DE10149393A1 - Detecting the expression of serum and glucocorticoid-dependent kinase-1 (sgk1), for diagnosing coagulative diseases, diabetes, tumors, diabetes and autoimmune diseases, comprises using an antibody against sgk1 - Google Patents

Detecting the expression of serum and glucocorticoid-dependent kinase-1 (sgk1), for diagnosing coagulative diseases, diabetes, tumors, diabetes and autoimmune diseases, comprises using an antibody against sgk1

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DE10149393A1 DE2001149393 DE10149393A DE10149393A1 DE 10149393 A1 DE10149393 A1 DE 10149393A1 DE 2001149393 DE2001149393 DE 2001149393 DE 10149393 A DE10149393 A DE 10149393A DE 10149393 A1 DE10149393 A1 DE 10149393A1
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Abstract

Use of at least one compound (A) for detecting the expression and/or function of sgk1 (serum and glucocorticoid-dependent kinase-1) in eukaryotic cells, for diagnosing diseases associated with abnormal activity of sgk1, is new. Independent claims are also included for: (1) use of an active agent (B) for modifying, especially inhibiting or activating, the expression and/or function of sgk-1 in eukaryotic cells, for the treatment of diseases associated with abnormal activity of the tissue factor; (2) a diagnostic kit containing (A); and (3) a pharmaceutical composition containing (B) and optionally a carrier.

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft die Verwendung einer Substanz zum diagnostischen Nachweis von sgk1 (serum and glucocorticoid dependent kinase 1) sowie die Verwendung eines Wirkstoffes zur Beeinflussung von sgk1 für die therapeutische Behandlung von Erkrankungen, die mit einer gestörten Aktivität von TF (Tissue Factor) im Zusammenhang stehen, sowie ein diesbezügliches Diagnosekit. The present invention relates to the use of a substance for diagnostic evidence of sgk1 (serum and glucocorticoid dependent kinase 1) and the use of an active ingredient for Influencing sgk1 for the therapeutic treatment of diseases, who have an impaired activity of TF (tissue factor) in the Are related, as well as a related diagnostic kit.

Eine Vielzahl von externen Signalen, denen eine Zelle in ihrer Umwelt ausgesetzt ist, führen zu intrazellulären Phosphorylierungs-/Dephosphorylierungskaskaden, um eine schnelle und reversible Übertragung dieser Signale von der Plasmamembran und ihren Rezeptoren in das Zytoplasma und den Zellkern zu ermöglichen. Die Regulation einzelner Proteine, die an diesen Kaskaden beteiligt sind, ermöglicht erst die hohe Spezifität und Flexibilität der Zellen, die es ihnen erlauben, sehr schnell auf extrazelluläre Signale zu reagieren. An diesen Regulationsprozessen sind insbesondere Kinasen, d. h. Proteine, die eine Phosphatgruppe auf individuelle Substrate übertragen, beteiligt. Die Serum- und Glucocorticoid-abhängige Kinase (sgk) wurde ursprünglich aus Rattenmammakarzinomazellen kloniert (Webster MK, Goya L, Firestone GL. J. Biol. Chem. 268 (16): 11482-11485, 1993; Webster MK, Goya L, Ge Y, Maiyar AC, Firestone GL. Mol. Cell. Biol. 13 (4): 2031-2040, 1993). Die humane Kinase hsgk wurde als zellvolumenreguliertes Gen aus Leberzellen kloniert (Waldegger S. Barth P, Raber G, Lang F. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 94: 4440-4445, 1997). Es zeigte sich, daß die Rattenkinase (Chen SY, Bhargava A, Mastroberardino L, Meijer OC, Wang J, Buse P, Firestone GL, Verrey F, Pearce D. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 96: 2514-2519, 1999; Naray-Fejes-Toth A, Canessa C, Cleaveland Es, Aldrich G, Fejes-Toth G.J. Biol. Ghem. 274: 16973-16978, 1999) den epithelialen Na+-Kanal (ENaC) stimuliert. Weiter wurde gezeigt, daß eine gesteigerte Aktivität des ENaC mit Hypertonie einhergeht (Warnock DG. Kidney Ind. 53 (1): 1824, 1998). A variety of external signals to which a cell is exposed in its environment lead to intracellular phosphorylation / dephosphorylation cascades to enable rapid and reversible transmission of these signals from the plasma membrane and its receptors into the cytoplasm and the cell nucleus. The regulation of individual proteins that are involved in these cascades enables the high specificity and flexibility of the cells, which allow them to react very quickly to extracellular signals. Kinases, ie proteins which transfer a phosphate group to individual substrates, are particularly involved in these regulatory processes. Serum and glucocorticoid dependent kinase (sgk) was originally cloned from rat breast cancer cells (Webster MK, Goya L, Firestone GL. J. Biol. Chem. 268 (16): 11482-11485, 1993; Webster MK, Goya L, Ge Y, Maiyar AC, Firestone GL. Mol. Cell. Biol. 13 (4): 2031-2040, 1993). The human kinase hsgk was cloned from liver cells as a cell volume-regulated gene (Waldegger S. Barth P, Raber G, Lang F. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 94: 4440-4445, 1997). It was found that the rat kinase (Chen SY, Bhargava A, Mastroberardino L, Meijer OC, Wang J, Buse P, Firestone GL, Verrey F, Pearce D. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 96: 2514-2519, 1999; Naray-Fejes-Toth A, Canessa C, Cleaveland Es, Aldrich G, Fejes-Toth GJ Biol. Ghem. 274: 16973-16978, 1999) stimulated the epithelial Na + channel (ENaC). It has also been shown that increased ENaC activity is associated with hypertension (Warnock DG. Kidney Ind. 53 (1): 1824, 1998).

In der DE 197 08 173 konnte gezeigt werden, daß die hsgk1 bei vielen Erkrankungen, die durch Zellvolumenänderung pathophysiologisch beeinflußt werden, wie beispielsweise Hypernatriämie, Hyponatriämie, Diabetes mellitus, Niereninsuffizienz, Hyperkatabolismus, hepatische Encephalopathie und mikrobielle oder virale Infektionen, ein beträchtliches diagnostisches Potential besitzt. In DE 197 08 173 it could be shown that the hsgk1 in many Diseases caused by pathophysiological changes in cell volume are influenced, such as hypernatremia, hyponatremia, Diabetes mellitus, renal failure, hypercatabolism, hepatic Encephalopathy and microbial or viral infections has considerable diagnostic potential.

In der DE 199 17 990 sind Kinase-Hemmstoffe, wie beispielsweise Staurosporin, Chelerythrin oder transdominant inhibitorische Kinase beschrieben worden, die bei der Therapie zellvolumenabhängiger Erkrankungen eingesetzt werden können. DE 199 17 990 contains kinase inhibitors such as, for example Staurosporine, chelerythrine or transdominant inhibitory kinase have been described which are dependent on cell volume in therapy Diseases can be used.

