CZ309932B6 - A strain of the Kazachstania pseudohumilis CCM 9277 yeast producing antifungally effective metabolites useable in the production of bakery products - Google Patents

A strain of the Kazachstania pseudohumilis CCM 9277 yeast producing antifungally effective metabolites useable in the production of bakery products Download PDF

Info

Publication number
CZ309932B6
CZ309932B6 CZ2023-69A CZ202369A CZ309932B6 CZ 309932 B6 CZ309932 B6 CZ 309932B6 CZ 202369 A CZ202369 A CZ 202369A CZ 309932 B6 CZ309932 B6 CZ 309932B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
strain
production
yeast
ccm
pseudohumilis
Prior art date
Application number
CZ2023-69A
Other languages
Czech (cs)
Other versions
CZ202369A3 (en
Inventor
Miloslava Kavková
Kavková Miloslava Ing., Ph.D.
Vladimír Dráb
Vladimír Ing. Dráb
Ladislav Bár
Ladislav Mgr. Bár
Jaromír Cihlář
Cihlář Jaromír Mgr., Ph.D.
Original Assignee
Výzkumný ústav mlékárenský s.r.o.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Výzkumný ústav mlékárenský s.r.o. filed Critical Výzkumný ústav mlékárenský s.r.o.
Priority to CZ2023-69A priority Critical patent/CZ202369A3/en
Publication of CZ309932B6 publication Critical patent/CZ309932B6/en
Publication of CZ202369A3 publication Critical patent/CZ202369A3/en

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14Fungi; Culture media therefor
    • C12N1/16Yeasts; Culture media therefor
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A21BAKING; EDIBLE DOUGHS
    • A21DTREATMENT, e.g. PRESERVATION, OF FLOUR OR DOUGH, e.g. BY ADDITION OF MATERIALS; BAKING; BAKERY PRODUCTS; PRESERVATION THEREOF
    • A21D8/00Methods for preparing or baking dough
    • A21D8/02Methods for preparing dough; Treating dough prior to baking
    • A21D8/04Methods for preparing dough; Treating dough prior to baking treating dough with microorganisms or enzymes
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14Fungi; Culture media therefor
    • C12N1/16Yeasts; Culture media therefor
    • C12N1/18Baker's yeast; Brewer's yeast

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Food Preservation Except Freezing, Refrigeration, And Drying (AREA)
  • Bakery Products And Manufacturing Methods Therefor (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

The strain of the Kazachstania pseudohumilis yeast, deposited in the Czech Collection of Microorganisms of the Faculty of Science of the Masaryk University, Kamenice 5, Brno under the number 9277 producing unidentifiable antifungally active metabolites during the growth in synthetic and flour media. This strain can be used to produce an antifungally effective preparation, ferment, crumb, mash with the usability in the baking industry.

Description

Kmen kvasinky Kazachstania pseudohumilis CCM 9277 produkující antifungálně účinné metabolity použitelné ve výrobě pekárenských výrobkůKazachstania pseudohumilis CCM 9277 yeast strain producing antifungal active metabolites usable in the production of bakery products

Oblast technikyField of technology

Řešení se týká průmyslového kvasinkového kmene Kazachstania pseudohumilis CCM 9277, který je využitelný pro produkci antifungálně účinných metabolitů, a to v průmyslových podmínkách za kontinuálních či diskontinuálních podmínek. Kmen byl vyselektován ze souboru různých kvasinkových kmenů izolovaných z kvásků a fermentovaných výrobků na základě výsledků inhibiční aktivity vůči růstu vláknitých hub.The solution concerns the industrial yeast strain Kazachstania pseudohumilis CCM 9277, which can be used for the production of antifungal active metabolites in industrial conditions under continuous or discontinuous conditions. The strain was selected from a group of different yeast strains isolated from sourdoughs and fermented products based on the results of inhibitory activity against the growth of filamentous fungi.

Dosavadní stav technikyCurrent state of the art

Vláknité askomycety a kvasinky, představují druhově rozmanité skupiny houbových organismů, které spolu s řadou mikroorganismů tvoří v přirozených podmínkách komunity, v nichž dochází k vzájemným interakcím na úrovni kompetice o živiny a prostor, antibiózy, parazitismu či predace. Potraviny, pekařské a mléčné výrobky, představují pro vláknité askomycety i kvasinky uniformní prostředí bohaté na živiny s malou mikrobiologickou konkurencí. Vláknité askomycety, zejména rod Penicillium sp., Aspergillus sp., a Fusarium sp., jsou nejčastějšími kontaminanty těchto produktů. Kontaminující druhy zpravidla tolerují vyšší hladinu soli (halotolerantní druhy) (15 %), nízkou vodní aktivitu (Aw) a mají širší teplotní amplitudu (Garnier a kol., 2017; Udovicki a kol., 2018). Potraviny znehodnocují nutričně i senzoricky a také jsou producenty mykotoxinů a dalších sekundárních metabolitů (Ráduly a kol., 2020). Sanitace výrobních a expedičních prostor a zařízení schválenými prostředky je sice pravidelnou součástí výrob, ale s ohledem na rezistentní a adaptační mechanismy kontaminujících plísní, nemusí být vždy efektivní. Legislativa EU povoluje konzervační prostředky v pekařských výrobcích jako je E280 (kyselina propionová) nebo E281 (propionát sodný) v množství 0,2 až 0,3 % (m/m) (Coda a kol., 2011), které chrání výrobek po deklarovanou dobu. V mléčných výrobcích jsou také v rámci EU povolené konzervanty, jako je kyselina sorbová (E200) a její soli (E202 a E203), benzoáty (E211 až E213) (Garnier a kol., 2017). V současné době jsou celosvětově a odůvodnitelně preferovány potraviny bez chemických konzervantů. Řada studií se proto zaměřuje na vývoj a aplikaci konzervantů přírodního původu (např. rostlinných eterických olejů), využití bakterií mléčného kvašení, kvasinek a jejich metabolických produktů (Freimoser a kol., 2019, Matevosyan a kol., 2020, Souza a kol., 2017, Wang a kol., 2021).Filamentous ascomycetes and yeasts represent species-diverse groups of fungal organisms that, together with a number of microorganisms, form communities in natural conditions in which mutual interactions occur at the level of competition for nutrients and space, antibiosis, parasitism or predation. Food, bakery and dairy products represent a uniform nutrient-rich environment for filamentous ascomycetes and yeasts with little microbiological competition. Filamentous ascomycetes, especially the genus Penicillium sp., Aspergillus sp., and Fusarium sp., are the most common contaminants of these products. Contaminating species generally tolerate a higher level of salt (halotolerant species) (15%), low water activity (Aw) and have a wider temperature amplitude (Garnier et al., 2017; Udovicki et al., 2018). They degrade food both nutritionally and sensorially and are also producers of mycotoxins and other secondary metabolites (Ráduly et al., 2020). Sanitation of production and shipping areas and equipment with approved means is a regular part of production, but with regard to the resistant and adaptive mechanisms of contaminating molds, it may not always be effective. EU legislation allows preservatives in bakery products such as E280 (propionic acid) or E281 (sodium propionate) in amounts of 0.2 to 0.3% (m/m) (Coda et al., 2011), which protect the product after the declared time. Preservatives such as sorbic acid (E200) and its salts (E202 and E203), benzoates (E211 to E213) are also allowed in dairy products within the EU (Garnier et al., 2017). Foods without chemical preservatives are currently preferred worldwide and with good reason. A number of studies therefore focus on the development and application of preservatives of natural origin (e.g. plant essential oils), the use of lactic acid bacteria, yeasts and their metabolic products (Freimoser et al., 2019, Matevosyan et al., 2020, Souza et al., 2017, Wang et al., 2021).

