DE102005028077A1 - Alkynyl-substituted thiophenes - Google Patents
Alkynyl-substituted thiophenes Download PDFInfo
- Publication number
- DE102005028077A1 DE102005028077A1 DE102005028077A DE102005028077A DE102005028077A1 DE 102005028077 A1 DE102005028077 A1 DE 102005028077A1 DE 102005028077 A DE102005028077 A DE 102005028077A DE 102005028077 A DE102005028077 A DE 102005028077A DE 102005028077 A1 DE102005028077 A1 DE 102005028077A1
- Authority
- DE
- Germany
- Prior art keywords
- substituents
- alkyl
- substituted
- amino
- group
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Withdrawn
Links
- 0 CC(C)N(C([C@](CC[C@@](*)C1)[C@]1O)=O)c([s]c(C#CC(C)(C)CO)c1)c1C(O)=O Chemical compound CC(C)N(C([C@](CC[C@@](*)C1)[C@]1O)=O)c([s]c(C#CC(C)(C)CO)c1)c1C(O)=O 0.000 description 2
- OVHUGEQYHYLJRC-BSIFCXSSSA-N CC(C)N(C([C@H](CC[C@@H](C)C1)[C@H]1OC(C)=O)=O)c([s]c(C#CC(C)(C)CO)c1)c1C(OC)=O Chemical compound CC(C)N(C([C@H](CC[C@@H](C)C1)[C@H]1OC(C)=O)=O)c([s]c(C#CC(C)(C)CO)c1)c1C(OC)=O OVHUGEQYHYLJRC-BSIFCXSSSA-N 0.000 description 1
- MTZOPMDGNCFHGA-UHFFFAOYSA-N COC(c1c(NC2CCOCC2)[s]cc1)=O Chemical compound COC(c1c(NC2CCOCC2)[s]cc1)=O MTZOPMDGNCFHGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LYNTZGXCFJRDLS-IYARVYRRSA-N C[C@H](CC1)CC[C@@H]1C(N(C1CCOCC1)c([s]c(C#CC(C)(C)C)c1)c1C(OC)=O)=O Chemical compound C[C@H](CC1)CC[C@@H]1C(N(C1CCOCC1)c([s]c(C#CC(C)(C)C)c1)c1C(OC)=O)=O LYNTZGXCFJRDLS-IYARVYRRSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D333/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom
- C07D333/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
- C07D333/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom
- C07D333/26—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D333/38—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
- C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
- C07D409/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
Abstract
Die Erfindung betrifft Alkinyl-substituierte Thiophene und Verfahren zu ihrer Herstellung, ihre Verwendung zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Krankheiten sowie ihre Verwendung zur Herstellung von Arzneimitteln zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Krankheiten, insbesondere zur Verwendung als antivirale Mittel, insbesondere gegen Hepatitis C Viren.The invention relates to alkynyl-substituted thiophenes and processes for their preparation, their use for the treatment and / or prophylaxis of diseases and their use for the preparation of medicaments for the treatment and / or prophylaxis of diseases, in particular for use as antiviral agents, especially against hepatitis C. viruses.
Description
Die Erfindung betrifft Alkinyl-substituierte Thiophene und Verfahren zu ihrer Herstellung, ihre Verwendung zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Krankheiten sowie ihre Verwendung zur Herstellung von Arzneimitteln zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Krankheiten, insbesondere zur Verwendung als antivirale Mittel, insbesondere gegen Hepatitis C Viren.The This invention relates to alkynyl-substituted thiophenes and methods for their preparation, their use for treatment and / or prophylaxis of diseases as well as their use for the production of medicines for the treatment and / or prophylaxis of diseases, in particular for use as antiviral agents, in particular against hepatitis C viruses.
Infektionen mit dem Hepatitis C-Virus (HCV) sind weltweit die Hauptursache für non-A/non-B Hepatitis-Erkrankungen. Nach Schätzungen sind etwa 170 Millionen Menschen weltweit mit dem Virus infiziert. Bei einem hohen Prozentsatz der Virusträger führt dies zu einer chronischen Hepatitis C-Erkrankung. Für diese Gruppe an Infizierten besteht ein erhöhtes Risiko, in der Folge an lebensbedrohlichen Lebererkrankungen wie Leberzirrhose, hepatocellulärem Carcinom oder terminalem Leberversagen zu versterben. Hepatitis C-Infektion ist eine der häufigsten Ursachen für eine Lebertransplantation. Noch nicht völlig geklärt sind die Mechanismen, wie es zum Persistieren der Virusinfektion und zur hohen Rate an daraus resultierenden ernsten Lebererkrankungen kommt. Es ist unbekannt, wie das Virus mit dem menschlichen Immunsystem interagiert und die Immunabwehr überwindet. Die Rolle der zellulären wie der humoralen Immunantworten beim Schutz gegen HCV-Infektion ist noch nicht verstanden. Es wurde berichtet, dass Immunglobuline zum prophylaktischen Schutz gegen transfusionsbedingte virale Hepatitis eingesetzt wurden; allerdings wird der Einsatz von Immunglobulinen für diesen Zweck gegenwärtig vom Center for Disease Control nicht empfohlen. Das Fehlen einer effizienten Immunantwort steht bislang der Etablierung eines Impfstoffes im Wege, ebenso wie einer Prophylaxe, die nach Kontakt mit dem Virus eingesetzt werden könnte. In der näheren Zukunft werden daher hauptsächlich antivirale Prinzipien eine Rolle in der Bekämpfung des Hepatitis C-Virus spielen.infections with the hepatitis C virus (HCV) are the leading cause of non-A / non-B worldwide Hepatitis disease. By estimates About 170 million people worldwide are infected with the virus. In a high percentage of virus carriers this leads to a chronic Hepatitis C disease. For this group of infected people is at increased risk, subsequently life-threatening liver diseases such as cirrhosis, hepatocellular carcinoma or terminal liver failure. Hepatitis C infection is one of the most common Reasons for a liver transplant. Not yet fully understood are the mechanisms, such as it to persist the virus infection and high rate of it resulting in serious liver disease. It is unknown how the virus interacts with the human immune system and overcomes the immune system. The role of the cellular as the humoral immune responses to protection against HCV infection is not understood yet. It has been reported that immunoglobulins for prophylactic protection against transfusion-induced viral hepatitis were used; however, the use of immunoglobulins For this Purpose present Not recommended by the Center for Disease Control. The lack of an efficient Immune response is so far the establishment of a vaccine in the Ways, as well as a prophylaxis, after contact with the virus could be used. In the nearer Therefore, the future will be mainly antiviral principles play a role in the fight against the hepatitis C virus play.
In verschiedenen klinischen Studien wurden Substanzen mit dem Ziel untersucht, HCV-Infektionen in Patienten mit chronischer Hepatitis wirkungsvoll zu therapieren. In diesen Studien kam Interferon-alpha (IFN-α), in Alleingabe oder in Kombination mit anderen antiviralen Wirkstoffen, zum Einsatz. Diese Untersuchungen haben gezeigt, dass eine erhebliche Anzahl an Patienten auf diese Therapie nicht anspricht, und dass ein großer Teil derjenigen, bei denen Interferon-alpha eine Wirkung zeigt, nach Absetzen der Substanz Rückfälle erleiden.In Various clinical trials have been targeting substances examined HCV infections in patients with chronic hepatitis to treat effectively. In these studies came interferon-alpha (IFN-α), in its sole use or in combination with other antiviral agents. These studies have shown that a significant number to patients on this therapy does not respond, and that a large part those in which interferon-alpha has an effect after Discontinuation of the substance to relapse.
Bis vor kurzem war die Behandlung mit Interferon (IFN) die einzige Therapieform mit klinisch nachgewiesener Wirksamkeit bei chronischer Hepatitis C-Erkrankung. Der Anteil der Patienten mit nachhaltigem Therapieerfolg ist jedoch gering. Die Interferon-Therapie ist durchweg mit ernsten Nebenwirkungen (z.B. Leukopenie, Thrombopenie, Retinopathie, Thyroiditis, akute Pancreatitis, Depression) verbunden, die die Lebensqualität der Patienten erheblich einschränken.To Recently, treatment with interferon (IFN) was the only form of therapy with clinically proven efficacy in chronic hepatitis C disease. The proportion of patients with sustainable therapeutic success but it is low. Interferon therapy is consistently serious Side effects (e.g., leukopenia, thrombocytopenia, retinopathy, thyroiditis, acute pancreatitis, depression) that affects the quality of life of patients considerably restrict.
Vor kurzer Zeit wurde die Kombination von Interferon mit Ribavirin zugelassen. Diese Kombinationstherapie führt zu einer verbesserten Wirksamkeit, verbessert aber nicht das mit IFN assoziierte Nebenwirkungsprofil, zudem sind auch mit Ribavirin Nebenwirkungen (z.B. hämolytische Anämie) assoziiert. Durch den Einsatz von pegylierten Formen des IFN wie PEG-Intron® oder Pegasys® können diese unerwünschten Nebeneffekte zumindest teilweise abgemildert werden. Ungeachtet dessen besteht ein großer Bedarf an oral anwendbaren antiviralen Wirkstoffen, mit denen die Einschränkungen der bislang etablierten Therapieformen überwunden werden können (S.-L. Tan et al., Nature Rev. Drug Discov. 2002, 1, 867-881).Recently, the combination of interferon with ribavirin was approved. This combination therapy results in improved efficacy, but does not improve the side-effect profile associated with IFN; moreover, side effects (eg haemolytic anemia) are also associated with ribavirin. Through the use of pegylated forms of IFN, such as PEG-Intron ® and Pegasys ® can be at least partially mitigated these undesirable side effects. Nonetheless, there is a great need for oral antiviral drugs that can overcome the limitations of previously established therapies (S.L.Tan et al., Nature Rev. Drug Discov., 2002, 1, 867-881).
Hepatitis C-Virus (HCV) ist der einzige Vertreter des Genus Hepacivirus innerhalb der Familie der Flaviviridae. Man unterscheidet mindestens 6 Genotypen und eine Vielzahl von Subtypen. Das Virus ist von einer Hülle umgeben und besitzt als Genom einen Positiv-Einzelstrang an viraler RNA. Die Länge des viralen RNA-Genoms beträgt ca. 9500 Nucleotide. Die Vermehrung des viralen Genoms und die Translation in Protein erfolgt mit Hilfe von RNA-Strukturen, welche am Anfang und am Ende des Genoms liegen (5' nicht-translatierte Region, 3' nicht-translatierte Region). Das Genom hat einen einzigen Leserahmen (open reading frame, ORF), der für ein Polyprotein (ca. 3000 Aminosäuren) codiert. Hieraus werden in einer infizierten Zelle durch virale oder Wirtszell-Enzyme Struktur- und Nichtstruktur (NS)-Proteine gespalten. HCV kodiert für ein Kapsidprotein (c) und zwei Hüllproteine (E1 und E2). Ein kleines Protein (p7) könnte ein sogenanntes Viroporin sein, welches für die Infektiosität des reifen Viruspartikels essentiell ist. Zu den reifen NS-Proteinen zählen die Proteine NS2, NS3, NS4A, NS4B, NS5A und NS5B. Für ihre Abspaltung aus dem Polyprotein sind zwei virale Proteasen verantwortlich. Das als NS2/3-Protease bezeichnete Enzym spaltet in bis jetzt nur gering charakterisierter Weise an der NS2-NS3-Schnittstelle. Die zweite Protease (NS3-Protease) ist eine Serinprotease, die im N-terminalen Teil des NS3-Proteins enthalten ist. Sie katalysiert alle abwärts von NS3 vorhandenen Spaltungen des Polyproteins, d.h. die NS3-NS4A-Proteolyse ebenso wie die Spaltungen an den Stellen NS4A-NS4B, NS4B-NS5A, NS5A-NS5B.Hepatitis C virus (HCV) is the only member of the genus Hepacivirus within the family Flaviviridae. There are at least 6 genotypes and a variety of subtypes. The virus is surrounded by a shell and has as a genome a positive single strand of viral RNA. The length of the viral RNA genome is approximately 9500 nucleotides. Propagation of the viral genome and translation into protein is accomplished by means of RNA structures located at the beginning and end of the genome (5 'untranslated region, 3' untranslated region). The genome has a single reading frame (ORF) encoding a polyprotein (about 3000 amino acids). From this, structural and non-structural (NS) proteins are cleaved in an infected cell by viral or host cell enzymes. HCV encodes a capsid protein (c) and two envelope proteins (E1 and E2). A small protein (p7) could be a so-called viroporin, which is essential for the infectivity of the mature virus particle. The mature NS proteins include the NS2, NS3, NS4A, NS4B, NS5A and NS5B proteins. For their cleavage from the polyprotein two viral proteases are responsible. The enzyme, designated as NS2 / 3 protease, cleaves at the NS2-NS3 site in a manner that is as yet only slightly characterized. The second protease (NS3 protease) is a serine protease contained in the N-terminal part of the NS3 protein. It catalyses all downs of NS3 existing cleavages of the poly proteins, ie NS3 NS4A proteolysis as well as the NS4A NS4B, NS4B NS5A, NS5A NS5B sites.
Das NS4A-Protein besitzt wahrscheinlich vielfältige Funktion, so zum Beispiel als Kofaktor der NS3-Protease und möglicherweise bei der Membranlokalisierung von NS3 und anderen NS-Proteinen. Die Komplexbildung zwischen NS3 und NS4A ist vermutlich eine Grundvoraussetzung für die Proteinprozessierung und erhöht die proteolytischen Aktivitäten bezogen auf alle Schnittstellen. Das NS3-Protein besitzt außerdem Aktivität als NTPase und Helikase. NS5B ist eine RNA-abhängige RNA-Polymerase, die entscheidend an der HCV-Replikation beteiligt ist. Über die Funktionen der NS4B- und NS5A-Proteine ist sehr wenig bekannt. Für NS5A wird eine Beteiligung an der klinischen Resistenz gegenüber Interferon diskutiert.The NS4A protein probably has multiple functions, such as as a cofactor of the NS3 protease and possibly in membrane localization of NS3 and other NS proteins. Complex formation between NS3 and NS4A is probably a prerequisite for the Protein processing and increased the proteolytic activities related to all interfaces. The NS3 protein also has activity as an NTPase and helicase. NS5B is an RNA-dependent RNA polymerase, which is critically involved in HCV replication. About the Functions of the NS4B and NS5A proteins is very little known. For NS5A will an involvement in clinical resistance to interferon discussed.
Dem Hepatitis C nah verwandte Viren wie beispielsweise das GBV B-Virus, welches Neuweltaffen infiziert, oder das BVDV (Bovines Virale Diarrhoe Virus) werden häufig als Modellviren verwendet, um bestimmte Aspekte des Viruslebenszyklus zu untersuchen.the Hepatitis C closely related viruses such as the GBV B virus, which infects New World monkeys, or the BVDV (Bovine Viral Diarrhea Virus) become common used as model viruses to certain aspects of the virus life cycle to investigate.
Eine Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist es daher, neue Verbindungen mit gleicher oder verbesserter antiviraler Wirkung zur Behandlung und/oder Prophylaxe von viralen Infektionskrankheiten bei Menschen und Tieren, insbesondere von Hepatitis C und deren Folgen, zur Verfügung zu stellen.A Object of the present invention is therefore to provide new compounds with equal or improved antiviral effect for treatment and / or prophylaxis of viral infectious diseases in humans and animals, especially hepatitis C and its consequences put.
Strukturell ähnliche Verbindungen sind beispielsweise in WO 02/100851, WO 04/052879 und WO 04/052885 zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Flavivirus Infektionen, wie z.B. Hepatitis C, in WO 00/027823 als Gastrin und/oder Cholecystokinin Rezeptoren zur Behandlung von Krebs und Erkrankungen des Zentralen Nervensystems, in WO 92/010094 in Kombination mit Aryloxyessigsäure Derivaten als Herbizide und in EP-A 423 523 als Herbizide beschrieben.Structurally similar Compounds are described for example in WO 02/100851, WO 04/052879 and WO 04/052885 for the treatment and / or prophylaxis of flavivirus infections, such as. Hepatitis C, in WO 00/027823 as gastrin and / or cholecystokinin Receptors for the treatment of cancer and diseases of the central Nervous system, in WO 92/010094 in combination with aryloxyacetic acid derivatives as herbicides and described in EP-A 423 523 as herbicides.
Laval Chan, et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 2004, 14, 793-796 und Laval Chan, et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 2004, 14, 797-800 beschreiben substituierte 5-Phenyl-thiophen-2-carbonsäuren als potente HCV-Inhibitoren.Laval Chan, et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 2004, 14, 793-796 and Laval Chan, et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 2004, 14, 797-800 substituted 5-phenyl-thiophene-2-carboxylic acids as potent HCV inhibitors.
Überraschenderweise wurde gefunden, dass die in der vorliegenden Erfindung beschriebenen substituierten Thiophene antiviral hochwirksam sind.Surprisingly was found to be those described in the present invention Substituted thiophenes are highly effective antiviral.
Gegenstand
der Erfindung sind Verbindungen der Formel in welcher
R1 für
(C1-C6)-Alkyl, (C3-C7)-Cycloalkyl,
5- bis 7-gliedriges Heterocyclyl, 5- bis 7-gliedriges Heteroaryl
oder Phenyl steht,
wobei Alkyl, Cycloalkyl, Heterocyclyl, Heteroaryl
und Phenyl substituiert sein können
mit 1 bis 3 Substituenten, wobei die Substituenten unabhängig voneinander
ausgewählt
werden aus der Gruppe, bestehend aus Halogen, Cyano, Hydroxy, Amino,
Nitro, Trifluormethyl, Trifluormethoxy, Hydroxycarbonyl, Aminocarbonyl, (C1-C6)-Alkyl, (C1-C6)-Alkoxy, (C1- C6)-Alkylamino, (C3-C7)-Cycloalkyl, Phenyl, 5- bis 7-gliedrigem
Heterocyclyl, 5- bis 7-gliedrigem
Heteroaryl, (C1-C6)-Alkylthio,
(C1-C6)-Alkylcarbonyl,
(C1-C6)-Alkylsulfonyl,
(C1-C6)-Alkylsulfoxyl,
(C1-C6)-Alkoxycarbonyl,
(C1-C6)-Alkylaminocarbonyl,
(C1-C6)-Alkylcarbonylamino,
(C1-C6)-Alkylsulfonylamino
und (C6-C10)-Arylsulfonylamino,
worin
Arylsulfonylamino seinerseits substituiert sein kann mit 1 bis 3
Substituenten, wobei die Substituenten unabhängig voneinander ausgewählt werden
aus der Gruppe, bestehend aus Halogen, Cyano, Hydroxy, Amino, Nitro,
Trifluormethyl, Trifluormethoxy, (C1-C6)-Alkyl und (C1-C6)-Alkoxy,
R2 für (C1-C6)-Alkyl, (C3-C7)-Cycloalkyl,
5- bis 7-gliedriges Heterocyclyl oder Benzyl steht,
wobei Alkyl,
Cycloalkyl, Heterocyclyl und Benzyl substituiert sein können mit
1 bis 3 Substituenten, wobei die Substituenten unabhängig voneinander
ausgewählt
werden aus der Gruppe, bestehend aus Halogen, Cyano, Hydroxy, Amino,
Nitro, Trifluormethyl, Trifluormethoxy, Hydroxycarbonyl, Aminocarbonyl,
(C1-C6)-Alkyl, (C1-C6)-Alkoxy, (C1-C6)-Alkylamino, (C1-C6)-Alkylthio,
(C1-C6)-Alkylcarbonyl,
(C1-C6)-Alkylsulfonyl,
(C1-C6)-Alkylsulfoxyl, (C1-C6)-Alkoxycarbonyl,
(C1-C6)-Alkylaminocarbonyl,
(C1-C6)-Alkylcarbonylamino,
5- bis 7-gliedrigem Heterocyclyl, gegebenenfalls Alkyl substituiertem
(C3-C7)-Cycloalkylaminocarbonyl und gegebenenfalls Alkyl
substituiertem 5- bis 7-gliedrigem Heterocyclylcarbonyl,
worin
Alkyl substituiert sein kann mit 1 bis 2 Substituenten, wobei die
Substituenten unabhängig
voneinander ausgewählt
werden aus der Gruppe, bestehend aus Hydroxy, Amino, (C1-C6)-Alkylamino, (C1-C6)-Alkylsulfoxyl und (C1-C6)-Alkoxycarbonyl,
R3 für
(C3-C7)-Cycloalkyl,
5- bis 7-gliedriges Heterocyclyl, (C6-C10)-Aryl, 5- bis 7-gliedriges Heteroaryl,
-CH2-R4 oder -CH2-CH2-R5 steht,
wobei
Cycloalkyl, Heterocyclyl, Aryl und Heteroaryl substituiert sein
können
mit 1 bis 3 Substituenten, wobei die Substituenten unabhängig voneinander
ausgewählt
werden aus der Gruppe, bestehend aus Halogen, Cyano, Hydroxy, Amino,
Nitro, Trifluormethyl, Trifluormethoxy, Hydroxycarbonyl, Aminocarbonyl,
(C1-C6)-Alkyl, (C1-C6)-Alkylthio,
(C1-C6)-Alkylcarbonyl, (C1-C6)-Alkylsulfonyl, (C1-C6)-Alkoxycarbonyl, (C6-C10)-Aryloxycarbonyl, (C1-C6)-Alkylaminocarbonyl, (C1-C6)-Alkylcarbonylamino, -OR6 und
-NR7R8,
worin
Alkyl substituiert sein kann mit 1 bis 3 Substituenten, wobei die
Substituenten unabhängig
voneinander ausgewählt
werden aus der Gruppe, bestehend aus Halogen, Hydroxy, Amino, Hydroxycarbonyl,
Aminocarbonyl, (C1-C6)-Alkoxy, (C1-C6)-Alkylamino,
(C1-C6)-Alkylthio,
Phenyl, (C1-C6)-Alkylcarbonyl,
(C1-C6)-Alkylsulfonyl, (C1-C6)-Alkoxycarbonyl,
(C1-C6)-Alkylaminocarbonyl
und (C1-C6)-Alkylcarbonylamino,
worin
Phenyl seinerseits substituiert sein kann mit 1 bis 3 Substituenten,
wobei die Substituenten unabhängig voneinander
ausgewählt
werden aus der Gruppe, bestehend aus Halogen, Cyano, Hydroxy, Amino,
Nitro, Trifluormethyl, Trifluormethoxy, Hydroxycarbonyl, Aminocarbonyl,
(C1-C6)-Alkyl, (C1-C6)-Alkoxy, (C1-C6)-Alkylamino, (C1-C6)-Alkylthio, (C1-C6)-Alkylcarbonyl, (C1-C6)-Alkylsulfonyl, (C1-C6)-Alkoxycarbonyl, (C1-C6)-Alkylaminocarbonyl und (C1-C6)-Alkylcarbonylamino,
wobei
R6 und R7 unabhängig voneinander
für (C1-C6)-Alkyl, (C3-C7)-Cycloalkyl,
5- bis 7-gliedriges
Heterocyclyl, Benzyl, (C6-C10)-Aryl
oder 5- oder 6-gliedriges Heteroaryl stehen,
wobei Alkyl, Cycloalkyl,
Heterocyclyl, Benzyl, Aryl und Heteroaryl substituiert sein können mit
1 bis 3 Substituenten, wobei die Substituenten unabhängig voneinander
ausgewählt
werden aus der Gruppe, bestehend aus Halogen, Cyano, Hydroxy, Amino,
Nitro, Trifluormethyl, Trifluormethoxy, Hydroxycarbonyl, Aminocarbonyl, (C1-C6)-Alkyl, (C1-C6)-Alkoxy, (C1-C6)-Alkylamino,
(C1-C6)-Alkylthio,
(C1-C6)-Alkylcarbonyl,
(C1-C6)-Alkylsulfonyl,
(C1-C6)-Alkoxycarbonyl,
(C1-C6)-Alkylaminocarbonyl
und (C1-C6)-Alkylcarbonylamino,
R8 für
Wasserstoff, (C1-C6)-Alkyl
oder (C3-C7)-Cycloalkyl
steht,
oder
R7 und R8 mit
dem Stickstoffatom an das sie gebunden sind einen 5- bis 7-gliedrigen Heterocyclus
bilden,
R4 und R5 unabhängig voneinander
für (C3-C7)-Cycloalkyl,
5- bis 7-gliedriges Heterocyclyl, (C6-C10)-Aryl oder 5- bis 7-gliedriges Heteroaryl
stehen,
wobei Cycloalkyl, Heterocyclyl, Aryl und Heteroaryl
substituiert sein können
mit 1 bis 3 Substituenten, wobei die Substituenten unabhängig voneinander
ausgewählt werden
aus der Gruppe, bestehend aus Halogen, Cyano, Hydroxy, Amino, Nitro,
Trifluormethyl, Trifluormethoxy, Hydroxycarbonyl, Aminocarbonyl,
(C1-C6)-Alkyl, (C1-C6)-Alkoxy, (C1-C6)-Alkylamino,
(C1-C6)-Alkylthio,
(C1-C6)-Alkylcarbonyl,
(C1-C6)-Alkylsulfonyl,
(C1-C6)-Alkoxycarbonyl,
(C1-C6)-Alkylaminocarbonyl
und (C1-C6)-Alkylcarbonylamino,
und
ihre Salze, ihre Solvate und die Solvate ihrer Salze.The invention relates to compounds of the formula in which
R 1 is (C 1 -C 6 ) -alkyl, (C 3 -C 7 ) -cycloalkyl, 5- to 7-membered heterocyclyl, 5- to 7-membered heteroaryl or phenyl,
wherein alkyl, cycloalkyl, heterocyclyl, heteroaryl and phenyl may be substituted with 1 to 3 substituents, the substituents being independently selected from the group consisting of halogen, cyano, hydroxy, amino, nitro, trifluoromethyl, trifluoromethoxy, hydroxycarbonyl, aminocarbonyl, (C 1 -C 6) alkyl, (C 1 -C 6) alkoxy, (C 1 - C 6) alkylamino, (C 3 -C 7) cycloalkyl, phenyl, 5- to 7-membered heterocyclyl, 5- to 7-membered heteroaryl, (C 1 -C 6 ) -alkylthio, (C 1 -C 6 ) -alkylcarbonyl, (C 1 -C 6 ) -alkylsulfonyl, (C 1 -C 6 ) -alkylsulfoxyl, (C 1 -C 6 ) -alkoxycarbonyl, (C 1 -C 6 ) -alkylaminocarbonyl, (C 1 -C 6 ) -alkylcarbonylamino, (C 1 -C 6 ) -alkylsulfonylamino and (C 6 -C 10 ) -arylsulfonylamino,
in which arylsulfonylamino may in turn be substituted by 1 to 3 substituents, where the substituents are independently selected from the group consisting of halogen, cyano, hydroxy, amino, nitro, trifluoromethyl, trifluoromethoxy, (C 1 -C 6 ) -alkyl and ( C 1 -C 6 ) -alkoxy,
R 2 is (C 1 -C 6) alkyl, (C 3 -C 7) -cycloalkyl, 5- to 7-membered heterocyclyl or benzyl,
wherein alkyl, cycloalkyl, heterocyclyl and benzyl may be substituted with 1 to 3 substituents, wherein the Substituents independently of one another are selected from the group consisting of halogen, cyano, hydroxyl, amino, nitro, trifluoromethyl, trifluoromethoxy, hydroxycarbonyl, aminocarbonyl, (C 1 -C 6 ) -alkyl, (C 1 -C 6 ) -alkoxy, ( C 1 -C 6 ) -alkylamino, (C 1 -C 6 ) -alkylthio, (C 1 -C 6 ) -alkylcarbonyl, (C 1 -C 6 ) -alkylsulfonyl, (C 1 -C 6 ) -alkylsulfoxyl, ( C 1 -C 6 ) -alkoxycarbonyl, (C 1 -C 6 ) -alkylaminocarbonyl, (C 1 -C 6 ) -alkylcarbonylamino, 5- to 7-membered heterocyclyl, optionally alkyl-substituted (C 3 -C 7 ) -cycloalkylaminocarbonyl and optionally alkyl-substituted 5- to 7-membered heterocyclylcarbonyl,
wherein alkyl may be substituted with 1 to 2 substituents wherein the substituents are independently selected from the group consisting of hydroxy, amino, (C 1 -C 6 ) alkylamino, (C 1 -C 6 ) alkylsulfoxyl and (C 1 -C 6 ) alkoxycarbonyl,
R 3 is (C 3 -C 7 ) -cycloalkyl, 5- to 7-membered heterocyclyl, (C 6 -C 10 ) -aryl, 5- to 7-membered heteroaryl, -CH 2 -R 4 or -CH 2 - CH 2 -R 5 is
wherein cycloalkyl, heterocyclyl, aryl and heteroaryl may be substituted with 1 to 3 substituents, wherein the substituents are independently selected from the group consisting of halogen, cyano, hydroxy, amino, nitro, trifluoromethyl, trifluoromethoxy, hydroxycarbonyl, aminocarbonyl, (C C 1 -C 6 ) -alkyl, C 1 -C 6 -alkylthio, C 1 -C 6 -alkylcarbonyl, C 1 -C 6 -alkylsulfonyl, C 1 -C 6 -alkoxycarbonyl, (C 6 -C 10 ) -aryloxycarbonyl, (C 1 -C 6 ) -alkylaminocarbonyl, (C 1 -C 6 ) -alkylcarbonylamino, -OR 6 and -NR 7 R 8 ,
wherein alkyl may be substituted with 1 to 3 substituents, wherein the substituents are independently selected from the group consisting of halogen, hydroxy, amino, hydroxycarbonyl, aminocarbonyl, (C 1 -C 6 ) alkoxy, (C 1 -C 6 ) -Alkylamino, (C 1 -C 6 ) -alkylthio, phenyl, (C 1 -C 6 ) -alkylcarbonyl, (C 1 -C 6 ) -alkylsulfonyl, (C 1 -C 6 ) -alkoxycarbonyl, (C 1 -) C 6 ) -alkylaminocarbonyl and (C 1 -C 6 ) -alkylcarbonylamino,
in which phenyl in turn may be substituted by 1 to 3 substituents, the substituents being independently selected from the group consisting of halogen, cyano, hydroxy, amino, nitro, trifluoromethyl, trifluoromethoxy, hydroxycarbonyl, aminocarbonyl, (C 1 -C 6 ) Alkyl, C 1 -C 6 alkoxy, C 1 -C 6 alkylamino, C 1 -C 6 alkylthio, C 1 -C 6 alkylcarbonyl, C 1 -C 6 Alkylsulfonyl, (C 1 -C 6 ) -alkoxycarbonyl, (C 1 -C 6 ) -alkylaminocarbonyl and (C 1 -C 6 ) -alkylcarbonylamino,
in which
R 6 and R 7 independently of one another are (C 1 -C 6 ) -alkyl, (C 3 -C 7 ) -cycloalkyl, 5- to 7-membered heterocyclyl, benzyl, (C 6 -C 10 ) -aryl or 5- or 6-membered heteroaryl,
where alkyl, cycloalkyl, heterocyclyl, benzyl, aryl and heteroaryl may be substituted by 1 to 3 substituents, the substituents being independently selected from the group consisting of halogen, cyano, hydroxy, amino, nitro, trifluoromethyl, trifluoromethoxy, hydroxycarbonyl, Aminocarbonyl, (C 1 -C 6 ) -alkyl, (C 1 -C 6 ) -alkoxy, (C 1 -C 6 ) -alkylamino, (C 1 -C 6 ) -alkylthio, (C 1 -C 6 ) - Alkylcarbonyl, (C 1 -C 6 ) -alkylsulphonyl, (C 1 -C 6 ) -alkoxycarbonyl, (C 1 -C 6 ) -alkylaminocarbonyl and (C 1 -C 6 ) -alkylcarbonylamino,
R 8 is hydrogen, (C 1 -C 6) alkyl or (C 3 -C 7) is cycloalkyl,
or
R 7 and R 8 with the nitrogen atom to which they are attached form a 5- to 7-membered heterocycle,
R 4 and R 5 independently of one another are (C 3 -C 7 ) -cycloalkyl, 5- to 7-membered heterocyclyl, (C 6 -C 10 ) -aryl or 5- to 7-membered heteroaryl,
wherein cycloalkyl, heterocyclyl, aryl and heteroaryl may be substituted with 1 to 3 substituents, wherein the substituents are independently selected from the group consisting of halogen, cyano, hydroxy, amino, nitro, trifluoromethyl, trifluoromethoxy, hydroxycarbonyl, aminocarbonyl, (C 1 -C 6 ) alkyl, (C 1 -C 6 ) alkoxy, (C 1 -C 6 ) alkylamino, (C 1 -C 6 ) alkylthio, (C 1 -C 6 ) alkylcarbonyl, (C 1 -C 6 ) -alkylsulfonyl, (C 1 -C 6 ) -alkoxycarbonyl, (C 1 -C 6 ) -alkylaminocarbonyl and (C 1 -C 6 ) -alkylcarbonylamino,
and their salts, their solvates, and the solvates of their salts.
Erfindungsgemäße Verbindungen sind die Verbindungen der Formel (I) und deren Salze, Solvate und Solvate der Salze, nachfolgend als Ausführungsbeispiel(e) genannten Verbindungen und deren Salze, Solvate und Solvate der Salze, soweit es sich bei den von Formel (I) umfassten, nachfolgend genannten Verbindungen nicht bereits um Salze, Solvate und Solvate der Salze handelt.Compounds of the invention are the compounds of formula (I) and their salts, solvates and solvates the salts, below as embodiment (e) mentioned compounds and their salts, solvates and solvates of Salts, as far as those of formula (I), hereinafter not already mentioned salts, solvates and solvates salts.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können in Abhängigkeit von ihrer Struktur in stereoisomeren Formen (Enantiomere, Diastereomere) existieren. Die Erfindung betrifft deshalb die Enantiomeren oder Diastereomeren und ihre jeweiligen Mischungen. Aus solchen Mischungen von Enantiomeren und/oder Diastereomeren lassen sich die stereoisomer einheitlichen Bestandteile in bekannter Weise isolieren.The Compounds of the invention can dependent on of their structure in stereoisomeric forms (enantiomers, diastereomers) exist. The invention therefore relates to the enantiomers or Diastereomers and their respective mixtures. From such mixtures enantiomers and / or diastereomers can be the stereoisomer isolate uniform components in a known manner.
Sofern die erfindungsgemäßen Verbindungen in tautomeren Formen vorkommen können, umfasst die vorliegende Erfindung sämtliche tautomere Formen.Provided the compounds of the invention can occur in tautomeric forms, For example, the present invention encompasses all tautomeric forms.
Als Salze sind im Rahmen der vorliegenden Erfindung physiologisch unbedenkliche Salze der erfindungsgemäßen Verbindungen bevorzugt. Umfasst sind aber auch Salze, die für pharmazeutische Anwendungen selbst nicht geeignet sind aber beispielsweise für die Isolierung oder Reinigung der erfindungsgemäßen Verbindungen verwendet werden können.Salts used in the context of the present invention are physiologically acceptable salts of the compounds according to the invention. Also included are salts which are suitable for pharmaceutical applications conditions are not suitable but can be used for example for the isolation or purification of the compounds of the invention.
Physiologisch unbedenkliche Salze der erfindungsgemäßen Verbindungen umfassen Säureadditionssalze von Mineralsäuren, Carbonsäuren und Sulfonsäuren, z.B. Salze der Chlorwasserstoffsäure, Bromwasserstoffsäure, Schwefelsäure, Phosphorsäure, Methansulfonsäure, Ethansulfonsäure, Toluolsulfonsäure, Benzolsulfonsäure, Naphthalindisulfonsäure, Essigsäure, Trifluoressigsäure, Propionsäure, Milchsäure, Weinsäure, Äpfelsäure, Zitronensäure, Fumarsäure, Maleinsäure und Benzoesäure.physiological Safe salts of the compounds of the invention include acid addition salts of mineral acids, carboxylic acids and sulfonic acids, e.g. Salts of hydrochloric acid, hydrobromic, Sulfuric acid, Phosphoric acid, methane, ethanesulfonic, toluene sulfonic acid, benzenesulfonic, naphthalenedisulfonic, Acetic acid, trifluoroacetic, propionic acid, Lactic acid, Tartaric acid, malic acid, citric acid, fumaric acid, maleic acid and Benzoic acid.
