CZ303612B6 - Sloucenina pro fotodynamickou inaktivaci soucasne grampozitivních bakterií, gramnegativních bakterií a patogenních kvasinek, na bázi derivátu ftalocyaninu, a pouzití této slouceniny - Google Patents
Sloucenina pro fotodynamickou inaktivaci soucasne grampozitivních bakterií, gramnegativních bakterií a patogenních kvasinek, na bázi derivátu ftalocyaninu, a pouzití této slouceniny Download PDFInfo
- Publication number
- CZ303612B6 CZ303612B6 CZ20100628A CZ2010628A CZ303612B6 CZ 303612 B6 CZ303612 B6 CZ 303612B6 CZ 20100628 A CZ20100628 A CZ 20100628A CZ 2010628 A CZ2010628 A CZ 2010628A CZ 303612 B6 CZ303612 B6 CZ 303612B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- gram
- phthalocyanine
- compound
- acid
- positive
- Prior art date
Links
- IEQIEDJGQAUEQZ-UHFFFAOYSA-N phthalocyanine Chemical class N1C(N=C2C3=CC=CC=C3C(N=C3C4=CC=CC=C4C(=N4)N3)=N2)=C(C=CC=C2)C2=C1N=C1C2=CC=CC=C2C4=N1 IEQIEDJGQAUEQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 47
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims abstract description 28
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 title claims abstract description 20
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 title claims abstract description 17
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 title claims abstract description 14
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 title claims abstract description 11
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 31
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 claims abstract description 14
- 235000015165 citric acid Nutrition 0.000 claims abstract description 11
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 claims abstract description 9
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 claims abstract description 8
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 claims abstract description 7
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 claims abstract description 5
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 claims abstract description 5
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 claims abstract description 4
- 229940124530 sulfonamide Drugs 0.000 claims description 22
- 150000003456 sulfonamides Chemical class 0.000 claims description 17
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 claims description 6
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 claims description 5
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 5
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims 1
- -1 organic acid salt Chemical class 0.000 abstract description 9
- IIACRCGMVDHOTQ-UHFFFAOYSA-N sulfamic acid Chemical compound NS(O)(=O)=O IIACRCGMVDHOTQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 239000003504 photosensitizing agent Substances 0.000 description 27
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 12
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 12
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 12
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 12
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 10
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 9
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 9
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 9
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 9
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 8
- 238000000034 method Methods 0.000 description 8
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 7
- 241000222122 Candida albicans Species 0.000 description 6
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 6
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 6
- XTHPWXDJESJLNJ-UHFFFAOYSA-N chlorosulfonic acid Substances OS(Cl)(=O)=O XTHPWXDJESJLNJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000012065 filter cake Substances 0.000 description 6
- FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N thionyl chloride Chemical compound ClS(Cl)=O FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 5
- 239000003642 reactive oxygen metabolite Substances 0.000 description 5
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 5
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 4
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 4
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 description 4
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 4
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- KEQGZUUPPQEDPF-UHFFFAOYSA-N 1,3-dichloro-5,5-dimethylimidazolidine-2,4-dione Chemical compound CC1(C)N(Cl)C(=O)N(Cl)C1=O KEQGZUUPPQEDPF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940095731 candida albicans Drugs 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 3
- 229940093915 gynecological organic acid Drugs 0.000 description 3
- 239000005457 ice water Substances 0.000 description 3
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 3
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 3
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- 238000009631 Broth culture Methods 0.000 description 2
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- RKFMOTBTFHXWCM-UHFFFAOYSA-M [AlH2]O Chemical compound [AlH2]O RKFMOTBTFHXWCM-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- QWPPOHNGKGFGJK-UHFFFAOYSA-N hypochlorous acid Chemical compound ClO QWPPOHNGKGFGJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 2
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- RLDWIFDMZUBMGW-UHFFFAOYSA-N 29h,31h-phthalocyanine, disodium salt Chemical compound [Na+].[Na+].C12=CC=CC=C2C(N=C2[N-]C(C3=CC=CC=C32)=N2)=NC1=NC([C]1C=CC=CC1=1)=NC=1N=C1[C]3C=CC=CC3=C2[N-]1 RLDWIFDMZUBMGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001478240 Coccus Species 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N Dioxygen Chemical compound O=O MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000194033 Enterococcus Species 0.000 description 1
- 206010017533 Fungal infection Diseases 0.000 description 1
- 241000108056 Monas Species 0.000 description 1
- 208000032234 No therapeutic response Diseases 0.000 description 1
- 229920002873 Polyethylenimine Polymers 0.000 description 1
- 241000588767 Proteus vulgaris Species 0.000 description 1
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 1
- SMDBWGNPNRLXOA-UHFFFAOYSA-N [Zn].OS(Cl)(=O)=O Chemical compound [Zn].OS(Cl)(=O)=O SMDBWGNPNRLXOA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000843 anti-fungal effect Effects 0.000 description 1
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- 229940072107 ascorbate Drugs 0.000 description 1
- 238000013142 basic testing Methods 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 230000001427 coherent effect Effects 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 238000013401 experimental design Methods 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 239000002324 mouth wash Substances 0.000 description 1
- 229940051866 mouthwash Drugs 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 229940007042 proteus vulgaris Drugs 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 239000004065 semiconductor Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 125000000565 sulfonamide group Chemical group 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N55/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators, containing organic compounds containing elements other than carbon, hydrogen, halogen, oxygen, nitrogen and sulfur
- A01N55/02—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators, containing organic compounds containing elements other than carbon, hydrogen, halogen, oxygen, nitrogen and sulfur containing metal atoms
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N59/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing elements or inorganic compounds
- A01N59/16—Heavy metals; Compounds thereof
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Agronomy & Crop Science (AREA)
- Pest Control & Pesticides (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Dentistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Predmetem vynálezu je sloucenina na bázi derivátu ftalocyaninu pro fotodynamickou inaktivaci soucasne grampozitivních bakterií, gramnegativních bakterií a patogenních kvasinek, která je tvorena alespon jednou solí organické kyseliny sulfonamidického typu derivátu ftalocyaninu, obecného vzorce I, pricemz organická kyselina je vybraná ze skupiny kyselina askorbová, kyselina mlécná, kyselina citronová.