Antifungální aktivita kvasinek vůči toxigenním plísním je přičítána kombinacím několika mechanismů jako např. kompetice o prostor a živiny, sekrece enzymů (glukanázy, chitinázy, proteázy), produkce toxinů a uvolňování těkavých látek (VOCs) (Freimoser a kol., 2019). Produkce těchto látek je podmíněná vnitrodruhovou variabilitou a podmínkami prostředí. Výběr kmene s antifungální aktivitou musí být účelově cílen tak, aby účinek byl efektivní a bez vedlejšího účinku, tedy bez poškození potravinářského produktu kvasinkou. Úkolem vynálezců bylo nalézt možnosti ochrany pekárenských výrobků před kažením způsobeným vláknitými houbami použitím kvasinek produkujících antifungálně působící metabolity.Antifungal activity of yeast against toxigenic fungi is attributed to combinations of several mechanisms such as competition for space and nutrients, secretion of enzymes (glucanases, chitinases, proteases), production of toxins and release of volatile compounds (VOCs) (Freimoser et al., 2019). The production of these substances is conditioned by intraspecific variability and environmental conditions. The selection of a strain with antifungal activity must be purposefully targeted so that the effect is effective and without side effects, i.e. without damage to the food product by yeast. The task of the inventors was to find ways to protect bakery products from spoilage caused by filamentous fungi by using yeasts that produce antifungal metabolites.

Podstata vynálezuThe essence of the invention

Uvedené nedostatky odstraňuje nový průmyslový mikrobiální kmen kvasinky Kazachstania pseudohumilis CCM 9277 produkující 1,3 beta glukanázu a další blíže nespecifikované antifungálně účinné metabolity při kultivaci v různých substrátech a moučných médiích.The mentioned deficiencies are eliminated by the new industrial microbial strain of the yeast Kazachstania pseudohumilis CCM 9277 producing 1,3 beta glucanase and other unspecified antifungal active metabolites during cultivation in various substrates and flour media.

Izolace kmene podle vynálezuStrain isolation according to the invention

- 1 CZ 309932 B6- 1 CZ 309932 B6

Při izolaci kmene se smíchalo 2 g žitného kvásku s 18 ml 2% roztoku citrátu sodného a po vytvoření homogenní emulze se připravila desítková ředění ve fyziologickém roztoku a naočkovala na Sabaroud dextrose agar (SDA). Kultivace probíhala aerobně při teplotě 25 °C po dobu 5 dní.When isolating the strain, 2 g of rye yeast was mixed with 18 ml of a 2% sodium citrate solution, and after the formation of a homogeneous emulsion, ten-fold dilutions were prepared in physiological solution and inoculated on Sabaroud dextrose agar (SDA). Cultivation took place aerobically at a temperature of 25 °C for 5 days.

Charakterizace kmene podle vynálezuCharacterization of the strain according to the invention

Po přečištění získaných kolonií na SDA byl získaný izolát SAL-SDA-6C dále charakterizován pomocí sekvenace 5.8 S rRNA ITS regionu. Na základě tohoto regionu nebylo možné kmen jednoznačně zařadit (K. humilis/pseudohumilis), a proto byla sekvenována Dl až D2 oblast genu pro 26 S rRNA velkou ribozomální podjednotku pro další upřesnění druhového zařazení. K amplifikaci byly použity primery NL1 (5'-GCATATCAATAAGCGGAGGAAAAG-3') a NL4 (5'-GGTCCGTGTTTCAAGACGG-3') (Kutzman a Robnett, 1998). Získané nukleotidové sekvence byly porovnány se sekvencemi uloženými v on-line databázích (http://www.ncbi.nlm.nih.gov). Výsledkem bylo zařazení kmene podle vynálezu do druhu Kazachstaniapseudohumilis a uložení sekvence vNCBI (Acc. No. OP721099).After purification of the obtained colonies on SDA, the obtained isolate SAL-SDA-6C was further characterized by sequencing the 5.8 S rRNA ITS region. Based on this region, the strain could not be unambiguously classified (K. humilis/pseudohumilis), so the D1 to D2 region of the 26 S rRNA large ribosomal subunit gene was sequenced to further refine the species classification. Primers NL1 (5'-GCATATCAATAAGCGGAGGAAAAG-3') and NL4 (5'-GGTCCGTGTTTCAAGACGG-3') were used for amplification (Kutzman and Robnett, 1998). The obtained nucleotide sequences were compared with sequences stored in online databases (http://www.ncbi.nlm.nih.gov). The result was the inclusion of the strain according to the invention in the species Kazachstaniapseudohumilis and the deposit of the sequence in NCBI (Acc. No. OP721099).