Physiologisch unbedenkliche Salze der erfindungsgemäßen Verbindungen umfassen auch Salze üblicher Basen, wie beispielhaft und vorzugsweise Alkalimetallsalze (z.B. Natrium- und Kaliumsalze), Erdalkalisalze (z.B. Calcium- und Magnesiumsalze) und Ammoniumsalze, abgeleitet von Ammoniak oder organischen Aminen mit 1 bis 16 C-Atomen, wie beispielhaft und vorzugsweise Ethylamin, Diethylamin, Triethylamin, Ethyldiisopropylamin, Monoethanolamin, Diethanolamin, Triethanolamin, Dicyclo-hexylamin, Dimethylaminoethanol, Prokain, Dibenzylamin, N-Methylmorpholin, Arginin, Lysin, Ethylendiamin und N-Methylpiperidin.physiological acceptable salts of the compounds of the invention also include Salts more usual Bases, such as by way of example and preferably alkali metal salts (e.g. Sodium and potassium salts), alkaline earth salts (e.g., calcium and magnesium salts) and ammonium salts derived from ammonia or organic amines with 1 to 16 carbon atoms, such as by way of example and preferably ethylamine, Diethylamine, triethylamine, ethyldiisopropylamine, monoethanolamine, Diethanolamine, triethanolamine, dicyclohexylamine, dimethylaminoethanol, Prokain, dibenzylamine, N-methylmorpholine, arginine, lysine, ethylenediamine and N-methylpiperidine.
Als Solvate werden im Rahmen der Erfindung solche Formen der erfindungsgemäßen Verbindungen bezeichnet, welche in festem oder flüssigem Zustand durch Koordination mit Lösungsmittelmolekülen einen Komplex bilden. Hydraie sind eine spezielle Form der Solvate, bei denen die Koordination mit Wasser erfolgt.When In the context of the invention, solvates are those forms of the compounds according to the invention, which in solid or liquid Condition by coordination with solvent molecules a complex form. Hydraie are a special form of solvates in which the coordination with water takes place.
Im
Rahmen der vorliegenden Erfindung haben die Substituenten, soweit
nicht anders spezifiziert, die folgende Bedeutung:
Alkyl per
se und "Alk" und "Alkyl" in Alkoxy, Alkylthio,
Alkylamino, Alkylcarbonyl, Alkoxycarbonyl, Alkylaminocarbonyl, Alkylcarbonylamino,
Alkylsulfonyl, Alkylsulfoxyl und Alkylsulfonylamino stehen für einen
linearen oder verzweigten Alkylrest mit in der Regel 1 bis 6 („C1-C6-Alkyl"), vorzugsweise 1
bis 4, besonders bevorzugt 1 bis 3 Kohlenstoffatomen, beispielhaft
und vorzugsweise für
Methyl, Ethyl, n-Propyl, Isopropyl, tert.-Butyl, n-Pentyl und n-Hexyl.Unless otherwise specified, in the context of the present invention, the substituents have the following meaning:
Alkyl per se and "Alk" and "alkyl" in alkoxy, alkylthio, alkylamino, alkylcarbonyl, alkoxycarbonyl, alkylaminocarbonyl, alkylcarbonylamino, alkylsulfonyl, alkylsulfoxyl and alkylsulfonylamino stand for a linear or branched alkyl radical with generally 1 to 6 ("C 1 - C 6 alkyl "), preferably 1 to 4, particularly preferably 1 to 3 carbon atoms, by way of example and preferably methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, tert-butyl, n-pentyl and n-hexyl.
Alkoxy steht beispielhaft und vorzugsweise für Methoxy, Ethoxy, n-Propoxy, Isopropoxy, tert.-Butoxy, n-Pentoxy und n-Hexoxy.alkoxy is exemplary and preferably methoxy, ethoxy, n-propoxy, Isopropoxy, tert-butoxy, n-pentoxy and n-hexoxy.
Alkylthio steht beispielhaft und vorzugsweise für Methylthio, Ethylthio, n-Propylthio, Isopropylthio, tert.-Butylthio, n-Pentylthio und n-Hexylthio.alkylthio is exemplary and preferably methylthio, ethylthio, n-propylthio, Isopropylthio, tert-butylthio, n-pentylthio and n-hexylthio.
Alkylcarbonyl steht beispielhaft und vorzugsweise für Acetyl und Propanoyl.alkylcarbonyl is exemplary and preferably acetyl and propanoyl.
Alkylamino steht für einen Alkylaminorest mit einem oder zwei (unabhängig voneinander gewählten) Alkylsubstituenten, beispielhaft und vorzugsweise für Methylamino, Ethylamino, n-Propylamino, Isopropylamino, tert.-Butylamino, n-Pentylamino, n-Hexylamino, N,N-Dimethylamino, N,N-Diethylamino, N-Ethyl-N-methylamino, N-Methyl-N-n-propylamino, N-Isopropyl-N-n-propylamino, N-t-Butyl-N-methylamino, N-Ethyl-N-n-pentylamino und N-n-Hexyl-N-methylamino. C1-C3-Alkylamino steht beispielsweise für einen Monoalkylaminorest mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen oder für einen Dialkylaminorest mit jeweils 1 bis 3 Kohlenstoffatomen pro Alkylsubstituent.Alkylamino represents an alkylamino radical having one or two (independently selected) alkyl substituents, by way of example and by way of preference methylamino, ethylamino, n-propylamino, isopropylamino, tert-butylamino, n-pentylamino, n-hexylamino, N, N-dimethylamino, N , N-diethylamino, N-ethyl-N-methylamino, N-methyl-Nn-propylamino, N-isopropyl-Nn-propylamino, Nt-butyl-N-methylamino, N-ethyl-Nn-pentylamino and Nn-hexyl-N methylamino. C 1 -C 3 -alkylamino is, for example, a monoalkylamino radical having 1 to 3 carbon atoms or a dialkylamino radical having in each case 1 to 3 carbon atoms per alkyl substituent.
Alkoxycarbonyl steht beispielhaft und vorzugsweise für Methoxycarbonyl, Ethoxycarbonyl, n-Propoxycarbonyl, Isopropoxycarbonyl, tert.-Butoxycarbonyl, n-Pentoxycarbonyl und n-Hexoxycarbonyl.alkoxycarbonyl is exemplary and preferably methoxycarbonyl, ethoxycarbonyl, n-propoxycarbonyl, Isopropoxycarbonyl, tert-butoxycarbonyl, n-pentoxycarbonyl and n-hexoxycarbonyl.
Alkylaminocarbonyl steht für einen Alkylaminocarbonylrest mit einem oder zwei (unabhängig voneinander gewählten) Alkylsubstituenten, beispielhaft und vorzugsweise für Methylaminocarbonyl, Ethylaminocarbonyl, n-Propylaminocarbonyl, Isopropylaminocarbonyl, tert.-Butylaminocarbonyl, n-Pentylaminocarbonyl, n-Hexylaminocarbonyl, N,N-Dimethylamino-carbonyl, N,N-Diethylaminocarbonyl, N-Ethyl-N-methylaminocarbonyl, N-Methyl-N-n-propylaminocarbonyl, N-Isopropyl-N-n-propylaminocarbonyl, N-t-Butyl-N-methylaminocarbonyl, N-Ethyl-N-n-pentylaminocarbonyl und N-n-Hexyl-N-methylaminocarbonyl. C1-C3-Alkylamino-carbonyl steht beispielsweise für einen Monoalkylaminocarbonylrest mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen oder für einen Dialkylaminocarbonylrest mit jeweils 1 bis 3 Kohlenstoffatomen pro Alkylsubstituent.Alkylaminocarbonyl represents an alkylaminocarbonyl radical having one or two (independently selected) alkyl substituents, by way of example and preferably methylaminocarbonyl, ethylaminocarbonyl, n-propylaminocarbonyl, isopropylaminocarbonyl, tert-butylaminocarbonyl, n-pentylaminocarbonyl, n-hexylaminocarbonyl, N, N-dimethylamino-carbonyl , N, N-diethylaminocarbonyl, N-ethyl-N-methylaminocarbonyl, N-methyl-Nn-propylaminocarbonyl, N-isopropyl-Nn-propylaminocarbonyl, Nt-butyl-N-methylaminocarbonyl, N-ethyl-Nn-pentylaminocarbonyl and Nn-hexyl -N-methylaminocarbonyl. C 1 -C 3 -alkylamino-carbonyl is, for example, a monoalkylaminocarbonyl radical having 1 to 3 carbon atoms or a dialkylaminocarbonyl radical having in each case 1 to 3 carbon atoms per alkyl substituent.
Alkylcarbonylamino steht beispielhaft und vorzugsweise für Acetylamino und Propanoylamino.alkylcarbonylamino is exemplary and preferably acetylamino and propanoylamino.
Alkylsulfonylamino steht beispielhaft und vorzugsweise für Methylsulfonylamino, Ethylsulfonylamino, n-Propylsulfonylamino, Isopropylsulfonylamino, tert.-Butylsulfonylamino, n-Pentylsulfonylamino und n-Hexylsulfonylamino.Alkylsulfonylamino is by way of example and preferably methylsulfonylamino, ethylsulfonylamino, n-propylsulfonylamino, isopropylsulfonylamino, tert-butylsulfonylamino, n-pentylsulfonylamino and n-hexyl sulfonylamino.
Alkylsulfonyl steht beispielhaft und vorzugsweise für Methylsulfonyl, Ethylsulfonyl, n-Propylsulfonyl, Isopropylsulfonyl, tert.-Butylsulfonyl, n-Pentylsulfonyl und n-Hexylsulfonyl.alkylsulfonyl is exemplary and preferably methylsulfonyl, ethylsulfonyl, n-propylsulfonyl, isopropylsulfonyl, tert -butylsulfonyl, n -pentylsulfonyl and n-hexylsulfonyl.
Alkylsulfoxyl steht beispielhaft und vorzugsweise für Methylsulfoxyl, Ethylsulfoxyl, n-Propylsulfoxyl, Isopropylsulfoxyl, tert.-Butylsulfoxyl, n-Pentylsulfoxyl und n-Hexylsulfoxyl.alkylsulfoxyl is exemplary and preferably methylsulfoxyl, ethylsulfoxyl, n-propylsulfoxyl, isopropylsulfoxyl, tert-butylsulfoxyl, n-pentylsulfoxyl and n-hexylsulfoxyl.
Cycloalkyl steht für eine Cycloalkylgruppe mit in der Regel 3 bis 7, bevorzugt 5 bis 6 Kohlenstoffatomen, beispielhaft und vorzugsweise für Cyclopropyl, Cyclobutyl, Cyclopentyl, Cyclohexyl und Cycloheptyl.cycloalkyl stands for a cycloalkyl group having usually 3 to 7, preferably 5 to 6 carbon atoms, by way of example and preferably for cyclopropyl, Cyclobutyl, cyclopentyl, cyclohexyl and cycloheptyl.
Aryl steht für einen mono- oder bicyclischen aromatischen, carbocyclischen Rest mit in der Regel 6 bis 10 Kohlenstoffatomen; beispielhaft und vorzugsweise für Phenyl und Naphthyl.aryl stands for a mono- or bicyclic aromatic, carbocyclic radical with usually 6 to 10 carbon atoms; by way of example and preferably for phenyl and naphthyl.
Aryloxycarbonyl steht beispielhaft und vorzugsweise für Phenyloxycarbonyl und Naphthyloxycarbonyl.aryloxycarbonyl is exemplary and preferably phenyloxycarbonyl and Naphthyloxycarbonyl.
Arysulfonylamino steht beispielhaft und vorzugsweise für Phenylsulfonylamino und Naphthylsulfonylamino.Arysulfonylamino is exemplary and preferably phenylsulfonylamino and naphthylsulfonylamino.
5- bis 7-gliedriges Heterocyclyl und 5- bis 7-gliedriger Heterocyclus stehen im Rahmen der Erfindung für einen monocyclischen, gesättigten oder partiell ungesättigten Heterocyclus mit bis zu drei Heteroatomen aus der Reihe N, O und/oder S, der über ein Ringkohlenstoffatom oder ein Stickstoffatom des Heterocyclus verknüpft ist und der gegebenenfalls Oxo substituiert ist. Beispielhaft und vorzugsweise seien genannt: Tetrahydrofuryl, Dihydrofuryl, Imidazolidinyl, Thiolanyl, Dioxolanyl, Pyrrolidinyl, Pyrrolinyl, Tetrahydro-2H-pyranyl, Dihydropyranyl, Piperidinyl, Piperazinyl, Morpholinyl, Thiomorpholinyl, Tetrahydro-2H-thiopyranyl, Oxidotetrahydro-2H-thiopyranyl, 1,1-Dioxidotetrahydro-2H-thiopyranyl, Tetrahydrothienyl und 1,4-Diazepanyl.5 to 7-membered heterocyclyl and 5- to 7-membered heterocycle are within the scope of the invention a monocyclic, saturated or partially unsaturated Heterocycle containing up to three heteroatoms from the series N, O and / or S, over a ring carbon atom or a nitrogen atom of the heterocycle is linked and optionally substituted oxo. Exemplary and preferably may be mentioned: tetrahydrofuryl, dihydrofuryl, imidazolidinyl, thiolanyl, Dioxolanyl, pyrrolidinyl, pyrrolinyl, tetrahydro-2H-pyranyl, dihydropyranyl, Piperidinyl, piperazinyl, morpholinyl, thiomorpholinyl, tetrahydro-2H-thiopyranyl, Oxidotetrahydro-2H-thiopyranyl, 1,1-Dioxotetrahydro-2H-thiopyranyl, tetrahydrothienyl and 1,4-diazepanyl.
5- bis 7-gliedriges Heteroaryl steht im Rahmen der Erfindung im allgemeinen für einen aromatischen, monocyclischen Rest mit 5 bis 7 Ringatomen und bis zu 4 Heteroatomen aus der Reihe S, O und/oder N. Bevorzugt sind 5- bis 6-gliedrige Heteroaryle mit bis zu 4 Heteroatomen. Der Heteroarylrest kann über ein Kohlenstoff- oder Heteroatom gebunden sein. Beispielsweise und vorzugsweise seien genannt: Thienyl, Furyl, Pyrrolyl, Thiazolyl, Oxazolyl, Imidazolyl, Pyridyl, Pyrimidyl und Pyridazinyl.5 to 7-membered heteroaryl is in the context of the invention in general for one aromatic, monocyclic radical having 5 to 7 ring atoms and up to 4 heteroatoms from the series S, O and / or N. Preferred 5- to 6-membered heteroaryls containing up to 4 heteroatoms. The heteroaryl radical can over be bound to a carbon or heteroatom. For example and Preferred are: thienyl, furyl, pyrrolyl, thiazolyl, Oxazolyl, imidazolyl, pyridyl, pyrimidyl and pyridazinyl.
Halogen steht für Fluor, Chlor, Brom und Jod.halogen stands for Fluorine, chlorine, bromine and iodine.
Bevorzugt
im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind Verbindungen der Formel
(I), in welcher
R1 für (C1-C6)-Alkyl, (C3-C7)-Cycloalkyl,
5- bis 7-gliedriges Heterocyclyl, 5- bis 7-gliedriges Heteroaryl
oder Phenyl steht,
wobei Alkyl, Cycloalkyl, Heterocyclyl, Heteroaryl
und Phenyl substituiert sein können
mit 1 bis 3 Substituenten, wobei die Substituenten unabhängig voneinander
ausgewählt
werden aus der Gruppe, bestehend aus Halogen, Cyano, Hydroxy, Amino,
Nitro, Trifluormethyl, Trifluormethoxy, Hydroxycarbonyl, Aminocarbonyl, (C1-C6)-Alkyl, (C1-C6)-Alkoxy, (C1-C6)-Alkylamino, (C3-C7)-Cycloalkyl, Phenyl, 5- bis 7-gliedrigem
Heterocyclyl, 5- bis 7-gliedrigem
Heteroaryl, (C1-C6)-Alkylthio,
(C1-C6)-Alkylcarbonyl,
(C1-C6)-Alkylsulfonyl,
(C1-C6)-Alkylsulfoxyl,
(C1-C6)-Alkoxycarbonyl,
(C1-C6)-Alkylaminocarbonyl,
(C1-C6)-Alkylcarbonylamino,
(C1-C6)-Alkylsulfonylamino
und (C6-C10)-Arylsulfonylamino,
worin
Arylsulfonylamino seinerseits substituiert sein kann mit 1 bis 3
Substituenten, wobei die Substituenten unabhängig voneinander ausgewählt werden
aus der Gruppe, bestehend aus Halogen, Cyano, Hydroxy, Amino, Nitro,
Trifluormethyl, Trifluormethoxy, (C1-C6)-Alkyl und (C1-C6)-Alkoxy,
R2 für (C1-C6)-Alkyl, (C3-C7)-Cycloalkyl,
5- bis 7-gliedriges Heterocyclyl oder Benzyl steht,
wobei Alkyl,
Cycloalkyl, Heterocyclyl und Benzyl substituiert sein können mit
1 bis 3 Substituenten, wobei die Substituenten unabhängig voneinander
ausgewählt
werden aus der Gruppe, bestehend aus Halogen, Cyano, Hydroxy, Amino,
Nitro, Trifluormethyl, Trifluormethoxy, Hydroxycarbonyl, Aminocarbonyl,
(C1-C6)-Alkyl, (C1-C6)-Alkoxy, (C1-C6)-Alkylamino, (C1-C6)-Alkylthio,
(C1-C6)-Alkylcarbonyl,
(C1-C6)-Alkylsulfonyl,
(C1-C6)- Alkylsulfoxyl, (C1-C6)-Alkoxycarbonyl,
(C1-C6)-Alkylaminocarbonyl,
(C1-C6)-Alkylcarbonylamino,
5- bis 7-gliedrigem Heterocyclyl, gegebenenfalls Alkyl substituiertem
(C3-C7)-Cycloalkylaminocarbonyl
und gegebenenfalls Alkyl substituiertem 5- bis 7-gliedrigem Heterocyclylcarbonyl,
worin
Alkyl substituiert sein kann mit 1 bis 2 Substituenten, wobei die
Substituenten unabhängig
voneinander ausgewählt
werden aus der Gruppe, bestehend aus Hydroxy, Amino, (C1-C6)-Alkylamino, (C1-C6)-Alkylsulfoxyl und (C1-C6)-Alkoxycarbonyl,
R3 für
Cyclohexyl steht,
wobei Cyclohexyl substituiert sein kann mit
1 bis 2 Substituenten, wobei die Substituenten unabhängig voneinander
ausgewählt
werden aus der Gruppe, bestehend aus Hydroxy und (C1-C3)-Alkyl,
und ihre Salze, ihre Solvate
und die Solvate ihrer Salze.Preferred in the context of the present invention are compounds of the formula (I) in which
R 1 is (C 1 -C 6 ) -alkyl, (C 3 -C 7 ) -cycloalkyl, 5- to 7-membered heterocyclyl, 5- to 7-membered heteroaryl or phenyl,
wherein alkyl, cycloalkyl, heterocyclyl, heteroaryl and phenyl may be substituted with 1 to 3 substituents, the substituents being independently selected from the group consisting of halogen, cyano, hydroxy, amino, nitro, trifluoromethyl, trifluoromethoxy, hydroxycarbonyl, aminocarbonyl, (C 1 -C 6 ) -alkyl, (C 1 -C 6 ) -alkoxy, (C 1 -C 6 ) -alkylamino, (C 3 -C 7 ) -cycloalkyl, phenyl, 5- to 7-membered heterocyclyl, 5- to 7-membered heteroaryl, (C 1 -C 6 ) -alkylthio, (C 1 -C 6 ) -alkylcarbonyl, (C 1 -C 6 ) -alkylsulfonyl, (C 1 -C 6 ) -alkylsulfoxyl, (C 1 -C 6 ) -alkoxycarbonyl, (C 1 -C 6 ) -alkylaminocarbonyl, (C 1 -C 6 ) -alkylcarbonylamino, (C 1 -C 6 ) -alkylsulfonylamino and (C 6 -C 10 ) -arylsulfonylamino,
in which arylsulfonylamino may in turn be substituted by 1 to 3 substituents, where the substituents are independently selected from the group consisting of halogen, cyano, hydroxy, amino, nitro, trifluoromethyl, trifluoromethoxy, (C 1 -C 6 ) -alkyl and ( C 1 -C 6 ) -alkoxy,
R 2 is (C 1 -C 6 ) -alkyl, (C 3 -C 7 ) -cycloalkyl, 5- to 7-membered heterocyclyl or benzyl,
wherein alkyl, cycloalkyl, heterocyclyl and benzyl may be substituted with 1 to 3 substituents, wherein the substituents are independently selected from the group consisting of halogen, cyano, hydroxy, amino, nitro, trifluoromethyl, trifluoromethoxy, hydroxycarbonyl, aminocarbonyl, (C 1 -C 6) alkyl, (C 1 -C 6) alkoxy, (C 1 -C 6) alkylamino, (C 1 -C 6) alkylthio, (C 1 -C 6) alkylcarbonyl, (C 1 -C 6) alkylsulfonyl, (C 1 -C 6) - alkylsulfoxyl, (C 1 -C 6) -alkoxycarbonyl, (C 1 -C 6) alkylaminocarbonyl, (C 1 -C 6) alkylcarbonylamino, 5- to 7-membered heterocyclyl, optionally alkyl-substituted (C 3 -C 7 ) -cycloalkylaminocarbonyl and optionally alkyl-substituted 5- to 7-membered heterocyclylcarbonyl,
wherein alkyl may be substituted with 1 to 2 substituents wherein the substituents are independently selected from the group consisting of hydroxy, amino, (C 1 -C 6 ) alkylamino, (C 1 -C 6 ) alkylsulfoxyl and (C 1 -C 6 ) alkoxycarbonyl,
R 3 is cyclohexyl,
wherein cyclohexyl may be substituted with 1 to 2 substituents, wherein the substituents are independently selected from the group consisting of hydroxy and (C 1 -C 3 ) -alkyl,
and their salts, their solvates, and the solvates of their salts.
Bevorzugt
im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch Verbindungen der
Formel (I), in welcher
R1 für (C1-C6)-Alkyl oder
(C3-C6)-Cycloalkyl
steht,
wobei Alkyl und Cycloalkyl substituiert sein können mit
1 bis 2 Substituenten, wobei die Substituenten unabhängig voneinander
ausgewählt
werden aus der Gruppe, bestehend aus Hydroxy, Amino, (C1-C6)-Alkylamino, 5- bis 7-gliedrigem Heterocyclyl
und Phenylsulfonylamino,
worin Phenylsulfonylamino seinerseits
substituiert sein kann mit 1 bis 3 Substituenten, wobei die Substituenten unabhängig voneinander
ausgewählt
werden aus der Gruppe, bestehend aus Fluor, Chlor, Hydroxy, Amino, Trifluormethyl,
Trifluormethoxy, Methyl und Methoxy,
R2 für verzweigtes
(C3-C5)-Alkyl, Cyclobutyl,
Cyclopentyl, Cyclohexyl, Tetrahydrofuranyl, Pyrrolidinyl, Tetrahydro-2H-pyranyl,
Piperidinyl, Tetrahydro-2H-thiopyranyl, Oxidotetrahydro-2H-thiopyranyl
oder 1,1-Dioxidotetrahydro-2H-thiopyranyl steht,
wobei Alkyl
substituiert sein kann mit 1 bis 2 Substituenten, wobei die Substituenten
unabhängig
voneinander ausgewählt
werden aus der Gruppe, bestehend aus Amino, Methoxy, (C1-C6)-Alkylamino, Methylthio, Methylsulfonyl,
Methylsulfoxyl oder Methoxycarbonyl,
R3 für Cyclohexyl
steht,
wobei Cyclohexyl substituiert sein kann mit 1 bis 2
Substituenten, wobei die Substituenten unabhängig voneinander ausgewählt werden
aus der Gruppe, bestehend aus Hydroxy und (C1-C3)-Alkyl,
und ihre Salze, ihre Solvate
und die Solvate ihrer Salze.Also preferred in the context of the present invention are compounds of the formula (I) in which
R 1 is (C 1 -C 6 ) -alkyl or (C 3 -C 6 ) -cycloalkyl,
wherein alkyl and cycloalkyl may be substituted with 1 to 2 substituents, wherein the substituents are independently selected from the group consisting of hydroxy, amino, (C 1 -C 6 ) alkylamino, 5- to 7-membered heterocyclyl and phenylsulfonylamino,
wherein phenylsulfonylamino in turn may be substituted with 1 to 3 substituents, wherein the substituents are independently selected from the group consisting of fluoro, chloro, hydroxy, amino, trifluoromethyl, trifluoromethoxy, methyl and methoxy,
R 2 is branched (C 3 -C 5 ) -alkyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclohexyl, tetrahydrofuranyl, pyrrolidinyl, tetrahydro-2H-pyranyl, piperidinyl, tetrahydro-2H-thiopyranyl, oxidotetrahydro-2H-thiopyranyl or 1,1-dioxotetrahydro- 2H-thiopyranyl stands,
wherein alkyl may be substituted with 1 to 2 substituents, wherein the substituents are independently selected from the group consisting of amino, methoxy, (C 1 -C 6 ) -alkylamino, methylthio, methylsulfonyl, methylsulfoxyl or methoxycarbonyl,
R 3 is cyclohexyl,
wherein cyclohexyl may be substituted with 1 to 2 substituents, wherein the substituents are independently selected from the group consisting of hydroxy and (C 1 -C 3 ) -alkyl,
and their salts, their solvates, and the solvates of their salts.
Bevorzugt
im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch Verbindungen der
Formel (I), in welcher
R1 für Isopropyl,
tert.-Butyl, Cyclopropyl, Cyclopentyl oder Cyclohexyl steht,
wobei
Isopropyl, tert.-Butyl, Cyclopropyl, Cyclopentyl und Cyclohexyl
substituiert sein können
mit einem Substituenten, wobei der Substituent ausgewählt wird
aus der Gruppe, bestehend aus Hydroxy und Amino,
R2 für verzweigtes
(C3-C5)-Alkyl, Cyclobutyl,
Cyclopentyl, Cyclohexyl, Tetrahydro-2H-pyranyl, Piperidinyl, Tetrahydro-2H-thiopyranyl,
Oxidotetrahydro-2H-thiopyranyl oder 1,1-Dioxidotetrahydro-2H-thiopyranyl
steht,
wobei Alkyl substituiert sein kann mit 1 bis 2 Substituenten,
wobei die Substituenten unabhängig
voneinander ausgewählt
werden aus der Gruppe, bestehend aus Methoxy, Dimethylamino, Methylthio,
Methylsulfonyl, Methylsulfoxyl oder Methoxycarbonyl,
R3 für
Cyclohexyl steht,
wobei Cyclohexylsubstituiert sein kann mit
1 bis 2 Substituenten, wobei die Substituenten unabhängig voneinander
ausgewählt
werden aus der Gruppe, bestehend aus Hydroxy und Methyl,
und
ihre Salze, ihre Solvate und die Solvate ihrer Salze.Also preferred in the context of the present invention are compounds of the formula (I) in which
R 1 is isopropyl, tert-butyl, cyclopropyl, cyclopentyl or cyclohexyl,
wherein isopropyl, tert-butyl, cyclopropyl, cyclopentyl and cyclohexyl may be substituted with a substituent, wherein the substituent is selected from the group consisting of hydroxy and amino,
R 2 is branched (C 3 -C 5 ) alkyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclohexyl, tetrahydro-2H-pyranyl, piperidinyl, tetrahydro-2H-thiopyranyl, oxidotetrahydro-2H-thiopyranyl or 1,1-dioxotetrahydro-2H-thiopyranyl .
wherein alkyl may be substituted with 1 to 2 substituents, wherein the substituents are independently selected from the group consisting of methoxy, dimethylamino, methylthio, methylsulfonyl, methylsulfoxyl or methoxycarbonyl,
R 3 is cyclohexyl,
wherein cyclohexyl may be substituted with 1 to 2 substituents, wherein the substituents are independently selected from the group consisting of hydroxy and methyl,
and their salts, their solvates, and the solvates of their salts.
Bevorzugt
im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch Verbindungen der
Formel (I), in welcher
R1 für Isopropyl,
tert.-Butyl, Cyclopropyl, Cyclopentyl oder Cyclohexyl steht,
wobei
Isopropyl, Cyclopropyl, Cyclopentyl und Cyclohexyl substituiert
sein können
mit einem Substituenten, wobei der Substituent ausgewählt wird
aus der Gruppe, bestehend aus Hydroxy und Amino,
R2 für verzweigtes
(C3-C5)-Alkyl, Cyclobutyl,
Cyclopentyl, Cyclohexyl, Tetrahydro-2H-pyranyl, Piperidinyl, Tetrahydro-2H-thiopyranyl,
Oxidotetrahydro-2H-thiopyranyl oder 1,1-Dioxidotetrahydro-2H-thiopyranyl
steht,
wobei Alkyl substituiert sein kann mit 1 bis 2 Substituenten,
wobei die Substituenten unabhängig
voneinander ausgewählt
werden aus der Gruppe, bestehend aus Methoxy, Dimethylamino, Methylthio,
Methylsulfonyl, Methylsulfoxyl oder Methoxycarbonyl,
R3 für
Cyclohexyl steht,
wobei Cyclohexyl substituiert sein kann mit
1 bis 2 Substituenten, wobei die Substituenten unabhängig voneinander
ausgewählt
werden aus der Gruppe, bestehend aus Hydroxy und Methyl,
und
ihre Salze, ihre Solvate und die Solvate ihrer Salze.Also preferred in the context of the present invention are compounds of the formula (I) in which
R 1 is isopropyl, tert-butyl, cyclopropyl, cyclopentyl or cyclohexyl,
wherein isopropyl, cyclopropyl, cyclopentyl and cyclohexyl may be substituted with a substituent, wherein the substituent is selected from the group consisting of hydroxy and amino,
R 2 is branched (C 3 -C 5 ) alkyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclohexyl, tetrahydro-2H-pyranyl, piperidinyl, tetrahydro-2H-thiopyranyl, oxidotetrahydro-2H-thiopyranyl or 1,1-dioxotetrahydro-2H-thiopyranyl .
wherein alkyl may be substituted with 1 to 2 substituents, wherein the substituents are independently selected from the group consisting of methoxy, dimethylamino, methylthio, methylsulfonyl, methylsulfoxyl or methoxycarbonyl,
R 3 is cyclohexyl,
wherein cyclohexyl may be substituted with 1 to 2 substituents, wherein the substituents are independently selected from the group consisting of hydroxy and methyl,
and their salts, their solvates, and the solvates of their salts.
Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch Verbindungen der Formel (I), in welcher R1 für Isopropyl, tert.-Butyl, Cyclopropyl, Cyclopentyl oder Cyclohexyl steht.Also preferred in the context of the present invention are compounds of the formula (I) in which R 1 is isopropyl, tert-butyl, cyclopropyl, cyclopentyl or cyclohexyl.
Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch Verbindungen der Formel (I), in welcher R1 für (C3-C4)-Alkyl oder (C3-C6)-Cycloalkyl steht, wobei Alkyl und Cycloalkyl substituiert sein können mit einem Substituenten, wobei der Substituent ausgewählt wird aus der Gruppe, bestehend aus Hydroxy, Amino oder (C1-C6)-Alkylamino.Also preferred in the context of the present invention are compounds of the formula (I) in which R 1 is (C 3 -C 4 ) -alkyl or (C 3 -C 6 ) -cycloalkyl, where alkyl and cycloalkyl may be substituted by one Substituents, wherein the substituent is selected from the group consisting of hydroxy, amino or (C 1 -C 6 ) alkylamino.
Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch Verbindungen der Formel (I), in welcher R1 für 1-Hydroxy-1-methyl-eth-1-yl oder 1-Hydroxycyclopent-1-yl steht.Also preferred in the context of the present invention are compounds of the formula (I) in which R 1 is 1-hydroxy-1-methyleth-1-yl or 1-hydroxycyclopent-1-yl.
Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch Verbindungen der Formel (I), in welcher R1 für 2-Hydroxy-1,1-dimethyl-eth-1-yl steht.Also preferred in the context of the present invention are compounds of the formula (I) in which R 1 is 2-hydroxy-1,1-dimethyl-eth-1-yl.
Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch Verbindungen der Formel (I), in welcher R2 für (C3-C7)-Cycloalkyl steht.Also preferred in the context of the present invention are compounds of the formula (I) in which R 2 is (C 3 -C 7 ) -cycloalkyl.
Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch Verbindungen der Formel (I), in welcher R2 für Cyclobutyl, Cyclopentyl oder Cyclohexyl steht.Also preferred in the context of the present invention are compounds of the formula (I) in which R 2 is cyclobutyl, cyclopentyl or cyclohexyl.
Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch Verbindungen der Formel (I), in welcher R2 für (C1-C6)-Alkyl steht, wobei Alkyl substituiert sein kann mit 1 bis 3 Substituenten, wobei die Substituenten unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe, bestehend aus Hydroxy, Amino, Hydroxycarbonyl, Aminocarbonyl, (C1-C6)-Alkoxy, (C1-C6)-Alkylamino, (C1-C6)-Alkylthio, (C1-C6)-Alkoxycarbonyl, (C1-C6)-Alkylaminocarbonyl, (C1-C6)-Alkylsulfonyl, (C1-C6)-Alkylsulfoxyl und (C1-C6)-Alkylcarbonylamino.Also preferred in the context of the present invention are compounds of the formula (I) in which R 2 is (C 1 -C 6 ) -alkyl, where alkyl may be substituted by 1 to 3 substituents, where the substituents are selected independently of one another the group consisting of hydroxy, amino, hydroxycarbonyl, aminocarbonyl, (C 1 -C 6 ) -alkoxy, (C 1 -C 6 ) -alkylamino, (C 1 -C 6 ) -alkylthio, (C 1 -C 6 ) Alkoxycarbonyl, (C 1 -C 6 ) -alkylaminocarbonyl, (C 1 -C 6 ) -alkylsulfonyl, (C 1 -C 6 ) -alkylsulfoxyl and (C 1 -C 6 ) -alkylcarbonylamino.
Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch Verbindungen der Formel (I), in welcher R2 für (C3-C5)-Alkyl steht, wobei Alkyl substituiert sein kann mit 1 bis 2 Substituenten, wobei die Substituenten unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe, bestehend aus Methoxy, Dimethylamino, Methylthio, Methylsulfonyl, Methylsulfoxyl oder Methoxycarbonyl.Also preferred in the context of the present invention are compounds of the formula (I) in which R 2 is (C 3 -C 5 ) -alkyl, where alkyl may be substituted by 1 to 2 substituents, where the substituents are selected independently of one another the group consisting of methoxy, dimethylamino, methylthio, methylsulfonyl, methylsulfoxyl or methoxycarbonyl.
Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch Verbindungen der Formel (I), in welcher R2 für ein über ein sekundäres Kohlenstoffatom an den Stickstoff gebundenes (C3-C5)-Alkyl steht, wobei Alkyl substituiert sein kann mit 1 bis 2 Substituenten, wobei die Substituenten unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe, bestehend aus Methoxy, Dimethylamino, Methylthio, Methylsulfonyl, Methylsulfoxyl oder Methoxycarbonyl.Also preferred in the context of the present invention are compounds of the formula (I) in which R 2 is a (C 3 -C 5 ) -alkyl bonded to the nitrogen via a secondary carbon atom, where alkyl may be substituted by 1 to 2 substituents wherein the substituents are independently selected from the group consisting of methoxy, dimethylamino, methylthio, methylsulfonyl, methylsulfoxyl or methoxycarbonyl.
Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch Verbindungen der Formel (I), in welcher R2 für 1-Dimethylaminopropan-2-yl, 1-Methoxypropan-2-yl, 1-Methylsulfonylpropan-2-yl oder 1-Methylsulfoxylpropan-2-yl steht.Also preferred in the context of the present invention are compounds of the formula (I) in which R 2 is 1-dimethylaminopropan-2-yl, 1-methoxypropan-2-yl, 1-methylsulfonylpropan-2-yl or 1-methylsulfoxylpropan-2 yl stands.
Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch Verbindungen der Formel (I), in welcher R2 für Isopropyl steht.Preferred in the context of the present invention are also compounds of the formula (I) in which R 2 is isopropyl.
Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch Verbindungen der Formel (I), in welcher R2 für 5- bis 7-gliedriges Heterocyclyl steht.Also preferred in the context of the present invention are compounds of the formula (I) in which R 2 is 5- to 7-membered heterocyclyl.
Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch Verbindungen der Formel (I), in welcher R2 für Tetrahydrofuranyl, Pyrrolidinyl, Tetrahydro-2H-pyranyl, Piperidinyl, Tetrahydro-2H-thiopyranyl, Oxidotetrahydro-2H-thiopyranyl oder 1,1-Dioxidotetrahydro-2H-thiopyranyl steht.Also preferred in the context of the present invention are compounds of the formula (I) in which R 2 is tetrahydrofuranyl, pyrrolidinyl, tetrahydro-2H-pyranyl, piperidinyl, tetrahydro-2H-thiopyranyl, oxidotetrahydro-2H-thiopyranyl or 1,1-dioxotetrahydro- 2H-thiopyranyl stands.
Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch Verbindungen der Formel (I), in welcher R2 für Tetrahydrofuranyl oder Tetrahydro-2H-pyranyl steht.Also preferred in the context of the present invention are compounds of the formula (I) in which R 2 is tetrahydrofuranyl or tetrahydro-2H-pyranyl.
Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch Verbindungen der Formel (I), in welcher R3 für Cyclohexyl steht, wobei Cyclohexyl substituiert sein kann mit 1 bis 2 Sub stituenten, wobei die Substituenten unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe, bestehend aus Hydroxy und Methyl.Preferred in the context of the present invention are also compounds of the formula (I) in which R 3 is cyclohexyl, where cyclohexyl may be substituted by 1 to 2 substituents, wherein the substituents are independently selected from the group consisting of hydroxy and Methyl.
Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch Verbindungen der Formel (I), in welcher R3 für trans-4-Methylcyclohexyl steht.Also preferred in the context of the present invention are compounds of the formula (I) in which R 3 is trans-4-methylcyclohexyl.
Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch Verbindungen der Formel (I), in welcher R3 für trans-4-Methylcyclohexyl steht, welches in 2-Position mit einer Hydroxy-Gruppe substituiert ist.Also preferred in the context of the present invention are compounds of the formula (I) in which R 3 is trans-4-methylcyclohexyl which is substituted in the 2-position by a hydroxyl group.
Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch Verbindungen der Formel (I), in welcher R3 für trans-4-Methylcyclohexyl steht, welches in 2-Position mit einer Hydroxy-Gruppe substituiert ist und diese Hydroxy-Gruppe und die Carbonyl-Gruppe in cis-Position zueinander stehen.Also preferred in the context of the present invention are compounds of the formula (I) in which R 3 is trans-4-methylcyclohexyl which is substituted in the 2-position by a hydroxyl group and this hydroxyl group and the carbonyl group in cis position to each other.
Gegenstand
der Erfindung ist weiterhin ein Verfahren zur Herstellung der Verbindungen
der Formel (I), wobei Verbindungen der Formel in welcher
R1, R2 und R3 die oben angegebene Bedeutung haben, und
R9 für
Alkyl, bevorzugt Methyl, Ethyl oder tert.-Butyl, steht,
mit
Basen oder Säuren
umgesetzt werden.The invention further provides a process for the preparation of the compounds of the formula (I), where compounds of the formula in which
R 1 , R 2 and R 3 have the abovementioned meaning, and
R 9 is alkyl, preferably methyl, ethyl or tert-butyl,
be reacted with bases or acids.
Im Falle, das R9 Methyl oder Ethyl ist, erfolgt die Umsetzung im Allgemeinen mit einer Base in inerten Lösungsmitteln, bevorzugt in einem Temperaturbereich von Raumtemperatur bis zum Rückfluss der Lösungsmittel bei Normaldruck.In the case where R 9 is methyl or ethyl, the reaction is generally carried out with a base in inert solvents, preferably in a temperature range from room temperature to reflux of the solvents under normal pressure.
Basen sind beispielsweise Alkalihydroxide wie Natrium-, Lithium- oder Kaliumhydroxid, oder Alkalicarbonate wie Cäsiumcarbonat, Natrium- oder Kaliumcarbonat, gegebenenfalls in wässriger Lösung, bevorzugt ist Lithiumhydroxid in Wasser.bases For example, alkali hydroxides such as sodium, lithium or Potassium hydroxide, or alkali metal carbonates such as cesium carbonate, sodium or Potassium carbonate, optionally in aqueous solution, is preferably lithium hydroxide in water.
Inerte Lösungsmittel sind beispielsweise Ether wie 1,2-Dimethoxyethan, Dioxan, Tetrahydrofuran, Glykoldimethylether oder Diethylenglykoldimethylether, oder Alkohole wie Methanol, Ethanol, n-Propanol, iso-Propanol, n-Butanol oder tert.-Butanol, oder Gemischen von Lösungsmitteln, bevorzugt ist Dioxan oder Tetrahydrofuran.inert solvent are, for example, ethers, such as 1,2-dimethoxyethane, dioxane, tetrahydrofuran, Glycol dimethyl ether or diethylene glycol dimethyl ether, or alcohols such as methanol, ethanol, n-propanol, iso-propanol, n-butanol or tert-butanol, or mixtures of solvents, preferred is dioxane or tetrahydrofuran.
Im Falle, das R9 tert.-Butyl ist, erfolgt die Umsetzung im Allgemeinen mit einer Säure in inerten Lösungsmitteln, bevorzugt in einem Temperaturbereich von Raumtemperatur bis zum Rückfluss der Lösungsmittel bei Normaldruck.In the case that R 9 is tert-butyl, the reaction is generally carried out with an acid in inert solvents, preferably in a temperature range from room temperature to the reflux of the solvent at atmospheric pressure.
Bevorzugt ist die Umsetzung mit Trifluoressigsäure in Methylenchlorid, mit Chlorwasserstoff in Dioxan oder mit Salzsäure in Dioxan.Prefers is the reaction with trifluoroacetic acid in methylene chloride, with Hydrogen chloride in dioxane or with hydrochloric acid in dioxane.
Sollte der Reste R3 funktionelle Gruppen wie beispielsweise Hydroxy oder Amino enthalten, so sind diese Gruppen mit geeigneten, literaturbekannten Schutzgruppen wie beispielsweise Acetyl, Benzyl, Benzyloxycarbonyl oder tert-Butyloxycarbonyl versehen, die nach der Reaktion zu Verbindungen der Formel (I) abgespalten werden (Lit: P.J. Kocienski: „Protecting Groups", Georg Thieme Verlag, Stuttgart, New York, 1994, ISBN 3-13-135601-4).If the radicals R 3 contain functional groups such as, for example, hydroxyl or amino, these groups are provided with suitable protective groups known from the literature, for example acetyl, benzyl, benzyloxycarbonyl or tert-butyloxycarbonyl, which are cleaved off after the reaction to give compounds of the formula (I) ( Lit: PJ Kocienski: Protecting Groups, Georg Thieme Verlag, Stuttgart, New York, 1994, ISBN 3-13-135601-4).
Die
Verbindungen der Formel (II) sind bekannt oder können hergestellt werden, indem
Verbindungen der Formel in welcher
R2, R3 und R9 die oben angegebene Bedeutung haben,
mit
Verbindungen der Formel in welcher
R1 die oben angegebene Bedeutung hat,
umgesetzt
werden.The compounds of the formula (II) are known or can be prepared by reacting compounds of the formula in which
R 2 , R 3 and R 9 have the abovementioned meaning,
with compounds of the formula in which
R 1 has the meaning given above,
be implemented.
Die Umsetzung erfolgt im Allgemeinen unter Sonogashira-Reaktionsbedingungen unter Argon in inerten und entgasten Lösungsmitteln, in Gegenwart eines Katalysators, gegebenenfalls in Gegenwart eines Zusatzreagenzes, in Anwesenheit einer Base und Triphenylphosphin, bevorzugt in einem Temperaturbereich von Raumtemperatur bis zum Rückfluss des Lösungsmittels bei Normaldruck (R.R. Tykwinski, Angew. Chem. Int. Ed. 2003, 42, 1566-1568, K. Sonogashira in Handbook of organopailadium chemistry for organic synthesis (Ed. E.-I. Negishi), 1133-1178 Wiley-Interscience, New-York (2002)).The Reaction is generally carried out under Sonogashira reaction conditions under argon in inert and degassed solvents, in the presence a catalyst, optionally in the presence of an additional reagent, in the presence of a base and triphenylphosphine, preferably in one Temperature range from room temperature to the reflux of the solvent at normal pressure (R. R. Tykwinski, Angew Chem, Int Ed 2003, 42, 1566-1568, K. Sonogashira in Handbook of organopailadium chemistry for organic synthesis (Ed E.I. Negishi), 1133-1178 Wiley-Interscience, New York (2002)).
Katalysatoren sind beispielsweise für Sonogashira-Reaktionsbedingungen übliche Palladium-Katalysatoren, bevorzugt sind Katalysatoren wie z.B. Tri(dibenzylidenaceton)dipalladium, Dichlorbis(triphenylphosphin)-palladium, Tetrakistriphenylphosphinpalladium(0), Palladium(II)-acetat, 1,1'-Bis[(diphenylphosphino)-ferrocen]palladium-II-chlorid (1:1)-Komplex mit Dichlormethan.catalysts are for example Sonogashira reaction conditions conventional palladium catalysts, preferred For example, catalysts such as e.g. Tri (dibenzylideneacetone) dipalladium, Dichlorobis (triphenylphosphine) palladium, tetrakistriphenylphosphine palladium (0), Palladium (II) acetate, 1,1'-bis [(diphenylphosphino) ferrocene] palladium II chloride (1: 1) complex with dichloromethane.
Zusatzreagenzien sind beispielsweise Kupfer-(I)-iodid und Triphenylphosphin.additional reagents are, for example, copper (I) iodide and triphenylphosphine.
Basen sind beispielsweise Aminbasen wie Triethylamin.bases For example, amine bases such as triethylamine.
Inerte Lösungsmittel sind beispielsweise Ether wie Dioxan, Tetrahydrofuran oder 1,2-Dimethoxyethan, Kohlenwasserstoffe wie Benzol, Xylol oder Toluol, oder andere Lösemittel wie Nitrobenzol, Dimethylformamid, Dimethylacetamid, Dimethylsulfoxid oder N-Methylpyrrolidon, bevorzugt sind Lösungsmittel wie z.B. Dimethylformamid, Dimethylacetamid, Dimethylsulfoxid oder 1,2-Dimethoxyethan.inert solvent For example, ethers such as dioxane, tetrahydrofuran or 1,2-dimethoxyethane, hydrocarbons such as benzene, xylene or toluene, or other solvents such as nitrobenzene, dimethylformamide, dimethylacetamide, Dimethylsulfoxide or N-methylpyrrolidone, preferred are solvents such as. Dimethylformamide, dimethylacetamide, dimethyl sulfoxide or 1,2-dimethoxyethane.
Die Verbindungen der Formel (IV) sind bekannt oder lassen sich nach bekannten Verfahren aus den entsprechenden Edukten synthetisieren.The Compounds of formula (IV) are known or can be after synthesize known methods from the corresponding starting materials.
Die
Verbindungen der Formel (III) sind bekannt oder können hergestellt
werden, indem Verbindungen der Formel in welcher
R2, R3 und R9 die oben angegebene Bedeutung haben,
mit
N-Bromsuccinimid in Halogenkohlenwaserstoffen wie Dichlormethan,
Chloroform oder Tetrachlorkohlenstoff sowie deren Gemischen umgesetzt
werden, bevorzugt ist eine Mischung aus Chloroform und Tetrachlorkohlenstoff.The compounds of the formula (III) are known or can be prepared by reacting compounds of the formula in which
R 2 , R 3 and R 9 have the abovementioned meaning,
are reacted with N-bromosuccinimide in halocarbon such as dichloromethane, chloroform or carbon tetrachloride and mixtures thereof, preferred is a mixture of chloroform and carbon tetrachloride.
Die
Verbindungen der Formel (V) sind bekannt oder können hergestellt werden, indem
Verbindungen der Formel in welcher
R2 und R9 die oben
angegebene Bedeutung haben,
mit Verbindungen der Formel in welcher
R3 die oben angegebene Bedeutung hat, und
X1 für
Halogen, bevorzugt Chlor oder Brom, steht,
umgesetzt werden.The compounds of the formula (V) are known or can be prepared by reacting compounds of the formula in which
R 2 and R 9 have the abovementioned meaning,
with compounds of the formula in which
R 3 has the meaning given above, and
X 1 is halogen, preferably chlorine or bromine,
be implemented.
Die Umsetzung erfolgt in inerten Lösungsmitteln oder ohne Lösungsmittel mit dem Acylierungsreagenz, gegebenenfalls in Gegenwart einer Base, bevorzugt in einem Temperaturbereich von 0°C bis 120°C bei Normaldruck.The Reaction is carried out in inert solvents or without solvents with the acylating reagent, if appropriate in the presence of a base, preferably in a temperature range from 0 ° C to 120 ° C at atmospheric pressure.
Inerte Lösungsmittel sind beispielsweise Halogenkohlenwasserstoffe wie Methylenchlorid, Trichlormethan, Tetrachlormethan, Trichlorethan, Tetrachlorethan, 1,2-Dichlorethan oder Trichlorethylen, Ether wie Diethylether, Methyl-tert.-butylether, Dioxan, Tetrahydrofuran, 1,2-Dimethoxyethan, Glykoldimethylether oder Diethylenglykoldimethylether, Kohlenwasserstoffe wie Benzol, Xylol, Toluol, Hexan, Cyclohexan oder Erdölfraktionen, oder Carbonsäureamide wie N,N- Dimethylformamid oder N,N-Dimethylacetamid, Alkylnitrile wie Acetonitril, oder Heteroaromaten wie Pyridin, oder Essigsäureethylester, bevorzugt ist Pyridin oder Acetonitril.inert solvent are, for example, halogenated hydrocarbons, such as methylene chloride, Trichloromethane, tetrachloromethane, trichloroethane, tetrachloroethane, 1,2-dichloroethane or trichlorethylene, ethers, such as diethyl ether, methyl tert-butyl ether, Dioxane, tetrahydrofuran, 1,2-dimethoxyethane, glycol dimethyl ether or diethylene glycol dimethyl ether, hydrocarbons such as benzene, Xylene, toluene, hexane, cyclohexane or petroleum fractions, or carboxylic acid amides such as N, N-dimethylformamide or N, N-dimethylacetamide, alkylnitriles such as acetonitrile, or heteroaromatics such as pyridine, or ethyl acetate, preferred is pyridine or acetonitrile.
Basen sind beispielsweise Alkalicarbonate wie Cäsiumcarbonat, Natrium- oder Kaliumcarbonat, Alkaliacetate wie Natriumacetat oder andere Basen wie Triethylamin, Diisopropylethylamin oder Pyridin, bevorzugt Diisopropylethylamin, Triethylamin oder Pyridin.bases For example, alkali metal carbonates such as cesium carbonate, sodium or Potassium carbonate, alkali acetates such as sodium acetate or other bases such as triethylamine, diisopropylethylamine or pyridine, preferably diisopropylethylamine, Triethylamine or pyridine.
Die Verbindungen der Formel (VII) sind bekannt oder lassen sich nach bekannten Verfahren aus den entsprechenden Edukten synthetisieren.The Compounds of formula (VII) are known or can be after synthesize known methods from the corresponding starting materials.
Die
Verbindungen der Formel (VI) sind bekannt oder können hergestellt werden, indem
Verbindungen der Formel in welcher
R9 die oben angegebene Bedeutung hat,
mit
Aldehyden, Ketonen, Orthoestern oder Enolethern, die den Rest R2 beinhalten,
unter den Bedingungen
einer reduktiven Aminierung umgesetzt werden.The compounds of the formula (VI) are known or can be prepared by reacting compounds of the formula in which
R 9 has the meaning given above,
with aldehydes, ketones, orthoesters or enol ethers containing the radical R 2 ,
be reacted under the conditions of a reductive amination.
Die Umsetzung erfolgt im Allgemeinen in inerten Lösungsmitteln, in Gegenwart eines Reduktionsmittels und Essigsäure, bevorzugt in einem Temperaturbereich von Raumtemperatur bis zum Rückfluss des Lösungsmittels bei Normaldruck.The Reaction is generally carried out in inert solvents, in the presence a reducing agent and acetic acid, preferably in a temperature range from room temperature to reflux of the solvent at normal pressure.
Inerte Lösungsmittel sind beispielsweise Halogenkohlenwasserstoffe wie Methylenchlorid oder 1,2-Dichlorethan, Ether wie Dioxan oder Tetrahydrofuran, Alkohole wie Methanol oder Ethanol, oder N,N-Dimethylformamid, bevorzugt sind Methylenchlorid oder 1,2-Dichlorethan. inert solvent For example, halogenated hydrocarbons such as methylene chloride or 1,2-dichloroethane, ethers, such as dioxane or tetrahydrofuran, alcohols such as methanol or ethanol, or N, N-dimethylformamide are methylene chloride or 1,2-dichloroethane.
Reduktionsmittel sind beispielsweise Natriumborhydrid, Natriumcyanoborhydrid, Natriumtrisacetoxyborhydrid oder Tetrabutylammoniumborhydrid, bevorzugt ist Natriumtrisacetoxyborhydrid.reducing agent For example, sodium borohydride, sodium cyanoborohydride, sodium trisacetoxyborohydride or tetrabutylammonium borohydride, preferred is sodium trisacetoxyborohydride.
Die Umsetzung erfolgt gegebenfalls in Gegenwart von Lewissäuren wie beispielsweise Titantetrachlorid (analog zu J.F. Parlow, M.S. South, Tetrahedron 2003, 59, 7695-7701).The If appropriate, reaction takes place in the presence of Lewis acids such as For example, titanium tetrachloride (analogous to J.F. Parlow, M. S. South, Tetrahedron 2003, 59, 7695-7701).
Die Verbindungen der Formel (VIII) sind bekannt oder lassen sich nach bekannten Verfahren aus den entsprechenden Edukten synthetisieren, z.B. mittels Gewald-Synthese (K. Gewald et al., Chem. Ber. 1966, 94-100).The Compounds of formula (VIII) are known or can be after synthesize known processes from the corresponding starting materials, e.g. by Gewald synthesis (K. Gewald et al., Chem. Ber. 1966, 94-100).
Aldehyde, Ketone, Orthoester und Enolether, die den Rest R2 beinhalten, sind bekannt oder lassen sich nach bekannten Verfahren aus den entsprechenden Edukten synthetisieren.Aldehydes, ketones, orthoesters and enol ethers containing the radical R 2 are known or are allowed be synthesized by known methods from the corresponding starting materials.
In
einem alternativen Verfahren können
die Verbindungen der Formel (V) hergestellt werden, indem Verbindungen
der Formel in welcher
R3 und R9 die oben
angegebene Bedeutung haben,
mit Verbindungen der Formel
R2 die oben angegebene Bedeutung hat, und
X2 für
Halogen, bevorzugt Iod oder Brom, oder Sulfonsäureester steht,
umgesetzt
werden.In an alternative method, the compounds of formula (V) can be prepared by reacting compounds of formula in which
R 3 and R 9 have the abovementioned meaning,
with compounds of the formula
R 2 has the meaning given above, and
X 2 is halogen, preferably iodine or bromine, or sulfonic acid ester,
be implemented.
Die Umsetzung erfolgt im Allgemeinen in inerten Lösungsmitteln, in Gegenwart einer Base, bevorzugt in einem Temperaturbereich von Raumtemperatur bis zum Rückfluss des Lösungsmittels bei Normaldruck.The Reaction is generally carried out in inert solvents, in the presence a base, preferably in a temperature range of room temperature until the reflux of the solvent at normal pressure.
Basen sind beispielsweise Alkalicarbonate wie Cäsiumcarbonat, Natrium- oder Kaliumcarbonat, oder Natrium- oder Kaliummethanolat, oder Natrium- oder Kaliumethanolat oder Kalium-tert.-butylat, oder Amide wie Natriumamid, Lithium-bis-(trimethylsilyl)amid oder Lithiumdiisopropylamid, oder metallorganische Verbindungen wie Butyllithium oder Phenyllithium, oder andere Basen wie Natriumhydrid, DBU, bevorzugt Kalium-tert.-butylat, Cäsiumcarbonat, DBU, Natriumhydrid, Kaliumcarbonat oder Natriumcarbonat.bases For example, alkali metal carbonates such as cesium carbonate, sodium or Potassium carbonate, or sodium or potassium methoxide, or sodium or potassium ethoxide or potassium tert-butoxide, or amides such as sodium amide, Lithium bis (trimethylsilyl) amide or lithium diisopropylamide, or organometallic compounds such as butyllithium or phenyllithium, or other bases such as sodium hydride, DBU, preferably potassium tert-butoxide, cesium carbonate, DBU, sodium hydride, potassium carbonate or sodium carbonate.
Inerte Lösungsmittel sind beispielsweise Halogenkohlenwasserstoffe wie Methylenchlorid, Trichlormethan oder 1,2-Dichlorethan, Ether wie Dioxan, Tetrahydrofuran oder 1,2-Dimethoxyethan, oder andere Lösemittel wie Aceton, Dimethylformamid, Dimethylacetamid, 2-Butanon oder Acetonitril, bevorzugt Tetrahydrofuran, Methylenchlorid, Aceton, 2-Butanon, Acetonitril, Dimethylformamid oder 1,2-Dimethoxyethan.inert solvent are, for example, halogenated hydrocarbons, such as methylene chloride, Trichloromethane or 1,2-dichloroethane, ethers, such as dioxane, tetrahydrofuran or 1,2-dimethoxyethane, or other solvents such as acetone, dimethylformamide, Dimethylacetamide, 2-butanone or acetonitrile, preferably tetrahydrofuran, Methylene chloride, acetone, 2-butanone, acetonitrile, dimethylformamide or 1,2-dimethoxyethane.
Die Verbindungen der Formel (X) sind bekannt oder lassen sich nach bekannten Verfahren aus den entsprechenden Edukten synthetisieren.The Compounds of the formula (X) are known or can be prepared by known processes Synthesize process from the corresponding starting materials.
Die Verbindungen der Formel (IX) sind bekannt oder können hergestellt werden, indem Verbindungen der Formel (VIII) mit Verbindungen der Formel (VII) unter den für die Umsetzung von Verbindungen der Formel (VI) mit Verbindungen der Formel (VII) angegebenen Reaktionsbedingungen umgesetzt werden.The Compounds of formula (IX) are known or can be prepared by: Compounds of the formula (VIII) with compounds of the formula (VII) under the for the reaction of compounds of the formula (VI) with compounds of the formula (VII) reaction conditions are reacted.
Die Herstellung der erfindungsgemäßen Verbindungen kann durch folgendes Syntheseschema verdeutlicht werden.The Preparation of the compounds of the invention can be illustrated by the following synthesis scheme.
Syntheseschema: Synthesis scheme:
Die erfindungsgemäßen Verbindungen zeigen ein nicht vorhersehbares, wertvolles Wirkspektrum. Sie zeigen antivirale Wirkung gegenüber Vertretern der Familie der Flaviviridae, vor allem gegenüber Hepatitis C-Virus.The Compounds of the invention show an unpredictable, valuable spectrum of action. they show antiviral effect Representatives of the family Flaviviridae, especially against hepatitis C virus.
Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist der Einsatz der erfindungsgemäßen Verbindungen zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Krankheiten, vor allem von Infektionen mit Viren, insbesondere den vorstehend genannten Viren, und den dadurch hervorgerufenen Infektionskrankheiten. Unter einer Virusinfektion wird nachfolgend sowohl eine Infektion mit einem Virus als auch eine durch eine Infektion mit einem Virus hervorgerufene Krankheit verstanden.Another The present invention is the use of the compounds of the invention for the treatment and / or prophylaxis of diseases, especially of Infections with viruses, in particular the viruses mentioned above, and the infectious diseases caused thereby. Under one Viral infection will subsequently both an infection with a Virus as well as one caused by an infection with a virus Illness understood.
Als Indikationsgebiete können beispielsweise genannt werden:
- 1. Behandlung von akuten und chronischen Hepatitis C-Infektionen und die Vermeidung, Linderung oder Eliminierung der Begleiterscheinungen und Folgeschäden wie beispielsweise Leberfibrose, Leberzirrhose, Leberkrebs (hepatozelluläres Karzinom) und/oder die Verminderung der Anzahl der viralen Genomkopien in einem Patienten;
- 2. Behandlung und Prophylaxe bei Organtransplantationspatienten, insbesondere bei einer Hepatitis C-Infektion des Organspenders oder Organempfängers;
- 3. Behandlung von HCV-Infektionen bei AIDS-Patienten und Patienten, welche mit HIV (humanes Immunodefizienz-Virus) infiziert sind (eine Co-Infektion von HIV mit Hepatitis C führt zu einer raschen Verschlechterung des Krankheitsbildes);
- 4. Behandlung von HCV-Infektionen bei Patienten, welche mit HBV (Hepatitis B-Virus) oder anderen hepatotrophen Viren (beispielsweise Hepatitis A-Virus, Hepatitis G-Virus) infiziert sind;
- 5. Behandlung von Erkrankungen mit Viren, welche mit HCV verwandt sind, wie z.B. Gelbfieber-Virus, Dengue-Virus, West Nil-Virus, Frühsommermeningoenzephalitis-Virus, Japanisches Enzephalitis-Virus;
- 6. Behandlung von Säugetieren mit verwandten animalen Viren wie beispielsweise Pestiviren;
- 7. Behandlung von Materialien oder biologischen Agentien, um eine Übertragung von Hepatitis C zu vermeiden oder eine solche Gefahr zu verringern (z.B. bei Blut und Blutprodukten, Blutspende-Utensilien oder chirurgischen Instrumenten).
- 1. Treatment of acute and chronic hepatitis C infections and prevention, alleviation or elimination of concomitant and sequelae such as liver fibrosis, cirrhosis of the liver, liver cancer (hepatocellular carcinoma) and / or reduction of the number of viral genome copies in a patient;
- 2. Treatment and prophylaxis in organ transplant patients, in particular in hepatitis C infection of the organ donor or organ recipient;
- 3. Treatment of HCV infections in AIDS patients and patients who are infected with HIV (human immunodeficiency virus) (a co-infection of HIV with hepatitis C leads to a rapid deterioration of the clinical picture);
- 4. treatment of HCV infections in patients infected with HBV (hepatitis B virus) or other hepatotrophic viruses (for example hepatitis A virus, hepatitis G virus);
- 5. Treatment of diseases with HCV-related viruses, such as yellow fever virus, dengue virus, West Nile virus, early-summer meningoencephalitis virus, Japanese encephalitis virus;
- 6. Treatment of mammals with related animal viruses, such as pestiviruses;
- 7. Treatment of materials or biological agents to prevent or reduce the transmission of hepatitis C (eg blood and blood products, blood donation items or surgical instruments).
Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist die Verwendung der erfindungsgemäßen Verbindungen zur Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Erkrankungen, insbesondere der zuvor genannten Erkrankungen.Another object of the present invention is the use of the compounds of the invention for the manufacture of a medicament for the treatment and / or prophylaxis of diseases, esp especially the aforementioned diseases.
Bevorzugt werden die erfindungsgemäßen Verbindungen zur Herstellung von Arzneimitteln verwendet, die zur Prophylaxe und/oder Behandlung von Infektionen mit Hepatitis C-Virus oder anderen Mitgliedern der Familie der Flaviviridae geeignet sind.Prefers be the compounds of the invention used for the preparation of medicines for prophylaxis and / or treatment of infections with hepatitis C virus or others Members of the family Flaviviridae are suitable.
Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist die Verwendung der erfindungsgemäßen Verbindungen allein oder in Kombination mit anderen Wirkstoffen zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Erkrankungen, insbesondere der zuvor genannten Erkrankungen.Another The present invention is the use of the compounds of the invention alone or in combination with other agents for treatment and / or prophylaxis of diseases, in particular those mentioned above Diseases.
Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung sind Arzneimittel, die mindestens eine erfindungsgemäße Verbindung, vorzugsweise zusammen mit Interferon (pegyliert oder nicht-pegyliert) oder mit Ribavirin oder mit einem oder mehreren anti-HCV-Agentien oder mit einer Kombination hiervon, enthalten, sowie deren Verwendung zu den zuvor genannten Zwecken.Another The present invention relates to medicaments which are at least a compound of the invention, preferably together with interferon (pegylated or non-pegylated) or with ribavirin or with one or more anti-HCV agents or with a combination thereof, as well as their use for the purposes mentioned above.
Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist ein Verfahren zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Erkrankungen, insbesondere der zuvor genannten Erkrankungen, unter Verwendung einer antiviral wirksamen Menge der erfindungsgemäßen Verbindungen.Another The subject of the present invention is a method of treatment and / or prophylaxis of diseases, in particular those mentioned above Diseases using an antivirally effective amount of Compounds of the invention.
Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist ein Verfahren zur Behandlung einer HCV-Infektion durch Gabe einer wirksamen Menge von mindestens einer der erfindungsgemäßen Verbindungen, eines pharmakologisch unbedenklichen Salzes, Solvates oder Solvates eines Salzes davon oder eines wie oben beschriebenen Arzneimittels, allein oder zusammen mit Interferon (pegyliert oder nicht-pegyliert) oder mit Immunmodulatoren (beispielsweise Ribavirin oder Viramidin) oder mit einem oder mehreren anti-HCV-Agentien oder mit einer Kombination hiervon, die zusammen oder getrennt verabreicht werden können.Another The subject of the present invention is a method of treatment a HCV infection by administering an effective amount of at least one of the compounds according to the invention, a pharmacologically acceptable salt, solvate or solvate a salt thereof or a drug as described above, alone or together with interferon (pegylated or non-pegylated) or with immunomodulators (for example ribavirin or viramidine) or with one or more anti-HCV agents or with a combination hereof, which can be administered together or separately.
Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist ein Verfahren zur Prophylaxe einer HCV-Infektion durch Gabe einer wirksamen Menge von mindestens einer der erfindungsgemäßen Verbindungen, eines pharmakologisch unbedenklichen Salzes, Solvates oder Solvates eines Salzes davon oder eines wie oben beschriebenen Arzneimittels, allein oder zusammen mit Interferon (pegyliert oder nicht-pegyliert) oder mit Immunmodulatoren (beispielsweise Ribavirin oder Viramidin) oder mit einem oder mehreren anti-HCV-Agentien oder mit einer Kombination hiervon, die zusammen oder getrennt verabreicht werden können.Another The present invention is a method for prophylaxis a HCV infection by Administration of an effective amount of at least one of the compounds according to the invention, a pharmacologically acceptable salt, solvate or solvate a salt thereof or a drug as described above, alone or together with interferon (pegylated or non-pegylated) or with immunomodulators (for example ribavirin or viramidine) or with one or more anti-HCV agents or with a combination hereof, which can be administered together or separately.
Arzneimittel der vorliegenden Erfindung können eines oder mehrere zusätzliche aktive Agentien enthalten, vorzugsweise ausgewählt aus der Gruppe antivirale Agentien, immunomodulatorische Agentien, HCV Protease-Inhibitoren, HCV Polymerase-Inhibitoren, Inhibitoren eines anderen Targets im HCV-Lebenszyklus, HIV-Inhibitoren, HAV-Inhibitoren und HBV-Inhibitoren. Beispiele solcher Agentien sind nachstehend aufgeführt und erläutert.drug of the present invention one or more additional ones containing active agents, preferably selected from the group antiviral Agents, immunomodulatory agents, HCV protease inhibitors, HCV polymerase inhibitors, inhibitors of another target in the HCV life cycle, HIV inhibitors, HAV inhibitors and HBV inhibitors. Examples of such agents are listed below and explained.
Bevorzugte Beispiele einiger dieser Agentien sind Ribavirin und Amantadin (antivirale Agentien), Klasse I-Interferone, Klasse II-Interferone und pegylierte Interferone (immunomodulatorische Agentien), Inhibitoren von HCV NS5B-Polymerase, HCV NS3-Helicase, HCV Protease oder IRES (Inhibitoren eines anderen Targets im HCV-Lebenszyklus), nukleosidische Inhibitoren, nicht-nukleosidische Inhibitoren, Protease-Inhibitoren, Fusions-Inhibitoren und Integrase-Inhibitoren von HIV (HIV-Inhibitoren) oder Agentien, die die HBV DNA-Polymerase inhibieren, oder Hepatitis B-Impfstoffe (HBV-Inhibitoren).preferred Examples of some of these agents are ribavirin and amantadine (antiviral Agents), class I interferons, class II interferons and pegylated Interferons (immunomodulatory agents), inhibitors of HCV NS5B polymerase, HCV NS3 helicase, HCV protease or IRES (inhibitors another target in the HCV life cycle), nucleoside inhibitors, non-nucleoside Inhibitors, protease inhibitors, fusion inhibitors and integrase inhibitors of HIV (HIV inhibitors) or agents containing the HBV DNA polymerase inhibit, or hepatitis B vaccines (HBV inhibitors).
Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist somit auch eine Kombinationstherapie, bei der mindestens eine der erfindungsgemäßen Verbindungen oder ein pharmakologisch unbedenkliches Salz, Solvat oder Solvat eines Salzes davon zusammen mit mindestens einem zusätzlichen Agens, ausgewählt aus der Gruppe antivirale Agentien, immunomodulatorische Agentien, HCV Protease-Inhibitoren, HCV Polymerase-Inhibitoren, Inhibitoren eines anderen Targets im HCV-Lebenszyklus, HIV-Inhibitoren, HAV-Inhibitoren und HBV-Inhibitoren, verabreicht werden. Die zusätzlichen Agentien können mit den erfindungsgemäßen Verbindungen zu einer einzigen pharmazeutischen Dosierungsform vereinigt werden. Alternativ können diese zusätzlichen Agentien separat verabreicht werden. Solche zusätzlichen Agentien können vor, während oder nach der Gabe einer erfindungsgemäßen Verbindung oder eines pharmakologisch unbedenklichen Salzes, Solvates oder Solvates eines Salzes davon verabreicht werden.object The present invention is therefore also a combination therapy, in the at least one of the compounds of the invention or a pharmacological harmless salt, solvate or solvate of a salt thereof with at least one additional Agent, selected from the group antiviral agents, immunomodulatory agents, HCV protease inhibitors, HCV polymerase inhibitors, inhibitors of another target in the HCV life cycle, HIV inhibitors, HAV inhibitors and HBV inhibitors, be administered. The additional Agents can with the compounds of the invention into a single pharmaceutical dosage form. Alternatively you can these extra Agents are administered separately. Such additional agents may while or after administration of a compound of the invention or pharmacologically harmless salt, solvates or solvates of a salt thereof be administered.