Die hsgk wird auch im Gehirn exprimiert (Waldegger S. Barth P, Raber G, Lang F. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 94: 4440-4445, 1997), wo sie die spannungsabhängigen K+-Kanäle Kv1.3 reguliert. Es wurde gezeigt, daß diese K+-Kanäle des Kv1.3-Typs involviert sind in der Regulation der neuronalen Erregbarkeit (Pongs O. Physiol. Rev. 72: 69-88, 1992), der Regulation von Zellproliferation (Cahalan MD und Chandy KG. Cur. Opin. Biotech. 8 (6): 749-756, 1997) sowie der Regulation von apoptiotischem Zelltod (Szabo I, Gulbins E, Apfel H, Zhan X, Barth P, Busch AE, Schlottmann K, Pongs O, Lang F. J. Biol. Chem. 271: 20465-20469, 1999; Lang F, Szabo I, Lepple-Wienhues A, Siemen D, Gulbins E. News Physiol. Sci. 14: 194-200, 1999). Kv1.3 ist ferner wichtig bei der Regulation der Lymphozytenproliferation und -funktion (Cahalan MD und Chandy KG, Cur. Opin. Biotech. 8 (6): 749-756, 1997). Es wurden zwei weitere Mitglieder der sgk-Familie kloniert, die sgk2 und sgk3 (Kobayashi T, Deak M, Morrice N, Cohen P. Biochem. J. 344: 189-197, 1999). Ferner zeigte sich, daß die sgk eine Serin-Threonin-Proteinkinase-Familie bilden, die transkriptionell und posttranskriptionell reguliert werden können. Wie die sgk1, werden auch die sgk2 und sgk3 durch z. B. Insulin und IGF1 über den P13-Kinase-Weg aktiviert. Eine vollständige Charakterisierung der sgk Proteinfamilie hat aber bis jetzt nicht stattgefunden. The hsgk is also expressed in the brain (Waldegger S. Barth P, Raber G, Lang F. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 94: 4440-4445, 1997), where it regulates the voltage-dependent K + channels Kv1.3 , It has been shown that these Kv1.3-type K + channels are involved in the regulation of neuronal excitability (Pongs O. Physiol. Rev. 72: 69-88, 1992), the regulation of cell proliferation (Cahalan MD and Chandy KG. Cur. Opin. Biotech. 8 (6): 749-756, 1997) and the regulation of apoptiotic cell death (Szabo I, Gulbins E, Apfel H, Zhan X, Barth P, Busch AE, Schlottmann K, Pongs O, Lang FJ Biol. Chem. 271: 20465-20469, 1999; Lang F, Szabo I, Lepple-Wienhues A, Siemen D, Gulbins E. News Physiol. Sci. 14: 194-200, 1999). Kv1.3 is also important in the regulation of lymphocyte proliferation and function (Cahalan MD and Chandy KG, Cur. Opin. Biotech. 8 (6): 749-756, 1997). Two other members of the sgk family were cloned, the sgk2 and sgk3 (Kobayashi T, Deak M, Morrice N, Cohen P. Biochem. J. 344: 189-197, 1999). Furthermore, it was shown that the sgk form a family of serine-threonine protein kinases, which can be regulated transcriptionally and post-transcriptionally. Like the sgk1, the sgk2 and sgk3 are replaced by z. B. Insulin and IGF1 activated via the P13 kinase pathway. So far, however, the sgk protein family has not been fully characterized.

Dementsprechend stellt sich die Erfindung die Aufgabe, die sgk1 für neue diagnostische und therapeutische Anwendungen nutzbar zu machen. Accordingly, the invention has the task that sgk1 for new diagnostic and therapeutic applications can be used do.

Überraschenderweise konnte gezeigt werden, daß die Überexpression von intakter sgk1 im Vergleich zur Expression von inaktiver sgk1 zu einer gesteigerten koagulatorischen Aktivität führt. Die Koagulation wurde in diesem experimentellen System durch den sogenannten Tissue Factor (TF) ausgelöst. Der TF ist ein 47 kDa-Transmembranglycoprotein, das als primäres Bindeglied zwischen vaskulären Zellen oder mononuklearen Zellen und dem hemostatischen System dient. Dabei initiiert TF die Blutkoagulationskaskade (Davie EW, Fujikawa K, Kisiel W. Biochemistry 30: 10363-10370, 1991). TF initiiert die Blutkoagulation durch Bindung an die Faktoren VII/VIIa mit hoher Affinität. Der daraus resultierende Komplex initiiert die Aktivierung der Faktoren IX und X mit der daran anschließenden Thrombingenerierung. Thrombin seinerseits katalysiert die Umwandlung von Fibrinogen zu Fibrin, was zur Fibrineinlagerung und Blutgerinnung führt (Nemerson Y. Blood 71: 1-8, 1998). Surprisingly, it was shown that overexpression of intact sgk1 compared to the expression of inactive sgk1 leads to increased coagulatory activity. The coagulation was in this experimental system through the so-called tissue Factor (TF) triggered. The TF is a 47 kDa transmembrane glycoprotein, that as the primary link between vascular cells or serves mononuclear cells and the hemostatic system. Thereby TF initiates the blood coagulation cascade (Davie EW, Fujikawa K, Kisiel W. Biochemistry 30: 10363-10370, 1991). TF initiates blood coagulation Binding to factors VII / VIIa with high affinity. The one out of it resulting complex initiates the activation of factors IX and X with the subsequent thrombin generation. Thrombin in turn catalyzes the conversion of fibrinogen to fibrin, resulting in Fibrin storage and blood clotting leads (Nemerson Y. Blood 71: 1-8, 1998).

