DD258624A1 - LONG-TERM STORAGE OF BREED MATERIAL IN SUGAR BEETS - Google Patents

LONG-TERM STORAGE OF BREED MATERIAL IN SUGAR BEETS Download PDF

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DD258624A1 DD85282700A DD28270085A DD258624A1 DD 258624 A1 DD258624 A1 DD 258624A1 DD 85282700 A DD85282700 A DD 85282700A DD 28270085 A DD28270085 A DD 28270085A DD 258624 A1 DD258624 A1 DD 258624A1
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lux
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DD85282700A
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Inventor
Karin Lohmann
Horst Lux
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Inst F Ruebenforschung
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    • Y02P60/216

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  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)

Abstract

Die Erfindung betrifft ein System, das geeignet ist, bewurzelte in vitro Pflanzen von Zuckerrueben mit geringem Aufwand an Kosten und Energie 18-24 Monate ohne Passagierung zu lagern. Ziel der Erfindung ist es, Zuchtmaterial genetisch unveraendert fuer mehrere Jahre aufzubewahren und wiederholt fuer den Zuchtprozess zur Verfuegung zu stellen. Erfindungsgemaess ist die Bereitstellung eines geeigneten Ueberlagerungsmediums mit bestimmten Zustaenden und die Auswahl geeigneter Temperatur- und Lichtbedingungen. Erfindungsgemaess besteht das Medium aus bekannten Makro- und Mikroelementen, dem Phytohormon Indolyl-3-buttersaeure und Zusaetzen von osmotisch wirksamen Substanzen: Glyzerin oder Saccharose. Die optimalen Kulturbedingungen liegen bei 8C und 800 Lux.The invention relates to a system which is suitable to store rooted in vitro plants of sugar beet with little expenditure and energy costs 18-24 months without passenger. The aim of the invention is to keep breeding material genetically unchanged for several years and to provide repeatedly for the breeding process available. According to the invention, the provision of a suitable superimposed medium with certain conditions and the selection of suitable temperature and light conditions. According to the invention, the medium consists of known macro- and microelements, the phytohormone indolyl-3-butyric acid and addition of osmotically active substances: glycerol or sucrose. The optimum culture conditions are 8C and 800 lux.

Description

Anwendungsgebiet der ErfindungField of application of the invention

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Langzeitlagerung bewurzelter Beta-Rüben unter in vitro Bedingungen im Rahmen der Hybridzüchtung.The invention relates to a method for long-term storage of rooted beta-beets under in vitro conditions in the context of hybrid breeding.

Bekannte technische LösungenWell-known technical solutions

Umfangreiche Erfahrungen zur in vitro Langzeitlagerung liegen bei Kartoffeln vor.Extensive experience of in vitro long-term storage is available for potatoes.

Dabei handelt es sich um verschiedene Methoden zur Verlängerung des Subkulturintervalls:These are different methods for extending the subculture interval:

— Einsatz von Hungermedien (MOREL, G.: In: FRANKEL, O. H.; HAWKES, J. G. [Eds.] Crop genetics recources für today and tomorrow, Cambridge, London, New York, Melbourne, Cambridge University Press, 1975, S. 327-332)- Use of starvation media (MOREL, G .: In: FRANKEL, OH; HAWKES, JG [eds.] Crop genetics recources for today and tomorrow, Cambridge, London, New York, Melbourne, Cambridge University Press, 1975, p. 327- 332)

— Einsatz vonWachstumsretardantien (MIX, G.: Kartoffelbau, Gelsenkirchen — Buer32 [1981 a] 7, S. 198-199; Mix, G.: Informationsblatt für Düngung und Saatgut, Wien [1982] 1; MiX. G.: Landbauforsch. Völkenrode, Braunschweig 33 [1983] 3, S. 179-182)- use of growth retardants (MIX, G .: potato, Gelsenkirchen - Buer32 [1981 a] 7, pp 198-199; Mix, G.: Information Sheet for Fertilization and Seed, Vienna [1982] 1; MiX G .: Landbauforsch. Volkenrode, Braunschweig 33 [1983] 3, p. 179-182)

— Einsatz von Osmotika (SCHILDE- RENTSCHLER und SCHIEDICHTE: CIP Circular, Lima, 12 [1984] 1, S. 1-6, WESTCOTT, R. J.: Potato Res., Wageningen 24 [1981] S.343-352)- Use of Osmotika (SCHILEN- RENTSCHLER and SCHIEDICHTE: CIP Circular, Lima, 12 [1984] 1, pp. 1-6, WESTCOTT, R.J .: Potato Res., Wageningen 24 [1981] p.343-352)

