DE102004058394A1

DE102004058394A1 - Sample holder for a cryoprobe and associated examination method

Info

Publication number: DE102004058394A1
Application number: DE200410058394
Authority: DE
Inventors: Heiko Dr. Zimmermann; Günter R. Prof. Dr. Fuhr; Rolf Dr. Hagedorn; Sebastian Schelenz
Original assignee: Fraunhofer Gesellschaft zur Forderung der Angewandten Forschung eV
Current assignee: Fraunhofer Gesellschaft zur Forderung der Angewandten Forschung eV
Priority date: 2004-12-03
Filing date: 2004-12-03
Publication date: 2006-06-14
Also published as: WO2006058816A1

Abstract

Die Erfindung betrifft eine Probenaufnahme (1) mit mindestens einer Probenkammer (2) zur Aufnahme einer Probe, insbesondere einer Kryoprobe, sowie mit mindestens einem Lichtwellenleiter (4, 5), der für eine optische Untersuchungg der Probe in die Probenkammer (2) mündet. Weiterhin umfasst die Erfindung ein entsprechendes optisches Untersuchungsverfahren.The invention relates to a sample receptacle (1) having at least one sample chamber (2) for receiving a sample, in particular a cryoprobe, and at least one optical waveguide (4, 5), which opens into the sample chamber (2) for an optical examination of the sample. Furthermore, the invention comprises a corresponding optical examination method.

Description

Die Erfindung betrifft eine Probenaufnahme, insbesondere für Kryoproben sowie ein Untersuchungsverfahren unter Verwendung einer derartigen Probenaufnahme gemäß dem Oberbegriff der nebengeordneten Ansprüche.The The invention relates to a sample receptacle, in particular for cryoprobes and an assay method using such a sample receiver according to the generic term the sibling claims.

Aus DE 100 60 889 A1 ist eine Probenaufnahme bekannt, die bei der Kryokonservierung eingesetzt werden kann, um eine Vielzahl von Kryoproben getrennt voneinander aufzunehmen. Die einzelnen Kryoproben können hierbei optisch untersucht werden, indem durch eine Abdeckung der einzelnen Probenkammern Lichtsignale ein- bzw. ausgekoppelt werden.Out DE 100 60 889 A1 For example, a sample receptacle is known that can be used in cryopreservation to separately receive a plurality of cryoprobes. In this case, the individual cryoprobes can be examined optically by switching on or off light signals by covering the individual sample chambers.

Nachteilig an dieser bekannten Probenaufnahme ist jedoch die unbefriedigende Eignung für optische Untersuchungen der in den einzelnen Probenkammern bzw. in Mehrprobensystemen befindlichen Kryoproben.adversely However, in this known sample holder is the unsatisfactory Fitness for optical investigations in the individual sample chambers or in multiple sample systems cryoprobes.

Der Erfindung liegt deshalb die Aufgabe zugrunde, die vorstehend beschriebene bekannte Probenaufnahme dahingehend zu verbessern, dass die darin befindlichen Kryoproben besser optisch untersucht werden können bzw. dass eine effizientere Untersuchung in Mehrprobensystemen möglich ist.Of the The invention is therefore based on the object described above to improve known sample recording in that the therein located cryoprobes can be better visually examined or that a more efficient investigation in multiple sampling systems is possible.

Diese Aufgabe wird durch einen Probenaufnahme bzw. ein Untersuchungsverfahren gemäß den nebengeordneten Ansprüchen gelöst.These The task is performed by a sample recording or an investigation procedure according to the siblings claims solved.

Die Erfindung umfasst die allgemeine technische Lehre, zur optischen Untersuchung der Kryoprobe Lichtwellenleiter einzusetzen, die in die Probenkammer gerichtet sind oder direkt in die Probenkammer münden.The Invention includes the general technical teaching, for optical Investigation of the Cryoprobe fiber optic cables used in the sample chamber are directed or directly into the sample chamber lead.

Über derartige Lichtwellenleiter kann in die Probenkammer ein Lichtsignal eingekoppelt werden, das von der darin befindlichen Probe beeinflusst wird. Das von der Kryoprobe beeinflusste Lichtsignal wird dann durch einen Lichtwellenleiter wieder aus der Probenkammer ausgekoppelt und ermöglicht im Rahmen einer anschließenden Auswertung Rückschlüsse auf den Zustand und die Beschaffenheit der untersuchten Probe.About such Optical waveguide can be coupled into the sample chamber, a light signal which is influenced by the sample contained therein. The then influenced by the cryoprobe light signal is then by a Fiber optic cable is again coupled out of the sample chamber and allows in the frame a subsequent Evaluation conclusions the condition and nature of the sample being tested.

In einem bevorzugten Ausführungsbeispiel der Erfindung weist die Probenaufnahme eine Vielzahl von Probenkammern für jeweils eine Probe auf, wobei in jede der Probenkammern jeweils mindestens ein Lichtwellenleiter gerichtet ist oder direkt mündet, um eine optische Untersuchung der in der Probenkammer befindlichen Probe zu ermöglichen. Vorzugsweise sind die einzelnen Probenkammern hierbei rasterförmig in der Probenaufnahme angeordnet, wie es beispielsweise auch bei einer herkömmlichen Mikrotiterplatte der Fall ist. Die Anzahl der Probenkammern in der Probenaufnahme ist hierbei beliebig und kann entsprechend dem erforderlichen Probenvolumen variiert werden.In a preferred embodiment of Invention, the sample receiving a plurality of sample chambers for each a sample, wherein in each of the sample chambers at least an optical fiber is directed or opens directly to an optical examination of those located in the sample chamber Allow sample. Preferably In this case, the individual sample chambers are grid-shaped in the sample holder arranged, as for example in a conventional Microtiter plate is the case. The number of sample chambers in the Sample recording is arbitrary and can be performed according to the required Sample volume can be varied.

In einer Variante der Erfindung mündet in die Probenkammer jeweils ein Lichtwellenleiter zur Einkopplung eines Lichtsignals und ein weiterer Lichtwellenleiter zur Auskopplung des von der Probe beeinflussten Lichtsignals, so dass die Ein- bzw. Auskopplung der Lichtsignale durch unterschiedliche Lichtwellenleiter erfolgt. In dieser Variante der Erfindung ist wahlweise eine Transmissionsmessung oder eine Reflexionsmessung der in der Probenkammer befindlichen Probe möglich.In a variant of the invention opens in the sample chamber in each case an optical waveguide for coupling a light signal and another optical fiber for decoupling of the light signal influenced by the sample, so that the coupling or decoupling the light signals through different optical fibers takes place. In this variant of the invention is optionally a transmission measurement or a reflection measurement of those in the sample chamber Sample possible.

