the process variant described above, in step 50 hence the condition % IG> 30% AND (% BLAST + 0.27 ·% IG)> 27%, checked.

Bei Erfüllung dieser Bedingung wird wiederum in Schritt 52 der Warnhinweis W ausgelöst.Upon fulfillment of this condition will turn in step 52 the warning W is triggered.

Die zuletzt beschriebene Verfahrensvariante hat nach durchgeführten Versuchen eine Sensitivität von 100%. Es wurden also mit hoher Sicherheit alle APL-positiven Blutproben als solche erkannt. Die hohe Sensitivität bedingt eine akzeptable, aber nicht gänzlich vernachlässigbare Wahrscheinlichkeit für Positiv-Fehlbefunde. Die Wahrscheinlichkeit, eine Blutprobe fälschlicherweise als APL-positiv zu werten, liegt dabei etwa bei 1:5000.The method variant described last has a sensitivity of 100% after tests have been carried out. Thus, all APL-positive blood samples were identified as such with a high degree of certainty. The high sensitivity requires an acceptable, but not completely negligible probability of positive-false findings. The probability of mistaking a blood sample as APL positive is about 1: 5000.

Der Warnhinweis W besteht vorzugsweise in einer Textnachricht, beispielsweise mit dem Wortlaut „APL Verdacht”, die von dem APL-Modul 11 über den Bildschirm 5 angezeigt wird. Die Textnachricht enthält vorzugsweise ergänzende Hinweise zu durchzuführenden weiteren Schritten zur Verifizierung oder Falsifizierung des Verdachts. Beispielsweise enthält die Textnachricht Kontaktdaten von Spezialisten, die zur Bestätigung des APL-Verdachts kontaktiert werden können. Ferner kann die Textnachricht auch Hinweise zur therapeutischen Behandlung des mutmaßlichen APL-Falls enthalten. Zusätzlich oder alternativ zu einer reinen Textnachricht kann der Warnhinweis W auch ein Licht- oder Tonsignal umfassen.The warning message W preferably consists in a text message, for example with the wording "APL suspicion", which is issued by the APL module 11 over the screen 5 is shown. The text message preferably contains supplementary information on further steps to be carried out for verifying or falsifying the suspicion. For example, the text message contains contact details of specialists who can be contacted to confirm the APL suspicion. Furthermore, the text message may also contain indications for the therapeutic treatment of the putative APL case. In addition or as an alternative to a pure text message, the warning W can also include a light or sound signal.

Die Funktion des APL-Moduls 11 beruht auf der Erkenntnis, dass sich eine APL-positive Blutprobe (also die Blutprobe 7 eines APL-Patienten) in dem Perox-Zytogramm 27 und dem Baso-Zytogramm 40 von einer APL-negativen Blutprobe (also der Blutprobe 7 eines nicht an APL erkrankten Patienten 7) signifikant und in charakteristischer Weise unterscheidet.The function of the APL module 11 is based on the knowledge that an APL-positive blood sample (ie the blood sample 7 an APL patient) in the peroxytogram 27 and the baso-cytogram 40 from an APL-negative blood sample (ie the blood sample 7 a non-APL patient 7 ) distinguishes significantly and in a characteristic way.

Dies wird im Vergleich der 5 und 6, die das Perox-Zytogramm 27 und das Baso-Zytogramm 40 für eine APL-positive Blutprobe zeigen, mit den 3 bzw. 4 deutlich, wobei die 3 und 4 das Perox-Zytogramm 27 und das Baso-Zytogramm 40 für eine APL-negative Blutprobe wiedergeben.This will be compared to the 5 and 6 containing the perox cytogram 27 and the baso-cytogram 40 for an APL-positive blood sample, with the 3 respectively. 4 clearly, the 3 and 4 the peroxytogram 27 and the baso-cytogram 40 for an APL-negative blood sample.