Eine erhöhte Expression von TF ist nicht notwendigerweise mit einer erhöhten biologischen Aktivität von TF assoziiert. Funktionell aktives TF hängt von der Expression einer biologisch aktiven Form an der Zelloberfläche ab. In glatten Gefäßmuskelzellen (smooth muscle cells SMC) und Monozyten sind nur 10-20% des totalen zellulären TF an der Zelloberfläche verfügbar, was auch die biologisch aktive Form darstellt, während das restliche TF in intrazellulären Pools (ungefähr 30%) und als latentes Oberflächen-TF (50-60%) vorliegt (Preissner KT, Nawroth PP, Kanse SM. J. Pathol. 190: 360-372, 2000; Schecter AD, Giesen PL, Taby O, Rosenfield CL, Rossikhina M, Fyfe BS, Kohtz DS, Fallon JT, Nemerson Y, Taubmann MB. J. Clin. Invest: 100: 2276-2285, 1997). Es konnte gezeigt werden, daß TF zusätzlich zu seiner koagulatorischen Wirkung (Ruef J, Hu ZY, Yin LY, Wu Y, Hanson SR, Kelly AB, Harker LA, Rao GN, Runge MS, Patterson C. Circ: Res.: 24-33, 1997) eine wichtige Rolle bei Metastasierung von Tumoren und bei der Angiogenese spielt (Lwaleed BA und Cooper AJ. Medical Hypotheses. 55: 470-473, 2000; Verheul HMW, Jorna AS, Hoekman K, Broxterman HJ, Gebbink MFBG, Pinedo HM. Blood: 4216-4221, 2000). Dadurch zeigen die gefundenen funktionellen Daten, daß die Wirkungen der sgk1 geeignet sind, die Expression und/oder Funktion von TF an der Zellmembran zu beeinflussen und damit mittelbar die Gerinnbarkeit des Blutes, die Anheftung von Tumorzellen mit folgender Metastasierung, die Angiogenese, sowie Erkrankungen, bei welchen Angiogenese eine Rolle spielt, zu beeinflussen. Durch Stimulierung der sgk1 kommt es zu einer gesteigerten Expression des Tissue Factors, durch Inhibierung der sgk1 zu einer verminderten Expression von aktivem Tissue Factor, und damit kann mittelbar stimulierend bzw. inhibierend auf die oben beschriebenen Indikationen eingewirkt werden. An increased expression of TF is not necessarily associated with one increased biological activity associated with TF. Functionally active TF depends on the expression of a biologically active form on the Cell surface. In smooth muscle cells (SMC) and Monocytes are only 10-20% of the total cellular TF at the Cell surface available, which is also the biologically active form, while the remaining TF in intracellular pools (approximately 30%) and as latent Surface TF (50-60%) is available (Preissner KT, Nawroth PP, Kanse SM. J. Pathol. 190: 360-372, 2000; Schecter AD, Giesen PL, Taby O, Rosenfield CL, Rossikhina M, Fyfe BS, Kohtz DS, Fallon JT, Nemerson Y, Taubmann MB. J. Clin. Invest: 100: 2276-2285, 1997). It could are shown to be TF in addition to its coagulant effect (Ruef J, Hu ZY, Yin LY, Wu Y, Hanson SR, Kelly AB, Harker LA, Rao GN, Runge MS, Patterson C. Circ: Res .: 24-33, 1997) an important one Role in tumor metastasis and angiogenesis (Lwaleed BA and Cooper AJ. Medical Hypotheses. 55: 470-473, 2000; Verheul HMW, Jorna AS, Hoekman K, Broxterman HJ, Gebbink MFBG, Pinedo HM. Blood: 4216-4221, 2000). This will show the found functional data that the effects of sgk1 are appropriate, the To influence expression and / or function of TF on the cell membrane and thus indirectly the coagulability of the blood, the attachment of Tumor cells with the following metastasis, angiogenesis, as well Diseases in which angiogenesis plays a role influence. By stimulating the sgk1 there is an increased Expression of the tissue factor, by inhibition of sgk1 to a decreased expression of active tissue factor, and thus can indirectly stimulating or inhibiting those described above Indications are taken into account.

Demzufolge wird die erfindungsgemäße Aufgabe durch den Gegenstand der unabhängigen Ansprüche 1, 2, 3, 17 und 20 gelöst. Bevorzugte Ausführungen sind in den abhängigen Ansprüchen 4 bis 16, 18, 19, sowie 21 bis 26 genannt. Der Inhalt aller dieser Ansprüche wird hiermit durch Bezugnahme zum Inhalt der Beschreibung gemacht. Accordingly, the object of the invention is through the subject of independent claims 1, 2, 3, 17 and 20 solved. preferred Designs are in the dependent claims 4 to 16, 18, 19, and Called 21 to 26. The content of all these claims is hereby acknowledged Reference made to the content of the description.

Erfindungsgemäß kann mindestens eine Substanz zum Nachweis der Expression und/oder der Funktion von sgk1 in eukaryotischen Zellen verwendet werden. Damit ist insbesondere auch eine Diagnose von Erkrankungen, die mit einer gestörten Aktivität von TF im Zusammenhang stehen, möglich. Bei dieser Substanz könnte es sich z. B. um einen Antikörper handeln, der gegen sgk1 gerichtet ist, und in einem dem Fachmann bekannten Nachweisverfahren, wie z. B. ELISA (enzyme-linked- immuno sorbent assay) eingesetzt werden kann. Bei solchen Immunoassays wird der gegen das zu bestimmende Antigen (sgk1) gerichtete spezifische Antikörper (bzw. bei Antikörperbestimmungen homologe Testantigene) an eine Trägersubstanz (z. B. Zellulose, Polystyrol) gebunden, an der sich nach der Inkubation mit der Probe Immunkomplexe bilden. In einem nachfolgenden Schritt wird diesen Immunkomplexen ein markierter Antikörper zugeführt. Durch Zugabe eines chromogenen Substrates zum Reaktionsansatz können die Immunokomplex-gebundenen Enzym-Substratkomplexe sichtbar gemacht bzw. die Antigenkonzentration in der Probe über eine photometrische Bestimmung der Immunkomplex-gebundenen Markerenzyme durch Vergleich mit Standards bekannter Enzymaktivität ermittelt werden. Weitere Substanzen, die für den diagnostischen Nachweis verwendet werden können, sind sogenannte Oligonukleotide, die mit Hilfe der sogenannten Polymerase- Kettenreaktion (PCR) geeignet sind, über ein molekulargenetisches Verfahren, bei dem selektiv bestimmte DNA-Abschnitte amplifiziert werden, einen quantitativen Nachweis von sgk1 zu erbringen. Weitere Verfahren, wie ein bekanntes Zielprotein quantitativ nachgewiesen werden kann, sind dem Fachmann geläufig. According to the invention, at least one substance for the detection of Expression and / or the function of sgk1 in eukaryotic cells be used. This is also a diagnosis of Diseases related to impaired TF activity stand, possible. This substance could e.g. B. one Act antibodies directed against sgk1 and in one Detection methods known to those skilled in the art, such as, for. B. ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) can be used. In such Immunoassays are directed against the antigen to be determined (sgk1) specific antibodies (or homologous for antibody determinations Test antigens) to a carrier substance (e.g. cellulose, polystyrene) bound to the immune complexes after incubation with the sample form. In a subsequent step, these immune complexes become one labeled antibody supplied. By adding a chromogenic Substrates for the reaction batch can be bound to the immunocomplex Enzyme-substrate complexes made visible Antigen concentration in the sample via a photometric determination of the Immune complex-bound marker enzymes by comparison with standards known enzyme activity can be determined. Other substances for the diagnostic evidence can be used so-called oligonucleotides, which with the help of the so-called polymerase Chain reaction (PCR) are suitable via a molecular genetic Method in which certain sections of DNA are selectively amplified to provide quantitative evidence of sgk1. Further Methods of quantitatively detecting a known target protein can are familiar to the person skilled in the art.