Bei einer Transmissionsmessung münden der zur Einkopplung des Lichtsignals dienende Lichtwellenleiter einerseits und der zur Auskopplung des Lichtsignals dienende Lichtwellenleiter andererseits auf gegenüber liegenden Seiten in die Probenkammer ein. Der Winkel zwischen den beiden Lichtwellenleitern kann hierbei in einem Bereich zwischen 150 Grad und 180 Grad liegen, um eine aussagefähige Transmissionsmessung zu ermöglichen.at a transmission measurement lead to the for coupling the light signal serving optical waveguide on the one hand and the optical fiber serving for coupling out the light signal on the other hand, opposite lying sides in the sample chamber. The angle between the Both optical waveguides can in this case in a range between 150 Degrees and 180 degrees to allow a meaningful transmission measurement enable.

Bei einer ebenfalls möglichen Reflexionsmessung münden der zur Einkopplung des Lichtsignals dienende Lichtwellenleiter einerseits und der zur Auskopplung des Lichtsignals dienende Lichtwellenleiter andererseits dagegen auf derselben Seite in die Probenkammer. Hierbei können die beiden Lichtwellenleiter zur Ein- bzw. Auskopplung des Lichtsignals einen Winkel einschließen, der im Bereich zwischen 0 Grad und 50 Grad liegt, um eine aussagefähige Reflexionsmessung zu ermöglichen.at another possible one Reflection measurement open the serving for coupling the light signal optical waveguide on the one hand and the light waveguide serving for coupling out the light signal on the other hand, on the other hand, on the same side in the sample chamber. in this connection can the two optical waveguides for coupling or decoupling the light signal a Include angle, which is in the range between 0 degrees and 50 degrees to a meaningful reflection measurement to enable.

In beiden Fällen (Reflexionsmessung und Transmissionsmessung) können Systeme zur Bündelung, Brechung und/oder Umlenkung der Lichtsignale eingesetzt werden.In both cases (Reflection measurement and transmission measurement) can be bundled, Refraction and / or deflection of the light signals are used.

Bei einer erfindungsgemäßen Probenaufnahme mit einer Vielzahl von Probenkammern besteht die Möglichkeit, dass die zur Einkopplung des Lichtsignals dienenden Lichtwellenleiter von mehreren Probenkammern eingangsseitig zusammenführt und gemeinsam ansteuerbar sind. Dies ermöglicht vorteilhaft eine Vereinfachung der optischen Ansteuerung, da nur ein einziges Messsignal erzeugt werden muss, das auf die einzelnen Probenkammern aufgeteilt wird. Die Selektivität der optischen Untersuchung kann hierbei dadurch erreicht werden, dass aus jeder Probenkammer getrennt jeweils ein Lichtsignal ausgekop pelt wird, wozu vorzugsweise jeweils ein Lichtwellenleiter vorgesehen ist.at a sample holder according to the invention with a large number of sample chambers it is possible to in that the light waveguides serving for coupling the light signal of several sample chambers merges on the input side and jointly controllable. This advantageously allows a simplification the optical control, since only a single measurement signal generated must be divided into the individual sample chambers. The selectivity the optical examination can be achieved by that separated from each sample chamber in each case a light signal ausgekop pelt is, for which purpose preferably a respective optical waveguide is provided is.

Darüber hinaus besteht die Möglichkeit, dass die zur Auskopplung des Lichtsignals dienenden Lichtwellenleiter von mehreren Probenkammern ausgangsseitig zusammengeführt und gemeinsam auslesbar sind. Eine derartige Zusammenführung der zur Auskopplung dienenden Lichtwellenleiter vereinfacht vorteilhaft die messtechnische Auswertung, da nur ein einziger optischer Detektor erforderlich ist. Die Selektivität der optischen Untersuchung kann hierbei dadurch erreicht werden, dass in die einzelnen Probenkammern jeweils ein Lichtwellenleiter mündet, wobei in die einzelnen Probenkammern sequentiell ein Lichtsignal eingekoppelt wird, so dass nur eine einzige Probe die ausgangsseitige Messung beeinflusst.Furthermore it is possible, in that the light waveguides serving to decouple the light signal merged on the output side of several sample chambers and are jointly readable. Such a merger of the Coupling serving optical waveguide simplifies advantageous the metrological evaluation, since only a single optical detector is required. The selectivity the optical examination can be achieved by that in each case an optical waveguide opens into the individual sample chambers, wherein sequentially coupled into the individual sample chambers, a light signal so that only a single sample affects the output measurement.

Darüber hinaus besteht auch die Möglichkeit, dass sowohl die zur Einkopplung der Lichtsignale dienenden Lichtwellenleiter als auch die zur Auskopplung der Lichtsignale aus den Probenkammern dienenden Lichtwellenleiter eingangsseitig bzw. ausgangsseitig zusammengeführt werden, was messtechnisch am einfachsten ist, aber keine selektive Untersuchung der in den einzelnen Probenkammern befindlichen Kryoproben erlaubt.Furthermore there is also the possibility in that both the light waveguides serving for coupling the light signals as well as serving for coupling the light signals from the sample chambers Optical fibers are merged on the input side or output side, which is easiest in terms of metrology, but no selective investigation allowed in the individual sample chambers cryoprobes allowed.

Ferner besteht die Möglichkeit, dass die Einkopplung des Lichtsignals und die Auskopplung des von der Probe beeinflussten Lichtsignals jeweils durch einen einzigen Lichtwellenleiter erfolgt. Dies bietet den Vorteil, dass für jede Probenkammer nur ein einziger Lichtwellenleiter erforderlich ist, wodurch der Aufwand für die Lichtwellenleiter erheblich verringert wird. In dieser Variante der Erfindung erfolgt vorzugsweise eine Reflexionsmessung der in der Probenkammer befindlichen Probe.Further it is possible, that the coupling of the light signal and the decoupling of the the sample influenced light signal each by a single Optical waveguide takes place. This offers the advantage that for each sample chamber Only a single optical fiber is required, causing the Effort for the optical fiber is significantly reduced. In this variant The invention preferably takes a reflection measurement of in the sample chamber located sample.

