CZ20003445A3

CZ20003445A3 - Alifatické aminokarboxylové a aminofosfonové kyseliny, aminonitrily a aminotetrazoly jako buněčná záchranná činidla

Info

Publication number: CZ20003445A3
Application number: CZ20003445A
Authority: CZ
Inventors: Lilian E. Dyck; Bruce A. Davis; Ya-Dong Liu; David A. Durden; Alan A. Boulton; I. Alick Paterson
Original assignee: University Of Saskatchewan Technologies Inc.
Priority date: 1999-03-25
Filing date: 1999-03-25
Publication date: 2001-02-14

Abstract

Nové sloučeniny obecného vzorce I, kde R| je (CH2)mCH3, kde m je 0 nebo celé číslo od 1 do 16 nebo alkenyl, alkinyl, f alkoxy, alkylthio nebo alkylsulfinylová skupina mající 2 až 17 atomů uhlíku, R2 = H, Ch3 nebo CH2CH3, R3 = H nebo CH3, R4 = H nebo CIT3, R5 = nižší alkyl mající 1 až 5 atomů uhlíku, n je celé číslo v rozsahu 1 až 3, a X je karboxyl (COOH), karbalkoxy (COOR5), kyano (CN), kyselina fosfonová (PO3H2), fosfonátový ester (PO3[R5]2) nebo 5-tetrazol a jejich farmaceuticky přijatelné soli. Výhodně jsou sloučeniny opticky čisté enantiomery R- nebo S-konfigurace, kde R3 = R4 = R5 = H, R2 = CPI3 a R, je nasycený alifatický řetězec s 1 až 5 atomy uhlíku. Sloučeniny jsou výhodně jako buněčná záchranná činidla

Description

Alifatické aminokarboxylové a aminofosfonové kyseliny, aminonitrily a aminotetrazoly jako buněčná záchranná činidla

Oblast techniky

Vynález se týká nových alifatických aminokarboxylových a aminofosfonových kyselin, aminonitrilů a aminotetrazolú, jejich solí, prostředků obsahujících takové sloučeniny a použití takových sloučenin jako buněčná záchranná činidla v lékařství a veterinářství.

Dosavadní stav techniky

Má se za to, že neurodegenerativní choroby (například chronické choroby jako je Alzheimrova nemoc, Parkinsonova nemoc, Hungtingtonova nemoc, Pickova nemoc, amyotropní laterální skleróza a glaukom a rovněž akutní poranění, jako je mrtvice, poranění hlavy, Bellova paréza a poranění páteře) zahrnují apoptotické procesy.

Deprenyl, alifatické propargylaminy, jejich odpovídající desmethylové analogy a rasagilin jsou pokládány za činidla, která chrání a zachraňují poškozené neurony v několika modelech degenerace [1-16], Má se za to, že propargylová skupina je požadavkem pro ochrannou nebo záchrannou aktivitu těchto sloučenin. Předešlé studie zkoumaly N-demethylaci a/nebo depropargylaci těchto léčiv [7,17].

Po určitou dobu je známo, že některé alifatické a aromatické acetylenické sloučeniny reagují s enzymy P450. Jedna z těchto reakcí vede k oxidaci koncového uhlíku acetylenových funkčních skupin za vzniku odpovídající kyseliny [18-20). Možnost oxidace N-acetylenové skupiny alifatických propargylaminů za vzniku matabolitů karboxylové kyseliny nebyla dříve určena. Rovněž nebyla dříve zvažována síla příbuzných kyselých sloučenin (aminofosfonových kyselin a aminotetrazolú) a prekurzorů takových sloučenin (aminonitrilů a aminoesterů) jako antiapoptotických činidel.

Vynálezci předkládaného vynálezu zjistili, že alifatické aminokarboxylové kyseliny a aminofosfonové kyseliny, aminonitrily a aminotetrazoly jsou

antiapoptotická činidla a mohou být použita jako buněčná záchranná činidla při léčbě lidí a živočichů.

Podstata vynálezu

Předkládaný vynález se týká sloučeniny obecného vzorce I i^x

R_T-C-N

R₃

Vzorec (I) \CH₂)n~X kde:

Ri je (CH₂)_mCH₃ kde m je 0 nebo celé číslo od 1 do 16 nebo alkenyl, alkinyl, alkoxy, alkylthio nebo alkylsulfinylová skupina mající 2 až 17 atomů uhlíku, Ri může být nesubstituován nebo je substituován alespoň jedním substituentem vybraným ze skupiny zahrnující hydroxy, aldehyd, oxo, nižší acyloxy, halogen, thio, sulfoxid, sulfon, fenyl, halogen-substituovaný fenyl, hydroxy-substituovaný fenyl, cykloalkyl mající 3 až 6 atomů uhlíku a heterocyklické substituenty mající 3 až 6 atomů, ze kterých jsou 1 až 3 heteroatomy vybrány z O, S a/nebo N,

R₂ = H, CH₃ nebo CH₂CH₃,

R₃ = H nebo CH₃,

R₄ = H nebo CH₃,

R₅ = nižší alkyl mající 1 až 5 atomů uhlíku, n je celé číslo v rozsahu 1 až 3, a X je karboxyl (COOH), karbalkoxy (COORs), kyano (CN), kyselina fosfonová (PO₃H₂), fosfonátový ester (PO₃[Rs]2) nebo 5-tetrazol a jejích solí, zejména jejích farmaceuticky přijatelných solí.

Sloučeniny obecného vzorce I, kde R1, R₂ a R₃ jsou navzájem odlišné jsou chirální. Bylo zjištěno, že R-enantiomery některých z těchto tříd nebo podtřídy těchto sloučenin (a S-enantiomery pro jiné třídy nebo podtřídy) jsou užitečné jako buněčná záchranná činidla pro léčbu a prevenci nemocí, kde dochází k zániku buněk apoptózou, jako je řada neurodegenerativních nemocí. Ve zvláštní třídě nebo podtřídě sloučenin nezabrání inaktivní enantiomer apoptóze, ale může antagonizovat • · · · · · ·· · · · · • · ·· · · · · · · ····· · ······ • · · · · · ···· ·· ·· ··· ··· ·· ·· antiapoptotická působení aktivních enantiomerů a jsou užitečné při výzkumu. Achirální sloučeniny rovněž vykazují vlastnosti buněčné záchrany.

Předkládaný vynález se také týká použití sloučenin obecného vzorce I jak jsou definovány shora a jejich solí jako buněčná záchranná činidla pro léčbu a prevenci nemocí kde dochází k zániku buněk apoptózou, zahrnující, nikoliv však s omezením, mrtvici, poranění hlavy, Bellovu plazíí, poranění páteře a poškození jiných nervů, Alzheimrovu nemoc, Parkinsonovu nemoc, Pickovu nemoc, amyotropní laterální sklerózu, Huntingtonovu nemoc, násobnou sklerózu, srdeční myopatii, nefropatii, retinopatii, diabetické komplikace, glaukom a rovněž idiopatickou neuropatii.

Předkládaný vynález poskytuje způsob léčení stavů, kdy dochází k zániku buněk apoptózou, který spočívá v tom, že se podá živočichu v případě potřeby účinné množství sloučeniny obecného vzorce I.

Předkládaný vynález se týká sloučenin obecného vzorce I

Rx-C-N r₃ \CH₂)n-X

Vzorec (I) kde:

Ri je (CH₂)_mCH₃ kde m je 0 nebo celé číslo od 1 do 16 nebo alkenyl, alkinyl, alkoxy, alkylthio nebo alkylsulfinylová skupina mající 2 až 17 atomů uhlíku, Ri může být nesubstituován nebo je substituován alespoň jedním substituentem vybraným ze skupiny zahrnující hydroxy, aldehyd, oxo, nižší acyloxy, halogen, thio, sulfoxid, suífon, fenyl, halogen-substituovaný fenyl, hydroxy-substituovaný fenyl, cykloalkyl mající 3 až 6 atomů uhlíku a heterocyklické substituenty mající 3 až 6 atomů, ze kterých jsou 1 až 3 heteroatomy vybrány z O, S a/nebo N,

R₂ = H, CH₃ nebo CH₂CH₃,

R₃ = H nebo CH₃,

R₄ = H nebo CH₃,

R₅ = nižší alkyl mající 1 až 5 atomů uhlíku, n je celé číslo v rozsahu 1 až 3, a X je karboxyl (COOH), karbalkoxy (COORs), kyano (CN), kyselina fosfonová (PO₃H₂), fosfonátový ester (PO₃[Rs]2) nebo 5-tetrazol a jejich solí.

Ve výhodném provedení předkládaný vynález poskytuje sloučeninu obecného vzorce I (jak je popsána shora) kde ·· ·· · · φφ ·· • · · · φ φ φφ · · φ · φφφφ φ · φ··· φφφ·· · ······ φφφφ φ φ φφφφ φφ Φ· φφ· ··· ₍ ·· ··

Ri je (CH₂)_mCH₃ kde m je O nebo celé číslo od 1 do 16 R₂ = CH₃, r₃ = h,

R₄ = H nebo CH₃,

R₅ = nižší alkyl mající 1 až 5 atomů uhlíku, n je celé číslo v rozsahu 1 až 3, a X je karboxyl (COOH), karbalkoxy (COOR5), kyano (CN), kyselina fosfonová (PO₃H₂), fosfonátový ester (PO₃[R₅]₂) nebo 5-tetrazol nebo její sůl.

Výhodné sloučeniny podle vynálezu jsou:

2-(2-Propylamino)octová kyselina;

2- (1-Hexylamino)octová kyselina;

(S)-2-(2-Heptylamino)octová kyselina;

3- (2-Propylamino)propionová kyselina;

3-(1-Hexylamino)propionová kyselina;

(R) -3-(2-Heptylamino)propionová kyselina;

2-(2-Propylmethylamino)octová kyselina;

2- (1 -Hexylmethylamino)octová kyselina;

(S) -2-(2-Heptylmethylamino)octová kyselina;

3- (2-Propylmethylamino)propionová kyselina;

3-(1 -Hexylmethylamino)propionová kyselina;

(R)-3-(2-Heptylmethylamino)propionová kyselina;

2-(2-Propylamino)acetonitril;

(R) -2-(2-Pentylamino)acetonitril;

2-(1-Hexylamino)acetonitril;

(S) -2-(2-Heptylamino)acetonitril;

(R)-3-(2-Heptylamino)propionitril;

2-(2-Propylmethylamino)acetonitril;

(R) -2-(2-Pentylmethylamino)acetonitril;

2-(1-Hexylmethylamino)acetonitril;

(S) -2-(2-Heptylmethylamino)acetonitril;

(R)-3-(2-Heptylmethylamino)propionitril;

2-(2-Propylamino)ethanfosfonová kyselina;

• ·

(R) -2-(2-Pentyíamino)ethanfosfonová kyselina;

(S) -2-(2-Heptylamino)ethanfosfonová kyselina;

2-(2-Propylmethylamino)ethanfosfonová kyselina; (S)-2-(2-Heptylmethylamino)ethanfosfonová kyselina; a (R)-2-(2-Heptylamino)ethan-5-tetrazol.

