CZ2020339A3 - Způsob přípravy biologického krytí na bázi aminové membrány pro rekonstrukční zákroky, a biologické krytí - Google Patents
Způsob přípravy biologického krytí na bázi aminové membrány pro rekonstrukční zákroky, a biologické krytí Download PDFInfo
- Publication number
- CZ2020339A3 CZ2020339A3 CZ2020339A CZ2020339A CZ2020339A3 CZ 2020339 A3 CZ2020339 A3 CZ 2020339A3 CZ 2020339 A CZ2020339 A CZ 2020339A CZ 2020339 A CZ2020339 A CZ 2020339A CZ 2020339 A3 CZ2020339 A3 CZ 2020339A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- amniotic membrane
- carrier
- tissue
- quadrant
- area
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 31
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 title claims abstract description 17
- 238000000576 coating method Methods 0.000 title claims abstract description 17
- 239000012528 membrane Substances 0.000 title description 9
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 title description 2
- 210000001691 amnion Anatomy 0.000 claims abstract description 138
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 claims abstract description 76
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 claims abstract description 21
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 claims abstract description 21
- 210000001136 chorion Anatomy 0.000 claims abstract description 15
- 238000007710 freezing Methods 0.000 claims abstract description 13
- 230000008014 freezing Effects 0.000 claims abstract description 12
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 claims abstract description 11
- 238000005202 decontamination Methods 0.000 claims abstract description 10
- 230000003588 decontaminative effect Effects 0.000 claims abstract description 10
- 238000003860 storage Methods 0.000 claims abstract description 10
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims abstract description 6
- 230000007547 defect Effects 0.000 claims description 21
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 11
- 238000010186 staining Methods 0.000 claims description 11
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 10
- 229920001903 high density polyethylene Polymers 0.000 claims description 9
- 239000004700 high-density polyethylene Substances 0.000 claims description 9
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 claims description 9
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 claims description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 8
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 claims description 5
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 5
- 210000001951 dura mater Anatomy 0.000 claims description 5
- 210000005081 epithelial layer Anatomy 0.000 claims description 5
- 239000011888 foil Substances 0.000 claims description 5
- 230000006837 decompression Effects 0.000 claims description 4
- 231100000241 scar Toxicity 0.000 claims description 4
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 claims description 3
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 claims description 3
- 238000012084 abdominal surgery Methods 0.000 claims description 3
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 claims description 3
- 230000000399 orthopedic effect Effects 0.000 claims description 3
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 claims description 3
- 210000000115 thoracic cavity Anatomy 0.000 claims description 3
- 239000004033 plastic Substances 0.000 claims description 2
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 claims description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 2
- 238000002278 reconstructive surgery Methods 0.000 claims 1
- 230000003750 conditioning effect Effects 0.000 abstract 1
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 description 18
- 239000000463 material Substances 0.000 description 8
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 7
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 6
- 238000001000 micrograph Methods 0.000 description 5
- 210000003954 umbilical cord Anatomy 0.000 description 5
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 4
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 4
- 210000003811 finger Anatomy 0.000 description 3
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 210000004381 amniotic fluid Anatomy 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 238000002316 cosmetic surgery Methods 0.000 description 2
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 2
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 2
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 2
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 2
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 1
- 238000005352 clarification Methods 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 210000004087 cornea Anatomy 0.000 description 1
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 210000005224 forefinger Anatomy 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000019948 ion homeostasis Effects 0.000 description 1
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 1
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 description 1
- 230000004089 microcirculation Effects 0.000 description 1
- 230000000926 neurological effect Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 230000003169 placental effect Effects 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 230000037390 scarring Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 1
- 210000001154 skull base Anatomy 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003813 thumb Anatomy 0.000 description 1
- 230000000472 traumatic effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61F—FILTERS IMPLANTABLE INTO BLOOD VESSELS; PROSTHESES; DEVICES PROVIDING PATENCY TO, OR PREVENTING COLLAPSING OF, TUBULAR STRUCTURES OF THE BODY, e.g. STENTS; ORTHOPAEDIC, NURSING OR CONTRACEPTIVE DEVICES; FOMENTATION; TREATMENT OR PROTECTION OF EYES OR EARS; BANDAGES, DRESSINGS OR ABSORBENT PADS; FIRST-AID KITS