Erfindungsgemäß wird ein Wirkstoff für die Beeinflussung, insbesondere die Inhibierung oder Aktivierung der Expression und/oder Funktion von sgk1 in eukaryotischen Zellen, zur Behandlung von Erkrankungen, die mit einer gestörten Aktivität von TF im Zusammenhang stehen, beansprucht. Da sgk1, wie auch sgk2 und sgk3, eine Kinase ist, kommen insbesondere dem Fachmann bekannte Kinase-Inhibitoren, wie z. B. Staurosporin, Chelerythrin etc., aber auch andere Substanzen wie z. B. transdominant negative Kinase Mutanten, in Frage. Dem Fachmann sind solche Substanzen bekannt, und man kann sie aus kommerziellen (Sigma, Calbiochem, etc.) sowie nicht kommerziellen Quellen beziehen. Als Aktivatoren können z. B. gentechnisch veränderte Mutanten von sgk1, aber auch z. B. Inhibitoren von Phosphatasen, genutzt werden. Auch Phosphatase-Inhibitoren sind dem Fachmann bekannt, und sie sind ebenfalls zum Teil kommerziell (Sigma, Calbiochem, etc.) sowie nicht kommerziell erhältlich. Bei Einsatz von Phosphatasen-Inhibitoren würde die Dephosphorylierung inhibiert, und dadurch das von sgk1 aktivierte Target (TF) im aktivierten Zustand verbleiben. Bevorzugt werden diese Wirkstoffe zur Herstellung eines Medikamentes oder einer pharmazeutischen Zusammensetzung genutzt. According to the invention, an active ingredient for influencing, in particular the inhibition or activation of the expression and / or function of sgk1 in eukaryotic cells, for the treatment of diseases that associated with impaired TF activity, claimed. Since sgk1, like sgk2 and sgk3, is a kinase, come in particular kinase inhibitors known to the person skilled in the art, such as, for. B. Staurosporine, chelerythrine etc., but also other substances such as B. transdominant negative kinase mutants, in question. The specialist are such substances are known and you can get them from commercial (Sigma, Calbiochem, etc.) as well as non-commercial sources. As activators z. B. genetically modified mutants of sgk1, but also z. B. inhibitors of phosphatases can be used. Phosphatase inhibitors are also known to the person skilled in the art, and they are also partly commercial (Sigma, Calbiochem, etc.) as well not commercially available. When using phosphatase inhibitors would inhibit dephosphorylation, and thereby that of sgk1 activated target (TF) remain in the activated state. To be favoured these active ingredients for the manufacture of a medicament or a pharmaceutical composition used.

In einer weiteren bevorzugten Ausführungsform der Erfindung ist der Wirkstoff gegen sgk1 selbst gerichtet. Es kann sich bei den Wirkstoffen z. B. um Antisensesequenzen, sogenannte kinase deficient mutants, aber auch um Kinaseinhibitoren, wie die weiter oben schon erwähnten Staurosporin und/oder Chelerythrin bzw. deren Analoga, handeln. Weiterhin kann der Wirkstoff auch ein sogenanntes "small molecular compound" bzw. ein Polynukleotid sein, welches für ein Peptid kodiert, das die Expression von sgk1 beeinflußt, vorzugsweise inhibiert oder aktiviert. In a further preferred embodiment of the invention, the Active ingredient directed against sgk1 itself. It can be the active ingredients z. B. antisense sequences, so-called kinase deficient mutants, but also about kinase inhibitors, such as those mentioned above Staurosporine and / or chelerythrine or their analogs act. Furthermore, the active ingredient can also be a so-called "small molecular compound "or a polynucleotide which codes for a peptide which the expression of sgk1 is influenced, preferably inhibited or activated.

In einer anderen bevorzugten Ausführungsform der Erfindung ist der Wirkstoff gegen Aktivatoren, Inhibitoren, Regulatoren und/oder biologische Vorläufer von sgk1 gerichtet. Diese Aktivatoren, Inhibitoren, Regulatoren und/oder biologische Vorläufer könnten up- und/oder downstream liegende Mitglieder der sgk1-Signaltransduktionskaskade, Transkriptionsfaktoren, die für den Expressionslevel von sgk1 verantwortlich sind, Proteasen, die für den proteolytischen Abbau von Aktivatoren, Inhibitoren, Regulatoren und/oder biologische Vorläufer von sgk1, aber auch bis jetzt unbekannte Moleküle, sein, die durch den Wirkstoff beeinflußt werden und an der Expression und/oder Funktion von sgk1 beteiligt sind. In another preferred embodiment of the invention, the Active ingredient against activators, inhibitors, regulators and / or biological precursors directed by sgk1. These activators, inhibitors, Regulators and / or biological precursors could be up and / or downstream members of the sgk1 signal transduction cascade, Transcription factors relevant for the expression level of sgk1 are responsible for proteases that are responsible for the proteolytic degradation of Activators, inhibitors, regulators and / or biological precursors of sgk1, but also so far unknown molecules, caused by the active ingredient be influenced and on the expression and / or function of sgk1 involved.

Erfindungsgemäß ist es möglich, bekannte sowie noch unbekannte Wirkstoffe zu verwenden. In einer besonders bevorzugten Ausführungsform ist der Wirkstoff, welcher gegen Aktivatoren, Inhibitoren, Regulatoren und/oder biologischer Vorläufer von sgk1 gerichtet ist, ein sogenanntes "small molecular compound", insbesondere ein solches mit einem Molekulargewicht (MG) < 1.000. Small molecular compounds können z. B. Kinase-Inhibitoren, wie z. B. die Imidazol-Derivate SB 203580 (MG 377,4, oder auch SB 202190 (MG 331,3) sein, die beide bekannten Inhibitoren der Kinase-Expression sind und von Calbiochem kommerziell vertrieben werden. According to the invention, it is possible to use known and still unknown To use active ingredients. In a particularly preferred The embodiment is the active ingredient which is active against activators, inhibitors, Regulators and / or biological precursors of sgk1 is directed So-called "small molecular compound", especially one with a Molecular weight (MW) <1,000. Small molecular compounds can e.g. B. Kinase inhibitors, such as B. the imidazole derivatives SB 203580 (MG 377.4, or also SB 202190 (MG 331.3), both of which are known Kinase expression inhibitors are commercially available from Calbiochem to be expelled.

Die Erfindung kann genutzt werden, um alle Formen von Erkrankungen, die mit einer gestörten Aktivität von TF im Zusammenhang stehen, zu behandeln. Insbesondere ist hierbei an Koagulopathien und/oder Angiopathien des angeborenen oder erworbenen Typs zu denken. Unter Koagulopathien werden allgemein Gerinnungsstörungen verstanden. Angeborene Koagulopathien (sogenannte Defektkoagulopathien) sind z. B. Dysfibrinogenämie, Hypoprokonvertinämie, Hämophilie B, Stuart- Prower-defect etc.. Erworbene Gerinnungsstörungen sind z. B. Prothrombin-Komplexmangel, Verbrauchs-Koagulopathie, Hyperfibrinolyse, Immunkoagulopathie sowie komplexe Koagulopathien. Beide Formen der Koagulopathien werden verursacht durch Mangel an oder Funktionsstörung von verschieden plasmatischen Gerinnungsfaktoren. Entsprechend der unterschiedlichen Symptomatik werden Koagulopathien mit Blutungstendenz (Minuskoagulopathien) und Koagulopathien mit Thrombosetendenz (Plusagulopathien) sowie entsprechend dem Ort der Ursache hepatogene, kardiogene und Immunkoagulopathien unterschieden. Somit läßt sich durch Aktivierung bzw. Inhibierung von sgk1 die Gerinnungsbereitschaft des Blutes herabsetzen bzw. steigern, und somit der medizinischen Indikation anpassen. Ähnliche Überlegungen gelten auch für Angiopathien, d. h. Erkrankungen, die unter den Oberbegriff für Gefäßkrankheiten zusammengefaßt werden, wie z. B. diabetische Angiopathie, diabetische Mikroangiopathie etc. Auch hierbei kann der Wirkstoff insbesondere dazu verwendet werden, angeborene und/oder erworbene Angiopathien zu behandeln. The invention can be used to treat all forms of diseases, associated with impaired TF activity to treat. In particular, here is coagulopathy and / or To think of congenital or acquired angiopathies. Under Coagulopathies are generally understood to be coagulation disorders. Congenital coagulopathies (so-called defect coagulopathies) are e.g. B. Dysfibrinogenemia, hypoproconvertinemia, hemophilia B, Stuart Prower defect etc. Acquired coagulation disorders are e.g. B. Prothrombin complex deficiency, consumption coagulopathy, hyperfibrinolysis, Immune coagulopathy and complex coagulopathies. Both forms of coagulopathies are caused by lack of or Dysfunction of various plasma coagulation factors. According to the different symptoms, coagulopathies become with bleeding tendency (minus coagulopathies) and coagulopathies with Tendency to thrombosis (plus agulopathies) and according to the location of the Cause hepatogenic, cardiogenic and immunocoagulopathies distinguished. Thus, by activating or inhibiting sgk1 reduce or increase the willingness of the blood to clot, and thus adapt to the medical indication. Similar considerations also apply to angiopathies, d. H. Diseases that are among the General term for vascular diseases can be summarized, such as. B. diabetic angiopathy, diabetic microangiopathy etc. the active ingredient in particular can be used congenital and / or treat acquired angiopathies.

