DD254395A1

DD254395A1 - PROCESS FOR OBTAINING TRYPTAMINE DERIVATIVES BY CULTIVATING HIGHER MUSHROOMS

Info

Publication number: DD254395A1
Application number: DD29723086A
Authority: DD
Inventors: Jochen Gartz
Original assignee: Akad Wissenschaften Ddr
Priority date: 1986-12-08
Filing date: 1986-12-08
Publication date: 1988-02-24

Abstract

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Gewinnung der Wirkstoffe Psilocybin und Psilocin durch Kultivierung der Fruchtkoerper hoeherer Pilze. Die Wirkstoffe sind als Modellsubstanzen in der neurobiologischen Forschung anwendbar. Die Fruchtkoerper werden nach der Beimpfung eines autoklavierten Gemisches aus Reiskoernern und Wasser mit Primaermycelkulturen nach einigen Wochen ohne weitere Verfahrensschritte wie zusaetzliche Bereitung des Substrates, Verwendung einer speziellen Deckschicht oder Konstanthaltung der Luftfeuchtigkeit erreicht. Die Gewinnung der Wirkstoffe aus den getrockneten und pulverisierten Fruchtkoerpern erfolgt mittels bekannter Verfahren wie Extraktion und Chromatographie.The invention relates to a process for obtaining the active ingredients psilocybin and psilocin by cultivating the fruiting bodies of higher fungi. The active substances are applicable as model substances in neurobiological research. After the inoculation of an autoclaved mixture of rice starches and water with primary mycelium cultures, the fruiting bodies are obtained after a few weeks without further process steps, such as additional preparation of the substrate, use of a special covering layer or constant maintenance of the air humidity. The recovery of the active ingredients from the dried and powdered fruiting bodies by known methods such as extraction and chromatography.

Description

Field of application of the invention

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Gewinnung von Tryptaminderivaten durch künstliche Anzucht höherer Pilze auf geeigneten Nährböden. Die Substanzen Psilocybin und Psilocin sind in der neurobiologischen Forschung als Modellsubstanzen anwendbar.The invention relates to a process for obtaining tryptamine derivatives by artificial cultivation of higher fungi on suitable nutrient media. The substances psilocybin and psilocin are applicable in neurobiological research as model substances.

Characteristic of the known technical solutions

Die Tryptaminderivate Psilocybin und Psilocin sind in natürlich vorkommenden höheren Pilzen der Gattungen Psilocybe, Stropkaria, Plutens, Conocybe und Inocybe bei verschiedenen Arten nachweisbar.The tryptamine derivatives psilocybin and psilocin are found in naturally occurring higher fungi of the genera Psilocybe, Stropkaria, Plutens, Conocybe and Inocybe in various species.

Es ist bekannt, daß Fruchtkörper verschiedener Pilzarten der Gattungen Psilocybe und Stropkaria auf Kompostsubstraten künstlich anzüchtbarsind (DE 1087321). Daraussind die Wirkstoffe mittels geeigneter Extraktionsverfahren und nachfolgender chromatographischer Auftrennung in seiner Form kristallin darstellbar. Das beschriebene Verfahren hat mehrere Nachteile. Ein zusätzlicher und langwieriger Verfahrensschritt ist die Bereitung der entsprechenden Kompostsubstrate. Weiterhin ist eine Deckschicht zur Fruktifikation nötig, die Fruchtkörperbildung setzt oft erst nach vielen Wochen ein. Schließlich müssen zur Erzielung der Fruktifikation konstante Feuchtigkeitsgrade der Luft garantiert werden.It is known that fruiting bodies of various fungus species of the genera Psilocybe and Stropkaria on compost substrates are artificially cultivated (DE 1087321). From this, the active ingredients can be prepared in a crystalline form by means of suitable extraction methods and subsequent chromatographic separation. The method described has several disadvantages. An additional and lengthy process step is the preparation of the corresponding compost substrates. Furthermore, a top layer for fructification is necessary, the fruit body formation often only after many weeks. Finally, in order to achieve fructification, constant moisture levels of the air must be guaranteed.