Sloučeniny obecného vzorce I, které jsou případně čistými enantiomery jsou nové. Achirální a racemické sloučeniny jsou nové s výjimkou následujících vyloučení, ačkoliv jejich vlastnosti jako buněčná záchranná činidla nejsou známá.

a) pro X = COOH; n = 1; R3 = R4 = H, s vyloučením sloučenin, pró které;

R2 = H a m = 1 až 4, 6, 7, 8, 9, 11 nebo 13, a R2 = CH3 a m = 0,1 nebo 2.

b) pro X = COOH; n = 1; R3 = H; R4 = CH3, s vyloučením sloučenin, pro které:

R2 = H a m = 2 nebo 3, a R2 = CH₃ a m = 0.

c) pro X = COOR5; n = 1; R3 = R4 = H, s vyloučením sloučenin,pro které:

R2 = H a m = 1 až 4 nebo 9, a R2 = CH3 a m = 0 nebo 1, a Rs = methyl, ethyl, terč.butyl.

d) pro X = COOH; n = 2; R3 = R4 = H, s vyloučením sloučenin, pro které:

R2 = H a m = 1 až 4, 6, 9 nebol 1, a R2 = CH₃ a m = 0,1 nebo 4.

e) pro X = COOH; n = 2; R3 = H; R4 = CH3, s vyloučením sloučenin, pro které:

R2 = H a m = 1 nebo 2.

f) pro X = COOR5; n = 2; R3 = R4 = H, s vyloučením sloučenin, pro které:

R2 = H a m = 1 až 5, 9 nebo 15,

R2 = CH3 a m = 0 nebol, a Rs = methyl, ethyl, terc.butyl.

g) pro X = COOR5; n = 2; R3 = H; R4 = CH3, s vyloučením sloučenin, pro které:

R2 = H a m = 1 nebo 2,

R2 = CH₃ a m = 0, a

Rs = methyl, ethyl, terc.butyl.

h) pro X = COOH; n = 3; R₃ = R₄ = H, s vyloučením sloučenin, pro které:

R2 = H a m = 2 nebo 6.

i)

j)

k)

l)

m)

n)

o)

P)

q)

• · pro X = COOR₅; n = 3; R₃ = R₄ = H, s vyloučením sloučenin, pro které:

R₂ = H a m = 2,

R₂ = CH3 a m = 0 nebol, a Rs = methyl, ethyl, terč.butyl.

pro X = CN (kyano); n = 1; R3 = R₄ = H, s vyloučením sloučenin, pro které: R₂ = H a m = 1,2, 4, 5 nebo 6 a R₂ = CH₃ a m = 0,1 nebo 2.

pro X = CN; n = 1; R₃ = H; R₄ = CH3, s vyloučením sloučenin, pro které:

R₂ = H a m = 1, a R₂ = CH3 a m = 0.

pro X = CN; n = 2; R₃ = R₄ = H, s vyloučením sloučenin, pro které:

R₂ = H a m = 1,2, 3, 4 nebo 6 a R₂ = CH3 a m = 0, 1 nebo 4 pro X = CN; n = 2; R₃ = H; R₄ = CH₃, s vyloučením sloučenin, pro které:

R₂ = H a m = 2, a R₂ = CH3 a m = 0.

pro X = CN; n = 3; R₃ = R₄ = H, s vyloučením sloučenin, pro které:

R₂ = H a m = 1 až 4, a R₂ = CH₃ a m = 1 nebo 2.

pro X = PO3H₂; n = 2; R₃ = R₄ = H, s vyloučením sloučenin, pro které:

R₂ = CH3 a m = 0, 1 nebo 5.

pro X = PO₃(Rs)2; n = 2; R₃ = R₄ = H, s vyloučením sloučenin, pro které:

R₂ = CH₃ a m = 0 nebo 1, a Rs = ethyl.

pro X = 5-tetrazol; n = 2; R₃ = R₄ = H, s vyloučením sloučenin, pro které:

R₂ = CH₃ a m = 0.

Zvlášť výhodné jsou ty z R a S konfigurací, závisející na podtřídě sloučeniny. Metody rozštěpení racemátů jsou známé. Vhodné metody zahrnují frakční krystalizací, derivatizaci racemátu následovanou stereospecifickým enzymatickým odstraněním připojené skupiny a chromatografii. Nicméně je výhodné připravit chirální sloučeniny obecného vzorce I z chirálních reakčních složek, za použití reakčních složek, které nepůsobí nepříznivě na stereochemii. Pokud se týká • · • · · · · · φ φ · φ · · φφφφ φ φ φφφφ φφφφφ φ φ · · φ · · φφφφ φ φ φφφφ φφ φφ φφφ φφφ φφ φφ enantiomerů je výhodné, když enantiomer neobsahuje více než 3 % sloučeniny opačné konfigurace. Je zvlášť výhodné, když enantiomer obsahuje méně než 1 % odpovídajícího enantiomerů opačné konfigurace.

Některé z inaktivních enantiomerů pro uvedenou třídu nebo podtřídu sloučenin silně antagonizují antiapoptotické působení aktivních enantiomerů a jsou užitečné jako výzkumné prostředky.

Vynález je rozšířen na soli sloučenin obecného vzorce I. Pro podávání solí by měly být tyto soli farmaceuticky přijatelné, ačkoliv mohou být užitečné i jiné soli, například při syntéze nebo čištění.

Příprava sloučenin podle vynálezu

Sloučeniny podle vynálezu se mohou připravit řadou různých způsobů. Jeden ze způsobů zahrnuje adici primárního aminu obecného vzorce II ^Ri r₂' nh₂ (Π) na olefinovou dvojnou vazbu α,β-nenasycených esterů karboxylové kyseliny (jako je methylakrylát) nebo esterů vinylfosfonových kyselin nebo na α,β-nenasycených nitrilů (jako je akrylonitril) obecného vzorce III [21]

CH₂=CH-X (III) kde X je polarizovaná skupina, jako je karboxylový ester, fosfonový ester nebo nitril za vzniku odpovídajících N-alkylaminopropionových esterů, ethanfosfonových esterů a propionitrilů.

Je možné použít amin obecného vzorce II, kde Ri se liší od R₂ ve formě racemátu a oddělit enantiomery následně, ale je výhodné použít amin v podstatě v enantiometricky čisté formě.

Chirální primární aminy (R- nebo S- formy) se připraví rekrystalizaci tartarátů racemátů z methanolu [22] s výjimkou pro (R) a (S)-2-butylaminy, které dodává Aldrich Chemical Co. Enantiomerní čistota se určí za použití chromatografie s chirální kapilární kolonou a chirálním derivatizačním činidlem [23], Analogicky ke shora uvedenému, chirální primární aminy mohou také být adovány na C-C dvojnou vazbu methylakrylátu, diethylvinylfosfonátu nebo akrylonitrilu za získání odpovídajícího chirálního methyl N-alkylaminopropionátu, chirálního diethyl Nalkylaminoethanfosfonátu nebo chirálního N-alkylaminopropionitrilu.

V jednom provedení se přebytek chirálního aminu aduje na olefinovou vazbu akrylonitrilu jak je zobrazeno v následujícím schématu.

Přebytek aminu a akrylonitrilu:

R^ přebytek h₂g=ch-c=n hod., 20 °C, potom reflux 90 min.

Rl nh-ch₂ch₂c=n

Rý kde Ri = vodík, methyl nebo ethyl a

R₂ = methyl, ethyl, propyl, butyl, pentyl, hexyl.

V dalším provedení se může přebytek aminu adovat na olefinovou vazbu diethylvinylfosfonátu za získání odpovídajícího diethyl N-alkylaminoethanfosfonátu. Kyselina chlorovodíková hydrolyzuje diester aminofosfonové kyseliny za získání odpovídající aminofosfonové kyseliny jako hydrochloridové soli.

Ještě v dalším provedení se může přebytek aminu adovat na olefinovou vazbu methylakrylátu za získání odpovídajícího methyl N-alkylaminopropionátu [24], Hydrolýza karboxylátového esteru kyselinou chlorovodíkovou vede k aminokyselině a její hydrochloridové soli v souladu s následujícím reakčním schématem:

Hydrolýza esterů:

O

NH-CH₂CH₂C-OCH₃

HC1 _x reflux

RY

O nh-ch₂ch₂c-oh φ φ φ • φ φ φ φ · φ φ φ φ φ φ φ φ φ φφ φφ φφ φ · φ φ φ φφφ φφφ

Druhý postup poskytuje sloučeniny podle vynálezu, které obsahují pouze jeden uhlíkový atom mezi atomem dusíku a funkční skupina zahrnuje kondenzaci primárního alifatického aminu obecného vzorce II s brommethylovou reakční složkou obecného vzorce IV

LCH₂X (IV) kde L je odštěpující se skupina, například halogenid, tosyl nebo mesylskupina (výhodný je bromid) a X je karboalkoxy ( výhodně karbomethoxy nebo karbethoxy), nitril nebo fosfodiethoxy. Opět se může použít amin v racemické nebo enantiomerně čisté formě. V jednom výhodném provedení reagují dva ekvivalenty aminu s jedním ekvivalentem brommethylového analogu obecného vzorce IV za vzniku požadovaného aminomethankarboxylátového (glycinového) esteru a hydrobromidové soli aminu, která se může izolovat a znova použít podle následujícího reakčního schématu.

Dva ekvivalenty aminu a jeden ekvivalent brommethylesteru v etheru:

Rn

NH,

Rz ekvivalenty

Rn

R,

O

II

NH-CH2C-OCH3 o

II

BrCH₂C-OCH₃ ekvivalent ether/reflux/3 dny ^R1K +

R/

NH₂.HBr

V dalším výhodném provedení reagují dva ekvivalenty aminu s jedním ekvivalentem brommethylového analogu vzorce IV za vzniku požadovaného aminomethannitrilu (aminoacetonitrilu) a hydrobromidové soli aminu, která se může izolovat a znovu použít podle následujícího reakčního schématu.

Dva ekvivalenty aminu a jeden ekvivalent bromacetonitrilu v etheru:

ekvivalenty

BrCH₂C=N ekvivalent ether/reflux/3 dny

Další cesta ke sloučeninám podle vynálezu zahrnuje trifluoracetylaci aminu následovanou reakcí s brommethyl, bromethyl nebo brompropylovými analogy esterů karboxylových kyselin nebo nitrilů obecného vzorce V

L(CH₂)nX (V) kde L je odštěpující se skupina, například halogenid, tosyl nebo mesylová skupina(výhodný je bromid), n je 1, 2 nebo 3 a X je karboalkoxy (výhodně methoxy nebo ethoxy), nitril nebo fosfodiethoxy.

Amin se může použít v racemické nebo enantiomerně čisté formě. Amin reaguje s anhydridem trifluoroctové kyseliny nebo trifluoracetylhalogenidem v inertním rozpouštědle, například v chlorovaném uhlovodíku, jako je methylendichlorid, chloroform nebo chlorid uhličitý a báze, například organická báze jako je triethylamin. N-trifluoracetylamin se potom zahřívá při zpětném toku s bromsloučeninou obecného vzorce V, vhodně v přítomnosti báze jako je terc.butoxid draselný v polárním rozpouštědle, například acetonitrilu a v přítomnosti crown etherového katalyzátoru, například 18-crown-6. Produkt této reakce se potom hydrolýzuje, výhodně reakcí s bází jako je hydroxid alkalického kovu v alkoholovém roztoku.

Tetrazolové sloučeniny podle vynálezu se připraví adicí azidového iontu na nitrilovou trojnou vazbu [25], Opět, amin se může použít v racemické nebo enantiomerně čisté formě. V jednom výhodném provedení azidový iont je generován pomalým přidáváním chloridu hlinitého k roztoku/suspenzi azidu sodného v tetrahydrofuranu při 0 °C. Ke vznikajícímu roztoku azidu hlinitého se přidá nitril ·* ·· • » ·

C · 4 * · · • · · • · · * 9

9 9 9 99 9

9 99 9

9 9 9 9 · · · · · ·· ·» »·· · (přípraven jak bylo popsáno shora) v tetrahydrofuranu při teplotě místnosti, následuje míchání po dobu 2 hodin a potom mírné zahřívání při zpětném toku po dobu několika hodin podle následujícího schématu.

Adice azidového iontu na nitril:

A1C1₃ + NaN₃

THF/0°C

R \—NHCH₂CH₂—₊ A1(I^)₃ (neizolován) r₂THF, 2 h/20°C reflux 4 až 14 hod.