Weiterhin kann die Probenkammer bei der erfindungsgemäßen Probenaufnahme eine lichtundurchlässige Probenkammerwand aufweisen, ohne die optische Untersuchung der in der Probenkammer befindlichen Probe zu beeinträchtigen. Bei einer solchen Probenkammer mit einer lichtundurchlässigen Probenkammerwand ragt der zur Untersuchung der Probe dienende Lichtwellenleiter vorzugsweise durch die Probenkammer hindurch in die Probenkammer hinein.Farther the sample chamber in the sample holder according to the invention an opaque sample chamber wall have, without the optical examination of the located in the sample chamber Affect sample. In such a sample chamber with an opaque sample chamber wall The optical waveguide serving to examine the sample preferably protrudes the sample chamber into the sample chamber.

In einem bevorzugten Ausführungsbeispiel der Erfindung sind die einzelnen Probenkammern in einem Substrat mit einem Oberteil und einem Unterteil angeordnet, wobei in dem Oberteil und/oder in dem Unterteil Kanäle zur Aufnahme der Lichtwellenleiter angeordnet sind. Die Lichtwellenleiter lassen sich somit durch ein entsprechendes Positionierungswerkzeug in die Kanäle in dem Unterteil einlegen, woraufhin das Oberteil mit dem Unterteil verklebt werden kann.In a preferred embodiment of Invention are the individual sample chambers in a substrate with an upper part and a lower part, wherein in the upper part and / or in the lower part channels are arranged for receiving the optical waveguide. The optical fibers can thus be controlled by a corresponding positioning tool into the channels in the lower part, whereupon the upper part with the lower part can be glued.

In einer Variante der Erfindung weist das in die Probenkammer eingekoppelte Lichtsignal eine Wellenlänge von ungefähr 650 nm auf, was die Überwachung und Sichtbarmachung von Phasenübergängen und Rekristallisationsprozessen ermöglicht. Damit lassen sich sowohl Nukleationskinetiken, wie sie beispielsweise zur Erforschung der Wirksamkeit von Gefrierschutzzusätzen mit der nötigen statistischen Absicherung benötigt werden, als auch die Abhängigkeiten zwischen Rekristallisationsprozessen und Zellüberleben bestimmen. Die Erfindung ist hierbei jedoch nicht auf eine Wellenlänge von exakt 650 nm beschränkt, sondern auch mit anderen Wellenlängen realisierbar, wobei die Wellenlänge des eingekoppelten Lichtsignals beispielsweise im Bereich von 550 nm bis 750 nm liegen kann.In a variant of the invention has the coupled into the sample chamber Light signal one wavelength of about 650 nm on what the monitoring and visualization of phase transitions and Recrystallization processes possible. In order to can be both nucleation kinetics, as for example to investigate the effectiveness of antifreeze additives with the necessary statistical hedging needed as well as dependencies determine between recrystallization processes and cell survival. The invention However, this is not limited to a wavelength of exactly 650 nm, but also with other wavelengths feasible, with the wavelength of the injected light signal, for example in the range of 550 nm can be up to 750 nm.

Darüber hinaus besteht im Rahmen der Erfindung die Möglichkeit einer Fluoreszenzfärbung der Proben, was es in Verbindung mit einer entsprechenden Anregung ermöglicht, die Bildung von intrazellulärem Eis in der Kryoprobe zu verfolgen.Furthermore exists within the scope of the invention the possibility of fluorescence staining of the samples, what makes it possible in conjunction with a corresponding suggestion the formation of intracellular Track ice in the cryoprobe.

Weiterhin ist zu erwähnen, dass die Probenkammer und/oder das Substrat mit den darin befindlichen Probenkammern vorzugsweise kühlbar ist und aus einem wärmeleitfähigem Material (z.B. Aluminium, Gold) oder aus einem wärmeisolierenden Material (z.B. Kunststoff) bestehen kann.Farther is to mention that the sample chamber and / or the substrate with the therein Sample chambers preferably coolable is and made of a thermally conductive material (e.g., aluminum, gold) or a heat-insulating material (e.g. Plastic) can exist.

Ferner ist zu erwähnen, dass der Lichtwellenleiter zur Ein- bzw. Auskopplung des Lichtsignals in die Probenkammer nicht notwendigerweise direkt in die Probenkammer münden muss. Es besteht vielmehr auch die Möglichkeit, dass die Probenkammer eine Mündungsöffnung aufweist, wobei der zur Einkopplung des Lichtsignals dienende Wellenleiter und der zur Auskopplung des Lichtsignals dienende Lichtwellenleiter von außen in die Mündungsöffnung der Probenkammer gerichtet ist. Hierbei können beispielsweise Miniaturspiegel und/oder -linsen eingesetzt werden, um eine entsprechende Strahlumlenkung zu erreichen.Further is to mention that the optical waveguide for coupling or decoupling the light signal in the sample chamber is not necessarily directly into the sample chamber flow got to. Rather, there is also the possibility that the sample chamber a Having orifice, wherein the serving for coupling the light signal waveguide and the optical fiber serving for coupling out the light signal from the outside in the mouth of the Sample chamber is directed. Here, for example, miniature mirror and / or lenses are used to a corresponding beam deflection to reach.

Bei einer erfindungsgemäßen Probenaufnahme mit einer Vielzahl von rasterförmig angeordneten Probenkammern besteht ferner die Möglichkeit, über der Probenaufnahme ein Glasfaserbündel anzuordnen, das die in den Probenkammern befindlichen Proben optisch untersucht.at a sample holder according to the invention with a variety of grid-shaped arranged sample chambers is also possible, above the sample holder To arrange glass fiber bundles, which visually inspects the samples in the sample chambers.

Darüber hinaus ist zu erwähnen, dass die einzelnen Probenkammern vorzugsweise ein Volumen zwischen 10 pl und 2 ml aufweisen, wobei die Probenaufnahme beispielsweise 96 oder 384 Probenkammern aufweisen kann, was der Anzahl von Probenkammern bei herkömmlichen Mikrotiterplatten entspricht. In einem be vorzugten Ausführungsbeispiel liegt das Volumen der einzelnen Probenkammern im Bereich von 20 μl bis 30 μl, wobei ein Wert von 25 μl besonders vorteilhaft ist.Furthermore is to mention the individual sample chambers preferably have a volume between 10 pl and 2 ml, the sample holder, for example 96 or 384 sample chambers, which may be the number of sample chambers at conventional Microtiter plates corresponds. In a preferred embodiment be preferred The volume of the individual sample chambers is in the range of 20 .mu.l to 30 .mu.l, wherein a value of 25 μl is particularly advantageous.