- A61F2/00—Filters implantable into blood vessels; Prostheses, i.e. artificial substitutes or replacements for parts of the body; Appliances for connecting them with the body; Devices providing patency to, or preventing collapsing of, tubular structures of the body, e.g. stents
- A61F2/02—Prostheses implantable into the body
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L15/00—Chemical aspects of, or use of materials for, bandages, dressings or absorbent pads
- A61L15/16—Bandages, dressings or absorbent pads for physiological fluids such as urine or blood, e.g. sanitary towels, tampons
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/36—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/36—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix
- A61L27/38—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix containing added animal cells
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/02—Devices for withdrawing samples
- G01N1/04—Devices for withdrawing samples in the solid state, e.g. by cutting
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61F—FILTERS IMPLANTABLE INTO BLOOD VESSELS; PROSTHESES; DEVICES PROVIDING PATENCY TO, OR PREVENTING COLLAPSING OF, TUBULAR STRUCTURES OF THE BODY, e.g. STENTS; ORTHOPAEDIC, NURSING OR CONTRACEPTIVE DEVICES; FOMENTATION; TREATMENT OR PROTECTION OF EYES OR EARS; BANDAGES, DRESSINGS OR ABSORBENT PADS; FIRST-AID KITS
- A61F2230/00—Geometry of prostheses classified in groups A61F2/00 - A61F2/26 or A61F2/82 or A61F9/00 or A61F11/00 or subgroups thereof
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T156/00—Adhesive bonding and miscellaneous chemical manufacture
- Y10T156/10—Methods of surface bonding and/or assembly therefor
- Y10T156/1002—Methods of surface bonding and/or assembly therefor with permanent bending or reshaping or surface deformation of self sustaining lamina
- Y10T156/1039—Surface deformation only of sandwich or lamina [e.g., embossed panels]
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Transplantation (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Botany (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Pathology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
Abstract
Předkládané řešení poskytuje způsob přípravy krytí na bázi amniové membrány pro rekonstrukční zákroky, který zahrnuje následující kroky: A) oddělení amniové membrány (amnionu) od chorionu; B) promytí a dekontaminaci amniové membrány a případné odstranění tkáně nedostačující kvality; C) aplikaci amniové membrány na nosič; D) umístění nosiče s aplikovanou amniovou membránou do sterilního obalu; E) úpravu nosiče s aplikovanou amniovou membránou ve sterilním obalu pro skladování, přičemž - v kroku C) je nosič vybrán ze skupiny zahrnující nitrocelulózu, Sanatyl, chirurgickou síťku, silikonový nosič; a - v kroku E) je úpravou pro skladování zamražení nosiče s aplikovanou amniovou membránou ve sterilním obalu alespoň na -60 °C. Dále předkládané řešení poskytuje biologické krytí připravené tímto způsobem, a jeho použití.
Description
Způsob přípravy biologického krytí na bázi aminové membrány pro rekonstrukční zákroky, a biologické krytí
Oblast techniky
Předkládaný vynález se týká způsobu přípravy biologického krytí na bázi amniové membrány pro rekonstrukční zákroky. Rovněž se týká biologického krytí získaného tímto způsobem.
Dosavadní stav techniky
Amnion je vnitřní plodový obal, který obepíná amniovou dutinu vyplněnou amniovou tekutinou (tj. plodovou vodou, ve které se vyvíjí zárodek savců). Amniový epitel přechází přes pupečník na periderm.
Použití amniové membrány pro výrobu materiálů pro rekonstrukci, ochranu a podporu hojení poraněných tkání je známo. Výhodou amniové membrány je to, že kromě vynikajících mechanických a biologických vlastností má velmi nízkou imunogenitu.
Amniová membrána může být použita jako štěp nebo jako kryt rány, například při rekonstrukci rohovky a dalších tkání (kůže, chrupavka, pojivové tkáně). Navrženo bylo i použití pro rekonstrukční zákroky v neurochirurgii, např. v US10286015 (pouze buňky nebo extrakt odvozené z amnionu); British Journal of Neurosurgery 2016, 32(5), 516-520 (dehydrovaný materiál); 10.7759/cureus.2586 (dehydrovaný materiál); Journal of Neurological Surgery Part B: Skull Base 2012, 73(05), 302-307 (dehydrovaný materiál).
Při traumatickém poškození orgánů nebo tkání vždy dochází k porušení homeostázy elektrolytů, uvolňování biologicky aktivních látek a porušení mikrocirkulace krve, způsobující narušení struktury tkáně, její turgor a otok. Tento jev definuje kritéria pro materiál (kryt), který ideálně musí zajistit minimální ztrátu elektrolytů, zajistit kvalitní bariéru pro prevenci jizvení a infekce, zároveň poskytuje regeneraci poškozené tkáni. Amniová membrána má všechny výše uvedené vlastnosti, které umožňují její využití ve všech chirurgických oborech (jako je např. neurochirurgiedekompresní kraniektomie, torakální chirurgie, abdominální chirurgie, gynekologie, popáleninová a estetická chirurgie, ortopedie).
Amniové membrány jsou obvykle zpracovány oddělením chorionu, vyčištěním a sterilizací amnionu, a úpravou pro skladování, kterou je převážně dehydratace či lyofilizace. Příkladem takového postupuje postup popsaný v PV 2017-846.
Zejména u dehydrovaných tkání dochází k narušení (zejména vytažení) struktury tkáně, takže se krytí po rehydrataci špatně aplikuje, má horší účinnost, a není po celém povrchu spolehlivě stejně účinné. To může představovat problém u všech použití, ale zejména u použití v neurochirurgii. Ideální by bylo používat čerstvě připravená krytí, ale to současná legislativa nedovoluje. Je tedy žádoucí pro medicínské použití poskytnout takovou úpravu, která by dovolila co nejlépe zachovat původní strukturu amniové membrány pro aplikaci.