1r ¹'V^4HCH₂CH₂-^^Í 'N R,- H^N “N

N-Methylace různých sekundárních aminů popsaných shora se dosáhne reduktivní methylací zá použití formaldehydu a fosfitu sodného [26], Opět, amin se může použít v racemické nebo enantiomerně čisté formě. Aminokarboxylátový ester nebo aminonitril (jako hydrochloridová sůl nebo volná báze) se rozpustí ve vodném dihydrogenfosfitu sodném a reaguje s přebytkem 37% vodného formaldehydu při 60 °C po dobu 15 minut. Produkt se izoluje etherovou extrakcí po alkalizaci ledem chlazené reakční směsi s hydroxidem sodíku. Výhodné provedení je ukázáno v následujícím reakčním schématu.

«*> 9 4-9* 44 • » · 9 ♦· ·* *94* « 9 99 · · 9 · * *

4 9 9 9 9 9 4 9 9 9 *

4·· 4 9 9 · 9 · ·· 9·· *99 99 9«

N-MethyJace aminoesteru:

^Rl\ II ý—NHCH₂CH₂ —C-OCH₃

R/

IN NaH₂FO₃37% HCHO 60°C/15 min ^Ri_x__N ^,CÍÍ3

O r₂- ch₂ch₂ —c—och₃

Ještě další výhodné provedení je uvedeno v následujícím reakčním schématu.

N-Methylace aminonitrilu:

^Ri>

^Rí ejch₂ch₂—ON

IN NaH₂FO₃37% HCHO 60°C/15 min ^Ri

V“N

R₂-’ • · • · · · · • · · · · · • · · · · ·· ·· ··

Terapeutické metody vynálezu

Jak bylo uvedeno shora, sloučeniny obecného vzorce i (jak jsou popsány shora) mají řadu terapeutických aplikací.

V jednom aspektu předkládaný vynález poskytuje způsob léčby nebo prevence stavu, kde dochází k zániku buněk apoptózou, zahrnující podání živočichovi v případě potřeby, účinného množství sloučeniny obecného vzorce I.

Výraz „účinné množství“ jak se zde používá zahrnuje množství účinné, v dávkách a časových periodách, nezbytných k dosažení požadovaného účinku.

Výraz „živočich“ jak se zde používá, zahrnuje všechny členy živočišné říše, včetně lidí.

Dalším aspektem předkládaného vynálezu je použití sloučeniny obecného vzorce I pro léčbu nebo prevenci stavů, kde dochází k zániku buněk apoptózou.

Ještě dalším aspektem předkládaného vynálezu je použití sloučeniny obecného vzorce I pro přípravu léčiva pro léčbu nebo prevenci stavů, kde dochází k zániku buněk apoptózou.

Stavy, při kterých dochází k zániku buněk apoptózou zahrnují, nikoliv však s omezením, mrtvici, poranění hlavy, Bellovu plazii, poranění páteře a poškození jiných nervů, Alzheimrovu nemoc, Parkinsonovu nemoc, Pickovu nemoc, amyotropní laterální sklerózu, Huntingtonovu nemoc, násobnou sklerózu, srdeční myopatii, nefropatii, retinopatii, diabetické komplikace, glaukom a rovněž idiopatickou neuropatii.

Farmaceutické prostředky

Sloučeniny obecného vzorce I mohou být formulovány do farmaceutických prostředků pro podání subjektům v biologicky kompatibilní formě vhodné pro podání in vivo. Prostředky obsahující sloučeniny podle vynálezu se mohou připravit samy o sobě známými způsoby pro přípravu farmaceuticky přijatelných prostředků, které mohou být podány subjektům, tak, že účinné množství aktivní substance se spojí ve směs s farmaceuticky přijatelnými vehikuly. Vhodné vehikuly jsou popsány například v Remingtonů Pharmaceutical Sciences (Remingtonů Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, Pa. USA 1985). Na této bázi, prostředky zahrnují, i když nikoli výlučně, roztoky substancí ve spojení s jedním nebo více farmaceutickými vehikuly nebo ředidly a obsažené v pufrových roztocích o vhodném pH a iso-osmotické s fyziologickými tekutinami.

• ·

ΛΑ 9 9 9 9 · · · · ·

I *+ ······ 9 9 9 9 9

9 9 9 · · ··· ·· 9 9 999 999 99 99

Aktivní substance se může podávat konvenčním způsobem, jako je injekce (subkutánní, intravenózní atd.), orální podání, inhalace, transdermální aplikace nebo rektální podání.

Při orálním podání mohou být sloučeniny podány jako tablety, povlečené tablety, želatinové kapsle, kapsle, tobolky a roztoky nebo suspenze. Sloučeniny mohou být podány paranterálně nebo jakoukoliv jinou vhodnou cestou podání, jako intravenózní, subkutánní, depotní injekce, intramuskulární, intratekální, intraventrikulární, intra-artikulární, rektální (čípky, střevní nálev), sublinguální, bukální, intra-okulární, intra-vitreo, transdermální (kůží), nazální kapky (zmlžovač, insuflace), liposomální systém dodávání. Denní dávka se pohybuje v rozsahu od 1 do 100 mg.

Podle dalšího aspektu předkládaný vynález poskytuje farmaceutický prostředek zahrnující sloučeninu obecného vzorce I ve směsi s vhodným nosičem nebo ředidlem. Sloučenina může být achirální nebo v podstatě enantiometricky čistý R- nebo S-enantiomer, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl, ve směsi s farmaceuticky přijatelnými ředidly nebo nosiči. Prostředky jsou užitečné při léčbě nebo prevenci stavů, u kterých dochází k zániku buněk apoptózou.

Dalším aspektem předkládaného vynálezu je komerční balení, obsahující jako aktivní složku sloučeninu obecného vzorce I nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl, společně s návodem pro použití pro léčbu nebo prevenci stavu, u kterého dochází k zániku buněk apoptózou.

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1 ln vitro protokol pro posouzení antiapoptotické kapacity různých sloučenin v cerebelárních zrnitých buňkách:

Následující biologická data demonstrují, že sloučeniny podle vynálezu vykazují antiapoptotické vlastnosti.

Kultury cerebelárních zrnitých buněk (CGC) mohou být indukovány do apoptózy přidáním vysoké koncentrace cytosin arabinosidu (AraC)[27j. Bylo prokázáno, že toto je na p53 závislá apoptóza [28], Byl naměřen antiapoptotický účinek některých aminokyselin, aminoesterů, aminofosfonových kyselin, aminonitrilů a aminotetrazolů za použití tohoto systému.

• ·	• · ·	• · ·	• ·
•	•	• ·	•	•	•		•	•	•
•	•	• · ·	•	•	• ·		•	•	•
•	•	• ·	•	•	•		•	•	•
• ·		• ·	• · ·	• · ·		Φ ·		• ·

Kultury CGC se získaly z 6 až 8 dnů starých mláďat krys Wistar. Kultury byly pěstovány na skle v 35 mm petriho miskách po dobu 3 dnů a potom se užily k pokusům. Do prostředí kultury se přidaly alikvoty (20 μΙ) roztoku léčiva (AraC, antiapoptotická léčiva, vehikula léčiv). Po 24 hodinách se kultury fixovaly s FAM a zbarvily se bis-benzamidem. Normální a apoptotická jádra byla počítána k celkovým 90 až 120 buňkám na kulturu. Nalezená optimální koncentrace AraC činila 300 μΜ.

Výsledky jsou shrnuty v tabulkách 1 až 4.

Tabulka 1 - Záchrana aminokyselinami a estery ve zkoušce CGC

Sloučenina	10'⁶M	10'⁹M	10'¹²M	Záchrana
Glyciny (aminooctové kyseliny)
2-Propyl	R	X	X	ano
1-Hexyl	X	R	X	ano
R-2-Heptyl	X	X	X	ne
S-2-Heptyl	R	R	R	ano

B-Alaniny (aminopropionové kyseliny)

2-Propyl	X	R	R	ano
2-Propyl-N-methyl	R	R	X	ano
R-2-Pentyl	X	X	X	ne
1-Hexyl .	R	R	R	ano
1 -Hexyl-N-methyl	R	R	X	ano
R-2-Heptyl		R	R	ano
R-2-Heptyl-N-methyl	R	R	R	ano
S-2-Heptyl			X	ne
B-Alanináty (estery)
2-Propyl	X	X	X	ne
1-Hexyl	X	R	R	ano
R-2-Heptyl-N-methyl	R	R	R	ano

R = záchrana; X = žádná záchrana ···· · · · · · · • ·· · · · ·· · · · * ···· · · · · · · • ·· · · · · ·· · · · « · · · · · ···· ·· ·« ··· ··· ·· ··

Tabulka 2 - Záchrana aminofosfonovými kyselinami ve zkoušce CGC

Sloučenina	10‘⁶M	10'⁹M	10’¹²M	Záchrana
Glyciny (aminooctové kyseliny)
2-Propyl	R	R	R	ano
R-2-Pentyl	R	X	X	ano
1 -Hexyl	X	X	X	ne
R-2-Heptyl	R‘	X	X	ano*
S-2-Heptyl	X	R	R	ano

‘Přítomnost 0,5% S-enantiomeru (který je silný při 10'¹² M) v R-enantiomeru je pravděpodobnou příčinou pro zřejmou záchranu R-enantiomerem při 10⁶ M.

Tabulka 3 - Záchrana aminotetrazoly ve zkoušce CGC

Sloučenina	1O’^eM	10‘⁹M	10'¹²M	Záchrana
R-2-Heptyl	R	R	R	ano
S-2-Heptyl	X	X	X	ne

• ·

Tabulka 4 - Záchrana aminonitrily ve zkoušce CGC

Sloučenina

Acetonitrily

2-Propyl

R-2-Pentyl

S-2-Pentyl

-Hexyl

R-2-Heptyl

S-2-Heptyl

Propionitrily

2-Propyl

2- Propyl-N-methyl R-2-Pentyl terc.Amyl terc.Amyl-N-methyl

3- Pentyl 1-Hexyl

-Hexyl-N-methyl R-2-Heptyl R-2-heptyl-N-methyl S-2-Heptyl

10'⁶M 10'⁹M

R

X

T

X

R

X

10'¹²M Záchrana

R

X

R

X

R

X

R

X

R ano ano ne ano ne ano

X

T

X

R

X

R

X

R

X

X ne ne ne ne ne ano ne ne ano ano ne

R = záchrana; X = žádná záchrana; T = toxický

Podrobné syntetické postupy

Dále jsou uvedeny neomezující příklady syntetických postupů.

Příklad 2

Hydrochlorid methyl 3-(1-hexylamino)propionátu [Methyl N-(1-hexyl)-p-alaninát] /, cooch₃

H

K 1-hexylaminu (7,58 g, 75 mmol) chlazenému lázní voda-led se přidá po kapkách methylakrylát (4,3 g, 50 mmol). Po skončení přidávání se nechá teplota stoupnout na teplotu místnosti a reakční roztok se míchá 5 hodin a potom se zahřívá při zpětném toku 90 minut. Po míchání přes noc při 20 °C se produkt, methyl 3-(1hexylamino)propionát destiluje (teplota varu = 85 až 88 °C/2 mm; udávaná teplota podle literatury 80 až 84 °C/0,5 mm) jako čirá, bezbarvá kapalina ve výtěžku 55 %. Hydrochloridová sůl se připraví přidáním methanolové HCI (15%) k etherovému roztoku volné báze; teplota tání = 204 až 205 °C (teplota udávaná v literatuře 190 až 192 °C)

Hmotnostní spektrum: m/e: 187 (M+); 116 (M-CsHn); 84.

Příklad 3

Hydrochlorid (R)-Methyl 3-(2-heptylámino)propionátu [(R)-Methyl N-(2-heptyl)-palaninát]

Připraví se podle příkladu 2. Hydrochloridová sůl se krystaluje ze směsi methanol/ether; teplota tání = 89,5 až 90,5 °C.

Hmotnostní spektrum: m/e: 201 (M+); 186 (M-CH₃); 130 (M-C5H11)

Příklad 4

Hydrochlorid methyl 3-(2-propylamino)propionátu [Methyl N-(2-propyl)-p-alaninát]

Připraví se podle příkladu 2. Hydrochloridová sůl se rekrystaluje ze směsi methanol/ether; teplota tání = 108 až 110 °C (teplota tání udávaná v literatuře 107 °C).