Im Perox-Zytogramm 27 der APL-negativen Blutprobe (3) sind die Populationen 34 und 35 wohlgetrennt und werden tatsächlich in guter Näherung von den neutrophilen bzw. den eosinophilen Granulozyten gebildet. Daher liegt die Summe der zugehörigen Anteilsparameter %NEUT und %EOS in der gleichen Größenordnung wie der aus dem Baso-Zytogramm 40 abgeleitete Anteilsparameter %PMN der polymorphkernigen Granulozyten. Entsprechend nimmt der gemäß GLG 3 berechnete Anteilsparameter %IG in diesem Fall nur geringe (oder sogar negative) Werte an.In the perox cytogram 27 the APL negative blood sample ( 3 ), populations 34 and 35 are well separated and are indeed well approximated by the neutrophils and eosinophils, respectively. Therefore, the sum of the associated percentage parameters% NEUT and% EOS is of the same order of magnitude as that of the Baso cytogram 40 derived percentage parameters% PMN of polymorphonuclear granulocytes. Accordingly, the percentage parameter% IG calculated according to GLG 3 assumes only low (or even negative) values in this case.

Im Perox-Zytogramm 27 der APL-positiven Blutprobe (5) werden die Populationen 34 und 35 dagegen wesentlich von den krankhaft vermehrten Promyelozyten geprägt, während andere Blutpartikelarten, insbesondere die ausdifferenzierten neutrophilen und eosinophilen Granulozyten stark zurückgedrängt sind. Dies wird dadurch deutlich, dass in dem nach GLG 3 berechneten Anteilsparameter %IG die Summe der Anteilsparameter %NEUT und %EOS den Anteilsparameter %PMN wesentlich übersteigt, so dass %IG hohe Werte annimmt.In the perox cytogram 27 the APL-positive blood sample ( 5 ), the populations 34 and 35, on the other hand, are significantly influenced by the pathologically increased promyelocytes, while other blood particle types, in particular the differentiated neutrophilic and eosinophilic granulocytes, are strongly suppressed. This is made clear by the fact that in the share parameter% IG calculated according to GLG 3, the sum of the share parameters% NEUT and% EOS substantially exceeds the share parameter% PMN, so that% IG assumes high values.

Im Baso-Zytogramm 40 sind die im APL-Fall krankhaft vermehrten Promyelozyten gemäß 6 erkanntermaßen am besten anhand einer anomalen Vermehrung der Population 43 zu erkennen, die im APL-negativen Blut maßgeblich von den Blasten geprägt ist. Erkanntermaßen schlägt sich allerdings in der Population 43 lediglich ein Teil der krankhaft vermehrten Promyelozyten nieder. Ein weiterer Teil der Promyelozyten schlägt sich im APL-Fall in der Population 44 der mononukliden Leukozyten (Monozyten und Lymphozyten) nieder. Die krankhafte Vermehrung der Promyelozyten ist hier allerdings nur wenig auffällig, da sie von dem Rückgang der mononukliden Leukozyten zu einem wesentlichen Teil kompensiert wird. Da nur ein Teil der Promyelozyten in der Population 43 sichtbar ist, ist der zweite Schwellwert S2 deutlich niedriger angesetzt als der erste Schwellwert S1.In the baso-cytogram 40 are in the APL case morbidly increased promyelocytes according to 6 It can best be recognized from an abnormal increase in the population 43, which is significantly affected by the blasts in the APL-negative blood. However, it has been found that only part of the pathologically proliferated promyelocytes is found in the population 43. Another part of the promyelocytes is reflected in the APL case in the population of 44 mononuclide leukocytes (monocytes and lymphocytes). However, the pathological proliferation of promyelocytes is only slightly conspicuous, as it is largely compensated by the decline in mononuclide leukocytes. Since only a part of the promyelocytes is visible in the population 43, the second threshold value S2 is set much lower than the first threshold value S1.

Obwohl die Erfindung anhand der vorstehend beschriebenen Ausführungsbeispiele besonders deutlich wird, ist sie auf diese nicht beschränkt. Vielmehr können zahlreiche weitere Ausführungsvarianten der Erfindung von dem Fachmann aus der vorstehenden Beschreibung abgeleitet werden.Although the invention will be particularly apparent from the embodiments described above, it is not limited to these. Rather, numerous other embodiments of the invention may be derived by those skilled in the art from the foregoing description.