Description
Slouče i pro fotodynamickou inaktivací současně gram pozitivních bakterií, gram negativních kterií a patogenních kvasinek, na bázi derivátu ftalocyaninu, a použití této sloučeniny
Oblast niky
Vynále ? týká nové sloučeniny pro fotodynamickou inaktivací současně grampozitivních i gramri ívních patogenních bakterií a také kvasinek (fotosenzitizátoru), ve všech aerobních prostřev , umožňujících přístup světla, fotodynamickou metodou, a dále se týká použití této sloučen
Dosavai stav techniky
Infekční lemocnění patogenními bakteriemi jak gram pozitivním i tak gram negativním i jsou v souča:' době léčena v humánní i veterinární medicíně trvale vyvíjenými chemoterapeutiky, často su lamidického typu, nebo stále sofistikovanějšími antibiotiky, jejichž počet a obtížnost způsobu pravý neustále vzrůstá. Úspěšnost terapeutického zákroku těmito léčivy na zasaženém organizn je však v mnoha případech komplikována malou či žádnou terapeutickou odpovědí, způsober i zpravidla postupně se vyvíjející rezistencí patogenních bakterií proti uvedeným léčivům. Obv bná situace nastává při kvasinkových infekcích, proti kterým jsou z podobných důvodů také v> íjeny stále novější typy léčiv. Z uvedených důvodů jsou hledány nové postupy účinné likvidace patogenních bakterií a kvasinek, které by omezily či úplně vyloučily vznik rezistence těchto mikroorganizmů.
Tomuto požadavku vyhovuje fotodynamická metoda, při které stopová množství vhodné účinné látky (fotosenzitizátoru), aplikovaná ve formě vodného roztoku na infikované místo, či do infikovaného vodného prostředí, za současného působení vzdušného kyslíku a denního či umělého světla vhodné vlnové délky, generují v terapeuticky postačujících množstvích různé reaktivní formy kyslíku (ROS), jakými jsou singletní kyslík, hydroxylové a kyslíkové radikály. Tyto reaktivní formy kyslíku jsou vlastním účinným prostředkem, který spolehlivě a rychle usmrcuje jak patogenní mikroorganizmy, tak i kvasinky. Vznik rezistentních bakteriálních kmenů vůči této terapii je nemožný, neboť mikroorganizmy nejsou schopny vypěstovat si rezistenci (obdoba tzv, na kyslíku závislého nitrobuněčného zabíjení mikrobů pohlcených buňkami lidského imunitního systérr*i i \
Vhodnými fotosenzitizátory pro uvedenou fotodynamickou metodu mohou například být vodorozpustné ftalocyaninové deriváty, popisované v americkém patentu US 4 318 883, Tento dokument popisuje obecně způsob boje proti mikroorganizmům v nebo na organických nebo anorganických substrátech a způsob ochrany těchto substrátů proti napadení mikroorganizmy sloučeninami ftalocyaninů rozpustnými ve vodě, za přítomnosti kyslíku a vody a při současném ozařování viditelným a/nebo infračerveným světlem.
V popisu patentu jsou uvedeny i výsledky mikrobiologického hodnocení fotodynamické účinnosti níže uvedených derivátů ftalocyaninu obecných vzorců:
H2Pc - bezkovový ftalocyanin
MePc - kovový ftalocyanin
V příkladech provedení jsou konkrétně uvedeny a hodnoceny následující fotosenzitizátory:
| Fotosenzitizátor | Vzorec ftalocyaninu |
| a | H2Pc(SO3H)2 |
| b | ZnPc(SO3H)2 |
| c | ZnPc(SO3H)4 |
| d | C1A1Pc(SO3H)2 |
| e | CaPc(SO3NH4)2 a CaPc(SO3H)3^ |
| f | MgPc(SO3NH4)2 a MgPc(SO3H)3^ |
| g | ZnPc[SO2NHCH2CH2CH2Nřr(CH3hb^ CH3COO“ |
| h | FePcCSOjHfc a FePc(SO3H)3 |
Ftalocyaninové fotosenzitizátory a až h vykázaly dle citovaného patentu dobou fotodynamickou účinnost pouze proti grampozitivním kmenům bakterií Staphylococcus aureus SG 511, Staphylo10 coccus aureus ATCC 6538 a Streptococcus (nově Enterococcus) faecalis, varieta zymogenes NCTC 5957.