Hmotnostní spektrum: m/e: 145 (M+); 130 (M-CH3); 98; 72; 56.

Příklad 5

Hydrochlorid (R)-3-(2-heptylamino)propionové kyseliny [(R)-N-(2-heptyl)-p-alanin]

COOH (R)-3-(2-Heptylamino)propionitril (7,5 g, 44,6 mmol) (připravený podle příkladu

18) se zahřívá při zpětném toku s koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou (50 ml) po dobu 4 hodiny. Po filtraci nerozpustného chloridu amonného se vodný roztok odpaří do sucha na rotační odpařovačce. Zbytek se míchá s dichlormethanem (120 ml) po dobu 2 hodin a nerozpustný chlorid amonný se filtruje. Filtrát se koncentruje, opět se filtruje a potom se odpaří a získá se bezbarvý olej, který po ochlazení krystalizuje. Výtěžek hygroskopického produktu je kvantitativní; teplota tání = 57 až 58 °C.

Hmotnostní spektrum: m/e: 187 (M+); 172 (M-CH₃); 116 (M-C₅Hn); 72.

1H-NMR (D₂O, 300 MHz): 0,72 (t, 3H); 1,18 (d, 3H); 1,1-1,3 (m, 6H); 1,42/1,60 (2m, vždy 1H); 2,67 (t, 2H); 3,17 (m, 3H; aCH & CH₂COOH).

Sloučenina uvedená v názvu se také může připravit hydrolýzou methylesteru kyselinou chlorovodíkovou (připraven podle příkladu 3).

Příklad 6

Hydrochlorid (S)-3-(2-heptylamino)propionové kyseliny [(S)-N-(2-heptyl)-0-alanin]

Připraven podle příkladu 5. Hydrochloridová sůl, teplota tání = 56 až 58 °, je hygroskopický.

Hmotnostní spektrum: m/e: 187 (M+); 172 (M-CH₃); 128 (M-CH₂COOH); 116 (MC₅Hh).

1H-NMR (D₂O, 300 MHz): 0,75 (t, 3H); 1,18 (d, 3H); 1,1-1,3 (m, 6H); 1,45/1,60 (2m, každý 1H); 2,68 (t, 2H); 3,20 (m, 3H; aCH & CH₂COOH).

Φ · ·· · ♦ φφφ · · · • · · · • · · · • · φ φ φ φ φ · φ φ φ· • φ φ φ · · • · · φ φ ♦ · · φ ··· ·

Příklad 7

3-(1-Hexylamino)propionová kyselina [Ν-(1 -hexyl)-p-alanin]

Hydrochlorid methyl 3-(1-hexylamino)propionátu (viz příklad 2) se hydrolyzuje zahříváním při zpětném toku s 2N HCI po dobu 24 hodin a potom následuje odpaření do sucha; teplota tání = 95 až 97 °C (žádný literární údaj).

Hmotnostní spektrum: m/e: 173 (M+); 102 (M-C5H11); 84, 72.

1H-NMR (D₂O, 300 MHz): 0,73 (t, 3H); 1,17 (m, 6H); 1,52 (m, 2H); 2,68 (t, 2H); 2,93 (t, 2H); 3,18 (t, 2H).

Příklad 8

Hydrochlorid 3-(2-propylamino)propionové kyseliny [N-(2-propyl)-p-alanin]

Připraví se hydrolýzou esteru (příklad 7). Produkt je bílý prášek, teplota tání = 154 až 155 °C (žádný literární údaj).

Hmotnostní spektrum: m/e: 131 (M+); 116 (M-CH₃); 98; 56.

1H-NMR (D₂O, 300 MHz): 1,20 (d, 6H); 2,70 (t, 2H); 3,19 (t, 2H); 3,32 (m, 1H).

Příklad 9

Hydrochlorid ethyl 2-(2-propylamino)acetátu [Ethyl N-(2-propargyl)glycinát]

NHCH₂COOC₂H₅

K roztoku 2-propylaminu (4,4 g, 75 mmol) v etheru (100 ml) se přidá ethylbromacetát (6,26 g, 37,5 mmol). Roztok se míchá při 20 °C po dobu 3 dnů. Vysrážený hydrobromid 2-propylaminu se filtruje a filtrát se odpaří na rotační odpařovačce a získá se 5,4 g čiré světle žluté kapaliny (surový výtěžek = 99 %). Připraví se hydrochloridová sůl a rekrystalizuje se ze směsi ethanol/ether; teplota tání = 120 až 121 °C (žádný literární údaj).

• · · · · • · · « · · • ♦ · φ · φ · φ φ φ φ φ φφφφ «φ φ φ φ φφ

Hmotnostní spektrum: m/e: 145 (M+); 130 (M-CH3); 72 (M-COOC2H5).

Příklad 10

Hydrochlorid 2-(2-propylamino)octové kyseliny [N-(2-Propyl)glycin]

Vzorek se připraví z nitrilu (připraven podle příkladu 25) v 72% výtěžku za použití hydrolyzního postupu, který je podobný postupu popsaném v příkladu 12. Hydrochloridová sůl se rekrýstalizuje z acetonu; teplota tání = 180 až 184 °C (teplota tání udávaná v literatuře 203 až 204,5 °C; 182 až 183 °C).

Hmotnostní spektrum: (Cl). 118 (M+1); 102 (M-CH₃); 72 (M-CO₂H); (El). 117 (M+); 102 (M-CH3); 72 (M-COOH).

1H-NMR (D₂O, 300 MHz): 1,19 (d, 6H); 3,33 (m, 1H); 3,79 (s, 2H).

Příklad 11

Hydrochlorid 2-(1-hexylamino)octové kyseliny [N-(1-Hexyl)glycin] IHxActAc

Vzorek se připraví z nitrilu (připraven analogicky podle příkladu 10) v 72% výtěžku za použití hydrolyzního postupu, který je podobný postupu popsaném v příkladu 12. Hydrochloridová sůl se rekrýstalizuje z acetonu; teplota tání = 162 až 164 °C (teplota tání udávaná v literatuře 215 až 218 °C).

Hmotnostní spektrum: m/e: 159 (M+); 114 (M-CO₂H); 88 (M-CsHn).

1H-NMR (D₂O, 300 MHz): 0,72 (t, 3H); 1,20 (d, 6H); 1,55 (m, 2H); 2,96 (t, 2H); 3,77 (s, 2H).

Příklad 12

Hydrochlorid (R)-2-(2-heptylamino)octové kyseliny [(R)-N-(2-Heptyl)glycinj

nh-ch₂cooh • ♦ • ·

Roztok (R)-2-(2-heptylamino)acetonitrilu (1,20 g, 7,79 mmol) (připraven podle příkladu 23) v koncentrované HCI (12 ml) a vodě (5 ml) se zahřívá 48 hodin na 90 °C. Po ochlazení na teplotu místnosti se reakční směs koncentruje do sucha, filtruje se a promyje se ethanolem k odstranění NH4CI. Vzniklý filtrát se koncentruje a získá se surový produkt (1,40 g). Roztok surového produktu (0,60 g) v koncentrované HCI (20 ml) a vodě (10 ml) se zahřívá 24 hodin při 90 °C. Po ochlazení na teplotu místnosti se reakční směs odpaří do sucha a trituruje se s etherem a získá se hydrochloridová sůl jako krystalická pevná látka (0,60 g, celkově 37% výtěžek); teplota tání = 162 až 164 °C.

Hmotnostní spektrum: m/e (Cl). 174 (M+1); 158 (M-CH3); 102 (M-C5H11).

1H-NMR (D₂O, 300 MHz): 0,74 (t, 3H); 1,18 (d, 3H); 1,1-1,3 (m, 6H); 1,45/1,60 (2m, vždy 1H); 3,21 (m, 1H); 3,79 (s, 2H).

Příklad 13

Hydrochlorid (S)-2-(2-heptylamino)octové kyseliny [(S)-N-(2-Heptyl)glycin]

Produkt se připraví jak je popsáno v příkladu 12 v 72% celkovém výtěžku hydrolýzou nitrochloridové soli; teplota tání =161 až 163 °C.

Hmotnostní spektrum: m/e (Cl). 174 (M+1); 156 (M-OH); 128 (M-CO2H).

1H-NMR (D₂O, 300 MHz): 0,73 (t, 3H); 1,18 (d, m; 9H); 1,47, 1,60 (2m, vždy 1H);

3,21 (m, 1H); 3,78 (s, 2H).

Příklad 14

Hydrochlorid methyl 3-(2-propylmethylamino)propionátu [Methyl N-(2-propyl)-Nmethyl-p-alaninátu]

CH2CH2COOCH3 φφ φφ φ φ φ φ « « φφφ • φ φ φ · φ φ φ φ φφ φφ φ φ φ φ φ » φ · φ φ φ φ φ » φ φ φ φ φφ

Κ roztoku hydrochloridu methyl 3-(2-propylamino)propionátu (příklad 10) (0,907 g, 5 mmol) v 1N dihydrogenfosfitu (25 ml) se přidá 37% formaldehyd (2,1 ml, 23 mmol). Roztok se míchá při 60 °C po dobu 10 minut, potom se ochladí v lázni ledu a vody a alkalizuje se 10% hydroxidem sodným (10 ml) Vzniklý roztok se nasytí chloridem sodným (9 g) a bezprostředně se extrahuje etherem (3x15 ml). Spojené filtráty se suší nad bezvodým síranem hořečnatým a odpaří se do sucha a získá se bezbarvá kapalina. Hydrochloridová sůl, připravená přidáním methanolové HCl k etherovému roztoku volné báze, se vysráží jako viskózní olej v 83% výtěžku. Hmotnostní spektrum: m/e: 159 (M+); 144 (M-CH₃); 86 (M-CH2COOCH3.

Příklad 15

Hydrochlorid (R)-methyl 3-(2-heptylmethylamino)propionátu [(R)-Methyl -(2-heptyl)N-methyl-p-alaninátu]

Hydrochloridová sůl se získá v 93% výtěžku jako bezbarvá viskózní kapalina. Hmotnostní spektrum: m/e: 215 (M+); 200 (M-CH3); 144 (M-CsHn).

Příklad 16

Hydrochlorid (R)-3-(2-heptylmethylamino)propionové kyseliny [N-(2-Heptyl)-Nmethyl-p-alanin]

Hydrochloridová sůl se vysráží jako bezbarvý viskózní olej.

Hmotnostní spektrum: m/e: 201 (M+1); 186 (M-CH3); 130 (M-C5H11).

1H-NMR (D₂O, 300 MHz): 0,72 (t, 3H); 1,18 (d, 9H); 1,47, 1,59 (2m, vždy 1H); 2,65 (d, 3H); 2,74 (t, 2H); 3,11 (m, 1H); 3,34 (s, 2H).

Příklad 17

Hydrochlorid (R)-3-(2-heptylamino)propionitrilu • » f · * • · ·· • · · · · ♦ · · · ·· ·· ·

C=N

K (R)-2-heptylaminu (99,4 % R) (9,28 g, 80,7 mmol) chlazeném v lázni ledvoda se přidá po kapkách akrylonitril (2,85 g, 3,543 ml, 54 mmol). Po skončení přidávání se teplota zvýší na teplotu místnosti a reakční roztok se míchá 5 hodin a potom se zahřívá při zpětném toku 90 minut. Po míchání přes noc při 20 °C se produkt, (R)-3-(2-heptylamino)propionitril destiluje jako čirá, bezbarvá kapalina, teploty tání 101 až 102 °C/2 mm, s výtěžkem 85 %. Hydrochloridová sůl se připraví přidáním ethanolové HCI (15%) k etherovému roztoku volné báze; teplota tání = 134 až 135 °C.

Hmotnostní spektrum: m/e: (Cl) 169 (M+H)+; 153 (M-CH₃); 97 (M-CsHn).