Dalším problémem je zajištění dostatečné kvality tkáně, při maximalizaci efektivity zpracování poskytnutých placent. Pro přípravu rekonstrukčních krytí lze používat pouze placenty z nekomplikovaných porodů nebo z porodů císařským řezem u zdravých rodiček, které poskytnou souhlas s využitím placenty. Je tedy zřejmé, že množství dostupného materiálu je omezené, a že je žádoucí jej využívat co nej efektivněji, při zachování standardizace a spolehlivosti zpracování.
Podstata vynálezu
- 1 CZ 2020 - 339 A3
Předmětem předkládaného vynálezu je způsob přípravy krytí na bázi amniové membrány pro rekonstrukční zákroky, který zahrnuje následující kroky:
A) oddělení amniové membrány (amnionu) od chorionu;
B) promytí a dekontaminaci amniové membrány a případné odstranění tkáně nedostačující kvality;
C) aplikaci amniové membrány na nosič;
D) umístění nosiče s aplikovanou amniovou membránou do sterilního obalu;
E) úpravu nosiče s aplikovanou amniovou membránou ve sterilním obalu pro skladování, jehož podstata spočívá v tom, že
- v kroku C) je nosič vybrán ze skupiny zahrnující nitrocelulózu, Sanatyl, chirurgickou síťku, silikonový nosič; a
- v kroku E) je úpravou pro skladování zamražení nosiče s aplikovanou amniovou membránou ve sterilním obalu alespoň na -60 °C.
Ve výhodném provedení je předmětem vynálezu způsob přípravy krytí na bázi amniové membrány, zahrnující kroky:
a) oddělení amniové membrány (amnionu) od chorionu tupou preparací;
bl) promytí amniové membrány fyziologickým roztokem;
b2) vyhodnocení kvality amniové membrány a případné odstranění tkáně nedostačující kvality;
b3) dekontaminace amniové membrány roztokem antibiotika ve fyziologickém roztoku;
cl) volitelně rozdělení amniové membrány na díly;
c2) aplikace amniové membrány nebo dílů amniové membrány na nosič;
c3) volitelně rozdělení nosiče s aplikovanou amniovou membránou na díly;
d) umístění nosiče s aplikovanou amniovou membránou do sterilního papír-fóliového (HDPE) obalu;
e) úprava nosiče s aplikovanou amniovou membránou pro skladování;
jehož podstata spočívá v tom, že
- v kroku c2) je nosič vybrán ze skupiny zahrnující nitrocelulózu, Sanatyl, chirurgickou síťku, silikonový nosič; a
- v kroku e) je úpravou pro skladování zamražení nosiče s aplikovanou amniovou membránou ve sterilním obalu alespoň na -60 °C.
Placenty mohou být získávány při plánovaném porodu císařským řezem od zdravých matek. Po odebrání placenty a informovaném souhlasu dárkyně je placenta přenesena do laboratoře pracující za sterilních podmínek. Placenta je obvykle balena v primárním sterilním obalu a následně ještě v kontejneru. Obvykle je před zpracováním ověřeno, že placenta není kontaminována patogenními mikroorganismy (mikrobiologická kontrola kvality). Placenty jsou s výhodou zpracovávány samostatně, tedy v jedné šarži je zpracovávána placenta pouze od jedné dárkyně.
-2CZ 2020 - 339 A3
Krok oddělení amnionu od chorionu (krok A), resp. a)) se typicky provádí manuálně tupou preparací, a to tak, že se začne od místa incize plodového vaku, a dále se pokračuje směrem k pupečníku po celém povrchu placenty. Na místě, kde amnion přechází do pupeční šňůry, se toto spojení přeruší sekcí, např. pomocí nůžek nebo skalpelu.
Krok promytí amnionu (krok B), resp. krok bl)) ve fyziologickém roztoku se typicky provádí vložením amniové membrány do fyziologického roztoku, lze jej při tom jemně propírat. Mechanické očištění je typicky prováděno při umístění amnionu epiteliální vrstvou na pracovní plochu a odstraňováním reziduí ze strany kontaktu amnionu s chorionem jemným pohybem palce a ukazováčku. Proces čištění amniové membrány ve fyziologickém roztoku a jejího mechanického čištění lze podle potřeby opakovat, s výhodou 2x nebo 3x.
Ve výhodném provedení se v kroku B), resp. v kroku b2) amniová membrána rovnoměrně rozloží na podložku rozdělenou na čtyři stejné kvadranty, následně se v jednotlivých kvadrantech zjistí přítomnost a plošný rozsah následujících defektů: jizevnatá tkáň a srostlá tkáň; nevyčistitelná krevní rezidua; nevyčistitelné zbarvení tkáně mimo následující rozsahy zbarvení: od barevného zbarvení C:0,0000 M:0,0000 Y:0,0000 K:0,0000 (průhledná) do C:0,0000 M:0,0392 Y:0,0392 K:0,0000 (načervenalé zbarvení) a od barevného zbarvení C:0,0000 M:0,0000 Y:0,0000 K:0,0000 (průhledná) do C:0,0157 M:0,0000 Y:0,1490 K:0,0000 (nazelenalé zbarvení); neoddělitelné zbytky chorionu; mechanicky porušená tkáň a trhliny; přičemž
- v případě, že plošný rozsah defektů přesahuje 50 % celkové plochy amniové membrány, amniová membrána se zlikviduje; a/nebo
- v případě, že plošný rozsah defektů v jednotlivém kvadrantu v oblasti 2 cm od okraje kvadrantu přesahuje 30 % plochy tkáně amniové membrány v této oblasti kvadrantu, tkáň amniové membrány z tohoto kvadrantu se zlikviduje;
- v případě, že plošný rozsah defektů v jednotlivém kvadrantu ve středové části kvadrantu (tj. mimo oblast 2 cm od okraje kvadrantu) přesahuje 20 % plochy tkáně amniové membrány v této oblasti kvadrantu, tkáň amniové membrány z tohoto kvadrantu se zlikviduje.
