DE102004005106A1 - New furanone and bicyclooctane derivatives, e.g. sorbifuranone A, B or C, sorbivinetone and sorbivinetol, useful as antitumor agents, prepared e.g. by culturing Penicillium fungi - Google Patents
New furanone and bicyclooctane derivatives, e.g. sorbifuranone A, B or C, sorbivinetone and sorbivinetol, useful as antitumor agents, prepared e.g. by culturing Penicillium fungi Download PDFInfo
- Publication number
- DE102004005106A1 DE102004005106A1 DE200410005106 DE102004005106A DE102004005106A1 DE 102004005106 A1 DE102004005106 A1 DE 102004005106A1 DE 200410005106 DE200410005106 DE 200410005106 DE 102004005106 A DE102004005106 A DE 102004005106A DE 102004005106 A1 DE102004005106 A1 DE 102004005106A1
- Authority
- DE
- Germany
- Prior art keywords
- compound
- alkyl
- sorbifuranone
- compound according
- aryl
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Withdrawn
Links
- 0 CC(*)(*)CC(C1(C)O2)C3(*)OC(*)=C(*)C3=*C1=C(C)C2=O Chemical compound CC(*)(*)CC(C1(C)O2)C3(*)OC(*)=C(*)C3=*C1=C(C)C2=O 0.000 description 2
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/02—Oxygen as only ring hetero atoms
- C12P17/04—Oxygen as only ring hetero atoms containing a five-membered hetero ring, e.g. griseofulvin, vitamin C
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C49/00—Ketones; Ketenes; Dimeric ketenes; Ketonic chelates
- C07C49/587—Unsaturated compounds containing a keto groups being part of a ring
- C07C49/753—Unsaturated compounds containing a keto groups being part of a ring containing ether groups, groups, groups, or groups
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C69/00—Esters of carboxylic acids; Esters of carbonic or haloformic acids
- C07C69/013—Esters of alcohols having the esterified hydroxy group bound to a carbon atom of a ring other than a six-membered aromatic ring
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
- C07D307/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
- C07D307/34—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D307/56—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D307/58—One oxygen atom, e.g. butenolide
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
- C07D307/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
- C07D307/34—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D307/56—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D307/60—Two oxygen atoms, e.g. succinic anhydride
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
- C07D307/94—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom spiro-condensed with carbocyclic rings or ring systems, e.g. griseofulvins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D407/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00
- C07D407/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00 containing two hetero rings
- C07D407/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
Landscapes
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Description
Die vorliegende Erfindung betrifft neue bioaktive Verbindungen aus einer marinen Pilzisolation und deren Derivate. Die Erfindung betrifft weiterhin ein Verfahren zur Herstellung der Verbindungen, diese enthaltende Arzneimittel und deren Verwendung bei der Behandlung von Erkrankungen.The The present invention relates to novel bioactive compounds from a marine fungal isolation and their derivatives. The invention relates furthermore a process for the preparation of the compounds, these containing drugs and their use in the treatment of diseases.
Hintergrund der ErfindungBackground of the invention
Pilze stellen seit langem eine wichtige Quelle pharmakologisch aktiver Substanzen dar, und die Suche nach neuen Naturstoffen aus diesen Mikroorganismen ist auch heute noch ein wichtiger Pfeiler der modernen Wirkstoffforschung. Behindert wird die Suche nach neuen Leitstrukturen aus Pilzen jedoch durch die wachsende Anzahl bereits bekannter Strukturen, die ein ökonomisch sinnvolles Screening nach neuartigen Verbindungen immer schwieriger gestaltet. Zur Überwindung dieser Problematik wurden verschiedene Methoden entwickelt, wie z. B. der Einsatz neuer Analyse-Techniken, welche die schnelle Identifizierung bekannter Naturstoffe direkt im Pilzextrakt ermöglichen, ohne diese aufwendig zu isolieren (Bringmann et al. (1998) Anal. Chem. 70:2805-2811; Bringmann et al. (1999) Anal. Chem. 71:2678-2686; Bringmann und Lang (2003) in Marine Molecular Biotechnology (Hrsg.: W. E. G: Müller), Springer Verlag, Berlin, 89-116). Doch auch die Auswahl der Pilzisolate hat einen großen Einfluß auf den Anteil an neuen Naturstoffen, die sich isolieren lassen, und somit auf die Wirtschaftlichkeit der Wirkstoffsuche. Im Vergleich zu den bisher hauptsächlich untersuchten bodenbewohnenden terrestrischen Pilzen produzieren Isolate aus ungewöhnlicheren Lebensräumen vermehrt Sekundärmetabolite mit neuartigen chemischen Strukturen und biologischen Eigenschaften. Eine wichtige Quelle für neue Pilzisolate ist hierbei der marine Lebensraum. Es ist gezeigt worden, daß marine Pilze nicht nur mit größerer Wahrscheinlichkeit bisher unbekannte Verbindungen produzieren als terrestrische Stämme, sondern daß diese Verbindungen auch öfter antibiotisch aktiv sind (Cuomo et al. (1995) J. Mar. Biotechnol. 2:199-204).mushrooms have long been an important source of pharmacologically active Substances, and the search for new natural substances from these Microorganisms are still an important pillar of modern drug discovery today. However, the search for new lead structures from fungi is hampered due to the growing number of already known structures that are economically meaningful screening for novel compounds more difficult designed. To overcome Various methods have been developed for this problem, such as z. B. the use of new analysis techniques, which direct the rapid identification of known natural products in mushroom extract, without costly isolation (Bringmann et al. (1998) Anal. Chem. 70: 2805-2811; Bringmann et al. (1999) Anal. Chem. 71: 2678-2686; Bringmann and Lang (2003) in Marine Molecular Biotechnology (ed. W. E. G: Müller), Springer Verlag, Berlin, 89-116). But also the selection of mushroom isolates has a big one Influence on the proportion of new natural products that can be isolated, and thus on the efficiency of the drug search. Compared to date, mainly examined soil-dwelling terrestrial mushrooms Isolates from more unusual ones habitats Increases secondary metabolites with novel chemical structures and biological properties. An important source for new ones Mushroom isolates are the marine habitat. It has been shown that marine Not only are mushrooms more likely previously unknown compounds produce as terrestrial strains, but that these Connections more often are antibiotically active (Cuomo et al. (1995) J. Mar. Biotechnol. 2: 199-204).
Zudem wird intensiv nach solchen bioaktiven Substanzen gesucht, die eine hohe Spezifität gegen definierte Tumoren entfalten. Auch hier könnten marine Pilze eine bisher unerschlossene Quelle solcher Substanzen sein.moreover is searched intensively for such bioactive substances, the one high specificity unfold against defined tumors. Again, marine mushrooms could be a hitherto be undeveloped source of such substances.
Es ist somit Aufgabe der vorliegenden Erfindung, weitere bioaktive Substanzen aus einem marinen Organismus, wie zum Beispiel einem in einem marinen Schwamm vorkommenden Pilz, zur Verfügung zu stellen.It is therefore an object of the present invention, further bioactive Substances from a marine organism, such as a available in a marine sponge mushroom, available too put.
In
einem ersten Aspekt betrifft die vorliegende Erfindung die bisher
nicht beschriebenen Naturstoffe Sorbifuranon A (1a), B (2a) und
C (3a), Sorbivineton (4a), Sorbivineton-Acetat (4b) und Sorbivinetol
(4c) sowie Verbindungen der allgemeinen Strukturen 1, 2, 3 und 4
(sowie deren stereoisomere Formen) 
R2,
R3 und R4 unabhängig voneinander
entweder H, ein unsubstituiertes, monosubstituiertes oder polysubstituiertes
C1-C18-Alkyl, wobei
das Alkyl gerade, verzweigt oder cyclisch sein kann, Alkenyl, ein
unsubstituierter, monosubstituierter oder polysubstituierter Aryl-
oder Heteroarylrest, eine unsubstituierte, monosubstituierte oder
polysubstituierte Benzylgruppe, eine Acylgruppe, wie z. B. Formyl,
Acetyl, Trichloracetyl, Fumaryl, Maleyl, Succinyl, Benzoyl, oder
eine verzweigte oder Heteroatom- oder arylsubstituierte Acylgruppe,
oder eine Sulfonylgruppe, wie z. B. -SO3H,
-SO2Me, -SO2CF3, -SO2C6H4CH3 oder SO2C6H4CH2Br sind,
und X ausgewählt ist
aus O, S, NOH oder NOR',
wobei R' ein geradekettiges
oder verzweigtes (C1-C6)-Alkyl
ist,
bei der allgemeinen Formel 1 Y entweder O ist, oder X
und Y zwei miteinander verbundene N-Atome sind, die somit einen
Pyrazolring bilden, und bei der allgemeinen Formel 4 sich an Stelle
der Reste R5 und R6 auch
ein doppelt gebundenes Sauerstoffatom befinden kann.In a first aspect, the present invention relates to the previously not described natural substances sorbifuranone A (1a), B (2a) and C (3a), sorbivinetone (4a), sorbivinetone acetate (4b) and sorbivinetol (4c) as well as compounds of the general structures 1, 2, 3 and 4 (and their stereoisomeric forms)
R 2 , R 3 and R 4 are each independently H, an unsubstituted, monosubstituted or polysubstituted C 1 -C 18 alkyl, wherein the alkyl may be straight, branched or cyclic, alkenyl, an unsubstituted, monosubstituted or polysubstituted aryl or heteroaryl radical , an unsubstituted, monosubstituted or polysubstituted benzyl group, an acyl group, such as. For example, formyl, acetyl, trichloroacetyl, fumaryl, maleyl, succinyl, benzoyl, or a branched or heteroatom or aryl-substituted acyl group, or a sulfonyl group, such as. B. -SO 3 H, -SO 2 Me, -SO 2 CF 3 , -SO 2 C 6 H 4 CH 3 or SO 2 C 6 H 4 CH 2 Br are,
and X is selected from O, S, NOH or NOR ', where R' is a straight-chained or branched (C 1 -C 6 ) -alkyl,
in the general formula 1, Y is either O, or X and Y are two interconnected N atoms which thus form a pyrazole ring, and in the general formula 4 may be in place of the radicals R 5 and R 6 , a double bonded oxygen atom.