— Anwendung spezifischer Kulturbedingungen (MENSHAW, G.G. et al.: In: INGRAM, D.S.; HELGESON, J.P. (Eds.): Tissue culture methods for plant pathologists, Edinburgh, Boston, Melbourne, Blackwall Scientific Publications [1980], S.71-76; STANDKE, K.-H. C: Proc. 5 th Intern. Congr. Pl. Tissue and Cell CuIt., Tokyo and Lake Yamanaka, 11. —16.7.1982, S.257)- Application of specific culture conditions (MENSHAW, GG et al .: In: INGRAM, DS; HELGESON, JP (Eds.): Tissue culture methods for plant pathologists, Edinburgh, Boston, Melbourne, Blackwall Scientific Publications [1980], p.71- 76; STANDKE, K.-H. C: Proc. 5 th Intern. Congr. Pl. Tissue and Cell CuIt., Tokyo and Lake Yamanaka, 11-16.7.1982, p.257)

— Erzeugung von Mikroknollen (OSTAPENKO, D. P.: Patentschrift, SU, WP, A01 H1/04, Nr. 743646 [1982], 4 S., PETT, B.; THIEME, R.: Potato Res., Wageningen 24 [1981], S.105-110- Production of microtubers (OSTAPENKO, DP: Patent, SU, WP, A01 H1 / 04, No. 743646 [1982], 4 pp., PETT, B .; THIEME, R .: Potato Res., Wageningen 24 [1981] , P.105-110

— Gefrierkonservierung (BAJAJ, Y. P. S.:Euphytica, Wageningen 30 [1981 ]1,S.141-145; MANZULIN et al.: Fiziol. Rast., Moskva 31 [1984] 4, S. 639-645)Frozen preservation (BAJAJ, Y. P. S.: Euphytica, Wageningen 30 [1981] 1, p.141-145; MANZULIN et al .: Fiziol. Rast., Moskva 31 [1984] 4, pp. 639-645)

Aus vorläufigen Ergebnissen mit Zuckerrüben wird mitgeteilt, daß bewurzelte Sprosse für maximal 1 Jahr bei 5-1O0C und geringer Lichtintensität gehalten werden können (MIEDEMA, D.: Euphytica 31 [1982]. S.635-643).Is informed of preliminary results with beet that rooted shoots for up to 1 year at 5-1O 0 C and low light intensity can be kept (MIEDEMA, D .: Euphytica 31 [1982]. S.635-643).

Weiterhin gibt es Überlegungen, durch Erhöhung des Mediumvolumens die Lagerdauer zu verlängern und die Absterberate der Pflanzen zu reduzieren (SAUNDERS, J. W., schriftl. Mitteil, vom Landwirtschaftsattache Schulz). Eine Überlagerung bei 12°C erforderte die Umsetzung des Materials im Abstand von 18 Wochen (HUSSEY, G.; HEPHER, R. P.: Ann. Bot. 42 [1978], S.477-Furthermore, there are considerations to extend the storage period by increasing the volume of medium and to reduce the mortality rate of the plants (SAUNDERS, J.W., written notice from the agricultural attorney Schulz). An overlay at 12 ° C required the reaction of the material at intervals of 18 weeks (HUSSEY, G., HEPHER, R.P .: Ann. Bot. 42 [1978], p.

Bei „Strube-Dieckmann" (BRD) werden ca. 1000 verschiedene Genotypen in einer „kleinen Genbank" bei 1O0C über einen Zeitraum von 4 Jahren gehalten (GASSNER, D.: Dt. Rübenzeitung, Worms 21 [1985]).In "Strube-Dieckmann" (Germany), about 1000 different genotypes in a "small library" are at 1O 0 C held over a period of 4 years (Gassner, D .: Dt. Beets newspaper, Worms 21 [1985]).

Ziel der ErfindungObject of the invention

Es ist das Ziel der vorliegenden Erfindung, für die Züchtung von Beta-Rüben, Zuchtmaterial über mehrere Jahre genetisch unverändert aufzubewahren und wiederholt in den Zuchtprozeß einzuordnen.It is the object of the present invention, for the breeding of beta beets, to keep genetic material unchanged over several years and to place it repeatedly in the breeding process.

