CZ20002787A3

CZ20002787A3 - 2-(purin-9-yl)-tetrahydrofuran-3,4-diolové deriváty

Info

Publication number: CZ20002787A3
Application number: CZ20002787A
Authority: CZ
Inventors: Chuen Chan; Richard Peter Charles Cousins; Brian Cox
Original assignee: Glaxo Group Limited
Priority date: 1999-01-29
Filing date: 1999-01-29
Publication date: 2001-04-11

Abstract

Sloučeniny obecného vzorce I jsou látky s protizánětlivým účinkem, které je možno použít k léčbě zánětlivých chorob ve formě farmaceutických prostředků, které rovněž tvoří součást podstaty vynálezu. Popsány jsou také způsoby výroby těchto účinných látek.

Description

Oblast techniky

Vynález se týká nových chemických derivátů, způsobu jejich výroby, farmaceutických prostředků, které tyto látky obsahují a použití těchto sloučenin k léčebným účelům.

Dosavadní stav techniky

Zánět je primární reakce na poranění tkáně nebo na útok mikroorganismů a spočívá v tom, že leukocyty lnou k endotelu a tkáň je aktivována. Aktivace leukocytů může vyvolat tvorbu toxických látek kyslíkaté povahy, např. aniontů superoxidů a uvolnění různých dalších látek, jako jsou peroxidázy a proteázy. Leukocyty v oběhu zahrnují neutrofilní, eosínofilní a bazofilní leukocyty, monocyty a lymfocyty. Různých forem zánětů se účastní různé typy leukocytů v závislosti na typu molekul, cytokinů a chemitaktických faktorů, k jejichž expresi dochází v příslušných tkáních.

Primární funkcí leukocytů je bránit organismus před napadením, např. bakteriemi nebo parazity. Jakmile je tkáň poraněna nebo infikována, dochází k řadě jevů, které přivádějí leukocyty z oběhu do napadené tkáně. Tento přívod leukocytů je řízen tak, aby docházelo k pravidelné destrukci a fagocytóze cizorodých nebo uhynulých buněk s následným hojením tkáně a rozpuštěním zánětlivého infiltrátu. U chronických zánětlivých stavů je však hojení často nedostatečné, zánět přetrvává a později vede k destrukci tkáně.

In vitro i in vivo bylo prokázáno, že sloučeniny, účinné na receptorů adenosinu A2a mají protizánětlivé účinky. Působení těchto látek bylo popsáno např. Cronsteinem 1994. Studie na izolovaných • · · ·

neutrofilech prokázaly, že látky, účinné na receptorech A2, vyvolávají inhibici tvorby superoxidů, degranulace, shlukování a lnutí k endotelu podle Crontein a další, 1993 a 1985, Burkey a Webster, 1993, Richter, 1992, Skubitz a další, 1988. V případě použití látek, selektivních pro receptory A2a spíše než pro receptory A2b (např. CGS21680) je profil inhibice shodný s působením na podtyp receptorů A2a podle Dianzani a další 1994. Látky s agonistickým účinkem s adenosinem mohou také potlačovat další typy leukocytů podle Elliot a Leonard, 1989, Peachell a další 1989. Při pokusech na zvířatech byly rovněž prokázány protizánětlivé účinky methotrexátu na receptorech A2 pro adenosin podle Asako a další, 1993, Cronstein a další 1993 a 1994. Adenosin jako takový a sloučeniny, které zvyšují koncentraci adenosinu v krevním oběhu, rovněž mají in vivo protizánětlivé účinky podle Green a další, 1991, Rosengren a další, 1995. Mimo to zvýšené koncentrace adenosinu v oběhu u člověka v důsledku nedostatku adenosindeaminázy potlačuje reaktivitu imunitního systému podle Hirschorn, 1993.

Některé substituované 4’-karboxamidové a 4’-thioamidoadenosinové deriváty, použitelné pro léčení zánětlivých onemocnění, jsou popsány v mezinárodních patentových přihláškách WO 94/17090, WO 96/02553 a WO 96/02543 (Glaxo Group). Substituované 4’-karboxamidoadenosinové deriváty, použitelné k léčení demence, jsou popsány v AU 8771946 (Hoechst Japan). Substituované 4’-hydroxymethyladenosinové deriváty, použitelné pro léčení poruch hybnosti žaludku a střev, byly uvedeny v EP-A-423776 a EP-A-423777 (Searle). Substituované 4’-hydroxymethyladenosinové deriváty, použitelné jako inhibitory shlukování krevních destiček jsou uvedeny v BE-768925 (Takeda). 4’-hydroxymethyladenosinové deriváty a jejich 4’-estery, použitelné jako látky, snižující zvýšený krevní tlak nebo mající další příznivé účinky na srdeční a cévní systém, jsou popsány v US 4663313, EP 139358 a US 4767747

