CZ20003414A3

CZ20003414A3 - Nové trisulfidy, způsob jejich přípravy a farmaceutický prostředek, který je obsahuje

Info

Publication number: CZ20003414A3
Application number: CZ20003414A
Authority: CZ
Inventors: Hakan Bergstrand; Jan Dahmén; Bengt Särnstrand
Original assignee: Astrazeneca Ab
Priority date: 1999-03-16
Filing date: 1999-03-16
Publication date: 2000-12-13

Abstract

Sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém R značí přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu obsahující 1 až 16 atomů uhlíku, jejich farmaceuticky přijatelné soli a/nebo jejich optické isomery mají imunostimulační účinky ajsou použitelné při léčení arteriosklerózy.

Description

Nové trisulfidy, způsob jejich přípravy a farmaceutický prostředek, který je obsahuje

Oblast_t®chniky

Vynález se týká nových sloučenin, zejména nových trisulfidů a jejich solí, způsobů jejich přípravy, prostředků, které je obsahují a metod jejich použití.

Dosavadní_stav_techniky

N-acetyl-L-cystein je velmi dobře /známá sloučenina, která se běžně používá jako léčivo chronických obstruktivních plicních chorob, zejména chronické bronchitidy. Způsob působení této sloučeniny není zcela objasněn, avšak předpokládá se, že tato sloučenina půso bí jako mykolytické nebo antioxidační činidlo. 0 snížení míry exacerbací u pacientů, kteří trpí chronickou bronchitidou, bylo referováno u N-acetyl-L-cysteinu. Možné vysvětlení tohoto efektu může spočívat v tom, že tato sloučenina zvyšuje obranyschopnost pacienta /viz Bergstrand, H. se sp., J. Pree Rádie. Biol. Med. 2, 119 - 127, 1986/.

Odpovídající disulfid N-acetyl-L-cysteinu, tj. N,N*-diacetylcystin /DiNAC/, je účinný imunostimulátor, jak ukazuje jeho kapacita, jež zvyšuje u myší reakci kontaktní senzitivity.

Podstata_vynálezu

Vynález se týká sloučeniny obecného vzorce I

R

/1/,

Φ • Φ νβ kterém R značí přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu obsahující 1 až 16 atomů uhlíku, její farmaceuticky přijatelné soli a/nebo některého jejího optického isomerů.

• φφ

ΦΦΦ · • ·· • · · φ Φ Φ • · · · ·

Φ· ·· • Φ Φ · • Φ Φ Φ

Φ Φ Φ ·

Φ Φ Φ Φ

ΦΦ ΦΦ

S výhodou značí R skupinu methylovou, ethylovou, n-propylovou, n-butylovou, n-pentylovou, n-hexylovou, n-heptylovou, n-oktylovou, n-nonylovou, n-decylovou, n-undecylovou, n-dodecylovou, n-tridecylovou, n-tetrad^cylovou, n-pentadecylovou, n-hexadecylovou, isopropylovou, 1-methylpropylovou, terč.-butylovou, 2-methylbutylovou nebo 3-methylbutylovou.

Příklady farmacuticky přijatelných solí sloučeniny podle vynálezu zahrnuji sůl sodnou, draselnou, vápenatou, hořečnatou nebo amonnou nebo soli mono- nebo di-protonizováných organických aminů, jako je lysin, ethylendiamin, N,N'-dibenzyl-ethylendiamin, adamantanamin, N-benzyl-2-fenylethylamin, benzatin, chlorprokain, cholin, diethanolamin, meglumin, prokain, benethamin, klemizol, tromethamin, ethanolamin, 2-amino-2-methyl-1,3-propandiol, terč.-butylamin, triethanolamin, pyridoxin, nikotinamid, methylnikotinát, arginin, histidin, morfolin, N-methylpiperidin, spermin, spermidin, cysteamin, cystamin, methenamin a piperazin.

Sloučenina podle vynálezu může být popřípadě ve formě směsi racemátů nebo D,D- nebo L,L-isomerů či v mesoformě. S výhodou je ve for mě svého L,L-isomeru.