Wesen der ErfindungEssence of the invention

Bei dem sehr langwierigen Prozeß der züchterischen Bearbeitung von Zuckerrüben bis zur Zulassung einer neuen Sorte (ca. 15 Jahre) ergibt sich die Notwendigkeit, das selektierte Material zu überprüfen bzw.. die Kombinationseignung festzustellen. Bis zur Ermittlung der Materialeigenschaften vergehen mitunter mehrere Jahre.In the very lengthy process of breeding sugar beets until the approval of a new variety (about 15 years) there is a need to check the selected material or to determine the combination suitability. Sometimes it takes several years to determine the material properties.

Erfindungsaufgabe ist es, ein Verfahren bereitzustellen, mit dem die Dauer der Lagerung von Zuchtmaterial unter in vitro Bedingungen verlängert werden kann.It is an object of the invention to provide a method by which the duration of storage of breeding material under in vitro conditions can be prolonged.

Erfindungsgemäß besteht das Verfahren für die Langzeitlagerung von Beta-Rübenzuchtmaterial aus der Nutzung von synthetischen Nährmedien mit Phytohormonen und Osmotika, die bei niedriger Temperatur und Schwachlicht aufbewahrt werden.According to the invention, the process is for the long-term storage of beta-beet breeding material from the use of synthetic nutrient media with phytohormones and osmotic agents, which are stored at low temperature and low light.

Zur Senkung der Wachstumsintensität während der Kühllagerung werden osmotisch wirksame Substanzen eingesetzt. Als besonders vorteilhaft erwiesen sich dabei Saccharose bzw. Glyzerin, die als physiologisch inaktive Substanzen keine Nebenwirkungen zur Folge haben, wie es bei retardierend wirkenden Substanzen bekannt ist.To reduce the growth intensity during cold storage, osmotically active substances are used. Sucrose or glycerol, which have no side effects as physiologically inactive substances, as is known in retarding substances, have proved to be particularly advantageous.

An Stelle von Agrarmedien wird für die in vitro-Bewurzlung und Kühllagerung Flüssigmedium eingesetzt. Hierdurch ist es ohne Schwierigkeiten möglich, durch nachträgliche Zugabe der osmotisch wicksamen Substanz negative Wirkungen auf die Bewurzlung zu vermeiden und bei Bedarf frische Nährlösung nachzufüllen.Instead of agricultural media, liquid medium is used for in vitro rooting and cold storage. As a result, it is possible without difficulty to avoid negative effects on the rooting by subsequent addition of the osmotic wicksamen substance and to refill fresh nutrient solution as needed.

Besonders bevorzugt ist als Phytohormon zur Bewurzlung und Kühllagerung lndolyl-3-buttersäure im Konzentrationsbereich 3,0Particularly preferred as phytohormone for rooting and cold storage indolyl-3-butyric acid in the concentration range 3.0

Die Glyzerinzugabe erfolgt vorzugsweise in einer Menge von 0,10 bis 0,20 mol/l, die Saccharosekonzentration wird bevorzugt eingesetzt bei 80 bis 100g/l.The glycerol is preferably added in an amount of 0.10 to 0.20 mol / l, the sucrose concentration is preferably used at 80 to 100g / l.

Ein solches Verfahren ermöglicht es, die Lagerungsdauer in vitro bewurzelter Pflanzen von Zuckerrüben bei niedriger Temperatur (80C) und Schwachlicht (800 Lux) im Unterschied zu den herkömmlichen Verfahren von bisher 12 Monate auf 18 bis 24 Monate zu verlängern.Such a method makes it possible to extend the storage period of in vitro rooted plants of sugar beet at low temperature (8 0 C) and low light (800 lux) in contrast to the conventional method from the previous 12 months to 18 to 24 months.

Die Erfindung soll nachstehend durch Beispiele näher erläutert werden.The invention will be explained in more detail by examples.