Es wurde nun unerwarteter weise gefunden; daß Sorbivineton-Acetat und Sorbifuranon A eine ausgeprägte und nicht vorhersehbare antitumorale Eigenschaft besitzen. Aufgrund dieser Eigenschaften ist die hier beschriebene Substanz geeignet zur Behandlung von Tumoren. Es wird vorgesehen, diese Substanz entweder in der vorliegenden Form oder in Form einer Depotsubstanz oder als Vorläufer zusammen mit einer geeigneten, pharmazeutisch verträglichen Verdünnungslösung oder Trägersubstanz anzuwenden.It was now found unexpectedly; that sorbivinetone acetate and sorbifuranone A pronounced and unpredictable antitumoral property. by virtue of These properties are suitable for the substance described here for the treatment of tumors. It is intended to use this substance either in the present form or in the form of a depot substance or as precursor together with a suitable, pharmaceutically acceptable Dilution solution or vehicle apply.
Die erfindungsgemäßen Substanzen könnten mit den üblichen Lösungsmitteln, Hilfs- und Trägerstoffen zu Tabletten, Dragees, Kapseln, Tropflösungen, Suppositorien, Injektions- und Infusionszubereitungen verarbeitet werden, um therapeutisch zur peroralen, rektalen oder parenteralen Applikation Verwendung zu finden.The substances according to the invention could with the usual solvents Auxiliaries and carriers to tablets, dragees, capsules, dripping solutions, suppositories, injections and infusion preparations are processed to be therapeutic for peroral, rectal or parenteral administration use to find.
Die vorliegende Erfindung betrifft weiterhin ein Verfahren zur Herstellung einer oben genannten Verbindung, das dadurch gekennzeichnet ist, daß die Substanz bevorzugt aus einem marinen Organismus, wie zum Beispiel einem in einem marinen Schwamm vorkommenden Pilz der Gattung Penicillium isoliert wird. Im Rahmen der vorliegenden Erfindung wurde ein Pilz der Gattung Penicillium (vorzugsweise Penicillium chrysogenum) erstmalig als Produzent der erfindungsgemäßen Verbindungen nachgewiesen. Die Sorbifuranone A, B und C werden unter den nachstehend aufgeführten Kulturbedingungen sowohl in das Kulturmedium abgegeben, als auch vor allem in der Pilzbiomasse akkumuliert. Bei dem Pilz handelt es sich um einen Vertreter der Gattung Penicillium LINK (1809), die als anamorphe Trichocomacae/Deuteromycetes/Mitosporic Fungi, code group 1.A2.15 systematisch charakterisiert ist. Diese Gattung zeichnet sich durch eine Vielzahl weit verbreiteter Spezies aus, die zum Teil beachtliche biochemische Potenzen besitzen. Bei der vorliegenden Spezies handelt es sich um eine seit 1910 bekannte Art, die bisher als Bewohner terrestrischer Biotope beschrieben ist. Die vorliegende Pilzisolation (Pilzstamm) entstammt jedoch dem marin-aquatischen Lebensraum und wurde von dem marinen Schwamm Ircinia fasciculata (Porifera) isoliert. Aufgrund der im Rahmen dieser Erfindung erfolgten Strukturaufklärung läßt sich die erfindungsgemäße. Verbindung jedoch auch mittels herkömmlicher Synthesechemie herstellen.The The present invention further relates to a process for the preparation an above-mentioned compound characterized that the Substance preferably from a marine organism, such as a fungus of the genus Penicillium found in a marine sponge is isolated. In the context of the present invention, a fungus of the genus Penicillium (preferably Penicillium chrysogenum) for the first time as a producer of the compounds of the invention demonstrated. The sorbifuranones A, B and C are mentioned below listed Culture conditions both delivered to the culture medium, as well accumulated mainly in the mushroom biomass. When the fungus acts it is a member of the genus Penicillium LINK (1809), as anamorphic Trichocomacae / Deuteromycetes / Mitosporic fungi, code group 1.A2.15 is systematically characterized. This genus characterized by a variety of widespread species, possess the sometimes considerable biochemical potencies. In the present species is a known since 1910 Species previously described as inhabitants of terrestrial biotopes is. However, the present fungus isolation (mushroom strain) originates from the marine aquatic habitat and was from the marine sponge Ircinia fasciculata (Porifera) isolated. Because of in the frame structure elucidation of this invention can be the inventive. connection but also by conventional synthetic chemistry produce.
Ein weiterer Aspekt der vorliegenden Erfindung betrifft die Verwendung mindestens einer der oben genannten Verbindungen zur Behandlung von Erkrankungen, wie z. B. Tumorerkrankungen. Diese Verwendung kann zum Beispiel in Form einer Depotsubstanz oder als Vorläufer zusammen mit einer geeigneten, pharmazeutisch verträglichen Verdünnungslösung oder Trägersubstanz erfolgen. Im Falle der Behandlung von Tumorerkrankungen mit z.B. Sorbifuranon A oder Sorbivineton-Acetat ist eine Behandlung in einem Konzentrationsbereich in vivo zwischen 0,3 und 5,0 μg/ml bevorzugt. Ein weiterer Aspekt ist die Verwendung einer oder mehrerer der erfindungsgemäßen Verbindungen für die Herstellung eines Medikaments zur Behandlung von Tumorerkrankungen. Diese Herstellung kann analog zu der oben beschriebenen Weise und in den oben beschriebenen Konzentrationen und für die oben u.a. beschriebenen Anwendungen erfolgen.One Another aspect of the present invention relates to the use at least one of the above compounds for treatment of diseases such. B. tumors. This use can for example in the form of a depot substance or as a precursor together with a suitable, pharmaceutically acceptable dilution solution or vehicle respectively. In the case of treating tumors with e.g. Sorbifuranone A or sorbivinetone acetate is a treatment in one Concentration range in vivo between 0.3 and 5.0 ug / ml is preferred. Another aspect is the use of one or more of the compounds of the invention for the Preparation of a medicament for the treatment of tumor diseases. This preparation can analogously to the manner described above and in the above-described concentrations and for the above, and the like. described Applications are made.
Ein weiterer Aspekt der vorliegenden Erfindung betrifft eine pharmazeutische Zusammensetzung, umfassend eine erfindungsgemäße Verbindung, zusammen mit geeigneten Zusatz- oder Hilfsstoffen. Diese pharmazeutische Zusammensetzung kann dadurch gekennzeichnet sein, daß die Verbindung in Form einer Depotsubstanz oder als Vorläufer zusammen mit einer geeigneten, pharmazeutisch verträglichen Verdünnungslösung oder Trägersubstanz vorliegt.One Another aspect of the present invention relates to a pharmaceutical A composition comprising a compound of the invention, together with suitable additives or auxiliaries. This pharmaceutical composition may be characterized in that the compound in the form of a Depot substance or as a precursor together with a suitable, pharmaceutically acceptable Dilution solution or vehicle is present.
Bevorzugt ist weiterhin eine pharmazeutische Zusammensetzung gemäß der vorliegenden Erfindung, die weitere Chemotherapeutika enthält. Diese Chemotherapeutika können alle für den Fachmann üblichen und im Stand der Technik ausführlich beschriebenen Chemotherapeutika im Rahmen einer Krebstherapie umfassen (z. B. Taxol oder andere). Das letztendlich verwendete Therapeutikum wird von der Art der Krebserkrankung und den persönlichen Anforderungen des Patienten abhängen.Prefers is further a pharmaceutical composition according to the present invention Invention containing other chemotherapeutic agents. These chemotherapeutic agents can all for the usual and in detail in the prior art chemotherapeutic agents used in cancer therapy (eg Taxol or others). The ultimately used therapeutic will depend on the type of cancer and the personal Depend on the patient's requirements.
Erfindungsgemäß kann die oben genannte pharmazeutische Zusammensetzung in Form von Tabletten, Dragees, Kapseln, Tropflösungen, Suppositorien, Injektions- oder Infusionszubereitungen zur peroralen, rektalen oder parenteralen Verwendung vorliegen. Solche Darreichungsformen und deren Herstellung sind dem Fachmann bekannt.According to the invention, the above-mentioned pharmaceutical composition in the form of tablets, Dragees, capsules, drop solutions, Suppositories, injections or infusion preparations for peroral, rectal or parenteral use. Such dosage forms and their preparation are known in the art.
Die Verfahrensprodukte der allgemeinen Formeln 1, 2, 3 und 4 besitzen wertvolle pharmakologische Eigenschaften. Die Antitumorwirkung wurde u.a. am L5178Y-Mäuselymphomzellsystem nachgewiesen (ATCC CRL-1722). Diese Zellen wurden in Suspensionskultur gehalten, wie bereits früher beschrieben (Müller et al. (1979) Cancer Res. 39:1102-1107). Die ED50-Konzentrationen für Sorbifuranon A (1a; Inokulation: 104 Zellen/ml; Inkubationszeit: 72 Std.) lag bei diesen Tumor-Zellstämmen bei 5,0 μg/ml. Die ED50-Konzentration für Sorbivineton-Acetat (4b; Inkubationszeit: 72 Std.) lag bei L5178Y-Zellen bei 0,62 μg/ml. In weiteren Untersuchungen wurden u.a. auch die Tumorzell-Linien PC-12 (adrenaler, phaeochromocytomaler Tumor [Ratte]; ATCC CRL-1721) und HeLa S3 (epitheloides Carcinom [Cervix; Mensch]; ATCC CCL-2.2) und HeLa (epitheloides Carcinom [Cervix; Mensch]; ATCC CCL-2) eingesetzt. Hier lagen die ED50-Konzentrationen deutlich höher als bei den Lymphomzellen. Die ED50-Konzentration für Sorbivineton-Acetat (4b; Inkubationszeit: 72 Std.) lag bei PC12- und HeLa-Zellen bei 9,2 und 3,6 μg/ml.The process products of the general formulas 1, 2, 3 and 4 have valuable pharmacological properties. The antitumor effect has been demonstrated, inter alia, on the L5178Y mouse lymphoma cell system (ATCC CRL-1722). These cells were maintained in suspension culture as previously described (Müller et al. (1979) Cancer Res. 39: 1102-1107). The ED 50 concentrations for sorbifuranone A (1a, inoculation: 10 4 cells / ml, incubation time: 72 hrs) were 5.0 μg / ml in these tumor cell strains. The ED 50 concentration for sorbivinetone acetate (4b, incubation time: 72 hrs) was 0.62 μg / ml for L5178Y cells. Other studies included the tumor cell lines PC-12 (adrenal, phaeochromocytic tumor [rat], ATCC CRL-1721) and HeLa S3 (epitheloid carcinoma [human cervix], ATCC CCL-2.2) and HeLa (epitheloid carcinoma). Cervix; human]; ATCC CCL-2). Here, the ED 50 concentrations were significantly higher than in the lymphoma cells. The ED 50 concentration for sorbivinetone acetate (4b, incubation time: 72 hours) was 9.2 and 3.6 μg / ml in PC12 and HeLa cells.