Ftalocyaninový fotosenzitizátor d vykázal dle citovaného patentu velmi dobrou fotodynamickou účinnost pouze proti gramnegativním kmenům bakterií Escherichia coli NCTC 8196, Pseudo15 monas aerugirtosa ATCC 15442 a Próteus vulgaris ATCC 6896.
Fotodynamická účinnost uvedených fotosenzitizátorů proti patogenním kvasinkám není v citovaném patentu popisována vůbec.
zo Nevýhoda známých sloučenin pro fotodynamickou inaktivaci mikroorganizmů na bází derivátů ftalocyaninu spočívá v tom, že nemají současný efektivní účinek na grampozitivní a gramnegativní patogenní bakterie a zároveň i na patogenní kvasinky.
Úkolem vynálezu je proto vytvoření takové sloučeniny, která by odstraňovala výše uvedené nedostatky a byla by vhodným univerzálním fotosenzitizátorem pro inaktivaci patogenních mikroorganizmů.
Podstata vynálezu
Uvedené nevýhody odstraňuje sloučenina podle vynálezu (fotosenzitizátor) na bázi derivátu ftalocyaninu, vyvinutá na základě hypotézy spočívající v předpokladu, že k účinné fotodynamic10 ké likvidaci jakéhokoliv mikroorganizmu je nezbytné, aby předmětný ftalocyaninový fotosenzitizátor byl především substantivní ke vnější stěně tohoto mikroorganizmu, byl schopen se na ni vázat a v podstatě ji vybarvovat. Tato skutečnost zajistí, že reaktivní formy kyslíku, vznikající interakcí ftalocyan i nového fotosenzitizátoru se světlem, jsou generovány bezprostředně na vnější stěně fotosenzitizátorem vybarveného mikroorganizmu a mají možnost na něj účinně působit, is Deriváty ftalocyaninu splňující tento předpoklad mají s výhodou základní strukturu molekuly sulfonamidického typu (vzorec I), přičemž konstituce sulfonamidických řetězců je uspořádána tak, aby bylo možné tyto sulfonamidické ftalocyaninové sloučeniny snadno převádět na formy vodorozp ústných solí pomocí cíleně vybraných organických kyselin (vzorec II), které mimo dobré rozpustnosti takto připravených solí sulfonamidických ftalocyaninu ve vodě zajistí i jejich požadovanou substantivitu k vnější stěně jak patogenních gram pozitivních, tak gram negativních bakterií a patogenních kvasinek. Konstituci popsaných fotosenzitizátorů založených na sulfonamidických derivátech ftalocyaninu ozřejmují následující obecné vzorce I a II:
MePc
-SO2NH-(CH2)h-N r2 (I)
0,1-4
Sulfonamidický typ derivátu ftalocyaninu nerozpustný ve vodném prostředí, kde:
Me = H2, HOA1, Zn,
Pc = ftalocyaninový skelet, n = i az o,
Ri, R2 jsou ethylové skupiny
MePc
-so2nh-(ch^-n;
r2
0,1-4 (II)
Sloučenina pro fotodynamickou inaktivaci současně grampozitivních bakterií, gramnegativníeh bakterií a patogenních kvasinek podle vynálezu, kterou tvoří sůl organické kyseliny sulfonamidického typu derivátu ftalocyaninu obecného vzorce I, rozpustná ve vodném prostředí, substan40 tivní k vnější obálce mikroorganizmu, kde:
Me = H2, HOAI, Zn,
Pc = ftalocyaninový skelet,
- j CZ 303612 B6 η = 1 až 6,
Ri, Rt jsou ethylové skupiny
A“ = anion alespoň jedné organické kyseliny ze skupiny kyselin askorbové, mléčné, citrónové.
Sloučenina pro fotodynamickou inaktivaci současně grampozitivních bakterií, gramnegativních bakterií a patogenních kvasinek se připraví způsobem, při kterém se sulfonamidický typ derivátu ftalocyaninu obecného vzorce I převede na alespoň jednu sůl organické kyseliny, ze skupiny kyseliny askorbové, mléčné nebo citrónové, která je rozpustná ve vodném či d i methyl sul fox ídovém prostředí, podle obecného vzorce II. Může se jednat i o směsi volí organických kyselin.
Ve výhodném způsobu přípravy sloučeniny podle vynálezu se sulfonamidický typ derivátů ftalocyaninu nejprve suspenduje ve vodném roztoku organické kyseliny, kde za míchání a zahřívání dojde k rozpuštění sulfonamidu, který je po následné filtraci odpařen na vodní lázni k suchu.