Ve výše uvedeném výhodném provedení kroku B), resp. kroku b2) se tedy posuzuje plošný rozsah diskvalifikujících defektů. Likvidace tkáně až v situaci, kdy plošný rozsah defektů přesahuje hranici, nad níž je tkáň nebo její část již nezpracovatelná, zvyšuje účinnost využití tkáně. Původci bylo zjištěno, že je možné tkáň posuzovat jak v celkovém pohledu, tak také po kvadrantech, kdy se likviduje pouze příliš defektní část v určitém kvadrantu, přičemž ostatní části mohou být stále velmi dobře použitelné.
Pro posouzení plošného rozsahu defektů se s výhodou jako pomůcka použije měřicí podložka rozdělená na čtyři stejné kvandranty, přičemž v každém kvadrantu je vyznačena síť tvořená liniemi, přičemž vzájemně rovnoběžné linie jsou od sebe ve stejných vzdálenostech v rozmezí 0,5 až 5 cm. Čtyři kvadranty lze například označit jako levý horní kvadrant (kvadrant A), levý dolní kvadrant (kvadrant B), pravý horní kvadrant (kvadrant C) a pravý dolní kvadrant (kvadrant D). V každém kvadrantu je vyznačena vyznačena síť s řadami linií, přičemž vzájemně rovnoběžné linie jsou od sebe ve stejných vzdálenostech v rozmezí 0,5 až 5 cm, s výhodou 0,5 až 2 cm. Linie mohou být s výhodou uspořádány jako dvě sady linií, které jsou vzájemně kolmé nebo svírají nekolmý úhel. Pak mohou být jednotkami sítě např. čtverce, obdélníky, kosočtverce, kosodélníky. Mohou být i tři sady linií, které pak tvoří trojúhelníkové nebo od trojúhelníků odvozené jednotky. Účelem jednotek sítě je umožnit snadné a rychlé vypočtení plošného rozsahu defektní a nedefektní tkáně.
Diskvalifikující defekty jsou:
1. jizevnatá tkáň a srostlá tkáň (ztluštělá a netransparentní)
2. nevyčistitelná krevní rezidua
-3CZ 2020 - 339 A3
3. nevyčistitelné zbarvení tkáně (hranice přijatelného zbarvení jsou definovány v PV 2017-846) 4. neoddělitelné zbytky chorionu
5. porušená tkáň, trhliny.
V průběhu hodnocení tkáně jsou tedy s výhodou vypočtena procenta plochy nepoužitelných částí amnionu, tj. částí amnionu zasažených diskvalifikujícími defekty, přičemž plochy částí nedefektní plochy amnionu a nepoužitelné plochy amnionu jsou ve výhodném provedení stanoveny s pomocí sítě na měřicí podložce.
V případě, že jsou při čištění nalezeny nepoužitelné části tkáně do určitého procenta plochy amnionu, je možné tkáň i nadále zpracovat, a nálezy je nutno odstranit pomocí skalpelu.
Limity defektnosti amnionu (platí jeden nebo více):
1) V případě, že výše uvedené defekty přesahují 50 % celkové plochy amnionu, je kvalita a výtěžnost tkáně nedostatečná, a tkáň je z tohoto důvodu určena k likvidaci.
2) V případě, že výše uvedené defekty v určitém kvadrantu v oblasti 2 cm od okraje kvadrantupřesahují 30 % plochy amnionu v tomto kvadrantu, je kvalita a výtěžnost tkáně v tomto kvadrantu nedostatečná a tkáň je z tohoto důvodu určena k likvidaci.
3) V případě, že výše uvedené defekty v určitém kvadrantu ve středové části kvadrantu (tj. mimo oblast 2 cm od okraje kvadrantu) přesahují 20 % plochy amnionu v tomto kvadrantu, je kvalita a výtěžnost tkáně v tomto kvadrantu nedostatečná a tkáň je z tohoto důvodu určena k likvidaci.