Definitionen:definitions:
Der Term "anti-virales Agens" meint ein Agens, das die Bildung und/oder Replikation eines Virus inhibiert. Das schließt Agentien ein, die in Mechanismen des Wirts oder des Virus eingreifen, die für die Bildung und/oder Replikation eines Virus notwendig sind. Anti-virale Agentien sind z.B. Ribavirin, Amantadin, VX-497 (Merimepodib, Vertex Pharmaceuticals), Viramidin, Ceplene (Maxamine), XTL-001 und XTL-002 (XTL-Biopharmaceuticals).The term "anti-viral agent" means an agent that inhibits the formation and / or replication of a virus biert. This includes agents that interfere with host or virus mechanisms necessary for the formation and / or replication of a virus. Anti-viral agents include Ribavirin, Amantadine, VX-497 (Merimepodib, Vertex Pharmaceuticals), Viramidine, Ceplene (Maxamine), XTL-001 and XTL-002 (XTL-Biopharmaceuticals).
Der Term "anti-HCV-Agens" meint ein Agens, das Hepatitis C-bedingte Krankheitssymptome vermindert oder verhindert. Ein solches Agens kann ein anti-virales Agens, ein immunomodulatorisches Agens, ein HCV Protease-Inhibitor, ein HCV Polymerase-Inhibitor oder ein Inhibitor eines anderen Targets im HCV-Lebenszyklus sein.Of the Term "anti-HCV agent" means an agent, reduces or prevents hepatitis C-related disease symptoms. Such an agent may be an anti-viral agent, an immunomodulatory Agent, an HCV protease inhibitor, an HCV polymerase inhibitor or an inhibitor of another target in the HCV life cycle.
Der Term "immunomodulatorisches Agens" meint ein Agens, das die Immunantwort verstärkt oder schädliche Immunreaktionen eindämmt. Immunomodulatorische Agentien sind z.B. Klasse I-Interferone (wie alpha-, beta-, delta- und omega-Interferone, tau-Interferone, consensus-Interferone und asialo-Interferone), Klasse II-Interferone (wie gamma-Interferone) und pegylierte Interferone sowie Substanzen wie Levovirin.Of the Term "immunomodulatory Agent, "says one Agent that enhances the immune response or harmful immune reactions restrains. Immunomodulatory agents are e.g. Class I interferons (such as alpha, beta, delta and omega interferons, tau interferons, consensus interferons and asialo interferons), class II interferons (such as gamma interferons) and pegylated interferons as well as substances such as levovirin.
Der Term "HCV Protease-Inhibitor" meint ein Agens, das die Funktion der HCV NS2/3-Metalloprotease oder der NS3/4A-Serinprotease inhibiert. HCV NS3/4A-Serinprotease-Inhibitoren sind z.B. BILN 2061 (Boehringer Ingelheim), oder VX-950/LY-570310 (Vertex/Eli Lilly).Of the Term "HCV protease inhibitor" means an agent, the function of HCV NS2 / 3 metalloprotease or NS3 / 4A serine protease inhibited. HCV NS3 / 4A serine protease inhibitors are e.g. BILN 2061 (Boehringer Ingelheim), or VX-950 / LY-570310 (Vertex / Eli Lilly).
Der
Term "HCV Polymerase-Inhibitor" meint ein Agens,
das die Funktion der HCV-Polymerase inhibiert. Dies schließt z.B.
Inhibitoren der HCV NS5B-Polymerase ein. HCV Polymerase-Inhibitoren
schließen Nicht-Nukleoside
ein, beispielsweise Verbindungen, die beschrieben sind in WO 02/100846
und WO 02/100851 (Shire), WO 01/85172 und WO 02/098424 (GSK), WO
00/06529 und WO 02/06246 (Merck), WO 01/47883 und WO 03/000254 (Japan
Tobacco) und
Der Term "Inhibitor eines anderen Targets im HCV-Lebenszyklus" meint ein Agens, das die Bildung und/oder Replikation von HCV auf andere Weise als durch die Inhibition der Funktion einer HCV Protease oder der HCV Polymerase inhibiert. Das schließt Agentien ein, die in Mechanismen des Wirts oder von HCV eingreifen, die für die Bildung und/oder Replikation von HCV notwendig sind. Inhibitoren eines anderen Targets im HCV-Lebenszyklus schließen Agentien ein, die beispielsweise eine Helicase oder eine IRES als Target inhibieren. Ein spezifisches Beispiel für einen Inhibitor eines anderen Targets im HCV-Lebenszyklus ist ISIS-14803 (ISIS-Pharmaceuticals).Of the Term "inhibitor of another target in the HCV life cycle "means an agent that controls the formation and / or Replication of HCV other than by inhibition of HCV Function of a HCV protease or HCV polymerase inhibited. The includes Agents that interfere with mechanisms of the host or HCV, the for the formation and / or replication of HCV are necessary. inhibitors another target in the HCV life cycle includes agents, for example inhibit a helicase or an IRES as a target. A specific one example for an inhibitor of another target in the HCV life cycle is ISIS-14803 (ISIS Pharmaceuticals).
Der Term "HIV-Inhibitor" meint ein Agens, das die Bildung und/oder Replikation von HIV inhibiert. Das schließt Agentien ein, die in Mechanismen des Wirts oder von HIV eingreifen, die für die Bildung und/oder Replikation von HIV notwendig sind. HIV-Inhibitoren schließen z.B. nukleosidische Inhibitoren, nicht-nukleosidische Inhibitoren, Protease-Inhibitoren, Fusions-Inhibitoren und Integrase-Inhibitoren ein.Of the Term "HIV inhibitor" means an agent, which inhibits the formation and / or replication of HIV. That includes agents One who intervene in mechanisms of the host or HIV responsible for education and / or replication of HIV are necessary. HIV inhibitors include e.g. nucleoside inhibitors, non-nucleoside inhibitors, protease inhibitors, Fusion inhibitors and integrase inhibitors.
Der Term "HAV-Inhibitor" meint ein Agens, das die Bildung und/oder Replikation von HAV inhibiert. Das schließt Agentien ein, die in Mechanismen des Wirts oder von HAV eingreifen, die für die Bildung und/oder Replikation von HAV notwendig sind. HAV-Inhibitoren schließen z.B. Hepatitis A-Impfstoffe [z.B. Havrix® (GSK), VAQTA® (Merck), Avaxim® (Aventis Pasteur)] ein.The term "HAV inhibitor" means an agent that inhibits the formation and / or replication of HAV. This includes agents that interfere with mechanisms of the host or HAV necessary for the formation and / or replication of HAV. HAV inhibitors include Hepatitis A vaccines, for example, [for example, Havrix ® (GSK), VAQTA ® (Merck), Avaxim ® (Aventis Pasteur)] a.
Der Term "HBV-Inhibitor" meint ein Agens, das die Bildung und/oder Replikation von HBV inhibiert. Das schließt Agentien ein, die in Mechanismen des Wirts oder von HBV eingreifen, die für die Bildung und/oder Replikation von HBV notwendig sind. HBV-Inhibitoren schließen z.B. Agentien ein, die die HBV DNA-Polymerase inhibieren, oder Hepatitis B-Impfstoffe. Spezifische Beispiele von HBV-Inhibitoren sind: Lamivudine (Epivir-HBV®), Adefovir Dipivoxil, Entecavir, FTC (Coviracil®), DAPD (DXG), L-FMAU (Clevudine®), AM365 (Amrad), Ldt (Telbivudine), monoval-LdC (Valtorcitabine), BAY 41-4109 (Bayer), ACH-126,443 (L-Fd4C) (Achillion), MCC478 (Eli Lilly), Racivir (RCV), Fluoro-L- und D-Nukleoside, Robustaflavone, ICN2001-3 (ICN), Bam 205 (Novelos), XTL-001 (XTL), Imino-Zucker (Nony-DNJ) (Synergy), HepBzyme, sowie immunomodulatorische Produkte wie z.B. Interferon alpha-2b, HE2000 (Hollis-Eden), Theradigm (Epimmune), EHT899 (Enzo Biochem), Thymosin alpha-1 (Zadaxin®), HBV DNA Vaccine (PowderJect), HBV DNA Vaccine (Jefferon Center), HBV Antigen (OraGen), BayHep B® (Bayer), Nabi-HB® (Nabi) und Anti-hepatitis B (Cangene), sowie HBV-Impfstoffe wie z.B. Engerix B, Recombivax HB, GenHevac B, Hepacare, Bio-Hep B, TwinRix, Comvax, Hexavac.The term "HBV inhibitor" means an agent that inhibits the formation and / or replication of HBV. This includes agents that interfere with host or HBV mechanisms necessary for the formation and / or replication of HBV. For example, HBV inhibitors include agents that inhibit HBV DNA polymerase, or hepatitis B vaccines. Specific examples of HBV inhibitors include Lamivudine (Epivir-HBV ®), Adefovir Dipivoxil, Entecavir, FTC (Coviracil ®), DAPD (DXG), L-FMAU (Clevudine ®), AM365 (Amrad), Ldt (Telbivudine), monoval-LdC (valtorcitabine), BAY 41-4109 (Bayer), ACH-126.443 (L-Fd4C) (Achillion), MCC 4 78 (Eli Lilly), Racivir (RCV), fluoro-L and D nucleosides, Robustaflavone , ICN2001-3 (ICN), Bam 205 (Novelos), XTL-001 (XTL), imino-sugar (Nony-DNJ) (Synergy), HepBzyme, and immunomodulatory products such as Interferon alpha-2b, HE2000 (Hollis-Eden ), Theradigm (Epimmune), EHT899 (Enzo Biochem), thymosin alpha-1 (Zadaxin ®), HBV DNA vaccine (PowderJect), HBV DNA vaccine (Jefferon Center), HBV antigen (oragen), BayHep B ® (Bayer), Nabi- HB® (Nabi) and anti-hepatitis B (Cangene), as well as HBV vaccines such as Engerix B, Recombivax HB, GenHevac B, Hepacare, Bio-Hep B, TwinRix, Comvax, Hexavac.
Der Term "Klasse I-Interferone" meint ein Interferon ausgewählt aus einer Gruppe von Interferonen, die alle an den Rezeptor Typ I binden. Das schließt natürliche und synthetisch hergestellte Klasse I-Interferone ein. Beispiele von Klasse I-Interferonen sind alpha-, beta- und omega-Interferone, tau-Interferone, consensus-Interferone und asialo-Interferone.Of the Term "Class I interferons" means an interferon selected from a group of interferons, all to the receptor type I tie. That concludes natural and synthetically prepared class I interferons. Examples of class I interferons are alpha, beta and omega interferons, tau interferons, consensus interferons and asialo interferons.
Der Term "Klasse II-Interferone" meint ein Interferon ausgewählt aus einer Gruppe von Interferonen, die alle an den Rezeptor Typ II binden. Beispiele von Klasse II-Interferonen sind gamma-Interferone.Of the Term "class II interferons" means an interferon selected from a group of interferons, all to the receptor type II bind. Examples of class II interferons are gamma interferons.
Der Term "Behandlung" meint die Verabreichung eines Arzneimittels entsprechend der vorliegenden Erfindung, um die Krankheitssymptome von Hepatitis C zu lindern oder zu eliminieren und/oder um die Virenmenge zu reduzieren.Of the Term "treatment" means the administration of a drug according to the present invention to alleviate or eliminate the disease symptoms of hepatitis C. and / or to reduce the amount of virus.
Der Term "Prophylaxe" meint die Verabreichung eines Arzneimittels entsprechend der vorliegenden Erfindung nach der Infektion mit HCV, aber vor dem Auftreten von Krankheitssymptomen und/oder vor der Detektion von HCV im Blut.Of the Term "Prophylaxis" means the administration of a medicament according to the present invention the infection with HCV, but before the onset of disease symptoms and / or before the detection of HCV in the blood.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können systemisch und/oder lokal wirken. Zu diesem Zweck können sie auf geeignete Weise appliziert werden, wie z.B. oral, parenteral, pulmonal, nasal, sublingual, lingual, buccal, rectal, dermal, transdermal, conjunctival, otisch oder als Implantat bzw. Stent.The Compounds of the invention can act systemically and / or locally. For this purpose they can be applied in a suitable manner, e.g. oral, parenteral, pulmonary, nasal, sublingual, lingual, buccal, rectal, dermal, transdermal, conjunctival, otic or as an implant or stent.
Für diese Applikationswege können die erfindungsgemäßen Verbindungen in geeigneten Applikationsformen verabreicht werden.For this Application routes can the compounds of the invention be administered in suitable administration forms.
Für die orale Applikation eignen sich nach dem Stand der Technik funktionierende schnell und/oder modifiziert die erfindungsgemäßen Verbindungen abgebende Applikationsformen, die die erfindungsgemäßen Verbindungen in kristalliner und/oder amorphisierter und/oder gelöster Form enthalten, wie z.B. Tabletten (nichtüberzogene oder überzogene Tabletten, beispielsweise mit magensaftresistenten oder sich verzögert auflösenden oder unlöslichen Überzügen, die die Freisetzung der erfindungsgemäßen Verbindung kontrollieren), in der Mundhöhle schnell zerfallende Tabletten oder Filme/Oblaten, Filme/Lyophylisate, Kapseln (beispielsweise Hart- oder Weichgelatinekapseln), Dragees, Granulate, Pellets, Pulver, Emulsionen, Suspensionen, Aerosole oder Lösungen.For the oral Application are functioning according to the prior art rapidly and / or modifies the compounds according to the invention donating Application forms containing the compounds of the invention in crystalline and / or amorphized and / or dissolved form, e.g. Tablets (uncoated or coated Tablets, for example, with enteric or delayed dissolving or insoluble coatings that control the release of the compound of the invention), in the oral cavity rapidly disintegrating tablets or films / wafers, films / lyophilisates, Capsules (for example hard or soft gelatine capsules), dragees, Granules, pellets, powders, emulsions, suspensions, aerosols or Solutions.
Die parenterale Applikation kann unter Umgehung eines Resorptionsschrittes geschehen (z.B. intravenös, intraarteriell, intrakardial, intraspinal oder intralumbal) oder unter Einschaltung einer Resorption (z.B. intramuskulär, subcutan, intracutan, percutan oder intraperitoneal). Für die parenterale Applikation eignen sich als Applikationsformen u.a. Injektions- und Infusionszubereitungen in Form von Lösungen, Suspensionen, Emulsionen, Lyophilisaten oder sterilen Pulvern.The Parenteral administration can bypass a resorption step happen (e.g., intravenously, intraarterial, intracardiac, intraspinal or intralumbar) or involving absorption (e.g., intramuscular, subcutaneous, intracutaneous, percutaneous or intraperitoneal). For parenteral administration are suitable as application forms u.a. Injection and infusion preparations in the form of solutions, Suspensions, emulsions, lyophilisates or sterile powders.
Für die sonstigen Applikationswege eignen sich z.B. Inhalationsarzneiformen (u.a. Pulverinhalatoren, Nebulizer), Nasentropfen, -lösungen, -sprays; lingual, sublingual oder buccal zu applizierende Tabletten, Filme/Oblaten oder Kapseln, Suppositorien, Ohren- oder Augenpräparationen, Vaginalkapseln, wäßrige Suspensionen (Lotionen, Schüttelmixturen), lipophile Suspensionen, Salben, Cremes, transdermale therapeutische Systeme, Milch, Pasten, Schäume, Streupuder, Implantate oder Stents.For the others Application routes are suitable, e.g. Inhalation medicines (i.a. Powder inhalers, nebulizers), nasal drops, solutions, sprays; lingual, sublingual or buccally applied tablets, films / wafers or capsules, Suppositories, ear or eye preparations, vaginal capsules, aqueous suspensions (Lotions, shake mixes), lipophilic suspensions, ointments, creams, transdermal therapeutic systems, Milk, pastes, foams, Scattering powders, implants or stents.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können in die angeführten Applikationsformen überführt werden. Dies kann in an sich bekannter Weise durch Mischen mit inerten, nichttoxischen, pharmazeutisch geeigneten Hilfsstoffen geschehen. Zu diesen Hilfsstoffen zählen u.a. Trägerstoffe (beispielsweise mikrokristalline Cellulose, Laktose, Mannitol), Lösungsmittel (z.B. flüssige Polyethylenglycole), Emulgatoren und Dispergier- oder Netzmittel (beispielsweise Natriumdodecylsulfat, Polyoxysorbitanoleat), Bindemittel (beispielsweise Polyvinylpyrrolidon), synthetische und natürliche Polymere (beispielsweise Albumin), Stabilisatoren (z.B. Antioxidantien wie beispielsweise Ascorbinsäure), Farbstoffe (z.B. anorganische Pigmente wie beispielsweise Eisenoxide) und Geschmacks- und/oder Geruchskorrigentien.The Compounds of the invention can in the cited Application forms are transferred. This can be done in a conventional manner by mixing with inert, Non-toxic, pharmaceutically suitable excipients happen. Among these adjuvants include et al excipients (for example, microcrystalline cellulose, lactose, mannitol), solvent (e.g., liquid Polyethylene glycols), emulsifiers and dispersing or wetting agents (For example, sodium dodecyl sulfate, Polyoxysorbitanoleat), binder (For example, polyvinylpyrrolidone), synthetic and natural polymers (for example, albumin), stabilizers (e.g., antioxidants such as for example ascorbic acid), Dyes (e.g., inorganic pigments such as iron oxides) and flavor and / or scent remedies.
Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung sind Arzneimittel, die mindestens eine erfindungsgemäße Verbindung, üblicherweise zusammen mit einem oder mehreren inerten, nichttoxischen, pharmazeutisch geeigneten Hilfsstoffen enthalten, sowie deren Verwendung zu den zuvor genannten Zwecken.Another The present invention relates to medicaments which are at least a compound of the invention, usually together with one or more inert, non-toxic, pharmaceutical contain suitable excipients, as well as their use to the previously mentioned purposes.
Im Allgemeinen hat es sich als vorteilhaft erwiesen, bei intravenöser Applikation Mengen von etwa 0.001 bis 20 mg/kg, vorzugsweise etwa 0.01 bis 5 mg/kg Körpergewicht zur Erzielung wirksamer Ergebnisse zu verabreichen, und bei oraler Applikation beträgt die Dosierung etwa 0.01 bis 50 mg/kg, vorzugsweise 0.1 bis 10 mg/kg Körpergewicht.In general, it has proven to be advantageous to administer amounts of about 0.001 to 20 mg / kg, preferably about 0.01 to 5 mg / kg of body weight to achieve effective results when administered intravenously, and for oral administration, the dosage is about 0.01 to 50 mg / kg, preferably 0.1 to 10 mg / kg body weight.
Trotzdem kann es gegebenenfalls erforderlich sein, von den genannten Mengen abzuweichen, und zwar in Abhängigkeit von Körpergewicht, Applikationsweg, individuellem Verhalten gegenüber dem Wirkstoff, Art der Zubereitung und Zeitpunkt bzw. Intervall, zu welchem die Applikation erfolgt. So kann es in einigen Fällen ausreichend sein, mit weniger als der vorgenannten Mindestmenge auszukommen, während in anderen Fällen die genannte obere Grenze überschritten werden muss. Im Falle der Applikation größerer Mengen kann es empfehlenswert sein, diese in mehreren Einzelgaben über den Tag zu verteilen.Nevertheless it may be necessary, if necessary, of the quantities mentioned to deviate, depending on of body weight, Route of administration, individual behavior towards the active substance, type of Preparation and time or interval to which the application he follows. So it can in some cases be sufficient, with less than the aforementioned minimum quantity to get along while in other cases exceeded the mentioned upper limit must become. In case of application of larger quantities it may be recommended be to distribute these in several single doses throughout the day.
Die Prozentangaben in den folgenden Tests und Beispielen sind, sofern nicht anders angegeben, Gewichtsprozente; Teile sind Gewichtsteile. Lösungsmittelverhältnisse, Verdünnungsverhältnisse und Konzentrationsangaben von flüssig flüssig-Lösungen beziehen sich jeweils auf das Volumen.The Percentages in the following tests and examples are provided not stated otherwise, weight percentages; Parts are parts by weight. Solvent ratios, dilution ratios and concentration data of liquid refer to liquid solutions each on the volume.
A. BeispieleA. Examples
Verwendete Abkürzungen:Used abbreviations:
-
- BINAPBINAP
- 2,2'-Bis-(diphenylphosphino)-1,1'-binaphthyl 2,2'-bis (diphenylphosphino) -1,1'-binaphthyl
- CDCl3 CDCl 3
- Deuterochloroformdeuterochloroform
- CD3CNCD 3 CN
- Deuteroacetonitrildeuteroacetonitrile
- DCDC
- DünnschichtchromatographieTLC
- DCIDCI
- direkte chemische Ionisation (bei MS)direct chemical Ionization (in MS)
- DCMDCM
- Dichlormethandichloromethane
- DIEADIEA
- N,N-Diisopropylethylamin (Hünig Base)N, N-diisopropylethylamine (Hünig Base)
- DMAPDMAP
- 4-N,N-Dimethylaminopyridin4-N, N-dimethylaminopyridine
- DMSODMSO
- Dimethylsulfoxiddimethyl sulfoxide
- DMFDMF
- N,N'-DimethylformamidN, N'-dimethylformamide
- d.Th.theory
- der Theoriethe theory
- EEEE
- Ethylacetat (Essigsäureethylester)Ethyl acetate (ethyl acetate)
- EIEGG
- Elektronenstoß-Ionisation (bei MS)Electron impact ionization (in MS)
- ESIIT I
- Elektrospray-Ionisation (bei MS)Electrospray ionization (in MS)
- Fp.Mp.
- Schmelzpunktmelting point
- ges.ges.
- gesättigtsaturated
- hH
- Stundehour
- HPLCHPLC
- Hochdruck-, HochleistungsflüssigchromatographieHigh pressure, high performance liquid chromatography
- konz.conc.
- konzentriertconcentrated
- LC-MSLC-MS
- Flüssigchromatographie-gekoppelte MassenspektroskopieLiquid chromatography-coupled mass spectroscopy
- LDALDA
- Lithium-DiisopropylamidLithium diisopropylamide
- LiOHLiOH
- Lithiumhydroxidlithium hydroxide
- MSMS
- Massenspektroskopiemass spectroscopy
- NMRNMR
- KernresonanzspektroskopieNuclear Magnetic Resonance Spectroscopy
- proz.proc.
- prozentigpercent
- RP-HPLCRP-HPLC
- Reverse Phase HPLCReverse phase HPLC
- RTRT
- Raumtemperaturroom temperature
- Rt R t
- Retentionszeit (bei HPLC)Retention time (at HPLC)
- THFTHF
- Tetrahydrofurantetrahydrofuran
Allgemeine LCMS- und HPLC-Methoden:General LCMS and HPLC methods:
Methode 1 (HPLC): Instrument: HP 1100 mit DAD-Detektion; Säule: Kromasil RP-18, 60 mm × 2 mm, 3.5 μm; Eluent A: 5 ml HClO4/l Wasser, Eluent B: Acetonitril; Gradient: 0 min 2%B, 0.5 min 2%B, 4.5 min 90%B, 6.5 min 90%B; Fluss: 0.75 ml/min; Ofen: 30°C; UV-Detektion: 210 nm.Method 1 (HPLC): Instrument: HP 1100 with DAD detection; Column: Kromasil RP-18, 60 mm × 2 mm, 3.5 μm; Eluent A: 5 ml HClO 4 / l water, eluent B: acetonitrile; Gradient: 0 min 2% B, 0.5 min 2% B, 4.5 min 90% B, 6.5 min 90% B; Flow: 0.75 ml / min; Oven: 30 ° C; UV detection: 210 nm.
Methode 2 (HPLC, präparative Trennung): Säule: CromSil C18, 250 mm × 30 mm; Eluent A: Wasser, Eluent B: Acetonitril; Gradient: 3 min 10%B → 31 min 90%B → 34 min 90%B → 34.01 min 10%B; Laufzeit: 38 min; Fluss: 50 ml/min; UV-Detektion: 210 nm.method 2 (HPLC, preparative Separation): column: CromSil C18, 250 mm × 30 mm; Eluent A: water, eluent B: acetonitrile; Gradient: 3 min 10% B → 31 min 90% B → 34 min 90% B → 34.01 min 10% B; Running time: 38 min; Flow: 50 ml / min; UV detection: 210 nm.
Methode 3 (HPLC): Instrument: HP 1100 mit DAD-Detektion; Säule: Kromasil RP-18, 60 mm × 2 mm, 3.5 μm; Eluent A: 5 ml HClO4/l Wasser, Eluent B: Acetonitril; Gradient: 0 min 2%B, 0.5 min 2%B, 4.5 min 90%B, 9 min 90%B; Fluss: 0.75 ml/min; Ofen: 30°C; UV-Detektion: 210 nm.Method 3 (HPLC): Instrument: HP 1100 with DAD detection; Column: Kromasil RP-18, 60 mm × 2 mm, 3.5 μm; Eluent A: 5 ml HClO 4 / l water, eluent B: acetonitrile; Gradient: 0 min 2% B, 0.5 min 2% B, 4.5 min 90% B, 9 min 90% B; Flow: 0.75 ml / min; Oven: 30 ° C; UV detection: 210 nm.
Methode 4 (LC-MS): Gerätetyp MS: Micromass ZQ; Gerätetyp HPLC: HP 1100 Series; UV DAD; Säule: Phenomenex Synergi 2μ Hydro-RP Mercury 20 mm × 4 mm; Eluent A: 1 l Wasser + 0.5 ml 50%ige Ameisensäure, Eluent B: 1 l Acetonitril + 0.5 ml 50%ige Ameisensäure; Gradient: 0.0 min 90%A → 2.5 min 30%A → 3.0 min 5%A → 4.5 min 5%A; Fluss; 0.0 min 1 ml/min, 2.5 min/3.0 min/4.5 min 2 ml/min; Ofen: 50°C; UV-Detektion: 210 nm.method 4 (LC-MS): Device type MS: Micromass ZQ; device type HPLC: HP 1100 Series; UV DAD; Pillar: Phenomenex Synergi 2μ Hydro-RP Mercury 20 mm × 4 mm; Eluent A: 1 l of water + 0.5 ml of 50% formic acid, eluent B: 1 liter acetonitrile + 0.5 ml 50% formic acid; Gradient: 0.0 min 90% A → 2.5 min 30% A → 3.0 min 5% A → 4.5 min 5% A; River; 0.0 min 1 ml / min, 2.5 min / 3.0 min / 4.5 min 2 ml / min; Oven: 50 ° C; UV detection: 210 nm.
Methode 5 (LC-MS): Instrument: Micromass Quattro LCZ mit HPLC Agilent Serie 1100; Säule: Phenomenex Synergi 2μ Hydro-RP Mercury 20 mm × 4 mm; Eluent A: 1 l Wasser + 0.5 ml 50%ige Ameisensäure, Eluent B: 1 l Acetonitril + 0.5 ml 50%ige Ameisensäure; Gradient: 0.0 min 90%A → 2.5 min 30%A → 3.0 min 5%A → 4.5 min 5%A; Fluss: 0.0 min 1 ml/min, 2.5 min/3.0 min/4.5 min 2 ml/min; Ofen: 50°C; UV-Detektion: 208 – 400 nm.method 5 (LC-MS): Instrument: Micromass Quattro LCZ with HPLC Agilent series 1100; Pillar: Phenomenex Synergi 2μ Hydro-RP Mercury 20 mm × 4 mm; Eluent A: 1 l of water + 0.5 ml of 50% formic acid, eluent B: 1 liter acetonitrile + 0.5 ml 50% formic acid; Gradient: 0.0 min 90% A → 2.5 min 30% A → 3.0 min 5% A → 4.5 min 5% A; Flow: 0.0 min 1 ml / min, 2.5 min / 3.0 min / 4.5 min 2 ml / min; Oven: 50 ° C; UV detection: 208 - 400 nm.
Ausgangsverbindungenstarting compounds
Beispiel 1AExample 1A
2-Aminothiophen-3-carbonsäuremethylester 2-aminothiophene-3-carbonsäuremethylester
In
Analogie zu J. Med. Chem. 1999, 42, 5437-5447 werden 65.1 g (656.9
mmol) Cyanessigsäuremethylester
und 50.0 g (328.4 mmol) 2,5-Dihydroxy-1,4-dithian in 400 ml DMF
vorgelegt, und man tropft unter Eiskühlung langsam 45.8 ml (328.4
mmol) Triethylamin hinzu. Der Reaktionsansatz wird 2 h bei RT gerührt und anschließend mit
1.2 leiner 0.4M Essigsäure
verdünnt.
Die wässrige
Phase wird viermal mit jeweils 150 ml tert.-Butyl-methylether extrahiert.
Die vereinigten organischen Phasen werden zweimal mit jeweils 150
ml Wasser gewaschen und mit Natriumsulfat getrocknet. Man entfernt
das Lösungsmittel
unter vermindertem Druck und gelindem Erwärmen am Rotationsverdampfer.
Man reinigt den Rückstand
durch zweimaliges Waschen mit kaltem Cyclohexan und erhält 35.3
g (68% d. Th.) Produkt.
HPLC (Methode 1): Rt =
3.63 min
Ms (DCI(NH3)): m/z = 158 (M+H)+.
1H-NMR (400MHz,
CDCl3): δ =
6.96 (d, 1H), 6.18 (d, 1H), 5.94 (br. s, 2H), 3.81 (s, 3H).In analogy to J. Med. Chem. 1999, 42, 5437-5447, 65.1 g (656.9 mmol) of methyl cyanoacetate and 50.0 g (328.4 mmol) of 2,5-dihydroxy-1,4-dithiane in 400 ml of DMF are initially charged While cooling with ice, 45.8 ml (328.4 mmol) of triethylamine are added dropwise. The reaction mixture is stirred for 2 h at RT and then diluted with 1.2 leiner 0.4M acetic acid. The aqueous phase is extracted four times with 150 ml each of tert-butyl methyl ether. The combined organic phases are washed twice with 150 ml of water and dried with sodium sulfate. The solvent is removed under reduced pressure and gentle heating on a rotary evaporator. The residue is purified by washing twice with cold cyclohexane to give 35.3 g (68% of theory) of product.
HPLC (Method 1): R t = 3.63 min
Ms (DCI (NH 3 )): m / z = 158 (M + H) + .
1 H-NMR (400MHz, CDCl 3): δ = 6.96 (d, 1H), 6.18 (d, 1H), 5.94 (br. S, 2H), 3.81 (s, 3H).
Beispiel 2AExample 2A
2-(Isopropylamino)thiophen-3-carbonsäuremethylester 2- (isopropylamino) thiophene-3-carbonsäuremethylester
27.5
g (175.0 mmol) 2-Amino-thiophen-3-carbonsäuremethylester werden unter
Argon in 533 ml Dichlormethan vorgelegt und man fügt bei RT
50.5 g (700 mmol) 2-Methoxypropen, 42.0 g Eisessig (700 mmol) und
74.2 g (350 mmol) Natriumtriacetoxyborhydrid hinzu. Der Reaktions ansatz
wird 2 h bei RT gerührt
und anschließend
mit einer wässrigen
2N Natriumhydroxid-Lösung
neutralisiert. Nach Trennung der Phasen wird die wässrige Phase
dreimal mit Dichlormethan extrahiert. Die vereinigten organischen
Phasen werden mit Natriumsulfat getrocknet, und das Lösungsmittel
wird unter vermindertem Druck und gelindem Erwärmen am Rotationsverdampfer
abgezogen. Der Rückstand
wird mittels flash-Chromatographie (Laufmittel Gradient: 0% Essigsäureethylester
in Petrolether auf 3% Essigsäureethylester
in Petrolether) aufgereinigt und man erhält 24.9 g (72% d. Th.) Produkt.
HPLC
(Methode 1): Rt = 4.88 min
MS (DCI(NH3)): m/z = 200 (M+H)+.
1H-NMR (400MHz, CDCl3): δ = 7.36 (d,
1H), 7.00 (d, 1H), 6.14 (d, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.45-3.55 (m, 1H),
1.31 (d, 6H).27.5 g (175.0 mmol) of 2-amino-thiophene-3-carboxylic acid methyl ester are initially charged under argon in 533 ml of dichloromethane and 50.5 g (700 mmol) of 2-methoxypropene, 42.0 g of glacial acetic acid (700 mmol) and 74.2 g (350 mmol) sodium triacetoxyborohydride. The reaction mixture is stirred for 2 h at RT and then neutralized with an aqueous 2N sodium hydroxide solution. After separation of the phases, the aqueous phase is extracted three times with dichloromethane. The combined organic phases are dried with sodium sulfate and the solvent is stripped off under reduced pressure and gentle heating on a rotary evaporator. The residue is purified by flash chromatography (mobile phase gradient: 0% ethyl acetate in petroleum ether to 3% ethyl acetate in petroleum ether) and obtained 24.9 g (72% of theory) of product.
HPLC (Method 1): R t = 4.88 min
MS (DCI (NH 3 )): m / z = 200 (M + H) + .
1 H-NMR (400MHz, CDCl 3): δ = 7.36 (d, 1H) 7.00 (d, 1H), 6.14 (d, 1H), 3.78 (s, 3H), 3:45 to 3:55 (m, 1H), 1.31 (d, 6H).
Beispiel 3AExample 3A
2-{Isopropyl[(trans-4-methylcyclohexyl)carbonyl]amino}thiophen-3-carbonsäuremethylester 2- {isopropyl [(trans-4-methylcyclohexyl) carbonyl] amino} thiophene-3-carbonsäuremethylester
30.0
g (211.0 mmol) trans-4-Methyl-cyclohexancarbonsäure werden unter Argon in 150.6
g (1.27 mol) Thionylchlorid gelöst
und 1 h unter Rückfluss
gekocht. Nach dem Erkalten wird das überschüssige Thionylchlorid im Vakuum
unter gelindem Erwärmen
abgezogen und der Rückstand
dreimal mit trockenem Toluol coevaporiert. Unter Argon fügt man zu
21.0 g (105.5 mmol) 2-Isopropylamino-thiophen-3-carbonsäuremethylester 33.9
g (211.0 mmol) trans-4-Methyl-cyclohexancarbonsäurechlorid und 25.9 g (200.5
mmol) trockenes Diisopropylethylamin hinzu. Es wird über Nacht
unter Rühren
auf 80°C
erwärmt.
Anschließend
verdünnt
man den Ansatz mit Dichlormethan und fügt vorsichtig wässrige,
gesättigte
Natriumcarbonat-Lösung
hinzu. Man trennt die Phasen, extrahiert die wässrige Phase dreimal mit Dichlormethan,
trocknet die vereinigten organischen Phasen über Natriumsulfat, filtriert
und engt ein. Nach Säulenchromatographie
an Kieselgel 60 (Laufmittel: Essigsäureethylester:Cyclohexan 1:5)
erhält
man 32.5 g (49% d. Th.) Produkt.
HPLC (Methode 1): Rt = 5.20 min
MS (ESI+): m/z = 324 (M+H)+
1H-NMR (400MHz,
CDCl3): δ =
7.44 (d, 1H), 7.19 (d, 1H), 4.94 (m, 1H), 3.79 (s, 3H), 1.93-2.09
(m, 1H), 1.56-1.78 (m, 5H), 1.19-1.43 (m, 2H), 1.16 (d, 3H), 0.88
(d, 3H), 0.77 (d, 3H), 0.54-0.74 (m, 2H).30.0 g (211.0 mmol) of trans-4-methyl-cyclohexanecarboxylic acid are dissolved under argon in 150.6 g (1.27 mol) of thionyl chloride and boiled under reflux for 1 h. After cooling, the excess thionyl chloride is removed in vacuo with gentle heating and the residue is coevaporated three times with dry toluene. 33.9 g (211.0 mmol) of trans-4-methylcyclohexanecarboxylic acid chloride and 25.9 g (200.5 mmol) of dry diisopropylethylamine are added under argon to 21.0 g (105.5 mmol) of methyl 2-isopropylamino-thiophene-3-carboxylate. It is heated with stirring to 80 ° C overnight. The mixture is then diluted with dichloromethane and carefully added aqueous saturated sodium carbonate solution. The phases are separated, the aqueous phase is extracted three times with dichloromethane, the combined organic phases are dried over sodium sulfate, filtered and concentrated. After column chromatography on silica gel 60 (eluent: ethyl acetate: cyclohexane 1: 5), 32.5 g (49% of theory) of product are obtained.