Sloučenina podle vynálezu se vyznačuje dobrou rozpustností ve vodném či dimethylsulfoxidovém prostředí, a zároveň dobrou afinitou k vnějším obalovým membránám mikroorganizmů, podporovanou zejména molekulárními konstitucemi těchto solí sulfonamidických ftalocyan i nových derivátů a organických kyselin. Kombinace dobré rozpustnosti a afinity zajišťuje bezprostřední kontakt fotodynamicky generovaných reaktivních forem kyslíku s cílovými mikroorganizmy, patogenními gram pozitiv ním i i gramnegativními bakteriemi a patogenními kvasinkami, a zvyšuje tak inaktivační účinek fotodynamického efektu.
Výhoda sloučeniny podle vynálezu tedy spočívá v tom, že vykazuje současně vysokou účinnost proti všem hlavním skupinám patogenních mikroorganizmů, oproti starším známým přípravkům, vůči kterým byly některé skupiny (kmeny) patogenních mikroorganizmů rezistentní.
Příklady provedení vynálezu
Vynález blíže objasňují následující příklady výchozích derivátů ftalocyaninu a syntetických postupů, vedoucích k jednotlivým příkladům provedení sloučenin podle vynálezu (vodorozpustným ftalocyan i novým fotosenzitizátorům) a dále příklady popisující způsoby mikrobiologického hodnocení jejich fotodynamického účinku na vybrané patogenní kmeny grampozitivních a gramnegativních bakterií jakož i patogenních kvasinek.
Příklad 1 - derivát ftalocyaninu pro přípravu fotosenzitizátoru g disodného ftalocyaninu bylo za míchání postupně nadávkováno do 64 ml kyseliny chlorsulfonové. Vzniklá směs byla během 15 minut vyhřátá na 100 °C a při této teplotě míchána 30 minut. Poté byla reakční směs ochlazena na 85 °C a při této teplotě pod zpětným chladičem přikapáno 34 ml thionylchloridu a reakční směs dále zahřívána 2 hodiny na 100 °C. Po ochlazení byla reakční směs za míchání pozvolna převedena do směsi 1500 g vody a 1500 g ledu. Vzniklá suspenze byla zfiltrována a filtrační koláč promyt ledovou vodou do vymizení kyselé reakce. Bylo tak získáno 31 g vodné pasty sulfochloridu bezkovového ftalocyaninu. Ve vzorku usušené pasty bylo stanoveno 11,1 % hydrolyzovatelného chloru.
Příklad 2 - derivát ftalocyaninu pro přípravu fotosenzitizátoru g hydroxy hlinitého ftalocyaninu bylo za míchání postupně nadávkováno do 64 ml kyseliny chlorsulfonové. Vzniklá směs byla během 15 minut vyhřátá na 100 °C a při této teplotě míchána minut. Poté byla reakční směs ochlazena na 85 °C a při této teplotě pod zpětným chladičem přikapáno 34 ml thionylchloridu a reakční směs dále zahřívána 2 hodiny na 100 °C. Po ochlazení
-4CZ 303612 B6 byla reakční směs za míchání pozvolna převedena do směsi 1500 g vody a 1500 g ledu. Vzniklá suspenze byla zfiltrována a filtrační koláč promyt ledovou vodou do vymizení kyselé reakce. Bylo tak získáno 115 g vodné pasty sulfochloridu hydroxyhlinitého ftalocyaninu. Ve vzorku usušené pasty bylo stanoveno 6,65 % hydrolyzovatelného chloru.
Příklad 3 — derivát ftalocyaninu pro přípravu fotosenzitizátoru g zinečnatého ftalocyaninu bylo za míchání postupně nadávkováno do 64 ml kyseliny chlorio sulfonové. Vzniklá směs byla během 15 minut vyhřátá na 100 °C a při této teplotě míchána minut. Poté byla reakční směs ochlazena na 85 °C a pri této teplotě pod zpětným chladičem přikapáno 34 ml thionylchloridu a reakční směs dále zahřívána 2 hodiny na 100 °C. Po ochlazení byla reakční směs za míchání pozvolna převedena do směsi 1500 g vody a 1500 g ledu. Vzniklá suspenze byla zfiltrována a filtrační koláč promyt ledovou vodou do vymizení kyselé reakce.
Bylo tak získáno 105 g vodné pasty sulfochloridu ftalocyaninu zinku. Ve vzorku usušené pasty bylo stanoveno 6,9 % hydrolyzovatelného chloru.