Claims (11)

Verfahren zur Analyse einer Blutprobe (7), – bei dem ein erster Teil (22) der Blutprobe (7) einer ersten Differentialanalyse (A1) in Hinblick auf die Peroxidase-Aktivität der Leukozyten unterzogen wird, wobei anhand der ersten Differentialanalyse (A1) ein erster Anteilsparameter (%PP = %NEUT + %EOS) bestimmt wird, der für den Anteil der peroxidase-positiven Leukozyten in der Blutprobe charakteristisch ist, – bei dem ein zweiter Teil (37) der Blutprobe (7) einer zweiten Differentialanalyse (A2) in Hinblick auf die Strukturierung der Leukozyten unterzogen wird, wobei anhand der zweiten Differentialanalyse (A2) ein zweiter Anteilsparameter (%PMN) bestimmt wird, der für den Anteil der polymorphkernigen Granulozyten in der Blutprobe (7) charakteristisch ist, – bei dem aus dem ersten Anteilsparameter (%PP) und dem zweiten Anteilsparameter (%PMN) ein dritter Anteilsparameter (%IG) abgeleitet wird, der für den Anteil der unreifen Granulozyten in der Blutprobe (7) charakteristisch ist, – bei dem anhand der zweiten Differentialanalyse (A2) ein vierter Anteilsparameter (%BLAST) bestimmt wird, der für den Anteil der unreifen, mononukliden Leukozyten in der Blutprobe (7) charakteristisch ist, und – bei dem ein Warnhinweis (W) erzeugt wird, wenn der dritte Anteilsparameter (%IG) einen ersten Schwellwert (S1) überschreitet und wenn der vierte Anteilsparameter (%BLAST) einen zweiten Schwellwert (S2) überschreitet, – wobei der erste Schwellwert (S1) derart vorgegeben wird, dass er einem Anteil der unreifen Granulozyten in der Blutprobe (7) zwischen 50% und 70% entspricht, und – wobei der zweite Schwellwert (S2) derart vorgegeben wird, dass er einem Anteil der unreifen, mononukliden Leukozyten in der Blutprobe (7) zwischen 10% und 30% entspricht.Method for analyzing a blood sample ( 7 ), - in which a first part ( 22 ) of the blood sample ( 7 ) is subjected to a first differential analysis (A1) with regard to the peroxidase activity of the leucocytes, the first differential analysis (A1) being used to determine a first particle parameter (% PP =% NEUT +% EOS) which determines the proportion of peroxidase activity. is characteristic of positive leukocytes in the blood sample, - in which a second part ( 37 ) of the blood sample ( 7 ) is subjected to a second differential analysis (A2) with regard to the structuring of the leucocytes, the second differential analysis (A2) being used to determine a second particle parameter (% PMN) which determines the proportion of polymorphonuclear granulocytes in the blood sample (A2). 7 ) is characteristic, - in which a third share parameter (% IG) is derived from the first share parameter (% PP) and the second share parameter (% PMN), which is indicative of the proportion of immature granulocytes in the blood sample ( 7 ) is characteristic, - in which, based on the second differential analysis (A2), a fourth fractional parameter (% BLAST) is determined which represents the proportion of immature, mononuclide leukocytes in the blood sample ( 7 ), and - wherein a warning (W) is generated when the third component parameter (% IG) exceeds a first threshold (S1) and when the fourth component parameter (% BLAST) exceeds a second threshold (S2), the first threshold value (S1) is predetermined such that it corresponds to a proportion of the immature granulocytes in the blood sample ( 7 ) is between 50% and 70%, and - wherein the second threshold (S2) is set such that it corresponds to a proportion of the immature, mononuclide leukocytes in the blood sample ( 7 ) corresponds to between 10% and 30%. Verfahren nach Anspruch 1, – wobei der erste Schwellwert (S1) derart vorgegeben wird, dass er einem Anteil der unreifen Granulozyten in der Blutprobe (7) zwischen 55% und 65%, und insbesondere 60% entspricht, und – wobei der zweite Schwellwert (S2) derart vorgegeben wird, dass er einem Anteil der unreifen, mononukliden Leukozyten in der Blutprobe (7) zwischen 15% und 25%, und insbesondere 20% entspricht.Method according to claim 1, - wherein the first threshold value (S1) is predetermined such that it corresponds to a proportion of the immature granulocytes in the blood sample ( 7 ) between 55% and 65%, and in particular 60%, and - wherein the second threshold value (S2) is predetermined such that it corresponds to a proportion of the immature, mononuclide leukocytes in the blood sample ( 7 ) between 15% and 25%, and in particular 20%. Verfahren zur Analyse einer Blutprobe (7), – bei dem ein erster Teil (22) der Blutprobe (7) einer ersten Differentialanalyse (A1) in Hinblick auf die Peroxidase-Aktivität der Leukozyten unterzogen wird, wobei anhand der ersten Differentialanalyse (A1) ein erster Anteilsparameter (%PP = %NEUT + %EOS) bestimmt wird, der für den Anteil der peroxidase-positiven Leukozyten in der Blutprobe charakteristisch ist, – bei dem ein zweiter Teil (37) der Blutprobe (7) einer zweiten Differentialanalyse (A2) in Hinblick auf die Strukturierung der Leukozyten unterzogen wird, wobei anhand der zweiten Differentialanalyse (A2) ein zweiter Anteilsparameter (%PMN) bestimmt wird, der für den Anteil der polymorphkernigen Granulozyten in der Blutprobe (7) charakteristisch ist, – bei dem aus dem ersten Anteilsparameter (%PP) und dem zweiten Anteilsparameter (%PMN) ein dritter Anteilsparameter (%IG) abgeleitet wird, der für den Anteil der unreifen Granulozyten in der Blutprobe (7) charakteristisch ist, – bei dem anhand der zweiten Differentialanalyse (A2) ein vierter Anteilsparameter (%BLAST) bestimmt wird, der für den Anteil der unreifen, mononukliden Leukozyten in der Blutprobe (7) charakteristisch ist, und – bei dem ein Warnhinweis (W) erzeugt wird, wenn nach Maßgabe der beiden Differentialanalysen (A1, A2) der Anteil (%PP) der peroxidase-positiven Leukozyten in der Blutprobe (7) den Anteil (%PMN) der polymorphkernigen Granulozyten in anomaler Weise übersteigt und wenn nach Maßgabe der zweiten Differentialanalyse (A2) der Anteil (%BLAST) der unreifen, mononukliden Leukozyten in der Blutprobe (7) in anomaler Weise erhöht ist, nämlich wenn der dritte Anteilsparameter (%IG) einen ersten Schwellwert (S1') überschreitet und wenn eine gewichtete Summe des dritten Anteilsparameters (%IG) mit dem vierten Anteilsparameter (%BLAST) einen zweiten Schwellwert (S2') überschreitet.Method for analyzing a blood sample ( 7 ), - in which a first part ( 22 ) of the blood sample ( 7 ) is subjected to a first differential analysis (A1) with regard to the peroxidase activity of the leucocytes, the first differential analysis (A1) being used to determine a first particle parameter (% PP =% NEUT +% EOS) which determines the proportion of peroxidase activity. is characteristic of positive leukocytes in the blood sample, - in which a second part ( 37 ) of the blood sample ( 7 ) is subjected to a second differential analysis (A2) with regard to the structuring of the leucocytes, the second differential analysis (A2) being used to determine a second particle parameter (% PMN) which determines the proportion of polymorphonuclear granulocytes in the blood sample (A2). 7 ) is characteristic, - in which a third share parameter (% IG) is derived from the first share parameter (% PP) and the second share parameter (% PMN), which is indicative of the proportion of immature granulocytes in the blood sample ( 7 ) is characteristic, - in which, based on the second differential analysis (A2), a fourth fractional parameter (% BLAST) is determined which represents the proportion of immature, mononuclide leukocytes in the blood sample ( 7 ), and - in which a warning (W) is generated if, according to the two differential analyzes (A1, A2), the proportion (% PP) of the peroxidase-positive leukocytes in the blood sample ( 7 ) exceeds the proportion (% PMN) of the polymorphonuclear granulocytes in an anomalous manner and if, according to the second differential analysis (A2), the proportion (% BLAST) of the immature, mononuclide leukocytes in the blood sample ( 7 ) is abnormally increased, namely when the third component parameter (% IG) exceeds a first threshold value (S1 ') and when a weighted sum of the third share parameter (% IG) with the fourth share parameter (% BLAST) exceeds a second threshold value (S2 '). Verfahren nach Anspruch 3, – wobei der erste Schwellwert (S1') derart vorgegeben wird, dass er einem Anteil der unreifen Granulozyten in der Blutprobe (7) zwischen 25% und 40%, insbesondere 30% entspricht, und – wobei der zweite Schwellwert (S2') derart vorgegeben wird, dass er zwischen 20% und 30%, insbesondere 27% der Summe des vierten Anteilsparameters (%BLAST) und des mit einem Wichtungsfaktor (F) gewichteten dritten Anteilsparameters (%IG) entspricht, wobei der Wichtungsfaktor (F) zwischen 0,25 und 0,30, und insbesondere bei 0,27 liegt.Method according to claim 3, - wherein the first threshold value (S1 ') is predetermined such that it corresponds to a proportion of the immature granulocytes in the blood sample ( 7 ) between 25% and 40%, in particular 30%, and - wherein the second threshold (S2 ') is set such that it is between 20% and 30%, in particular 27% of the sum of the fourth proportion parameter (% BLAST) and the with a weighting factor (F) weighted third proportion parameter (% IG), wherein the weighting factor (F) is between 0.25 and 0.30, and in particular 0.27. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 4, wobei in der ersten Differentialanalyse (A1) die jeweilige Lichtabsorption der analysierten Leukozyten nach einer Peroxidase-Färbung oder eine hieraus abgeleitete Größe als Maß für die Peroxidase-Aktivität herangezogen werden.Method according to one of claims 1 to 4, wherein in the first differential analysis (A1) the respective light absorption of the analyzed leukocytes after a peroxidase staining or a variable derived therefrom are used as a measure of the peroxidase activity. Verfahren nach Anspruch 5, wobei in der ersten Differentialanalyse (A1) die jeweilige Vorwärtslichtstreuung der Leukozyten oder eine hieraus abgeleitete Größe zusätzlich als Maß für die Zellgröße herangezogen werden.The method of claim 5, wherein in the first differential analysis (A1) the respective forward light scattering of the leukocytes or a variable derived therefrom are additionally used as a measure of the cell size. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 6, wobei in der zweiten Differentialanalyse (A2) die jeweilige Seitwärtslichtstreuung der Leukozyten oder eine hieraus abgeleitete Größe als Maß für die Strukturierung herangezogen werden.Method according to one of claims 1 to 6, wherein in the second differential analysis (A2) the respective lateral light scattering of the leukocytes or a variable derived therefrom are used as a measure of the structuring. Verfahren nach Anspruch 7, wobei in der zweiten Differentialanalyse (A2) die jeweilige Vorwärtslichtstreuung der Leukozyten oder eine hieraus abgeleitete Größe zusätzlich als Maß für die Zellgröße herangezogen werden.The method of claim 7, wherein in the second differential analysis (A2), the respective forward light scattering of the leukocytes or a variable derived therefrom are additionally used as a measure of the cell size. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 8, wobei die Erythrozyten des ersten Teils (22) der Blutprobe (7) im Zuge der ersten Differentialanalyse (A1) lysiert werden.Method according to one of claims 1 to 8, wherein the erythrocytes of the first part ( 22 ) of the blood sample ( 7 ) are lysed in the course of the first differential analysis (A1). Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 9, wobei die Erythrozyten und die Thrombozyten sowie alle Leukozyten des zweiten Teils (37) der Blutprobe (7) mit Ausnahme der basophilen Granulozyten im Zuge der zweiten Differentialanalyse (A2) lysiert werden.Method according to one of claims 1 to 9, wherein the erythrocytes and the platelets and all leukocytes of the second part ( 37 ) of the blood sample ( 7 ) except the basophilic granulocytes are lysed in the second differential analysis (A2). Hämatologie-System (1), – mit einer Analyseinheit (2) zur Durchführung einer ersten Differentialanalyse (A1) in Hinblick auf die Peroxidase-Aktivität der Leukozyten, – mit einer Analyseeinheit (3) zur Durchführung einer zweiten Differentialanalyse (A2) in Hinblick auf die Strukturierung der Leukozyten, sowie – mit einer Steuereinheit (4), die zur automatischen Durchführung des Verfahrens nach einem der Ansprüche 1 bis 10 eingerichtet ist.Hematology system ( 1 ), - with an analysis unit ( 2 ) for carrying out a first differential analysis (A1) with regard to the peroxidase activity of the leukocytes, - with an analysis unit ( 3 ) for performing a second differential analysis (A2) with regard to the structuring of the leukocytes, and - with a control unit ( 4 ), which is set up to automatically carry out the method according to one of claims 1 to 10.
DE201310203839 2013-03-06 2013-03-06 Method for analyzing a blood sample and associated hematology system Expired - Fee Related DE102013203839B4 (en)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE201310203839 DE102013203839B4 (en) 2013-03-06 2013-03-06 Method for analyzing a blood sample and associated hematology system
PCT/EP2014/052778 WO2014135349A1 (en) 2013-03-06 2014-02-13 Method for the analysis of a blood sample and associated haematology system