Původní kmen podle vynálezu je uložen v lyofilizovaném stavu na mezinárodním ukládacím místě podle Budapešťské smlouvy v České sbírce mikroorganismů Přírodovědecké fakulty Masarykovy univerzity, Kamenice 5, Brno pod sbírkovým číslem CCM 9277.The original strain according to the invention is stored in a lyophilized state at an international storage site according to the Budapest Treaty in the Czech Collection of Microorganisms of the Faculty of Science of the Masaryk University, Kamenice 5, Brno under collection number CCM 9277.

a) Houbové organismya) Fungal organisms

Kvasinky (tabulka 2) a vláknité askomycety (tabulka 1) použité k testování vzájemných interakcí, pocházejí ze sbírek mikroorganismů CCDBC (Milcom a.s., CZ) a CCF (Karlova univerzita, CZ). A. tahacinus a A. unguis jsou izoláty získané z kontaminovaných pekařských a mléčných výrobků. Stejně jako kmeny CCDBC a CCF, i izoláty byly určeny na základě sekvenování jaderných a nejademých úseků DNA (barkódování) podle (Schoch a kol., 2012; Stiellow a kol., 2015) a doplněny o mikroskopické popisy (Samson a kol, 2010). Kmeny a izoláty kvasinek byly určeny na základě sekvenace 5.8 S rRNA ITS spektra a morfologie kolonii a buněk (Kurtzman a kol, 2011).Yeasts (Table 2) and filamentous ascomycetes (Table 1) used for testing mutual interactions come from the microorganism collections CCDBC (Milcom a.s., CZ) and CCF (Karl's University, CZ). A. tahacinus and A. unguis are isolates obtained from contaminated bakery and dairy products. Like the CCDBC and CCF strains, the isolates were determined based on nuclear and non-nuclear DNA sequencing (barcoding) according to (Schoch et al., 2012; Stiellow et al., 2015) and supplemented with microscopic descriptions (Samson et al., 2010) . Yeast strains and isolates were determined based on 5.8 S rRNA ITS spectrum sequencing and colony and cell morphology (Kurtzman et al, 2011).

Tab. 1 Seznam použitých kmenů a izolátů vláknitých askomycet rodů Penicillium sp., Aspergillus sp.Tab. 1 List of used strains and isolates of filamentous ascomycetes of the genera Penicillium sp., Aspergillus sp.

Aspergillus sp. Aspergillus sp. Akronym Acronym Penicillium sp. Penicillium sp. Akronym Acronym A. fumigatus A. fumigatus CCF3170 CCF3170 P. glahrum P. glahrum CCDBC 312 CCDBC 312 A. penicillioides A. penicillioides CCF1832 CCF1832 P. crustosum P. crustosum CCF 304 CCF 304 A. niger A. niger CCF3264 CCF3264 P. carneum P. carneum CCF 308 CCF 308 A. tahacinus A. tahacinus Izolát VUM VUM isolate P. discolor P. discolor CCDBC 340 CCDBC 340 A. ciharius A. ciharius CCDBC 318 CCDBC 318 P. fimorum P. fimorum CCDBC 339 CCDBC 339 A. versicolor A. versicolor CCDBC 321 CCDBC 321 P. chrysogenum P. chrysogenum CCDBC 311 CCDBC 311 A. unguis A. unguis Izolát VUM VUM isolate A. montevidensis A. montevidensis CCDBC 338 CCDBC 338

-2CZ 309932 B6-2CZ 309932 B6

Tab. 2 Seznam použitých kmenů kvasinekTab. 2 List of yeast strains used

Rod Genus Druh Species Akronym Acronym Wickerhamomyces Wickerhamomyces anomalus anomalous CL8, KV4, WA2, 605, KV3 CL8, KV4, WA2, 605, KV3 Kluyveromyces Kluyveromyces lactis lactis KL6A, 1054 KL6A, 1054 marxianus marxian KM8A, 258, 270 KM8A, 258, 270 Kazcichstcinici Kazcichstcinici pseudohumilis pseudohumilis 3300, CCM 9277 3300, CCM 9277 harnettii harnettii 3301 3301 humilis humilis 3305 3305 unispora unispora 3304,2010 3304, 2010

b) Antifungální testb) Antifungal test

Interakce mezi kvasinkami a vláknitými askomyčetami byly testovány upravenou metodou podle Demirbas a kol. 2017. Za účelem testování byly vláknité askomycety kultivovány metodou přelivu vytemperovaným malt extrakt agarem (MEA, Hi-media, Indie). Takto připravené kultury 10 byly kultivovány při 25 °C, penicilia 5 dní, aspergily 7 dní. Kvasinky byly kultivovány 24 h vYPD bujónu. Vytemperovaný MEA agar byl zaočkován 1% podílem bujónu s kmenem či izolátem kvasinek po 24 h kultivaci a rozlit na Petriho misky. Z Petriho misek s nakultivovanými penicilii a aspergily byly sterilně korkovrtem vyseknuté terčíky (průměr 5 mm). Na každou misku s kmenem kvasinky byly přeneseny dva terčíky od každého druhu penicilia a 15 aspergilu. Misky byly uloženy v 25 °C v termostatu. Radiální růst mycelia byl měřen po 24 h po dobu 5 až 7 dní. Růst mycelia penicilii a aspergilů z terčíků na čistém MEA představoval kontrolní variantu. Výsledky jsou graficky znázorněny na obr. 1 a obr. 2.Interactions between yeast and filamentous ascomycetes were tested using a modified method of Demirbas et al. 2017. For the purpose of testing, filamentous ascomycetes were cultured by the overflow method on tempered malt extract agar (MEA, Hi-media, India). Cultures 10 prepared in this way were cultivated at 25 °C, penicillium for 5 days, aspergillus for 7 days. Yeast was cultured for 24 h in YPD broth. Tempered MEA agar was inoculated with a 1% proportion of broth with a yeast strain or isolate after 24 h of cultivation and poured into Petri dishes. Targets (diameter 5 mm) were sterilely cut out with a corkscrew from Petri dishes with cultured penicillium and aspergillus. Two plates of each species of Penicillium and 15 Aspergillus were transferred to each plate of yeast strain. The dishes were stored at 25 °C in a thermostat. Radial mycelial growth was measured every 24 h for 5 to 7 days. Growth of penicillii and aspergillus mycelia from plates on pure MEA was a control variant. The results are shown graphically in Fig. 1 and Fig. 2.