Příklad 4 — derivát ftalocyaninu pro přípravu fotosenzitizátoru g vodné pasty sulfochloridu bezkovového ftalocyaninu, připravené dle příkladu 1, bylo dokonale rozmícháno v 50 ml vody při teplotě 19 °C. Do takto připravené směsi bylo najednou nalito 20 g AJV-diethylaminopropylarninu, čímž teplota vzrostla na 31 °C. Vzniklá směs byla za míchání zahřívána 5 hodin pri 60 °C pod zpětným chladičem a poté zfiltrována. Filtrační koláč byl pro25 myt vodou a sušen pri 80 °C do konstantní hmotnosti. Bylo tak získáno 10,2 g produktu následující konstituce:
Z xC2H5 \
H2Pc4sO2NHCH2CH2CH2Nx \ c2h5 /
2-4
Příklad 5 - vodorozpustný fotosenzitizátor ’ π e. i * v’ '1 11 «Ί 1 1 Λ 1 . (_ ________
I g bUllOllilIIllUU υ«,κυνυναΐυ I LdlUVJ dli 11IU pi ijjirt VVIIVIIO Uiv pí irviciviU τ uj iv oujpvuuu * wnv v 30 ml a z byrety byl postupně přidáván 1M roztok kyseliny citrónové. Po přidání 3,5 ml tohoto 35 roztoku došlo k rozpuštění sulfonamidu, který byl po klerační filtraci odpařen na vodní lázni k suchu. Bylo tak získáno 1,13 g citrátu sulfonamidu bezkovového ftalocyaninu následující konstituce:
H2Pc c2h5
SO2NHCH2CH2CH2Nt
H CzH5 A'
2-4
A = anion kyseliny citrónové
Příklad 6 — derivát ftalocyaninu pro přípravu fotosenzitizátoru
100 g vodné pasty sulfochloridu hydroxyhlinitého ftalocyaninu, připravené dle příkladu 2, bylo dokonale rozmícháno v 50 ml vody pri teplotě 19 °C. Do takto připravené směsi bylo najednou nalito 20 g Λ’,Λ'-diethylaminopropylaminu, čímž teplota vzrostla na 36 °C. Vzniklá směs byla za
- 5 CZ 303612 B6 míchání zahřívána 5 hodin při 60 °C pod zpětným chladičem a poté zfiltrována. Filtrační koláč byl promyt vodou a sušen při 80 °C do konstantní hmotnosti. Bylo tak získáno 19,8 g sulfonamidu hydroxyh Hnitého ftalocyaninu následující konstituce:
HOAlPc
SO2NHCH2CH2CH2N £2^5
CzHg
2-4
Příklad 7 - vodorozpustný fotosenzitizátor
2 g sulfonamidu hydroxy hlinitého ftalocyaninu připraveného dle příkladu 6 bylo suspendováno ve 20 ml vodného roztoku obsahující 0,88 g kyseliny citrónové a za míchání zahříváno na 70 °C až došlo k rozpuštění sulfonamidu, který byl po klerační filtraci odpařen na vodní lázni k suchu. Bylo tak získáno 1,82 g citrátu sulfonamidu hydroxyh Hnitého ftalocyaninu následující konstituce:
HOAlPc
C2H5
SO2NHCH2CH2CH2N+ \ H C2Hs
A'
2-4
A = anion kyseliny citrónové
Příklad 8 - derivát ftalocyaninu pro přípravu fotosenzitizátoru
90 g vodné pasty sulfochloridu zinečnatého ftalocyaninu, připravené dle příkladu 3, bylo dokonale rozmícháno v 50 ml vody při teplotě 19 °C. Do takto připravené směsi bylo najednou nalito 20 g ACV—diethylaminopropylaminu. čímž teplota vzrostla na 36 °C. Vzniklá směs byla za míchání zahřívána 5 hodin při 60 °C pod zpětným chladičem a poté zfiltrována. Filtrační koláč byl promyt vodou a sušen při 80 °C do konstantní hmotnosti. Bylo tak získáno 16,8 g sulfonamidu zinečnatého ftalocyaninu následující konstituce:
ZnPc-ÍsO2NHCH2CH2CH2N' 2 5 \ c2h5
Příklad 9 - vodorozpustný fotosenzitizátor g sulfonamidu zinečnatého ftalocyaninu, připraveného dle příkladu 8, bylo suspendováno ve 20 ml vodného roztoku obsahující 0,88 g kyseliny citrónové a za míchání zahříváno na 70 °C až došlo k rozpuštění sulfonamidu, který byl po klerační filtraci odpařen na vodní lázni k suchu.
Bylo tak získáno 1,74 g citrátu sulfonamidu zinečnatého ftalocyaninu následující konstituce:
-6CZ 303612 B6
ZnPc
SO2NHCH2CH2CH2N \ H +C2 H5 c2h5
2-4
A' = anion kyseliny citrónové
Příklad 10 - vodorozpustný fotosenzitizátor g sulfonamidu zinečnatého ftalocyaninů, připraveného dle příkladu 8, bylo suspendováno ve 20 ml vodného roztoku obsahující 0,88 g kyseliny askorbové a za míchání zahříváno na 70 °C, až došlo k rozpuštění sulfonamidu, který byl po klerační filtraci odpařen na vodní lázni k suchu. Bylo tak získáno 1,74 g askorbátu sulfonamidu zinečnatého ftalocyaninů následující konstituce:
io
ZnPc c2h5
SO2NHCH2CH2CH2Nt V H C2H5
2-4
A’
A' - anion kyseliny askorbové
Příklad 11 - Testování fotoinaktivační schopnosti sloučenin podle vynálezu: Mikrobiálnímu tes15 tování byly podrobeny sloučeniny (fotosenzitizátory) připravené dle výše popsaných příkladů č. 7, 9 a 10.