HPLC (Method 1): R t = 5.20 min
MS (ESI +): m / z = 324 (M + H) +
1 H-NMR (400MHz, CDCl 3): δ = 7.44 (d, 1H), 7.19 (d, 1H), 4.94 (m, 1H), 3.79 (s, 3H), 1.93-2.09 (m, 1H), 1.56-1.78 (m, 5H), 1.19-1.43 (m, 2H), 1.16 (d, 3H), 0.88 (d, 3H), 0.77 (d, 3H), 0.54-0.74 (m, 2H).
Beispiel 4AExample 4A
5-Brom-2-{isopropyl[(trans-4-methylcyclohexyl)carbonyl]amino}thiophen-3-carbonsäuremethylester 5-bromo-2- {isopropyl [(trans-4-methylcyclohexyl) carbonyl] amino} thiophene-3-carbonsäuremethylester
15.4
g (47.1 mmol) 2-{Isopropyl[(trans-4-methylcyclohexyl)carbonyl]amino}thiophen-3-carbonsäuremethylester
werden in 308 ml einer 1:1 Mischung Chloroform:Tetrachlorkohlenstoff
vorgelegt und man fügt
21.2 g (119.0 mmol) N-Bromsuccinimid hinzu. Der Ansatz wird 2.5
h unter Rückfluss
gerührt.
Nach dem Erkalten entfernt man unter gelindem Erwärmen das
Lösungsmittel
im Vakuum. Der Rückstand
wird mittels flash-Chromatographie an Kieselgel 60 (Lösungsmittel:
Essigsäureethylester:Cyclohexan
1:5) aufgereinigt und man erhält
13.8 g (72% d. Th.) Produkt
HPLC (Methode 3): Rt =
5.88 min
MS (ESI+): m/z = 402 (M+H)+.
1H-NMR (400MHz, CDCl3): δ = 7.42 (s,
1H), 4.91 (m, 1H), 3.78 (s, 3H), 2.02-2.16 (m, 1H), 1.55-1.74 (m, 5H), 1.22-1.49
(m, 2H), 1.14 (d, 3H), 0.90 (d, 3H), 0.79 (d, 3H), 0.61-0.78 (m,
2H).15.4 g (47.1 mmol) of 2- {isopropyl [(trans-4-methylcyclohexyl) carbonyl] amino} thiophene-3-carboxylic acid methyl ester are initially charged in 308 ml of a 1: 1 mixture of chloroform: carbon tetrachloride and 21.2 g (119.0 mmol) of N are added Bromosuccinimide added. The mixture is stirred under reflux for 2.5 h. After cooling, the solvent is removed in vacuo with gentle heating. The residue is purified by flash chromatography on silica gel 60 (solvent: ethyl acetate: cyclohexane 1: 5) to give 13.8 g (72% of theory) of product
HPLC (Method 3): R t = 5.88 min
MS (ESI +): m / z = 402 (M + H) + .
1 H-NMR (400MHz, CDCl 3): δ = 7.42 (s, 1H), 4.91 (m, 1H), 3.78 (s, 3H), 2:02 to 2:16 (m, 1H), 1.55-1.74 (m, 5H ), 1.22-1.49 (m, 2H), 1.14 (d, 3H), 0.90 (d, 3H), 0.79 (d, 3H), 0.61-0.78 (m, 2H).
Beispiel 5AExample 5A
2-(Tetrahydro-2H-pyran-4-yl)aminothiophen-3-carbonsäuremethylester 2- (tetrahydro-2H-pyran-4-yl) aminothiophene-3-carbonsäuremethylester
2.0
g (12.7 mmol) 2-Aminothiophen-3-carbonsäuremethylester werden in 10
ml 1,2-Dichlorethan vorgelegt, 1.27 g (12.7 mmol) Tetrahydropyran-4-on
zugegeben und das Gemisch über
Nacht bei Raumtemperatur gerührt.
Anschließend
werden 5.39 g (25.4 mmol) Natriumtrisacetoxyborhydrid sowie 3.06
g (50.9 mmol) Essigsäure
zugegeben und das Gemisch bei 40°C über Nacht
gerührt.
Danach wird der Ansatz auf gesättigte Natriumhydrogencarbonatlösung geschüttet, die
organische Phase abgetrennt, die wässrige Phase dreimal mit Dichlormethan
extrahiert, die organischen Phasen vereinigt, über Natriumsulfat getrocknet,
filtriert und im Vakuum das Lösungsmittel
entfernt. Das Produkt wird durch Chromatographie an Kieselgel mit
Dichlormethan gereinigt. Ausbeute: 835 mg (26% d. Th.).
HPLC
(Methode 1): Rt = 4.33 min
MS (ESI-pos):
m/z = 242 (M+H)+ 2.0 g (12.7 mmol) of 2-aminothiophene-3-carboxylic acid methyl ester are initially charged in 10 ml of 1,2-dichloroethane, 1.27 g (12.7 mmol) of tetrahydropyran-4-one are added and the mixture is stirred at room temperature overnight. Subsequently, 5.39 g (25.4 mmol) of sodium trisacetoxyborohydride and 3.06 g (50.9 mmol) of acetic acid are added and the mixture is stirred at 40 ° C. overnight. Thereafter, the batch is poured onto saturated sodium bicarbonate solution, the organic phase separated, the aqueous phase extracted three times with dichloromethane, the organic phases combined, dried over sodium sulfate, filtered and the solvent removed in vacuo. The product is purified by chromatography on silica gel with dichloromethane. Yield: 835 mg (26% of theory).
HPLC (Method 1): R t = 4.33 min
MS (ESI-pos): m / z = 242 (M + H) +
Beispiel 6AExample 6A
2-[[(trans-4-Methylcyclohexyl)carbonyl](tetrahydro-2H-pyran-4-yl)amino]thiophen-3-carbonsäuremethylester 2 - [[(trans-4-methylcyclohexyl) carbonyl] (tetrahydro-2H-pyran-4-yl) amino] thiophene-3-carbonsäuremethylester
474
mg (1.96 mmol) des Amins aus Beispiel 5A und 1.5 ml trans-4-Methylcyclohexylcarbonsäurechlorid
werden zusammengegeben und das Gemisch über Nacht bei 90°C gerührt. Das
abgekühlte
Gemisch wird mit Essigsäureethylester
aufgenommen und viermal mit gesättigter Natriumhydrogencarbonatlösung extrahiert.
Das Produkt wird mittels präparativer
HPLC (Methode 2) gereinigt. Ausbeute: 261 mg (36% d. Th.).
HPLC
(Methode 1): Rt = 4.92 min
MS (ESI-pos):
m/z = 366 (M+H)+ 474 mg (1.96 mmol) of the amine from Example 5A and 1.5 ml of trans-4-methylcyclohexylcarboxylic acid chloride are combined and the mixture is stirred at 90 ° C. overnight. The cooled mixture is taken up in ethyl acetate and extracted four times with saturated sodium bicarbonate solution. The product is purified by preparative HPLC (Method 2). Yield: 261 mg (36% of theory).
HPLC (Method 1): R t = 4.92 min
MS (ESI-pos): m / z = 366 (M + H) +
Beispiel 7AExample 7A
5-Brom-2-[[(trans-4-methylcyclohexyl)carbonyl](tetrahydro-2H-pyran-4-yl)amino]thiophen-3-carbonsäuremethylester 5-bromo-2 - [[(trans-4-methylcyclohexyl) carbonyl] (tetrahydro-2H-pyran-4-yl) amino] thiophene-3-carbonsäuremethylester
338
mg (0.93 mmol) des Thiophens aus Beispiel 6A werden in 14 ml eines
1:1-Gemisches von Tetrachlorkohlenstoff und Chloroform vorgelegt,
823 mg (4.62 mmol) N-Bromsuccinimid zugegeben und das Gemisch 5
h unter Rückfluss
gerührt.
Der Ansatz wird mit Dichlormethan verdünnt und auf gesättigte Thiosulfatlösung gegeben.
Die organische Phase wird abgetrennt, die wässrige Phase mit Dichlormethan
extrahiert, die vereinigten organischen Phase mit gesättigter
Natriumchloridlösung
gewaschen, über
Natriumsulfat getrocknet, filtriert, im Vakuum das Lösungsmittel
entfernt und das Produkt mittels präparativer HPLC (Methode 2)
gereinigt. Ausbeute: 356 mg (87% d. Th.).
HPLC (Methode 3):
Rt = 5.52 min
MS (DCI-pos): m/z = 446
(M+H)+ 338 mg (0.93 mmol) of the thiophene from Example 6A are initially charged in 14 ml of a 1: 1 mixture of carbon tetrachloride and chloroform, 823 mg (4.62 mmol) of N-bromosuccinimide are added and the mixture is stirred under reflux for 5 hours. The reaction is diluted with dichloromethane and added to saturated thiosulphate solution. The organic phase is separated, the aqueous phase extracted with dichloromethane, the combined organic phase washed with saturated sodium chloride solution, dried over sodium sulfate, filtered, the solvent removed in vacuo and the product purified by preparative HPLC (Method 2). Yield: 356 mg (87% of theory).
HPLC (Method 3): R t = 5.52 min
MS (DCI pos): m / z = 446 (M + H) +
Beispiel 8AExample 8A
5-(3,3-Dimethylbut-1-in-1-yl)-2-{isopropyl[(trans-4-methylcyclohexyl)carbonyl]amino}thiophen-3-carbonsäuremethylester 5- (3,3-dimethylbut-1-yn-1-yl) -2- {isopropyl [(trans-4-methylcyclohexyl) carbonyl] amino} thiophene-3-carbonsäuremethylester
500.0
mg (1.24 mmol) 5-Brom-2-{isopropyl[(trans-4-methylcyclohexyl)carbonyl]amino}thiophen-3-carbonsäuremethylester,
439.0 mg (5.34 mmol, 4.3 equiv) 3,3-Dimethyl-1-butin, 892.8 mg (8.82
mmol, 7.1 equiv) Triethylamin, 32.6 mg (0.12 mmol, 0.1 equiv) Triphenylphosphin,
4.7 mg (0.02 mmol, 0.02 equiv) Kupfer-(I)-jodid werden in 5 ml N,N'-Dimethylformamid
vorgelegt und durch die Reaktionsmischung wird für 1 h Argon durchgeleitet.
Anschließend
fügt man
79.7 mg (0.09 mmol, 0.07 equiv) Tris(dibenrylidenaceton)dipalladium hinzu
und rührt
die Reaktionsmischung über
Nacht bei 60°C
in einem geschlossenen Reaktionsgefäß. Der Kolbeninhalt wird über Kieselguhr
filtriert und mittels präparativer
HPLC aufgereinigt. Man erhält
350.0 mg (70% d. Th.) Produkt
HPLC (Methode 3): Rt =
6.77 min
MS (DCI): m/z = 404 (M+H)+.
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 7.42 (s,
1H), 4.69-4.80 (m, 1H), 3.72 (s, 3H), 1.97-2.08 (m, 1H), 1.41-1.66 (m,
5H), 1.17-1.35 (m, 11H), 1.08 (d, 3H), 0.82 (d, 3H), 0.77 (d, 3H),
0.57-0.74 (m, 2H).500.0 mg (1.24 mmol) of methyl 5-bromo-2- {isopropyl [(trans-4-methylcyclohexyl) carbonyl] amino} thiophene-3-carboxylate, 439.0 mg (5.34 mmol, 4.3 equiv) of 3,3-dimethyl-1-butyne , 892.8 mg (8.82 mmol, 7.1 equiv) of triethylamine, 32.6 mg (0.12 mmol, 0.1 equiv) of triphenylphosphine, 4.7 mg (0.02 mmol, 0.02 equiv) of copper (I) iodide are initially charged in 5 ml of N, N'-dimethylformamide and argon is passed through the reaction mixture for 1 h. Then add 79.7 mg (0.09 mmol, 0.07 equiv) of tris (dibenzyl) acetal and the reaction mixture is stirred overnight at 60 ° C in a closed reaction vessel. The contents of the flask are filtered through kieselguhr and purified by preparative HPLC. 350.0 mg (70% of theory) of product are obtained
HPLC (Method 3): R t = 6.77 min
MS (DCI): m / z = 404 (M + H) + .
1 H-NMR (400MHz, DMSO-d 6 ): δ = 7.42 (s, 1H), 4.69-4.80 (m, 1H), 3.72 (s, 3H), 1.97-2.08 (m, 1H), 1.41-1.66 (m, 5H), 1.17-1.35 (m, 11H), 1.08 (d, 3H), 0.82 (d, 3H), 0.77 (d, 3H), 0.57-0.74 (m, 2H).
Beispiel 9AExample 9A
5-(Cyclopropylethinyl)-2-{isopropyl[(trans-4-methylcyclohexyl)carbonyl]amino}thiophen-3-carbonsäuremethylester 5- (cyclopropylethynyl) -2- {isopropyl [(trans-4-methylcyclohexyl) carbonyl] amino} thiophene-3-carbonsäuremethylester
500.0
mg (1.24 mmol) 5-Brom-2-{isopropyl[(trans-4-methylcyclohexyl)carbonyl]amino}thiophen-3-carbonsäuremethylester,
353.2 mg (5.34 mmol, 4.3 equiv) Ethinylcyclopropan, 892.8 mg (8.82
mmol, 7.1 equiv) Triethylamin, 32.6 mg (0.12 mmol, 0.1 equiv) Triphenylphosphin,
4.7 mg (0.02 mmol, 0.02 equiv) Kupfer-(I)-jodid werden in 5 ml N,N'-Dimethylformamid
vorgelegt und durch die Reaktionsmischung wird für 1 h Argon durchgeleitet.
Anschließend
fügt man
79.7 mg (0.09 mmol, 0.07 equiv) Tris(dibenzylidenaceton)dipalladium hinzu
und rührt
die Reaktionsmischung über
Nacht bei 60°C.
Der Kolbeninhalt wird über
Kieselguhr filtriert und mittels präparativer HPLC aufgereinigt.
Man erhält
263.0 mg (55% d. Th.) Produkt
HPLC (Methode 3): Rt =
6.14 min
MS (DCI): m/z = 388 (M+H)+.
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 7.41 (s,
1H), 4.66-4.80 (m, 1H), 3.72 (s, 3H), 1.94-2.05 (m, 1H), 1.39-1.65 (m,
6H), 1.17-1.35 (m, 2H), 1.08 (d, 3H), 0.86-0.07 (m, 2H), 0.72-0.85
(m, 8H), 0.50-0.72 (m, 2H).500.0 mg (1.24 mmol) of methyl 5-bromo-2- {isopropyl [(trans-4-methylcyclohexyl) carbonyl] amino} thiophene-3-carboxylate, 353.2 mg (5.34 mmol, 4.3 equiv) of ethynylcyclopropane, 892.8 mg (8.82 mmol, 7.1 equiv) triethylamine, 32.6 mg (0.12 mmol, 0.1 equiv) of triphenylphosphine, 4.7 mg (0.02 mmol, 0.02 equiv) of copper (I) iodide are initially charged in 5 ml of N, N'-dimethylformamide and the reaction mixture is stirred for 1 h Passed through argon. Subsequently, 79.7 mg (0.09 mmol, 0.07 equiv) of tris (dibenzylideneacetone) dipalladium are added and the reaction mixture is stirred overnight at 60.degree. The contents of the flask are filtered through kieselguhr and purified by preparative HPLC. This gives 263.0 mg (55% of theory) of product
HPLC (Method 3): R t = 6.14 min
MS (DCI): m / z = 388 (M + H) + .
1 H-NMR (400MHz, DMSO-d 6 ): δ = 7.41 (s, 1H), 4.66-4.80 (m, 1H), 3.72 (s, 3H), 1.94-2.05 (m, 1H), 1.39-1.65 (m, 6H), 1.17-1.35 (m, 2H), 1.08 (d, 3H), 0.86-0.07 (m, 2H), 0.72-0.85 (m, 8H), 0.50-0.72 (m, 2H).
Allgemeine Arbeitsvorschrift [A]: Sonogashira-Kupplung von Brom-thiophenen mit AlkinenGeneral working instructions [A]: Sonogashira coupling of bromo-thiophenes with alkynes
Unter Argon werden 0.25 mmol (1.0 Äquivalente) des Bromthiophens, 1.07 mmol (4.3 Äquivalente) Alkin, 1.76 mmol (7.1 Äquivalente) Triethylamin, 0.02 mmol (0.1 Äquivalente) Triphenylphosphin und 0.005 mmol (0.02 Äquivalente) Kupfer-(I)-jodid in 1 ml N,N'-Dimethylformamid gelöst. Man leitet 1 h bei RT Argon durch den Reaktionsansatz und fügt anschließend Tri(dibenzylidenaceton)dipalladium hinzu. Der Reaktionsansatz wird über Nacht bei 60°C in einem geschlossenen Reaktionsgefäß gerührt. Nach dem Erkalten flitriert man über Kieselguhr ab und reinigt mittels präparativer HPLC (RP-18 Säule, Laufmittel Acetonitril-Wasser Gradient) auf.Under Argon becomes 0.25 mmol (1.0 equivalent) of bromothiophene, 1.07 mmol (4.3 equivalents) of alkyne, 1.76 mmol (7.1 equivalents) Triethylamine, 0.02 mmol (0.1 equiv.) Triphenylphosphine and 0.005 mmol (0.02 equivalents) of copper (I) iodide in 1 ml of N, N'-dimethylformamide solved. The mixture is passed through the reaction mixture at RT argon for 1 h and then tri (dibenzylideneacetone) dipalladium is added added. The reaction mixture is over Night at 60 ° C stirred in a closed reaction vessel. After cooling, it is filtered one over kieselguhr and cleans by preparative HPLC (RP-18 column, Eluent acetonitrile-water gradient).
Die Beispiele 10A bis 18A werden in analoger Weise nach der allgemeinen Arbeitsvorschrift [A] aus den entsprechenden Ausgangsverbindungen hergestellt.The Examples 10A to 18A are analogously to the general Working instruction [A] from the corresponding starting compounds produced.
Beispiel 19AExample 19A
5-(3,3-Dimethylbut-1-in-1-yl)-2-[[(trans-4-methylcyclohexyl)carbonyl](tetrahydro-2H-pyran-4-yl)amino]thiophen-3-carbonsäuremethylester 5- (3,3-dimethylbut-1-yn-1-yl) -2 - [[(trans-4-methylcyclohexyl) carbonyl] (tetrahydro-2H-pyran-4-yl) amino] thiophene-3-carbonsäuremethylester
100
mg (0.23 mmol) des Bromids aus Beispiel 7A, 79 mg (0.97 mmol) 3,3-Dimethyl-1-butin,
162 mg (1.60 mmol) Triethylamin, 5.9 mg (0.02 mmol) Triphenylphosphin
und 0.9 mg (0.005 mmol) Kupfer(I)iodid werden in 1 ml N,N'-Dimethylformamid
vorgelegt, die Lösung
auf 60°C
erwärmt
und durch die warme Lösung
1 h lang Argon durchgeleitet. Anschließend werden 14 mg (0.016 mmol)
Tris(dibenzylidenaceton)dipalladium zugegeben und das Gemisch über Nacht
bei 60°C
unter Argon gerührt.
Der abgekühlte
Ansatz wird über
Kieselgur filtriert, das Kieselgur mit Acetonitril nachgewaschen
und das Produkt mittels präparativer
HPLC (Methode 2) gereinigt. Ausbeute: 54 mg (54% d. Th.).
HPLC
(Methode 3): Rt = 6.17 min
MS (ESIpos):
m/z = 446 (M+H)+ 100 mg (0.23 mmol) of the bromide from Example 7A, 79 mg (0.97 mmol) of 3,3-dimethyl-1-butyne, 162 mg (1.60 mmol) of triethylamine, 5.9 mg (0.02 mmol) of triphenylphosphine and 0.9 mg (0.005 mmol) Copper (I) iodide are introduced into 1 ml of N, N'-dimethylformamide, the solution is heated to 60 ° C. and argon is passed through the warm solution for 1 hour. Subsequently, 14 mg (0.016 mmol) of tris (dibenzylideneacetone) dipalladium are added and the mixture is stirred overnight at 60 ° C. under argon. The cooled mixture is filtered through kieselguhr, the diatomaceous earth is washed with acetonitrile and the product is purified by preparative HPLC (method 2). Yield: 54 mg (54% of theory).
HPLC (Method 3): R t = 6.17 min
MS (ESIpos): m / z = 446 (M + H) +
Beispiel 20AExample 20A
2-{(2-Methoxy-1-methylethylamino}-thiophen-3-carbonsäuremethylester 2 - {(2-methoxy-1-methylethylamino} -thiophene-3-carbonsäuremethylester
In
1,2-Dichlorethan werden 2.0 g (12.72 mmol) des 2-Aminothiophen-3-carbonsäuremethylester
vorgelegt, 1.12 g (12.72 mmol) Methoxyaceton zugegeben und das Gemisch über Nacht
bei Raumtemperatur gerührt.
Anschließend
werden 5.39 g (25.45 mmol) Natriumtriacetoxyborhydrid sowie 3.06
g (50.89 mmol) Essigsäure
zugegeben und das Gemisch über
Nacht bei 40°C
gerührt.
Dann wird der Ansatz abgekühlt,
vorsichtig mit gesättigter
Natriumhydrogencarbonatlösung
versetzt und die organische Phase abgetrennt. Die wässrige Phase
wird dreimal mit Dichlormethan extrahiert, alle organischen Phase
werden vereinigt, über
Natriumsulfat getrocknet, filtriert und im Vakuum wird das Lösungsmittelgemisch
entfernt. Das Produkt wird durch Chromatographie an Kieselgel (Laufmittel
Dichlormethan) sowie präparative
HPLC (Methode 2) gereinigt. Ausbeute: 254 mg (9% d. Th.).
HPLC
(Methode 1): Rt = 4.53 min
MS (ESI-pos):
m/z = 230 (M+H)+ 2.0 g (12.72 mmol) of methyl 2-aminothiophene-3-carboxylate are introduced into 1,2-dichloroethane, 1.12 g (12.72 mmol) of methoxyacetone are added and the mixture is stirred at room temperature overnight. Subsequently, 5.39 g (25.45 mmol) of sodium triacetoxyborohydride and 3.06 g (50.89 mmol) of acetic acid are added and the mixture is stirred overnight at 40.degree. Then the mixture is cooled, cautiously treated with saturated sodium bicarbonate solution and the organic phase separated. The aqueous phase is extracted three times with dichloromethane, all organic phase are combined, dried over sodium sulfate, filtered and the solvent mixture is removed in vacuo. The product is purified by chromatography on silica gel (mobile phase dichloromethane) and preparative HPLC (Method 2). Yield: 254 mg (9% of theory).
HPLC (Method 1): R t = 4.53 min
MS (ESI-pos): m / z = 230 (M + H) +
Beispiel 21AExample 21A
2-{(2-Methoxy-1-methylethyl)[(trans-4-methylcyclohexyl)carbonyl]amino}-thiophen-3-carbonsäuremethylester 2 - {(2-methoxy-1-methylethyl) [(trans-4-methylcyclohexyl) carbonyl] amino} thiophene-3-carbonsäuremethylester
277
mg (1.21 mmol) des Aminothiophens aus Beispiel 20A werden mit 0.3
ml trans-4-Methylcyclohexan-1-carbonsäurechlorid
versetzt und das Gemisch über
Nacht bei 90°C
Badtemperatur gerührt.
Anschließend
werden weitere 0.3 ml des Säurechlorids
zugegeben und für
11 h bei 90°C
gerührt.
Das Reaktionsgemisch wird in Ethylacetat aufgenommen, dreimal mit
gesättigter
Natriumhydrogencarbonatlösung
extrahiert, die organische Phase abgetrennt und über Natriumsulfat getrocknet,
flitriert und im Vakuum das Lösungsmittel entfernt.
Das Produtk wird mittels präparativer
HPLC (Methode 2) gereinigt. Ausbeute: 108 mg (25% d. Th.).
HPLC
(Methode 3): Rt = 4.58 min
MS (ESI-pos):
m/z = 354 (M+H)+ 277 mg (1.21 mmol) of the aminothiophene from Example 20A are mixed with 0.3 ml of trans-4-methylcyclohexane-1-carboxylic acid chloride and the mixture is stirred overnight at 90 ° C bath temperature. Then another 0.3 ml of the acid chloride are added and stirred for 11 h at 90 ° C. The reaction mixture is taken up in ethyl acetate, extracted three times with saturated sodium bicarbonate solution, the organic phase is separated off and dried over sodium sulfate, filtered and the solvent is removed in vacuo. The product is purified by preparative HPLC (Method 2). Yield: 108 mg (25% of theory).
HPLC (Method 3): R t = 4.58 min
MS (ESI-pos): m / z = 354 (M + H) +
Beispiel 22AExample 22A
5-Brom-2-{(2-methoxy-1-methylethyl)[(trans-4-methylcyclohexyl)carbonyl]amino}-thiophen-3-carbonsäuremethylester 5-bromo-2 - {(2-methoxy-1-methylethyl) [(trans-4-methylcyclohexyl) carbonyl] amino} thiophene-3-carbonsäuremethylester
105
mg (0.30 mmol) des Thiophens aus Beispiel 21A werden in 4 ml eines
1:1-Gemisches von Tetrachlorkohlenstoff und Chloroform vorgelegt,
132 mg (0.74 mmol) N-Bromsuccinimid zugegeben und das Gemisch 3
h unter Rückfluss
und anschließend über Nacht
bei Raumtemperatur gerührt.
Der Ansatz wird mit Dichlormethan verdünnt und das Produkt durch Chromatographie
an Kieselgel (Gradient: Dichlormethan zu Dichlormethan/Methanol
100:1 v/v) gereinigt. Ausbeute: 141 mg (95% d. Th.).
HPLC (Methode
4): Rt = 3.24 min
MS (ESI-pos): m/z
= 433 (M+H)+ 105 mg (0.30 mmol) of the thiophene from Example 21A are initially charged in 4 ml of a 1: 1 mixture of carbon tetrachloride and chloroform, 132 mg (0.74 mmol) of N-bromosuccinimide are added and the mixture is refluxed for 3 h and then overnight at room temperature touched. The batch is diluted with dichloromethane and the product is purified by chromatography on silica gel (gradient: dichloromethane to dichloromethane / methanol 100: 1 v / v). Yield: 141 mg (95% of theory).
HPLC (Method 4): R t = 3.24 min
MS (ESI-pos): m / z = 433 (M + H) +
Allgemeine Arbeitsvorschrif [B]: Alternative Methode der Sonogashira-Kupplung von 5-Bromthiophenen mit AlkinenGeneral working procedure [B]: Alternative method of Sonogashira coupling of 5-bromothiophenes with alkynes
Zu einer 0.1 M Lösung von 1.0 Äquivalenten des Bromthiophens in DMF werden 7.1 Äquivalente Triethylamin, 0.1 Äquivalente Triphenlyphosphin sowie 0.02 Äquivalente Kupfer(I)iodid gegeben. Durch diese Lösung wird für 15 Minuten Argon geleitet, dann werden 4.3 Äquivalente Alkin sowie 0.07 Äquivalente Tris(dibenrylidenaceton)dipalladium zugegeben und das Reaktionsgemisch über Nacht bei 65°C gerührt. Anschließend wird das Gemisch über Kieselgur filtriert und mittels präparativer HPLC (Methode 2) gereinigt.To a 0.1 M solution of 1.0 equivalents of bromothiophene in DMF become 7.1 equivalents of triethylamine, 0.1 equiv Triphenlyphosphine and 0.02 equivalents Copper (I) iodide given. Argon is passed through this solution for 15 minutes, then 4.3 equiv Alkyne and 0.07 equivalents Added tris (dibenzylidene) dipalladium and the reaction mixture overnight at 65 ° C touched. Subsequently, will the mixture over Diatomaceous earth filtered and by preparative HPLC (method 2) cleaned.
Folgende Beispiele werden nach der Allgemeinen Arbeitsvorschrift [B] hergestellt: The following examples are produced according to the general procedure [B]:
Beispiel 29AExample 29A
5-[3-(Acetylamino)-3-methylbut-1-in-1-yl]-2-[[(trans-4-methylcyclohexyl)carbonyl]-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)amino]thiophen-3-carbonsäuremethylester 5- [3- (acetylamino) -3-methylbut-1-yn-1-yl] -2 - [[(trans-4-methylcyclohexyl) carbonyl] - (tetrahydro-2H-pyran-4-yl) amino] thiophene -3-carbonsäuremethylester
50
mg (0.11 mmol) des Amins aus Beispiel 7A und 16 mg (0.12 mmol) Hünig Base
werden in 5 ml Tetrahydrofuran vorgelegt, mit 13 mg (0.12 mmol)
Essigsäureanhydrid
versetzt und das Gemisch über
Nacht bei Raumtemperatur gerührt.
Anschließend
werden die flüchtigen
Bestandteile im Vakuum entfernt und das Produkt mittels präparativer
HPLC (Methode 2) gereinigt. Ausbeute: 38 mg (66% d. Th.).
HPLC
(Methode 3): Rt = 4.63 min
MS (ESIpos):
m/z = 489 (M+H)+ 50 mg (0.11 mmol) of the amine from Example 7A and 16 mg (0.12 mmol) Hunig base are initially charged in 5 ml of tetrahydrofuran, admixed with 13 mg (0.12 mmol) of acetic anhydride and the mixture is stirred overnight at room temperature. The volatiles are then removed in vacuo and the product is purified by preparative HPLC (method 2). Yield: 38 mg (66% of theory).
HPLC (Method 3): R t = 4.63 min
MS (ESIpos): m / z = 489 (M + H) +
Beispiel 30AExample 30A
2-[[(trans-4-Methylcyclohexyl)carbonyl](tetrahydro-2H-pyran-4-yl)amino]-5-{3-methyl-3-[(methylsulfonyl)amino]but-1-in-1-yl}thiophen-3-carbonsäuremethylester 2 - [[(trans-4-methylcyclohexyl) carbonyl] (tetrahydro-2H-pyran-4-yl) amino] -5- {3-methyl-3 - [(methylsulfonyl) amino] but-1-yn-1- yl} thiophene-3-carbonsäuremethylester
25
mg (0.06 mmol) des Amins aus Beispiel 7A und 17 mg (0.17 mmol) Triethylamin
werden in 2 ml Dichlormethan vorgelegt, mit 16 mg (0.14 mmol) Methansulfonsäurechlorid
versetzt und das Gemisch 2 h bei Raumtemperatur gerührt. Anschließend werden
die flüchtigen
Bestandteile im Vakuum entfernt und das Produkt mittels präparativer
HPLC (Methode 2) gereinigt. Ausbeute: 16 mg (52% d. Th.).
HPLC
(Methode 5): Rt = 2.60 min
MS (ESIpos):
m/z = 525 (M+H)+ 25 mg (0.06 mmol) of the amine from Example 7A and 17 mg (0.17 mmol) of triethylamine are dissolved in 2 ml Submitted to dichloromethane, treated with 16 mg (0.14 mmol) of methanesulfonyl chloride and the mixture was stirred for 2 h at room temperature. The volatiles are then removed in vacuo and the product is purified by preparative HPLC (method 2). Yield: 16 mg (52% of theory).
HPLC (method 5): R t = 2.60 min
MS (ESIpos): m / z = 525 (M + H) +
Beispiel 31AExample 31A
2-({[(1R,2S,4R)-2-(Acetyloxy)-4-methylcyclohexyl]carbonyl}amino)thiophen-3-carbonsäuremethylester 2 - ({[(1R, 2S, 4R) -2- (acetyloxy) -4-methylcyclohexyl] carbonyl} amino) thiophene-3-carbonsäuremethylester
(1R,2S,4R)-2-(Acetyloxy)-4-methylcyclohexancarbonsäure wird
in Analogie zu WO 2004/052885 synthetisiert. 9.00 g (44.9 mmol)
(1R,2S,4R)-2-(Acetyloxy)-4-methylcyclohexancarbonsäure werden
in 50 ml Thionylchlorid gelöst
und 2 h bei Raumtemperatur gerührt.
Das Reaktionsgemisch wird im Vakuum zur Trockene eingedampft, in
90 ml Dioxan aufgenommen und mit 6.54 g (41.6 mmol) 2-Amino-5-phenylthiophen-3-carbonsäuremethylester
versetzt. Die Lösung
wird bei 90°C
für 30
Minuten gerührt.
Das abgekühlte
Reaktionsgemisch wird zwischen Ethylacetat und gesättigter
Natriumhydrogencarbonat-Lösung
verteilt. Die vereinten organischen Phasen werden über Magnesiumsulfat
getrocknet und im Vakuum eingedampft. Aus dem Rückstand erhält man nach der Reinigung über Kieselgel
60 mittels MPLC (Laufmittel: Cyclohexan/Ethylacetat 5/1) 5.66 g
(39% d. Th.) Produkt.
HPLC (Methode 1): Rt =
4.76 min
MS (DCI(NH3)): m/z = 357 (M+NH4)+
1H-NMR (300MHz, DMSO-d6): δ = 11.03
(s, 1H), 7.16 (d, 1H), 7.01 (d, 1H), 5.36-5.30 (m, 1H), 3.85 (s,
3H), 2.90-2.80 (m, 1H), 1.95-1.56 (m, 8H, darin: 1.93 (s, 3H)),
1.33-.20 (m, 1H), 1.12-0.95 (m, 1H), 0.96 (d, 3H)(1R, 2S, 4R) -2- (acetyloxy) -4-methylcyclohexanecarboxylic acid is synthesized in analogy to WO 2004/052885. 9.00 g (44.9 mmol) of (1R, 2S, 4R) -2- (acetyloxy) -4-methylcyclohexanecarboxylic acid are dissolved in 50 ml of thionyl chloride and stirred at room temperature for 2 h. The reaction mixture is evaporated to dryness in vacuo, taken up in 90 ml of dioxane and admixed with 6.54 g (41.6 mmol) of methyl 2-amino-5-phenylthiophene-3-carboxylate. The solution is stirred at 90 ° C for 30 minutes. The cooled reaction mixture is partitioned between ethyl acetate and saturated sodium bicarbonate solution. The combined organic phases are dried over magnesium sulfate and evaporated in vacuo. After purification over silica gel 60 by MPLC (mobile phase: cyclohexane / ethyl acetate 5/1), the residue gives 5.66 g (39% of theory) of product.
HPLC (Method 1): R t = 4.76 min
MS (DCI (NH 3 )): m / z = 357 (M + NH 4 ) +
1 H-NMR (300MHz, DMSO-d 6 ): δ = 11.03 (s, 1H), 7.16 (d, 1H), 7.01 (d, 1H), 5.36-5.30 (m, 1H), 3.85 (s, 3H ), 2.90-2.80 (m, 1H), 1.95-1.56 (m, 8H, where: 1.93 (s, 3H)), 1.33-.20 (m, 1H), 1.12-0.95 (m, 1H), 0.96 ( d, 3H)
Beispiel 32AExample 32A
2-[{[(1R,2S,4R)-2-(Acetyloxy)-4-methylcyclohexyl]carbonyl}(isopropyl)amino]thiophen-3-carbonsäuremethylester 2 - [{[(1R, 2S, 4R) -2- (acetyloxy) -4-methylcyclohexyl] carbonyl} (isopropyl) amino] thiophene-3-carbonsäuremethylester
5.66
g (16.7 mmol) der Verbindung aus Beispiel 31A, 13.22 g (50.0 mmol)
18-Krone-6 und 46.1 g (333 mmol) Kaliumcarbonat werden in 60 ml
N,N-Dimethylformamid vorgelegt und anschließend mit 33.2 ml (333 mmol)
2-Iodpropan versetzt. Die Reaktionsmischung wird über Nacht
bei 40°C
im geschlossenen Reaktionsgefäß gerührt. Das
abgekühlte
Reaktionsgemisch wird zwischen Ethylacetat und 2N Salzsäure verteilt,
die organische Phase wird mit Wasser gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet
und das Lösungsmittel
im Vakuum abgedampft. Dieses Rohprodukt wird nochmals analog der
bisherigen Arbeitsvorschrift umgesetzt. Nach der zweiten Umsetzung
wird der Rückstand über Kieselgel
60 mittels MPLC (Laufmittel: Cyclohexan/Ethylacetat 8/1 → 5/1) gereinigt
und es werden eine saubere und eine verunreinigte Fraktion isoliert.