Postup popsaný ve výhodném provedení kroku B), resp. kroku b2) tedy dovoluje rychle a efektivně vyhodnotit využitelnost tkáně, přičemž jsou jasně daná kritéria (vyhodnocení tedy bude jednoznačné a vždy stejné, snižuje se prostor pro subjektivitu), a omezit množství likvidované tkáně na minimum. Spolehlivost hodnocení je důležitá z hlediska toho, že se jedná o materiál pro léčebné využití, a omezení množství likvidované tkáně na minimum je důležité kvůli omezenému množství dostupného výchozího materiálu. S využitím postupu podle vynálezu, využívajícího měřicí podložku, se v laboratoři původců podařilo zvýšit míru využití dodaných placent na cca 85 %, z původních cca 70 % za využití postupů podle stavu techniky. Likvidace placent, resp. amniových membrán, z důvodu nedostatečné kvality a výtěžnosti tkáně, se tedy snížila o 50 %.
Dekontaminace amniové membrány ve fyziologickém roztoku s přídavkem antibiotika (v kroku B), resp. v kroku b3)) se s výhodou provádí v lázni obsahující poměr antibiotika k fyziologickému roztoku 1:100 až 1:10, výhodněji 1:60 až 1:40, nejvýhodněji 1:50. S výhodou se amniová membrána ponechá v této lázni po dobu alespoň 15 minut, výhodněji alespoň 25 minut.
Antibiotikem pro dekontaminaci je s výhodou gentamicin.
V kroku C), resp. c2) je velmi výhodným nosičem nitrocelulóza.
S výhodou je obalem použitým v kroku D), resp. d) obal s vrstvou papíru a vrstvou vysokohustotního polyethylenu (HDPE), tzv. papír-fóliový obal.
Zamražením v kroku E, resp. e) je rozuměno vystavení nízké teplotě za normálního tlaku a bez dehydratace; zamražením není míněna lyofilizace.
S výhodou je zamražení v kroku E, resp. e) prováděno na alespoň -80 °C.
Kombinací zamražení a použití nitrocelulózy jako nosiče se téměř odstraní deformace struktury tkáně amniové membrány. Struktura je velmi podobná struktuře čerstvé tkáně.
-4CZ 2020 - 339 A3
Předmětem předkládaného vynálezu je dále zamražené krytí na bázi amniové membrány pro rekonstrukční zákroky, obsahující amniovou membránu včetně epitelové vrstvy a nosič. Takovéto krytí je připravitelné postupem podle předkládaného vynálezu.
Nosič může být vybrán ze skupiny zahrnující nitrocelulózu, Sanatyl, chirurgickou síťku, silikonový nosič.
S výhodou je nosičem v zamraženém krytí pro rekonstrukční zákroky nitrocelulóza. Jak je uvedeno výše, kombinace nitrocelulózy jako nosiče a zamraženého stavu zajišťuje vynikající strukturní vlastnosti produktu, podobné vlastnostem čerstvé amniové membrány.
Ve výhodném provedení je zamražené krytí na bázi amniové membrány pro rekonstrukční zákroky, obsahující amniovou membránu včetně epitelové vrstvy a nosič, opatřené sterilním obalem s vrstvou papíru a vrstvou vysokohustotního polyethylenu (HDPE).
Získaný materiál je zejména vhodný pro použití jako rekonstrukční krytí v chirurgii, např. neurochirurgii, a to především na plastiku dura mater a při dekompresní kraniektomii, gynekologii, popáleninové a estetické chirurgii, torakální chirurgii, abdominální chirurgii, ortopedii, nebo v oftalmologii.
Bezprostředně před použitím se zamrazená amniová membrána vyjme z hlubokomrazícího boxu. V průběhu cca 10 minut dochází k rozmrznutí tkáně a tkáň je připravena k použití. Amniová membrána se v průběhu aplikace stáhne z nosiče, hydratuje fyziologickým roztokem, a tím dochází k přilnutí na postiženou oblast. Pro větší fixace tkáně je v okrajích přistehnuta k dura mater nebo jiné přiléhající tkáni.
Objasnění výkresů
Obr. 1 znázorňuje náčrt měřicí podložky pro použití ve způsobu podle vynálezu.
Obr. 2 znázorňuje mikrosnímek z elektronového mikroskopu ukazující strukturu amnionu připraveného postupem podle vynálezu (po rozmražení).
Obr. 3 znázorňuje mikrosnímek z elektronového mikroskopu ukazující strukturu čerstvého amnionu.
Obr. 4 znázorňuje mikrosnímek z elektronového mikroskopu ukazující strukturu amnionu připraveného na silikonovém nosiči a lyofilizovaného (srovnávací snímek).
Příklad uskutečnění vynálezu
Před zahájením zpracování placenty se provede kontrola záznamové dokumentace odpovědnou osobou tkáňového zařízení za účelem propuštění tkáně ke zpracování. Tkáň je zpracována kampaňovitě tzn. zpracovává se pouze tkáň od 1 dárce, tím je zajištěno, že tkáň není kontaminována.
Vzhledem k charakteru tkáně musí být placenta zpracována neprodleně do 24 hodin od odběru.
Pracovník přenese placentu v primárním obalu do laminámího boxu, vybalí placentu na pracovní desku a provede stěr/plošný otěr z celé plochy placenty v rámci mikrobiologické kontroly kvality.