Ausführungsbeispiel 1Embodiment 1

Die in vitro-Bewurzlung erfolgt auf Flüssig-Mineralsalzmedium nach MURASHIGE und SKOOG (Physiol. Plant. 15 [1962]) unter Zusatz von 20g/l Saccharose 4mg/l lndolyl-3-buttersäureThe in vitro rooting is carried out on liquid mineral salt medium according to MURASHIGE and SKOOG (Physiol Plant 15 [1962]) with the addition of 20 g / l sucrose 4 mg / l indolyl-3-butyric acid

Kulturbedingungen: 16 Std. Licht, 8 Std. Dunkelheit bei 25°C/15°C, 3000 Lux, weißes Licht) Nach 6 Wochen Kultur kann die Lagerung unter folgenden Bedingungen beginnen: Temperatur: 80C Licht: 3 x 4Std. bei 800 LuxCulture conditions: 16 hrs light, 8 hrs darkness at 25 ° C / 15 ° C, 3000 lux, white light) After 6 weeks culture, storage may begin under the following conditions: temperature: 8 0 C light: 3 x 4 hrs. at 800 lux

Die Nährlösung wurde nach 9 Monaten in der erforderlichen Menge ergänzt.The nutrient solution was supplemented after 9 months in the required amount.

Die Lagerung des in vitro-Materials erfolgt auf diese Weise für die Dauer von 18 Monaten.The storage of the in vitro material takes place in this way for a period of 18 months.

Ausführungsbeispiel 2Embodiment 2

Die Kulturbedingungen für die in vitro-Bewurzlung wie in Beispiel 1 beschrieben. Es wurde nur die Zugabe von Saccharose variiert, anstelle von 20g/l Saccharose enthielt das Bewurzlungsmedium bzw. Überlagerungsmedium 80g/l Saccharose. Damit wurde eine Überlagerungsdauer von 24 Monaten erreicht. 'The culture conditions for in vitro rooting as described in Example 1. Only the addition of sucrose was varied, instead of 20 g / l of sucrose, the rooting medium or overlay medium contained 80 g / l of sucrose. This resulted in an overlay duration of 24 months. '

Claims (5)

Erfindungsanspruch:Invention claim: 1. Verfahren zur Langzeitlagerung (Depothaltung) von bewurzelten Beta-Rüben in synthetischen Nährmedien gekennzeichnet dadurch, daß die Pflanzen unter Zusatz von Phytohormonen und osmotisch wirksamen Substanzen bei Temperaturen von +60C bis +10°C und weißem Schwachlicht im Bereich von 500 bis 1 000 Lux gelagert werden.1. A method for long-term storage (Depothaltung) of rooted beta beets in synthetic nutrient media, characterized in that the plants with the addition of phytohormones and osmotically active substances at temperatures of +6 0 C to + 10 ° C and white low light in the range of 500 to 1,000 lux are stored. 2. Verfahren nach Pkt. 1, gekennzeichnet dadurch, daß als Phytohormon lndolyl-3-buttersäure im Konzentrationsbereich von 0,1 ... 10 mg/l(vorzugsweise 3... 5 mg/l^ugefügt wird.2. The method according to item 1, characterized in that as phytohormone indolyl-3-butyric acid in the concentration range of 0.1 to 10 mg / l ( preferably 3 ... 5 mg / l ^ u. 3. Verfahren nach Pkt. 1, gekennzeichnet dadurch, daß als osmotisch wirksame Substanzen vorzugsweise Saccharose oder Glyzerin verwendet werden, wobei Saccharose im Bereich von 5 ... 150g/l vorzugsweise im Bereich von 80 ...100g/l und Glyzerin im Bereich von 0,01 ... 0,5mol/l, vorzugsweise im Bereich von 0,1 ... 0,3 mol/l(verwendet werden.3. The method according to item 1, characterized in that preferably used as osmotically active substances sucrose or glycerol, wherein sucrose in the range of 5 ... 150g / l preferably in the range of 80 ... 100g / l and glycerol in the range from 0.01 to 0.5 mol / l, preferably in the range of 0.1 to 0.3 mol / l ( used. 4. Verfahren nach Pkt. 1, gekennzeichnet dadurch, daß die Temperatur vorzugsweise 6.. .8°C und das Schwachlicht vorzugsweise 800 Lux beträgt.4. The method according to item 1, characterized in that the temperature is preferably 6 .. .8 ° C and the low light is preferably 800 lux. 5. Verfahren nach Pkt. 1-4, gekennzeichnet dadurch, daß die Pflanze die Zuckerrübe, Beta vulgaris, ist.5. The method according to Pkt. 1-4, characterized in that the plant is the sugar beet, Beta vulgaris.
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
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EP0327362A1 (en) * 1988-02-03 1989-08-09 Mitsui Petrochemical Industries, Ltd. Method for storing seedling, nursery plant and bulb
EP0399158A1 (en) * 1989-05-23 1990-11-28 Societe Des Produits Nestle S.A. Method for preserving vegetal embryos

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