Die Trennung der Mischfraktion über
die präparative
RP-HPLC ergibt mit einem Wasser/Acetonitril- Gradienten eine weitere saubere Produktfraktion.
Nach der Vereinigung der gereinigten Fraktionen werden 1.68 g (26%
d. Th.) Produkt erhalten.
HPLC (Methode 3): Rt =
4.85 min
MS (DCI(NH3)): m/z = 399 (M+NH4)+
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 7.56 (s,
1H), 7.41 (s, 1H), 5.09-5.03 (m, 1H), 4.75-4.62 (m, 1H), 3.75 (s,
3H), 2.35 (br d, 1H), 1.98-1.79 (m, 4H, darin: 1.95 (s, 3H)), 1.70-1.55
(m, 3H), 1.47-1.40 (m, 1H), 1.05 (d, 3H), 0.85-0.72 (m, 8H).5.66 g (16.7 mmol) of the compound from Example 31A, 13.22 g (50.0 mmol) of 18-crown-6 and 46.1 g (333 mmol) of potassium carbonate are initially charged in 60 ml of N, N-dimethylformamide and then treated with 33.2 ml (333 ml mmol) of 2-iodopropane. The reaction mixture is stirred overnight at 40 ° C in a closed reaction vessel. The cooled reaction mixture is partitioned between ethyl acetate and 2N hydrochloric acid, the organic phase is washed with water, dried over magnesium sulfate and the solvent evaporated in vacuo. This crude product is again implemented analogously to the previous work instructions. After the second reaction, the residue is purified over silica gel 60 using MPLC (eluent: cyclohexane / ethyl acetate 8/1 → 5/1) and a clean and a contaminated fraction are isolated. The separation of the mixed fraction on the preparative RP-HPLC with a water / acetonitrile gradient results in another clean product fraction. After combining the purified fractions, 1.68 g (26% of theory) of product are obtained.
HPLC (Method 3): R t = 4.85 min
MS (DCI (NH 3 )): m / z = 399 (M + NH 4 ) +
1 H-NMR (400MHz, DMSO-d 6 ): δ = 7.56 (s, 1H), 7.41 (s, 1H), 5.09-5.03 (m, 1H), 4.75-4.62 (m, 1H), 3.75 (s , 3H), 2.35 (br d, 1H), 1.98-1.79 (m, 4H, therein: 1.95 (s, 3H)), 1.70-1.55 (m, 3H), 1.47-1.40 (m, 1H), 1.05 ( d, 3H), 0.85-0.72 (m, 8H).
Beispiel 33AExample 33A
2-[{[(1R,2S,4R)-2-(Acetyloxy)-4-methylcyclohexyl]carbonyl}(isopropyl)amino]-5-bromthiophen-3-carbonsäuremethylester 2 - [{[(1R, 2S, 4R) -2- (acetyloxy) -4-methylcyclohexyl] carbonyl} (isopropyl) amino] -5-bromothiophene-3-carbonsäuremethylester
1.68
g (4.4 mmol) der Verbindung aus Beispiel 32A und 1.96 g (11.0 mmol)
N-Bromsuccinimid werden in 30 ml einer Mischung aus Chloroform/Tetrachlorkohlenstoff
1/1 unter Rückfluß über Nacht
gerührt.
Das Lösungsmittel
wird im Vakuum abgedampft und der Rückstand über Kieselgel 60 mittels MPLC
(Laufmittel: Cyclohexan/Ethylacetat 5:1) gereinigt. Es werden 1.7
g (83% d. Th.) Produkt erhalten.
HPLC (Methode 3): Rt = 5.39 min
MS (DCI(NH3)):
m/z = 477/479 (M+NH4)+
1H-NMR (300MHz, DMSO-d6): δ = 7.55 (s,
1H), 5.18-5.08 (m, 1H), 4.75-4.60 (m, 1H), 3.75 (s, 3H), 2.00-1.80 (m,
4H, darin 1.95 (s, 3H)), 1.70-1.52 (m, 3H), 1.48-1.35 (m, 1H), 1.10-0.70
(m, 11H, darin 1.03 (d, 3H)).1.68 g (4.4 mmol) of the compound from Example 32A and 1.96 g (11.0 mmol) of N-bromosuccinimide are stirred in 30 ml of a mixture of chloroform / carbon tetrachloride 1/1 under reflux overnight. The solvent is evaporated in vacuo and the residue is purified on silica gel 60 using MPLC (eluent: cyclohexane / ethyl acetate 5: 1). 1.7 g (83% of theory) of product are obtained.
HPLC (Method 3): R t = 5.39 min
MS (DCI (NH 3 )): m / z = 477/479 (M + NH 4 ) +
1 H-NMR (300MHz, DMSO-d 6): δ = 7.55 (s, 1H), 5:18 to 5:08 (m, 1H), 4.75-4.60 (m, 1H), 3.75 (s, 3H), 2.00-1.80 (m, 4H, therein 1.95 (s, 3H)), 1.70-1.52 (m, 3H), 1.48-1.35 (m, 1H), 1.10-0.70 (m, 11H, therein 1.03 (d, 3H)).
Beispiel 34AExample 34A
2-[{[(1R,2S,4R)-2-(Acetyloxy)-4-methylcyclohexyl]carbonyl}(isopropyl)amino]-5-(3-methylbut-1-in-1-yl)thiophen-3-carbonsäuremethylester 2 - [{[(1R, 2S, 4R) -2- (acetyloxy) -4-methylcyclohexyl] carbonyl} (isopropyl) amino] -5- (3-methylbut-1-yn-1-yl) thiophene-3- carbonsäuremethylester
60.0
mg (130 μmol)
der Verbindung aus Beispiel 33A, 129 μl (0.93 mmol) Triethylamin,
3.4 mg (13.0 μmol)
Triphenylphosphin, 0.5 mg (2.6 μmol)
Kupfer(I)iodid und 8.4 mg (9.1 μmol)
Tris(dibenrylidenaceton)dipalladium werden in 1 ml N,N-Dimethylformamid
unter Argon vorgelegt, 38.7 mg (560 μmol) 3-Methyl-1-butin werden
zugegeben und im geschlossenen Reaktionsgefäß bei 60°C über Nacht nachgerührt. Zur
abgekühlten Reaktion
wird Ethylacetat zugegeben, mehrmals mit Wasser und einmal mit gesättigter
Natriumchlorid-Lösung gewaschen,
die organische Phase über
Kieselgel 60/Magnesiumsulfat filtriert und das Lösungsmittel wird im Vakuum
abgedampft. Der Rückstand
wird über
Kieselgel 60 mittels MPLC (Laufmittel: Cyclohexan/Ethylacetat 8/1 → 5/1) vorgereinigt
und nach nochmaliger Trennung über
die präparative
RP-HPLC (Wasser/Acetonitril-Gradient) werden 41.7 mg (71% d. Th.)
Produkt erhalten.
HPLC (Methode 3): Rt =
5.61 min
MS (ESI+): m/z = 448 (M+H)+
1H-NMR (300MHz, DMSO-d6): δ = 7.44 (s,
1H), 5.18-5.08 (m, 1H), 4.78-4.63 (m, 1H), 3.73 (s, 3H), 2.94-2.80 (m,
1H), 2.50-2.38 (m, 1H), 1.80-2.02 (m, 4H, darin: 1.94 (s, 3H)),
1.52-1.70 (m, 3H), 1.47-1.36 (m, 1H), 1.22 (d, 6H), 1.04 (d, 3H),
0.97-0.68 (m, 8H).60.0 mg (130 μmol) of the compound from Example 33A, 129 μl (0.93 mmol) triethylamine, 3.4 mg (13.0 μmol) triphenylphosphine, 0.5 mg (2.6 μmol) copper (I) iodide and 8.4 mg (9.1 μmol) tris (dibenzylideneacetone) Dipalladium be presented in 1 ml of N, N-dimethylformamide under argon, 38.7 mg (560 .mu.mol) of 3-methyl-1-butyne are added and stirred in a closed reaction vessel at 60 ° C overnight. Ethyl acetate is added to the cooled reaction, washed several times with water and once with saturated sodium chloride solution, the organic phase is filtered through silica gel 60 / magnesium sulfate and the solvent is evaporated in vacuo. The residue is prepurified on silica gel 60 using MPLC (mobile phase: cyclohexane / ethyl acetate 8/1 → 5/1) and, after repeated separation via preparative RP-HPLC (water / acetonitrile gradient), 41.7 mg (71% of theory) of th. ) Product received.
HPLC (Method 3): R t = 5.61 min
MS (ESI +): m / z = 448 (M + H) +
1 H-NMR (300MHz, DMSO-d 6 ): δ = 7.44 (s, 1H), 5.18-5.08 (m, 1H), 4.78-4.63 (m, 1H), 3.73 (s, 3H), 2.94-2.80 (m, 1H), 2.50-2.38 (m, 1H), 1.80-2.02 (m, 4H, therein: 1.94 (s, 3H)), 1.52-1.70 (m, 3H), 1.47-1.36 (m, 1H) , 1.22 (d, 6H), 1.04 (d, 3H), 0.97-0.68 (m, 8H).
Beispiel 35AExample 35A
2-[{[(1R,2S,4R)-2-(Acetyloxy)-4-methylcyclohexyl]carbonyl}(isopropyl)amino]-5-(cyclopropylethinyl)thiophen-3-carbonsäuremethylester 2 - [{[(1R, 2S, 4R) -2- (acetyloxy) -4-methylcyclohexyl] carbonyl} (isopropyl) amino] -5- (cyclopropylethynyl) thiophen-3-carbonsäuremethylester
Die
Verbindung wird analog der Vorschrift des Beispiels 34A aus 60.0
mg (130 μmmol)
der Verbindung aus Beispiel 33A und 37.0 mg (560 μmol) Ethinylcyclopropan
mit 37.2 mg (64% d. Th.) erhalten.
HPLC (Methode 1): Rt = 5.40 min
MS (ESI+): m/z = 446 (M+H)+
1H-NMR (300MHz,
DMSO-d6): δ = 7.44 (s, 1H), 5.20-5.05 (m,
1H), 4.76-4.62 (m, 1H), 3.72 (s, 3H), 2.48-2.37 (m, 1H), 2.01-1.79
(m, 4H, darin: 1.95 (s, 3H)), 1.78-1.52 (m, 4H), 1.46-1.34 (m, 1H), 1.04
(d, 3H), 0.98-0.68 (m, 11H).The compound is obtained analogously to the procedure of Example 34A from 60.0 mg (130 μmol) of the compound from Example 33A and 37.0 mg (560 μmol) of ethynylcyclopropane with 37.2 mg (64% of theory).
HPLC (Method 1): R t = 5.40 min
MS (ESI +): m / z = 446 (M + H) +
1 H-NMR (300MHz, DMSO-d 6 ): δ = 7.44 (s, 1H), 5.20-5.05 (m, 1H), 4.76-4.62 (m, 1H), 3.72 (s, 3H), 2.48-2.37 (m, 1H), 2.01-1.79 (m, 4H, therein: 1.95 (s, 3H)), 1.78-1.52 (m, 4H), 1.46-1.34 (m, 1H), 1.04 (d, 3H), 0.98 -0.68 (m, 11H).
Beispiel 36AExample 36A
2-[{[(1R,2S,4R)-2-(Acetyloxy)-4-methylcyclohexyl]carbonyl}(isopropyl)amino]-5-(4-hydroxy-3,3-dimethylbut-1-in-1-yl)thiophen-3-carbonsäuremethylester 2 - [{[(1R, 2S, 4R) -2- (acetyloxy) -4-methylcyclohexyl] carbonyl} (isopropyl) amino] -5- (4-hydroxy-3,3-dimethylbut-1-yn-1- yl) thiophen-3-carbonsäuremethylester
100
mg (217 μmol)
der Verbindung aus Beispiel 33A, 5.7 mg (22.0 μmol) Triphenylphosphin, 0.8
mg (4 μmol)
Kupfer(I)iodid und 4.0 mg (4 μmol)
Tris(dibenrylidenaceton)dipalladium werden in 1 ml N,N-Dimethylformamid
unter Argon vorgelegt, 214 μl
(1.54 mmol) Triethylamin und 42.6 mg (0.434 mmol) 2,2-Dimethylpent-3-in-1-ol
(X. Creary, J. Am. Chem. Soc. 1977, 99, 7632-7639) werden zugegeben und im geschlossenen Reaktionsgefäß bei 75°C 4 h gerührt. Das
Reaktionsgemisch wird zwischen tert.-Butylmethylether und 2N Salzsäure verteilt,
die organische Phase wird über
Natriumchlorid getrocknet, dekantiert und zur Trockene eingedampft.
Der Rückstand
wird über
Kieselgel 60 mittels Vakuumflashchromatographie (Laufmittel: Cyclohexan/Ethylacetat
85/15 – 66:33)
gereinigt. Es werden 103 mg (99% d. Th.) Produkt erhalten.
HPLC
(Methode 3): Rt = 4.91 min
MS (ESI+):
m/z = 478 (M+H)+
1H-NMR
(300MHz, DMSO-d6): δ = 7.42 (s, 1H), 5.18-5.15 (m,
1H), 5.08 (t, 1H), 4.78-4.67 (m, 1H), 3.73 (s, 3H), 3.38-3.28 (m,
2H), 2.43 (br d, 1H), 2.03-1.83 (m, 4H, darin 1.94 (s, 3H)), 1.70-1.53 (m, 3H), 1.48-1.38
(m, 1H), 1.25-0.70 (m, 17 H, darin 1.20 (s, 6H), 1.03 (d, 3H), 0.77/0.75
(Rotamere, 2 d, 3H)).100 mg (217 μmol) of the compound from Example 33A, 5.7 mg (22.0 μmol) of triphenylphosphine, 0.8 mg (4 μmol) of copper (I) iodide and 4.0 mg (4 μmol) of tris (dibenzylideneacetone) dipalladium are dissolved in 1 ml of N, N Dimethylformamide under argon, 214 μl (1.54 mmol) of triethylamine and 42.6 mg (0.434 mmol) of 2,2-dimethylpent-3-yn-1-ol (X. Creary, J. Am. Chem. Soc. 1977, 99, 7632-7639) are added and stirred in a closed reaction vessel at 75 ° C for 4 h. The reaction mixture is partitioned between tert-butyl methyl ether and 2N hydrochloric acid, the organic phase is dried over sodium chloride, decanted and evaporated to dryness. The residue is purified on silica gel 60 by means of vacuum flash chromatography (eluent: cyclohexane / ethyl acetate 85/15 - 66:33). There are obtained 103 mg (99% of theory) of product.
HPLC (Method 3): R t = 4.91 min
MS (ESI +): m / z = 478 (M + H) +
1 H-NMR (300MHz, DMSO-d 6 ): δ = 7.42 (s, 1H), 5.18-5.15 (m, 1H), 5.08 (t, 1H), 4.78-4.67 (m, 1H), 3.73 (s , 3H), 3.38-3.28 (m, 2H), 2.43 (br d, 1H), 2.03-1.83 (m, 4H, therein 1.94 (s, 3H)), 1.70-1.53 (m, 3H), 1.48-1.38 (m, 1H), 1.25-0.70 (m, 17H, 1.20 (s, 6H), 1.03 (d, 3H), 0.77 / 0.75 (rotamers, 2 d, 3H)).
Beispiel 37AExample 37A
5-(4-Hydroxy-3,3-dimethylbut-1-in-1-yl)-2-{isopropyl[(trans-4-methylcyclohexyl)carbonyl]amino}thiophen-3-carbonsäuremethylester 5- (4-hydroxy-3,3-dimethylbut-1-yn-1-yl) -2- {isopropyl [(trans-4-methylcyclohexyl) carbonyl] amino} thiophene-3-carbonsäuremethylester
100
mg (249 μmol)
der Verbindung aus Beispiel 4A, 6.5 mg (25 μmol) Triphenylphosphin, 0.95
mg (5 μmol)
Kupfer(I)iodid und 4.5 mg (5 μmol)
Tris(dibenzylidenaceton)dipalladium werden in 1 ml N,N-Dimethylformamid
unter Argon vorgelegt, 245 μl
(1.76 mmol) Triethylamin und 36.5 mg (0.373 mmol) 2,2-Dimethylpent-3-in-1-ol
werden zugegeben und im geschlossenen Reaktionsgefäß bei 90°C 6 h gerührt. Das
Reaktionsgemisch wird zwischen tert.-Butylmethylether und 2N Salzsäure verteilt,
die organische Phase wird über
Natriumchlorid getrocknet, dekantiert und zur Trockene eingedampft.
Der Rückstand
wird über
Kieselgel 60 mittels Vakuumflashchromatographie (Laufmittel: Petrolether/Ethylacetat
85/15 – 70:30)
gereinigt. Es werden 50 mg (43% d. Th.) Produkt erhalten.
HPLC
(Methode 3): Rt = 5.24 min
MS (DCI):
m/z = 420 (M+H)+
1H-NMR
(400MHz, DMSO-d6): δ = 7.42 (s, 1H), 5.05 (t, 1H),
4.80-4.70 (m, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.40-3.27 (m, 2H), 2.10-1.95 (m,
1H), 1.65-0.60 (m, 24 H, darin 1.20 (s, 6H), 0.81 (d, 3H), 0.77
(d, 3H)).100 mg (249 μmol) of the compound from Example 4A, 6.5 mg (25 μmol) of triphenylphosphine, 0.95 mg (5 μmol) of copper (I) iodide and 4.5 mg (5 μmol) of tris (dibenzylideneacetone) dipalladium are dissolved in 1 ml of N, N Dimethylformamide presented under argon, 245 .mu.l (1.76 mmol) of triethylamine and 36.5 mg (0.373 mmol) of 2,2-dimethylpent-3-in-1-ol are added and stirred in a closed reaction vessel at 90 ° C for 6 h. The reaction mixture is partitioned between tert-butyl methyl ether and 2N hydrochloric acid, the organic phase is dried over sodium chloride, decanted and evaporated to dryness. The residue is purified on silica gel 60 by means of vacuum flash chromatography (eluent: petroleum ether / ethyl acetate 85/15 - 70:30). It will be 50 mg (43% of theory) product.
HPLC (Method 3): R t = 5.24 min
MS (DCI): m / z = 420 (M + H) +
1 H-NMR (400MHz, DMSO-d 6 ): δ = 7.42 (s, 1H), 5.05 (t, 1H), 4.80-4.70 (m, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.40-3.27 (m , 2H), 2.10-1.95 (m, 1H), 1.65-0.60 (m, 24H, 1.20 (s, 6H), 0.81 (d, 3H), 0.77 (d, 3H)).
Allgemeine Arbeitsvorschrift [C]: Sonogashira-Kupplung der Verbindung aus Beispiel 33A mit AlkinenGeneral working instructions [C]: Sonogashira coupling of the compound of Example 33A with alkynes
130 μmol (1.0 Äquivalent) der Verbindung aus Beispiel 33A, 925 μmol (7.1 Äquivalente) Triethylamin, 13.0 μmol (0.1 Äquivalente) Triphenylphosphin, 2.6 μmol (0.02 Äquivalente) Kupfer(I)iodid und 9.1 μmol (0.07 Äquivalente) Tris(dibenrylidenaceton)dipalladium werden in 1 ml N,N-Dimethylformamid unter Argon vorgelegt, 560 μmol (4.3 Äquivalente) Alkin werden zugegeben und im geschlossenen Reaktionsgefäß bei 60°C über Nacht nachgerührt. Zur abgekühlten Reaktion wird Ethylacetat zugegeben, mehrmals mit Wasser und einmal mit gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen, die organische Phase über Kieselgur filtriert und das Lösungsmittel wird im Vakuum abgedampft. Der Rückstand wird über die präparative RP-HPLC (Wasser/Acetonitril-Gradient) gereinigt.130 μmol (1.0 equivalent) the compound of Example 33A, 925 μmol (7.1 equivalents) of triethylamine, 13.0 μmol (0.1 equivalent) Triphenylphosphine, 2.6 μmol (0.02 equivalents) Copper (I) iodide and 9.1 μmol (0.07 equivalents) Tris (dibenzylideneacetone) dipalladium are dissolved in 1 ml of N, N-dimethylformamide submitted under argon, 560 .mu.mol (4.3 equivalents) Alkyne are added and in a closed reaction vessel at 60 ° C overnight stirred. To the cooled Reaction is added ethyl acetate, several times with water and once with saturated Sodium chloride solution washed, the organic phase over Diatomaceous earth filtered and the solvent is evaporated in vacuo. The residue will over the preparative RP-HPLC (water / acetonitrile gradient) cleaned.
Folgende Beispiele werden nach der Allgemeinen Arbeitsvorschrift [C] hergestellt: The following examples are prepared according to General Procedure [C]:
Ausführungsbeispieleembodiments
Beispiel 1example 1
5-(3,3-Dimethylbut-1-in-1-yl)-2-{isopropyl[(trans-4-methylcyclohexyl)carbonyl]amino} thiophen-3-carbonsäure 5- (3,3-Dimethylbut-1-yn-1-yl) -2- {isopropyl [(trans-4-methylcyclohexyl) carbonyl] amino} thiophene-3-carboxylic acid
70.0
mg (0.17 mmol) 5-(3,3-Dimethylbut-1-in-1-yl)-2-{isopropyl[(trans-4-methylcyclohexyl)carbonyl]amino}thiophen-3-carbonsäuremethylester
werden in 1 ml Dioxan gelöst.
Man gibt 1 ml einer wässrigen
1N Lithiumhydroxid-Lösung
hinzu und rührt
2 h bei RT. Die Reaktionsmischung wird angesäuert und im Vakuum unter gelindem
Erwärmen
das Dioxan abgezogen Das Restvolumen wird mit Acetonitril und Dimethylsulfoxid verdünnt und
mittels präperativer
HPLC (RP-18 Säule,
Laufmittel: Acetonitril-Wasser Gradient 95:5 → 5:95) aufgereinigt. Man erhält 31 mg
(46% d. Th.) Produkt.
HPLC (Methode 3): Rt =
5.89 min
MS (ESIpos): m/z = 390 (M+H)+.
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 13.17
(br s, 1H), 7.37 (s, 1H), 4.66-4.83 (m, 1H), 1.96-2.12 (m, 1H), 1.39-1.69
(m, 5H), 1.16-1.34 (m, 11H), 1.09 (d, 3H), 0.85 (d, 3H), 0.77 (d,
3H), 0.53-0.73 (m, 2H).70.0 mg (0.17 mmol) of 5- (3,3-dimethylbut-1-yn-1-yl) -2- {isopropyl [(trans-4-methylcyclohexyl) carbonyl] amino} thiophene-3-carboxylic acid methyl ester are dissolved in 1 ml of dioxane solved. 1 ml of an aqueous 1N lithium hydroxide solution is added and the mixture is stirred at RT for 2 h. The reaction mixture is acidified and the dioxane is stripped off in vacuo with gentle heating. The residual volume is diluted with acetonitrile and dimethyl sulfoxide and purified by means of preparative HPLC (RP-18 column, eluent: acetonitrile-water gradient 95: 5 → 5:95). This gives 31 mg (46% of theory) of product.
HPLC (Method 3): R t = 5.89 min
MS (ESIpos): m / z = 390 (M + H) +.
1 H-NMR (400MHz, DMSO-d 6 ): δ = 13.17 (br s, 1H), 7.37 (s, 1H), 4.66-4.83 (m, 1H), 1.96-2.12 (m, 1H), 1.39- 1.69 (m, 5H), 1.16-1.34 (m, 11H), 1.09 (d, 3H), 0.85 (d, 3H), 0.77 (d, 3H), 0.53-0.73 (m, 2H).
Beispiel 2Example 2
5-(Cyclopropylethinyl)-2-{isopropyl[(trans-4-methylcyclohexyl)carbonyl]amino}thiophen-3-carbonsäure 5- (cyclopropylethynyl) -2- {isopropyl [(trans-4-methylcyclohexyl) carbonyl] amino} thiophene-3-carboxylic acid
70.0
mg (0.18 mmol) 5-(Cyclopropylethinyl)-2-{isopropyl[(trans-4-methylcyclohexyl)carbonyl]amino}thiophen-3-carbonsäuremethylester
werden in 1 ml Dioxan gelöst.
Man gibt 1 ml einer wässrigen
1N Lithiumhydroxid-Lösung
hinzu und rührt
2 h bei RT. Die Reaktionsmischung wird angesäuert und im Vakuum unter gelindem
Erwärmen
das Dioxan abgezogen Das Restvolumen wird mit Acetonitril und Dimethylsulfoxid
verdünnt
und mittels präperativer
HPLC (RP-18 Säule,
Laufmittel: Acetonitril-Wasser Gradient 95:5 → 5:95) aufgereinigt. Man erhält 40 mg
(59% d. Th.) Produkt.
HPLC (Methode 3): Rt =
5.45 min
MS (ESIpos): m/z = 374 (M+H)+.
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 13.17
(br s, 1H), 7.39 (s, 1H), 4.63-4.83 (m, 1H), 1.94-2.11 (m, 1H), 1.36-1.67
(m, 6H), 1.15-1.34 (m, 2H), 1.08 (d, 3H), 0.89-0.97 (m, 2H), 0.85
(d, 3H), 0.74-0.82
(m, 5H), 0.52-0.73 (m, 2H).70.0 mg (0.18 mmol) of methyl 5- (cyclopropylethynyl) -2- {isopropyl [(trans-4-methylcyclohexyl) carbonyl] amino} thiophene-3-carboxylate are dissolved in 1 ml of dioxane. 1 ml of an aqueous 1N lithium hydroxide solution is added and the mixture is stirred at RT for 2 h. The reaction mixture is acidified and the dioxane is stripped off in vacuo with gentle heating. The residual volume is diluted with acetonitrile and dimethyl sulfoxide and purified by means of preparative HPLC (RP-18 column, eluent: acetonitrile-water gradient 95: 5 → 5:95). 40 mg (59% of theory) of product are obtained.
HPLC (Method 3): R t = 5.45 min
MS (ESIpos): m / z = 374 (M + H) + .
1 H-NMR (400MHz, DMSO-d 6 ): δ = 13.17 (br s, 1H), 7.39 (s, 1H), 4.63-4.83 (m, 1H), 1.94-2.11 (m, 1H), 1.36- 1.67 (m, 6H), 1.15-1.34 (m, 2H), 1.08 (d, 3H), 0.89-0.97 (m, 2H), 0.85 (d, 3H), 0.74-0.82 (m, 5H), 0.52- 0.73 (m, 2H).
Beispiel 3Example 3
5-(Cyclohexylethinyl)-2-{isopropyl[(trans-4-methylcyclohexyl)carbonyl]amino}thiophen-3-carbonsäure 5- (cyclohexylethynyl) -2- {isopropyl [(trans-4-methylcyclohexyl) carbonyl] amino} thiophene-3-carboxylic acid
70
mg (0.16 mmol) der Verbindung aus Beispiel 10A werden in 1.0 ml
Dioxan gelöst
und mit 1.0 ml einer wässrigen
1N Lithiumhydroxid-Lösung
versetzt. Der Reaktionsansatz wird 2 h bei RT gerührt und
anschließend
wie in Beispiel 1 beschrieben aufgearbeitet. Nach präperativer
HPLC (RP-18 Säule,
Laufmittel: Acetonitril-Wasser Gradient 95:5 → 5:95) erhält man 10.0 mg (12% d. Th.)
Produkt.
HPLC (Methode 3): Rt = 6.38
min
MS (ESIpos): m/z = 416.1 (M+H)+.
1H-NMR (400MHz, CD3OD): δ = 7.38 (s,
1H), 2.60-2.72 (m, 1H), 2.09-2.22 (m, 1H), 1.24-1.96 (m, 18H), 1.18 (d,
3H), 0.96 (d, 3H), 0.82 (d, 3H), 0.62-0.79 (m, 2H).70 mg (0.16 mmol) of the compound from Example 10A are dissolved in 1.0 ml of dioxane and admixed with 1.0 ml of an aqueous 1N lithium hydroxide solution. The reaction mixture is stirred for 2 h at RT and then worked up as described in Example 1. After preparative HPLC (RP-18 column, eluent: acetonitrile-water gradient 95: 5 → 5:95), 10.0 mg (12% of theory) of product are obtained.
HPLC (Method 3): R t = 6.38 min
MS (ESIpos): m / z = 416.1 (M + H) + .
1 H-NMR (400 MHz, CD 3 OD): δ = 7.38 (s, 1H), 2.60-2.72 (m, 1H), 2.09-2.22 (m, 1H), 1.24-1.96 (m, 18H), 1.18 ( d, 3H), 0.96 (d, 3H), 0.82 (d, 3H), 0.62-0.79 (m, 2H).
Beispiel 4Example 4
2-{Isopropyl[(trans-4-methylcyclohexyl)carbonyl]amino}-5-(3-methylbut-1-in-1-yl)thiophen-3-carbonsäure 2- {isopropyl [(trans-4-methylcyclohexyl) carbonyl] amino} -5- (3-methylbut-1-yn-1-yl) thiophene-3-carboxylic acid
Die
51 mg (0.13 mmol) der Verbindung aus Beispiel 11A werden in 1.0
ml Dioxan gelöst
und mit 1.0 ml einer wässrigen
1N Lithiumhydroxid-Lösung
versetzt. Der Reaktionsansatz wird 18 h bei RT gerührt und anschließend mittels
präparativer
HPLC (RP-18 Säule,
Laufmittel: Acetonitril-Wasser
Gradient 95:5 → 5:95) aufgereinigt.
Man erhält
42 mg (85% d. Th.) Produkt.
HPLC (Methode 1): Rt =
5.64 min
MS (ES-): m/z = 374.0 (M–H)–.
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 13.2 (br.
s, 1H), 7.39 (s, 1H), 4.67-4.82 (m, 1H), 2.77-2.92 (m, 1H), 1.96-2.11 (m,
1H), 1.35-1.68 (m, 5H), 1.14-1.32 (m, 8H), 1.09 (d, 3H), 0.85 (d,
3H), 0.77 (d, 3H), 0.55-0.73 (m, 2H).The 51 mg (0.13 mmol) of the compound from Example 11A are dissolved in 1.0 ml of dioxane and admixed with 1.0 ml of an aqueous 1N lithium hydroxide solution. The reaction mixture is stirred for 18 h at RT and then purified by preparative HPLC (RP-18 column, eluent: acetonitrile-water gradient 95: 5 → 5:95). 42 mg (85% of theory) of product are obtained.
HPLC (Method 1): R t = 5.64 min
MS (ES): m / z = 374.0 (M-H) - .
1 H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ): δ = 13.2 (br.s, 1H), 7.39 (s, 1H), 4.67-4.82 (m, 1H), 2.77-2.92 (m, 1H), 1.96 -2.11 (m, 1H), 1.35-1.68 (m, 5H), 1.14-1.32 (m, 8H), 1.09 (d, 3H), 0.85 (d, 3H), 0.77 (d, 3H), 0.55-0.73 (m, 2H).
Beispiel 5Example 5
5-(3-Hydroxy-3-methylbut-1-in-1-yl)-2-{isopropyl[(trans-4-methylcyclohexyl)carbonyl]amino}thiophen-3-carbonsäure 5- (3-hydroxy-3-methylbut-1-yn-1-yl) -2- {isopropyl [(trans-4-methylcyclohexyl) carbonyl] amino} thiophene-3-carboxylic acid
95
mg (0.23 mmol) der Verbindung aus Beispiel 12A werden in 1.0 ml
Dioxan gelöst
und mit 1.0 ml einer wässrigen
1N Lithiumhydroxid-Lösung
versetzt. Der Reaktionsansatz wird 18 h bei RT gerührt und
anschließend
mittels präparativer
HPLC (RP-18 Säule,
Laufmittel: Acetonitril-Wasser Gradient 95:5 → 5:95) aufgereinigt. Man erhält 67 mg
(73% d. Th.) Produkt.
HPLC (Methode 1): Rt =
4.62 min
MS (ES-): m/z = 390.0 (M–H)–.
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 13.2 (br
s, 1H), 7.42 (s, 1H), 5.58 (nr s, 1H), 4.67-4.83 (m, 1H), 1.96-2.11 (m,
1H), 1.53-1.69 (m, 4H), 1.37-1.53 (m, 7H), 1.17-1.33 (m, 2H), 1.09
(d, 3H), 0.86 (d, 3H), 0.77 (d, 3H), 0.55-0.73 (m, 2H).95 mg (0.23 mmol) of the compound from Example 12A are dissolved in 1.0 ml of dioxane and admixed with 1.0 ml of an aqueous 1N lithium hydroxide solution. The reaction mixture is stirred for 18 h at RT and then purified by preparative HPLC (RP-18 column, eluent: acetonitrile-water gradient 95: 5 → 5:95). 67 mg (73% of theory) of product are obtained.
HPLC (Method 1): R t = 4.62 min
MS (ES): m / z = 390.0 (M-H) - .
1 H-NMR (400MHz, DMSO-d 6 ): δ = 13.2 (br s, 1H), 7.42 (s, 1H), 5.58 (nr s, 1H), 4.67-4.83 (m, 1H), 1.96-2.11 (m, 1H), 1.53-1.69 (m, 4H), 1.37-1.53 (m, 7H), 1.17-1.33 (m, 2H), 1.09 (d, 3H), 0.86 (d, 3H), 0.77 (i.e. , 3H), 0.55-0.73 (m, 2H).
Beispiel 6Example 6
5-(3-Amino-3-methylbut-1-in-1-yl)-2-{isopropyl[(trans-4-methylcyclohexyl)carbonyl]amino}thiophen-3-carbonsäure 5- (3-amino-3-methylbut-1-yn-1-yl) -2- {isopropyl [(trans-4-methylcyclohexyl) carbonyl] amino} thiophene-3-carboxylic acid
93
mg (0.23 mmol) der Verbindung aus Beispiel 13A werden in 1.0 ml
Dioxan gelöst
und mit 1.0 ml einer wässrigen
1N Lithiumhydroxid-Lösung
versetzt. Der Reaktionsansatz wird 18 h bei RT gerührt und
anschließend
mittels präparativer
HPLC (RP-18 Säule,
Laufmittel: Acetonitril-Wasser Gradient 95:5 → 5:95) aufgereinigt. Man erhält 37 mg
(41% d. Th.) Produkt.
HPLC (Methode 1): Rt =
4.00 min
MS (ES-): m/z = 389.1 (M–H)–.
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 8.16 (s,
2H), 7.39 (s, 1H), 4.67-4.78 (m, 1H), 2.02-2.13 (m, 1H), 1.16-1.72 (m,
13H), 1.08 (d, 3H), 0.87 (d, 3H), 0.77 (d, 3H), 0.52-0.72 (m, 2H).93 mg (0.23 mmol) of the compound from Example 13A are dissolved in 1.0 ml of dioxane and admixed with 1.0 ml of an aqueous 1N lithium hydroxide solution. The reaction mixture is stirred for 18 h at RT and then purified by preparative HPLC (RP-18 column, eluent: acetonitrile-water gradient 95: 5 → 5:95). 37 mg (41% of theory) of product are obtained.
HPLC (Method 1): R t = 4.00 min
MS (ES): m / z = 389.1 (M-H) - .