Darüber hinaus umfasst die Erfindung ein entsprechendes Untersuchungsverfahren, was bereits aus der vorstehenden Beschreibung hervorgeht.Furthermore the invention comprises a corresponding investigation method, which already appears from the above description.

Schließlich ist noch zu erwähnen, dass der im Rahmen der Erfindung verwendete Begriff eines Lichtwellenleiters allgemein zu verstehen ist und nicht auf Glasfasern (z.B. Stufenfasern oder Gradientenfasern) im engeren Sinne beschränkt ist. Es besteht vielmehr auch die Möglichkeit, dass das Substrat der Probenaufnahme selbst den Lichtwellenleiter bildet. Dies ist beispielsweise dann möglich, wenn das Substrat der Probenaufnahme aus einem durchsichtigen Kunststoff besteht.Finally is to mention that of the term used in the invention of an optical waveguide is generally understood and not on glass fibers (e.g., step fibers or gradient fibers) in the narrower sense is limited. It rather exists also the possibility that the substrate of the sample holder itself forms the optical waveguide. This is possible, for example, then if the substrate of the sample holder made of a transparent plastic consists.

Andere vorteilhafte Weiterbildungen der Erfindung sind in den Unteransprüchen gekennzeichnet oder werden nachstehend zusammen mit der Beschreibung der bevorzugten Ausführungsbeispiele der Erfindung anhand der Figuren näher erläutert. Es zeigen:Other advantageous developments of the invention are characterized in the subclaims or will be discussed below together with the description of the preferred Embodiments of the Invention with reference to the figures explained. Show it:

1 eine Perspektivansicht einer erfindungsgemäßen Probenaufnahme mit neun Probenkammern zur Aufnahme von Kryoproben, 1 a perspective view of a sample holder according to the invention with nine sample chambers for receiving cryoprobes,

2 eine vereinfachte Perspektivansicht einer Probenkammer der Probenaufnahme aus 1, 2 a simplified perspective view of a sample chamber of the sample holder from 1 .

3A und 3B Perspektivansichten eines Oberteils und eines Unterteils eines alternativen Ausführungsbeispiels einer erfindungsgemäßen Probenaufnahme, 3A and 3B Perspective views of an upper part and a lower part of an alternative embodiment of a sample holder according to the invention,

4 eine Perspektivansicht eines alternativen Ausführungsbeispiels einer erfindungsgemäßen Probenaufnahme, bei dem Lichtwellenleiter zur optischen Untersuchung durch die Mündungsöffnung in die einzelnen Probenkammern gerichtet sind, 4 a perspective view of an alternative embodiment of a sample holder according to the invention, in which optical fibers are directed through the mouth opening into the individual sample chambers for optical examination,

5 ein weiteres alternatives Ausführungsbeispiel einer erfindungsgemäßen Probenaufnahme, bei dem die optische Untersuchung der Kryoproben durch ein Glasfaserbündel erfolgt, 5 a further alternative embodiment of a sample receptacle according to the invention, in which the optical examination of the cryoprobes takes place through a glass fiber bundle,

6A bis 6C verschiedene vereinfachte Aufsichtsdarstellungen einer Probenkammer mit zwei Lichtwellenleitern zur Ein- bzw. Auskopplung eines Lichtsignals aus der Probenkammer, 6A to 6C various simplified views of a sample chamber with two optical waveguides for coupling or decoupling a light signal from the sample chamber,

7 bis 10 verschiedene Aufsichtsdarstellungen einer erfindungsgemäßen Probenaufnahme mit sechs Probenkammern und unterschiedlichen Konfigurationen der Lichtwellenleiter zur Ein- bzw. Auskopplung der Lichtsignale. 7 to 10 various views of a supervisor of a sample holder according to the invention with six sample chambers and different configurations of optical fibers for coupling or decoupling the light signals.

Die Perspektivansicht in 1 zeigt in vereinfachter Form eine erfindungsgemäße Probenaufnahme 1 mit neun Probenkammern 2 zur Aufnahme jeweils einer Kryoprobe.The perspective view in 1 shows in simplified form a sample holder according to the invention 1 with nine sample chambers 2 for each receiving a cryoprobe.

Die Probenaufnahme 1 besteht aus einem wärmeleitfähigem Material, wie beispielsweise Aluminium, und ist kühlbar, um eine vitalitätserhaltende Kryokonservierung von Kryoproben zu er möglichen, was an sich bekannt ist und deshalb hier nicht weiter beschrieben wird.The sample holder 1 is made of a thermally conductive material, such as aluminum, and is coolable to enable vitality-preserving cryopreservation of cryoprobes, which is known per se and therefore will not be further described here.

Die Beschickung der einzelnen Probenkammern erfolgt durch jeweils eine Mündungsöffnung 3, die an der Oberseite der Probenaufnahme 1 zugänglich ist.The feeding of the individual sample chambers is carried out by a respective mouth opening 3 at the top of the specimen holder 1 is accessible.

In die einzelnen Probenkammern 2 mündet jeweils ein Lichtwellenleiter 4 zur Einkopplung eines Lichtsignals, das zur optischen Untersuchung der in den Probenkammern 2 befindlichen Kryoproben dient.Into the individual sample chambers 2 each opens an optical fiber 4 for coupling a light signal, which is used for the optical examination of the in the sample chambers 2 located cryoproben serves.

Darüber hinaus mündet in jede der Probenkammern 2 jeweils ein weiterer Lichtwellenleiter 5 zur Auskopplung eines Lichtsignals, wobei das über die Lichtwellenleiter 5 ausgekoppelte Lichtsignal von den einzelnen Kryoproben beeinflusst wird und dadurch einen Rückschluss auf den Zustand und die Beschaffenheit der jeweiligen Kryoprobe ermöglicht.In addition, flows into each of the sample chambers 2 in each case a further optical waveguide 5 for decoupling a light signal, which via the optical waveguide 5 decoupled light signal is influenced by the individual cryoprobes, thereby allowing a conclusion on the state and nature of each cryoprobe.

Aus der vereinfachten Perspektivansicht in 2 ist ersichtlich, dass der Lichtwellenleiter 4 zur Einkopplung eines Lichtsignals einerseits und der Lichtwellenleiter 5 zur Auskopplung eines Lichtsignals auf gegenüberliegenden Seiten in die Probenkammer 2 münden, so dass eine Transmissionsmessung der in der Probenkammer befindlichen Kryoprobe stattfindet.From the simplified perspective view in 2 it can be seen that the optical waveguide 4 for coupling a light signal on the one hand and the optical waveguide 5 for coupling a light signal on opposite sides into the sample chamber 2 open, so that a transmission measurement of the cryoprobe in the sample chamber takes place.