Vynález se rovněž týká způsobu přípravy sloučeniny obecného vzorce I, jehož podstata spočívá v tom, že se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce II

R • 4 ·· · • · · • 4 • ·

444 44

- 3 ve kterém Η značí totéž co ve vzorci I, s činidlem přenášejícím síru, a popřípadě reakcí získaného produktu s vhodnou bází, aby se získala farmaceuticky přijatelná sůl, a/nebo se izoluje některý optický isomer.

Vhodnými síru přenášejícími činidly, která lze používat při způsobu podle vynálezu, jsou s výhodou N,N '-thio-bis/ftalimid/, N,N' -dibenzimidazylsulfid, thio-bis/imidazol/, chlorid simatý, chlorid simý, elementární síra, především N ,N '-thio-bis/ftalimid/.

Způsob podle vynálezu se s výhodou realizuje v polárním rozpouštědle, výhodněji ve směsi vody a polárního rozpouštědla. Příklady vhodných polárních organických rozpouštědel zahrnují n-propanol, isopropylalkohol, ethanol, butanol, aceton, tetrahydrofuran a/nebo acetonitril. Směs vody a isopropylalkoholu je nejvýhodnější.

Izolaci optických isomerů lze provádět s použitím obvyklých metod.

Sloučeninu obecného vzorce II lze připravit z komerčně dostupných výchozích materiálů metodami, které jsou odborníkům známy.

Vynález se rovněž týká farmaceutického prostředku, který obsahuje sloučeninu obecného vzorce I zároveň s farmaceuticky přijatelným nosičem a/nebo excipientem. Prostředek podle vynálezu se popřípadě zpracovává takovým způsobem, který je vhodný pro inhalační aplikaci, nebo pro perorální, topickou nebo parenterální aplikaci. Pokud je to účelné, může být prostředek popřípadě upraven například do formy aerosolu, tablet, potahovaných tablet, želatinových tobolek nebo roztoku.

Pro přípravu tablet, potahovaných tablet nebo želatinových tobolek se sloučenina podle vynálezu zpracovává s vhodným farmaceuticky. přijatelným nosičem, jako je laktóza, škrob, hydrogenfosforečnan vápenatý, mikrokrystalická celulóza, polyvínylpyrrolidon, želatina, deriváty celulózy, koloidální oxid křemičitý, mastek a/nebo stearová kyselina a/nebo její soli.

• · · • · φφ

I 4 » 4 • Φ

Pro přípravu, roztoku se sloučenina podle vynálezu zpracovává s farmaceuticky při jatelným excipientem, jako je voda, sacharóza, sorbitol,fruktóza a/nebo xylitol.

Farmaceutický prostředek podle vynálezu může popřípadě dále obsahovat konzervační látku, stabilizátor, činidlo upravující viskozitu, emulgátor, sladidlo, barvivo, ochucovadlo, činidlo regulující tonicitu, pufr a/nebo oxidační Činidlo. Může popřípadě obsahovat ještě i jiné terapeuticky účinné látky.

Vynález se týká sloučenin k použití při léčebné terapii, obzvláště sloučenin s výhodnými vlastnostmi při léčení chorob, zejména takových chorob, u kterých l&e očekávat energii imunitní odpovědi nebo odchylnou imunitní odpověS nebo neúčinnou obranu u subjektu. Zmíněné choroby zahrnují chronickou bronchitidu, u které snížení množství exacerbací bylo již popsáno, a to s modifikátory imunitní odpovědi, jako je Biostim /Radermecker, M. se sp., Int. J. Immunopharmac. 10, 913 - 917, 1988; Scheffer, J. se sp., Arzneim. Forsch./Drug Res. 41, 815 - 820, 1991/, Ribomunyl^a a Broncho Vaxom /Paupe, J. Respiration 58, 150 - 154, 1991/ a také N-acetylcystein /Bergstrand, H. se sp., J. Free Radíc. Biol. Med.

2, 119 - 127, 1986/.