1H-NMR (D₂O, 300 MHz): 0,73 (t, 3H); 1,20 (d, m; 9H); 1,45, 1,61 (2m, vždy 1H);

2,85 (t, 2H); 3,3 (m, 3H).

Elermentární analýza: Vypočteno: %C = 58,66; %H = 10,34; %N = 13,68.

Nalezeno: % C = 58,73; %H = 10,53; %N = 13,47.

Výchozí materiál, (R)-2-heptylamin, se rozdělí od racemátu opakovanou rekrystalizací jeho L-tartarátové soli z methanolu. Osm rekrystalizací za použití poměru objemu (methanolu) k hmotnosti (tartarátové soli) 2,4 až 2,6 (zvýšení jak se zvyšuje optická čistota) poskytuje R-enantiomer s optickou čistotou 99,4 % R. Optická čistota se stanoví derivatizací čerstvě připraveným chirálním reakčním činidle (S)-N-trifluoracetylchloridem a potom plynovou chromatografii na chirální koloně [23],

Příklad 18

Hydrochlorid (S)-3-(2-heptylamino)propionitrilu (S)-2-Heptylamin jako jeho D-tartarátová sůl se připraví rekrystalizací racemátu (obohacého S, izolován a připraven z kombinovaných filtrátů získaných při rekrystalizacích L-tartarát s R-enantiomerem popsané v příkladu 17). Optická čistota • · ·· · • · 9 * * · · • · ·· · • · 9 9 9 9

9 9 9 9

99 9999 je 99,4 % S. S-2HECN se připraví v 85% výtěžku (teplota varu 99 až 100 °C/2 mm) jak je popsáno pro R-enantiomer v příkladu 17. Hydrochloridová sůl se rekrystalizuje ze směsi methanol/ether; teplota tání = 133 až 134 °C.

Hmotnostní spektrum: m/e: (Cl) 169 (M+H)+; 153 (M-CH₃); 128 (MCH2CN); 97 (MC₅Hu).

H-NMR (D₂O, 300 MHz): 0,72 (t, 3H); 1,20 (d, m; 9H); 1,45, 1,62 (2m, vždy 1H);

2,85 (t, 2H); 3,29 (m, 3H).

Elermentámí analýza: Vypočteno: %C = 58,66; %H = 10,34; %N = 13,68.

Nalezeno: % C = 58,61; %H = 10,10; %N = 13,42.

Příklad 19

Hydrochlorid 3-(2-propylamino)propionitrilu

Volná báze, teploty varu 94 °C/30 mm (teplota varu udávaná v literatuře 86 až 87 °C/17 mm) se připraví podle postupu příkladu 17 a potom se převede na hydrochloridovou sůl, která rekrystalizuje ze směsi methanol/ether; teplota tání =

145,5 až 146 °C (žádný literární údaj).

Hmotnostní spektrum: m/e: 140 (M+); 97 (M-CH₃); 72 (M-CH₂CN).

1H-NMR (D₂O, 300 MHz): 1,20 (d, 6H); 2,85 (t, 2H); 3,29 (t, 2H); 3,36 (m, 1H).

Příklad 20

Hydrochlorid 3-(1 -hexylamino)propionitrilu

Hydrochloridová sůl se rekrystalizuje ze směsi ethanol/ether; teplota tání =

188 až 189 °C (žádný literární údaj).

Hmotnostní spektrum: m/e: 154 (M+); 114 (M-CH₂CN); 83 (M-C₅Hn).

H-NMR (D₂O, 300 MHz): 0,72 (t, 3H); 1,18 (m, 6H); 1,53 (m, 2H); 2,87 (t, 2H); 2,96 (t, 2H); 3,29 (t, 2H).

Příklad 21 ·· «· ·· • · · · • · ·» • · · · • · · · ·· ·· • · • ·

Hydrochlorid 3-(3-pentylamino)propionitrilu

Volná báze, teploty varu = 84 až 85 °C/2 mm (žádný literární údaj) se převede na hydrochloridovou sůl, teploty tání = 118,5 až 119,5 °C (žádný literární údaj). Hmotnostní spektrum: m/e: 140 (M+); 111 (M-C2H5); 100 (M-CH2CN); 82; 70.

1H-NMR (D₂O, 300 MHz): 0,83 (t, 6H); 1,64 (m, 4H); 2,89 (t, 2H); 3,10 (m, 1H); 3,33 (t, 2H).

Příklad 22

Hydrochlorid 3-(terc.amylamino)propionitrilu

Volná báze, teploty varu = 62 až 63 °C/2 mm (žádný literární údaj) se převede na hydrochloridovou sůl, teploty tání = 199 až 200 °C (žádný literární údaj). Hmotnostní spektrum: m/e: 140 (M+, nepřítomno); 125 (M-CH3); 111 (M-C2H5). 1H-NMR (D₂O, 300 MHz): 0,82 (t, 3H); 1,20 (s, 6H); 1,58 (q, 2H); 2,83 (t, 2H); 3,29 (t, 2H).

Příklad 23

Hydrochlorid (R)-2-(2-heptylamino)cetonitrilu nh-ch₂c=n

K roztoku (R)-2-heptylaminu (1,90 g, 16,5 mmol) v etheru (25 ml) se přidá bezvodý Na2CO3 (1,60 g, 14,9 mmol) a bromacetonitril (0,92 ml, 13,2 mmol).

Reakční směs se míchá při teplotě místnosti 24 hodin a dalších 14 hodin při 80 °C. Po ochlazení na teplotu místnosti se reakční směs filtruje a filtrát se promyje HCI (3N, 3x10 ml). Vodná vrstva se alkalizuje NaOH (6N) a extrahuje se etherem (3 x 25 ml). Vzniklý etherový roztok se suší nad Na2SO4 a odpaří se do sucha. Zbytek se rozdělí mžikovou sloupcovou chromatografií (25% EtOAc/hexan, ether) a získá se bezbarvý olej (2,10 g, 82 %). Hydrochloridová sůl se připraví přidáním ethanolové HCI k etherovému roztoku volné báze; teplota tání = 152 až 153 °C.

Hmotnostní spektrum: m/e: (Cl) 155 (M+1); 128 (M-CN); (El) 139 (M-CH₃); 83 (MC5H11).

1H-NMR (D₂O, 300 MHz): 0,75 (t, 3H); 1,20 (d, 3H); 1,15-1,35 (m, 6H); 1,47/1,62 (2m, vždy 1H); 3,35 (m, 1H); 4,18 (s, 2H).

Elermentární analýza: Vypočteno: %C = 56,68; %H = 10,04; %N = 14,69.

Nalezeno: %C = 56,81; %H = 10,20; %N = 14,46.

Příklad 24

Hydrochlorid (S)-2-(2-heptylamino)acetonitrilu

Vzorek se připraví v 96% výtěžku za použití shora uvedeného postupu (příklad 23). Hydrochloridová sůl se připraví přidáním ethanolové HCI (15%) k etherovému roztoku volné báze a rekrystalizuje se ze směsi ethanol/ether. Sůl sublimuje během tání; teplota tání = 140 °C.

Hmotnostní spektrum: m/e: 154 (M+); 139 (M-CH3).

1H-NMR (D₂O, 300 MHz): 0,73 (t, 3H); 1,18 (d, m; 9H); 1,43,1,59 (2m, vždy 1H); 3,31 (m, 1H); 4,15 (s, 2H).

Elermentární analýza: Vypočteno: %C = 56,68; %H = 10,04; %N = 14,69.

Nalezeno: %C = 56,51; %H= 9,71; %N = 14,79.

Příklad 25

Hydrochlorid 2-(2-propylamino)acetonitrilu

Hydrochloridová sůl se rekrystalizuje ze směsi methanol/ether; teplota tání = 166 až 167 °C (teplota tání podle literatury 154 až 156 °C).

Hmotnostní spektrum: m/e: 98 (M+); 83 (M-CH₃); 56.

1H-NMR(D₂O, 300 MHz: 1,19 (d, 6H); 3,45 (m, 1H); 4,17 (s, 2H).

Příklad 26

Hydrochlorid 2-(1 -hexylamino)acetonitrilu

Volná báze vzorku se připraví v 62% výtěžku za použití shora popsaného postupu (příklad 23). Hydrochloridová sůl se připraví přidáním ethanolové HCI (15%) k etherovému roztoku volné báze a rekrystalizuje se ze směsi ethanol/ether; teplota tání = 114 až 115 °C (teplota tání udávaná v literatuře 84 až 86 °C).

Hmotnostní spektrum: m/e: (Cl) 141 (M+1)+; 126 (M-CN).

1H-NMR (D₂O, 300 MHz): 0,74 (t, 3H); 1,21 (m, 6H); 1,58 (m, 2H); 3,08 (t, 2H); 4,17 (s, 2H).

Příklad 27

Hydrochlorid (R)-3-(2-heptylmethylamino)propionitrilu

ch₂ch₂c=n (R)-3-(2-heptylamino)propionitril (příklad 17) (0,85 g, 5,0 mmol) se rozpustí v 1N dihydrogenfosfitu (NaH₂PO₃) (25 ml) a přidá se 37% formaldehyd (2,1 ml, 23 mmol). Potom se přidá dostatečné množství dioxanu a získá se čirý roztok (10 ml). Roztok se míchá při 60 °C po dobu 15 minut, přičemž se během této doby roztok zakalí. K chladnému roztoku se přidá 20% hydroxid sodný (20 ml) a chlorid sodný (9

g). Bázický roztok se extrahuje etherem (3x15 ml). Spojené extrakty se suší nad síranem hořečnatým a potom se odpaří a získá se čirá, bezbarvá kapalina v kvantitativním výtěžku. Hydrochloridová sůl se připraví přidáním methanolové HCI k etherovému roztoku volné báze; teplota tání = 98 až 98,5 °C. Celkový výtěžek 85 %.

Hmotnostní spektrum: m/e: 182 (M+); 167 (M-CH₃); 142 (M-CH₂CN); 111 (M-C₅Hn). 1H-NMR (D₂O, 300 MHz): 0,77 (t, 3H); 1,20 (d, 3H); 1,15-1,35 (m, 6H); 1,50/1,62 (2m, vždy 1H); 2,73 (s, 3H); 2,95 (t, 2H); 3,40 (m, 3H; aCH & CH₂CN).

····* · * · · · · • · · · 4 4 4 4 4 ·« ·« Φ·· 449 <· **

Elementární analýza: Vypočteno: %C = 60,39; %H = 10,60; %N = 12,80.

Nalezeno: %C = 59,55; %H = 10,29 ; %N = 13,67.

Příklad 28

Hydrochlorid 3-(2-propylmethylamino)propionitrilu

Hydrochloridová sůl se získá v 90% výtěžku; teplota tání = 121 až 121,5 °C (žádný údaj v literatuře) (viž. příklad 27).

Hmotnostní spektrum: m/e: 126 (M+); 111 (M-CH3); 86 (M-CH2CN).

1H-NMR (D₂O, 300 MHz): 1,23 (d, 6H); 2,73 (s, 3H); 2,97 (t, 2H); 3,52 (br s, 2H);

3,60 (m, 1H).

Příklad 29

Hydrochlorid 3-(terc.amylmethylamino)propionitrilu

Hydrochloridová sůl se získá v 87% výtěžku; teplota tání = 137 až 138 °C (žádný údaj v literatuře) (viz. příklad 27).

Hmotnostní spektrum: m/e: 154 (M+); 139 (M-CH₃); 125 (M-C₂H₅); 72.

1H-NMR (D₂O, 300 MHz): 0,87 (t, 3H); 1,25 (6H); 1,67 (q, 2H); 2,10 (s, 2H); 2,73 (s, 3H), 2,94 (široký t, 2H).

Elementární analýza: Vypočteno: %C = 56,68; %H = 10,04; %N = 14,69.

Nalezeno: %C = 56,62; %H = 10,12 ; %N = 14,62.