Schéma pokusu bylo upraveno podle Tegose a kol,: Protease-stable polycationic photosenzitizer conjugates between polyethyleneimine and chlorine for broad-spectrum antimicrobial photo:— —k 4—... sn/Λλ i/ím-ijin nnoM
Pro základní testování sloučenin byly zvoleny bakteriální kmeny Staphylococcus aureus 5887, Escherichia coli 5276 a Candida albicans 6258 z České národní sbírky typových kultur při Státním zdravotním ústavu v Praze.
Laser
Při pokusech byl použit laserový systém MAESTRO/CCM (MediCom, a.s.). Skládá se ze stolní řídicí jednotky a laserové sondy (aktivní laserové prostředí tvoří polovodičová laserová dioda
AlGalnP), která vyzařuje koherentní monochromatické světlo vlnové délky 670 nm odpovídající absorpčnímu spektru ftalocyaninů a má maximální výkon 80 mW.
Příprava kmenů
Testované bakteriální kmeny Staphylococcus aureus 5887 a Escherichia coli 5276 a kvasinka
Candida albicans 6258 byly naočkovány do BHI bujónu (Brain-Heart Bouillon, BioMerieux) a kultivovány 18 až 24 hodin při 36 °C. Po pomnožení byla 18 až 24 - hodinová kultura přeočkována v poměru 1 : 100 do čerstvého BHI bujónu a kultivována do dosažení mid-log fáze růstu.
Pro dosažení standardní velikosti inokula byla denzita bujónové kultury ověřována na denzito- 7 CZ 303612 B6 metru, v experimentech byla používána hustota inokula 108 až 109 cfu/ml. Následně byla bujónová kultura odstředěna při 5000 ot./l 0 min, poté odsát supematant a sediment byl resuspendován ve sterilním fosfátovém pufru (PBS, pH 7,2) na hodnotu výchozí denzity.
Příprava sloučenin
Byly připraveny pracovní koncentrace sloučenin 2, 4, 8, 16 mg/1. Poté následovala inkubace 1 ml bakteriální kultury s 1 ml testovaného ftalocyaninu v poměru 1 : 1 tak, že konečné testované koncentrace ftalocyaninu byly 1 mg/1, 2 mg/1,4 mg/1 a 8 mg/1; po 30 minutách působení pri pokojové ío teplotě ve tmě byla opět testovaná suspenze odstředěna (5000 ot./l0 min), odsát supematant a přidán sterilní fosfátový pufr.
Ozařování laserem i? 100 μί bakteriální kultury bylo přeneseno do jamky mikrotitrační destičky a ozářeno laserovou sondou dávkou světla 20 J/cm2 a 40 J/cm2 ze vzdálenosti 2 až 3 mm.
Hodnocení bakterie i dní ho účinku zo Po ozáření bylo z jamky mikrotitrační destičky odsáto 100 μί testované kultury a přeneseno do 1. zkumavky ředící řady - pro každou testovanou koncentraci a dávku světla. Z každého ředění byly vyočkovány dva vzorky po 100 μί na Petriho misku s Mueller-Hinton 2 agarem a Saubouraud agarem (BioMerieux) a po 24-hodinové inkubaci spočítány narostlé kolonie testovaného bakteriálního kmene (v ředění, ve kterém se počet vyrostlých kolonií pohyboval v rozmezí 20 až 200).
Látky byly testovány ve dvou nezávislých pokusech, součástí pokusů byly i kontrolní testy pro zjištění vlivu samotné látky na bakteriální kulturu bez ozáření a také pro vyhodnocení vlivu samotného ozáření bez přítomnosti testované sloučeniny. Účinnost foto inaktivace byla hodnocena porovnáním počtu viabilních bakterií po ovlivnění bakteriální kultury ftalocyaninem a ozářením laserem k počtu bakterií v kontrolních vzorcích (survival fraction). Výsledky byly zpracovány statisticky.
Za účinné, antimikrobiálně působící látky podle literatury jsou považovány látky snižující počet bakterií minimálně o 3 řády.
Výsledky:
| Sloučenina | Frakce viabilních buněk v pokusu s koncentrací FTC 8 mg/1 (%) | |||||
| Staphylococcus aureus | Escherichia coli | Candida albicans | ||||
| 20 J/cm2 | 40 J/cm2 | 20 J/cm2 | 40 J/cm2 | 20 J/cm2 | 40 J/cm | |
| Příklad 7 | 0 | 0 | 0,000067 | 0 | 3,7 | 0,090 |
| Příklad 9 | 0 | 0 | 2 | 0,091 | 0,12 | 0,0017 |
| Příklad 10 | 0 | 0 | 2,7 | 0,0011 | 0,47 | 0 |
Sloučenina z příkladu 7 vykázala výrazný antibakteriální i antifungální efekt, pri fotoinaktivaci kmene S. aureus a £. coli došlo v nejvyšší testované koncentraci (8 mg/1) a po ozáření dávkou světla 40 J/cm k úplné eliminaci, při pokusech s C. albicans pak ke snížení počtu kvasinek o tři řády.