Onemocnění, u kterých se sloučeniny podle vynálezu mohou používat, zahrnují určité formy maligních onemocnění. V literatuře je více přehledů, které se týkají možností stimulace imunitní odpovědi u pacientů s různými formami maligních onemocnění /Stevenson, F. K. FASBB J 5: 2250 - 2257, 1991; Melief, C. J. M. Advances in.Cancer Research 58: 143 - 75, 1992; Chen, J. se sp., Immunology Today 14:10, 483 - 86, 1995/. Například u pacientů s intrakraniálními tumory /gliomy/ se projevuje závažný úbytek imunity, pravděpodobně následkem porušení sekrece IL-2 a rovněž jako projev receptorů IL-2 v T buňkách těchto pacientů /Roszman, T. se sp., Immunology Today 12, 370 - 374, 1991/· Signifikantní podpůrný účinek při imunoterapii melanomu a karcinomu tračníku /kolonu/ byl prokázán u imunostimulátoru Levamisolu /Van Wauwe, J. a Janssen,

P. A. J.: Int. J. Immunopharmac. 13, 3 - 9J 1991/. Rovněž imuno« ·· • · · · • ·· • · · • · · ··· ·» ·· φ· • » · · • · 4 4 · ··· • · · ·· ·· ·· ·· • » ♦ · • 4 4 4

4 4 9 terapie pomocí IL-2 in vivo nebo terapie zabíječských buněk pacientovým aktivovaným lymfokininem pomocí IL-2 ex vivo způsobila regresi nádoru /Rosenberg, S. A., Immunology Today 9, 58 - 62, 1988/.

Maligní onemocnění, u kterých lze očekávat příznivé účinky sloučenin podle vynálezu, jsou například nádory mesenchymálního původu, jako jsou sarkomy, například ,f ibrosarkom, myxosarkom, liposarkom, chondrosarkom, osteogenní sarkom nebo chordosarkom, sarkomy jako angiosarkom, endoteliosarkom, lymfangiosarkom, synoviosarkom nebo mesoteliosarkom, leukemie a lymfomy, jako je granulocytická leukemie, monocytická leukemie, lymfocytická leukemie, maligní lymfom, plasmocytom, sarkom buněk retikula nebo Hodgkinova nemoc, sarkomy, například leiomysarkom nebo rybdomysarkom, nádory epiteliálního původu /karcinomy/, jako karcinom skvamózních buněk, karcinom bazálních buněk, karcinom potni žlázy, karcinom tukové žlázy, adenokarcinom, papilární karcinom, papilární adenokarcinom, cystadenokarcinom, medulámí karcinom, nediferencovaný karcinom, bronchogenní karcinom, melanom, karcinom ranálních buněk, karcinom-hepatom jaterních buněk, karcinom žlučovodu-cholangiokarcinom, papilární karcinom, karcinom transicionálních buněk, karcinom skvamózních buněk, choriokarcinom, semonom nebo embryonální karcinom, nádory centrálního nervového systému, jako je gliom, meningom, meduloblastom, schwannom nebo ependymom.

Navíc mají sloučeniny podle tohoto vynálezu rovněž výhodné vlastnosti při léčení chronických infekcí, jako je herpes, aftová stomatitida, jakož i syndromy s minimálními změnami, kde již bylo konstatováno klinické zlepšení při léčení imunostimulátorem, jako je Levamisol, dále i jiná chronická zánětlivá onemocnění močového ústrojí nebo uší, nosu nebo krku, u nichž je prospěšné léčení imunostimulátory, jako je Biostim^, Broncho-Vaxom a Ribomunyl^ a též u infekce HIV nebo AIDS.

Kromě toho se předpokládalo, že existuje poškození, porucha nebo nevyrovnanost imunitní odpovědi u atopických onemocnění, jako je atopická dermatitida, rinitida a astma /Katz,D. Η., Immunology ·· ·· • · · • · · * · · · • · · ·· ·· ·· • · · • « · • · • ·· «· · · • ·· • · · · « · · ··· ·· ·· ··· ··

Re77ievrs 41, 77 - 108, 1977/. Od té doby teoretické úvahy předpokládají, že stimulace imunitní odpovědi by mohla být nejlepší ces tou k nápravě poškození a. autoimunity /Varela, P. J. a Coutinho, A,, Immunology Today 12, 159 - 166, 1991/; očekává se tedy, že sloučeniny podle vynálezu mají výhodné vlastnosti k léčení astmatu, rinitidy, atopické dermatitidy a autoimunitních onemocnění, jako je neobézní diabetes, systémový lupus erythematosus, sklerodermie, Sjčgrenův syndrom, dermatomyositida nebo mnohočetná skleróza, reumatoidní artritida a psoriáza.