Die vorliegende Erfindung betrifft weiterhin ein Verfahren zur Behandlung von Tumorerkrankungen, die ein Verabreichen einer erfindungsgemäßen Verbindung, etwa in Form einer erfindungsgemäßen pharmazeutischen Zusammensetzung, umfaßt. Die Verabreichung kann erfindungsgemäß in Form einer Depotsubstanz oder als Vorläufer zusammen mit einer geeigneten, pharmazeutisch verträglichen Verdünnungslösung oder Trägersubstanz erfolgen.The The present invention further relates to a method of treatment of tumor diseases which involve administering a compound according to the invention, for example in the form of a pharmaceutical according to the invention Composition comprising. The administration can according to the invention in the form of a depot substance or as a precursor together with a suitable, pharmaceutically acceptable Dilution solution or vehicle respectively.
Im Rahmen der vorliegenden Erfindung soll unter einem "Derivat" eine von einer der allgemeinen Formeln 1, 2, 3 oder 4 abgeleitete Verbindung sein, die zum Beispiel durch verschiedene der oben für R1 bis R10 und X oder Y angegebenen Restgruppen substituiert ist, sowie Gemische verschiedener dieser Verbindungen, die zum Beispiel zu einem auf die jeweils zu therapierende Erkrankung und/oder den Patienten auf Basis von diagnostischen oder Daten über den Behandlungserfolg oder -verlauf abgestimmten "personalisierten" Medikament verarbeitet werden können. Unter einem Derivat wird auch eine Verbindung der Sorbifuranon-Klasse verstanden, die aus anderen Organismen isoliert werden kann, als den hier (beispielhaft) erwähnten.In the context of the present invention, a "derivative" is intended to mean a compound derived from one of the general formulas 1, 2, 3 or 4, which is substituted, for example, by various of the radical groups given above for R 1 to R 10 and X or Y, and mixtures of various of these compounds, which can be processed, for example, into a "personalized" drug adapted to the particular disease being treated and / or the patient based on diagnostic or data on the success or course of treatment. A derivative is also understood to mean a compound of the sorbifuranone class which can be isolated from other organisms than the one mentioned here by way of example.
Unter einem "Vorläufer" einer Substanz soll im Rahmen der vorliegenden Erfindung zum einen eine Substanz verstanden werden, die im Laufe ihrer Verabreichung zur Behandlung durch die Bedingungen im Körper (z. B. pH im Magen, oder ähnliches) so verändert wird, oder aber durch den Körper nach Aufnahme so metabolisiert wird, daß sich als wirksame Substanz die erfindungsgemäße Verbindung oder deren Derivate bilden. Zum anderen werden als Vorläufer aus Organismen isolierte Derivate eines der Sorbifuranone verstanden, die als Ausgangsprodukte zur Synthese der Verbindung in dem jeweiligen Organismus dienen und bereits die hierin angegebenen Eigenschaften eines der Sorbifuranone aufweisen.Under a "precursor" of a substance in the context of the present invention on the one hand understood a substance be administered in the course of their administration by the Conditions in the body (eg pH in the stomach, or similar) so changed is, or through the body After ingestion is metabolized so that as an effective substance the compound of the invention or their derivatives. On the other hand, as a precursor Organisms isolated derivatives of a sorbifuranone understood as starting materials for the synthesis of the compound in the respective Organism and already serve the properties given herein have one of the sorbifuranones.
Die Erfindung soll nun im folgenden anhand von Beispielen näher verdeutlicht werden, ohne jedoch auf diese Beispiele irgendwie beschränkt zu sein. In den Figuren zeigtThe Invention will now be clarified in more detail below with reference to examples without being limited to these examples anyway. In the figures shows
Beispiel 1: Gewinnung der Substanzen Sorbifuranon A, B und C sowie Sorbivineton (4a) aus biologischem Material.Example 1: Extraction the substances sorbifuranone A, B and C and sorbivinetone (4a) biological material.
Ein Pilz der Gattung Penicillium (vorzugsweise Penicillium chrysogenum) wird erstmalig als Produzent der neuen Naturstoffe Sorbifuranon A (1a), B (2a) und C (3a) nachgewiesen. Diese Substanzen werden unter den nachstehend aufgeführten Kulturbedingungen sowohl in das Kulturmedium abgegeben als auch vor allem in der Pilzbiomasse akkumuliert. Durch Zugabe von Ethylvinylether bei der Extraktion besteht auch die Möglichkeit, den ebenfalls vom Pilz produzierten Naturstoff Sorbicillinol in Sorbivineton (4a) umzuwandeln, welche sich zusammen mit den anderen Substanzen durch präparative HPLC isolieren läßt.One Fungus of the genus Penicillium (preferably Penicillium chrysogenum) becomes for the first time as a producer of the new natural substances sorbifuranone A (1a), B (2a) and C (3a). These substances will be among the following Culture conditions both in the culture medium delivered as well accumulated mainly in the mushroom biomass. By adding ethyl vinyl ether in the extraction there is also the possibility of the also of Mushroom produced natural product sorbicillinol in sorbivinetone (4a) to transform, which together with the other substances through preparative Isolate HPLC.
Der
vorliegende Pilzstamm von Penicillium chrysogenum wurde am 02.05.2001
aus dem marinen Schwamm Ircinia fasciculata aus 17,5 m Wassertiefe
in der Bucht von Fetovaia (42°43'24''N/10°09'31''E) auf Elba, Italien, isoliert. Der
Schwamm wurde sofort nach der Entnahme mit Hilfe einschlägiger marin-mykologischer
Methoden auf seinen Pilzbesatz hin untersucht. Die vorliegende Isolation
wurde durch Auslegen kleiner Gewebestückchen des sezierten Schwammes
auf einer Nähragarplatte
folgender Zusammensetzung (CYAS, nach Pitt 1973) gewonnen:
Czapek-Hefeextrakt-Agar
+ Meerwasser:
30 g Saccharose
5 g Hefeextrakt
3 g
NaNO3
1 g K2HPO4
10 ml Mineral-Lösung (5 g KCl; 5 g MgSO4 × 7
H2O; 0,1 g FeSO4 × 7 H2O/100 ml H2O)
1
ml Spurenmetall-Lösung
(1 g ZnSO4 × 7 H2O;
0,5 g CuSO4 × 5 H2O/100
ml H2O
Antibiotika: Streptomycin-Sulfat
0,1 g/l, Chloramphenicol 0,2 g/l 1000 ml Meerwasser (30-33 PSU)The present fungus strain of Penicillium chrysogenum was found on 02.05.2001 from the marine sponge Ircinia fasciculata from 17.5 m water depth in the bay of Fetovaia (42 ° 43'24''N / 10 ° 09'31''E) on Elba, Italy, isolated. The sponge was examined immediately after collection with the help of relevant marine-mycological methods for its mushroom deposit. The present isolation was obtained by laying small pieces of tissue of the dissected sponge on a Nähragarplatte the following composition (CYAS, Pitt 1973):
Czapek Yeast Extract Agar + Seawater:
30 g of sucrose
5 g of yeast extract
3 g NaNO 3
1 g K 2 HPO 4
10 ml of mineral solution (5 g KCl; 5 g MgSO 4 .7H 2 O; 0.1 g FeSO 4 .7H 2 O / 100 ml H 2 O).
1 ml of trace metal solution (1 g ZnSO 4 .7H 2 O; 0.5 g CuSO 4 .5H 2 O / 100 ml H 2 O
Antibiotics: streptomycin sulfate 0.1 g / l, chloramphenicol 0.2 g / l 1000 ml seawater (30-33 PSU)
Durch
mehrere Reinigungsstufen wurde die primäre Rohkultur zu einer axenischen
Reinkultur weitergezüchtet.
