DE102011082759A1 - Method for individualized skin treatment, involves measuring spatial expansion or size of cells from stratum granulosum of epidermis corresponding to in vivo analysis, and comparing actual value of size with predetermined target values - Google Patents
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Abstract
Description
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur individualisierten Hautbehandlung, das eine gezielte kosmetische Behandlung ermöglicht.The invention relates to a method for individualized skin treatment, which allows a targeted cosmetic treatment.
Gepflegte, glatte und straffe Haut ist ein Verbraucherbedürfnis über alle Kulturen und Altersgrenzen hinweg. Eine schier unendliche Vielfalt hautkosmetischer Produkte will dieses Verbraucherbedürfnis befriedigen, allerdings führt diese Vielfalt auch zu einer Verunsicherung der Verbraucher, welches Produkt für seine Haut und sein gewünschtes Aussehen am besten geeignet ist.Well-groomed, smooth and firm skin is a consumer need across all cultures and age ranges. An almost infinite variety of skin cosmetic products wants to satisfy this consumer need, but this diversity also leads to uncertainty among consumers, which product is best suited for his skin and his desired appearance.
Es besteht daher der Bedarf, dem Verbraucher jenseits von Marketingversprechen die Auswahl eines speziell auf seine Haut abgestimmten Produktes zu ermöglichen. Bislang sind Untersuchungsmethoden am Individuum der medizinischen Forschung vorbehalten, weil sie entweder zu aufwändig und damit zu teuer sind oder zu viel Probesubstanz benötigen. Eine individuelle, zuverlässige und auch jenseits der Medizin anwendbare Methode, die Haut eines Konsumenten zu beurteilen und anhand der Beurteilung gezielt Produkte anzubieten, existiert im kosmetischen Massenmarkt nicht.There is therefore a need to enable the consumer, beyond marketing promises, to select a product specially adapted to his skin. So far, research methods on the individual are reserved for medical research because they are either too time-consuming and therefore too expensive or require too much sample substance. An individual, reliable and also beyond medicine applicable method to judge the skin of a consumer and to offer targeted products based on the assessment does not exist in the cosmetic mass market.
Zudem wünscht der Verbraucher oft ein „jüngeres” Aussehen. Entsprechende Aussagen in der Produktwerbung werden allerdings mit Skepsis wahrgenommen.In addition, consumers often want a "younger" look. However, corresponding statements in product advertising are perceived with skepticism.
Es besteht daher der Bedarf, das Alter eines Konsumenten durch eine Hautanalyse treffsicher feststellen zu können. Anhand der Altersbestimmung kann dann ein kosmetisches Mittel appliziert und nach geeigneter Behandlungszeit eine erneute Altersbestimmung durchgeführt werden. Bei erfolgreicher Behandlung ist dann die Aussage „um x Jahre verjüngte Haut” fundiert abgesichert.There is therefore a need to be able to accurately determine the age of a consumer by skin analysis. Based on the age determination, a cosmetic agent can then be applied and, after a suitable treatment time, a new age determination can be carried out. If the treatment is successful, the statement "Skin rejuvenated by x years" is substantiated.
Der vorliegenden Erfindung lag daher die Aufgabe zugrunde, ein Verfahren bereitzustellen, das eine kostengünstige und individuelle Beurteilung des Hautzustands ermöglicht und in Abhängigkeit von der Beurteilung Vorschläge für Produkte unterbreiten kann. Dabei sollte das Verfahren für den Kunden schnell und ohne wesentliche Beeinträchtigungen (Schmerz, großer Zeitaufwand) durchführbar sein.The present invention was therefore based on the object to provide a method that allows a cost-effective and individual assessment of the skin condition and can make proposals for products depending on the assessment. The procedure should be feasible for the customer quickly and without significant impairments (pain, great expenditure of time).
Es wurde nun gefunden, daß eine schnelle und schmerzlose in-vivo-Analyse und eine Kommunikation der Ergebnisse mit Produktempfehlungen nicht nur die vorstehend genannten Aufgaben löst, sondern auch geeignet ist, die Kundenbindung deutlich zu verbessern.It has now been found that a quick and painless in vivo analysis and communication of results with product recommendations not only solves the above-mentioned objects, but is also capable of significantly improving customer loyalty.
Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist in einer ersten Ausführungsform ein Verfahren zur individualisierten Hautbehandlung, bei dem man
- a) im Rahmen einer in-vivo-Analyse die räumliche Ausdehnung (Größe) von Zellen aus dem Stratum granulosum der Epidermins mißt,
- b) den Ist-Wert der Größe mit vorgegebenen Sollwerten vergleicht und
- c) die Haut des Individuums mit kosmetischen Mitteln behandelt, die die räumliche Ausdehnung (Größe) von Zellen aus dem Stratum granulosum beeinflussen.
- a) measures the spatial extent (size) of cells from the stratum granulosum of the epidermins as part of an in vivo analysis,
- b) compares the actual value of the size with predetermined target values and
- c) the skin of the individual treated with cosmetic agents that affect the spatial extent (size) of cells from the stratum granulosum.
In einer zweiten Ausführungsform betrifft die vorliegende Erfindung ein Verfahren zur Wirksamkeitsbeurteilung von Hautkosmetika, bei dem man
- i) im Rahmen einer in-vivo-Analyse die räumliche Ausdehnung (Größe) von Zellen aus dem Stratum granulosum der Epidermins eines unbehandelten Hautareals mißt,
- ii) das Hautareal mit einem topisch applizierten Hautkosmetikum kosmetisch behandelt,
- iii) im Rahmen einer in-vivo-Analyse die räumliche Ausdehnung (Größe) von Zellen aus dem Stratum granulosum der Epidermins des nunmehr behandelten Hautareals mißt,
- iv) den Wert aus Schritt i) mit dem Werte aus Schriit iii) vergleicht und
- v) die Wirksamkeit des Hautkosmetikums anhand des Einflusses aus die räumliche Ausdehnung (Größe) von Zellen aus dem Stratum granulosum der Epidermins bewertet.
- i) as part of an in vivo analysis measures the spatial extent (size) of cells from the stratum granulosum of the epidermis of an untreated skin area,
- ii) cosmetically treating the skin area with a topically applied skin cosmetic,
- (iii) as part of an in vivo analysis measures the spatial extent (size) of cells from the stratum granulosum of the epidermins of the now treated skin area,
- iv) comparing the value of step i) with the value of step iii), and
- v) evaluated the effectiveness of the skin cosmetic on the influence of the spatial extent (size) of cells from the stratum granulosum of epidermins.
Unabhängig davon, ob das erfindungsgemäße Verfahren der individualisierten Hautbehandlung oder der Wirksamkeitsbeurteilung von Hautkosmetika dient, wird im jeweils ersten Schritt a) bzw. i) im Rahmen einer in-vivo-Analyse die räumliche Ausdehnung (Größe) von Zellen aus dem Stratum granulosum der Epidermins gemessen.Regardless of whether the inventive method of individualized skin treatment or the efficacy assessment of skin cosmetics is used in the first step a) or i) in the context of an in vivo analysis, the spatial extent (size) of cells from the stratum granulosum of epidermins measured.
Als Epidermis bezeichnet man die Oberhaut bei Wirbeltieren und beim Menschen. Sie bildet als äußerste Hautschicht die eigentliche Schutzhülle gegenüber der Umwelt. Vom Körperinneren aus nach außen unterscheidet man insgesamt fünf Epidermis-Schichten: Basalschicht (Stratum basale), Stachelzellschicht (Stratum spinosum) Körnerschicht (Stratum granulosum), Glanzschicht (Stratum lucidum) und Hornschicht (Stratum corneum). Die Epidermis besteht zu 90 Prozent aus Keratinozyten, die von Desmosomen zusammengehalten werden. In den äußeren Schichten besteht sie aus verhornten Plattenepithelzellen.The epidermis is the epidermis of vertebrates and humans. As the outermost layer of skin, it forms the actual protective cover against the environment. A total of five epidermal layers are distinguished from the inside of the body: basal layer (stratum basale), spiny cell layer (stratum spinosum), granular layer (stratum granulosum), gloss layer (stratum lucidum) and horny layer (stratum corneum). The epidermis consists of 90 percent keratinocytes, which are held together by desmosomes. In the outer layers it consists of keratinized squamous epithelial cells.