Pracovník manuálně identifikuje místo incize plodového vaku (po celém obvodu incize), v tomto místě zahájí separaci amnionu od chorionu. Jemně odseparuje tyto 2 blány od sebe a pokračuje v
-5CZ 2020 - 339 A3 preparaci v uvedeném místě směrem k pupečníku po celém povrchu placenty. Technika preparace: tupá preparace, amnion není natahován, je jemně fixován levou rukou operatéra, který ukazováčkem pravé ruky jemně odděluje amnion od chorionu.
Po odpreparování amnionu po celém povrchu zůstává amnion fixován na místě, kde přechází do pupeční šňůry, toto spojení se přeruší sekcí pomocí skalpelu.
Odpreparovaná amniová membrána se vloží do dózy s připraveným fyziologickým roztokem (FR). Pracovník lehce a jemně prsty propere amnion v připravené první dóze s FR. Vyjme membránu a položí na připravenou čistou pracovní desku. Amnion umístí epiteliální vrstvou na pracovní plochu.
Kontaktní strana amnionu (s choriovou blánou) se čistí v několika fázích. Pracovník odstraňuje z této strany amnionu rezidua, přičemž systematicky postupuje po celé ploše amnionu, amnion je v průběhu čištění oplachován ve fyziologickém roztoku.
V průběhu zpracování pracovník vizuálně zhodnotí tkáň - hodnotí barvu a strukturu tkáně. Jsou-li při zpracování nalezeny změny barvy nebo změny ve struktuře, je posouzen jejich vzhled, rozsah a charakter. Tyto změny jsou hodnoceny pomocí k tomu určené měřicí podložky (viz Obr. 1), která je rozdělena na 4 kvadranty: levý horní (kvadrant A), levý dolní (kvadrant B), pravý horní (kvadrant C) a pravý dolní (kvadrant D). V každém kvadrantu je síť tvořená dvěma sadami linií, přičemž rovnoběžné linie jsou vzájemně vždy ve vzdálenosti 0,5 až 5 cm, ve vyobrazeném provedení např. 2 cm. Síť tedy tvoří jednotky, ve vyobrazeném případě čtverečky o hraně 2 cm.
Primárně omytá tkáň je rozložena rovnoměrně na měřicí podložku a jsou hodnoceny následující defekty:
1. j izevnatá tkáň a srostlá tkáň (ztluštělá a netransparentní)
2. nevyčistitelná krevní rezidua
3. nevyčistitelné zbarvení tkáně (mimo následující rozsahy zbarvení: od barevného zbarvení C:0,0000 M:0,0000 Y:0,0000 K:0,0000 (průhledná) do C:0,0000 M:0,0392 Y:0,0392 K:0,0000 (načervenalé zbarvení) a od barevného zbarvení C:0,0000 M:0,0000 Y:0,0000 K:0,0000 (průhledná) do C:0,0157 M:0,0000 Y:0,1490 K:0,0000 (nazelenalé zbarvení))
4. neoddělitelné zbytky chorionu
5. porušená tkáň, trhliny
V průběhu hodnocení tkáně jsou vypočtena procenta plochy nepoužitelných částí amnionu pomocí čtverečků na Podložce ke zhodnocení tkáně amnionu.
V případě, že jsou při čištění nalezeny nepoužitelné části tkáně, je možné tkáň i nadále zpracovat, a nálezy je nutno odstranit pomocí skalpelu.
Limity použitelnosti tkáně:
1) V případě, že výše uvedené defekty přesahují 50 % celkové plochy amnionu, je kvalita a výtěžnost tkáně nedostatečná, a tkáň je z tohoto důvodu určena k likvidaci.
2) V případě, že výše uvedené defekty v určitém kvadrantu v oblasti 2 cm od okraje kvadrantu přesahují 30 % plochy amnionu v tomto kvadrantu, je kvalita a výtěžnost tkáně v tomto kvadrantu nedostatečná a tkáň je z tohoto důvodu určena k likvidaci.
-6CZ 2020 - 339 A3
3) V případě, že výše uvedené defekty v určitém kvadrantu ve středové části kvadrantu (tj. mimo oblast 2 cm od okraje kvadrantu) přesahují 20 % plochy amnionu v tomto kvadrantu, je kvalita a výtěžnost tkáně v tomto kvadrantu nedostatečná a tkáň je z tohoto důvodu určena k likvidaci.
Následně se amnion ponoří do dekontaminační lázně, která se skládá z fyziologického roztoku a gentamicinu v poměru 50:1. Membrána se ponechá v dekontaminační lázni 30 minut.
Celý amnion pak pracovník resekuje pomocí skalpelu na několik větších fragmentů (cca 20xl5cm). Tyto větší fragmenty aplikuje na nitrocelulózu: Pracovník pečlivě rozprostře na pracovní ploše amnion s použitím menšího množství FR, amnion naléhá epitelem na povrch pracovního povrchu. Na opačnou vrstvu amnionu, tj. stroma, se aplikuje připravený kus nitrocelulózové membrány. Opatrně pomocí prstů se nitrocelulóza přitlačí k amnionu. Fixace musí být provedena tak, aby na nitrocelulóze nevznikaly přehyby a bubliny. Poté se nitrocelulóza s amnionem přeloží na pracovní plochu epitelovou stranou nahoru. Amnion se na nosiči ještě dodatečně vyrovná.