Die Stammkultur erfolgt auf Schrägagarröhrchen folgender
Zusammensetzung (GPYNS, Schaumann 1974):
Glucose-Pepton-Hefeextrakt-Ammoniumnitrat-Meerwasser-Agar:
1,0
g Glucose
0,5 g Pepton
0,1 g Hefeextrakt
1,0 g Ammoniumnitrat
15,0
g Agar
1000 ml Meerwasser (30-33 PSU)
pH 7,2–7,4 Through several purification stages, the primary crude culture was further bred to an axenic pure culture. The stock culture is carried out on slanting agarous tubes of the following composition (GPYNS, Schaumann 1974):
Glucose-peptone-yeast extract ammonium seawater agar:
1.0 g of glucose
0.5 g peptone
0.1 g of yeast extract
1.0 g of ammonium nitrate
15.0 g agar
1000 ml of seawater (30-33 PSU)
pH 7.2-7.4
Die
Anzucht der Pilzkultur für
die Gewinnung der neuen Naturstoffe Sorbifuranon A, B und C erfolgte in
1-Liter-Erlenmeyerkolben, die mit je 300 ml Nährlösung folgender Zusammensetzung
(WS, nach Wickerham, 1951) beschickt wurden:
Wickerham-Meerwasser-Medium:
3,0
g Hefeextrakt
3,0 g Malzextrakt
5,0 g Pepton
10,0
g Glucose
1000 ml Meerwasser (30-33 PSU)
pH 7,2–7,4The cultivation of the fungal culture for the recovery of the new natural substances sorbifuranone A, B and C was carried out in 1-liter Erlenmeyer flasks, which were each charged with 300 ml nutrient solution of the following composition (WS, according to Wickerham, 1951):
Wickerham seawater medium:
3.0 g of yeast extract
3.0 g malt extract
5.0 g peptone
10.0 g of glucose
1000 ml of seawater (30-33 PSU)
pH 7.2-7.4
Die Sterilisation der Nährlösung erfolgte durch Autoklavieren bei 121 °C/1 bar, 15 Minuten. Als Inokulum für die experimentelle Pilzkultur dienten zehn Stück Mycelscheibchen (Durchmesser 5 mm) je Kolben. Diese wurden aus einer 7 Tage alten Vorkultur auf WS-Agar mit Hilfe eines Korkbohrers ausgestanzt und in die Nährlösung übertragen. Die Inkubation der beimpften Kolben erfolgte über einen Zeitraum von 14 Tagen bei Raumtemperatur oder auch konstant 20°C in statischer Kultur im Dunkeln. Anschließend wurde das gewachsene Mycel einschließlich der Kulturbrühe abgeerntet, mit 40 ml Ethylacetat und 0,5 ml Ethylvinylether pro 300 ml Kulturbrühe versetzt und bei –86°C tiefgefroren.The Sterilization of the nutrient solution was carried out by autoclaving at 121 ° C / 1 bar, 15 minutes. As inoculum for the experimental fungal culture served ten pieces of mycelium discs (diameter 5 mm) per piston. These were from a 7 day old pre-culture on Pressed out WS agar using a cork borer and transferred into the nutrient solution. The incubation of the inoculated flask was carried out over a period of 14 days at room temperature or even constant 20 ° C in static culture in the dark. Subsequently the grown mycelium, including the culture broth, was harvested, with 40 ml of ethyl acetate and 0.5 ml of ethyl vinyl ether per 300 ml of culture broth and frozen at -86 ° C.
Bei
30 300-ml-Kulturansätzen
wurde das Mycel vom Kulturmedium durch Filtration getrennt, zerkleinert
und mit 250 ml eines Dichlormethan-Methanol-Gemisches (1:1) unter Rühren 48
Stunden lang extrahiert. Anschließend wurde das Mycel durch
Zentrifugation abgetrennt und der Extrakt im Vakuum zur Trockne
eingeengt. Das Kulturfiltrat wurde dreimal mit je 250 ml Essigester
extrahiert, die Essigesterphasen vereinigt und ebenfalls im Vakuum
zur Trockne eingeengt. Kulturfiltrat- und Mycelextrakt wurden zusammen
in einem Gemisch aus 200 ml Methanol und 6 ml Wasser gelöst und mit
200 ml Petrolether extrahiert. Die Methanol-Wasser-Phase wurde im Vakuum
eingeengt und die darin enthaltenen Verbindungen durch präparative
HPLC isoliert:
Säule:
Waters SymmetryPrep C18, 19 × 300
mm
Eluent: Acetonitril + 0,05 % TFA, Wasser + 0,05 % TFA (Trifluoressigsäure)
Gradient:
von 30 % Acetonitril auf 100 % Acetonitril in 25 min
Fluss:
11 ml/min
Detektion: 254 nmIn 30 300 ml culture batches, the mycelium was separated from the culture medium by filtration, crushed and extracted with 250 ml of a dichloromethane-methanol mixture (1: 1) with stirring for 48 hours. Subsequently, the mycelium was separated by centrifugation and the extract was concentrated to dryness in vacuo. The culture filtrate was extracted three times with 250 ml of ethyl acetate, the ethyl acetate phases combined and also concentrated to dryness in vacuo. Culture filtrate and mycelial extract were dissolved together in a mixture of 200 ml of methanol and 6 ml of water and extracted with 200 ml of petroleum ether. The methanol-water phase was concentrated in vacuo and the compounds contained therein were isolated by preparative HPLC:
Column: Waters SymmetryPrep C18, 19 × 300 mm
Eluent: acetonitrile + 0.05% TFA, water + 0.05% TFA (trifluoroacetic acid)
Gradient: from 30% acetonitrile to 100% acetonitrile in 25 min
Flow: 11 ml / min
Detection: 254 nm
Sorbifuranon A (1a) eluierte nach 16,1 min, Sorbifuranon B (2a) nach 13,5 min und Sorbifuranon C (3a) nach 11,9 min und Sorbivineton (4a) nach 20,0 min. Die entsprechenden Fraktionen wurden gesammelt und im Vakuum bis zur Trockne eingeengt. Pro Liter Kulturansatz erhielt man 1,3 mg Sorbifuranon A (1a), 0,7 mg Sorbifuranon B (2a) und 2,4 mg Sorbifuranon C (3a) und 0,6 mg Sorbivineton (4a) als amorphe Feststoffe.Sorbifuranon A (1a) eluted after 16.1 minutes, sorbifuranone B (2a) after 13.5 minutes and sorbifuranone C (3a) after 11.9 min and sorbivinetone (4a) after 20.0 min. The appropriate fractions were collected and stored in the Vacuum to dryness. Received per liter culture batch 1.3 mg sorbifuranone A (1a), 0.7 mg sorbifuranone B (2a) and 2.4 mg sorbifuranone C (3a) and 0.6 mg sorbivinetone (4a) as amorphous Solids.
Spektroskopische Daten und Strukturaufklärung der isolierten Substanzen:spectroscopic Data and structure elucidation of isolated substances:
CD
(c = 0,1 in McOH): Δε212 –1,8; Δε250 +3,2; Δε288 –2,9; Δε325 +2,0.
IR
(KBr): ν ~ = 3407 (br.), 2967 (m), 2937 (m), 2876 (w), 1708 (s), 1635
(s), 1443 (m), 1382 (m), 1342 (m), 1195 (m), 1078 (m) cm–1.
MS
(ESI, positiv): m/z 445 [M+H]+.
MS
(FAB positiv, in 2-Nitrobenzylalkohol): m/z 445 [M+H]+.CD (c = 0.1 in MeOH): Δε 212 -1.8; Δε 250 +3.2; Δε 288 -2.9; Δε 325 + 2.0.
IR (KBr): ν ~ = 3407 (br.), 2967 (m), 2937 (m), 2876 (w), 1708 (s), 1635 (s), 1443 (m), 1382 (m), 1342 (m), 1195 (m), 1078 (m) cm -1 .
MS (ESI, positive): m / z 445 [M + H] + .
MS (FAB positive, in 2-nitrobenzyl alcohol): m / z 445 [M + H] + .
Hochauflösende Masse: 
Tabelle
1. NMR-Daten von Sorbifuranon A (1a) in MeOH-d4. 
In Übereinstimmung mit der mittels hochauflösender Massenspektrometrie ermittelten Summenformel C24H28O8 zeigte das 13C-NMR-Spektrum von Sorbifuranon A 24 Signale. Durch Auswertung der HMBC-, HMQC- und COSY-Spektren konnten 14 Kohlenstoffatome einem Sorbicillinol-Rest, d.h. einem zweifach methylierten Cyclohexadionring mit Sorbyl-Substituenten, zugeordnet werden. Weitere Strukturelemente waren ein n-Propylrest und eine α,β-ungesättigte Carbonsäure, deren 3JHH-Kopplungskonstante von 11,9 Hz eine Z-Konfiguration belegte. Bei den restlichen Signalen handelte es sich um zwei Carbonylkohlenstoffe C-10 und C-12 (203,8 bzw. 193,6 ppm), einen quartären Kohlenstoff C-11 bei 115,6 ppm und einen Methinkohlenstoff C-9 bei 84,7 ppm mit zugehörigem Proton 9-H bei 5,27 ppm. Die HMBC-Wechselwirkungen von 9-H zu C-1, C-5 und C-6 legten nahe, daß der unbekannte Teil der Struktur über C-9 mit C-6 des Sorbicillinolteils verknüpft war, in die andere Richtung war eine HMBC-Korrelation von 2-H zu C-10 zu sehen. Durch weitere HMBC-Wechselwirkungen ausgehend von Protonen des n-Propylrests wurde die Abfolge der Kohlenstoffatome C-11, C-12 und C-13 erkannt. Die α,β-ungesättigte Carbonsäureeinheit war an C-11 gebunden, was aus der Wechselwirkung 17-H → C-11 ersichtlich war. Die Korrelationen 16-H → C-10 und 16-H → C-12 ließen den Schluß zu, daß direkt an C-11 neben C-12 und C-16 auch C-10 gebunden war. Ein weiterer für die Strukturaufklärung wichtiger Faktor war die chemische Verschiebung von C-9 (84,7 ppm), die auf einen Sauerstoffsubstituenten hindeutete.In agreement with the high-resolution mass spectrometry C 24 H 28 O 8 , the 13 C NMR spectrum of sorbifuranone A showed 24 signals. By evaluating the HMBC, HMQC and COZY spectra, 14 carbon atoms could be assigned to a sorbicillinol residue, ie a double methylated cyclohexadione ring with sorbyl substituents. Further structural elements were an n-propyl radical and an α, β-unsaturated carboxylic acid, whose 3 J HH coupling constant of 11.9 Hz showed a Z configuration. The remaining signals were two carbonyl carbons C-10 and C-12 (203.8 and 193.6 ppm), a quaternary carbon C-11 at 115.6 ppm and a methine carbon C-9 at 84.7 ppm with associated proton 9-H at 5.27 ppm. The HMBC interactions of 9-H to C-1, C-5 and C-6 suggested that the unknown part of the structure was linked via C-9 to C-6 of the sorbicillinol part, in the other direction was an HMBC Correlation of 2-H to C-10 can be seen. Further HMBC interactions starting from protons of the n-propyl residue revealed the sequence of carbon atoms C-11, C-12, and C-13. The α, β-unsaturated carboxylic acid moiety was attached to C-11, as evidenced by the 17-H → C-11 interaction. The correlations 16-H → C-10 and 16-H → C-12 led to the conclusion that C-11 was bonded to C-11 as well as C-12 and C-16. Another important factor in the structure elucidation was the chemical shift of C-9 (84.7 ppm), which suggested an oxygen substituent.