Das Stratum granulosum (die Körnerschicht) ist eine dünne Zellschicht in der Epidermis, in der Keratinocyten, die aus der darunterliegenden Stachelzellschicht (Stratum spinosum) migrieren, zu Körnerzellen werden. Diese Zellen enthalten Keratohyalin Granulate, Proteinstrukturen, die die Hydratation und Quervernetzung des Keratins fördern.The stratum granulosum (the granule layer) is a thin cell layer in the epidermis where keratinocytes migrating from the underlying spiny cell layer (stratum spinosum) become granule cells. These cells contain keratohyalin Granules, protein structures that promote the hydration and cross-linking of keratin.
Die Größe der Körnerzellen, die im jeweils ersten Schritt a) bzw. i) im Rahmen einer in-vivo-Analyse bestimmt wird, kann mit verschiedenen Methoden bestimmt werden.The size of the granule cells, which is determined in each case in the first step a) or i) in the context of an in vivo analysis, can be determined by various methods.
Bei der Bestimmung von Konzentration und Größenverteilung von suspendierten Zellen (in vitro) wird überwiegend mit nephelometrischen und turbidimetrischen Verfahren gearbeitet. Die Nephelometrie beruht auf der Messung von Streulicht, das beim Lichtdurchtritt durch ein optisch trübes Medium durch Streuung an den vorhandenen Partikeln auftritt, während turbidimetrische Sensoren die Lichtschwächung durch Streuung messen. Diese Verfahren sind für die in-vivo-Analyse nicht geeignet.In determining the concentration and size distribution of suspended cells (in vitro), nephelometric and turbidimetric methods are predominantly used. Nephelometry is based on the measurement of scattered light, which occurs when light passes through an optically turbid medium due to scattering on the existing particles, while turbidimetric sensors measure the light attenuation by scattering. These methods are not suitable for in vivo analysis.
Für die in-vivo-Analyse hat ssich die konfokale Laserscanning-Mikroskopie als besonders geeignet herausgestellt. Die konfokale Lasermikroskopie ist eine nichtinvasive Methode zur hochauflösenden Diagnostik von Gewebe. Während konventionelle Mikroskope mit Durchlichttechnik arbeiten, bei der dünne Gewebeschichten von unten beleuchtet werden, arbeiten die für die Dermatologie konzipierten konfokalen Lasermikroskopie mit einer Auflichttechnik. Die Haut wird von oben fokussiert mit einem Laser beleuchtet. Das reflektierte Licht wird über eine Lochblende auf einen Detektor geleitet, so dass ausschließlich Signale aus einer definierten horizontalen Ebene hochauflösend zur Bildgebung herangezogen werden. Durch diese Technik ist die Eindringtiefe in die Haut limitiert. Dafür ist die Untersuchung nichtinvasiv in vivo und Echtzeit möglich. Die konfokale Lasermikroskopie erlaubt eine mikroskopische Darstellung oberflächennaher Hautschichten in vivo und eröffnet für die Dermatologie neue Möglichkeiten zur Diagnostik und Verlaufsbeobachtung, insbesondere bei dynamischen Veränderungen.For in vivo analysis, confocal laser scanning microscopy has been found to be particularly suitable. Confocal laser microscopy is a noninvasive method for the high-resolution diagnosis of tissue. While conventional microscopes use transmitted-light technology to illuminate thin layers of tissue from below, confocal laser microscopy designed for dermatology uses incident-light technology. The skin is focused from above with a laser light. The reflected light is directed through a pinhole onto a detector, so that only signals from a defined horizontal plane are used for high-resolution imaging. This technique limits the depth of penetration into the skin. For this, the examination is possible non-invasively in vivo and in real time. Confocal laser microscopy allows microscopic imaging of near-surface skin layers in vivo and opens up new possibilities for the diagnosis and follow-up of dermatology, especially in the case of dynamic changes.
Zur Bildgebung werden die reflektierten Lichtsignale aus einer horizontalen Ebene detektiert. Das Licht wird an Grenzflächen reflektiert, an denen sich der Brechungsindex ändert. Stark reflektierende Strukturen der Haut sind Keratin, Melanin und Kollagen. Bei Einsatz monochromatischen Laserlichts und geeigneter Filter kann neben der Reflektion auch eine Fluoreszenz zur Bildgebung genutzt werden. Hierfür muss die Haut von außen oder durch eine intradermale Injektion mit Fluoreszenzfarbstoffen gefärbt werden.For imaging, the reflected light signals are detected from a horizontal plane. The light is reflected at interfaces where the refractive index changes. Strongly reflecting structures of the skin are keratin, melanin and collagen. When using monochromatic laser light and suitable filters, in addition to the reflection, fluorescence can also be used for imaging. For this purpose, the skin must be stained from the outside or by an intradermal injection with fluorescent dyes.