Weiterhin wird zur Fruchtkörpererzeugung ein Substrat mit Roggen als Hauptbestandteil beschrieben (J. Ethnopharm. 5 [1982] 287). Der Nachteil dieses Verfahrens ist ebenfalls die notwendige Anwendung einer kompliziert zusammengesetzten Deckschicht mit spezifischem Wasserbindungsvermögen bei gleichzeitiger Garantierung einer konstanten Befeuchtung.Furthermore, a substrate with rye is described as the main constituent for fruit body production (J. Ethnopharm, 5 [1982] 287). The disadvantage of this method is also the necessary application of a complicated composite cover layer with specific water-binding capacity while guaranteeing a constant humidification.

Object of the invention

Ziel der Erfindung ist es, ein einfaches und wenig aufwendiges Verfahren zur Gewinnung von Tryptaminderivaten durch Kultivierung von Fruchtkörpern höherer Pilze zu entwickeln, bei denen eine hohe Konzentration der Tryptaminderivate im Pilzgewebe bei gleichzeitiger schneller Fruktifikation erreicht wird.The aim of the invention is to develop a simple and inexpensive process for obtaining tryptamine derivatives by culturing fruiting bodies of higher fungi, in which a high concentration of the tryptamine derivatives in the fungal tissue is achieved with simultaneous rapid fructification.

Explanation of the essence of the invention

Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, solche Nährboden zur Fruktifikation auszuwählen, die ohne Deckschicht und der Notwendigkeit einer konstanten Luftbefeuchtung eine schnelle Fruchtkörperbildung bei gleichzeitig hoher Konzentration an Tryptaminderivaten in den Pilzen gewährleisten.The invention has for its object to select such culture medium for fructification, which ensure a fast fruit body formation at the same time high concentration of tryptamine in the mushrooms without top coat and the need for constant humidification.

Erfindungsgemäß wird die Aufgabe dadurch gelöst, indem ein Gemisch aus Reiskörnern und Wasser als fester Nährboden zur Fruchtkörperbildung verwendet wird. Nach derAutoklavierung des Gemisches wird der Nährboden bei Raumtemperatur (20 bis 25°C) mit geeigneten Primärkulturen aus Agarplatten steril beimpft. Für die Nährböden werden 20 bis 70% Reiskörnerund die auf 100% zu ergänzenden Mengen Wasser verwendet. Nach 3 bis 4 Wochen Wachstum der Kultur mit oder ohne zusätzliche Belichtung, je nach Pilzart, erscheinen die ersten Fruchtkörper ohne Verwendung einer Deckschicht oder notwendige Befeuchtung, die Ernte der Fruchtkörper erfolgt in den nächsten Wochen, je nach der jeweiligen Fruktifikationswelle. Nach dem völligen Durchwachsen des Nährbodens mit Mycel kann die Fruchtkörperbildung auch unter unsterilen Bedingungen weitergeführt werden. Bei dieser Verfahrensweise sind Psilocybin und Psilocin in Mengen bis zu 1 % bzw. 0,5%, berechnet auf die Trockenmassen der Fruchtkörper darstellbar. Die Wirkstoffe werden in bekannter Weise durch Extraktion mit Methanol und nachfolgender Chromatographie isoliertAccording to the invention the object is achieved by a mixture of rice grains and water is used as a solid medium for fruiting body formation. After autoclaving the mixture, the medium is sterile inoculated at room temperature (20-25 ° C) with appropriate primary cultures of agar plates. For the nutrient media 20 to 70% rice grains and 100% additional water are used. After 3 to 4 weeks growth of the culture with or without additional exposure, depending on the type of fungus, the first fruiting bodies appear without the use of a cover layer or necessary moistening, the harvesting of fruiting bodies takes place in the next few weeks, depending on the respective fructification wave. After complete penetration of the medium with mycelium, the fruit body formation can be continued under unsterile conditions. In this procedure, psilocybin and psilocin are present in amounts of up to 1% and 0.5%, respectively, calculated on the dry masses of the fruiting bodies. The active compounds are isolated in a known manner by extraction with methanol and subsequent chromatography