c) Extracelulámí produkty kvasinekc) Extracellular yeast products

Organické kyselinyOrganic acids

Hodnoty pH byly stanoveny u bujónů (YPD, MEA) a moučných médií zaočkovaných kvasinkami po 24h kultivace pomocí pH metru InoLab pH 720 a elektrody SenTix Sp (WTW, 25 Německo). Profil organických kyselin byl vyhodnocen kapilární isotachoforézou (EA 02, VILLAThe pH values were determined in broths (YPD, MEA) and flour media inoculated with yeast after 24 h of cultivation using a pH meter InoLab pH 720 and a SenTix Sp electrode (WTW, 25 Germany). The profile of organic acids was evaluated by capillary isotachophoresis (EA 02, VILLA

Labeco, Slovakia) a kapilární elektroforézou Agilent CE G7100 (Agilent Technologies, USA) s UV detekcí.Labeco, Slovakia) and capillary electrophoresis Agilent CE G7100 (Agilent Technologies, USA) with UV detection.

Proteiny a peptidyProteins and peptides

Extracelulámí proteiny a peptidy byly izolovány pomocí ultrafiltračních kolonek AMICON 30 MWO (Sigma Aldrich, USA) (Kavková a kol, 2022). Profil extracelulámích peptidů a proteinů byl detekován podle Haider a kol., 2011 metodou Tricine-SDS-PAGE na 15 % a 12 % polyakrylamidovém gelu a zároveň byly stanoveny přímo v bujónu metodou LC-MS ((TimsTOF 35 Pro (Bruker Daltonik, Bremen, Germany) s Ultra-High-Performance Liquid ChromatographyExtracellular proteins and peptides were isolated using AMICON 30 MWO ultrafiltration columns (Sigma Aldrich, USA) (Kavková et al., 2022). The profile of extracellular peptides and proteins was detected according to Haider et al., 2011 by the Tricine-SDS-PAGE method on 15% and 12% polyacrylamide gel, and at the same time they were determined directly in the broth by the LC-MS method ((TimsTOF 35 Pro (Bruker Daltonik, Bremen, Germany) with Ultra-High-Performance Liquid Chromatography

UltiMate 3000 nano UHPLC). Profily stanovené metodou Tricine-SDS-PAGE jsou graficky znázorněny na obr. 3.UltiMate 3000 nano UHPLC). The profiles determined by the Tricine-SDS-PAGE method are shown graphically in Fig. 3.

Zpracování datData processing

Antifungální testy byly opakovány třikrát pro všechny kombinace kvasinek, aspergilů a penicilii.Antifungal tests were repeated three times for all combinations of yeast, aspergillus and penicillium.

Výsledky byly zpracovány v programu Statistica Soft, verze 12.1. metodou analýzy variance s faktoriálním designem při p<0,05<a.The results were processed in the Statistica Soft program, version 12.1. by the method of analysis of variance with factorial design at p<0.05<a.

-3 CZ 309932 B6-3 CZ 309932 B6

Objasnění výkresůClarification of drawings

Vlastnosti kmene podle patentového nároku jsou objasněny v následujících obrázcích. Obr. 1 znázorňuje Inhibiční účinek šesti kmenů z rodu Kazachstania na radiální růst mycelia pěti druhů penicilií. Obr. 2 znázorňuje inhibiční účinek šesti kmenů z rodu Kazachstania na radiální růst mycelia osmi druhů aspergilů. Inhibiční účinek kvasinek je interpretován napříč druhovým spektrem použitých aspergilů a penicilií, zahrnuje tedy interakce s různě citlivými druhy penicilií a aspergilů. Testování antifungálního účinku kvasinek vůči aspergilům a peniciliím ukázalo, že míra inhibice růstu mycelia na MEA s kvasinkou je závislá na druhu a kmenu kvasinky, ale také na druhu penicilia nebo aspergila, které vykazují vůči kvasinkám různou citlivost. Míra inhibice růstu pěti testovaných druhů penicilií prokázala, že kmen CCM 9277 významně zpomaloval vývoj největšího druhového spektra penicilií s průměrnou mírou inhibice radiálního růstu 47 %. V případě inhibice radiálního růstu mycelia osmi druhů aspergilů byla míra inhibice 50 %.The features of the claimed strain are illustrated in the following figures. Giant. 1 shows the inhibitory effect of six strains from the genus Kazachstania on radial mycelial growth of five species of penicillium. Giant. 2 shows the inhibitory effect of six strains from the genus Kazachstania on radial mycelial growth of eight Aspergillus species. The inhibitory effect of yeast is interpreted across the species spectrum of aspergilli and penicillium used, thus including interactions with various sensitive species of penicillium and aspergillus. Testing of the antifungal effect of yeast against Aspergillus and Penicillium showed that the degree of inhibition of mycelial growth on MEA with yeast is dependent on the species and strain of yeast, but also on the species of Penicillium or Aspergillus, which show different sensitivity to yeast. The rate of growth inhibition of the five tested Penicillium species showed that strain CCM 9277 significantly retarded the development of the largest species spectrum of Penicillium with an average rate of radial growth inhibition of 47%. In the case of inhibition of radial mycelial growth of eight Aspergillus species, the inhibition rate was 50%.