Amnion se rozdělí na menší části 8x10 cm nebo 10x15 cm a každá část na nitrocelulózovém nosiči se zvlášť umístí do obalu, kterým je sterilizovatelný papír-fóliový obal, kdy fóliovou částí je vysokodenzitní polyethylen, obal se zataví ve svářečce. Zabalená tkáň se vloží do ochranné plastové kazety.
Poté se amniové membrány na nosiči a v obalu vloží do hlubokomrazícího boxu a zmrazí na -80°C, kde za těchto podmínek mohou být skladovány až 5 let bez změny kvality tkáně.
Takto zpracovaná amniová membrána se používá na plastiku dura mater a při dekompresní kraniektomii.
Bezprostředně před použitím se amniová membrána vyjme z hlubokomrazícího boxu. V průběhu cca 10 minut dochází k rozmrznutí tkáně a tkáň je připravena k použití. Amniová membrána je v průběhu aplikace stažena z nosiče, hydratována fyziologickým roztokem a tím dochází k přilnutí na postiženou oblast. Pro větší fixace tkáně může být v okrajích přistehnuta k dura mater.
Obr. 2 ukazuje mikrosnímek z elektronového mikroskopu, ukazující strukturu krytí na bázi amniové membrány připraveného popsaným postupem podle příkladu provedení. Obr. 3 ukazuje pro porovnání mikrosnímek z elektronového mikroskopu, ukazující strukturu čerstvé amniové membrány. Z porovnání Obr. 2 a Obr. 3 je viditelné, že postup podle příkladu provedení s nitrocelulózovým nosičem zachovává strukturu amniové membrány, nedochází k natažení a deformaci vláken.
Postup byl zopakován i s dalšími nosiči, tj. Sanatylem, chirurgickou síťkou a silikonovou membránou (silikonovým nosičem). Bylo zjištěno, že s nitrocelulózovým nosičem se dosáhne nej lepší struktury výsledného produktu, ale i s ostatními nosiči se dosáhlo při použití zamražení relativně dobrého zachování struktury amniové membrány.
Obr. 4 pro srovnání ukazuje mikrosnímek z elektronového mikroskopu, ukazující strukturu krytí na bázi amniové membrány připraveného bez použití měřicí podložky, se silikonovou membránou, a s použitím lyofilizace namísto zamražení. (Ostatní parametry přípravy byly stejné jako ve výše uvedeném příkladu.) Je viditelné, že za takovýchto podmínek dojde k poškození a deformaci (vytažení) vláken membrány.
Claims (11)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Způsob přípravy krytí na bázi amniové membrány pro rekonstrukční zákroky, který zahrnuje následující kroky:A) oddělení amniové membrány od chorionu;B) promytí a dekontaminaci amniové membrány a případné odstranění tkáně nedostačující kvality;C) aplikaci amniové membrány na nosič;D) umístění nosiče s aplikovanou amniovou membránou do sterilního obalu;E) úpravu nosiče s aplikovanou amniovou membránou ve sterilním obalu pro skladování, vyznačující se tím, že- v kroku C) je nosič vybrán ze skupiny zahrnující nitrocelulózu, Sanatyl, chirurgickou síťku, silikonový nosič; a- v kroku E) je úpravou pro skladování zamražení nosiče s aplikovanou amniovou membránou ve sterilním obalu alespoň na -60 °C.
- 2. Způsob podle nároku 1, zahrnující kroky:a) oddělení amniové membrány od chorionu tupou preparací;bl) promytí amniové membrány fyziologickým roztokem;b2) vyhodnocení kvality amniové membrány a případné odstranění tkáně nedostačující kvality;b3) dekontaminace amniové membrány roztokem antibiotika ve fyziologickém roztoku;cl) volitelně rozdělení amniové membrány na díly;c2) aplikace amniové membrány nebo dílů amniové membrány na nosič;c3) volitelně rozdělení nosiče s aplikovanou amniovou membránou na díly;d) umístění nosiče s aplikovanou amniovou membránou do sterilního papír-fóliového (HDPE) obalu;e) úprava nosiče s aplikovanou amniovou membránou pro skladování;vyznačující se tím, že- v kroku c2) je nosič vybrán ze skupiny zahrnující nitrocelulózu, Sanatyl, chirurgickou síťku, silikonový nosič; a- v kroku e) je úpravou pro skladování zamražení nosiče s aplikovanou amniovou membránou ve sterilním obalu alespoň na -60 °C.