1 H-NMR (400MHz, DMSO-d 6 ): δ = 8.16 (s, 2H), 7.39 (s, 1H), 4.67-4.78 (m, 1H), 2.02-2.13 (m, 1H), 1.16-1.72 (m, 13H), 1.08 (d, 3H), 0.87 (d, 3H), 0.77 (d, 3H), 0.52-0.72 (m, 2H).
Beispiel 7Example 7
5-[(1-Hydroxycyclopentyl)ethinyl]-2-{isopropyl[(trans-4-methylcyclohexyl)carbonyl]amino}thiophen-3-carbonsäure 5 - [(1-hydroxycyclopentyl) ethynyl] -2- {isopropyl [(trans-4-methylcyclohexyl) carbonyl] amino} thiophene-3-carboxylic acid
87
mg (0.20 mmol) der Verbindung aus Beispiel 14A werden in 1.0 ml
Dioxan gelöst
und mit 1.0 ml einer wässrigen
1N Lithiumhydroxid-Lösung
versetzt. Der Reaktionsansatz wird 18 h bei RT gerührt und
anschließend
mittels präparativer
HPLC (RP-18 Säule,
Laufmittel: Acetonitril-Wasser Gradient 95:5 → 5:95) aufgereinigt. Man erhält 63 mg
(74% d. Th.) Produkt.
HPLC (Methode 1): Rt =
4.94 min
MS (ES-): m/z = 416.1 (M–H)–.
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 13.23
(br s, 1H), 7.43 (s, 1H), 5.44 (br s, 1H), 4.67-4.84 (m, 1H), 1.97-2.11 (m,
1H), 1.36-1.97 (m, 13H), 1.16-1.34 (m, 2H), 1.09 (d, 3H), 0.86 (d,
3H), 0.77 (d, 3H), 0.54-0.73 (m, 2H).87 mg (0.20 mmol) of the compound from Example 14A are dissolved in 1.0 ml of dioxane and admixed with 1.0 ml of an aqueous 1N lithium hydroxide solution. The reaction mixture is stirred for 18 h at RT and then purified by preparative HPLC (RP-18 column, eluent: acetonitrile-water gradient 95: 5 → 5:95). 63 mg (74% of theory) of product are obtained.
HPLC (Method 1): R t = 4.94 min
MS (ES-): m / z = 416.1 (M-H) - .
1 H-NMR (400MHz, DMSO-d 6 ): δ = 13.23 (br s, 1H), 7.43 (s, 1H), 5.44 (br s, 1H), 4.67-4.84 (m, 1H), 1.97-2.11 (m, 1H), 1.36-1.97 (m, 13H), 1.16-1.34 (m, 2H), 1.09 (d, 3H), 0.86 (d, 3H), 0.77 (d, 3H), 0.54-0.73 (m , 2H).
Beispiel 8Example 8
5-[3-(Dimethylamino)prop-1-in-1-yl]-2-{isopropyl[(trans-4-methylcyclohexyl)carbonyl]amino}thiophen-3-carbonsäure 5- [3- (dimethylamino) prop-1-in-1-yl] -2- {isopropyl [(trans-4-methylcyclohexyl) carbonyl] amino} thiophene-3-carboxylic acid
18
mg (0.044 mmol) der Verbindung aus Beispiel 15A werden in 1.0 ml
Dioxan gelöst
und mit 1.0 ml einer wässrigen
1N Lithiumhydroxid-Lösung
versetzt. Der Reaktionsansatz wird 18 h bei RT gerührt und
anschließend
mittels präparativer
HPLC (RP-18 Säule,
Laufmittel: Acetonitril-Wasser Gradient 95:5 → 5:95) aufgereinigt. Man erhält 13 mg
(75% d. Th.) Produkt.
MS (ES-): m/z = 389.0 (M–H)–.
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 12.88
(br s, 1H), 7.48 (s, 1H), 4.67-4.83 (m, 1H), 3.52 (s, 2H), 2.24
(s, 6H), 1.99-2.12 (m, 1H), 1.53-1.69 (m, 4H), 1.37-1.53 (m, 1H),
1.17-1.33 (m, 2H), 1.09 (d, 3H), 0.87 (d, 3H), 0.77 (d, 3H), 0.55-0.73
(m, 2H).18 mg (0.044 mmol) of the compound from Example 15A are dissolved in 1.0 ml of dioxane and admixed with 1.0 ml of an aqueous 1N lithium hydroxide solution. The reaction mixture is stirred for 18 h at RT and then purified by preparative HPLC (RP-18 column, eluent: acetonitrile-water gradient 95: 5 → 5:95). 13 mg (75% of theory) of product are obtained.
MS (ES): m / z = 389.0 (M-H) - .
1 H-NMR (400MHz, DMSO-d 6 ): δ = 12.88 (br s, 1H), 7.48 (s, 1H), 4.67-4.83 (m, 1H), 3.52 (s, 2H), 2.24 (s, 6H), 1.99-2.12 (m, 1H), 1.53-1.69 (m, 4H), 1.37-1.53 (m, 1H), 1.17-1.33 (m, 2H), 1.09 (d, 3H), 0.87 (d, 3H), 0.77 (d, 3H), 0.55-0.73 (m, 2H).
Beispiel 9Example 9
2-{Isopropyl[(trans-4-methylcyclohexyl)carbonyl]amino}-5-(3-methylhex-1-in-1-yl)thiophen-3-carbonsäure 2- {isopropyl [(trans-4-methylcyclohexyl) carbonyl] amino} -5- (3-methylhex-1-yn-1-yl) thiophene-3-carboxylic acid
9.0
mg (0.022 mmol) der Verbindung aus Beispiel 16A werden in 1.0 ml
Dioxan gelöst
und mit 1.0 ml einer wässrigen
1N Lithiumhydroxid-Lösung
versetzt. Der Reaktionsansatz wird 18 h bei RT gerührt und
anschließend
mittels präparativer
HPLC (RP-18 Säule,
Laufmittel: Acetonitril-Wasser
Gradient 95:5 → 5:95)
aufgereinigt. Man erhält
6 mg (69% d. Th.) Produkt.
HPLC (Methode 1): Rt =
6.16 min
1H-NMR (400MHz, CDCl3): δ =
7.46 (s, 1H), 4.86-5.04 (m, 1H), 2.61-2.76 (m, 1H), 2.03-2.19 (m,
1H), 1.11-1.75 (m, 17H), 0.86-1.10 (m, 6H), 0.61-0.84 (m, 5H).9.0 mg (0.022 mmol) of the compound from Example 16A are dissolved in 1.0 ml of dioxane and admixed with 1.0 ml of an aqueous 1N lithium hydroxide solution. The reaction mixture is stirred for 18 h at RT and then purified by preparative HPLC (RP-18 column, eluent: acetonitrile-water gradient 95: 5 → 5:95). 6 mg (69% of theory) of product are obtained.
HPLC (Method 1): R t = 6.16 min
1 H-NMR (400MHz, CDCl 3): δ = 7.46 (s, 1H), 4.86-5.04 (m, 1H), 2.61-2.76 (m, 1H), 2:03 to 2:19 (m, 1H), 1.11-1.75 (m, 17H), 0.86-1.10 (m, 6H), 0.61-0.84 (m, 5H).
Beispiel 10Example 10
5-(3-{[(2-Chlorphenyl)sulfonyl]amino}-3-methylbut-1-in-1-yl)-2-{isopropyl[(trans-4-methylcyclohexyl)carbonyl]amino}thiophen-3-carbonsäure 5- (3 - {[(2-chlorophenyl) sulfonyl] amino} -3-methylbut-1-yn-1-yl) -2- {isopropyl [(trans-4-methylcyclohexyl) carbonyl] amino} thiophene-3- carboxylic acid
72
mg (0.12 mmol) der Verbindung aus Beispiel 17A werden in 1.0 ml
Dioxan gelöst
und mit 1.0 ml einer wässrigen
1N Lithiumhydroxid-Lösung
versetzt. Der Reaktionsansatz wird 18 h bei RT gerührt und
anschließend
mittels präparativer
HPLC (RP-18 Säule,
Laufmittel: Acetonitril-Wasser Gradient 95:5 → 5:95) aufgereinigt. Man erhält 61 mg
(87% d. Th.) Produkt.
HPLC (Methode 3): Rt =
5.05 min
MS (ES-): m/z = 562.9 (M–H)–.
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 13.22
(br s, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.99-8.08 (m, 1H), 7.54-7.60 (m, 1H), 7.38-7.52
(m, 2H), 7.12 (s, 1H), 4.65-4.83 (m, 1H), 1.90-2.04 (m, 1H), 1.16-1.70
(m, 13H), 1.08 (d, 3H), 0.84 (d, 3H), 0.78 (d, 3H), 0.55-0.75 (m,
2H).72 mg (0.12 mmol) of the compound from Example 17A are dissolved in 1.0 ml of dioxane and admixed with 1.0 ml of an aqueous 1N lithium hydroxide solution. The reaction mixture is stirred for 18 h at RT and then purified by preparative HPLC (RP-18 column, eluent: acetonitrile-water gradient 95: 5 → 5:95). This gives 61 mg (87% of theory) of product.
HPLC (Method 3): R t = 5.05 min
MS (ES): m / z = 562.9 (M-H) - .
1 H-NMR (400MHz, DMSO-d 6 ): δ = 13.22 (br s, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.99-8.08 (m, 1H), 7.54-7.60 (m, 1H), 7.38- 7.52 (m, 2H), 7.12 (s, 1H), 4.65-4.83 (m, 1H), 1.90-2.04 (m, 1H), 1.16-1.70 (m, 13H), 1.08 (d, 3H), 0.84 ( d, 3H), 0.78 (d, 3H), 0.55-0.75 (m, 2H).
Beispiel 11Example 11
5-(3,3-Dimethylpent-1-in-1-yl)-2-{isopropyl[(trans-4-methylcyclohexyl)carbonyl]amino} thiophen-3-carbonsäure 5- (3,3-Dimethylpent-1-yn-1-yl) -2- {isopropyl [(trans-4-methylcyclohexyl) carbonyl] amino} thiophene-3-carboxylic acid
50
mg (0.12 mmol) der Verbindung aus Beispiel 18A werden in 1.0 ml
Dioxan gelöst
und mit 1.0 ml einer wässrigen
1N Lithiumhydroxid-Lösung
versetzt. Der Reaktionsansatz wird 18 h bei RT gerührt und
anschließend
mittels präparativer
HPLC (RP-18 Säule,
Laufmittel: Acetonitril-Wasser Gradient 95:5 → 5:95) aufgereinigt. Man erhält 48 mg
(99% d. Th.) Produkt.
HPLC (Methode 3): Rt =
6.01 min
MS (ES-): m/z = 402.0 (M–H)–.
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 7.17 (s,
1H), 4.56-4.70 (m, 1H), 2.13-2.30 (m, 1H), 1.78-1.91 (m, 1H), 1.10-1.63
(m, 14H), 1.03 (d, 3H), 0.98 (t, 3H), 0.89 (d, 3H), 0.76 (d, 3H),
0.50-0.71 (m, 2H).50 mg (0.12 mmol) of the compound from Example 18A are dissolved in 1.0 ml of dioxane and admixed with 1.0 ml of an aqueous 1N lithium hydroxide solution. The reaction mixture is stirred for 18 h at RT and then purified by preparative HPLC (RP-18 column, eluent: acetonitrile-water gradient 95: 5 → 5:95). 48 mg (99% of theory) of product are obtained.
HPLC (Method 3): R t = 6.01 min
MS (ES): m / z = 402.0 (M-H) - .
1 H-NMR (400MHz, DMSO-d 6 ): δ = 7.17 (s, 1H), 4.56-4.70 (m, 1H), 2.13-2.30 (m, 1H), 1.78-1.91 (m, 1H), 1.10 -1.63 (m, 14H), 1.03 (d, 3H), 0.98 (t, 3H), 0.89 (d, 3H), 0.76 (d, 3H), 0.50-0.71 (m, 2H).
Beispiel 12Example 12
5-(3,3-Dimethylbut-1-in-1-yl)-2-[[(trans-4-methylcyclohexyl)carbonyl](tetrahydro-2H-pyran-4-yl)amino]thiophen-3-carbonsäure 5- (3,3-dimethylbut-1-yn-1-yl) -2 - [[(trans-4-methylcyclohexyl) carbonyl] (tetrahydro-2H-pyran-4-yl) amino] thiophene-3-carboxylic acid
52
mg (0.12 mmol) des Methylester aus Beispiel 19A werden in 3 ml Dioxan
und 0.3 ml Wasser vorgelegt, 4 mg (0.53 mmol) Lithiumhydroxid zugegeben
und das Gemisch 3.5 h unter Rückfluss
gerührt.
Anschließend
wird der Ansatz mit 1N Salzsäure
neutralisiert, das Lösungsmittel
im Vakuum entfernt und das Produkt mittels präparativer HPLC gereinigt (Methode
2). Ausbeute: 39 mg (78% d. Th.).
HPLC (Methode 3): Rt = 5.57 min
MS (ESI-pos): m/z = 432
(M+H)+
1H-NMR
(400 MHz, CDCl3): δ [ppm] = 7.44 (s, 1H), 4.82-4.73
(m, 1H), 4.02-3.87 (m, 2H), 3.54-3.39
(m, 2H), 2.17-2.05 (m, 1H), 1.82-1.59 (m, 8H), 1.42-1.25 (m, 3H),
1.33 (s, 9H, 0.80 (d, 3H), 0.77-0.63 (m, 2H).52 mg (0.12 mmol) of the methyl ester from Example 19A are initially charged in 3 ml of dioxane and 0.3 ml of water, 4 mg (0.53 mmol) of lithium hydroxide are added and the mixture is stirred under reflux for 3.5 h. The mixture is then neutralized with 1N hydrochloric acid, the solvent removed in vacuo and the product purified by preparative HPLC (Method 2). Yield: 39 mg (78% of theory).
HPLC (Method 3): R t = 5.57 min
MS (ESI-pos): m / z = 432 (M + H) +
1 H-NMR (400 MHz, CDCl 3): δ [ppm] = 7.44 (s, 1H), 4.82-4.73 (m, 1H), 4.02-3.87 (m, 2H), 3:54 to 3:39 (m, 2H) , 2.17-2.05 (m, 1H), 1.82-1.59 (m, 8H), 1.42-1.25 (m, 3H), 1.33 (s, 9H, 0.80 (d, 3H), 0.77-0.63 (m, 2H).
Allgemeine Arbeitsvorschrift [D]: Verseifung von Thiophen-3-carbonsäureesternGeneral working instructions [D]: saponification of thiophene-3-carboxylic acid esters
In einem Dioxan/Wasser-Gemisch (5:1 v/v) wird 1.0 Äquivalent des Esters vorgelegt (ca. 0.01-0.1 M Lösung), mit 4-5 Äquivalenten Lithiumhydroxid versetzt und das Gemisch unter Rückfluss gerührt. Mittels HPLC wird der Umsatz verfolgt. Sobald der Ester umgesetzt ist wird das Gemisch mit 1N Salzsäure angesäuert, das Lösungsmittelgemisch im Vakuum entfernt und das Produkt mittels präparativer HPLC (Methode 2) gereinigt. Enthält das Produkt einen basischen Stickstoff, so wird es nach der Reinigung in das Hydrochlorid überführt. Zu diesem Zweck wird das gereinigte Produkt in einem Gemisch 1N Salzsäure und Methanol aufgenommen und dieses Gemisch im Vakuum entfernt.In a dioxane / water mixture (5: 1 v / v) is placed 1.0 equivalent of the ester (about 0.01-0.1 M solution), treated with 4-5 equivalents of lithium hydroxide and the mixture stirred under reflux. The turnover is monitored by means of HPLC. As soon as the ester has reacted, the mixture is acidified with 1N hydrochloric acid, the solvent mixture is removed in vacuo and the product is purified by preparative HPLC (method 2). If the product contains a basic nitrogen, it will become the hydrochloride after purification transferred. For this purpose, the purified product is taken up in a mixture of 1N hydrochloric acid and methanol and this mixture is removed in vacuo.
Folgende Beispiele werden nach der Allgemeinen Arbeitsvorschrift [D] hergestellt: The following examples are produced according to the general procedure [D]:
Beispiel 20Example 20
2-[{[(1R,2S,4R)-2-Hydroxy-4-methylcyclohexyl]carbonyl}(isopropyl)amino]-5-(3-methylbut-1-in-1-yl)thiophen-3-carbonsäure 2 - [{[(1R, 2S, 4R) -2-hydroxy-4-methylcyclohexyl] carbonyl} (isopropyl) amino] -5- (3-methylbut-1-yn-1-yl) thiophene-3-carboxylic acid
38.0
mg (8.5 μmol)
der Verbindung aus Beispiel 34A werden in 1.5 ml einer Mischung
aus Dioxan/Wasser (2/l) gelöst,
anschließend
wird mit 212 μl
(424.4 μmol)
2N Lithiumhydroxid-Lösung versetzt
und die Reaktion wird über
Nacht bei Raumtemperatur gerührt.
Das Lösungsmittel
wird im Vakuum abgedampft, der Rückstand
mit Ethylacetat und mit 2N Salzsäure
versetzt und die wässrige
Phase wird nochmals mit Ethylacetat extrahiert. Nach dem Trocknen
der vereinigten organischen Phasen über Magnesiumsulfat wird das
Lösungsmittel
im Vakuum abgedampft. Das erhaltene Rohprodukt wird durch präparative
RP-HPLC mit einem Wasser-Acetonitril-Gradienten gereinigt. Es werden
28.6 mg (86% d. Th) Produkt erhalten.
HPLC (Methode 3): Rt = 4.85 min
MS (ESI+): m/z = 392 (M+H)+
1H-NMR (300
MHz, DMSO-d6, 1:1-Mischung von Rotameren): δ = 13.25
(br. s, 1H), 7.43-7.35 (2s, 1H), 4.87-4.72 (m, 1.5H), 4.24 (d, 0.5H),
4.00-3.94 (m, 0.5H), 3.87-3.80 (m, 0.5H), 2.94-2.78 (m, 1H), 2.10-2.30 (m, 1H), 1.95-1.28
(m, 5H), 1.22 (d, 6H), 1.16-1.05 (2d, 3H), 0.91-0.80 (2d, 3H), 0.78-0.52 (m, 5H, darin:
0.73 (d, 3H)).38.0 mg (8.5 .mu.mol) of the compound from Example 34A are dissolved in 1.5 ml of a mixture of dioxane / water (2 / l), then 212 .mu.l (424.4 .mu.mol) 2N lithium hydroxide solution and the reaction is overnight at room temperature touched. The solvent is evaporated in vacuo, the residue is combined with ethyl acetate and 2N hydrochloric acid and the aqueous phase is extracted once more with ethyl acetate. After drying the combined organic phases over magnesium sulfate, the solvent is evaporated in vacuo. The resulting crude product is purified by preparative RP-HPLC with a water-acetonitrile gradient. There are obtained 28.6 mg (86% of theory) of product.
HPLC (Method 3): R t = 4.85 min
MS (ESI +): m / z = 392 (M + H) +
1 H-NMR (300 MHz, DMSO-d 6 , 1: 1 mixture of rotamers): δ = 13.25 (br. S, 1H), 7.43-7.35 (2s, 1H), 4.87-4.72 (m, 1.5H ), 4.24 (d, 0.5H), 4.00-3.94 (m, 0.5H), 3.87-3.80 (m, 0.5H), 2.94-2.78 (m, 1H), 2.10-2.30 (m, 1H), 1.95- 1.28 (m, 5H), 1.22 (d, 6H), 1.16-1.05 (2d, 3H), 0.91-0.80 (2d, 3H), 0.78-0.52 (m, 5H, therein: 0.73 (d, 3H)).
Beispiel 21Example 21
5-(Cyclopropylethinyl)-2-[{[(1R,2S,4R)-2-hydroxy-4-methylcyclohexyl]carbonyl}(isopropyl)amino)thiophen-3-carbonsäure 5- (cyclopropylethynyl) -2 - [{[(1R, 2S, 4R) -2-hydroxy-4-methylcyclohexyl] carbonyl} (isopropyl) amino) thiophene-3-carboxylic acid
Die
Verbindung wird analog der Vorschrift des Beispiels 20 aus 32.0
mg (7.2 μmol)
der Verbindung aus Beispiel 35A und 179 μl (359 μmol) 2M Lithiumhydroxid-Lösung mit
25.4 mg (91% d. Th.) erhalten.
HPLC (Methode 3): Rt =
4.38 min
MS (ESI+): m/z = 390 (M+H)+
1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6,
1:1-Mischung von Rotameren): δ =
13.25 (br s, 1H), 7.40/7.38 (2s, 1H), 4.68-4.89 (m, 1.5H), 4.25
(d, 0.5H), 4.00-3.92 (m, 0.5H), 3.87-3.78 (m, 0.5H), 2.312.08 (m,
1H), 1.96-1.26 (m, 6H), 1.20-0.47 (m, 12H).The compound is obtained analogously to the procedure of Example 20 from 32.0 mg (7.2 μmol) of the compound from Example 35A and 179 μl (359 μmol) of 2M lithium hydroxide solution with 25.4 mg (91% of theory).
HPLC (Method 3): R t = 4.38 min
MS (ESI +): m / z = 390 (M + H) +
1 H-NMR (300 MHz, DMSO-d 6 , 1: 1 mixture of rotamers): δ = 13.25 (br s, 1H), 7.40 / 7.38 (2 s, 1 H), 4.68-4.89 (m, 1.5H) , 4.25 (d, 0.5H), 4.00-3.92 (m, 0.5H), 3.87-3.78 (m, 0.5H), 2.312.08 (m, 1H), 1.96-1.26 (m, 6H), 1.20-0.47 (m, 12H).
Beispiel 22Example 22
5-(4-Hydroxy-3,3-dimethylbut-1-in-1-yl)-2-[{[(1R,2S,4R)-2-hydroxy-4-methylcyclohexyl]carbonyl}(isopropyl)amino]thiophen-3-carbonsäure 5- (4-hydroxy-3,3-dimethylbut-1-yn-1-yl) -2 - [{[(1R, 2S, 4R) -2-hydroxy-4-methylcyclohexyl] carbonyl} (isopropyl) amino] thiophene-3-carboxylic acid
80.0
mg (167 μmol)
der Verbindung aus Beispiel 36A werden in einer Mischung aus 3 ml
Methanol und 418 μl
(837 μmol)
2N wässriger
Lithiumhydroxid-Lösung über Nacht
bei Raumtemperatur gerührt.
Das Reaktionsgemisch wird zwischen tert.-Butylmethylether und 2N
Salzsäure
verteilt, die vereinten organischen Phasen werden über Natriumchlorid
getrocknet, dekantiert und zur Trockene eingedampft. Das Rohgemisch
wird durch präparative
RP-HPLC mit einem Wasser/Acetonitril-Gradienten gereinigt. Es werden
48 mg (68% d. Th) Produkt erhalten.
HPLC (Methode 3): Rt = 4.42 min
MS (ESI+): m/z = 422 (M+H)+
1H-NMR (300
MHz, DMSO-d6, Mischung von Rotameren): δ = 13.25
(br s, 1H), 7.38/7.35 (2s, 1H), 5.12-5.02 (m, 1H), 4.90-4.70 (m,
1.5H), 4.22 (d, 0.5 H), 3.98/3.83 (2m, 1H), etwa 3.32 (s, 2H, in
CDCl3-Spektrum bei 3.52), 2.26/2.18 (2 d,
1H), 1.95-0.55 (m, 22H, darin 1.20 (s, 6H), 1.11 (t, 3H), 0.85 (t,
3H), 0.72 (d, 3H)).80.0 mg (167 μmol) of the compound from Example 36A are stirred in a mixture of 3 ml of methanol and 418 μl (837 μmol) of 2N aqueous lithium hydroxide solution overnight at room temperature. The reaction mixture is partitioned between tert-butyl methyl ether and 2N hydrochloric acid, the combined organic phases are dried over sodium chloride, decanted and evaporated to dryness. The crude mixture is purified by preparative RP-HPLC with a water / acetonitrile gradient. 48 mg (68% of theory) of product are obtained.
HPLC (Method 3): R t = 4.42 min
MS (ESI +): m / z = 422 (M + H) +
1 H-NMR (300 MHz, DMSO-d 6 , mixture of rotamers): δ = 13.25 (brs, 1H), 7.38 / 7.35 (2s, 1H), 5.12-5.02 (m, 1H), 4.90-4.70 ( m, 1.5H), 4.22 (d, 0.5 H), 3.98 / 3.83 (2m, 1H), about 3.32 (s, 2H, in CDCl 3 spectrum at 3.52), 2.26 / 2.18 (2 d, 1H), 1.95 -0.55 (m, 22H, where 1.20 (s, 6H), 1.11 (t, 3H), 0.85 (t, 3H), 0.72 (d, 3H)).
Beispiel 23Example 23
5-(4-Hydroxy-3,3-dimethylbut-1-in-1-yl)-2-{isopropyl[(trans-4-methylcyclohexyl)carbonyl]amino}thiophen-3-carbonsäure 5- (4-hydroxy-3,3-dimethylbut-1-yn-1-yl) -2- {isopropyl [(trans-4-methylcyclohexyl) carbonyl] amino} thiophene-3-carboxylic acid
45.0
mg (107 μmol)
der Verbindung aus Beispiel 37A werden in einer Mischung aus 1.35
ml Methanol und 161 μl
(322 μmol)
2N wässriger
Lithiumhydroxid-Lösung über Nacht
bei Raumtemperatur gerührt.
Das Reaktionsgemisch wird zwischen tert.-Butylmethylether und 2N
Salzsäure
verteilt, die vereinten organischen Phasen werden über Natriumchlorid
getrocknet, dekantiert und zur Trockene eingedampft. Das Rohgemisch wird
durch präparative
RP-HPLC mit einem Wasser/Acetonitril-Gradienten gereinigt. Es werden
32 mg (73% d. Th) Produkt erhalten.
HPLC (Methode 3): Rt = 4.75 min
MS (ESI-): m/z = 404 (M–H)–
1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ = 13.25
(br s, 1H), 7.38 (s, 1H), 5.11-5.02 (m, 1H), 4.82-4.68 (m, 1H), 2.10-2.00
(m, 1H), 1.70-0.55 (m, 24H, darin 1.20 (s, 6H), 1.10 (d, 3H), 0.85
(d, 3H), 0.77 (d, 3H)).45.0 mg (107 μmol) of the compound from Example 37A are stirred in a mixture of 1.35 ml of methanol and 161 μl (322 μmol) of 2N aqueous lithium hydroxide solution overnight at room temperature. The reaction mixture is partitioned between tert-butyl methyl ether and 2N hydrochloric acid, the combined organic phases are dried over sodium chloride, decanted and evaporated to dryness. The crude mixture is purified by preparative RP-HPLC with a water / acetonitrile gradient. There are obtained 32 mg (73% of theory) of product.
HPLC (Method 3): R t = 4.75 min
MS (ESI): m / z = 404 (M-H) -
1 H-NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ = 13.25 (brs, 1H), 7.38 (s, 1H), 5.11-5.02 (m, 1H), 4.82-4.68 (m, 1H), 2.10 -2.00 (m, 1H), 1.70-0.55 (m, 24H, 1.20 (s, 6H), 1.10 (d, 3H), 0.85 (d, 3H), 0.77 (d, 3H)).
Allgemeine Arbeitsvorschrift [E]: Alternative Methode der Verseifung der Sonogashira-ProdukteGeneral working instructions [E]: Alternative method of saponification of Sonogashira products
1 Äquivalent des Thiophencarbonsäureesters werden in einer Mischung aus Dioxan/Wasser (2/l) und 5 oder 10 Äquivalente 2M Lithiumhydroxid-Lösung 3 Stunden bei Raumtemperatur oder 1 Stunde bei 50°C gerührt. Das Lösungsmittel wird vollständig verdampft, der Rückstand mit Ethylacetat und mit 2N Salzsäure versetzt und die wässrige Phase wird nochmals mit Ethylacetat extrahiert. Nach dem Trocknen der vereinigten organischen Phasen über Magnesiumsulfat wird das Lösungsmittel im Vakuum abgedampft und das Produkt wird nach der Reinigung über die präparative RP-HPLC (Wasser-Acetonitril-Gradient) erhalten.1 equivalent of the thiophenecarboxylic acid ester is stirred in a mixture of dioxane / water (2 / l) and 5 or 10 equivalents of 2M lithium hydroxide solution for 3 hours at room temperature or for 1 hour at 50 ° C. The solvent is completely evaporated, the residue with ethyl acetate and 2N hydrochloric acid ver and the aqueous phase is extracted again with ethyl acetate. After drying the combined organic phases over magnesium sulfate, the solvent is evaporated in vacuo and the product is obtained after purification via preparative RP-HPLC (water-acetonitrile gradient).
Folgende Beispiele werden nach der Allgemeinen Arbeitsvorschrift [E] hergestellt: The following examples are produced according to the general procedure [E]:
B. Bewertung der physiologischen WirksamkeitB. Assessment of physiological effectiveness
Abkürzungen:Abbreviations:
-
- DMSODMSO
- Dimethylsulfoxiddimethyl sulfoxide
- DMEMDMEM
- Dulbecco's Modified Earle's MediumDulbecco's Modified Earle's Medium
- FKSFKS
- Fötales KälberserumFetal calf serum
- G418G418
- Geneticingeneticin
- EC50 EC 50
- Effektive Konzentration 50Effective concentration 50
- IC50 IC 50
- Inhibitorische Konzentration 50Inhibitory concentration 50
- CC50 CC 50
- Cytotoxische Konzentration 50Cytotoxic concentration 50
- PenPen
- Penicillinpenicillin
- StrepStrep
- Streptomycinstreptomycin
- min.minute
- Minutenminutes
- NEAANEAA
- Nichtessentielle AminosäurenNonessential amino acids
- PBSPBS
- Phosphate buffered saline (Phosphatpuffer)Phosphate buffered saline (phosphate buffer)
- hH
- Stundenhours
- secsec
- Sekundenseconds
- RTRT
- Raumtemperaturroom temperature
Verwendete Produkte: Used products:
Die in vitro-Wirkung der erfindungsgemäßen Verbindungen kann in folgenden Assays gezeigt werden:The In vitro activity of the compounds of the invention can be seen in the following Assays are shown:
1. Messung der Substanzaktivität in einem zellulären HCV-RNA-Replikationsassay ("Replikon-System")1. Measurement of the substance activity in one cellular HCV RNA Replication Assay ("Replicon System")
Hepatits
C kann bis zum jetzigen Zeitpunkt nicht reproduzierbar mit hohen
Titern in Zellkultur vermehrt werden. Daher wird die Substanzaktivität im sogenannten
Replikonsystem nachgewiesen. Dabei handelt es sich um Genomteile
des HCV oder um gesamte Genome von HCV, welche in Zelllinien (hier
HuH-7 Zellen) menschlichen Ursprungs verbracht werden. Durch Einfügen eines
Selektionsmarkers können
stabile Zelllinien gewonnen werden, welche unter Selektionsdruck
genomische oder subgenomische RNA von HCV vermehren [Lohmann et
al., Science 285, 110-113 (1999); Blight et al., Science 290, 1972-1974
(2000)]. Die hier verwendeten HuH5-2 Zellen beherbergen ein selektionierbares,
Luciferase tragendes, zellkulturadaptiertes Replikon wie in
a) Zubereitung der Testsubstanzen:a) Preparation of the test substances:
Die Testverbindungen werden als 50 mM-Stammlösung in DMSO angesetzt. Für die Bestimmung der EC50-Werte werden die Substanzen anschließend in DMEM seriell in Zweierstufen verdünnt. Die Verdünnungen werden als Duplets auf die Zellkulturplatten übertragen. Anschließend erfolgt die Zugabe der trypsinierten, in Medium resuspendierten Zellen. Die Endkonzentrationen der Testsubstanzen in den Zellkulturkavitäten beträgt beispielsweise 300 μM bis 0.0001 μM. Interferonalpha dient als Referenzsubstanz in Konzentrationen von 60 IU/ml bis 1 IU/ml. Antimycin-alpha dient als Zytotoxizitätskontrolle in Konzentrationen von 2 μM bis 0.03 μM. Nicht-behandelte Zellen dienen als Referenz. Die Platten werden dann bei 37°C unter 5% CO2 für 4-5 Tage inkubiert. Im Anschluss daran erfolgen die unterschiedlichen Messungen bzw. die Quantifizierung der HCV-Replikon-RNA.The test compounds are prepared as a 50 mM stock solution in DMSO. For the determination of the EC 50 values, the substances are then diluted serially in DMEM in two stages. The dilutions are transferred as duplets to the cell culture plates. This is followed by the addition of the trypsinized, resuspended in medium cells. The final concentrations of the test substances in the cell culture cavities is, for example, 300 μM to 0.0001 μM. Interferon alpha serves as a reference in concentrations from 60 IU / ml to 1 IU / ml. Antimycin-alpha serves as a cytotoxicity control in concentrations from 2 μM to 0.03 μM. Untreated cells are for reference. The plates are then incubated at 37 ° C under 5% CO 2 for 4-5 days. This is followed by the different measurements or the quantification of the HCV replicon RNA.
b) Zytotoxizitätstest (visuell):b) Cytotoxicity test (visual):
Für die Bewertung der Zytotoxizität der Testsubstanzen auf HUH5-2 Zellen wird der obige Test in einer transparenten Zellkulturplatte angesetzt. Die qualitative Auswertung erfolgt visuell unter dem Mikroskop.For the rating cytotoxicity of the test substances on HUH5-2 cells, the above test becomes transparent Attached to cell culture plate. The qualitative evaluation is done visually Under the microscope.
c) Alamar Blue-Test (quantitativer Zytotoxizitätstest):c) Alamar Blue test (quantitative Cytotoxicity):
Alamar Blue ist ein wasserlöslicher Redox-Indikator, der in Abhängigkeit von der metabolischen Aktivität der zu untersuchenden Zellen reduziert wird. Der Alamar Blue-Test wird als quantitativer Zytotoxizitätsassay verwendet. Hierfür werden die Zellen mit den entsprechenden Testsubstanzen (siehe oben) in weiße 384-well-Zellkulturplatten eingesät und entsprechend bei 37°C unter 5% CO2 für 4 Tage inkubiert. 4 bis 6 Stunden vor der eigentlichen Messung erfolgt die Zugabe von 5 μl Alamar Blue pro well. Anschließend wird die Fluoreszenz bei einer Emissionswellenlänge von 544 nm und bei einer Extinktionswellenlänge von 590 nm gemessen. Soll im Anschluss an diesen Test auf der gleichen Platte noch die Chemolumineszenzmessung (siehe unten) erfolgen, wird die Farbstofflösung von den Zellen abgesaugt und diese anschließend einmal mit PBS gewaschen. Das PBS wird ebenfalls wieder von den Zellen abgesaugt.Alamar Blue is a water-soluble redox indicator, which is reduced depending on the metabolic activity of the cells to be examined. The Alamar Blue test is used as a quantitative cytotoxicity assay. For this purpose, the cells are seeded with the appropriate test substances (see above) in white 384-well cell culture plates and incubated at 37 ° C under 5% CO 2 for 4 days. 4 to 6 hours before the actual measurement, add 5 μl Alamar Blue per well. Subsequently, the fluorescence is measured at an emission wavelength of 544 nm and at an extinction wavelength of 590 nm. If, following this test, the chemiluminescence measurement (see below) is carried out on the same plate, the dye solution is aspirated from the cells and then washed once with PBS. The PBS is also aspirated from the cells again.
d) Messung der HCV-RNA-Menge durch Ermittlung der Aktivität eines Reportergens:d) Measurement of the amount of HCV RNA by determining the activity a reporter gene:
In das HCV-Replicon-HuH5-2 ist ein Reportergen eingefügt, hier das Gen für das Enzym Luciferase des Photinus pyralis. Nach Zugabe des Luciferase-Reagenz (20 mM Tris/HCl, 20 mM Tricine, 2.67 mM MgSO4, 0.1 mM EDTA, 33.3 mM DTT, 0.27 mM Coenzym A, 0.47 mM Luciferin, 0.53 mM ATP, pH 7.8) zu den Zellen erfolgt die Chemolumineszenzmessung in einem Luminometer. Üblicherweise werden die Photonen in einem Zeitraum von 10 sec bis 60 sec gemessen.In the HCV replicon HuH5-2, a reporter gene is inserted, here the gene for the enzyme luciferase of Photinus pyralis. After addition of the luciferase reagent (20 mM Tris / HCl, 20 mM Tricine, 2.67 mM MgSO 4 , 0.1 mM EDTA, 33.3 mM DTT, 0.27 mM Coenzyme A, 0.47 mM luciferin, 0.53 mM ATP, pH 7.8) to the cells the chemiluminescence measurement in a luminometer. Usually, the photons are measured in a period of 10 seconds to 60 seconds.