Příklad 30

Hydrochlorid 3-(1 -hexylmethylamino)propionitrilu

Hygroskopická hydrochloridová sůl se získá v 75% výtěžku; teplota tání = 77 až 78,5 °C (žádný údaj v literatuře) (viz. příklad 27).

Hmotnostní spektrum: m/e: 168 (M+); 128 (M-CH2CN); 97 (M-C5H11).

···· ·· ·· · · · · ···· · · · · · · ····· · ······ ···· · · · · · · • · ·· ··· · · · ·· · ·.

1H-NMR (D₂O, 300 MHz): 0,72 (t, 3H); 1,20 (d, 6H); 1,60 (m, 2H), 2,79 (s, 3H); 2,95 (t, 2H); 3,09 (t, 2H); 3,42 (t, 2H).

Příklad 31

Hydrochlorid diethyl 2-(2-propylamino)ethanfosfonátu

O nh-ch₂ch₂—p;

OC,H

OC₂H₅

K ledem chlazenému 2-propylaminu (0,53 ml, 6,2 mmol) se přidá po kapkách a pod dusíkem diethylvinylfosfonát (0,4 ml, 3,1 mmol). Reakční směs se míchá 2 hodiny při 0 °C, potom 14 hodin při teplotě místnosti a 10 hodin při 100 °C. Po ochlazení na teplotu místnosti se reakční směs koncentruje a získá se bezbarvý olej (0,89 g). K roztoku surového produktu (0,89 g) v etheru (40 ml) se přidá ethanolická HCI (15%) a směs se potom míchá 2 hodiny při teplotě místnosti. Vzniklá krystalizovaná hydrochloridová sůl se filtruje, promyje se etherem a získá se bílá pevná látka (0,76 g, celkem 95 %); teplota tání = 96 až 97 °C (žádný údaj v literatuře).

Hmotnostní spektrum: m/e: 208 (M-CHs)+; 180 (M-C3H₇)+.

Příklad 32

Hydrochlorid 2-(2-propylamino)ethanfosfonové kyseliny

Hydrochloridová sůl produktu (vychází se z diesteru, příklad 31) se připraví v 32% celkovém výtěžku za použití postupu popsaném v příkladu 37; teplota tání = 164 až 166 °C (žádný údaj v literatuře).

Hmotnostní spektrum: m/e: (Cl). 168 (M+1)+.

1H-NMR (D₂O, 300 MHz): 1,16 (d, 6H); 1,84 (m, 2H); 3,08 (q, 2H); 3,27 (m, 1H).

• ·

Příklad 33

Hydrochlorid diethyl 2-(1-hexylamino)ethanfosfonátu

Surový produkt se připraví ve 100% výtěžku za použití shora popsaného postupu. Hydrochloridová sůl produktu se připraví přidáním ethanolové HCI (15%) k etherovému roztoku produktu; sůl je viskosní olej.

Hmotnostní spektrum: m/e: 265 (M)+, 194 (M-CsHn)+.

Příklad 34

Hydrochlorid 2-(1-hexylamino)fosfonové kyseliny

Hydrochloridová sůl se připraví hydrolýzou diethylesteru za použití metody popsané v příkladu 37; teplota tání = 145 až 150 °C (žádný údaj v literatuře). Hmotnostní spektrum: příliš netěkavý

1H-NMR (D₂O, 300 MHz): 0,70 (t, 3H); 1,15 (m, 6H); 1,50 (m, 2H); 1,90 (m, 2H); 2,88 (t, 2H); 3,08 (q, 2H).

Elermentární analýza: Vypočteno: %C = 39,11; %H = 8,62; %N = 5,70.

Nalezeno: %C = 39,34; %H = 8,53; %N = 5,89.

Příklad 35

Hydrochlorid (R)-diethyl 2-(2-heptylamino)ethansulfonátu

Volná báze se připraví v 93% výtěžku za použití shora uvedeného postupu. Hydrochloridová sůl se připraví přidáním ethanolové HCI (15%) v etherovém roztoku produktu; sůl je viskosní olej.

Hmotnostní spektrum: m/e: (Cl). 280 (M+1)+; 264 (M-CH₃)+; 208 (M-CsHn)+.

Příklad 36

Hydrochlorid (S) diethyl 2-(2-heptylamino)ethanfosfonátu

Volná báze se připraví v 91 % výtěžku za použití shora uvedeného postupu. Hydrochloridová sůl se připraví přidáním ethanolové HCI (15%) k etherovému roztoku produktu; sůl je viskosní olej.

Hmotnostní spektrum: m/e: (Cl). 280 (M+1)+; 208 (M-C₅Hn)+.

Příklad 37

Hydrochlorid (R)-2-(2-heptylamino)ethanfosfonové kyseliny

Roztok hydrochloridu (R)-diethyl 2-(2-heptylamino)ethanfosfonátu (0,19 g, 0,68 mmol) v koncentrované HCI (7 ml) se zahřívá na 90 °C po dobu 48 hodin. Reakční směs se odpaří do sucha a zbytek se trituruje s acetonem. Bílá pevná látka se filtruje a po sušení na vzduchu se získá celkový 86% výtěžek; teplota tání = 106 až 112 °C (žádný údaj v literatuře).

Hmotnostní spektrum: příliš netěkavý

1H-NMR (D₂O, 300 MHz): 0,73 (t, 3H); 1,25-1,10 (m, 12H); 1,43 (m, 1H); 1,58 (m, 1H); 1,89-1,78 (m, 2H); 3,22-3,05 (m, 3H).

Elermentární analýza: Vypočteno: %C = 41,62; %H = 8,93; %N = 5,39.

Nalezeno: %C = 41,68; %H = 9,10; %N = 5,23.

Příklad 38

Hydrochlorid (S)-2-(2-heptylamino)ethanfosfonové kyseliny

Hydrochloridová sůl se připraví v celkovém 71% výtěžku za použití shora uvedeného postupu; teplota tání = 106 až 113 °C (žádný údaj v literatuře). Hmotnostní spektrum: příliš netěkavý

1H-NMR (D₂O, 300 MHz): 0,73 (t, 3H); 1,25-1,10 (m, 12H); 1,44 (m, 1H); 1,59 (m, 1H); 1,89-1,78 (m, 2H); 3,22-3,05 (m, 3H).

Elermentární analýza: Vypočteno: %C = 41,62; %H = 8,93; %N = 5,39.

Nalezeno: %C = 41,43; %H = 9,09; %N = 5,33.

« · • · • · · • · ·· • · · · • · · · • · · · · • · · ·

Příklad 39

Hydrochlorid (R)-2-(2-heptylamino)ethan-5-tetrazolu

nh-ch₂ch₂

Sloučenina jako hydrochloridové sůl se připraví v 28% celkovém výtěžku za použití postupu popsaném dále v příkladu 40; sůl je viskosní olej.

Hmotnostní spektrum: m/e: (Cl). 140 (M-CsHu)+; 128 (M-C2H₃N₄)+.

1H-NMR (D₂O, 300 MHz): 0,71 (t, 3H); 1,18 (m, 9H); 1,44, 1,60 (2m, vždy 1H); 3,30 (t+m; 3H); 3,45 (m, 2H).

Příklad 40

Hydrochlorid (S)-2-(2-heptylamino)ethan-5-tetrazolu

K ledem chlazené suspenzi NaN₃ (2,60 g, 40 mmol) v suchém THF (20 ml) se přidá po částech pod dusíkem AICI₃ (1,36 g, 10 mmol) a směs se míchá 30 minut.

K vzniklé směsi se přidá roztok (S)-3-(2-heptylamino)propionitrilu (1,68 g, 10 mmol) v THF (10 ml) a míchá se 2 hodiny při teplotě 0 °C a potom se mírně zahřívá při zpětném toku 24 hodin. Po ochlazení na teplotu místnosti se reakční směs zchladí opatrným přidáním HCI (3N, 15 ml), vody (5 ml) a obě vrstvy se oddělí. Nižší vodná vrstva se extrahuje ethylacetátem (3x15 ml). Vyšší (organická) vrstva a organické extrakty se spojí a suší se nad Na₂S0₄ a vysušením do sucha se získá surový produkt (olej, 1,36 g). Olej se zředí etherem (30 ml) a ethanolem (5 ml), míchá se 2 hodiny a filtrací se získá hydrochloridové sůl (0,21 g, celkem 9% výtěžek); teplota tání = 112 až 113 °C (žádný literární údaj).

Hmotnostní spektrum: m/e: (Cl). 140 (M-CsHu)+; 128 (M-C₂H₃N₄)+.

1H-NMR(D₂O, 300 MHz): 0,72 (t, 3H); 1,20 (d, 3H); 1,15-1,35 (m, 6H); 1,45/1,62 (2m, vždy 1H); 3,30 (t+m; 3H); 3,43 (m, 2H).

• ·

Elermentární analýza: Vypočteno: %C = 48,47; %H = 8,95; %N = 28,27.

Nalezeno: %C = 48,24; %H = 8,85; %N = 28,40.

• * • · φ φ φ φ φ φ φφφφφφ φφφφ φ · φφφφ φ φ · φ φφφ · φ φ · · ·

Plné citace pro dokumenty reference uváděné v popise:

1. Ansari, K.S., a kol., Rescue of axotomized immature ratfacial motoneurons by R(-)-deprenyl: stereospecificity and independence from monoamine oxidase inhibition. Journal of Neuroscience, 1993. 13: str. 4042-4053.

2. Davis, B.A., a kol. Neurorescue by the optically active enentiomers of some aliphatic N-methylpropargylamines. Abstract, American Society for Neurochemistry. 1995. Santa Monica, CA.

3. Oh, C., a kol., (-)-Deprenyl alters the survival of adult murine facial motoneurons after axotomy: Increases in vulnerable C57BL strain but decreases in motor neuron degeneration mutants. J. Neurosci,. Res., 1994. 38: str. 64-74.

4. Paterson, I.A., B.A. Davis a A.A. Boulton, Aliphatic propargylamines prevent hippocampal neuronal death induced by hypoxia-ischemia. J. Neurochem., 1997. 69 (Supp.): str. S137.

5. Paterson, I.A. a kol., (-)-Deprenyl reduces delayed neuronal death of hippocampal pyramidal cells. Neurosci. Biobehav. Rev., 1997. 21: str. 181-186.

6. Paterson, I.A., a kol., R-Deprenyl and R-2-heptyl-N-methylpropargylamine prevent apoptosis in cerebellar granule neurons induced by cytosine arabinoside but not low extracellular potassium. J. Neurochem., 1998. 98: str. 515-523.

7. Paterson, I.A., a kol., The anti-apoptotic effects of 2HMP is due to a desmethyl metabolite. Society for Neuroscience Abstracts, 1997. 23 (část 2): str. 2254 (#880.6).

8. Paterson, I.A., a kol., Aliphatic propargylamines as cellular rescue agents. United States Patent, podán 14.7.1997.

9. Tatton, W,G. a C.E. Greenwood, Rescue of dying neurons: a new action for deprenyl in MPTP Parkinsonism. J. Neurosci. Res., 1991. 30: str. 666-672.

10. Tatton, W.G., a kol., (-)-Deprenyl reduces PC 12 cell apoptosis by inducing new protein synthesis. J. Neurochem., 1994. 63: str. 1572-1575.

11. Sálo, P.T. a W.G. Tatton, Depřenyl reduces the death of motoneurons caused by axotomy. J. Neurosci. Res., 1992. 31: str. 394-400.

12. Wu, R.M., D.L. Murphy a C.C Chiueh, Neuronal protective and rescue effects of depřenyl against MPP+ dopaminergic toxicity. J. Neural Transm. [Gen Séct], 1995. 100: str. 53-61.

13. Yoles, E. a Schwartz, N-Propargyl-1 (R)-aminoindan (TVP-1012), a putative neuroprotective agent, enhance in vitro neuronal survival after glutamate toxicity. Abstract, American Society for Neuroscience. 1995. San Diego, CA.