Die Erfindung soll durch die nachfolgenden Beispiele näher erläutert werden: The invention will be explained in more detail by the following examples:

embodiments example 1

Es wurde eine Primärkultur von Psilocybe cubensis (Earle) Singer zur Beimpfung verwendet, die durch Keimung der Sporen auf 6%igem Malzagar, Überimpfung nach 14Tagen und nachfolgender Kultivierung (20 Tage) auf 100ml des gleichen Agärs gewonnen wurde.A primary culture of Psilocybe cubensis (Earle) Singer was used for inoculation, obtained by germination of the spores on 6% malt agar, inoculation after 14 days, and subsequent cultivation (20 days) on 100 ml of the same agar.

Ein Mycelstückvon ca. 2 χ 2cm wurde mit einem sterilen Spatel entnommen und daraus durch Schütteln mit 30 ml sterilem Wasser und 15g Sattelfüllkörpern eine Suspension feiner Mycelflöckchen erzeugt.A piece of mycelium approximately 2 cm 2 cm was removed with a sterile spatula and a suspension of fine mycelium flakes was produced therefrom by shaking with 30 ml of sterile water and 15 g of saddle filling bodies.

10ml der Suspension dienten zur Beimpfung eines autoklavierten Gemischesaus 100g Reiskörnern und 200ml Wasser. Nach Wochen begann die Bildung der Fruchtkörper, die in 5 Fruktifikationswellen erschienen.10ml of the suspension was used to inoculate an autoclaved mixture of 100g rice grains and 200ml water. After weeks began the formation of fruiting bodies, which appeared in 5 fructification waves.

Ausbeute: 21 g trockene Fruchtkörper HPLC-Analyse: Psilocybin-Gehalt: 0,7% Psilocin-Gehalt: 0,1%Yield: 21 g dry fruit bodies HPLC analysis: Psilocybin content: 0.7% Psilocin content: 0.1%

Aufarbeitung erfolgt in bekannter Weise durch Extraktion des gepulverten Materials mit Methanol und nachfolgender Säulenchromatographie an Cellulose.Workup is carried out in a known manner by extraction of the powdered material with methanol and subsequent column chromatography on cellulose.

Example 2

Es wurde ein 2. Stamm von Psilocybe cubensis (Earle) Singer verwendet. Unter analogen Bedingungen wurde nach 4 Wochen die ersten Fruchtkörper erreicht. Ausbeute: 25g trockene Fruchtkörper HPLC: Psilocybin-Gehalt: 0,95% Psilocin-Gehalt: 0,2%.A second strain of Psilocybe cubensis (Earle) Singer was used. Under analogous conditions, the first fruiting bodies were reached after 4 weeks. Yield: 25g dry fruit bodies HPLC: Psilocybin content: 0.95% Psilocin content: 0.2%.

Claims

1. A process for the production of tryptamine derivatives by culturing fruiting bodies of psilocybin and psilocin-containing higher fungi, preferably of the genera Psilocybe, Stropkaria, Plutens and Conocybe, characterized in that moist rice grains are inoculated as a solid medium with Primärmycelkulturen under sterile conditions and after fruiting body formation Separation of psilocybin and prilocin in a manner known per se, as carried out by extraction or chromatography.

2. The method according to claim 1, characterized in that after the growth of the nutrient medium through the mycelium at a temperature of 20-25 ⁰ C, the cultivation of the fruiting body is also non-sterile, and depending on the fungus species with or without additional exposure.

3. Culture medium for cultivation of higher fungi, which can be used for the recovery of tryptamine derivatives, characterized by the composition

- rice grains 20-70%

- Water 30-80%

in autoclaved state of the mixture.