Für die konfokale Lasermikroskopie werden Geräte mit einem oder mehreren Lasern als Lichtquelle eingesetzt, die sowohl zur in vivo als auch ex vivo Untersuchung der Haut herangezogen werden können. Die Laserenergie auf Gewebsebene beträgt üblicherweise weniger als 30 mW, daher besteht keine Gefahr für das zu untersuchende Gewebe oder das menschliche Auge (Laserklasse I).For confocal laser microscopy devices are used with one or more lasers as a light source, which can be used both for in vivo and ex vivo examination of the skin. The laser energy at tissue level is usually less than 30 mW, so there is no danger to the tissue to be examined or the human eye (laser class I).
Ein konfokales Laserscanmikroskop für die in vivo Diagnostik besteht aus verschiedenen Elementen und beinhaltet in der Regel einen Gerätewagen sowie einen PC mit Monitor, Schwenkarm und Lasereinheit. Fakultativ kann die Ausstattung durch eine anzuschließende Makrokamera ergänzt werden. Kommerziell erhältliche Geräte weisen eine variable Eindringtiefe auf, bei der sich in Abhängigkeit von der eingesetzten Wellenlänge oberflächliche dermale und epidermal gelegene Strukturen in hoher Auflösung darstellen lassen. Hierbei werden mit einem Magnetring auf die Haut lokal fixierbare Geräte von sog. Hand-held devices unterschieden, die auch Untersuchungen an schwer zugänglichen Hautarealen wie zum Beispiel an der Nase oder in Körperbeugen ermöglichen. In sogenannten „Multiwave”-Geräten können bis zu drei Laser gleichzeitig eingebaut werden. Neben der Lichtquelle bei 830 nm, die ausschließlich für die Reflektionsdiagnostik eingesetzt wird, kommen Laser bei 445 nm, 488 nm, 658 nm und 785 nm für die Fluoreszenz- und Reflektionsdiagnostik zum Einsatz. Die Filter ermöglichen hierbei die Darstellung der Reflektion alleine, der Fluoreszenz alleine sowie von Reflektion und Fluoreszenz in einem Bild. Die Reflektionsbilder zeigen bei den kürzeren Wellenlängen in oberflächennahen Schnitten eine höhere Auflösung bei geringerer Eindringtiefe. Zur Fluoreszenzdiagnostik können in vivo Natriumfluoreszein bei den Wellenlängen 445 nm und 488 nm, Methylen- und Patentblau bei 658 nm und Indocyangrün bei 785 nm als Farbstoffe eingesetzt werden. Diese können entweder topisch auf die Hautoberfläche aufgebracht oder intrakutan gespritzt werden.A confocal laser scanning microscope for in vivo diagnostics consists of various elements and usually includes a trolley and a PC with monitor, swivel arm and laser unit. Optionally, the equipment can be supplemented by a macro camera to be connected. Commercially available devices have a variable penetration depth, which can depict superficial dermal and epidermal structures in high resolution, depending on the wavelength used. Here, a magnetic ring on the skin locally distinguishable devices of so-called. Hand-held devices are distinguished, which also allow investigations in hard to reach skin areas such as the nose or in body bends. In so-called "multiwave" devices up to three lasers can be installed simultaneously. In addition to the light source at 830 nm, which is used exclusively for reflection diagnostics, lasers at 445 nm, 488 nm, 658 nm and 785 nm are used for fluorescence and reflection diagnostics. The filters allow the representation of the reflection alone, the fluorescence alone and of reflection and fluorescence in an image. The reflection images show a higher resolution with lower penetration depth at the shorter wavelengths in near-surface sections. For fluorescence diagnosis, sodium fluorescein can be used in vivo at wavelengths 445 nm and 488 nm, methylene and patent blue at 658 nm and indocyanine green at 785 nm as dyes. These can either be applied topically to the skin surface or injected intracutaneously.