Navíc se u sloučenin podle tohoto vynálezu pro jejich imunostimulační vlastnosti předpokládá, že mají příznivé vlastnosti jako ad juvans v různých formách vakcinových přípravků. Pro jejich imunomodulační vlastnosti se u sloučenin podle vynálezu očekává, že ma jí výhodné vlastnosti při inhibici odmítání transplantovaných orgánů.

Posléze se u sloučenin podle tohoto vynálezu očekávají výhodné vlastnosti při léčení arteriosklerózy /Hansson, G. K. se sp., Proč. Nat. Acad. Sci.-USA 88, 10530, 1991/.

Sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou zejména vhodné k léčení zhoubných nádorových onemocnění, jako je melanom, karcinom prsů, gastrointestinální karcinom, gliom, karcinom močového měchýře a karcinom skvamózních buněk v oblasti krku a hlavy;

chorob dýchacích cest, jako je chronická bronchitida, astma, rinitida;

atopických:chorob, jako je atopická dermatitida;

infekcí, jako je hepatitida, poinfekční anergie a získaná imunitní nedostatečnost, jako je AIDS;

posttraumatická imunologická anergie a ^k domnělé autoimunitní choroby, zejména reumatoidní artrituda, mho- 7 hočetná skleróza, arterioskleróza a psoriáza.

Dalším předmětem vynálezu je použití sloučenin podle tohoto vynálezu k výrobě léčiv s imunostimulačním účinkem a především léčiv k léčení arteriosklerózy.

Jiným předmětem vynálezu je metoda imunostimulace, která spočívá v podávání účinného množství sloučeniny podle tohoto vynálezu takovému subjektu, který toto léčení potřebuje.

Ještě dalším předmětem, vynálezu je metoda léčení arteriosklerózy, která spočívá v podávání účinného množství sloučeniny podle tohoto vynálezu takovému subjektu, který toto léčení potřebuje.

Následující příklad provedení vynález ilustruje, avšak nijak neomezuje jeho rozsah.

Příklad_provedení „vynálezu /R,R^z/-3,3*-trithiobis-2-acetamidopropanová kyselina /kyselá forma trisulfidu N,N *-diacetyl-L-eystinu/ g /30,6 mmol/ N-acetylcysteinu se suspenduje ve směsi isopropylalkoholu a vody /1 : 1, 3,0 litry/ a přidá se 5 g /15,4 mmol/

N,N^z-thio-bis/ftalimidu/. Směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 24 h a potom se z čirého rozinu odpařením odstraní isopropylalkohol. Filtrací vysráženého materiálu a následující lyofylizací se získá surový trisulfidický produkt, znečištěný převážně ftalimidem. Preparativní HPLC /Ěromasil K 100-10-C 18, sloupec /2** x 250 mm/ s použitím směsi acetonitrilu s vodou /19 : 81/, obsahující 0,1 trifluoroctové kyseliny jako elučního činidla, s průtokem 40 ml/min a detekcí při 220 nm/ poskytla po lyofilizaci čistou titulní sloučeninu v kvantitativním výtěžku, M+H: 357.

- 8 Farmakologický test

Schopnost sloučenin podle vynálezu měnit imunitní odpovědi byla potvrzena použitím následujícího testu opožděného typu zvířecí hypersenzitvity /DTH/ u myší.

Byli použiti jak myší samci, tak i samice kmene Balb/c, s hmotností asi od 18 do 20 g, od firmy Bomho'ltsgaard /Dánsko/. Jako antigen byl při tomto testu použit 4-ethoxymethylen-2-fenyl-oxazolin-5-on /OXA , zakoupený u firmy BDH, Anglie/.