Na obr. 3 jsou zobrazeny výsledky screeningu extracelulárních peptidů a proteinů u různých kmenů kvasinek po 24 h kultivaci v YPD bujonu pomocí 15 % Tricine-SDS PAGE. Profil extracelulárních proteinů ukazuje, že kmen K. pseudohumilis CCM 9277, který inhiboval aspergily a penicilia produkuje nejen peptidy, ale i proteiny ve spektru 25 až 50 kDa, které mohou odpovídat například chitinázám (Thery a kol., 2019). Metoda LC-MS prokázala přítomnost různých proteinů (mol. hmotnost 34118,36985, 50727 a 51310 Da) se sekvencí podobnou exo a endo 1,3-beta-glukanázám. Tyto enzymy mají potenciál inhibice růstu vláknitých hub v důsledku štěpení buněčné stěny (Jijakli a kol., 1998).Fig. 3 shows the results of the screening of extracellular peptides and proteins in different yeast strains after 24 h of cultivation in YPD broth using 15% Tricine-SDS PAGE. The profile of extracellular proteins shows that the strain K. pseudohumilis CCM 9277, which inhibited aspergilli and penicillium, produces not only peptides, but also proteins in the spectrum of 25 to 50 kDa, which may correspond, for example, to chitinases (Thery et al., 2019). The LC-MS method demonstrated the presence of different proteins (mol. mass 34118, 36985, 50727 and 51310 Da) with sequences similar to exo and endo 1,3-beta-glucanases. These enzymes have the potential to inhibit the growth of filamentous fungi due to cell wall cleavage (Jijakli et al., 1998).

Na obr. 4 jsou znázorněny výsledky stanovení obsahu organických kyselin v extraktu pšeničné celozrnné mouky(T1700) po fermentaci kmenem Kazachstania pseudohumilis CCM 9277, přičemž A je standard kyselin o koncentraci 5 ppm, B je extrakt pšeničné mouky fermentovaný kmenem CCM 9277, C je nefermentovaný extrakt pšeničné mouky. Testována byla přítomnost těchto organických kyselin: ILA kys. DL-indol-3-mléčná, PLA L-3-fenyl mléčná, OH-PLA DLp-hydroxyfenylmléčná, 2-P5CA 2-pyrrolidon-5-karboxylová, HIPP hippurová, CAP kapronová, SOR sorbová, PAA fenyloctová, SAL salicylová, BENZ benzoová. Kromě tvorby malého množství kyseliny jantarové a octové zjištěné metodou kapilární isotachoforézy (výsledky neuvedeny) nebyla doložena významná tvorba antifungálně účinných organických kyselin kmenem CCM 9277Fig. 4 shows the results of determining the content of organic acids in whole wheat flour extract (T1700) after fermentation by Kazachstania pseudohumilis strain CCM 9277, where A is the acid standard with a concentration of 5 ppm, B is wheat flour extract fermented by strain CCM 9277, C is unfermented wheat flour extract. The presence of the following organic acids was tested: ILA DL-indole-3-lactic acid, PLA L-3-phenyl lactic, OH-PLA DLp-hydroxyphenyl lactic, 2-P5CA 2-pyrrolidone-5-carboxylic acid, HIPP hippuric, CAP caproic, SOR sorbic, PAA phenylacetic, SAL salicylic, BENZ benzoic. Apart from the formation of a small amount of succinic and acetic acid detected by the capillary isotachophoresis method (results not shown), no significant formation of antifungal active organic acids by strain CCM 9277 was documented

Příklady uskutečnění vynálezuExamples of implementation of the invention

Následující příklady provedení kmen podle vynálezu pouze dokládají, ale neomezují.The following examples of embodiments of the strain according to the invention only demonstrate, but do not limit.

Příklad 1Example 1

V jednom provedení vynálezu je kmen ve formě biologicky čisté kultury (monokultura kmene Kazachstania pseudohumilis CCM 9277.In one embodiment of the invention, the strain is in the form of a biologically pure culture (a monoculture of the strain Kazachstania pseudohumilis CCM 9277.

Příklad 2Example 2

V jiném provedení vynálezu je kmen ve formě inaktivovaných buněk biologicky čisté kultury (monokultura kmene Kazachstania pseudohumilis CCM 9277).In another embodiment of the invention, the strain is in the form of inactivated cells of a biologically pure culture (a monoculture of the strain Kazachstania pseudohumilis CCM 9277).

Příklad 3Example 3

V jiném provedení vynálezu je kmen CCM 9277 uchovávaný v lyofilizovaném nebo hluboko mraženém stavu obnoven v některém z bujónů vhodných pro kultivaci kvasinek (přednostně sladový nebo WYD) a kultivovaný při teplotě 25 °C po dobu 18 až 24 hodin. Získaná kultura jeIn another embodiment of the invention, strain CCM 9277 stored in a lyophilized or deep-frozen state is reconstituted in one of the broths suitable for the cultivation of yeast (preferably malt or WYD) and cultured at 25°C for 18 to 24 hours. Acquired culture is

- 4 CZ 309932 B6 v dávce 105 KTJ/g použita k inokulaci směsi mouky a vody. Použít lze mouku pšeničnou, žitnou, špaldovou, pohankovou, ovesnou, ječnou nebo rýžovou či jejich směsi v různém poměru (DY 150 až 250). Takto získaný produkt je v aktivní nebo inaktivované formě použit jako antifungálně účinný preparát do různých typů pekárenských výrobků.- 4 CZ 309932 B6 in a dose of 10 5 KTJ/g used to inoculate a mixture of flour and water. Wheat, rye, spelled, buckwheat, oat, barley or rice flour or their mixtures in different proportions can be used (DY 150 to 250). The product obtained in this way is used in active or inactivated form as an antifungal preparation in various types of bakery products.

Příklad 4Example 4

V jiném provedení vynálezu je kmen CCM 9277 připraven stejným postupem jako v příkladu 3 a zaočkovaná směs je zároveň inokulována bakteriálním kmenem Lactiplantibacillus plantarum CCDM 3018 nebo CCDM 3036 nebo CCDM 3046 v dávce 107 KTJ/g. Zaočkovaná směs je dále zpracována dle pracovního postupu pro jednostupňové vedení kvasu.In another embodiment of the invention, the strain CCM 9277 is prepared by the same procedure as in example 3 and the inoculated mixture is simultaneously inoculated with the bacterial strain Lactiplantibacillus plantarum CCDM 3018 or CCDM 3036 or CCDM 3046 at a dose of 10 7 KTJ/g. The inoculated mixture is further processed according to the work procedure for one-stage fermentation.