Der
einzige Strukturvorschlag, der im Einklang sowohl mit den eben genannten
HMBC-Wechselwirkungen als auch mit der Summenformel C24H28O8 stand, ist die
in
In Übereinstimmung mit dem Strukturvorschlag 1a wurde die Verbindung bei Behandlung mit Diazomethan zweifach zu 1 b methyliert (siehe Beispiel 2), an der freien Säuregruppe C-18 und an der enolischen Hydroxylgruppe an C-4, nicht jedoch unter Enoletherbildung an C-10. Dabei wurde die Position der eingeführten Methylgruppen durch ein HMBC-Experiment ermittelt. Ein zusätzlicher Hinweis auf die Richtigkeit der Struktur war die ROESY-Wechselwirkung 16-H ↔ 13-H. Nach den beiden hier diskutierten Strukturelementen, der Sorbicillinol- und der Furanonhälfte, wurde die neue Verbindung Sorbifuranon A (1a) genannt.In accordance with structural proposal 1a, the compound became on treatment with diazomethane twice to 1 b methylated (see Example 2), to the free acid group C-18 and at the enolic hydroxyl group at C-4, but not below Enol ether formation at C-10. Thereby, the position of the introduced methyl groups became determined by an HMBC experiment. An additional indication of the correctness the structure was the ROESY interaction 16-H ↔ 13-H. After the two structural elements discussed here, sorbicillinol and the furanone half, the new compound was called sorbifuranone A (1a).
Die cis-Anordnung von 6-H und der Methylgruppe C-7 am Cyclohexanonring konnte durch die NOESY-Wechselwirkung 6-H ↔ 7-H belegt werden. Über die Konfiguration des dritten Stereozentrums C-9 konnte aus den NMR-Spektren keine Information gewonnen werden. Auch die absolute Konfiguration von 1a wurde nicht bestimmt.The cis arrangement of 6-H and methyl group C-7 on the cyclohexanone ring could be confirmed by the NOESY interaction 6-H ↔ 7-H. About the Configuration of the third stereocenter C-9 was unable to obtain information from the NMR spectra be won. Also the absolute configuration of 1a did not become certainly.
Tabelle
2. NMR-Daten von Sorbifuranon B (2a) in MeOH-d4. 
IR
(KBr): ν ~ = 3405 (br.), 2967 (m), 2942 (m), 1715 (s), 1659 (s), 1579
(m), 1441 (m), 1385 (m), 1316 (m), 1252 (m), 1166 (m), 1061 (m),
823 (w) cm–1.
MS
(ESI, positiv): m/z 447 [M+H]+.
MS
(ESI, negativ): m/z 445 [M–H]–.
MS
(FAB positiv, in 2-Nitrobenzylalkohol): m/z 447 [M+H]+.
MS
(FAB negativ, in 2-Nitrobenzylalkohol): m/z 445 [M+H]+.Table 2. NMR data of sorbifuranone B (2a) in MeOH-d 4 .
IR (KBr): ν ~ = 3405 (br.), 2967 (m), 2942 (m), 1715 (s), 1659 (s), 1579 (m), 1441 (m), 1385 (m), 1316 (m), 1252 (m), 1166 (m), 1061 (m), 823 (w) cm -1 .
MS (ESI, positive): m / z 447 [M + H] + .
MS (ESI, negative): m / z 445 [M-H] - .
MS (FAB positive, in 2-nitrobenzyl alcohol): m / z 447 [M + H] + .
MS (FAB negative, in 2-nitrobenzyl alcohol): m / z 445 [M + H] + .
Die Analyse der NMR-Spektren von 2a offenbarte die gleiche Dihydrofuranon-Struktur wie bei Sorbifuranon A (1a). Allerdings fehlten bei den in MeOH-d4 gemessenen Spektren die Signale von 9-H und scheinbar auch von C-9. Durch eine längere Meßzeit und die daraus resultierende Verbesserung des Signal-Rausch-Verhältnisses gelang es dann schließlich doch, das C-9-Signal im Protonen-entkoppelten 13C-Spektrum aufzuspüren, allerdings als sehr schwaches Triplett mit einer Kopplungskonstante von ca. 20 Hz. Diese Aufspaltung mit einer für 1JDC-Kopplungen typischen Konstante sprach für einen H-D-Austausch an C-9. Durch eine erneute Messung der Substanz in McOH/MeOH-d4 (9:1) wurde diese Vermutung bestätigt; das Signal von C-9 erschien wie erwartet als scharfes Singulett bei 84,9 ppm (bei 1a: 84,7 ppm). Die chemische Verschiebung des Protons 9-H lag mit 4,68 ppm ebenfalls im erwarteten Bereich (bei 1a: 5,27 ppm). Dieser H-D-Austausch sprach auch dafür, daß die Konfiguration am Stereozentrum C-9 unter normalen Bedingungen nicht stabil ist. Bei 1a wurde ein solch schneller Austausch von 9-H zwar nicht beobachtet, doch die Ähnlichkeit der Strukturen ließ die Vermutung zu, daß auch hier ein Austausch stattfinden kann, Sorbifuranon A (1a) also nur zwei konfigurativ stabile Stereozentren besitzt.Analysis of the NMR spectra of 2a revealed the same dihydrofuranone structure as sorbifuranone A (1a). However, in the spectra measured in MeOH-d 4, the signals of 9-H and apparently also of C-9 were absent. By a longer measurement time and the resulting improvement in the signal-to-noise ratio, it was finally possible to detect the C-9 signal in the proton-decoupled 13 C spectrum, but as a very weak triplet with a coupling constant of about 20 Hz This splitting with a constant typical of 1 J DC couplings suggested HD exchange at C-9. Re-measurement of the substance in MeOH / MeOH-d 4 (9: 1) confirmed this assumption; the signal from C-9 appeared as expected as a sharp singlet at 84.9 ppm (at 1a: 84.7 ppm). The chemical shift of proton 9-H was also in the expected range at 4.68 ppm (at 1a: 5.27 ppm). This HD exchange also suggested that the configuration at the stereocenter C-9 is not stable under normal conditions. In 1a, such a rapid exchange of 9-H was not observed, but the similarity of the structures led to the assumption that sorbifuranone A (1a) has only two configurationally stable stereocenters.
Neben dem Dihydrofuranon-Strukturelement wurde bei 2a eine 2',3'-Dihydrosorbyl-Seitenkette identifiziert, wobei jedoch die chemische Verschiebung des Carbonylkohlenstoffs C-1' mit 209,5 ppm deutlich höher lag als z. B. bei Sorbifuranon A (169,1 ppm), die Carbonylfunktion bei dieser Verbindung also nicht enolisiert vorlag. An Stelle des bei Sorbicillin-Derivaten üblichen Cyclohexanonrings wurde bei 2a ein Butenolid-System identifiziert. Solche Butenolid-Strukturen sind auch von biosynthetisch verwandten Verbindungen bekannt, so z. B. beim Bisorbibutenolid (Andrade et al. (1997) Aust. J. Chem. 50:255-257).Next the dihydrofuranone structural element was identified at 2a as a 2 ', 3'-dihydrosorbyl side chain, however, the chemical shift of the carbonyl carbon C-1 'at 209.5 ppm was significantly higher as z. For example, in sorbifuranone A (169.1 ppm), the carbonyl function at This compound was therefore not enolized. In place of at Sorbicillin derivatives usual Cyclohexanone ring was identified at 2a a butenolide system. Such butenolide structures are also biosynthetically related Known compounds, such. B. in bisorbibutenolide (Andrade et al. (1997) Aust. J. Chem. 50: 255-257).
Über die
HMBC-Wechselwirkungen des Protons 6-H konnten wegen dessen zentraler
Lage im Molekül
die Teilstrukturen zu der Gesamtstruktur 2a (
IR
(KBr): ν ~ = 3373 (br.), 3175 (br.), 2967 (m), 2939 (m), 1699 (s),
1654 (s), 1440 (m), 1384 (m), 1260 (m), 1176 (m), 1047 (w) cm–1.
MS
(ESI, positiv): m/z 445 [M+H]+.
MS
(ESI, negativ): m/z 443 [M–H]–.
MS
(FAB positiv, in 2-Nitrobenzylalkohol): m/z 445 [M+H]+.
MS
(FAB negativ, in 2-Nitrobenzylalkohol): m/z 443 [M+H]+.
MS
(EI): m/z (%): 444 [M]+ (13), 426 (26),
317 (56), 299 (21), 273 (16), 249 (37), 231 (47), 229 (11), 221
(10), 205 (65), 204 (11), 203 (11), 177 (10), 165 (11), 95 (100),
71 (21), 67 (20), 55 (22), 44 (53).Because of its central position in the molecule, the HMBC interactions of the proton 6-H enabled the partial structures to form the overall structure 2a (FIG.
IR (KBr): ν ~ = 3373 (br.), 3175 (br.), 2967 (m), 2939 (m), 1699 (s), 1654 (s), 1440 (m), 1384 (m), 1260 (m), 1176 (m), 1047 (w) cm -1 .
MS (ESI, positive): m / z 445 [M + H] + .
MS (ESI, negative): m / z 443 [M-H] - .
MS (FAB positive, in 2-nitrobenzyl alcohol): m / z 445 [M + H] + .
MS (FAB negative, in 2-nitrobenzyl alcohol): m / z 443 [M + H] + .