V den D byly myši senzibilizovány epikutánní aplikací absolutního roztoku směsi ethanolu s acetonem /3 : 1/, obsahujícího 3 OXA, na oholené břicho. Aplikace sloučeniny podle vynálezu nebo vehikula /0,9^ roztok chloridu sodného/ byla zahájena perorálním podáním ihned po senzibilizacia pokračovala jednou denně až do dne 6. Sedm dní po senzibilizaci /den 6/ byly u všech myší obě uši po obou stranách testovány topickou aplikací 20 ml 1¼ roztoku OXA v arašídovém oleji. Tlouštka uší byla měřena před aplikací a 24 nebo 48 h po testu s použitím posuvného měřítka Oditest. Hodnocení a měření byly prováděny za lehké anestézie pentobarbitalem.

Intenzita reakcí DTH byla vyjádřena podle vzorce Tt24/48-Tt0 jednotek y. mm, přičemž tO, t24 a t48 značí tlouštku ucha před testem a 24 nebo 48 h po něm v jednotlivých testech /T/. Výsledky byly vyjádřeny jako průměrná hodnota + S.E.M. Hladina významnosti mezi středními hodnotami skupin byla získána Studentovým t-testem. Imunostimulační potence sloučeniny byla měřena srovnáváním zvětšení tlouštky ucha s hodnotami získanými u kontrol.

Prů52sloyá_využitelnost

Nové sloučeniny podle vynálezu jsou po zpracování do vhodných lékových forem použitelné k léčení širokého spektra chorob, které jsou vyvolávány poruchami imunitního systému.

Claims

Sloučenina obecného vzorce • ·· ·· · · • ·· • · · • · · ··· ··

NÁROKY

I

-3(,/(/ ·· ·· ·· ·· ·' ·· · ·· /1/, • · · • · · • « · · • · · ·· ·· ve kterém R značí přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu obsahující 1 až 16 atomů uhlíku, její farmaceuticky přijatelné soli a/nebo některý její optický isomer.
2. Sloučenina podle nároku 1,vyznačující se tím, že R značí skupinu methylovou, ethylovou, n-propylovou, n-butylovou, n-pentylovou, n-hexylovou, n-heptylovou, n-oktylovou, n-nonylovou, n-decylovou, n-un.decylovou, n-dodecylovou, n-tridecylovou, n-tetradecylovou, n-pentadecylovou, n-hexa_decylovou, isopropylovou, 1-methylpropylovou, terč.-butylovou, 2-methylbutylovou nebo 3-methylbutylovou.
3. Způsob přípravy sloučeniny podle nároku 1 nebo 2, v y z n a dující se tím, že se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce II ve kterém R značí totéž co ve vzorci I, s činidlem přenášejícím síru a popřípadě reakcí získaného produktu s vhodnou bází, aby-se

- 10 ♦ ·' · * • · · · · · · · · · ·*· ·♦ ·· ♦· ·· ·· získala farmaceuticky přijatelná sůl a/nebo se izoluje některý optický isomer.
4. Způsob podle nároku 3,vyznačující se tím, že činidlem přenášejícím síru je N ,N '-thio-bis/ftalimid/.
5. Sloučenina podle nároku 1 nebo 2 k použití při léčebné terapii.
6. Sloučenina podle nároku 5,vyznačující se tím, že léčebnou terapií je imunostimulace.
7. Sloučenina podle nároku 5,vyznačující se tím, že léčebnou terapií je arterioskleróza.
8. Farmaceutický prostředek obsahující sloučeninu podle nároku 1 nebo 2 zároveň s farmacutioky přijatelným nosičem a/nebo excipientem.
9. Použití sloučeniny podle nároku 1 nebo 2 k výrobě léčiva s imunostimulačním účinkem.
10. Použití sloučeniny podle nároku 1 nebo 2 nebo prostředku podle nároku 8 k výrobě léčiva pro použití při léčení arteriosklerózy.
11. Metoda imunostimulace vyznačující se tím, že se subjektu, který potřebuje imunostimulaci, podává účinné množství sloučeniny podle nároku 1 nebo 2 nebo prostředku podle nároku 8.
12. Metoda léčení arteriosklerózy vyznačující se t í m , že se subjektu, který takové léčení potřebuje, podává účinné množství sloučeniny podle nároku 1 nebo 2 nebo prostředku podle nároku 8.