Die 3A und 3B zeigen ein alternatives Ausführungsbeispiel einer erfindungsgemäßen Probenaufnahme, die aus einem Oberteil 6 und einem Unterteil 7 besteht.The 3A and 3B show an alternative embodiment of a sample holder according to the invention, which consists of an upper part 6 and a lower part 7 consists.

In dem Unterteil 7 sind mehrere zylindrische, topfförmige Probenkammern 8 angeordnet, wobei das Unterteil 7 aus einem wärmeleitfähigen Material besteht, wie beispielsweise Alumi nium. Dies ermöglicht vorteilhaft eine definierte Kühlung der in den Probenkammern 8 befindlichen Kryoproben.In the lower part 7 are several cylindrical cup-shaped sample chambers 8th arranged, the lower part 7 is made of a thermally conductive material, such as Alumi nium. This advantageously allows a defined cooling in the sample chambers 8th located cryoprobes.

An der Oberseite des Unterteils 7 verlaufen vom Umfangsrand der Mündungsöffnung der Probenkammern 8 Kanäle 9, 10 mit einem halbkreisförmigen Querschnitt, wobei die Kanäle 9, 10 im montierten Zustand jeweils einen Lichtwellenleiter aufnehmen, der hier zur Vereinfachung nicht dargestellt ist.At the top of the base 7 extend from the peripheral edge of the mouth of the sample chambers 8th channels 9 . 10 with a semicircular cross section, with the channels 9 . 10 in each case receive an optical waveguide in the assembled state, which is not shown here for simplicity.

In dem Oberteil 6 der Probenaufnahme befinden sich an der Unterseite ebenfalls entsprechend angepasste Kanäle 11, 12 mit einem halbkreisförmigen Querschnitt, die im montierten Zustand über den Kanälen 9, 10 in dem Unterteil 7 liegen und dadurch Kanäle mit einem kreisförmigen Querschnitt bilden, in welche die Lichtwellenleiter eingelegt werden können.In the shell 6 the sample recording be There are also adapted channels on the underside 11 . 12 with a semicircular cross-section, which in the assembled state over the channels 9 . 10 in the lower part 7 lie and thereby form channels with a circular cross section, in which the optical fibers can be inserted.

Darüber hinaus befinden sich in dem Oberteil 6 zylindrische Bohrungen 13, die im montierten Zustand fluchtend über den Probenkammern 8 liegen und dadurch eine Beschickung der Probenkammern 8 ermöglichen.In addition, located in the top 6 cylindrical holes 13 , which in the installed state aligned over the sample chambers 8th lie and thereby a charge of the sample chambers 8th enable.

Im montierten Zustand ist das Oberteil 6 mit dem Unterteil 7 verklebt und bildet eine kompakte Einheit.When assembled, the upper part is 6 with the lower part 7 glued and forms a compact unit.

Im Folgenden wird nun das Ausführungsbeispiel gemäß 4 beschrieben, das teilweise mit dem vorstehend beschriebenen und in 1 dargestellten Ausführungsbeispiel übereinstimmt, so dass zur Vermeidung von Wiederholungen auf die vorstehende Beschreibung zu 1 verwiesen wird, wobei für entsprechende Bauteile dieselben Bezugszeichen wie in 1 verwendet werden.The following is the embodiment according to 4 described in part with the above-described and in 1 corresponds to the embodiment shown, so that to avoid repetition of the above description 1 is referenced, wherein for corresponding components the same reference numerals as in 1 be used.

Eine Besonderheit dieses Ausführungsbeispiels besteht in der Ein- bzw. Auskopplung der Lichtsignale zur optischen Untersuchung der in den Probenkammern 2 befindlichen Kryoproben.A special feature of this embodiment is the input or output of the light signals for optical examination of the in the sample chambers 2 located cryoprobes.

Hierzu sind Lichtwellenleiter 14, 15 vorgesehen, die oberhalb der Mündungsöffnung 3 der einzelnen Probenkammern 2 angeordnet sind und auf die Mündungsöffnung 3 gerichtet sind. Anstelle der abgewinkelten Lichtwellenleiter 14, 15 können auch entsprechende Mikrospiegel eingesetzt werden, um die Lichtsignale von außen durch die Mündungsöffnung 3 in die Probenkammern 2 ein- bzw. auszukoppeln.These are optical fibers 14 . 15 provided, the above the mouth opening 3 the individual sample chambers 2 are arranged and on the mouth opening 3 are directed. Instead of the angled optical fiber 14 . 15 It is also possible to use corresponding micromirrors to transmit the light signals from the outside through the mouth opening 3 into the sample chambers 2 to couple in or out.

Das in 5 dargestellte Ausführungsbeispiel stimmt ebenfalls teilweise mit dem vorstehend beschriebenen und in 1 dargestellten Ausführungsbeispiel überein, so dass zur Vermeidung von Wiederholungen auf die vorstehende Beschreibung verwiesen wird, wobei für entsprechende Bauteile ebenfalls dieselben Bezugszeichen verwendet werden wie in 1.This in 5 Embodiment also partially agrees with that described above and in 1 In order to avoid repetition, reference is made to the above description, with the same reference numerals being used for corresponding components as in FIG 1 ,

Eine Besonderheit dieses Ausführungsbeispiels besteht darin, dass die optische Untersuchung der in den Probenkammern 2 befindlichen Kryoproben durch ein Glasfaserbündel 16 erfolgt, das oberhalb der Probenaufnahme 1 verschiebbar angeordnet ist und die gesamte Breite der Probenaufnahme 1 abdeckt, wobei über das Glasfaserbündel 16 Lichtstrahlen in die einzelnen Probenkammern 2 eingekoppelt bzw. daraus ausgekoppelt werden können.A special feature of this embodiment is that the optical examination of the in the sample chambers 2 located cryoprobes through a glass fiber bundle 16 This is done above the sample holder 1 slidably disposed and the entire width of the sample holder 1 covering, using the fiber optic bundle 16 Light rays in the individual sample chambers 2 coupled or can be coupled out of it.

Die 6A bis 6C zeigen vereinfachte Aufsichtsdarstellungen einer zylindrischen Probenkammer 17 mit einem Lichtwellenleiter 18 zur Einkopplung eines Lichtsignals und einem Lichtwellenleiter 19 zur Auskopplung eines Lichtsignals, das den Zustand und die Beschaffenheit der in der Probenkammer 17 befindlichen Kryoprobe wiedergibt.The 6A to 6C show simplified top views of a cylindrical sample chamber 17 with an optical fiber 18 for coupling a light signal and an optical waveguide 19 for decoupling a light signal indicating the condition and nature of the sample chamber 17 reproduces the cryoprobe.