Příklad 5Example 5

V jiném provedení vynálezu je kvas připraven stejným postupem jako v příkladu 4, s tím rozdílem, že zaočkovaná směs je dále zpracována dle pracovního postupu pro dvoustupňové vedení kvasu.In another embodiment of the invention, kvass is prepared by the same procedure as in example 4, with the difference that the inoculated mixture is further processed according to the work procedure for two-stage fermentation.

Příklad 6Example 6

V jiném provedení vynálezu je kvas připraven stejným postupem jako v příkladu 4, s tím rozdílem, že zaočkovaná směs je dále zpracována dle pracovního postupu pro třístupňové vedení kvasu.In another embodiment of the invention, the kvass is prepared by the same procedure as in example 4, with the difference that the inoculated mixture is further processed according to the work procedure for three-stage kvass management.

Příklad 7Example 7

V jiném provedení vynálezu je kvas připraven stejným postupem jako v příkladu 4, s tím rozdílem, že pro zlepšení organoleptických vlastností jsou dále přidávány různé kombinace kmenů laktobacilů a laktokoků (CCDM 3032, 3033, 3035, 3037) v dávce 107 KTJ/g a kvasinek (CCDM 3300, 3301 a 3303) v dávce 105 KTJ/g.In another embodiment of the invention, the yeast is prepared by the same procedure as in example 4, with the difference that to improve the organoleptic properties, various combinations of lactobacilli and lactococci strains (CCDM 3032, 3033, 3035, 3037) are added in a dose of 10 7 KTJ/ha of yeast (CCDM 3300, 3301 and 3303) in a dose of 10 5 KTJ/g.

Příklad 8Example 8

V jiném provedení vynálezu je kvas připraven stejným postupem jako v příkladu 5, s tím rozdílem, že pro zlepšení organoleptických vlastností jsou dále přidávány různé kombinace kmenů laktobacilů a laktokoků (CCDM 3032, 3033, 3035, 3037) v dávce 107 KTJ/g a kvasinek (CCDM 3300, 3301 a 3303) v dávce 105 KTJ/g.In another embodiment of the invention, the yeast is prepared by the same procedure as in example 5, with the difference that to improve the organoleptic properties, various combinations of strains of lactobacilli and lactococci (CCDM 3032, 3033, 3035, 3037) are added in a dose of 10 7 KTJ/ha of yeast (CCDM 3300, 3301 and 3303) in a dose of 10 5 KTJ/g.

Příklad 9Example 9

V jiném provedení vynálezu je kvas připraven stejným postupem jako v příkladu 6, s tím rozdílem, že pro zlepšení organoleptických vlastností jsou dále přidávány různé kombinace kmenů laktobacilů a laktokoků (CCDM 3032, 3033, 3035, 3037) v dávce 107 KTJ/g a kvasinek (CCDM 3300, 3301 a 3303) v dávce 105 KTJ/g.In another embodiment of the invention, the yeast is prepared by the same procedure as in example 6, with the difference that to improve the organoleptic properties, various combinations of lactobacilli and lactococci strains (CCDM 3032, 3033, 3035, 3037) are added in a dose of 10 7 KTJ/ha of yeast (CCDM 3300, 3301 and 3303) in a dose of 10 5 KTJ/g.

Příklad 10Example 10

V jiném provedení vynálezu je kvas připravený stejným postupem jako v příkladu 3 až 9, s tím rozdílem, že získaný preparát je použit pro výrobu drobenky nebo zápary.In another embodiment of the invention, kvass is prepared by the same procedure as in examples 3 to 9, with the difference that the preparation obtained is used for the production of crumb or brew.

Příklad 11Example 11

V jiném provedení vynálezu je kvas připravený stejným postupem jako v příkladu 3 až 9, s tím rozdílem, že získaný preparát je použit pro výrobu stabilizovaného kvasu.In another embodiment of the invention, kvass is prepared by the same procedure as in examples 3 to 9, with the difference that the preparation obtained is used for the production of stabilized kvass.

- 5 CZ 309932 B6- 5 CZ 309932 B6

Příklad 12Example 12

V jiném provedení vynálezu je kvas připravený stejným postupem jako v příkladu 3 až 9, s tím rozdílem že, koncentrace antifungálně účinných látek je zvýšena zahuštěním na vakuové odparce nebo sušením.In another embodiment of the invention, kvass is prepared by the same procedure as in examples 3 to 9, with the difference that the concentration of antifungal active substances is increased by concentration on a vacuum evaporator or drying.

ReferenceReference

Coda, R., Cassone, A., Rizzello, C.G., Nionelli, L., Cardinali, G., Gobbetti, M. (2011): Antifungal activity of Wickerhamomyces anomalus and Lactobacillus plantarum during sourdough fermentation: Identification of novel compounds and their effect on long-term storage of wheat bread. Food Microbiol. 33, 243-251.Coda, R., Cassone, A., Rizzello, C.G., Nionelli, L., Cardinali, G., Gobbetti, M. (2011): Antifungal activity of Wickerhamomyces anomalus and Lactobacillus plantarum during sourdough fermentation: Identification of novel compounds and their effect on long-term storage of wheat bread. Food Microbiol. 33, 243-251.

De Souza, ML., Passamaniz, F.R.F., Da Silva Ávila, C.L., Batistaz, L.R., Schvan, R.R., Terreira Silva, C. (2017): Use of wild yeasts as a biocontrol agent against toxigenic fungi and OTA production. Acta scientarium, 39, 349-358.De Souza, ML., Passamaniz, F.R.F., Da Silva Ávila, C.L., Batistaz, L.R., Schvan, R.R., Terreira Silva, C. (2017): Use of wild yeasts as a biocontrol agent against toxigenic fungi and OTA production. Acta scientarium, 39, 349-358.