Das optische Grundprinzip der konfokalen Laserscan-Mikroskopie, (LSM) ist dem des Ultraschalls vergleichbar, wobei eine Punktlichtquelle dazu verwendet wird, Hautstrukturen in virtuellen, horizontalen Schichtaufnahmen darzustellen. Kommerziell erhältliche Laserscan-Mikroskope sind mit einem 830 nm Diodenlaser ausgestattet, der auf eine vom Untersucher frei wählbare Ebene innerhalb des Gewebes fokussiert wird. Hierbei wird das Gewebe mit Hilfe eines Rasterscanners untersucht. Die Bildgebung des LSM beruht auf der Reflektion und Streuung von Licht aus dem untersuchten Gewebeabschnitt. Unterschiede in den Refraktionsindices der einzelnen Zellstrukturen und Hautschichten führen zu differenzierten Reflektionsmustern, und diese Abschnitte kommen in unterschiedlichen Graustufen zur Darstellung.The basic optical principle of confocal laser scanning microscopy (LSM) is comparable to that of ultrasound, whereby a point light source is used to represent skin structures in virtual horizontal slice images. Commercially available laser scanning microscopes are equipped with an 830 nm diode laser which is focused to a level within the tissue that is freely selectable by the examiner. Here, the tissue is examined using a raster scanner. The imaging of the LSM is based on the reflection and scattering of light from the examined tissue section. Differences in the refractive indices of the individual cell structures and skin layers lead to differentiated reflection patterns, and these sections are displayed in different gray levels.
Als ”endogene” Kontrastmittel dienen Melanin, Hämoglobin, zelluläre Mikrostrukturen sowie Kollagen. Daher lassen sich insbesondere melanozytäre Läsionen mit Hilfe der LSM gut darstellen. Reflektiertes Licht jenseits der fokalen Ebene wird durch eine sehr kleine Apertur herausgefiltert, daher ergibt sich die hohe Auflösung der LSM. Die laterale Auflösung liegt im Bereich von 0,5 bis 1 μm im zellulären Bereich, die axiale Auflösung (Schichtdicke) entspricht mit 3 bis 5 μm der Schichtdicke normaler histologischer Untersuchungen.Melanin, hemoglobin, cellular microstructures and collagen serve as "endogenous" contrast agents. Therefore, especially melanocytic lesions can be visualized well with the help of LSM. Reflected light beyond the focal plane is replaced by a filtered out very small aperture, which results in the high resolution of the LSM. The lateral resolution is in the range of 0.5 to 1 μm in the cellular region, the axial resolution (layer thickness) corresponds to 3 to 5 μm of the layer thickness of normal histological examinations.
Um die Lichtbrechung an der Hautoberfläche durch den hohen Refraktionsindex des Stratum corneum zu reduzieren, werden bei der Untersuchung Wasser- oder Ölimmersionslinsen eingesetzt. Vor dem Aufsetzen des Ringes auf die Haut sollte die Läsion mit Isopropylalkohol gereinigt werden und ein Tröpfchen Öl auf das Klebefenster gegeben werden. Alternativ können auch Wasser-basierte Gele zum Einsatz kommen, insbesondere wenn es sich um schräge Oberflächen oder stark hyperkeratotische Areale handelt, da diese ein rasches Abrinnen verhindern bzw. sich gut zwischen die abgelösten Korneozyten einlagern.In order to reduce the refraction of light at the skin surface by the high refractive index of the stratum corneum, water or oil immersion lenses are used in the investigation. Before placing the ring on the skin, the lesion should be cleaned with isopropyl alcohol and a drop of oil applied to the adhesive window. Alternatively, water-based gels can also be used, especially if they are oblique surfaces or strongly hyperkeratotic areas, since these prevent rapid drainage or interpose well between the detached corneocytes.