Bei einer weiteren bevorzugten Ausführungsform wird der Wirkstoff zur Stimulierung oder Inhibierung der Angiogenese verwendet. Unter Angiogenese wird die Entwicklung von Gefäßwänden, z. B. während der Embryonalentwicklung verstanden, und eine Reihe von angiogeneseabhängigen Erkrankungen sind dem Fachmann bekannt, so z. B. Diabetes Tumorbildung und Autoimmunerkrankungen. In einer weiteren bevorzugten Ausführungsform wird der Wirkstoff zur Stimulierung oder Inhibierung der Wundheilung eingesetzt. In a further preferred embodiment, the active ingredient becomes Stimulation or inhibition of angiogenesis used. Under Angiogenesis is the development of vessel walls, e.g. B. during the Embryonic development understood, and a number of Angiogenesis-dependent diseases are known to the person skilled in the art. B. Diabetes Tumor formation and autoimmune diseases. In another preferred embodiment is the active ingredient for stimulation or Inhibition of wound healing used.

Die Erfindung betrifft auch ein Diagnosekit. Dieser umfaßt mindestens eine Substanz, die zum Nachweis von Expression und/oder Funktion von sgk1 geeignet ist, zur Diagnose von Erkrankungen, die mit einer gestörten Aktivität von TF im Zusammenhang stehen. Weiterhin können mit einem solchen Kit Erkrankungen diagnostiziert werden, die mit einer Über- oder Unterexpression bzw. -funktion von sgk1 verbunden sind. Gezielt können solche Diagnostika in einem Diagnosekit eingesetzt werden, um unter anderem Erkrankungen, wie die weiter oben beschriebenen Koagulopathien, Angiopathien, angiogeneseabhängige Erkrankungen, Erkrankungen der Wundheilungen etc., nachzuweisen. Auch hierbei kann der Nachweis der Erkrankungen über den Nachweis einer gestörten Expression und/oder Funktion von sgk1 erfolgen. Insbesondere kann es sich bei dieser Substanz um eine solche handeln, die auf Nukleotid und/oder Peptid-Ebene bzw. Polynukleotid und/Polypeptid diesen Nachweis erbringt. Zu den weiteren Merkmalen einer solchen Substanz wird auf den entsprechenden bisherigen Text der Beschreibung Bezug genommen. The invention also relates to a diagnostic kit. This includes at least a substance used to demonstrate expression and / or function of sgk1 is suitable for the diagnosis of diseases with a related activity of TF related. Can continue with such a kit, diseases can be diagnosed with a Over or under expression or function of sgk1 are connected. Such diagnostics can be used in a targeted manner in a diagnostic kit to treat diseases such as the ones above described coagulopathies, angiopathies, angiogenesis-dependent Diseases, diseases of wound healing, etc. to be proven. Also Here, the detection of the diseases can be demonstrated by the detection of a impaired expression and / or function of sgk1. In particular this substance can be one that is based on Nucleotide and / or peptide level or polynucleotide and / polypeptide this Provides proof. The other characteristics of such a substance will refer to the corresponding previous text of the description taken.

Die Erfindung umfaßt ferner eine pharmazeutische Zusammensetzung, die mindestens einen Wirkstoff enthält, der die Expression und/oder Funktion von sgk1 beeinflußt, insbesondere inhibiert oder aktiviert, und vorzugsweise ggf. einen pharmazeutischen Träger. Dabei kann es sich bei dem Wirkstoff um einen Kinase-Inhibitor, wie die bereits weiter oben erwähnten Inhibitoren Staurosporin, Chelerythrin, SB 203580 und SB 202190 bzw. deren Analoga, aber auch andere Substanzen, handeln. Ferner kann es sich bei dem Wirkstoff um ein Polynukleotid handeln, welches ein Peptid, vorzugsweise ein Polypeptid kodiert, wobei dieses Peptid die Expression von sgk1 beeinflußt, vorzugsweise inhibiert oder aktiviert. Ein Beispiel für ein erfindungsgemäßes Polypeptid ist ein sogenannter kinase deficient mutant. Weitere Beispiele, wie die Expression und/oder Funktion über gentechnisch veränderte Varianten des Target-Proteins beeinflußt werden kann, sind dem Fachmann geläufig, und können in einer Reihe von Lehr-/Fachbüchern sowie Anleitungen für die Laborarbeit (z. B. Maniatis T, Fritsch EF, Sambrook J. Cold Spring Harbor, NY: Cold Spring Harbor Laborator, 1996; Leonard G, Davis PhD, Michael W, Kuehl Md, James F, Battey MD. McGraw-Hill Professional Publishing, 1995) nachgelesen werden. Bei dem erfindungsgemäßen Wirkstoff kann es sich ferner um einen sogenannten "small molecular compound" handeln, vorzugsweise um ein "small molecular compound" mit einem Molekulargewicht (MG) < 1.000. Ferner kann es sich bei dem Wirkstoff auch um eine sogenannte Antisensesequenz handeln, d. h. eine Sequenz, die in der Lage ist, mit der mRNA eine Doppelstrangduplex auszubilden, und dadurch die Translation eines Zielpolypeptids zu verhindern. Auch kann die Sequenz von sgk1 selbst genutzt werden, um eine Überexpression zu erzielen, z. B. durch Einbau in Vektoren oder Plasmiden, wobei vorher die Zielsequenz auch noch durch "Carrier"- Moleküle, z. B. Promotoren, modifiziert werden kann. Zu weiteren Merkmalen einer solchen Zusammensetzung wird auf den entsprechenden bisherige Text der Beschreibung Bezug genommen. The invention further comprises a pharmaceutical composition, which contains at least one active ingredient which expression and / or Function of sgk1 influenced, in particular inhibited or activated, and preferably a pharmaceutical carrier if necessary. It can be the active ingredient is a kinase inhibitor, like the one already mentioned above mentioned inhibitors staurosporine, chelerythrine, SB 203580 and SB 202190 or their analogues, but also other substances. Furthermore, the active substance can be a polynucleotide which encodes a peptide, preferably a polypeptide, this Peptide influences the expression of sgk1, preferably inhibits or activated. An example of a polypeptide according to the invention is a so-called kinase deficient mutant. More examples like that Expression and / or function via genetically modified variants of the Target protein can be influenced are known to the person skilled in the art, and can be found in a number of textbooks / specialist books as well as instructions for the Laboratory work (e.g. Maniatis T, Fritsch EF, Sambrook J. Cold Spring Harbor, NY: Cold Spring Harbor Laborator, 1996; Leonard G, Davis PhD, Michael W, Kuehl Md, James F, Battey MD. McGraw-Hill Professional Publishing, 1995). In the invention Active ingredient can also be a so-called "small molecular compound ", preferably a" small molecular compound " with a molecular weight (MW) <1,000. Furthermore, it can Active ingredient is also a so-called antisense sequence, d. H. a sequence that is able to bind to the mRNA Form double strand duplex, and thereby the translation of a target polypeptide prevent. The sequence of sgk1 itself can also be used to to achieve overexpression, e.g. B. by incorporation in vectors or Plasmids, the target sequence also previously being carried out by "carrier" Molecules, e.g. B. promoters can be modified. To further Characteristics of such a composition is based on the corresponding previous text of the description referred.