MS (EI): m / z (%): 444 [M] + (13), 426 (26), 317 (56), 299 (21), 273 (16), 249 (37), 231 (47) , 229 (11), 221 (10), 205 (65), 204 (11), 203 (11), 177 (10), 165 (11), 95 (100), 71 (21), 67 (20) , 55 (22), 44 (53).
Hochauflösende Masse: 
Tabelle
3. NMR-Daten von Sorbifuranon C (3a) in MeOH-d4. 
Die
NMR-Spektren von Sorbifuranon C (3a) zeigten eine große Ähnlichkeit
zu denen von 2a. Wieder wurde ein Butenolidrest gefunden; dessen
chemische Verschiebungen waren beinahe identisch zu denen von 2a.
Auch ein Dihydrofuranon-System wurde identifiziert, allerdings mit
einem quartär
substituierten Kohlenstoff C-9. Der Kohlenstoff C-3' im Sorbylteil des
Moleküls
war dreifach substituiert, während
er bei Sorbifuranon B (2a) noch eine CH2-Gruppe war. Ein weiterer
Unterschied zu 2a war die stärkere 'Aufspaltung' der diastereotopen
Protonen an C-1 (2,29 und 3,07 ppm) und C-2' (2,50 und 2,77 ppm). Große Differenzen
zwischen den chemischen Verschiebungen diastereotoper Protonen,
die an dasselbe Kohlenstoffatom gebunden sind, sprechen oft dafür, daß diese
CH2-Gruppe Teil eines Ringsystems ist. Tatsächlich offenbarten
die HMBC-Spektren eine zusätzliche
Bindung, zwischen C-9 und C-3',
belegt durch die Wechselwirkungen 2'-H → C-9,
3'-H → C-9 und
3'-H → C-10, so
daß es
sich bei 3a um ein Cyclohexanonderivat mit einem spiro-verknüpften Dihydrofuranonring
handelte (
Sorbifuranon C (3a) besitzt drei Stereozentren: C-6, C-9 und C-3'. Da diese Teil desselben Sechsringes sind, bestand hier die Möglichkeit, durch ein NOESY-Experiment Informationen über die relative Konfiguration zu erhalten. Aussagekräftig war dabei vor allem die Wechselwirkung der Methylgruppe 7-H zu 3'-H, welche zeigte, daß 3'-H und 6-H in trans-Konfiguration zueinander stehen. Unterstützt wurde dies auch durch das Fehlen einer Wechselwirkung 3'-H ↔ 6-H, die bei einer cis-Konfiguration zu erwarten wäre, da wegen der zwei relativ großen Substituenten an C-6 und C-3' (d.h. des Butenolid- und des n-Propenylrestes) von einer axialen Anordnung dieser beiden Protonen ausgegangen werden kann. Allerdings war es wegen der großen räumlichen Entfernung aller Protonen im Dihydrofuranonteil zu den Protonen im Rest des Moleküls nicht möglich, an Hand der NOESY-Daten auch die Konfiguration an C-9 in Relation zu den beiden anderen Stereozentren zu setzen.Sorbifuranon C (3a) has three stereogenic centers: C-6, C-9, and C-3 '. Because this part of it There are six-ring, here was the possibility through a NOESY experiment information about to get the relative configuration. Meaningful especially the interaction of the methyl group 7-H to 3'-H, which showed that 3'-H and 6-H in trans configuration to stand by each other. supports This was also due to the absence of an interaction 3'-H ↔ 6-H, the would be expected with a cis configuration, because of the two relative huge Substituents at C-6 and C-3 '(i.e. of butenolide and n-propenyl) from an axial arrangement These two protons can be assumed. However, it was because of the big one spatial Removal of all protons in the dihydrofuranone part to the protons in the rest of the molecule not possible, on the basis of the NOESY data also the configuration at C-9 in relation to put to the other two stereocenters.
D)
Sorbivineton (4a) 
CD
(c = 0,1 in MeOH): Δε223 –2,5; Δε246 +1,8; Δε310 –9,7; Δε353 +8,1.
IR
(KBr): ν ~ = 3425 (br.), 2966 (w), 2926 (m), 2860 (w), 1728 (m), 1629
(m), 1451 (m), 1380 (m), 1092 (m), 1026 (m), 998 (m) cm–1.
MS
(EI): m/z (%): 320 [M]+ (30), 274 (81),
259 (13), 245 (48), 233 (11), 231 (28), 217 (18), 205 (31), 203
(24), 191 (33), 189 (14), 181 (35), 180 (23), 167 (24), 151 (45),
137 (22), 95 (100), 73 (26), 67 (36).CD (c = 0.1 in MeOH): Δε 223 -2.5; Δε 246 +1.8; Δε 310 -9.7; Δε 353 +8.1.
IR (KBr): ν ~ = 3425 (br.), 2966 (w), 2926 (m), 2860 (w), 1728 (m), 1629 (m), 1451 (m), 1380 (m), 1092 (m), 1026 (m), 998 (m) cm -1 .
MS (EI): m / z (%): 320 [M] + (30), 274 (81), 259 (13), 245 (48), 233 (11), 231 (28), 217 (18) , 205 (31), 203 (24), 191 (33), 189 (14), 181 (35), 180 (23), 167 (24), 151 (45), 137 (22), 95 (100) , 73 (26), 67 (36).
Hochauflösende Masse: 
Tabelle
4. NMR-Daten von Sorbivineton (4a) in MeOH-d4. 
Die NMR-Spektren zeigten wie schon bei Sorbifuranon A (1a) einen Sorbylrest in seiner Enolform. Auch das bekannte Sorbicillinol-Grundgerüst wurde bei dieser Verbindung identifiziert. Auffällig war das stark tieffeldverschobene Signal von C-4 (210,4 ppm), welches deutlich machte, daß diese Carbonylfunktion hier nicht als Enol wie bei Sorbifuranon A (1a) vorlag. Zusätzlich zu den 14 Kohlenstoffatomen des Sorbicillinolgerüsts enthielt das 13C-NMR-Spektrum noch die Signale von vier weiteren Kohlenstoffen: einer Methylgruppe C-12 (15,4 ppm), zwei Methylenkohlenstoffen C-9 und C-11 (31,8 und 66,3 ppm) und einem Methinkohlenstoff C-10 (79,9 ppm). Mehrere HMBC-Wechselwirkungen belegten eine von C-9 und C-10 gebildete C2-Brücke von C-6 zu C-3 des Sorbicillinolringes, so daß ein [2.2.2]-Bicyclus vorlag. Die Ausrichtung dieser C2-Brücke, also die Frage welcher Brückenkohlenstoff an C-6 und welcher an C-3 gebunden ist, war durch die HMBC-Wechselwirkungen 10-H → C-2 und 10-H → C-4 sowie durch 9-H → C-1 und 9-H → C-5 eindeutig festgelegt. Die restlichen zwei Kohlenstoffatome C-11 und C-12 gehörten offensichtlich zu einer O-Ethylgruppe. Die HMBC-Korrelationen 10-H → C-11 und 11-H → C-10 zeigten, daß diese an C-10, also eines der Brückenkohlenstoffatome, gebunden war. Da es sich bei er Substanz, der damit die Struktur 4a zugeordnet war, offensichtlich um ein Cycloadditionsprodukt von Sorbicillinol und Vinylethylether handelt, wurde ihr der Name Sorbivineton gegeben.The NMR spectra showed, as with sorbifuranone A (1a), a sorbyl residue in its enol form. The known sorbicillinol backbone was also identified in this compound. Noticeable was the strongly downfield shifted signal of C-4 (210.4 ppm), which made it clear that this carbonyl function was not present as enol as in sorbifuranone A (1a). In addition to the 14 carbon atoms of the sorbicillinol skeleton, the 13 C NMR spectrum still contained the signals of four other carbons: a methyl group C-12 (15.4 ppm), two methylene carbons C-9 and C-11 (31.8 and 66 , 3 ppm) and a methine C-10 (79.9 ppm). Several HMBC interactions revealed a C 2 -to-C-3 C 2 to C 3 bridge of the sorbicillinol ring formed by C-9 and C-10 to give a [2.2.2] bicyclic moiety. The orientation of this C 2 bridge, that is, the question of which bridging carbon is attached to C-6 and which to C-3, was due to the HMBC interactions 10-H → C-2 and 10-H → C-4 and 9 -H → C-1 and 9-H → C-5 are clearly defined. The remaining two carbon atoms C-11 and C-12 apparently belonged to an O-ethyl group. The HMBC correlations 10-H → C-11 and 11-H → C-10 showed that this was bound to C-10, one of the bridging carbon atoms. Since the substance assigned to structure 4a was obviously a cycloaddition product of sorbicillinol and vinyl ethyl ether, it was given the name sorbivinetone.
Beispiel 2: O-Methylierung von Sorbifuranon A (1a)Example 2: O-Methylation of sorbifuranone A (1a)
Zu einer Lösung von 4 mg Sorbifuranon A (1a) in 2 ml McOH/Wasser (9:1) wurde eine Lösung von Diazomethan in Diethylether gegeben, bis die N2-Entwicklung versiegte. Nach 5 min wurde die Reaktionslösung getrocknet und das Produkt durch präparative HPLC aufgereinigt: Säule: Waters SymmetryPrep C18, 19 × 30 mm; Eluenten: Wasser (A), Acetonitril (B); Fluß 12 ml/min; 0 min 25 % B, 30 min 100 % B. Das Hauptprodukt 1 b wurde nach 22,5 min eluiert. Nach dem Trocknen erhielt man 2,8 mg eines gelben amorphen Feststoffes. Die Strukturaufklärung erfolgte durch NMR und ergab die folgende Struktur.To a solution of 4 mg of sorbifuranone A (1a) in 2 ml of MeOH / water (9: 1) was added a solution of diazomethane in diethyl ether until the N 2 evolution ceased. After 5 minutes, the reaction solution was dried and the product purified by preparative HPLC: column: Waters SymmetryPrep C 18 , 19 x 30 mm; Eluents: water (A), acetonitrile (B); Flow 12 ml / min; 0 min 25% B, 30 min 100% B. The main product 1 b was eluted after 22.5 min. After drying, 2.8 mg of a yellow amorphous solid were obtained. The structure was determined by NMR and gave the following structure.