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE201310203839 DE102013203839B4 (en) 2013-03-06 2013-03-06 Method for analyzing a blood sample and associated hematology system

Publications (2)

Publication Number Publication Date
DE102013203839A1 DE102013203839A1 (en) 2014-09-11
DE102013203839B4 true DE102013203839B4 (en) 2014-10-16

Family

ID=50115858

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE201310203839 Expired - Fee Related DE102013203839B4 (en) 2013-03-06 2013-03-06 Method for analyzing a blood sample and associated hematology system

Country Status (2)

Country Link
DE (1) DE102013203839B4 (en)
WO (1) WO2014135349A1 (en)

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2012084963A1 (en) * 2010-12-23 2012-06-28 Siemens Aktiengesellschaft Method for detecting a plasmodium infection

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU775260B2 (en) 1999-03-31 2004-07-29 Bayer Corporation Single channel, single dilution detection method

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2012084963A1 (en) * 2010-12-23 2012-06-28 Siemens Aktiengesellschaft Method for detecting a plasmodium infection

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
SIEMENS HEALTHCARE DIAGNOSTICS: ADVIA® 2120/2120i Hematology Systems - Operator's Guide. Tarrytown, New York, USA, 2010 (067D0157-01 Rev. C, 2010-04). - Firmenschrift *
SIEMENS HEALTHCARE DIAGNOSTICS: ADVIA® 2120/2120i Hematology Systems - Operator's Guide. Tarrytown, New York, USA, 2010 (067D0157-01 Rev. C, 2010-04). – Firmenschrift

Also Published As

Publication number Publication date
DE102013203839A1 (en) 2014-09-11
WO2014135349A1 (en) 2014-09-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE69432410T2 (en) RETICULOYCYTE DETERMINATION METHOD AND DEVICE USING LIGHT SCATTERING TECHNIQUES
Constantino The red cell histogram and the dimorphic red cell population
DE69924968T2 (en) PROCESS FOR THE DISTINCTION OF CORE-CONTAINING RED BLOOD CELLS
DE60015726T2 (en) METHOD AND DEVICE FOR PREDICTING HAEMOSTATIC DISTURBANCE IN PATIENT SAMPLES
EP3052934B1 (en) Method for recognising a state of a sample, device for analysing samples and laboratory automation system
EP2202523A1 (en) Diagnosis assisting system
US20140186874A1 (en) Immature platelet enumeration systems and methods
DE3390432T1 (en) Method for the volumetric differentiation of leukocytes
Watanabe et al. Automated measurement of reticulated platelets in estimating thrombopoiesis
DE60020571T2 (en) METHOD AND DEVICE FOR THE DISTINCTION AND COUNTY OF LEUKOCYTES
US20140172321A1 (en) Leukemia classification using cpd data
EP2199791B1 (en) Method for calculating the haemolysis of a blood sample and device
EP2997365A1 (en) Analysis method for supporting classification
DE102020214050A1 (en) Computer-implemented method and device for performing a medical laboratory value analysis
EP3371571B1 (en) Method of detecting neutrophil extracellular traps
EP2635695B1 (en) Method for detecting a plasmodium infection.
DE102013203839B4 (en) Method for analyzing a blood sample and associated hematology system
EP3391349B1 (en) Method and apparatus for classifying eye opening data for at least one eye of an occupant of a vehicle, and method and apparatus for sensing drowsiness and/or microsleep in an occupant of a vehicle
CN112789503B (en) Method for analyzing nucleated red blood cells, blood cell analyzer and storage medium
EP0003958B1 (en) Method of analysing a liquid in dependance upon the preparatory condition of a sample contained in the liquid
CN114419620A (en) Abnormal sample identification method and device, sample analyzer and storage medium
EP0343380A1 (en) Method and agent to differentiate between and to determine leucocytes
Eason et al. Platelet population profiles: Significance of species variation and drug‐induced changes
AT525533B1 (en) Method and system for analyzing a blood sample
Schoorl et al. Effects of iron supplementation on microcytic and hypochromic red blood cells during the third trimester of pregnancy

Legal Events

Date Code Title Description
R012 Request for examination validly filed
R016 Response to examination communication
R018 Grant decision by examination section/examining division
R020 Patent grant now final
R119 Application deemed withdrawn, or ip right lapsed, due to non-payment of renewal fee