Schließlich umfaßt die Erfindung eine pharmazeutische Zusammensetzung, die eine wirksame Menge mindestens eines Wirkstoffes aufweist, der die Expression und/oder Funktion von Aktivatoren, Inhibitoren, Regulatoren und/oder biologischen Vorläufern von sgk1 beeinflußt, insbesondere inhibiert oder aktiviert. Vorzugsweise kann diese pharmazeutische Zusammensetzung ggf. auch einen pharmazeutischen Träger enthalten. Diese Aktivatoren, Inhibitoren, Regulatoren und/oder biologische Vorläufer von sgk1 können z. B. weitere Kinasen sein, die an der Regulation der Aktivität von sgk1 beteiligt sind, Transkriptionfaktoren, die eine Rolle spielen für den Expressionslevel von sgk1, sowie weitere bekannte oder bis jetzt unbekannte Mitglieder der sgk1 in einer Transduktionskaskade, sowie die weiter oben schon beschriebenen Moleküle. Auch Polynukleotide, die ein Peptid kodieren, welches die Expression von Aktivatoren, Inhibitoren, Regulatoren und/oder biologischen Vorläufern von sgk1 beeinflußt, vorzugsweise inhibiert oder aktiviert, können in einer solchen Zusammensetzung enthalten sein. Auch sogenannte "small molecular compounds", die vorzugsweise ein Molekulargewicht (MG) < 1.000 haben, und die gegen Aktivatoren, Inhibitoren, Regulatoren und/oder biologischen Vorläufern von sgk1 gerichtet sind, und dabei die Expression bzw. die Funktion dieser Kinase inhibieren oder aktivieren, sind einsetzbar. Zu weiteren Merkmalen eines solchen Wirkstoffes wird auf den entsprechenden bisherigen Text der Beschreibung Bezug genommen. Finally, the invention includes a pharmaceutical Composition which has an effective amount of at least one active ingredient, the expression and / or function of activators, inhibitors, Regulators and / or biological precursors influenced by sgk1, in particular inhibited or activated. Preferably, this can pharmaceutical composition, possibly also a pharmaceutical composition Carrier included. These activators, inhibitors, regulators and / or biological precursors of sgk1 can e.g. B. be further kinases that are involved in regulating the activity of sgk1, Transcription factors that play a role in the expression level by sgk1, as well as other known or as yet unknown members the sgk1 in a transduction cascade, as well as the one above described molecules. Polynucleotides that encode a peptide, which is the expression of activators, inhibitors, regulators and / or biological precursors influenced by sgk1, preferably inhibited or activated in such a composition be included. Also so-called "small molecular compounds", the preferably have a molecular weight (MW) <1,000, and the against Activators, inhibitors, regulators and / or biological precursors are directed by sgk1, and thereby the expression or the function inhibit or activate this kinase can be used. To further Characteristics of such an active ingredient is based on the corresponding previous text of the description reference taken.

Die bestehenden Merkmale und weitere Merkmale der Erfindung ergeben sich aus der nachfolgenden Beschreibung von bevorzugten Ausführungsformen in Verbindung mit den Unteransprüchen und den Figuren. Hierbei können die einzelnen Merkmale jeweils für sich oder zu mehreren in Kombination miteinander verwirklicht sein. The existing features and other features of the invention emerge from the following description of preferred Embodiments in connection with the subclaims and the figures. The individual features can be used individually or separately several can be realized in combination with each other.

In den Abbildungen zeigen: The pictures show:

Fig. 1 Stimulation der prokoagulatorischen Aktivität glatter Gefäßmuskelzellen. Fig. 1 stimulation of the procoagulatory activity of smooth vascular muscle cells.

Experimentexperiment

Aufgetragen ist die prokoagulatorische Aktivität in % des Maximalwertes gegen die Zeit nach Rekalzifizierung. Bei dem Experiment zu Fig. 1 wurde die prokoagulatorische Aktivität humaner glatter Gefäßmuskelzellen (HAOSMC) durch die Messung der Thrombinbildung während des Gerinnungsvorganges in rekalzifiziertem Blutplättchen-armen Plasma (PPP) gemessen (Beguin S. Lidhout T, Hemker HC: Throm. Haemost. 61: 25-29, 1998). Dazu wurden konfluente glatte Gefäßmuskelzellen für 24 Stunden in serum-freiem Medium gehalten, dann dreimal in HEPES- Tyrode-Lösung gewaschen, und dann mit humanem PPP inkubiert. Die Bildung von Thrombin wurde durch Zugabe von 16,7 mM CaCl2 zum Inkubationsmedium ausgelöst. Jeweils 20 µl des Überstandes wurden alle ein bis zwei Minuten entnommen und darin die Thrombin-Bildung mit Hilfe des Farbstoffes S-2238 (Haemochrom Diagnostica) bestimmt. Die optische Dichte wurde in ein Spektrophotometer (Uvikon, Controninstruments) bei 405 nm bestimmt. Die Abhängigkeit der oberflächenprokoagulatorischen Aktivität von glatten Muskelzellen von der Verfügbarkeit des membran-gebundenen Tissue Factors wurde durch neutralisierende Antikörper gegen den humanen Tissue Factor nachgewiesen (Mab# 4508; American Diagnostica; 10 µg/ml 20 Minuten vor der Rekalzifizierung des PPP). The procoagulatory activity is plotted in% of the maximum value against the time after recalcification. In the experiment of FIG. 1, the procoagulatory activity of human smooth vascular muscle cells (HAOSMC) was measured by measuring the thrombin formation during the coagulation process in recalcified low-platelet plasma (PPP) (Beguin S. Lidhout T, Hemker HC: Throm. Haemost. 61 : 25-29, 1998). For this purpose, confluent smooth vascular muscle cells were kept in serum-free medium for 24 hours, then washed three times in HEPES-Tyrode solution, and then incubated with human PPP. The formation of thrombin was triggered by adding 16.7 mM CaCl 2 to the incubation medium. In each case 20 μl of the supernatant were removed every one to two minutes and the thrombin formation was determined therein with the aid of the dye S-2238 (Haemochrom Diagnostica). The optical density was determined in a spectrophotometer (Uvikon, Controninstruments) at 405 nm. The dependence of the surface procoagulatory activity of smooth muscle cells on the availability of the membrane-bound tissue factor was demonstrated by neutralizing antibodies against the human tissue factor (Mab # 4508; American Diagnostica; 10 µg / ml 20 minutes before the recalcification of the PPP).