Tabelle
5. NMR-Daten von 1 b in MeOH-d4. 
Beispiel 3: Gewinnung von Sorbivineton-Acetat (4b): Durch chemische SyntheseExample 3: Extraction of sorbivinetone acetate (4b): By chemical synthesis
Acht mg racemisches Sorbicillinol-Acetat, synthetisiert nach einer literaturbekannten Vorschrift (Nicolaou et al. (2000) J. Am. Chem. Soc. 122:3071-3079), wurden durch präparative HPLC gereinigt (Wasser (A), Acetonitril (B); Fluß 12 ml/min; 0 min 10 % B, 40 min 100 % B), Sorbicillinol- Acetat wurde nach 29 min eluiert: Da es sich bei Sorbicillinolacetat um eine relativ instabile Verbindung handelt, wurden die Sorbicillinolacetat-haltigen Fraktionen aus der präparativen HPLC (11 ml; ca. 0,3 mg Sorbicillinolacetat pro ml Acetonitril/Wasser-Gemisch) nicht getrocknet, sondern direkt mit 100 μl Ethylvinylether versetzt. Nach 24 Stunden war die Reaktion abgeschlossen. Nach Trocknen der Reaktionslösung erhielt man 3,2 mg eines zähen hellgelben Öls; in Analogie zu 4a wurde die Substanz als Sorbivineton-Acetat (4b) bezeichnet.eight mg racemic sorbicillinol acetate, synthesized according to a literature Regulation (Nicolaou et al. (2000) J. Am. Chem. Soc. 122: 3071-3079), were made by preparative HPLC purified (water (A), acetonitrile (B); flow 12 ml / min; 0 min 10% B, 40 min. 100% B), sorbicillinol acetate was eluted after 29 min: since sorbicillinol acetate was is a relatively unstable compound, the sorbicillinol acetate-containing Fractions from the preparative HPLC (11 ml, about 0.3 mg sorbicillinol acetate per ml acetonitrile / water mixture) not dried, but added directly with 100 .mu.l of ethyl vinyl ether. After 24 hours the reaction was complete. After drying the reaction solution received 3.2 mg of a tough pale yellow oil; in analogy to 4a, the substance was synthesized as sorbivinetone acetate (4b) designated.
MS (EI): m/z (%): 362 [M]+ (21), 336 (14), 320 (20), 294 (29), 274 (25), 245 (18), 207 (53), 205 (30), 191 (18), 179 (15), 163 (14), 95 (69), 83 (20), 67 (22), 43 (100).MS (EI): m / z (%): 362 [M] + (21), 336 (14), 320 (20), 294 (29), 274 (25), 245 (18), 207 (53) , 205 (30), 191 (18), 179 (15), 163 (14), 95 (69), 83 (20), 67 (22), 43 (100).
Hochauflösende Masse: 
Tabelle
6. NMR-Daten von Sorbivineton-Acetat (4b) in McOH-d4. 
Beispiel 4: Gewinnung von Sorbivinetol (4c): Durch Anzucht eines Pilzes in Gegenwart von EthylvinyletherExample 4: Extraction of sorbivinetol (4c): By growing a fungus in the presence of ethyl vinyl ether
Zur
Produktion von Sorbivinetol (4c) wurde der in Beispiel 1 verwendete
Pilz als Standkultur in Wickerham-Meerwasser-Medium bei 30°C angezogen.
Am 4., 5., 6. und 7. Tag wurden jeweils 500 μl Ethylvinylether pro Liter
Pilzkultur zugegeben. Nach acht Tagen wurde das Pilzmycel abfiltriert
und das Kulturmedium mit Ethylacetat extrahiert. Den Extrakt unterzog
man einer präparativen
HPLC unter folgenden Bedingungen:
Säule: Waters SymmetryPrep C18,
19 × 300
mm
Eluent: Acetonitril + 0,05 % TFA, Wasser + 0,05 % TFA (Trifluoressigsäure) Isokratische
Bedingungen mit 35 % B
Fluss: 12 ml/min
Detektion: 254
nm 
Column: Waters SymmetryPrep C18, 19 × 300 mm
Eluent: acetonitrile + 0.05% TFA, water + 0.05% TFA (trifluoroacetic acid) isocratic conditions with 35% B
Flow: 12 ml / min
Detection: 254 nm
Hochauflösende Masse: 
Tabelle
7. NMR-Daten von Sorbivinetol (4c) in MeOH-d4. 
Beispiel 5: Biologische Eigenschaften der VerbindungenExample 5: Biological Properties of the connections
a) Antitumorale Aktivitäta) Antitumoral activity
Die antitumorale Aktivität von Sorbifuranon A (1a), B (2a), C (3a), Sorbivineton (4a), Sorbivineton-Acetat (4b) und Sorbivinetol (4c) wurde an einer Reihe von Tumor-transformierten Zellen, wie dem L5178Y Mäuselymphomzellsystem (ATCC CRL-1722), PC12-Zellen (ATCC CRL-1721), HeLa-Zellen (ATCC CCL-2) und HeLa-S3-Zellen (ATCC CCL-2.2) getestet. Die L5178Y-Zellen wurden in RPM11640-Medium, dem 10 % fötales Kälberserum (FKS) zugesetzt worden war, kultiviert. Die PC12-Zellen wurden in DMEM-Medium mit 10 % Pferdeserum (PS) und 5 % FKS gehalten und die HeLa-Zellen in DMEM-Medium mit 10 % FKS. Als Inokulumskonzentration wurde für die L5178Y-Zellen 8 × 103; für die PC12-Zellen 5 × 104 und für die HeLa-Zellen 3 × 104 Zellen/ml gewählt. Zum Startzeitpunkt wurde Sorbifuranon A (1a) in den Konzentrationen 3,0; 5,0 und 10,0 μg/ml, Sorbifuranon B (2a) und C (3a) in den Konzentrationen 0,1; 0,3; 1,0; 3,0; 10,0 und 30,0 μg/ml, Sorbivineton (4a) in den Konzentrationen 3,0 und 10,0 μg/ml, Sorbivineton-Acetat (4b) und Sorbivinetol (4c) in den Konzentrationen 0,1; 0,3; 1,0; 3,0 und 10,0 μg/ml zugegeben und die Kultur 72 Stunden lang inkubiert. Danach wurde die Anzahl der lebenden Zellen mittels des kolorimetrischen MTT-Tests bestimmt und mit einem ELISA Reader ausgewertet (Scudiero et al. (1988) Cancer Res. 48:4827-4833; Daum et al. (1992) Intervirology 33:65-75). Die optische Dichte der Kontrollen wurde als 100 % definiert. Die Wachstumshemmung wurde als % der Kontrolle ausgerechnet.The antitumoral activity of sorbifuranone A (1a), B (2a), C (3a), sorbivinetone (4a), sorbivinetone acetate (4b) and sorbivinetol (4c) was measured on a number of tumor-transformed cells, such as the L5178Y mouse lymphoma cell system (ATCC CRL-1722), PC12 cells (ATCC CRL-1721), HeLa cells (ATCC CCL-2), and HeLa S3 cells (ATCC CCL-2.2). The L5178Y cells were cultured in RPM11640 medium to which 10% fetal calf serum (FCS) had been added. The PC12 cells were maintained in DMEM medium with 10% horse serum (PS) and 5% FCS and the HeLa cells in DMEM medium with 10% FCS. As the inoculum concentration, 8 × 10 3 ; 5 × 10 4 for the PC12 cells and 3 × 10 4 cells / ml for the HeLa cells. At baseline, sorbifuranone A (1a) was in the concentrations 3.0; 5.0 and 10.0 μg / ml, sorbifuranone B (2a) and C (3a) in the concentrations 0.1; 0.3; 1.0; 3.0; 10.0 and 30.0 μg / ml, sorbivinetone (4a) in the concentrations 3.0 and 10.0 μg / ml, sorbivinetone acetate (4b) and sorbivinetol (4c) in the concentrations 0.1; 0.3; 1.0; 3.0 and 10.0 μg / ml were added and the culture incubated for 72 hours. Thereafter, the number of living cells was determined by the colorimetric MTT assay and evaluated with an ELISA reader (Scudiero et al., (1988) Cancer Res. 48: 4827-4833; Daum et al. (1992) Intervirology 33: 65-75 ). The optical density of the controls was defined as 100%. Growth inhibition was calculated as% of control.
Tabelle
8. Einfluß von
Sorbifuranon A (1a) auf ausgewählte
Tumorzell-Linien. 
Tabelle
9. Einfluß von
Sorbifuranon B (2a) auf ausgewählte
Tumorzell-Linien. 
Tabelle
10. Einfluß von
Sorbifuranon C (3a) auf ausgewählte
Tumorzell-Linien. 
Tabelle
11. Einfluß von
Sorbivineton (4a) auf L5178Y-Zellen. 
Tabelle
12. Einfluß von
Sorbivineton-Acetat (4b) auf ausgewählte Tumorzell-Linien. 
Tabelle
13. Einfluß von
Sorbivinetol (4c) auf ausgewählte
Tumorzell-Linien. 