- 3. Způsob podle nároku 1 nebo 2, vyznačující se tím, že se v kroku B), resp. v kroku b2) amniová membrána rovnoměrně rozloží na podložku rozdělenou na čtyři stejné kvadranty, následně se v jednotlivých kvadrantech zjistí přítomnost a plošný rozsah následujících defektů: jizevnatá tkáň a srostlá tkáň; nevyčistitelná krevní rezidua; nevyčistíteIné zbarvení tkáně mimo následující rozsahy zbarvení: od barevného zbarvení C:0,0000 M:0,0000 Y:0,0000 K:0,0000 (průhledná) do C:0,0000 M:0,0392 Y:0,0392 K:0,0000 (načervenalé zbarvení) a od barevného-8CZ 2020 - 339 A3 zbarvení C:0,0000 M:0,0000 Y:0,0000 K:0,0000 (průhledná) do C:0,0157 M:0,0000 Y:0,1490 K:0,0000 (nazelenalé zbarvení); neoddělitelné zbytky chorionu; mechanicky porušená tkáň a trhliny; přičemž- v případě, že plošný rozsah defektů přesahuje 50 % celkové plochy amniové membrány, amniová membrána se zlikviduje; a/nebo- v případě, že plošný rozsah defektů v jednotlivém kvadrantu v oblasti 2 cm od okraje kvadrantu přesahuje 30 % plochy tkáně amniové membrány v této oblasti kvadrantu, tkáň amniové membrány z tohoto kvadrantu se zlikviduje;- v případě, že plošný rozsah defektů v jednotlivém kvadrantu ve středové části kvadrantu (tj. mimo oblast 2 cm od okraje kvadrantu) přesahuje 20 % plochy tkáně amniové membrány v této oblasti kvadrantu, tkáň amniové membrány z tohoto kvadrantu se zlikviduje.
- 4. Způsob podle kteréhokoliv z předcházejících nároků, vyznačující se tím, že antibiotikem pro dekontaminaci v kroku B), resp. v kroku b3 je gentamicin.
- 5. Způsob podle kteréhokoliv z předcházejících nároků, vyznačující se tím, že nosičem je nitrocelulóza.
- 6. Způsob podle kteréhokoliv z předcházejících nároků, vyznačující se tím, že sterilním obalem použitým v kroku D), resp. d) je sterilní obal s vrstvou papíru a vrstvou vysokohustotního polyethylenu.
- 7. Způsob podle kteréhokoliv z předcházejících nároků, vyznačující se tím, že zamražení v kroku E, resp. e) se provede při alespoň -80 °C.
- 8. Zamražené krytí na bázi amniové membrány pro rekonstrukční zákroky, vyznačující se tím, že obsahuje amniovou membránu včetně epitelové vrstvy a nosič vybraný ze skupiny zahrnující nitrocelulózu, Sanatyl, chirurgickou síťku, silikonový nosič.
- 9. Zamražené krytí podle nároku 8, vyznačující se tím, že nosičem je nitrocelulóza.
- 10. Zamražené krytí podle nároku 8 nebo 9, vyznačující se tím, že je opatřené sterilním obalem obsahujícím vrstvu papíru a vrstvu vysokohustotního polyethylenu.
- 11. Zamražené krytí podle kteréhokoliv z nároků 8 až 10 pro použití jako rekonstrukční krytí v chirurgii, zejména v neurochirurgii, a to především na plastiku dura mater a při dekompresní kraniektomii, gynekologii, popáleninové a estetické chirurgii, torakální chirurgii, abdominální chirurgii, ortopedii, nebo v oftalmologii.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ2020339A CZ2020339A3 (cs) | 2020-06-11 | 2020-06-11 | Způsob přípravy biologického krytí na bázi aminové membrány pro rekonstrukční zákroky, a biologické krytí |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ2020339A CZ2020339A3 (cs) | 2020-06-11 | 2020-06-11 | Způsob přípravy biologického krytí na bázi aminové membrány pro rekonstrukční zákroky, a biologické krytí |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ2020339A3 true CZ2020339A3 (cs) | 2021-12-22 |
Family
ID=80038186
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ2020339A CZ2020339A3 (cs) | 2020-06-11 | 2020-06-11 | Způsob přípravy biologického krytí na bázi aminové membrány pro rekonstrukční zákroky, a biologické krytí |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CZ (1) | CZ2020339A3 (cs) |
-
2020
- 2020-06-11 CZ CZ2020339A patent/CZ2020339A3/cs unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US10869951B2 (en) | Tissue grafts modified with a cross-linking agent and method of making and using the same | |
| EP3220970B1 (en) | Fenestration kits for making fenestrated placental tissue allografts and methods of using the same | |
| JP6254094B2 (ja) | 架橋脱水された胎盤組織移植片ならびにそれを作製および使用する方法 | |
| EP3349813B1 (en) | Compositions derived from placenta and methods of producing the same | |
| KR20190086033A (ko) | 바르톤 젤리로 이루어진 라미네이트된 조직 이식편 및 그것의 제조 및 사용 방법 | |
| EP3349812B1 (en) | Compositions derived from placenta and methods of producing the same | |
| US20220133955A1 (en) | Meshed placental membrane tissue grafts | |
| US20210393852A1 (en) | Meshed umbilical cord tissue grafts | |
| US20230347015A1 (en) | Lyophilized perforated placental membrane tissue grafts | |
| CZ2020339A3 (cs) | Způsob přípravy biologického krytí na bázi aminové membrány pro rekonstrukční zákroky, a biologické krytí | |
| CZ2017846A3 (cs) | Způsob přípravy materiálu na bázi amniové membrány a materiál připravitelný tímto způsobem | |
| US20210244845A1 (en) | Method Of Processing Amnion To Form A Suture |