(Warner Lambert), US 4985409 (Nippon Zoki) a US 5043325 (Whitby Research). 4-hydroxymethyladenosinové deriváty, použitelné při léčení autoimunitních poruch jsou uvedeny v US 5106837 (Scrips Research Institute). 4’-hydroxymethyladenosinové deriváty s antialergickým účinkem jsou uvedeny v US 4704381 (Boehringer Mannheim). Některé 4’-tetrazolylalkyladenosinové deriváty, použitelné k léčení poruch srdce a krevního oběhu, byly popsány v DT-A-2621470 (Pharma-Waldhof). Další 4’-karboxamidoadenosinové deriváty, použitelné při léčení srdečních a cévních onemocnění, byly popsány také v US 5219840, GB 2203149 a GB 2199036 (Sandoz), WO 94/02497 (US Dept. Health), US 4968697 a EP 277917 (Ciba Geigy), US 5424297 (Univ. Virginia) a EP 232813 (Warner Lambert).

Další 4’-karboxamidoadenosinové deriváty, nesubstituované na purinovém kruhu v poloze 2 jsou uvedeny v DT 2317770, DT 2213180, US 4167565, US 3864483 a US 3966917 (Abbott Labs), DT 2034785 (Boehringer Mannheim), JP 58174322 a JP 58167599 (Tanabe Seiyaku), WO 92/05177 a US 5364862 (Rhone Poulenc Rorer), EP 66918 (Procter and Gamble), WO 86/00310 (Nerlson), EP 222330, US 4962194, WO 88/03147 a WO 88/03148 (Warner Lambert) a US 5219839, WO 95/18817 a WO 93/14102 (Lab UPSA).

4’-hydroxymethyladenosinové deriváty, nesubstituované na purinovém kruhu v poloze 2 jsou popsány ve WO 95/11904 (Univ Florida).

4’-substituované adenosinové deriváty, použitelné jako inhibitory adenosinkinázy jsou popsány ve WO 94/18215 (Gensia).

Další 4’-halogenmethyl-, methyl-, thioalkylmethyl- nebo alkoxymethyladenosinové deriváty jsou popsány v EP 161128 a EP 181129 (Warner Lambert) a US 3983104 (Schering). Další

4’-karboxamidoadenosinové deriváty jsou popsány v US 7577528 (NIH), WO 91/13082 (Whitby Research) a WO 95/02604 (US Dept Health).

Některé deoxynukleotidy, obsahující tetrazolovou skupinu, které nemají antiinfekční účinek, byly popsány v publikaci Baker a další, 1974, Tetrahedron 30, 2939-2942. Další adenosinové deriváty s obsahem tetrazolové skupiny, vyvolávající inhibici shlukování krevních destiček byly popsány v publikaci Mester a Mester (1972) PathologieBiologie, 20 (Suppl) 11-14.

Některé deriváty ribózy s obsahem nitrilových skupin byly popsány v Schmidt a další (1974), Liebigs Ann. Chem. 1856-1863.

Patentové přihlášky, zveřejněné těsně po datu prvního práva přednosti předmětné přihlášky zahrnují WO 98/28319 (Glaxo Group Limited), popisující 4’-substituované tetrazol-2-(purin-9-yl)tetrahydrofuran-3,4-diolové deriváty, WO 98/16539 (Novo Nordisk A/S), popisující adenosinové deriváty, použitelné pro léčení ischemie srdečního svalu a mozku a pro léčení epilepsie, WO 98/01426 (RhonePoulenc Rorer Pharmaceuticals lne.), týkající se adenosinových derivátů s antihypertenzivním, kardioprotektivním, antiischemickým a antilipolytickým účinkem a WO 98/01459 (Novo Nordisk A/S), popisující N,9-substituované adeninové deriváty, substituované v poloze 4’ nesubstituovanou oxazolylovou nebo isoxazolylovou skupinou a použití takových sloučenin pro léčení poruch, vyvolaných u člověka působením cytokinů.

Nyní byla objevena nová skupina sloučenin se širokou škálou protizánětlivých účinků. Tyto látky vyvolávají inhibici přitahování leukocytů a inhibici jejich aktivace a mají agonistický účinek na receptoru 2a pro adenosin. Tyto látky je tedy možno použít k léčebným • · účinkům k zábraně destrukce tkání působením leukocytů u chorob, kde dochází ke hromadění leukocytů v tkáních. Uvedené látky jsou bezpečnější než kortikosteroidy, jejichž použití je omezeno jejich závažnými vedlejšími účinky.