Die folgenden Daten können von den Testplatten ermittelt werden:
- CC50
- = Substanzkonzentration in μM, bei der die Alamar Blue-Fluoreszenz im Vergleich zur unbehandelten Kontrolle um 50% abnimmt;
- EC50
- = Substanzkonzentration, bei der die Luciferaseaktivität im Vergleich zur unbehandelten Replikonkontrolle um 50% abnimmt;
- SI(Selektivitätsindex)
- = CC50/EC50.
- CC 50
- = Substance concentration in μM at which the Alamar Blue fluorescence decreases by 50% compared to the untreated control;
- EC 50
- = Substance concentration at which luciferase activity decreases by 50% compared to untreated replicon control;
- SI (selectivity index)
- = CC 50 / EC 50 .
e) Messung der Substanzaktivität mittels direkter Messung der HCV-Genommenge:e) Measurement of the substance activity by means of direct measurement of HCV genome:
Zellen, welche subgenomische HCV-RNA vermehren, werden wie oben beschrieben in 96 well oder 24 well-Zellkulturplatten in DMEM/10% FKS ohne Zusatz von Geniticin vermehrt. Befinden sich die Zellen in der logarithmischen Wachstumsphase, wird Substanz in geeigneter Verdünnung in das Medium gemischt. Die Endkonzentrationen betragen beispielsweise 100 μM und 30 μM sowie Verdünnungen hiervon. Nach 4 bis 5 Tagen Inkubation wird das Medium verworfen. Die Zellen werden mit Hilfe von Trypsin von der Zellkulturplatte gelöst und in 100 μl Phosphatpuffer (PBS) aufgenommen. Wird der Test in 24 well Zellkulturplatten durchgeführt, werden die Zellen aufgeteilt, ein Teil wird auf ihren Gehalt an HCV-RNA mit Hilfe der quantitativen PCR untersucht, der andere Teil der Zellen mit Hilfe des Nachweises der Luciferase-Aktivität untersucht (Bright Glow Kit, Fa. Promega, Durchführung gemäß Angaben des Herstellers). Wird der Test in 96 well Zellkulturplatten durchgeführt, werden parallel Proben angesetzt. Wie oben beschrieben wird ein Duplikat auf Luciferase Aktivität untersucht, von dem anderen Duplikat wird RNA gewonnen und mit HIlfe der quantitativen PCR auf den gehalt an HCV RNA untersucht. Erhaltene Werte werden durch Kurvenanalysen (sigmoidale Dosis-Wirkungskurven mit variablem Kurvenverlauf; GraphPad Prism Version 3.02 für Windows, GraphPad Software Inc.) ausgewertet und die effektive Konzentration, mit der eine 50%-Hemmung erzielt wird (EC50), ermittelt. Zum Vergleich dienen unbehandelte Zellen. Aus den restlichen zu untersuchenden Zellen wird mit Hilfe des Rneasy Mini Kits (Fa. Qiagen, Bestell-Nr. 74104) nach Angaben des Herstellers Gesamtzell-RNA isoliert. Die Elution erfolgt in 30-50 μl Rnase-freiem Wasser. Die RNA wird bei –80°C gelagert. Mit Hilfe von TaqMan®-Assays (Fa. Applied Biosystems) wird die enthaltene Menge an HCV-RNA bestimmt. Die verwendeten primer und Gensonden binden an die konservierte 5'-nichttranslatierte Region des Virusgenoms (primer für kodierenden DNA-Strang: aatgcctggagatttgggc; primer in Gegenrichtung: tttcgcgacccaacactactc; Gensonde: 6-Carboxyfluorescin-tgcccccgcgagactgcatagc-N,N,N',N'-tetramethyl-6-carboxyrhodamine). Zur Standardisierung der eingesetzten Probe wird die Expression eines zelleigenen Genes bestimmt (TagMan Ribosomal RNA Control Reagents, Fa. Applied Biosystems P/N 4308329). Für die Reaktion wird der Kit Platinum® Quantitative RT-PCR ThermoscriptTM one step system der Fa. Invitrogen (Bestell-Nr. 12267-019) verwendet. Die Reaktion findet in einem Endvolumen von 25 μM mit 1 μl Probenvolumen statt. Die Reaktionsbedingungen sind: 30 min Inkubation bei 50°C, danach 5 min Inkubation bei 95°C. Nach diesem Schritt folgt die eigentliche Amplifikationsphase mit 40 Wiederholungen folgender Schritte: 15 sec Inkubation bei 95°C gefolgt von 1 min Inkubation bei 60°C. Die Messung und Auswertung erfolgte in einem Applied Biosystems Abi Prism 7700 Sequence Detection-Gerät. Mit Hilfe der erhaltenen CT-Werte aus den Reaktionen für das Zielgen (hier: HCV) und das zelluläre Referenzgen (hier: 18s RNA) wird die relative Expression errechnet wie beschrieben unter: Abi Prism 7700 Sequence Detection System User Bulletin #2: Relative Quantification of Gene expression (P/N 4303859).Cells which amplify subgenomic HCV RNA are propagated as described above in 96 well or 24 well cell culture plates in DMEM / 10% FCS without addition of geniticin. If the cells are in the logarithmic growth phase, the substance is mixed in a suitable dilution in the medium. The final concentrations are, for example, 100 μM and 30 μM and dilutions thereof. After 4 to 5 days of incubation, the medium is discarded. The cells are detached from the cell culture plate using trypsin and taken up in 100 μl of phosphate buffer (PBS). When the assay is carried out in 24 well cell culture plates, the cells are split, one part is assayed for their content of HCV RNA by quantitative PCR, the other part of the cells is assayed for luciferase activity (Bright Glow Kit, Fa. Promega, implementation according to the manufacturer). If the test is carried out in 96 well cell culture plates, samples are taken in parallel. As described above, one duplicate is assayed for luciferase activity, RNA is recovered from the other duplicate and assayed for HCV RNA content by quantitative PCR. Values obtained are evaluated by curve analysis (variable curve sigmoidal dose-response curves, GraphPad Prism version 3.02 for Windows, GraphPad Software Inc.) and the effective concentration at which 50% inhibition is achieved (EC 50 ) is determined. For comparison, untreated cells are used. From the remaining cells to be examined, whole cell RNA is isolated according to the manufacturer's instructions using the Rneasy Mini Kit (Qiagen, order No. 74104). Elution is carried out in 30-50 μl of Rnase-free water. The RNA is stored at -80 ° C. Using TaqMan ® assays (Fa. Applied Biosystems) determining the amount of HCV RNA contained. The primer and gene probes used bind to the conserved 5'-untranslated region of the viral genome (primer for coding DNA strand: aatgcctggagatttgggc; primer in the opposite direction: tttcgcgacccaacactactc; probe: 6-carboxyfluorescin-tgcccccgcgagactgcatagc-N, N, N ', N'- tetramethyl-6-carboxyrhodamine). To standardize the sample used, the expression of a cell-specific gene is determined (TagMan Ribosomal RNA Control Reagents, Applied Biosystems P / N 4308329). For the reaction, the kit Platinum ® Quantitative RT-PCR Thermoscript TM one step system is of the company. Invitrogen (Cat. 12267-019) is used. The reaction takes place in a final volume of 25 μM with 1 μl sample volume. The reaction conditions are: incubation at 50 ° C for 30 min, then incubation at 95 ° C for 5 min. After this step, the actual amplification phase follows with 40 repeats of the following steps: 15 sec incubation at 95 ° C followed by 1 min incubation at 60 ° C. The measurement and evaluation took place in an Applied Biosystems Abi Prism 7700 Sequence Detection device. Using the obtained CT values from the reactions for the target gene (here: HCV) and the cellular reference gene (here: 18s RNA), the relative expression is calculated as described under: Abi Prism 7700 Sequence Detection System User Bulletin # 2: Relative Quantification of gene expression (P / N 4303859).
Tabelle A (HCV-RNA-Replikationsassay) Table A (HCV RNA Replication Assay)
2. Aktivitätsbestimmung der RNA-abhängigen RNA-Polymerase (NS5B) des Hepatitis C Virus in Anwesenheit und Abwesenheit von Testsubstanzen2. Activity determination of the RNA-dependent RNA polymerase (NS5B) of hepatitis C virus in the presence and absence of test substances
Ausgehend von dem Plasmid pBacSB-Chis (Lohmann V, Koerner F, Herian U und Bartenschlager R, J. Virol. 71 (1997) 8461-8428), welches die vollständige DNA-Sequenz eines rekombinanten NS5B-Gens aus dem Hepatitis C Virus Genotyp 1b enthält, wird per Polymerase-Kettenreaktion (PCR) eine DNA-Sequenz amplifiziert (Sambrock J und Russel DW, Cold Spring Harbor Press, New York (2001)), die für ein um 21 Aminosäuren am Carboxyl-Terminus verkürztes NS5B-Protein kodiert. Durch die Verwendung der PCR-Primer 5B21AAUPI (5'-AATTGCTAGCATGTCCTACACATGGACAGGCGCCCTGA-3') und 5B21AAD1 (5'-TATACTCGAGGCGGGGTCGGGCACGAGACAGGCT-3') kann das PCR-Produkt in den T7-Expressionsvektor pET21b (Novagen) über die Erkennungsschnittstellen für die Restriktionsendo nukleasen NheI und XhoI kloniert werden. Mit dem so konstruierte Plasmid pET21NS5Bt wird ein NS5B-Protein exprimiert, welches die Aminosäuren 2420 bis 2989 des HCV Vorläufer-Polyproteins und eine Poly-Histidin-Fusion am Carboxyl-Terminus trägt. Die Expression und Reinigung einer solchen rekombinanten NS5B-Variante im heterologen Wirt Escherichia coli BL21(DE3) (Novagen) wurde bereits mehrfach beschrieben (Ferrari E, Wright-Minogue J, Fang JWS, Baroudy BM, Lau JYN und Hong Z, J. Virol. 73 (1999) 1649-1654; Tomei L, Vitale RL, Incitti I, Serafini S, Altamura S, Vitelli A und DeFrancesco R, J. Gen. Virol. 81 (2000) 759-767). BL21(DE3)-Zellen, die mit dem Plasmid pET21NS5Bt transformiert wurden, werden bis zu einer optischen Dichte O.D. (600 nm) = 0.6 bei 37°C in LB-Medium (zuzüglich 100 μg/ml Ampicillin) geschüttelt und anschließend mit 0,5 mM IPTG (Isopropyl-beta-D-Thiogalaktopyranosid) induziert. Zur Verhinderung von Zelleinschlusskörpern erfolgt eine 4-stündige Expression bei 20°C bis 25°C. Die Zellsedimente, die durch Zentrifugation gewonnen werden (20 min; 5000 × g; 4°C), werden auf eine O.D. (600 nm) = 50 bis 500 in Zellaufschlusspuffer (50 mM NaH2PO4; 5 mM Tris-HCl (Tris-(hydroxymethyl)-aminomethan) pH 8,0; 25 mM Imidazol; 10 mM MgCl2; 500 mM NaCl; 0,1%(v/v) β-Mercapto-Ethanol; 1 mM EDTA (Ethylendiamin-N,N,N',N'-tetraacetat); 10%(v/v) Glycerol; 1 Tablette/50 ml Complete (Roche); 10 μg/ml DNase I) konzentriert und anschließend mit Ultraschall (10 × 30 s; 200 Watt; 0°C) aufgeschlossen. Die lösliche Proteinfraktion, die von der unlöslichen Proteinfraktion durch Zentrifugation (20 min; 10000 × g; 4°C) getrennt wird, wird sterilfiltriert (< 0.45 μm) und auf eine mit Zellaufschlusspuffer equilibrierte Ni-NTA-Säule (Nickel-Nitrilotriessigsäure, Qiagen) aufgetragen. Nach der Probenaufgabe erfolgt ein Waschschritt mit 10 Säulenvolumen Zellaufschlusspuffer und anschließend mit 20 Säulenvolumen Waschpuffer (50 mM NaH2PO4; 5 mM Tris-HCl pH 8,0; 25 mM Imidazol; 10 mM MgCl2; 500 mM NaCl; 0,1%(v/v) β-Mercapto-Ethanol; 1 mM EDTA; 10%(v/v) Glycerol). Die Proteinelution erfolgt mit einem Imidazol-Stufengradient (Waschpuffer supplementiert mit 50 mM, 100 mM, 250 mM und 500 mM Imidazol) mit jeweils 5 Säulenvolumen pro Imidazol-Sufe. Während der Elution werden Fraktionen von 1 bis 2 ml Volumen aufgefangen und in einer SDS-PAGE analysiert. Die NS5B-haltigen Fraktionen werden vereinigt und mit Hilfe einer PD10-Säule (Amersham) nach Angaben des Herstellers in Lagerpuffer (25 mM Tris-HCl pH 7,5; 0,3 M NaCl; 10 mM MgCl2; 5 mM DTT (Dithiothreitol); 1 mM EDTA; 0,1% n-Dodecyl-maltoside; 30% Glycerol) umgepuffert und bei –80°C gelagert. Als Mock-Kontrolle wird mit einem Proteinextrakt, der aus mit dem Leervektor pET21b transformierten Escherichia coli BL21(DE3)-Zellen gewonnen wurde, analog verfahren.Starting from the plasmid pBacSB-Chis (Lohmann V, Koerner F, Herian U and Bartenschlager R, J. Virol 71 (1997) 8461-8428), which shows the complete DNA sequence of a recombinant NS5B gene from the hepatitis C virus genotype 1b, a DNA sequence is amplified by polymerase chain reaction (PCR) (Sambrock J and Russel DW, Cold Spring Harbor Press, New York (2001)), which encodes a NS5B protein truncated by 21 amino acids at the carboxyl terminus , By using the PCR primers 5B21AAUPI (5'-AATTGCTAGCATGTCCTACACATGGACAGGCGCCCTGA-3 ') and 5B21AAD1 (5'-TATACTCGAGGCGGGGTCGGGCACGAGACAGGCT-3'), the PCR product can be introduced into the T7 expression vector pET21b (Novagen) via the recognition cleavage sites for the restriction endonucleases NheI and XhoI are cloned. The thus-constructed plasmid pET21NS5Bt expresses an NS5B protein carrying amino acids 2420 to 2989 of the HCV precursor polyprotein and a poly-histidine fusion at the carboxyl terminus. The expression and purification of such a recombinant NS5B variant in the heterologous host Escherichia coli BL21 (DE3) (Novagen) has already been described several times (Ferrari E, Wright-Minogue J, Fang JWS, Baroudy BM, Lau JYN and Hong Z, J. Virol Tomei L, Vitale RL, Incitti I, Serafini S, Altamura S, Vitelli A and DeFrancesco R, J. Gen. Virol 81 (2000) 759-767). BL21 (DE3) cells transformed with the plasmid pET21NS5Bt are shaken to an optical density OD (600 nm) = 0.6 at 37 ° C in LB medium (plus 100 μg / ml ampicillin) and then at 0, 5 mM IPTG (isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside) induced. To prevent cell inclusion bodies, expression is carried out at 20 ° C to 25 ° C for 4 hours. The cell pellets recovered by centrifugation (20 min, 5000 x g, 4 ° C) are assayed for OD (600 nm) = 50 to 500 in cell disruption buffer (50 mM NaH 2 PO 4 ; 5 mM Tris-HCl (Tris - (hydroxymethyl) -aminomethane) pH 8.0; 25 mM imidazole; 10 mM MgCl 2 ; 500 mM NaCl; 0.1% (v / v) β-mer capto-ethanol; 1 mM EDTA (ethylenediamine-N, N, N ', N'-tetraacetate); 10% (v / v) glycerol; 1 tablet / 50 ml Complete (Roche); 10 μg / ml DNase I) and then disrupted with ultrasound (10 × 30 s, 200 W, 0 ° C.). The soluble protein fraction, which is separated from the insoluble protein fraction by centrifugation (20 min; 10000 x g; 4 ° C), is sterile filtered (<0.45 μm) and loaded onto a Ni-NTA column (nickel nitrilotriacetic acid, Qiagen ) applied. After sample loading, a 10 column volume cell disruption buffer wash followed by 20 column volumes of wash buffer (50 mM NaH 2 PO 4 ; 5 mM Tris-HCl pH 8.0; 25 mM imidazole; 10 mM MgCl 2 ; 500 mM NaCl; 0.1 % (v / v) β-mercaptoethanol; 1mM EDTA; 10% (v / v) glycerol). The protein elution is carried out with an imidazole step gradient (wash buffer supplemented with 50 mM, 100 mM, 250 mM and 500 mM imidazole) with 5 column volumes per imidazole step. During elution, fractions of 1 to 2 ml volume are collected and analyzed in SDS-PAGE. The NS5B-containing fractions are pooled and purified using a PD10 column (Amersham) according to the manufacturer in storage buffer (25 mM Tris-HCl pH 7.5, 0.3 M NaCl, 10 mM MgCl 2 , 5 mM DTT (dithiothreitol 1mM EDTA, 0.1% n-dodecyl maltoside, 30% glycerol) and stored at -80 ° C. The mock control procedure is analogous to a protein extract obtained from Escherichia coli BL21 (DE3) cells transformed with the empty vector pET21b.
Zum Nachweis der NS5B-Aktivität wird eine RNA-Polymerase katalysierte Primer-Elongations-Reaktion durchgeführt wie sie bereits beschrieben wurde (Ferrari et al., 1999; Tomei et al., 2000). Dabei wird ein einzelsträngiges, homopolymeres RNA-Template (poly(rA) (Amersham)) mit Hilfe von RNA-Primern (oligo(rU)12 (Eurogentec)) und dem Substrat UTP zu einer doppelsträngigen RNA-Duplex umgesetzt. Bei Verwendung von radioaktiv markiertem UTP z.B. [32P]-UTP kann der Einbau des Substrats quantifiziert werden. In Abweichung zu der Großzahl von publizierten Assayformaten wird Tritium markiertes UTP ([3H]-UTP ([5,6 3H]-Uridin-5'-Triphosphat), Perkin Elmer) anstelle von [32P]-UTP verwendet, wie es bereits bei Uchiyama et al. (Uchiyama Y, Huang Y, Kanamori H, Uchida M, Doi T, Takamizawa A, Hamakubo T und Kodama T, Hepatol. Res. 23 (2002) 90-97) Verwendung fand. Ein Reaktionsansatzt enthält 6 μg/ml poly(rA), 90 nM oligo(rU)12, 5 μM UTP und 16 μCi/ml [3H]-UTP und in 90 μl Reaktionspuffer (20 mM Tris-HCl pH 7,5; 25 mM KCl; 5 mM MgCl2; 1 mM EDTA; 1 mM DTT; 0,01%(w/v) BSA; 0,5 (v/v) DMSO; 100 U/ml RNasin (Promega)). Soll die Wirkung von Substanzen auf die Polymeraseaktivität getestet werden, wird die zu testende Substzanz in gewünschter Konzentration vor der Zugabe von Template, Primer und Substrat dem Reaktionsansatz zugesetzt. Die Reaktion wird durch die Zugabe von 12,5 nM NS5B-Protein gestartet und bei 30°C inkubiert. Nach einer Inkubationszeit von 120 min wird die Reaktion mit 1 Volumen eiskaltem Stoppuffer 1 (0,2 M EDTA; 100 μg/ml Kalbsthymus DNA) gestoppt und in 4 Volumen Stopplösung 2 (10%(w/v) Tri-Chlor-Essigsäure; 0,5%(w/v) Natrium Pyrophosphat für 30 min auf Eis gefällt. Das Präzipitat wird auf GF/C-Filter im 96er-Well Mikrotiterplatten-Format (Millipore) übertragen und 3 mal mit Waschlösung 1 (1%(w/v) Tri-Chlor-Essigsäure; 0,1%(w/v) Natrium Pyrophosphat) und 2 mal mit 95% (v/v) Ethanol gewaschen. Die getrockneten Filter werden mit Szintillationsflüssigkeit (Liquid Scintillation Cocktails Ultima Gold XR, Packard Instruments) versetzt, weitere 30 min inkubiert und anschließend mit einem Microbeta Counter (1450 Microbeta Plus, Wallac) nach Angaben des Herstellers ausgelesen. Die eingebaute Menge [3H]-UTP bzw. die gemessenen CPM (counts per minute) sind ein Maß für die Aktivität der NS5B-Polymerase. Zur Bestimmung der IC50-Werte wird in einer Dosis-Wirkungskurve der relative Einbau von [3H]-UTP gegen die Konzentration der eingesetzten Testsubstanz aufgetragen. Die IC50-Werte werden mit Hilfe der Analysesoftware GraphPad Prism 3.02 (GraphPad Software, INC) unter Benutzung der Funktion „Sigmoidale Dosis-Wirkungskurve mit variabler Steigung" ermittelt. Als Bezugsgröße wird der relative Einbau an [3H]-UTP ohne Zusatz einer Testsubstanz verwendet.To detect NS5B activity, an RNA polymerase catalyzed primer elongation reaction is performed as previously described (Ferrari et al., 1999; Tomei et al., 2000). Here, a single-stranded, homopolymeric RNA template (poly (rA) (Amersham)) with the aid of RNA primers (oligo (rU) 12 (Eurogentec)) and the substrate UTP is converted to a double-stranded RNA duplex. When using radioactively labeled UTP eg [ 32 P] -UTP, the incorporation of the substrate can be quantified. In contrast to the majority of published assay formats, tritiated UTP ([ 3 H] -UTP ([5,6 3 H] -uridine-5'-triphosphate), Perkin Elmer) is used instead of [ 32 P] -UTP, such as it has already been described by Uchiyama et al. (Uchiyama Y, Huang Y, Kanamori H, Uchida M, Doi T, Takamizawa A, Hamakubo T and Kodama T, Hepatol. Res. 23 (2002) 90-97). A reaction mixture contains 6 μg / ml poly (rA), 90 nM oligo (rU) 12 , 5 μM UTP and 16 μCi / ml [ 3 H] -UTP and in 90 μl reaction buffer (20 mM Tris-HCl pH 7.5; 25 mM KCl; 5 mM MgCl 2 ; 1 mM EDTA; 1 mM DTT; 0.01% (w / v) BSA; 0.5 (v / v) DMSO; 100 U / ml RNasin (Promega)). If the effect of substances on the polymerase activity is to be tested, the substance to be tested in the desired concentration is added to the reaction mixture before the addition of template, primer and substrate. The reaction is started by the addition of 12.5 nM NS5B protein and incubated at 30 ° C. After an incubation period of 120 min, the reaction is stopped with 1 volume of ice-cold stop buffer 1 (0.2 M EDTA; 100 μg / ml calf thymus DNA) and dissolved in 4 volumes of stop solution 2 (10% (w / v) tri-chloro-acetic acid; 0.5% (w / v) sodium pyrophosphate is precipitated on ice for 30 min The precipitate is transferred to GF / C filters in 96 well microtiter plate format (Millipore) and washed 3 times with wash solution 1 (1% w / w). v) Tri-chloroacetic acid, 0.1% (w / v) sodium pyrophosphate) and twice with 95% (v / v) ethanol The dried filters are washed with scintillation liquid (Ultima Gold XR Liquid Scintillation Cocktails, Packard Instruments ), incubated for a further 30 minutes and then read using a Microbeta Counter (1450 Microbeta Plus, Wallac) according to the manufacturer The built-in amount [ 3 H] -UTP or the measured CPM (counts per minute) are a measure of the Activity of the NS5B Polymerase To determine the IC 50 values, the relative egg is determined in a dose-response curve Construction of [ 3 H] -UTP against the concentration of the test substance used applied. The IC 50 values are determined using the GraphPad Prism 3.02 analysis software (GraphPad Software, INC) using the Sigmoid Variable-Dose-Response Curve function. The reference is the relative incorporation of [ 3 H] -UTP without the addition of a Test substance used.
C. Ausführungsbeispiele für pharmazeutische ZusammensetzungenC. Embodiments for pharmaceutical compositions
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können folgendermaßen in pharmazeutische Zubereitungen überführt werden:The Compounds of the invention can as follows be converted into pharmaceutical preparations:
Tablette:Tablet:
Zusammensetzung: 100 mg der Verbindung von Beispiel 1, 50 mg Lactose (Monohydrat), 50 mg Maisstärke (nativ), 10 mg Polyvinylpyrolidon (PVP 25) (Fa. BASF, Ludwigshafen, Deutschland) und 2 mg Magnesiumstearat.Composition: 100 mg of the compound of Example 1, 50 mg lactose (monohydrate), 50 mg of corn starch (natively), 10 mg polyvinylpyrolidone (PVP 25) (BASF, Ludwigshafen, Germany) and 2 mg magnesium stearate.
Tablettengewicht 212 mg. Durchmesser 8 mm, Wölbungsradius 12 mm.tablet weight 212 mg. Diameter 8 mm, radius of curvature 12 mm.
Herstellung: Die Mischung aus Wirkstoff, Lactose und Stärke wird mit einer 5%-igen Lösung (m/m) des PVPs in Wasser granuliert. Das Granulat wird nach dem Trocknen mit dem Magnesiumstearat für 5 min. gemischt. Diese Mischung wird mit einer üblichen Tablettenpresse verpresst (Format der Tablette siehe oben). Als Richtwert für die Verpressung wird eine Presskraft von 15 kN verwendet.Preparation: The mixture of active ingredient, lactose and starch is granulated with a 5% solution (m / m) of the PVP in water. The granules, after drying with the magnesium stearate for 5 min. mixed. This mixture is compressed with a conventional tablet press (for the tablet format see above). As a guideline for the compression, a pressing force of 15 kN is used.
Oral applizierbare Suspension:Orally administrable suspension:
Zusammensetzung: 1000 mg der Verbindung von Beispiel 1, 1000 mg Ethanol (96%), 400 mg Rhodigel (Xanthan gum der Fa. FMC, Pennsylvania, USA) und 99 g Wasser.Composition: 1000 mg of the compound of Example 1, 1000 mg of ethanol (96%), 400 mg Rhodigel (xanthan gum from FMC, Pennsylvania, USA) and 99 g of water.
Einer Einzeldosis von 100 mg der erfindungsgemäßen Verbindung entsprechen 10 ml orale Suspension.one Single dose of 100 mg of the compound of the invention correspond 10 ml oral suspension.
Herstellung: Das Rhodigel wird in Ethanol suspendiert, der Wirkstoff wird der Suspension zugefügt. Unter Rühren erfolgt die Zugabe des Wassers. Bis zum Abschluss der Quellung des Rhodigels wird ca. 6 h gerührt.production: The rhodigel is suspended in ethanol, the active ingredient is the Added suspension. Under stir the addition of the water takes place. Until the completion of the swelling of the Rhodigels is stirred for about 6 h.
Oral applizierbare Lösung:Orally administrable solution:
Zusammensetzung: 500 mg der erfindungsgemäßen Verbindung, 2.5 g Polysorbat und 97 g Polyethylenglycol 400. Einer Einzeldosis von 100 mg der erfindungsgemäßen Verbindung entsprechen 20 g orale Lösung.Composition: 500 mg of the compound according to the invention, 2.5 g polysorbate and 97 g polyethylene glycol 400. A single dose of 100 mg of the compound of the invention correspond to 20 g of oral solution.
Herstellung: Die erfindungsgemäße Verbindung wird in der Mischung aus Polyethylenglycol und Polysorbat unter Rühren suspendiert. Der Rührvorgang wird bis zur vollständigen Auflösung der erfindungsgemäßen Verbindung fortgesetzt.production: The compound of the invention is in the mixture of polyethylene glycol and polysorbate under stir suspended. The stirring process will be up to the full resolution the compound of the invention continued.
i.v.-Lösung:iv solution:
Die erfindungsgemäße Verbindung wird in einer Konzentration unterhalb der Sättigungslöslichkeit in einem physiologisch verträglichen Lösungsmittel (z.B. isotonische Kochsalzlösung, Glucoselösung 5% und/oder PEG 400-Lösung 30%) gelöst. Die Lösung wird steril filtriert und in sterile und pyrogenfreie Injektionsbehältnisse abgefüllt.The inventive compound becomes in a concentration below the saturation solubility in a physiological acceptable solvent (e.g., isotonic saline, glucose solution 5% and / or PEG 400 solution 30%) solved. The solution is sterile filtered and placed in sterile and pyrogen-free injection containers bottled.
Claims (13)
Priority Applications (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE102005028077A DE102005028077A1 (en) | 2004-12-22 | 2005-06-17 | Alkynyl-substituted thiophenes |
PCT/EP2005/013218 WO2006072348A2 (en) | 2004-12-22 | 2005-12-09 | Alkinyl-substituted thiophenes |
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE102004061745.7 | 2004-12-22 | ||
DE102004061745 | 2004-12-22 | ||
DE102005028077A DE102005028077A1 (en) | 2004-12-22 | 2005-06-17 | Alkynyl-substituted thiophenes |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
DE102005028077A1 true DE102005028077A1 (en) | 2006-07-13 |
Family
ID=36599492
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DE102005028077A Withdrawn DE102005028077A1 (en) | 2004-12-22 | 2005-06-17 | Alkynyl-substituted thiophenes |
Country Status (2)
Country | Link |
---|---|
DE (1) | DE102005028077A1 (en) |
WO (1) | WO2006072348A2 (en) |
Families Citing this family (14)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
AP1753A (en) | 2001-06-11 | 2007-07-18 | Shire Biochem Inc | Thiophene derivatives as antiviral agents for flavvivirus infection |
KR101058696B1 (en) | 2002-12-10 | 2011-08-22 | 바이로켐 파마 인코포레이티드 | Compounds and Methods for the Treatment or Prevention of Furabivirus Infections |
KR20080016597A (en) | 2005-05-13 | 2008-02-21 | 바이로켐 파마 인코포레이티드 | Compounds and methods for the treatment or prevention of flavivirus infections |
DE102006013957A1 (en) * | 2006-03-27 | 2007-10-04 | Bayer Healthcare Aktiengesellschaft | Use of new or known N-benzyl N-phenyl benzenesulfonamide derivatives to prepare medicaments for treating or preventing viral diseases |
PL2104674T3 (en) | 2006-11-15 | 2013-12-31 | Vertex Pharmaceuticals Canada Incorporated | Thiophene analogues for the treatment or prevention of flavivirus infections |
PE20120666A1 (en) | 2009-07-21 | 2012-06-01 | Gilead Sciences Inc | INHIBITORS OF FLAVIVIRIDAE VIRUSES |
NZ598208A (en) | 2009-09-09 | 2014-02-28 | Gilead Sciences Inc | Inhibitors of flaviviridae viruses |
EP2504329A1 (en) * | 2009-11-25 | 2012-10-03 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | 5-alkynyl-thiophene-2-carboxylic acid derivatives and their use for the treatment or prevention of flavivirus infections |
AR080001A1 (en) | 2010-01-15 | 2012-03-07 | Gilead Sciences Inc | VIRUS FLAVIVIRIDAE INHIBITORS |
US8524764B2 (en) * | 2010-01-15 | 2013-09-03 | Gilead Sciences, Inc. | Inhibitors of Flaviviridae viruses |
EP2734515B1 (en) | 2011-07-13 | 2015-11-04 | Gilead Sciences, Inc. | Thiophen-2-carboxylic acid derivatives useful as inhibitors of flaviviridae viruses |
US8841340B2 (en) | 2012-08-17 | 2014-09-23 | Gilead Sciences, Inc. | Solid forms of an antiviral compound |
US8927741B2 (en) | 2012-08-17 | 2015-01-06 | Gilead Sciences, Inc. | Synthesis of an antiviral compound |
US8759544B2 (en) | 2012-08-17 | 2014-06-24 | Gilead Sciences, Inc. | Synthesis of an antiviral compound |
Family Cites Families (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
AP1753A (en) * | 2001-06-11 | 2007-07-18 | Shire Biochem Inc | Thiophene derivatives as antiviral agents for flavvivirus infection |
DE60221627D1 (en) * | 2001-12-21 | 2007-09-20 | Virochem Pharma Inc | Thiazole derivatives and their use for the treatment or prevention of infections by flaviviruses |
DE10359791A1 (en) * | 2003-12-19 | 2005-07-21 | Bayer Healthcare Ag | Substituted thiophenes |
-
2005
- 2005-06-17 DE DE102005028077A patent/DE102005028077A1/en not_active Withdrawn
- 2005-12-09 WO PCT/EP2005/013218 patent/WO2006072348A2/en not_active Application Discontinuation
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
WO2006072348A2 (en) | 2006-07-13 |
WO2006072348A3 (en) | 2006-09-21 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
DE102005028077A1 (en) | Alkynyl-substituted thiophenes | |
DE10359791A1 (en) | Substituted thiophenes | |
WO2006072347A2 (en) | Alkinyl-substituted thiophenes | |
EP1940792B1 (en) | Aminopyrimidine, aminopyridine and aniline derivatives as inhibitors of pim-1 and/or pim-3 | |
US7449488B2 (en) | Pyrazolopyrimidines as protein kinase inhibitors | |
KR101313804B1 (en) | Fused amino pyridine as hsp90 inhibitors | |
AU2015355839B2 (en) | Heterocyclic derivatives and use thereof | |
KR20060072142A (en) | Crf antagonists and heterobicyclic compounds | |
CN101087755A (en) | Substituted aryl acylthioureas and related compounds, inhibitors of viral replication | |
AU2005288080A1 (en) | Carbostyril compound | |
CN101687875A (en) | Pyrrolopyrimidin-7-one derivatives and their use as pharmaceuticals | |
US20110183974A1 (en) | 1,2,4-oxadiazole substituted piperidine and piperazine derivatives as smo antagonists | |
CA2657651A1 (en) | Antiviral agents | |
US8470823B2 (en) | Saturated bicyclic heterocyclic derivatives as SMO antagonists | |
CZ293825B6 (en) | Quinoxalines, process of their preparation, their use and pharmaceutical compositions in which these compounds are comprised | |
CA2893318A1 (en) | Thienopyridine derivatives for the treatment and prevention of dengue virus infections | |
TW200817413A (en) | Polycyclic viral inhibitors | |
WO2010007944A1 (en) | Nitrogenated bicyclic heterocyclic compound | |
TW200924758A (en) | Therapeutic agents | |
EP1896484A2 (en) | Tetrahydropyridothiophenes for use in the treatment of cancer | |
WO2007110171A1 (en) | Substituted n-benzyl-n-phenylbenzenesulphonamides for treating viral infections | |
WO2010082044A1 (en) | Unsaturated bicyclic heterocyclic derivatives as smo antagonists | |
MX2010013630A (en) | Tricyclic indole derivatives and methods of use thereof. | |
WO2008020024A1 (en) | Ntetrahydropyridothiophene derivatives for the treatment of cancer | |
CN107074876B (en) | Macrocyclic heterocyclic compound for inhibiting hepatitis C virus and preparation and application thereof |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
8139 | Disposal/non-payment of the annual fee |