Wie Fig. 1 zeigt, nimmt die prokoagulatorische Aktivität von humanen glatten Gefäßmuskelzellen wenige Minuten nach Zugabe von CaCl2 zu. Diese Zunahme ist bei Expression der inaktiven Kinase (sgk-MT) langsamer als bei der Expression der normalen Kinase (sgk-WT). Die zusätzliche Verabreichung von Thrombin (Thr) führt erwartungsgemäß zu einer Beschleunigung der Zunahme der prokoagulatorischen Aktivität. Auch dabei ist die Wirkung stärker und schneller in Zellen, welche die intakte Kinase exprimieren, als in Zellen, welche eine inaktive Mutante exprimieren. Zellen, welche intakte (Wildtyp) sgk Kinase exprimieren (sgk-WT) weisen zu jedem Zeitpunkt eine höhere prokoagulatorische Aktivität auf als Zellen, welche eine inaktive sgk Mutante exprimieren (sgk-MT), unabhängig davon, ob Thrombin dazugegeben (sgk-WT/Thr bzw. Sgk-MTIThr) wurde oder nicht. As shown in FIG. 1, the procoagulatory activity of human smooth vascular muscle cells increases a few minutes after the addition of CaCl 2 . This increase is slower when the inactive kinase (sgk-MT) is expressed than when the normal kinase (sgk-WT) is expressed. The additional administration of thrombin (Thr) is expected to accelerate the increase in procoagulant activity. Here, too, the effect is stronger and faster in cells which express the intact kinase than in cells which express an inactive mutant. Cells which express intact (wild-type) sgk kinase (sgk-WT) have a higher procoagulatory activity at all times than cells which express an inactive sgk mutant (sgk-MT), regardless of whether thrombin is added (sgk-WT / Thr or Sgk-MTIThr) was or not.

Dieses Ergebnis zeigt eindeutig, daß eine Überexpression von intakter sgk1 in glatten Gefäßmuskelzellen zu einer gesteigerten koagulatorischen Aktivität führt. Durch die bekannt wichtige Rolle des TF bei verschiedenen Zellvorgängen zeigt dieses Ergebnis auch, daß eine Überaktivität der sgk1 bei einer gesteigerten Expression des Tissue Factors an der Zellmembran die Gerinnbarkeit des Blutes fördern, die Anheftung von Tumorzellen mit folgender Metastasierung ermöglichen sowie die Angiogenese steigern kann. Umgekehrt würde dieser Mechanismus durch Unterdrückung der sgk1-Expression bzw. durch pharmakologische Hemmung der skgl unterdrückt werden. This result clearly shows that overexpression of intact sgk1 in smooth vascular muscle cells to an increased leads to coagulatory activity. Due to the well-known important role of the TF in various cell processes, this result also shows that a Overactivity of sgk1 with an increased expression of the tissue factor promote the coagulability of the blood on the cell membrane, the attachment of tumor cells with the following metastasis as well as the Can increase angiogenesis. This mechanism would be reversed by suppressing sgk1 expression or by pharmacological inhibition of skgl can be suppressed.

Claims (26)