Bei dem Ausführungsbeispiel gemäß 6A erfolgt eine reine Transmissionsmessung der in der Probenkammer 17 befindlichen Kryoprobe. Die beiden Lichtwellenleiter 18, 19 für die Ein- bzw. Auskopplung des Lichtsignals aus der Probenkammer 17 münden deshalb auf gegenüberliegenden Seiten in die Probenkammer 17, um eine Durchleuchtung der in der Probenkammer 17 befindlichen Kryoprobe zu erreichen.In the embodiment according to 6A a pure transmission measurement takes place in the sample chamber 17 located cryoprobe. The two optical fibers 18 . 19 for the coupling or decoupling of the light signal from the sample chamber 17 therefore open on opposite sides in the sample chamber 17 to a fluoroscopy in the sample chamber 17 reach the cryoprobe.

Bei dem Ausführungsbeispiel gemäß 6B erfolgt dagegen eine kombinierte Transmissions- und Reflexionsmessung. Die beiden Lichtwellenleiter 18, 19 für die Ein- bzw. Auskopplung des Lichtsignals münden deshalb in einem vorgegebenen Winkel α zueinander in die Probenkammer 17, wobei der Winkel α zwischen den beiden Lichtwellenleitern 18, 19 vorzugsweise im Bereich zwischen 20 Grad und 70 Grad liegt.In the embodiment according to 6B In contrast, a combined transmission and reflection measurement takes place. The two optical fibers 18 . 19 for the coupling or decoupling of the light signal therefore open at a predetermined angle α to each other in the sample chamber 17 where the angle α between the two optical fibers 18 . 19 preferably in the range between 20 degrees and 70 degrees.

Das Ausführungsbeispiel gemäß 6C stimmt weitgehend mit dem Ausführungsbeispiel gemäß 6A überein, jedoch ragen die beiden Lichtwellenleiter 18, 19 hierbei durch die Wandung der Probenkammer 17 in die Probenkammer 17 hinein, so dass die Wandung der Probenkammer lichtundurchlässig sein kann.The embodiment according to 6C is largely consistent with the embodiment 6A match, but the two optical fibers protrude 18 . 19 in this case through the wall of the sample chamber 17 into the sample chamber 17 into it, so that the wall of the sample chamber can be opaque.

Die 7 bis 10 zeigen schließlich verschiedene vereinfachte Aufsichtsdarstellungen einer erfindungsgemäßen Probenaufnahme 20 mit sechs topfförmigen, zylindrischen Probenkammern 21–26, wobei die einzelnen Probenkammern eine optische Untersuchung der in den Probenkammern 21–26 befindlichen Kryoproben ermöglichen.The 7 to 10 Finally, show various simplified top views of a sample holder according to the invention 20 with six pot-shaped, cylindrical sample chambers 21 - 26 , wherein the individual sample chambers, a visual examination of the in the sample chambers 21 - 26 enable cryoprobes located.

Im Folgenden wird zunächst das Ausführungsbeispiel gemäß 7 beschrieben, das eine Transmissionsmessung der in den Probenkammern 21–26 befindlichen Kryoproben ermöglicht. Hierzu münden in die einzelnen Probenkammern 21–26 Lichtwellen leiter zur Einkopplung eines Lichtsignals, wobei diese Lichtwellenleiter eingangsseitig zu einem gemeinsamen Lichtwellenleiter 27 zusammen geführt und gemeinsam optisch ansteuerbar sind. Die eingangsseitige Zusammenführung der einzelnen Lichtwellenleiter zu einem gemeinsamen Lichtwellenleiter 27 vereinfacht die optische Ansteuerung der Probenaufnahme 20, da ein einziger optischer Sender eingesetzt werden kann.In the following, the embodiment according to 7 described a transmission measurement in the sample chambers 21 - 26 located cryoprobes allows. For this purpose, open into the individual sample chambers 21 - 26 Fiber optic conductor for coupling a light signal, said optical waveguide on the input side to a common optical waveguide 27 run together and optically controllable together. The input-side merger of the individual optical fibers to a common optical waveguide 27 simplifies the optical control of the sample holder 20 because a single optical transmitter can be used.

Die Selektivität der optischen Untersuchung bezüglich der einzelnen Probenkammern 21–26 wird hierbei dadurch erreicht, dass in jede der Probenkammern 21–26 zur Auskopplung eines von der jeweiligen Kryoprobe beeinflussten Lichtsignals jeweils ein weiterer Lichtwellenleiter 28–33 mündet.The selectivity of the optical investigation with respect to the individual sample chambers 21 - 26 This is achieved in that in each of the sample chambers 21 - 26 for decoupling a light signal influenced by the respective cryoprobe in each case a further optical waveguide 28 - 33 empties.

Die zur Einkopplung des Lichtsignals dienenden Lichtwellenleiter einerseits und die zur Auskopplung des Lichtsignals dienenden Lichtwellenleiter 28–33 andererseits münden hierbei auf diametral gegenüberliegenden Seiten in die einzelnen Probenkammern 21–26, um eine Transmissionsmessung zu ermöglichen.The light waveguide serving for coupling the light signal on the one hand and the light waveguide serving for coupling out the light signal on the one hand 28 - 33 On the other hand, this opens on diametrically opposite sides in the individual sample chambers 21 - 26 to enable a transmission measurement.

Das in 8 dargestellte Ausführungsbeispiel stimmt teilweise mit dem vorstehend beschriebenen und in 7 dargestellten Ausführungsbeispiel überein, so dass zur Vermeidung von Wiederholungen auf die vorstehende Beschreibung zu 7 verwiesen wird.This in 8th illustrated embodiment is partly true with that described above and in 7 illustrated embodiment, so that to avoid repetition of the above description to 7 is referenced.

Eine Besonderheit dieses Ausführungsbeispiels besteht darin, dass die zur Auskopplung des Lichtsignals aus den einzelnen Probenkammern 21–26 dienenden Lichtwellenleiter ausgangsseitig zu einem gemeinsamen Lichtwellenleiter 34 zusammengeführt sind, so dass die ausgekoppelten Lichtsignale der einzelnen Probenkammern 21–26 gemeinsam ausgewertet werden.A special feature of this embodiment is that for the extraction of the light signal from the individual sample chambers 21 - 26 serving optical fiber output side to a common optical waveguide 34 are merged, so that the decoupled light signals of the individual sample chambers 21 - 26 be evaluated together.