Freimoser, F.M., Rueda-Meija, M.P., Tilocca, B., Migheli, Q. (2019): Biocontrol yeast: mechanism and applications. World Journal of Microbiology and Biotechnology 35, 1-19.Freimoser, F.M., Rueda-Meija, M.P., Tilocca, B., Migheli, Q. (2019): Biocontrol yeast: mechanism and applications. World Journal of Microbiology and Biotechnology 35, 1-19.

Garnier, L., Valence F., Mounier, J. (2017): Diversity and Control of Spoilage Fungi in Dairy Products: An Update. Microorganisms, 5, 42, 1-33.Garnier, L., Valence F., Mounier, J. (2017): Diversity and Control of Spoilage Fungi in Dairy Products: An Update. Microorganisms, 5, 42, 1-33.

Jijakli MH, Lepoivre P. (1998): Characterization of an Exo-beta-1, 3- Glucanase Produced by Pichia anomala Strain K, Antagonist of Botrytis cinerea on Apples. Phytopathology, 88, 335-343.Jijakli MH, Lepoivre P. (1998): Characterization of an Exo-beta-1, 3- Glucanase Produced by Pichia anomala Strain K, Antagonist of Botrytis cinerea on Apples. Phytopathology, 88, 335-343.

Kavková, M.; Cihlář, J.; Dráb, V.; Bazalová, O.; Dlouhá, Z (2022): The Interactions among Isolates of Lactiplantibacillus plantarum and Dairy Yeast Contaminants: Towards Biocontrol Applications. Fermentation, 8, 14.Kavková, M.; Cilář, J.; Dráb, V.; Bazalova, O.; Dlouhá, Z (2022): The Interactions among Isolates of Lactiplantibacillus plantarum and Dairy Yeast Contaminants: Towards Biocontrol Applications. Fermentation, 8, 14.

Kurtzman, C. P., and C. J. Robnett. (1998): Identification and phylogeny of ascomycetous yeasts from analysis of nuclear large subunit (26S) ribosomal DNA partial sequences. Antonie Leeuwenhoek 73:331 až 371.Kurtzman, C.P., and C.J. Robnett. (1998): Identification and phylogeny of ascomycetous yeasts from analysis of nuclear large subunit (26S) ribosomal DNA partial sequences. Antonie Leeuwenhoek 73:331 to 371.

Matevosyan, L., Bazukyan, I., Trchounian, A. (2020): Antifungal and antibacterial effects of newly created lactic acid bacteria associations depending on cultivation media and duration of cultivation. BMC microbiology, 102 (19): 1-8.Matevosyan, L., Bazukyan, I., Trchounian, A. (2020): Antifungal and antibacterial effects of newly created lactic acid bacteria associations depending on cultivation media and duration of cultivation. BMC microbiology, 102 (19): 1-8.

Ráduly Z, Szabó L, Madar A, Pócsi I, Csernoch L. (2020): Toxicological and Medical Aspects of Aspergillus-Derived Mycotoxins Entering the Feed and Food Chain. Front Microbiol., 10: 2908.Ráduly Z, Szabó L, Madar A, Pócsi I, Csernoch L. (2020): Toxicological and Medical Aspects of Aspergillus-Derived Mycotoxins Entering the Feed and Food Chain. Front Microbiol., 10: 2908.

Udovicki, B., Audenaert, K., De Saeger, S., Rajkovic, A. (2018): Overview on the Mycotoxins incidence in Serbia in the period 2004-2016. Toxins, 10, 279.Udovicki, B., Audenaert, K., De Saeger, S., Rajkovic, A. (2018): Overview on the Mycotoxins incidence in Serbia in the period 2004-2016. Toxins, 10, 279.

Wang, Y., Wu J, L.V. M., Shao, Z., Hungwe, M., Wang, J., Bai, X., Xie, J., Wang, Y., Geng, W. (2021): Metabolism Characteristics of Lactic Acid Bacteria and the Expanding Applications. Food Industry. Frontiers in Bioengineering Biotechnology, 9, 1-19.Wang, Y., Wu J, L.V. M., Shao, Z., Hungwe, M., Wang, J., Bai, X., Xie, J., Wang, Y., Geng, W. (2021): Metabolism Characteristics of Lactic Acid Bacteria and the Expanding Applications. Food Industry. Frontiers in Bioengineering Biotechnology, 9, 1-19.

Claims (6)

PATENTOVÉ NÁROKYPATENT CLAIMS 1. Průmyslový kmen kvasinky Kazachstania pseudohumilis, uložený v České sbírce mikroorganismů Přírodovědecké fakulty Masarykovy univerzity, Kamenice 5, Brno pod číslem 5 9277, který produkuje 1,3 beta glukanázu a další blíže neidentifikované antifungálně aktivní metabolity.1. Industrial yeast strain Kazachstania pseudohumilis, deposited in the Czech Microorganism Collection of the Faculty of Science, Masaryk University, Kamenice 5, Brno under number 5 9277, which produces 1,3 beta glucanase and other unidentified antifungal active metabolites. 2. Použití kmene podle nároku 1 k výrobě preparátu, který obsahuje živé nebo inaktivované buňky nebo jejich části.2. Use of the strain according to claim 1 for the production of a preparation that contains living or inactivated cells or their parts. 3. Použití kmene podle nároku 1 k výrobě kvasu jednostupňovým, dvoustupňovým nebo 10 třístupňovým vedením kvasu.3. Use of the strain according to claim 1 for the production of kvass by one-stage, two-stage or three-stage fermentation. 4. Použití kmene podle nároku 1 k výrobě kvasu, přičemž fermentace probíhá směsí alespoň dvou kmenů mikroorganismů, z nichž jeden je kmen kvasinky Kazachstaniapseudohumilis CCM 9277.4. Use of the strain according to claim 1 for the production of kvass, wherein the fermentation takes place with a mixture of at least two strains of microorganisms, one of which is the Kazachstaniapseudohumilis CCM 9277 yeast strain. 5. Použití kmene podle nároku 1 k výrobě drobenky, zápary nebo stabilizovaného kvasu.5. Use of the strain according to claim 1 for the production of crumb, brew or stabilized kvass. 6. Použití kmene podle kteréhokoliv z nároků 2 až 5, kde preparát, kvas nebo drobenka slouží jako 15 náhrada konzervantů do těsta pro přípravu toastového chleba a jiných druhů pekárenských výrobků.6. Use of the strain according to any one of claims 2 to 5, where the preparation, kvass or crumb serves as a substitute for preservatives in the dough for the preparation of toasted bread and other types of bakery products.
CZ2023-69A 2023-02-21 2023-02-21 Strain of the Kazachstania pseudohumilis CCM 9277 yeast producing antifungally effective metabolites usable in production of bakery products CZ202369A3 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CZ2023-69A CZ202369A3 (en) 2023-02-21 2023-02-21 Strain of the Kazachstania pseudohumilis CCM 9277 yeast producing antifungally effective metabolites usable in production of bakery products