Der Einsatz eines abnehmbaren Metallrings hält das Immersionsmedium sowie das Objektiv während des Untersuchungsvorganges stabil und minimiert somit das Auftreten von Bewegungsartefakten. Nach Aufbringen des Immersionsmediums wird dieser Ring mit Hilfe von beidseitig adhäsiven Klebeplättchen an der Probandenhaut fixiert und das Objektiv mit dem dazugehörigen Gehäuse darin magnetisch angeschlossen. Durch die Bewegung des Objektivs in der Z-(vertikale)Achse in Bezug auf die Hautoberfläche kann man unterschiedliche Ebenen innerhalb des Gewebes untersuchen. Gleichzeitig kann man das Gewebe innerhalb einer ausgesuchten Ebene in der X-Y-(horizontalen)Achse in unterschiedlicher Ausdehnung untersuchen; individuelle Bilder sind 500 μm × 500 μm groß, individuelle Übersichtsmappen zwischen 1 mm × 1 mm bis 8 mm × 8 mm. Die Bildinterpretation beruht dabei im Gegensatz zur Routinehistologie auf virtuellen horizontalen Schnitten des Gewebes.The use of a removable metal ring keeps the immersion medium as well as the lens stable during the examination process, thus minimizing the occurrence of motion artifacts. After application of the immersion medium of this ring is fixed by means of adhesive adhesive on both sides of the test person skin and the lens with the associated housing is magnetically connected therein. By moving the lens in the Z (vertical) axis with respect to the skin surface, one can examine different levels within the tissue. At the same time, one can examine the tissue within a selected plane in the X-Y (horizontal) axis at different extents; individual images are 500 μm × 500 μm in size, individual overview folders between 1 mm × 1 mm to 8 mm × 8 mm. In contrast to routine histology, the image interpretation is based on virtual horizontal sections of the tissue.
Der Einsatz einer digitalen Makrokamera mit dermatoskopischer Qualität ermöglicht die makroskopische Beurteilung der zu untersuchenden Hautareale. Die elektronische Kopplung beider Geräte ermöglicht eine Navigation im makroskopischen Bild zur Spezifizierung von Bereichen für die anschließende mikroskopische Betrachtung.The use of a digital macro camera with dermatoscopic quality enables the macroscopic assessment of the skin areas to be examined. The electronic coupling of both devices allows navigation in the macroscopic image to specify areas for subsequent microscopic viewing.
Mit Hilfe einer integrierten Software wird eine systematische Bilddokumentation ermöglicht. Im System kann für jeden Probanden eine Probandenakte angelegt werden, in der die Probandendaten sowie Angaben zur untersuchten Hautveränderung gespeichert werden können.With the help of integrated software, systematic image documentation is possible. In the system, a subject file can be created for each subject in which the subject data and information on the examined skin change can be stored.
Zusammenfassend sind erfindungsgemäße Verfahren bevorzugt, bei denen die räumliche Ausdehnung (Größe) von Zellen aus dem Stratum granulosum der Epidermins in Schritt a) bzw. i) und iii) mit Hilfe der konfokalen Laserscanning-Mikroskopie gemessen wird.In summary, methods according to the invention are preferred in which the spatial extent (size) of cells from the stratum granulosum of the epidermins in step a) or i) and iii) is measured by means of confocal laser scanning microscopy.
Vorzugsweise erfolgt die Messung der räumliche Ausdehnung (Größe) von Zellen aus dem Stratum granulosum der Epidermins als Flächenmessung, d. h. bevorzugte erfindungsgemäße Verfahren sind dadurch gekennzeichnet, daß in Schritt a) bzw. i) und iii) die Fläche der Zelle(n) in μm2 gemessen wird.The measurement of the spatial extent (size) of cells from the stratum granulosum of the epidermins is preferably carried out as area measurement, ie preferred methods according to the invention are characterized in that in step a) or i) and iii) the area of the cell (s) is in μm 2 is measured.
Um die Genauigkeit der erfindungsgemäßen verfahren noch weiter zu steigern, ist es bevorzugt, mehre Messungen durchzuführen und aus den dort ermittelten Werten Mittelwerte zu bilden. Entsprechende Verfahren, bei denen in den Schritten a) bzw. i) und iii) jeweils mehrere Meßwerte bestimmt werden und daraus ein Mittelwert gebildet wird, sind erfindungsgemäß bevorzugt.In order to further increase the accuracy of the methods according to the invention, it is preferable to carry out several measurements and to form average values from the values determined there. Corresponding methods in which a plurality of measured values are respectively determined in steps a) and i) and iii) and an average value is formed therefrom are preferred according to the invention.