14; Zhang X. a kol., Immunohistochemical evidence of neuroprotection by R-(-)-deprenyl and N-(2-hexyl)-N-methylpropargylamine on DSP-4-induced degeneration of rat brain noradrenergic axons and terminals. Journal of Neuroscience Research, 1996. 43: str. 482-489.

15. Yu, P.H., Davis, B.A., Boulton, A.A., Aliphatic propargylamines as specific MAO-B inhibitors as neuroprotective agents. United States Patent č. 5 508 311 (1992).

16. Durden, D.A., a kol. Aliphatic propargylamines as cellular rescue agents. United States Patent č 5 840 979 (1997).

17. Grace, J.M., M.T. Kinter a T.L. Macdonald, Atypical metabolism of depřenyl and its enentiomer, (S)-(+)-N, alpha-dimethyl-N-propynylphenylethylamine, by cytochrome P450 2D6. Chem. Res. Toxicol., 1994. 7: str. 286-290.

18. Komives, E.A. a P.R. Ortiz de Montellano, Mechanism of oxidation π bonds by cytochrome P-450. J. Biol. Chem., 1987. 262: str. 9793-9802.

19. Roberts, E.S., a kol., Mechanism-based inactivation of cytochrome 450 2B1 by 9ethynylphenanthrene. Arch. Biochem. Biophys., 1995. 323: str. 295-302.

• 99·· · · • · · 9 9 · ·· 99 9 9 · · 9 9

20. Valoti, Μ. a kol., Interactions between substituted tryptamine analogues, MAO inhibitors and cytochrome P.450. J. Neural Transm. [Suppl], 1994. 41: str. 291-293.

21. Tarbell, D.S., a kol., The synthesis of some 7-chloro-4-(3alkylaminopropylamino)quinolines. J. Am. Chem. Soc., 1946. 68: str. 1217-1219.

22. Mazur, R.H., Absolute configuration of 1-methylalkylamines. J. Organic Chemistry, 1970. 35: str. 2050-2051.

23. Durden, D.A., B.A. Davis, a A.A. Boulton, Enantioslective gas chromatographic assay of 2-alkylamines using N-(trifluoracetyl)propyl derivatives and a chiral capilary column. Journal of Chromatography B, 1997. 689: str. 165-173.

24. Robinson, J.B. a J. Thomas, The preparation of N-t-butyl-4-piperidone. J. Chem. Soc., 1965: str. 2270-2271.

25. Arnold, C. a D.N. Tatcher, Preparation and reactions of 5-vinyltetrazole. J. Org. Chem., 1969. 34: str. 1141-1142.

26. Loibner, H., A. Pruckner, a A. Stutz, Reductive methýlation of amines. Tetrahedron Lett, 1984. 25: str. 2535-2536.

27. Dessi, F, a kol, Cytosine arabinoside induces apoptosis in cerebellar neurons in culture. J. Neurochem, 1995. 64: str. 1980-1987.

28. Enokido, Y, a kol, P53 involves cytosine arabinoside induced apoptosis in cultured cerebellar granule neurons. Neurosci. Lett, 1996. 203: str. 1-4.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Alifatická aminová sloučenina obecného vzorce I

R₂

Rj-C-N

R, r₄ \CH₂)n-X

Vzorec I kde:

Ri je (CH₂)_MCH₃ kde m je 0 nebo celé číslo od 1 do 16 nebo alkenyl, alkinyl, alkoxy, alkylthio nebo alkylsulfinylová skupina mající 2 až 17 atomů uhlíku,

R₂ = H, CH₃ nebo CH₂CH₃,

R3 = H nebo CH₃,

R4 = H nebo CH₃,

Rs = nižší alkyl mající 1 až 5 atomů uhlíku, n je celé číslo v rozsahu 1 až 3, a X je karboxyl (COOH), karbalkoxy (COOR5), kyano (CN), kyselina fosfonová (PO3H2), fosfonátový ester (PO3[Rs]2) nebo 5-tetrazol nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
2. Alifatická aminová sloučenina obecného vzorce I podle nároku 1, kde:

R1 je (CH2)mCH3 kde m je 0 nebo celé číslo od 1 do 16

R₂ = CH₃, r₃ = h,

R4 = H nebo CH3,

Rs = nižší alkyl mající 1 až 5 atomů uhlíku, n je celé číslo v rozsahu 1 až 3, a X je karboxyl (COOH) nebo karbalkoxy (COOR5), kyano (CN), kyselina fosfonová (PO3H2), fosfonátový ester (PO3[Rs]2) nebo 5-tetrazol nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
3. Alifatická aminová sloučenina obecného vzorce I podle nároku 1, kde:

• · • · · · * · • · ·· · • · · · · 9 • · · · · ·· · · ♦·· • · · » • · · · • · · 9 • 9 9 ·

9 9 « 9

Ri je (CH₂)_mCH₃ kde m je O nebo celé číslo od 1 do 16

R₂ = CH₃, r₃ = h,

R₄ = H nebo CH₃,

Rs = nižší alkyl mající 1 až 5 atomů uhlíku, n je celé číslo v rozsahu 1 až 3, a X je karboxyl (COOH) nebo karbalkoxy (COOR5), kyano (CN), kyselina fosfonová (PO₃H₂), fosfonátový ester (PO₃[Rs]₂) nebo 5-tetrazol, jako v podstatě čistý enantiomer v R-konfiguraci nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
4. Alifatická aminová sloučenina obecného vzorce I podle nároku 1, kde:

R1 je (CH₂)_mCH₃ kde m je 0 nebo celé číslo od 1 do 16

R₂ = CH₃,

R₃ = H,

R₄ = H nebo CH₃,

R₅ = nižší alkyl mající 1 až 5 atomů uhlíku, n je celé číslo v rozsahu 1 až 3, a X je karboxyl (COOH) nebo karbalkoxy (COOR5), kyano (CN), kyselina fosfonová (PO₃H₂), fosfonátový ester (PO₃[R₅]₂) nebo 5-tetrazol, jako v podstatě čistý enantiomer v S-konfiguraci nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
5. Alifatická aminová sloučenina obecného vzorce I podle nároku 1, kde:

R1 je (CH₂)_mCH₃ kde m je 0 nebo celé číslo od 1 do 16

R₂ = CH₃, r₃ = h,

R₄ = H nebo CH₃,

R₅ = nižší alkyl mající 1 až 5 atomů uhlíku, n je celé číslo v rozsahu 1 až 3, ·· 44

94 94

4 4 9

4 4 9

9 4 9

9 4 4 9

4 ® · · a X je karboxyl (COOH) nebo karbalkoxy (COORs), kyano (CN), kyselina fosfonová (PO3H2), fosfonátový ester (PO₃[Rs]2) nebo 5-tetrazol, kde sloučenina je racemická nebo achirální a s následujícími výjimkami:

a) pro X = COOH; n = 1; R₃ = R4 = H, s vyloučením sloučenin, pro které:

R₂ = H a m = 1 až 4, 6, 7, 8, 9, 11 nebo 13, a R₂ = CH₃ a m = 0,1 nebo 2;

b) pro X = COOH; n = 1; R₃ = H; R₄ = CH₃, s vyloučením sloučenin, pro které:

R₂ = H a m = 2 nebo 3, a R₂ = CH₃ a m = 0;

c) pro X = COOR5; n = 1; R₃ = R₄ = H, s vyloučením sloučenin,pro které:

R₂ = H a m = 1 až 4 nebo 9, a R₂ = CH₃ a m = 0 nebo 1, a R₅ = methyl, ethyl, terc.butyl;

d) pro X = COOH; n = 2; R₃ = R₄ = H, s vyloučením sloučenin, pro které:

R₂ = H a m = 1 až 4, 6, 9 nebol 1, a R₂ = CH₃ a m = 0,1 nebo 4;

e) pro X = COOH; n = 2; R₃ = H; R₄ = CH₃, s vyloučením sloučenin, pro které:

R₂ = H a m = 1 nebo 2;

f) pro X = COOR5; n = 2; R₃ = R₄ = H, s vyloučením sloučenin, pro které:

R₂ = H a m = 1 až 5, 9 nebo 15,

R₂ = CH₃ a m = 0 nebol, a Rs = methyl, ethyl, terc.butyl;

g) pro X = COOR5; n = 2; R₃ = H; R₄ = CH₃, s vyloučením sloučenin, pro které:

R₂ = H a m = 1 nebo 2,

R₂ = CH₃ a m = 0, a

Rs = methyl, ethyl, terc.butyl;

h) pro X = COOH; n = 3; R₃ = R₄ = H, s vyloučením sloučenin, pro které:

R₂ = H a m = 2 nebo 6;

i) pro X = COOR5; n = 3; R₃ = R₄ = H, s vyloučením sloučenin, pro které:

R₂ = H a m = 2,

R₂ = CH₃ a m = 0 nebol, a ·* » « ··

Rs = methyl, ethyl, terc.butyl;

j) pro X = CN (kyano); n = 1; R3 = R4 = H, s vyloučením sloučenin, pro které:

R2 = H a m = 1, 2, 4, 5 nebo 6 a R2 = CH₃ a m = 0,1 nebo 2;

k) pro X = CN; n = 1; R3 = H; R4 = CH3, s vyloučením sloučenin, pro které:

R2 = H a m = 1, a R2 = CH3 a m = 0;

l) pro X = CN; n = 2; R3 = R₄ = H, s vyloučením sloučenin, pro které:

R2 = H a m = 1, 2, 3, 4 nebo 6 a R2 = CH₃ a m = 0, 1 nebo 4;

m) pro X = CN; n = 2; R3 = H; R4 = CH3, s vyloučením sloučenin, pro které:

R₂ = H a m = 2, a R2 = CH₃ a m = 0;

n) pro X = CN; n = 3; R₃ = R₄ = H, s vyloučením sloučenin, pro které:

R2 = H a m = 1 až 4, a R2 = CH₃ a m = 1 nebo 2;

o) pro X = PO3H2; n = 2; R3 = R4 = H, s vyloučením sloučenin, pro které:

R2 = CH3 a m = 0, 1 nebo 5;

p) pro X = PO₃(R₅)2; n = 2; R3 = R4 = H, s vyloučením sloučenin, pro které:

R2 = CH₃ a m = 0 nebo 1, a Rs = ethyl; a

q) pro X = 5-tetrazol; n = 2; R3 = R4 = H, s vyloučením sloučenin, pro které:

R₂ = CH₃ a m = 0.
6. Alifatická aminová sloučenina obecného vzorce I podle kteréhokoliv z nároků 1 až 5, kde R1 je substituován alespoň jedním substituentem, vybraným ze souboru, který zahrnuje hydroxy, aldehyd, oxo, nižší acyloxy, halogen, thio, sulfoxid, sulfon, fenyl, halogen-substituovaný fenyl, hydroxy-substituovaný fenyl, cykloalkyl mající 3 až 6 atomů uhlíku a heterocyklické substituenty mající 3 až 6 atomů, ze kterých jsou 1 až 3 heteroatomy vybrány z O, S a/nebo N.
7. Alifatická aminová sloučenina podle nároku 3, kde uvedená sloučenina obecného vzorce I je vybrána ze skupiny zahrnující:

φ φ φ φφφ (R)-3-(2-Heptylamino)propionovou kyselinu;

(R)-3-(2-Heptylmethylamino)propionovou kyselinu;

Methyl (R)-3-(2-heptylamino)propionát;

Methyl (R)-3-(2-heptylmethylamino)propionát;

(R)-2-(2-Pentylamino)acetonitril;

(R)-2-(2-Pentylmethylamino)acetonitril;

(R)-3-(2-Heptylamino)propionitril;

(R)-3-(2-Heptylmethylamino)propionitril;

(R)-2-(2-Pentylamino)ethanfosfonovou kyselinu;

(R)-2-(2-Pentylmethylamino)ethanfosfonovou kyselinu; a (R) -2-(2-Heptylamino)ethan-5-tetrazol.
8. Alifatická aminová sloučenina podle nároku 4, kde uvedená sloučenina obecného vzorce I je vybrána ze skupiny zahrnující:

(S) -2-(2-Heptylamino)octovou kyselinu;

(S)-2-(2-Heptylmethylamino)octovou kyselinu;

Methyl (S)-2-(2-heptylamino)acetát;

Methyl (S)-2-(2-heptylmethylamino)acetát;

(S)-2-(2-Heptylamino)acetonitril;

(S)-2-(2-Heptylmethylamino)acetonitril;

(S)-2-(2-Heptylamino)ethanfosfonovou kyselinu; a (S)-2-(2-Heptylmethylamino)ethanfosfonovou kyselinu.
9. Alifatická aminová sloučenina podle nároku 5, kde uvedená sloučenina obecného vzorce I je vybrána ze skupiny zahrnující:

2- (1-Hexylmethylamino)octovou kyselinu;

3- (2-Propylmethylamino)propionovou kyselinu;

Methyl 2-(2-propylmethylamino)acetát;

Methyl 2-( 1 -hexylmethylamino)acetát;

Methyl 3-(1 -hexylmethylamino)propionát;

2-( 1 -Hexylaminojacetonitril;

2-(1-Hexylmethylamino)acetonitril;

9* ·♦

9 9 9

9 9 99

9 9 9

9 9 9

99 99

99 99

9 9 9 9

9 · · ·

9 9 9 9

9 9 9 ·

9* 99

3-(3-Pentylamino)propionoitril;

3-(3-Pentylmethylamino)propionitril;

2-(2-Propylamino)ethanfosfonovou kyselinu; a

2-(2-Propylmethylamino)ethanfosfonovou kyselinu.
10. Alifatická aminová sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 1 až 9 ve formě hydrochloridové soli.
11. Alifatická aminová sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 3 až 9, kde m je celé číslo od 1 do 12.
12. Alifatická aminová sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 3 až 9, kde m je celé číslo 1 až 9.
13. Prostředek pro léčbu nebo prevenci nemoci, při které dochází k zániku buněk apoptózou, vyznačující se tím, že zahrnuje účinné množství alifatické aminové sloučeniny mající obecný vzorec I:

Rj R i² Λ

Rj-C—N Vzorec I

J '(CH₂)n—X k₃ kde:

Ri je (CH₂)_mCH₃ kde m je 0 nebo celé číslo od 1 do 16 nebo alkenyl, alkinyl, alkoxy, alkylthio nebo alkylsulfinylová skupina mající 2 až 17 atomů uhlíku,

R₂ = H, CH₃ nebo CH₂CH₃,

R₃ = H nebo CH₃,

R₄ = H nebo CH₃,

Rs = nižší alkyl mající 1 až 5 atomů uhlíku, n je celé číslo v rozsahu 1 až 3, a Xje karboxyl (COOH), karbalkoxy (COOR5), kyano (CN), kyselina fosfonová (PO₃H₂), fosfonátový ester (PO₃[Rs]2) nebo 5-tetrazol nebo její farmaceuticky přijatelné soli, ve směsi s vhodným ředidlem nebo nosičem.

• tf
14. Prostředek podle nároku 13, v y z n a č u j í c í se t í m, že:

Ri je (CH₂)mCH₃ kde m je 0 nebo celé číslo od 1 do 16

R₂ = CH_3l r₃ = h,

R4 = H nebo CH₃,

Rs = nižší alkyl mající 1 až 5 atomů uhlíku, n je celé číslo v rozsahu 1 až 3, a X je karboxyl (COOH) nebo karbalkoxy (COOR5), kyano (CN), kyselina fosfonová (PO₃H₂), fosfonátový ester (PO₃[Rs]2) nebo 5-tetrazol nebo její farmaceuticky přijatelná sůl ve směsi s vhodným ředidlem nebo nosičem.
15. Prostředek podle nároku 13 nebo 14, v y z n a č u j í c í se t í m, že R1 se liší od R₂, R₃ = H a sloučenina je v R-konfiguraci.
16. Prostředek podle nároku 13 nebo 14, v y z n a č uj í c í se t í m, že Ri se liší od R₂, R₃ = H a sloučenina je v S-konfiguraci.
17. Prostředek podle kteréhokoliv z nároků 13 až 16, v y z n a č uj í cí se tím, že R1 je substituován alespoň jedním substituentem, vybraným ze souboru, který zahrnuje hydroxy, aldehyd, oxo, nižší acyloxy, halogen, thio, sulfoxid, sulfon, fenyl, halogen-substituovaný fenyl, hydroxy-substituovaný fenyl, cykloalkyl mající 3 až 6 atomů uhlíku a heterocykl ické substituenty mající 3 až 6 atomů, ze kterých jsou 1 až 3 heteroatomy vybrány z O, S a/nebo N.
18. Prostředek podle nároku 13 nebo 14, vyznačující se tím, že uvedená sloučenina je vybrána ze skupiny zahrnující:

2-(2-Propylamino)octovou kyselinu;

2- (1-Hexylamino)octovou kyselinu;

(S)-2-(2-Heptylamino)octovou kyselinu;

3- (2-Propylamino)propionovou kyselinu;

3-(1-Hexylamino)propionovou kyselinu;

·· ·· • · · · • · ·· • · · · • · · · ·· »· (R) -3-(2-Heptylamino)propionovou kyselinu;

2-(2-Propylmethylamino)octovou kyselinu;

2- (1 -Hexylmethylamino)octovou kyselinu;

(S) -2-(2-Heptylmethylamino)octovou kyselinu;

3- (2-Propylmethylamino)propionovou kyselinu;

3-(1-Hexylmethylamino)propionovou kyselinu;

(R)-3-(2-Heptylmethylamino)propionovou kyselinu;

2-(2-Propylamino)acetonitril;

(R) -2-(2-Pentylamino)acetonitril;

2-(1-Hexylamino)acetonitril;

(S) -2-(2-Heptylamino)acetonitril;

(R)-3-(2-Heptylamino)propionitril;

2-(2-Propylmethylamino)acetonitril;

(R) -2-(2-Pentylmethylamino)acetonitril;

2-(1-Hexylmethylamino)acetonitril;

(S) -2-(2-Heptylmethylamino)acetonitril;

(R)-3-(2-Heptylmethylamino)propionitril;

2-(2-Propylamino)ethanfosfonovou kyselinu;

(R) -2-(2-Pentylamino)ethanfosfonovou kyselinu;

(S) -2-(2-Heptylamino)ethanfosfonovou kyselinu;

2-(2-Propylmethylamino)ethanfosfonovou kyselinu;

(S)-2-(2-Heptylmethylamino)ethanfosfonovou kyselinu; a (R)-2-(2-Heptylamino)ethan-5-tetrazol.
19. Prostředek podle nároku 18, vyznačující se tím, že alifatická aminová sloučenina obecného vzorce I je ve formě hydrochloridové soli.
20. Použití alifatická aminové sloučeniny obecného vzorce I pro léčbu nebo prevenci nemoci, kde dochází k zániku buněk apoptózou, kde uvedená sloučenina má obecný vzorec I:

^R2 R I ,4

Rj-C^-N ' \CH₂)n-X Vzorec I •**•3 kde:

Ri je (CH₂)_mCH₃ kde m je 0 nebo celé číslo od 1 do 16 nebo alkenyl, alkinyl, alkoxy, alkylthio nebo alkylsulfinylová skupina mající 2 až 17 atomů uhlíku,

R₂ = H, CH₃ nebo CH₂CH₃,

R₃ = H nebo CH₃,

R₄ = H nebo CH₃,

Rs = nižší alkyl mající 1 až 5 atomů uhlíku, n je celé číslo v rozsahu 1 až 3, a X je karboxyl (COOH), karbalkoxy (COOR5), kyano (CN), kyselina fosfonová (PO₃H₂), fosfonátový ester (PO₃[Rs]₂) nebo 5-tetrazol nebo její farmaceuticky přijatelné soli.
21. Použití podle nároku 20, kde

R1 je (CH₂)_mCH₃ kde m je 0 nebo celé číslo od 1 do 16

R₂ = CH₃,

R₃ = H,

R₄ = H nebo CH₃,

Rs = nižší alkyl mající 1 až 5 atomů uhlíku, n je celé číslo v rozsahu 1 až 3, a X je karboxyl (COOH) nebo karbalkoxy (COOR5), kyano (CN), kyselina fosfonová (PO₃H₂), fosfonátový ester (PO₃[Rs]2) nebo 5-tetrazol nebo její farmaceuticky přijatelné soli.
22. Použití podle kteréhokoliv z nároků 20 nebo 21, kde R1 je substituován alespoň jedním substituentem, vybraným ze souboru, který zahrnuje hydroxy, aldehyd, oxo, nižší acyloxy, halogen, thio, sulfoxid, sulfon, fenyl, halogen-substituovaný fenyl, hydroxy-substituovaný fenyl, cykloalkyl mající 3 až 6 atomů uhlíku a heterocyklické • ·· · * · · ·· · >· «· ·*· «·· ·· »^r substituenty mající 3 až 6 atomů, ze kterých jsou 1 až 3 heteroatomy vybrány z O, S a/nebo N.
23. Použití podle nároku 20, kde uvedená alifatická aminová sloučenina obecného vzorce I je vybrána ze skupiny zahrnující:

2-(2-Propylamino)octovou kyselinu;

2- (1-Hexylamino)octovou kyselinu;

(S)-2-(2-Heptylamino)octovou kyselinu;

3- (2-Propylamino)propionovou kyselinu;

3-(1-Hexylamino)propionovou kyselinu;

(R) -3-(2-Heptylamino)propionovou kyselinu;

2-(2-Propylmethylamino)octovou kyselinu;

2- (1 -Hexylmethylamino)octovou kyselinu;

(S) -2-(2-Heptylmethylamino)octovou kyselinu;

3- (2-Propylmethylaminó)propionovou kyselinu;

3-(1-Hexylmethylamino)propionovou kyselinu;

(R)-3-(2-Heptylmethylamino)propionovou kyselinu;

2-(2-Propylamino)acetonitril;

(R) -2-(2-Pentylamino)acetonitril;

2-(1-Hexylamino)acetonitril;

(S) -2-(2~Heptylamino)acetonitril;

(R)-3-(2-Heptylamino)propionitril;

2-(2-Propylmethylamino)acetonitril;

(R) -2-(2-Pentylmethylamino)acetonitril; ¹

2-( 1 -Hexylmethylamino)acetonitril; ** (S) -2-(2-Heptylmethylamino)acetonitril;

(R)-3-(2-Heptylmethylamino)propionitril;

2-(2-Propylamino)ethanfosfonovou kyselinu;

(R) -2-(2-Pentylamino)ethanfosfonovou kyselinu;

(S) -2-(2-Heptylamino)ethanfosfonovou kyselinu;

2-(2-Propylmethylamino)ethanfosfonovou kyselinu;

(S)-2-(2-Heptylmethylamino)ethanfosfonovou kyselinu; a • · (R)-2-(2-Heptylamino)ethan-5-tetrazol.
24. Použití podle kteréhokoliv z nároků 20 až 23, kde nemoc je vybrána ze skupiny zahrnující mrtvici, poranění hlavy, Bellovu plazii, poranění páteře, Alzheimrovu nemoc, Parkinsonovu nemoc, Pickovu nemoc, amyotropní laterální sklerózu, Huntingtonovu nemoc, násobnou sklerózu, srdeční myopatii, nefropatii, retinopatii, diabetické komplikace, glaukom a idiopatickou neuropatii.
25. Použití podle kteréhokoliv z nároků 20 až 24 pro léčbu lidí.
26. Komerční balíček pro léčbu nebo prevenci nemoci, při které dochází k zániku buněk apoptózou, vyznačující se tím, že uvedený balíček zahrnuje farmaceutický prostředek podle kteréhokoliv z nároků 13 až 19, společně s návodem pro použití při léčbě nebo prevenci nemocí, při kterých dochází k zániku buněk apoptózou.