Ergebnisse: Es wird deutlich, daß Sorbifuranon A (1a) die Zellproliferation nur bei L5178Y-Zellen nach 72 Stunden entscheidend reduziert. Die ED50-Konzentration (berechnet nach Sachs L. (1984) Angewandte Statistik. Springer, Berlin) lag bei den verwendeten L5178Y-Zellen bei 5 μg/ml. Die Wachstumshemmung von Sorbifuranon A (1a) bei HeLa-S3- und die PC12-Zellen war gleich null. Eine Wachstumshemmung von 56,5 % (die ED50- Konzentration) wurde bei L5178Y-Zellen nach der Inkubation mit 30,0 μg/ml Sorbifuranon B (2a) gemessen. Gleichzeitig wurde eine kleine Wachstumshemmung von ~ 15 % nach der Inkubation der PC12-Zellen mit 3,0; 10,0 und 30,0 μg/ml von Sorbifuranon B (2a) festgestellt. Bei den HeLa-Zellen wurde eine Wachstumshemmung von 14,3 % erst nach der Zugabe von 30,0 μg/ml Sorbifuranon B (2a) gemessen. Parallel, wurde fast keine Wachstumshemmung nach der Inkubation der PC12- und HeLa-Zellen mit Sorbifuranon C (3a) festgestellt. Eine Hemmung des Zellwachstums um 48,2 wurde nur bei L5178Y-Zellen beobachtet. Die ED50-Konzentration liegt bei 30,0 μg/ml.Results: It is clear that sorbifuranone A (1a) significantly reduces cell proliferation only in L5178Y cells after 72 hours. The ED 50 concentration (calculated according to Sachs L. (1984) Applied Statistics, Springer, Berlin) was 5 μg / ml in the L5178Y cells used. Growth inhibition of sorbifuranone A (1a) in HeLa-S3 and PC12 cells was zero. A growth inhibition of 56.5% (the ED 50 concentration) was measured in L5178Y cells after incubation with 30.0 μg / ml sorbifuranone B (2a). At the same time, a small growth inhibition of ~ 15% was observed after incubation of the PC12 cells with 3.0; 10.0 and 30.0 μg / ml of sorbifuranone B (2a). For the HeLa cells, a growth inhibition of 14.3% was measured only after the addition of 30.0 μg / ml sorbifuranone B (2a). In parallel, almost no growth inhibition was observed after incubation of the PC12 and HeLa cells with sorbifuranone C (3a). Inhibition of cell growth by 48.2 was observed only with L5178Y cells. The ED 50 concentration is 30.0 μg / ml.
Sorbivineton (4a) hemmt das Wachstum bei L5178Y-Zellen. Die Zellproliferation hat sich um 19,8 %, nach der Inkubation der Zellen mit 10,0 μg/ml von Sorbivineton (4a), reduziert. Die ED50-Konzentration liegt bei > 10,0 μg/ml. Sorbivineton-Acetat (4b) besitzt eine starke wachstumshemmende Eigenschaft bei L5178Y-Zellen. Mit 3,0 μg/ml war eine 100%ige Hemmung der Zellproliferation erreicht. Die ED50-Konzentration (berechnet nach Sachs L. (1984) Angewandte Statistik. Springer, Berlin) lag bei den verwendeten L5178Y-Zellen bei 0,62 μg/ml. Unter vergleichbaren Bedingungen wurde eine geringe Reduktion der Zellproliferation bei L5178Y- und HeLa-Zellen nach der Zugabe von 3,0 (6,7 % und 12,3 %) und 10,0 (28,4 % und 14,1 %) μg/ml von Sorbivinetol (4c) gemessen. Die ED50-Konzentration liegt bei > 10,0 μg/ml für die L5178Y-Zellen.Sorbivinetone (4a) inhibits growth in L5178Y cells. Cell proliferation was reduced by 19.8% after incubation of cells with 10.0 μg / ml of sorbivinetone (4a). The ED 50 concentration is> 10.0 μg / ml. Sorbivinetone acetate (4b) has a strong growth-inhibiting property in L5178Y cells. At 3.0 μg / ml, 100% inhibition of cell proliferation was achieved. The ED 50 concentration (calculated according to Sachs L. (1984) Angewandte Statistik, Springer, Berlin) was 0.62 μg / ml in the L5178Y cells used. Under comparable conditions, there was a small reduction in cell proliferation in L5178Y and HeLa cells after the addition of 3.0 (6.7% and 12.3%) and 10.0 (28.4% and 14.1%) μg, respectively / ml of sorbivinetol (4c). The ED 50 concentration is> 10.0 μg / ml for the L5178Y cells.
Claims (19)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE200410005106 DE102004005106A1 (en) | 2004-02-02 | 2004-02-02 | New furanone and bicyclooctane derivatives, e.g. sorbifuranone A, B or C, sorbivinetone and sorbivinetol, useful as antitumor agents, prepared e.g. by culturing Penicillium fungi |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE200410005106 DE102004005106A1 (en) | 2004-02-02 | 2004-02-02 | New furanone and bicyclooctane derivatives, e.g. sorbifuranone A, B or C, sorbivinetone and sorbivinetol, useful as antitumor agents, prepared e.g. by culturing Penicillium fungi |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DE102004005106A1 true DE102004005106A1 (en) | 2005-08-18 |
Family
ID=34801442
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DE200410005106 Withdrawn DE102004005106A1 (en) | 2004-02-02 | 2004-02-02 | New furanone and bicyclooctane derivatives, e.g. sorbifuranone A, B or C, sorbivinetone and sorbivinetol, useful as antitumor agents, prepared e.g. by culturing Penicillium fungi |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| DE (1) | DE102004005106A1 (en) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105037479A (en) * | 2015-06-10 | 2015-11-11 | 中国科学院微生物研究所 | Antimicrobial compound based on fungus transformation, and preparation method and application thereof |
| WO2021056936A1 (en) * | 2019-09-26 | 2021-04-01 | 青岛农业大学 | Polyketone compounds having trans-decalin ring and preparation method therefor and application thereof |
| US11324217B2 (en) | 2019-09-26 | 2022-05-10 | Qingdao Agricultural University | Preparation method and application of polyketides bearing the trans-fused decalin skeleton |
| WO2023059224A1 (en) | 2021-10-09 | 2023-04-13 | Joint Stock Company "Pharmasyntez" | A new class of antiviral drugs |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE10238257A1 (en) * | 2002-08-21 | 2004-03-11 | Johannes-Gutenberg-Universität Mainz | New compounds sorbicillactone A and derivatives, useful as antitumor, antiviral and antiinflammatory agents, obtained e.g. by culturing Penicillium fungi |
-
2004
- 2004-02-02 DE DE200410005106 patent/DE102004005106A1/en not_active Withdrawn
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE10238257A1 (en) * | 2002-08-21 | 2004-03-11 | Johannes-Gutenberg-Universität Mainz | New compounds sorbicillactone A and derivatives, useful as antitumor, antiviral and antiinflammatory agents, obtained e.g. by culturing Penicillium fungi |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| J. Am. Chem. Soc. (2002), 122, S. 3071-3079 * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105037479A (en) * | 2015-06-10 | 2015-11-11 | 中国科学院微生物研究所 | Antimicrobial compound based on fungus transformation, and preparation method and application thereof |
| WO2021056936A1 (en) * | 2019-09-26 | 2021-04-01 | 青岛农业大学 | Polyketone compounds having trans-decalin ring and preparation method therefor and application thereof |
| US11324217B2 (en) | 2019-09-26 | 2022-05-10 | Qingdao Agricultural University | Preparation method and application of polyketides bearing the trans-fused decalin skeleton |
| WO2023059224A1 (en) | 2021-10-09 | 2023-04-13 | Joint Stock Company "Pharmasyntez" | A new class of antiviral drugs |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DE2227739C2 (en) | Pseudomonas acids, their sodium salts and methyl esters and processes for their preparation | |
| CH638194A5 (en) | ESTERASTIN, A NEW PHYSIOLOGICALLY EFFECTIVE SUBSTANCE AND THEIR PRODUCTION. | |
| DE2941080A1 (en) | NEW METABOLITES, THEIR PRODUCTION AND USE | |
| CH637398A5 (en) | METHOD FOR PRODUCING MAYTANSINOID COMPOUNDS. | |
| DE2524355A1 (en) | PHYSIOLOGICALLY ACTIVE COMPOUNDS AND PROCEDURES FOR THEIR PRODUCTION | |
| DE2743654C3 (en) | ||
| DE3109335C2 (en) | Ebelacton A and B, process for their preparation and pharmaceutical compositions containing these compounds | |
| EP0318849A2 (en) | Manumycin derivatives, process for their preparation and their use | |
| EP0639644A1 (en) | New macrolides and their use | |
| CH640270A5 (en) | METHOD FOR PRODUCING THE ANTIBIOTIC C-15003 P-3. | |
| DE2149750A1 (en) | Erythromycin derivatives | |
| DE102004005106A1 (en) | New furanone and bicyclooctane derivatives, e.g. sorbifuranone A, B or C, sorbivinetone and sorbivinetol, useful as antitumor agents, prepared e.g. by culturing Penicillium fungi | |
| DE69908569T2 (en) | METHOD FOR PRODUCING FEXOFENADINE | |
| EP1532129B1 (en) | Sorbicillactone-a derivatives for the treatment of tumour and viral diseases | |
| EP0337152A1 (en) | Furans and lactones from streptomycetes, process for their preparation and their use | |
| CH678855A5 (en) | ||
| DE3247175A1 (en) | DIHYDRO- AND TETRAHYDROMONACOLIN L, THEIR METAL SALTS AND ALKYLESTERS AND METHOD FOR THE PRODUCTION THEREOF AND THE MEDICINAL PRODUCTS CONTAINING THE SAME | |
| DE2849666A1 (en) | METHOD OF PREPARATION OF ANTIBIOTIC C-15003 P 4 | |
| EP0482543B1 (en) | Oasomycine, method of its preparation and its use | |
| DE3407979C2 (en) | ||
| DE102010006245B4 (en) | Mayamycin compounds, process for their preparation, their uses and cosmetic product containing them | |
| DE60101313T2 (en) | PLURAFLAVINE AND DERIVATIVES THEREOF, METHOD FOR THE PRODUCTION AND USE THEREOF | |
| DE102004004901B4 (en) | Process for the preparation of sorbicillactone A. | |
| CH647790A5 (en) | MACROLIDANTIBIOTICS. | |
| DE60132703T2 (en) | CITRULLIMYCINE, METHOD FOR THE PRODUCTION THEREOF AND THEIR USE AS A MEDICAMENT |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| OP8 | Request for examination as to paragraph 44 patent law | ||
| 8139 | Disposal/non-payment of the annual fee |