-8CZ 303612 B6
Sloučeninu z příkladu 9 bylo možné hodnotit jako účinnou látku v pokusech se všemi testovanými kulturami, v nejvyšší testované koncentraci (8 mg/1) a po ozáření dávkou světla 40 J/cm došlo k úplné eliminaci bakterií kmene & aureus, u kmene E. coli došlo k poklesu počtu bakterií o 3 řády, v pokusech s C. albicans dochází ke zmenšení počtu kvasinek o 4 řády.
Sloučenina z příkladu 10 byla také hodnocena jako účinný fotosenzitizátor. Při pokusech s kmenem S. aureus a C. albicans v nejvyšší testované koncentraci a dávce ozáření došlo k úplné eliminaci bakterií a kvasinek a v pokusech s E. coli za stejných podmínek ke snížení počtu bakterií o 5 řádů.
Průmyslová využitelnost
Sloučeninu podle vynálezu lze využít pro fotodynamickou inaktivaci mikroorganizmů, zejména patogenních bakterií a kvasinek.
Claims (3)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Sloučenina pro fotodynamickou inaktivaci současně grampozitivních bakterií, gramnegativ25 nich bakterií a patogenních kvasinek, na bázi derivátu ftalocyaninú tvořená alespoň jednou solí organické kyseliny sulfonamidíckého typu derivátu ftalocyaninú, obecného vzorceHx RiMePc-j“SO2NH—(CH^N* R20,1-430 kde:Me = Ho. HOA1. Zn,Pc = ftalocyaninový skelet, η - l až 6,35 Ri, R2 jsou ethylové skupinyA“ ~ anion alespoň jedné organické kyseliny ze skupiny kyselina askorbová, kyselina mléčná, kyselina citrónová.
- 2. Použití vodorozpustné soli organické kyseliny sulfonamidíckého typu derivátu ftalocyaninú 40 podle nároku 1, obecného vzorceMePíH PíSO2NH-(CH^-|M+ r20,1-4-9CZ 303612 B6 kde:Me = H2, HOAI, Zn,
- 5 Pc = ftalocyaninový skelet, η = 1 až 6,Ri, R2 jsou ethylové skupinyA = anion alespoň jedné organické kyseliny ze skupiny kyselina askorbová, kyselina mléčná, kyselina citrónová opro fotodynamickou inaktivaci současně grampozitivních bakterií, gramnegativních bakterií a patogenních kvasinek „in vitro“.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ20100628A CZ303612B6 (cs) | 2010-08-19 | 2010-08-19 | Sloucenina pro fotodynamickou inaktivaci soucasne grampozitivních bakterií, gramnegativních bakterií a patogenních kvasinek, na bázi derivátu ftalocyaninu, a pouzití této slouceniny |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ20100628A CZ303612B6 (cs) | 2010-08-19 | 2010-08-19 | Sloucenina pro fotodynamickou inaktivaci soucasne grampozitivních bakterií, gramnegativních bakterií a patogenních kvasinek, na bázi derivátu ftalocyaninu, a pouzití této slouceniny |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ2010628A3 CZ2010628A3 (cs) | 2012-02-29 |
| CZ303612B6 true CZ303612B6 (cs) | 2013-01-09 |
Family
ID=45699715
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ20100628A CZ303612B6 (cs) | 2010-08-19 | 2010-08-19 | Sloucenina pro fotodynamickou inaktivaci soucasne grampozitivních bakterií, gramnegativních bakterií a patogenních kvasinek, na bázi derivátu ftalocyaninu, a pouzití této slouceniny |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CZ (1) | CZ303612B6 (cs) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP3193864A4 (en) * | 2014-09-09 | 2018-04-25 | Purepurge, Inc. | Compositions for photodynamic control of infection |
| CZ307394B6 (cs) * | 2015-01-20 | 2018-07-25 | Centrum organické chemie s.r.o. | Způsob inaktivace mikroorganismů v obráběcích emulzích a zařízení pro provádění tohoto způsobu |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3954392A (en) * | 1973-08-02 | 1976-05-04 | Allied Chemical Corporation | Copper phthalocyanine N-Di-N-butylaminoalkyl sulfonamide, quaternized solutions of the quaternary compound, and paper dyeing therewith |
| US4318883A (en) * | 1977-03-25 | 1982-03-09 | Ciba-Geigy Corporation | Process for combating micro-organisms, and novel phthalocyanine compounds |
| WO2001042368A1 (en) * | 1999-12-08 | 2001-06-14 | Gentian As | Substituted phthalocyanines and their precursors |
| WO2008007318A2 (en) * | 2006-07-07 | 2008-01-17 | The Procter & Gamble Company | Detergent compositions |
-
2010
- 2010-08-19 CZ CZ20100628A patent/CZ303612B6/cs not_active IP Right Cessation
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3954392A (en) * | 1973-08-02 | 1976-05-04 | Allied Chemical Corporation | Copper phthalocyanine N-Di-N-butylaminoalkyl sulfonamide, quaternized solutions of the quaternary compound, and paper dyeing therewith |