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CZ2023-69A CZ202369A3 (en) 2023-02-21 2023-02-21 Strain of the Kazachstania pseudohumilis CCM 9277 yeast producing antifungally effective metabolites usable in production of bakery products

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ309932B6 true CZ309932B6 (en) 2024-02-07
CZ202369A3 CZ202369A3 (en) 2024-02-07

Family

ID=89766921

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ2023-69A CZ202369A3 (en) 2023-02-21 2023-02-21 Strain of the Kazachstania pseudohumilis CCM 9277 yeast producing antifungally effective metabolites usable in production of bakery products

Country Status (1)

Country Link
CZ (1) CZ202369A3 (en)

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2017060230A1 (en) * 2015-10-06 2017-04-13 Puratos Nv Leavening agents

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2017060230A1 (en) * 2015-10-06 2017-04-13 Puratos Nv Leavening agents

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
JACQUES, NOÉMIE, ET AL.: "Three novel ascomycetous yeast species of the Kazachstania clade, Kazachstania saulgeensis sp. nov., Kazachstania serrabonitensis sp. nov. and Kazachstania australis sp. nov. ...", INTERNATIONAL JOURNAL OF SYSTEMATIC AND EVOLUTIONARY MICROBIOLOGY, vol. 66, pages 5192 - 5200, ISSN: 1466-5026 *
KORCARI, DEA, ET AL.: "Physiological performance of Kazachstania unispora in sourdough environments", WORLD JOURNAL OF MICROBIOLOGY AND BIOTECHNOLOGY, vol. 37, no. 5, pages 88 - 96, XP037456585, ISSN: 0959-3993, DOI: 10.1007/s11274-021-03027-0 *
WITTWER, ANNA E., ET AL.: "Kazachstania humilis", TRENDS IN MICROBIOLOGY, vol. 30, no. 10, pages 1012 - 1013, XP087178538, ISSN: 0966-842X, DOI: 10.1016/j.tim.2022.05.007 *
ZHOU, NERVE, ET AL.: "Kazachstania gamospora and Wickerhamomyces subpelliculosus: Two alternative baker´s yeasts in the modern bakery", INTERNATIONAL JOURNAL OF FOOD MICROBIOLOGY, vol. 250, pages 45 - 58, XP085007941, ISSN: 0168-1605, DOI: 10.1016/j.ijfoodmicro.2017.03.013 *

Also Published As

Publication number Publication date
CZ202369A3 (en) 2024-02-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Walker Pichia anomala: cell physiology and biotechnology relative to other yeasts
Rouse et al. Lactic acid bacteria with potential to eliminate fungal spoilage in foods
Coda et al. Antifungal activity of Wickerhamomyces anomalus and Lactobacillus plantarum during sourdough fermentation: identification of novel compounds and long-term effect during storage of wheat bread
Morin-Sardin et al. Effect of temperature, pH, and water activity on Mucor spp. growth on synthetic medium, cheese analog and cheese
Amoa‐Awua et al. The contribution of moulds and yeasts to the fermentation of ‘agbelima’cassava dough
Sadeghian et al. Post harvest biological control of apple bitter rot by soil-borne actinomycetes and molecular identification of the active antagonist
Onilude et al. Inhibition of aflatoxin-producing aspergilli by lactic acid bacteria isolates from indigenously fermented cereal gruels
CN104320980B (en) Protective foods containing pediococcus acidilactici J9 and its preparation method
Nora et al. Antifungal activity of newly isolates of lactic acid bacteria
Laitila et al. Yeasts isolated from industrial maltings can suppress Fusarium growth and formation of gushing factors
CN107788517B (en) Method for enhancing enzyme efficacy by using lactobacillus bulgaricus
Massawe et al. Yeasts and lactic acid bacteria coffee fermentation starter cultures
Ramos-Pereira et al. Antifungal activity of lactic acid bacteria isolated from milk against Penicillium commune, P. nordicum, and P. verrucosum
Kıvanc et al. Screening of lactic acid bacteria for antifungal activity against fungi.
Moure et al. Characterization of kefir yeasts with antifungal capacity against Aspergillus species
CN114854622A (en) Lactobacillus plantarum with broad-spectrum activity of inhibiting mold and pathogenic bacteria and capable of producing multiple antibacterial metabolites and application of lactobacillus plantarum
Angeli et al. Production of Ampelomyces quisqualis conidia in submerged fermentation and improvements in the formulation for increased shelf-life
Ström Fungal inhibitory lactic acid bacteria: characterization and application of Lactobacillus plantarum MiLAB 393
CZ309932B6 (en) A strain of the Kazachstania pseudohumilis CCM 9277 yeast producing antifungally effective metabolites useable in the production of bakery products
Khusro et al. Enhancement of anti-tubercular activity and biomass of fermented food associated Staphylococcus hominis strain MANF2 using Taguchi orthogonal array and Box-Behnken design
SE513894C2 (en) Procedure for airtight storage of moist grain in the presence of a biocontrol agent
Stanzer et al. Diversity of lactic acid bacteria on organic flours and application of isolates in sourdough fermentation
US20210300835A1 (en) A Bacterial Composition Capable of Degrading Complex Carbohydrates
Sicuia et al. Antifungal action of lactic acid bacteria isolated from plant materials against mycotoxigenic fungi.
Ström Fungal inhibitory lactic acid bacteria