Ganz besonders bevorzugt wird nicht eine einzelne Zelle mehrfach vermessen, sondern es werden mehrere Zellen vermessen und eine mittlere Zellgröße errechnet. Entsprechende erfindungsgemäße Verfahren, bei denen von mindestens 10, vorzugsweise von mindestens 20, weiter bevorzugt von mindestens 30, noch weiter bevorzugt von mindestens 40 und insbesondere von mindestens 50 Zellen die räumliche Ausdehnung bestimmt wird, sind erfindungsgemäß bevorzugt.Most preferably, not a single cell is measured several times, but several cells are measured and an average cell size is calculated. Corresponding methods according to the invention in which the spatial extent of at least 10, preferably at least 20, more preferably at least 30, even more preferably at least 40 and in particular at least 50 cells is determined, are preferred according to the invention.
Die Genauigkeit läßt sich noch weiter steigern, indem verschiedene Hautareale vermessen werden und aus den so ermittelten Meßergebnissen Mittelwerte gebildet werden.The accuracy can be further increased by measuring different skin areas and averages are formed from the measurement results thus determined.
In Schritt b) des erfindungsgemäßen Verfahrens der ersten Ausführungsform wird der Ist-Wert mit vorgegebenen Sollwerten verglichen.In step b) of the method according to the invention of the first embodiment, the actual value is compared with predetermined desired values.
Diese Sollwerte lassen sich beispielsweise durch die Untersuchung gesunder Haut ermitteln, wobei bevorzugt Mittelwerte aus einem Kollektiv gebildet werden. Besonders bevorzugt werden die Kollektive dabei besonders einheitlich und besonders groß gebildet, d. h. der „Basiswert” wird aus der Haut möglichst vieler Individuen ermittelt, die möglichst viele Eigenschaften miteinander teilen, wobei dem Alter und dem Geschlecht die größte Bedeutung zukommt. In erfindungsgemäß bevorzugten Verfahren führt man die Erhebung der Sollwerte in Schritt b) mit einer in Bezug auf das Alter und das Geschlecht ausreichend großen (vorzugsweise mindestens 10, besonders bevorzugt mindestens 50 und insbesondere mindestens 100 Personen) Kontrollgruppe durch.These target values can be determined, for example, by the examination of healthy skin, wherein preferably mean values are formed from a collective. Particularly preferably, the collectives are formed in a particularly uniform and particularly large way, ie. H. the "Underlying" is determined from the skin of as many individuals as possible, sharing as many characteristics as possible, with age and gender being of the greatest importance. In preferred methods according to the invention, the collection of the desired values in step b) is carried out with a sufficiently large (preferably at least 10, more preferably at least 50 and especially at least 100) control group with regard to age and gender.
Ganz besonders bevorzugt werden noch weitere Spezifizierungen/Gruppierungen eingeführt und die Grenzen möglichst eng gesteckt. So könnte eine Kontrollgruppe „weiblich, drittes Lebensjahrzehnt” weiter aufgeteilt werden in „weiblich, 25 Jahre” oder „weiblich, Geburtsjahrgang xxxx” und gegebenenfalls noch weiter in „weiblich, 25 Jahre, trockene Haut” usw..Most particularly, further specifications / groupings are introduced and the limits set as narrow as possible. Thus, a control group "female, third decade of life" could be further divided into "female, 25 years" or "female, year of birth xxxx" and possibly even further in "female, 25 years, dry skin" etc ..
Auf diese Weise erhält man „Eichkurven” bestimmter Kollektive. Es ist aber auch möglich, die Sollwerte vorher in Form einer Gleichung „Zellfläche versus Alter” zu definieren. Umfangreiche Untersuchungen haben gezeigt, daß Alter und Zellfläche in einem linearen Zusammenhang stehen. Anstelle der oben erwähnten „Eichkurven” kann daher auch der Sollwert direkt aus dem tatsächlichen Alter einer Person bestimmt werden. Dabei haben sich erfindungsgemäße Verfahren als besonders geeignet erwiesen, bei denen der Alters-Sollwert in Schritt b) nach der Formel Fläche [μm2] = Alter mal 2,5 + 490,4 errechnet wird.In this way one obtains "calibration curves" of certain collectives. However, it is also possible to define the target values beforehand in the form of an equation "cell area versus age". Extensive research has shown that age and cell area are linearly related. Instead of the above-mentioned "calibration curves", therefore, the target value can be determined directly from the actual age of a person. In this case, methods of the invention have proved to be particularly suitable, in which the age value in step b) is calculated according to the formula area [μm2] = age times 2.5 + 490.4.