| US4318883A (en) * | 1977-03-25 | 1982-03-09 | Ciba-Geigy Corporation | Process for combating micro-organisms, and novel phthalocyanine compounds |
| WO2001042368A1 (en) * | 1999-12-08 | 2001-06-14 | Gentian As | Substituted phthalocyanines and their precursors |
| WO2008007318A2 (en) * | 2006-07-07 | 2008-01-17 | The Procter & Gamble Company | Detergent compositions |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| Cerny J., at al.: Journal of Photochemistry and Photobiology A: Chemistry 2010, 210, str. 82-88 * |
| Pochekailov S., et al.: Materials Science-Poland 2009, 27 (3), str. 781-794; str. 782-784 * |
| Ryskova L, et al.: Abstract of the Interscience Konference on Antimicrobial Agents and Chemotherapy 2009, 49, str. 188, bibliograficka data zobrazena ve Vieweru (Epoque) * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP3193864A4 (en) * | 2014-09-09 | 2018-04-25 | Purepurge, Inc. | Compositions for photodynamic control of infection |
| CZ307394B6 (cs) * | 2015-01-20 | 2018-07-25 | Centrum organické chemie s.r.o. | Způsob inaktivace mikroorganismů v obráběcích emulzích a zařízení pro provádění tohoto způsobu |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CZ2010628A3 (cs) | 2012-02-29 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Tim | Strategies to optimize photosensitizers for photodynamic inactivation of bacteria | |
| Caruso et al. | Synthesis and antibacterial activity of novel cationic BODIPY photosensitizers | |
| Kussovski et al. | Photodynamic inactivation of Aeromonas hydrophila by cationic phthalocyanines with different hydrophobicity | |
| Mantareva et al. | Non-aggregated Ga (III)-phthalocyanines in the photodynamic inactivatio planktonic and biofilm cultures of pathogenic microorganisms | |
| F. Sperandio et al. | Antimicrobial photodynamic therapy to kill Gram-negative bacteria | |
| Tang et al. | Preparation of a porphyrin metal–organic framework with desirable photodynamic antimicrobial activity for sustainable plant disease management | |
| Zhang et al. | Rapid killing of bacteria by a new type of photosensitizer | |
| Pfitzner et al. | Killing of periodontopathogenic bacteria by photodynamic therapy | |
| Wang et al. | The phototoxicity of xanthene derivatives against Escherichia coli, Staphylococcus aureus, and Saccharomyces cerevisiae | |
| Su et al. | Photodynamic antimicrobial activity of hypocrellin A | |
| Banerjee et al. | Photodynamic antimicrobial chemotherapy (PACT) using riboflavin inhibits the mono and dual species biofilm produced by antibiotic resistant Staphylococcus aureus and Escherichia coli | |
| Gsponer et al. | Approaches to unravel pathways of reactive oxygen species in the photoinactivation of bacteria induced by a dicationic fulleropyrrolidinium derivative | |
| US20170275572A1 (en) | Compositions for photodynamic control of infection | |
| Mamone et al. | Photodynamic inactivation of planktonic and biofilm growing bacteria mediated by a meso-substituted porphyrin bearing four basic amino groups | |
| Spesia et al. | Evolution of phthalocyanine structures as photodynamic agents for bacteria inactivation | |
| Braz et al. | Photodynamic inactivation of methicillin-resistant Staphylococcus aureus on skin using a porphyrinic formulation | |
| Lourenço et al. | Photoinactivation of planktonic and biofilm forms of Escherichia coli through the action of cationic zinc (II) phthalocyanines | |
| Jesus et al. | An insight into the photodynamic approach versus copper formulations in the control of Pseudomonas syringae pv. actinidiae in kiwi plants | |
| Ryskova et al. | In vitro antimicrobial activity of light-activated phthalocyanines | |
| Mamone et al. | Photodynamic inactivation of Gram-positive bacteria employing natural resources | |
| US20130064712A1 (en) | Composite comprising at least one type of perfluoroalkyl-perfluoro-phthalocyanine | |
| CN107827891A (zh) | 一系列与革兰氏阴性菌细菌膜特异性结合的光动力杀菌剂及制备方法 | |
| Sierra-Garcia et al. | In vitro photodynamic treatment of Fusarium oxysporum conidia through the action of thiopyridinium and methoxypyridinium chlorins | |
| Galstyan et al. | Determining and unravelling origins of reduced photoinactivation efficacy of bacteria in milk | |
| CN109125737A (zh) | 负载前体药物的介孔纳米钌系统及制备和在制备治疗耐药细菌感染药物中的应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20170819 |