1. Verwendung mindestens einer Substanz zum Nachweis der Expression und/oder Funktion von sgk1 in eukaryotischen Zellen, zur Diagnose von Erkrankungen, die mit einer gestörten Aktivität von TF (Tissue Factor) im Zusammenhang stehen. 1. Use at least one substance for the detection of Expression and / or function of sgk1 in eukaryotic cells Diagnosis of diseases with an impaired activity of TF (Tissue Factor) related. 2. Verwendung mindestens eines Wirkstoffes zur Beeinflussung, insbesondere zur Inhibierung oder Aktivierung der Expression und/oder Funktion von sgk1 in eukaryotischen Zellen, zur Behandlung von Erkrankungen, die mit einer gestörten Aktivität von TF im Zusammenhang stehen. 2. Use of at least one active ingredient for influencing, in particular for inhibiting or activating expression and / or function of sgk1 in eukaryotic cells, for Treatment of disorders associated with impaired TF activity Related. 3. Verwendung mindestens eines Wirkstoffes zur Beeinflussung, insbesondere zur Inhibierung oder Aktivierung der Expression und/oder Funktion von sgk1 in eukaryotischen Zellen, zur Herstellung eines Medikamentes oder einer pharmazeutischen Zusammensetzung zur Behandlung von Erkrankungen, die mit einer gestörten Aktivität von TF im Zusammenhang stehen. 3. Use of at least one active ingredient for influencing, in particular for inhibiting or activating expression and / or function of sgk1 in eukaryotic cells, for Manufacture of a drug or pharmaceutical Composition for the treatment of diseases with a related activity of TF related. 4. Verwendung nach Anspruch 2 oder 3, dadurch gekennzeichnet, daß der Wirkstoff gegen sgk1 gerichtet ist. 4. Use according to claim 2 or 3, characterized in that the active ingredient is directed against SGK1. 5. Verwendung nach einem der Ansprüche 2 bis 4, dadurch gekennzeichnet, daß der Wirkstoff gegen Aktivatoren, Inhibitoren, Regulatoren und/oder biologische Vorläufer von sgk1 gerichtet ist. 5. Use according to one of claims 2 to 4, characterized characterized in that the active ingredient against activators, inhibitors, Regulators and / or biological precursors of sgk1 is directed. 6. Verwendung nach einem der Ansprüche 2 bis 5, dadurch gekennzeichnet, daß der Wirkstoff ein Kinase-Inhibitor, vorzugsweise Staurosporin und/oder Chelerythrin bzw. eines von deren Analoga, ist. 6. Use according to any one of claims 2 to 5, characterized characterized in that the active ingredient is a kinase inhibitor, preferably Staurosporine and / or chelerythrine or one of their analogues, is. 7. Verwendung nach einem der Ansprüche 2 bis 6, dadurch gekennzeichnet, daß der Wirkstoff ein Polynukleotid ist, welches ein Peptid, vorzugsweise ein Polypeptid, kodiert, wobei dieses Peptid die Expression und/oder Funktion von sgk1 beeinflußt, vorzugsweise inhibiert oder aktiviert. 7. Use according to one of claims 2 to 6, characterized characterized in that the active ingredient is a polynucleotide, which is a Peptide, preferably a polypeptide, which peptide encodes the Expression and / or function of sgk1 influenced, preferably inhibited or activated. 8. Verwendung nach einem der Ansprüche 2 bis 7, dadurch gekennzeichnet, daß der Wirkstoff ein "small molecular compound", vorzugsweise ein "small molecular compound" mit einem Molekulargewicht (MG) < 1.000, ist. 8. Use according to one of claims 2 to 7, characterized characterized in that the active ingredient is a "small molecular compound", preferably a "small molecular compound" with a Molecular weight (MW) <1,000. 9. Verwendung nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß es sich bei den Erkrankungen, die insbesondere mit einer gestörten Aktivität von TF im Zusammenhang stehen, um Koagulopathien handelt. 9. Use according to one of the preceding claims, characterized in that the diseases that especially associated with impaired TF activity stand for coagulopathies. 10. Verwendung nach Anspruch 9, dadurch gekennzeichnet, daß es sich bei den Koagulopathien um angeborene Koagulopathien handelt. 10. Use according to claim 9, characterized in that it coagulopathies are congenital coagulopathies is. 11. Verwendung nach Anspruch 9, dadurch gekennzeichnet, daß es sich bei den Koagulopathien um erworbene Koagulopathien handelt. 11. Use according to claim 9, characterized in that it coagulopathies are acquired coagulopathies is. 12. Verwendung nach einem der Ansprüche 1 bis 8, dadurch gekennzeichnet, daß es sich bei den Erkrankungen, die insbesondere mit einer gestörten Aktivität von TF im Zusammenhang stehen, um Angiopathien handelt. 12. Use according to one of claims 1 to 8, characterized characterized in that the diseases, in particular with related activity of TF related to Angiopathy. 13. Verwendung nach Anspruch 12, dadurch gekennzeichnet, daß es sich bei den Angiopathien um angeborene Angiopathien handelt. 13. Use according to claim 12, characterized in that it angiopathies are congenital angiopathies. 14. Verwendung nach Anspruch 12, dadurch gekennzeichnet, daß es sich bei den Angiopathien um erworbene Angiopathien handelt. 14. Use according to claim 12, characterized in that it the angiopathies are acquired angiopathies. 15. Verwendung nach einem der Ansprüche 1 bis 8, dadurch gekennzeichnet, daß der Wirkstoff zur Stimulierung oder Inhibierung der Angiogenese eingesetzt wird. 15. Use according to one of claims 1 to 8, characterized characterized in that the active ingredient for stimulating or inhibiting the Angiogenesis is used. 16. Verwendung nach einem der Ansprüche 1 bis 8, dadurch gekennzeichnet, daß der Wirkstoff zur Stimulierung oder Inhibierung der Wundheilung eingesetzt wird. 16. Use according to one of claims 1 to 8, characterized characterized in that the active ingredient for stimulating or inhibiting the Wound healing is used. 17. Diagnosekit, umfassend mindestens eine Substanz zum Nachweis von Expression und/oder Funktion von sgk1, zur Diagnose von Erkrankungen, die mit einer gestörten Aktivität von TF im Zusammenhang stehen. 17. Diagnostic kit comprising at least one substance for detection of expression and / or function of sgk1, for the diagnosis of Diseases associated with impaired activity of TF in Related. 18. Diagnosekit nach Anspruch 17 zur Diagnose von Erkrankungen, die mit einer Über- und/oder Unterfunktion von sgk1 verbunden sind. 18. Diagnostic kit according to claim 17 for the diagnosis of diseases, linked to an over- and / or under-function of sgk1 are. 19. Diagnosekit nach Anspruch 17 oder 18 zur Diagnose von Koagulopathien, Angiopathien und/oder Angiogenese-abhängigen Erkrankungen. 19. Diagnostic kit according to claim 17 or 18 for the diagnosis of Coagulopathies, angiopathies and / or angiogenesis-dependent Diseases. 20. Pharmazeutische Zusammensetzung, umfassend eine wirksame Menge mindestens eines Wirkstoffes, der die Expression und/oder Funktion von sgk1 beeinflußt, insbesondere inhibiert oder aktiviert, und ggf. einen pharmazeutischen Träger. 20. A pharmaceutical composition comprising an effective one Amount of at least one active ingredient, the expression and / or Function of sgk1 influenced, in particular inhibited or activated, and possibly a pharmaceutical carrier. 21. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 20, dadurch gekennzeichnet, daß es sich bei dem Wirkstoff um einen Kinase- Inhibitor, vorzugsweise um Staurosporin und/oder Chelerythrin bzw. eines von deren Analoga, handelt. 21. Pharmaceutical composition according to claim 20, characterized characterized in that the active ingredient is a kinase Inhibitor, preferably around staurosporine and / or chelerythrine or one of their analogues. 22. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 20, dadurch gekennzeichnet, daß der Wirkstoff ein Polynukleotid ist, welches ein Peptid, vorzugsweise ein Polypeptid kodiert, wobei dieses Peptid die Expression und/oder Funktion von sgk1 beeinflußt, vorzugsweise inhibiert oder aktiviert. 22. Pharmaceutical composition according to claim 20, characterized characterized in that the active ingredient is a polynucleotide which encodes a peptide, preferably a polypeptide, this Peptide influences the expression and / or function of sgk1, preferably inhibited or activated. 23. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 20, dadurch gekennzeichnet, daß der Wirkstoff ein "small molecular compound", vorzugsweise ein "small molecular compound" mit einem Molekulargewicht (MG) < 1.000, ist. 23. Pharmaceutical composition according to claim 20, characterized characterized in that the active ingredient is a "small molecular compound ", preferably a" small molecular compound "with a Molecular weight (MW) <1,000. 24. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 20, umfassend eine wirksame Menge mindestens eines Wirkstoffes, der die Expression und/oder Funktion von Aktivatoren, Inhibitoren, Regulatoren und/oder biologischen Vorläufern von sgk1 beeinflußt, insbesondere inhibiert oder aktiviert, und ggf. einen pharmazeutischen Träger. 24. The pharmaceutical composition according to claim 20, comprising an effective amount of at least one active ingredient which Expression and / or function of activators, inhibitors, Regulators and / or biological precursors influenced by sgk1, in particular inhibited or activated, and possibly one pharmaceutical carrier. 25. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 24, dadurch gekennzeichnet, daß der Wirkstoff ein Polynukleotid ist, welches ein Peptid, vorzugsweise ein Polypeptid kodiert, wobei dieses Peptid die Expression und/oder Funktion von Aktivatoren, Inhibitoren, Regulatoren und/oder biologischen Vorläufern von sgk1 beeinflußt, vorzugsweise inhibiert oder aktiviert. 25. Pharmaceutical composition according to claim 24, characterized characterized in that the active ingredient is a polynucleotide which encodes a peptide, preferably a polypeptide, this Peptide the expression and / or function of activators, Inhibitors, regulators and / or biological precursors of sgk1 influenced, preferably inhibited or activated. 26. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 24, dadurch gekennzeichnet, daß der Wirkstoff ein "small molecular compound", vorzugsweise ein "small molecular compound" mit einem Molekulargewicht (MG) < 1.000, ist. 26. Pharmaceutical composition according to claim 24, characterized characterized in that the active ingredient is a "small molecular compound ", preferably a" small molecular compound "with a Molecular weight (MW) <1,000.
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