Mit Hilfe dieser Gleichung ist direkt eine Aussage möglich, daß ein x Jahre altes Individuum die Haut eines x-y Jahre alten Individuums besitzt.With the help of this equation, a statement is directly possible that an x-year-old individual possesses the skin of an x-y years old individual.
Diese Aussage läßt sich absolut („y Jahre jüngere Haut”) oder relativ („um z % verjüngte Haut”) formulieren. Auch der Vergleich der beiden Messungen in den Schritten i) und iii) der zweiten Verfahrensvariante kann so formuliert werden, wenn im Anschluß an die kosmetische Behandlung ein Effekt auf die Zellfläche eingetreten ist.This statement can be expressed absolutely ("y years younger skin") or relatively ("z% rejuvenated skin"). The comparison of the two measurements in steps i) and iii) of the second variant of the method can also be formulated if an effect on the cell surface has occurred after the cosmetic treatment.
Erfindungsgemäße Verfahren, bei denen der Vergleich in Schritt iv) und die Bewertung in Schritt v) in der Aussage „x % jüngere Haut” erfolgen, und erfindungsgemäße Verfahren, bei denen Vergleich in Schritt iv) und die Bewertung in Schritt v) in der Aussage „um x Jahre jüngere Haut” erfolgen, sind bevorzugte Ausführungsformen dieser zweiten Verfahrensvariante.Methods according to the invention, in which the comparison in step iv) and the evaluation in step v) take place in the statement "x% younger skin", and methods according to the invention, in which comparison in step iv) and the evaluation in step v) in the statement "X years younger skin" done, are preferred embodiments of this second process variant.
Auf dieser Datenlage kann dann das in Schritt ii) des erfindungsgemäßen Verfahrens applizierte kosmetische Mittel in Schritt v) bewertet werden. Dem Kunden kann somit eine individuelle Produktempfehlung ausgesprochen werden, die gezielt problematische Bereiche adressiert, ohne daß sich der Kunde auf allgemeine Werbeaussagen wie „straffere” Haut verlassen müßte. Zudem kann der Erfolg des jeweiligen Kosmetikums durch eine weitere Analyse nach einer bestimmten Behandlungszeit aufgezeigt und dokumentiert werden. Dem individuellen Zufriedenheitsgefühl des Verbrauchers wird damit eine objektive Analyse zur Seite gestellt, die geeignet ist, dem Kunden an eine Herstellfirma und ihre Produkte zu binden.On this data basis, the cosmetic agent applied in step ii) of the method according to the invention can then be evaluated in step v). The customer can thus be given an individual product recommendation that specifically addresses problematic areas without the customer having to rely on general advertising claims such as "tighter" skin. In addition, the success of the respective cosmetic can be shown and documented by further analysis after a certain treatment time. The individual satisfaction of the consumer is thus provided with an objective analysis that is suitable for binding the customer to a manufacturing company and its products.
Nicht zuletzt leistet das erfindungsgemäße Verfahren wertvolle Dienste bei der Entwicklung neuer Kosmetika, da es eine schnelle und objektivierte Leistungsbeurteilung von Hautkosmetika ermöglicht.Last but not least, the inventive method provides valuable services in the development of new cosmetics, as it allows a fast and objectified performance assessment of skin cosmetics.
Ein weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist die Verwendung der konfokalen Laserscanning-Mikroskopie zur Stützung von Werbeaussagen für Kosmetika.Another object of the present invention is the use of confocal laser scanning microscopy in support of advertising claims for cosmetics.
Claims (10)
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Cited By (2)
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Cited By (3)
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| DE102013008278B4 (en) * | 2013-05-15 | 2020-11-05 | Nanofocus Ag | Method and device for 3-D measurement of the skin surface and skin layers close to the surface |
| CN112119307A (en) * | 2018-05-17 | 2020-12-22 | 荷兰联合利华有限公司 | Evaluation of protective efficacy of leave-on cosmetic composition against contaminants |
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