Die Selektivität der optischen Untersuchung bezüglich der einzelnen Probenkammern 21–26 wird hierbei dadurch erreicht, dass zur Einkopplung der Lichtsignale in die einzelnen Probenkammern 21–26 sechs getrennte Lichtwellenleiter 35–40 vorgesehen sind, die bei der optischen Untersuchung sequentiell angesteuert werden.The selectivity of the optical examination with respect to the individual sample chambers 21 - 26 is achieved here by the fact that for coupling the light signals in the individual sample chambers 21 - 26 six separate optical fibers 35 - 40 are provided, which are driven sequentially during the optical examination.

Auch das in 9 dargestellte Ausführungsbeispiel stimmt teilweise mit dem vorstehend beschriebenen und in 7 dargestellten Ausführungsbeispiel überein, so dass zur Vermeidung von Wiederholungen auf die vorstehende Beschreibung verwiesen wird, wobei für entsprechende Bauteile dieselben Bezugszeichen verwendet werden.Also in 9 illustrated embodiment is partly true with that described above and in 7 illustrated embodiment, so reference is made to avoid repetition of the above description, wherein the same reference numerals are used for corresponding components.

Eine Besonderheit dieses Ausführungsbeispiels besteht darin, dass die in den einzelnen Probenkammern 21–26 befindlichen Kryoproben hierbei einer Reflexionsmessung unterzogen werden. In jede der Probenkammern 21–26 mündet deshalb jeweils nur ein Lichtwellenleiter, wobei die einzelnen Lichtwellenleiter ausgangsseitig zu einem gemeinsamen Lichtwellenleiter 41 zusammen geführt sind.A special feature of this embodiment is that in the individual sample chambers 21 - 26 This cryoprobes are subjected to a reflection measurement. In each of the sample chambers 21 - 26 Therefore, in each case only one optical waveguide discharges, with the individual optical waveguides on the output side becoming a common optical waveguide 41 are led together.

Die Einkopplung des Lichtsignals erfolgt hierbei über einen weiteren Lichtwellenleiter 42, der von einem optischen Sender angesteuert wird und das von diesem erzeugte Lichtsignal in den Lichtwellenleiter 41 einkoppelt, wie hier nur schematisch dargestellt ist.The coupling of the light signal takes place here via another optical waveguide 42 , which is driven by an optical transmitter and the light signal generated by this in the optical waveguide 41 coupled, as shown here only schematically.

Schließlich stimmt auch das in 10 dargestellte Ausführungsbeispiel teilweise mit dem vorstehend beschriebenen und in 7 dargestellten Ausführungsbeispiel überein, so dass zur Vermeidung von Wiederholungen auf die vorstehende Beschreibung zu 7 verwiesen wird, wobei für entsprechende Bauteile dieselben Bezugszeichen verwendet werden. Eine Be sonderheit dieses Ausführungsbeispiels besteht darin, dass auch die Lichtwellenleiter 28–33 zur Auskopplung der Lichtsignale aus den einzelnen Probenkammern 21–26 ausgangsseitig zu einem gemeinsamen Lichtwellenleiter 43 zusammengeführt sind. Bei diesem Ausführungsbeispiel erfolgt also sowohl eine gemeinsame optische Ansteuerung der einzelnen Probenkammern 21–26 als auch eine gemeinsame Messung der einzelnen Probenkammern 21–26, was messtechnisch besonders einfach ist.Finally, that's true in 10 illustrated embodiment partially with the above-described and in 7 illustrated embodiment, so that to avoid repetition of the above description to 7 is referenced, wherein the same reference numerals are used for corresponding components. Be a special feature of this embodiment is that the optical fibers 28 - 33 for decoupling the light signals from the individual sample chambers 21 - 26 on the output side to a common optical waveguide 43 are merged. In this embodiment, therefore, both a common optical control of the individual sample chambers takes place 21 - 26 as well as a common measurement of the individual sample chambers 21 - 26 , which is particularly easy to measure.

Die Erfindung ist nicht auf die vorstehend beschriebenen bevorzugten Ausführungsbeispiele beschränkt. Vielmehr ist eine Vielzahl von Varianten und Abwandlungen möglich, die ebenfalls von dem Erfindungsgedanken Gebrauch machen und deshalb in den Schutzbereich fallen.The Invention is not limited to those described above embodiments limited. Rather, a variety of variants and modifications is possible, the also make use of the idea of the invention and therefore in fall within the scope of protection.

11: Probenaufnahmespecimen collection
22: Probenkammernsample chambers
33: Mündungsöffnungmouth
44: Lichtwellenleiter zur Einkopplungoptical fiber for coupling
55: Lichtwellenleiter zur Auskopplungoptical fiber for decoupling
66: Oberteiltop
77: Unterteillower part
88th: Probenkammersample chamber
99: Kanal für Lichtwellenleiterchannel for optical fibers
1010: Kanal für Lichtwellenleiterchannel for optical fibers
1111: Kanal für Lichtwellenleiterchannel for optical fibers
1212: Kanal für Lichtwellenleiterchannel for optical fibers
1313: Bohrungdrilling
1414: Lichtwellenleiteroptical fiber
1515: Lichtwellenleiteroptical fiber
1616: Glasfaserbündelglass fiber bundle
1717: Probenkammersample chamber
1818: Lichtwellenleiteroptical fiber
1919: Lichtwellenleiteroptical fiber
2020: Probenaufnahmespecimen collection
21–2621-26: Probenkammernsample chambers
2727: Lichtwellenleiteroptical fiber
28–3328-33: Lichtwellenleiteroptical fiber
3434: Lichtwellenleiteroptical fiber
35–4035-40: Lichtwellenleiteroptical fiber

Claims

Sample recording ( 1 . 20 ) with at least one sample chamber ( 2 . 8th . 17 . 21 - 26 ) for receiving a Sample, in particular a cryoprobe, characterized by at least one optical waveguide ( 4 . 5 ) for optical examination of the sample in the sample chamber ( 2 . 8th . 17 . 21 - 26 ).

Sample recording ( 1 . 20 ) according to claim 1, characterized in that the optical waveguide ( 4 . 5 . 18 . 19 ) directly into the sample chamber ( 2 . 8th . 17 . 21 - 26 ) opens.

Sample recording ( 1 . 20 ) according to one of the preceding claims, characterized by a plurality of sample chambers ( 2 . 8th . 17 . 21 - 26 ) for each one sample, with each of the sample chambers ( 2 . 8th . 17 . 21 - 26 ) at least one optical waveguide ( 4 . 5 . 18 . 19 ) or directly flows.

Sample recording ( 1 . 20 ) according to one of the preceding claims, characterized in that in the sample chamber ( 2 . 8th . 17 . 21 - 26 ) in each case an optical waveguide ( 4 . 18 ) for coupling a light signal and another optical waveguide ( 5 . 19 ) is directed to the decoupling of a light signal influenced by the sample or discharges directly.

Sample recording ( 1 . 20 ) according to claim 4, characterized in that the light waveguide serving for coupling the light signal ( 4 . 18 ) of several sample chambers ( 2 . 8th . 17 . 21 - 26 ) are merged on the input side and can be controlled together.

Sample recording ( 1 . 20 ) according to claim 4 or 5, characterized in that the light waveguide serving for coupling out the light signal ( 5 . 19 ) of several sample chambers ( 2 . 8th . 17 . 21 - 26 ) are merged on the output side and can be read together.

Sample recording ( 1 . 20 ) according to any one of claims 4 to 6, characterized in that the light waveguide serving for coupling the light signal ( 4 . 18 ) and serving for coupling the light signal optical waveguide ( 5 . 19 ) for a transmission measurement on opposite sides into the sample chamber ( 2 . 8th . 17 . 21 - 26 ).

Sample recording ( 1 . 20 ) according to claim 7, characterized in that the light waveguide serving for coupling the light signal ( 4 . 18 ) with an angle (α) to the light waveguide ( 5 . 19 ) into the sample chamber ( 2 . 8th . 17 . 21 - 26 ), which lies in the range between 150 ° and 180 °.

Sample recording ( 1 . 20 ) according to claim 6, characterized in that serving for coupling the light signal optical waveguide ( 4 . 18 ) and serving for coupling the light signal optical waveguide ( 5 . 19 ) for a reflection measurement on the same side in the sample chamber ( 2 . 8th . 17 . 21 - 26 ).

Sample recording ( 1 . 20 ) according to claim 9, characterized in that the light waveguide serving for coupling the light signal ( 4 . 18 ) at an angle to the optical waveguide used for decoupling the light signal ( 5 . 19 ) into the sample chamber ( 2 . 8th . 17 . 21 - 26 ), which lies in the range between 0 ° and 50 °.

Sample recording ( 1 . 20 ) according to one of the preceding claims, characterized in that in the sample chamber ( 21 - 26 ) is directed in each case only a single optical waveguide or opens directly, which serves both for coupling the light signal and for coupling out the light signal influenced by the sample.

Sample recording ( 1 . 20 ) according to one of the preceding claims, characterized in that the sample chamber ( 2 . 8th . 17 . 21 - 26 ) has a sample chamber wall, wherein the optical waveguide ( 18 . 19 ) through the sample chamber wall into the sample chamber ( 17 ) protrudes.

Sample recording ( 1 . 20 ) according to claim 12, characterized in that the sample chamber wall is at least partially opaque.

Sample recording ( 1 . 20 ) according to one of claims 3 to 13, characterized in that the sample chambers ( 2 . 8th . 17 . 21 - 26 ) in a substrate with a top ( 6 ) and a lower part ( 7 ) are arranged, wherein in the upper part ( 6 ) and / or in the lower part ( 7 ) Channels ( 9 . 10 . 11 . 12 ) are arranged for receiving the optical waveguide.

Sample recording ( 1 . 20 ) according to claim 14, characterized in that the upper part ( 6 ) of the substrate with the lower part ( 7 ) of the substrate is glued or glued.

Sample recording ( 1 . 20 ) according to one of the preceding claims, characterized in that in the sample chamber ( 2 . 8th . 17 . 21 - 26 ) coupled light signal has a wavelength between 550 nm and 750 nm.

Sample recording ( 1 . 20 ) according to one of the preceding claims, characterized in that the sample chamber ( 2 . 8th . 17 . 21 - 26 ) and / or the substrate is coolable.

Sample recording ( 1 . 20 ) according to any one of the preceding claims, characterized in that the sample holder ( 1 . 20 ) consists of a thermally conductive material.

Sample recording ( 1 . 20 ) according to one of the preceding claims, characterized in that the sample chamber ( 2 ) an orifice ( 3 ), wherein the light waveguide serving for coupling the light signal ( 14 ) and serving for coupling the light signal optical waveguide ( 15 ) from the outside into the mouth opening ( 3 ) of the sample chamber ( 2 ).

Sample recording ( 1 . 20 ) according to one of the preceding claims, characterized in that the sample chamber ( 2 . 8th . 21 - 26 ) an orifice ( 3 ), wherein over the mouth opening a glass fiber bundle ( 16 ) is arranged.

Sample recording ( 1 . 20 ) according to one of the preceding claims, characterized in that the sample chamber ( 2 . 8th . 17 . 21 - 26 ) has a volume between 50 μl and 2 ml.

Examination method for a sample, in particular for a cryoprobe, in which the sample is placed in a sample chamber ( 2 . 8th . 17 . 21 - 26 ) is optically examined, characterized in that a light signal by means of an optical waveguide ( 4 . 19 ) into the sample chamber ( 2 . 8th . 21 - 26 ) is coupled with the sample contained therein.

Examination method according to claim 22, characterized in that a Lichtsig influenced by the sample nals by means of another optical waveguide ( 5 . 19 ) is decoupled from the sample.

Examination method according to one of claims 22 to 23, characterized in that a transmission measurement or a reflection measurement of the sample is performed.

Examination method according to one of claims 22 to 24, characterized in that a plurality of samples optically is examined, wherein coupled out of each sample in each case a light signal which is influenced by the respective sample.

Examination method according to claim 25, characterized characterized in that the decoupled from the individual samples Light signals either separately examined or merged and be examined together.

Examination method according to one of claims 22 to 26, characterized in that in the sample chamber ( 2 . 8th . 21 - 26 ) with the sample coupled light signal has a wavelength between 550 nm and 750 nm.

Examination method according to one of claims 22 to 27, characterized in that in the sample chamber ( 2 . 8th . 21 - 26 ) with the sample coupled light signal is constant, pulsed or wavy.

Examination method according to one of claims 22 to 28, characterized in that the sample is a cryoprobe, the - during the Freezing and / or - in the frozen state and / or - during thawing examined becomes.