Skupina sloučenin podle vynálezu má výhodnější profil účinnost ve srovnání se známými agonísty, selektivními pro receptory A2a v tom smyslu, že obecně nemají agonistický účinek na lidském receptoru A3. Mohou dokonce mít na tomto receptoru antagonistický účinek. Tato účinnost je velmi výhodná vzhledem k tomu, že receptory A3 se také nacházejí na leukocytech, zejména eosinofilních a na dalších zánětlivých buňkách a aktivace těchto receptorů tedy může podporovat zánětlivé pochody podle Kohno a další, 1996, Van Schaick a další 1996. Byly dokonce vysloveny názory, že zúžení průdušek působením adenosinu u astmatiků může být zprostředkováno přes receptory A3 pro adenosin (Kohno a další, 1996).

Podstata vynálezu

Podstatu vynálezu tvoří 2-(purin-9-yl)-tetrahydrofuran-3,4diolové deriváty obecného vzorce I

kde R¹ a R² a nezávisle volí ze skupiny:

(i) C3-C8cykloalkyl, (ii) atom vodíku, (iii) (aryl)2CHCH₂-, (iv) C3-C8cykloalkylC1-C6alkyl, (v) C1-C8alkyl, (vi) arylC1-C6alkyl, (vii) R⁴R⁵N-C1-C6alkyl, (viii) C1-C6alkyl-CH(CH₂OH)-, (ix) arylC1-C5alkyl-CH(CH₂OH)-, (x) arylC1-C5alkyl-C(CH₂OH)₂-, (xi) C3-C8cykloalkyl, nezávisle substituovaný jedním nebo větším počtem, např. 1, 2 nebo 3 skupinami -(CH₂)_PR⁶, (xii) H₂NC(=NH)NHC1-C6alkyl, (xiii) skupina obecného vzorce ^(CHA_X-\ X (CH₂)_b ^Z nebo obdobná skupina, v níž je jeden atom uhlíku methylenové skupiny, sousedící se skupinou X nebo oba tyto atomy, substituovány methylovou skupinou, (xiv) -C1-C6alkyl-OH, (xv) -C1-C8halogenalkyl, (xvi) skupina obecného vzorce (CH₂)_eCO(CH₂)_d-C NR⁷ >CH₂)_e/ (xvii) aryl a (xviii) -(CH₂)fSO₂NHg(C1-C4alkyl)₂._g nebo -(CH₂)_fSO₂NH_g(arylC1-C4alkyl)₂._g,

R³ znamená methyl, ethyl, -CH=CH₂, n-propyl, -CH₂CH=CH2, CH=CHCH3, isopropyl, isopropenyl, cyklopropyl, cyklopropenyl, cyklopropylmethyl, cyklopropenylmethyl, -CH(OH)CH₂, -(CH₂)_qhalogen -(CH₂)_hY(CH₂)iH, -(CH₂)_kZ, -(CH₂)hCO(CH₂)₀H, -(CH₂)_rS(O)_t(CH₂)_sH nebo -(CH₂)_kC((CH₂)_uH)=NO(CH₂)_vH,

Y znamená O, S nebo N(CH₂)jH,

Z znamená -COO(CH₂),H nebo -CON(CH₂)_mH((CH₂)_nH), a a b nezávisle znamenají celá čísla 0 až 4 za předpokladu, že a+b je v rozmezí 3 až 5, c, d a e nezávisle znamenají celá čísla 0 až 3 za předpokladu, že c+d+e je v rozmezí 2 až 3, f znamená 2 nebo 3 a g znamená celé číslo 0 až 2, p znamená 0 nebo 1, q znamená celé číslo 0 až 3, h znamená celé číslo 0 až 2, i znamená celé číslo 0 až 2, přičemž h+i je v rozmezí 0 až 3, j znamená celé číslo 0 až 2, přičemž h+i+j je v rozmezí 0 až 3, k znamená 0 nebo 1,

I znamená 1 nebo 2, přičemž k+l je v rozmezí 1 až 2, man nezávisle znamenají celé číslo 0 až 2, přičemž k+m+n je v rozmezí 0 až 2, o znamená celé číslo 0 až 2, přičemž h+o je v rozmezí 0 až 2, ras nezávisle znamenaní 1 nebo 2, přičemž r+s je v rozmezí 2 až 3, t znamená 1 nebo 2, u a v nezávisle znamenají 0 nebo 1, přičemž k+u+v je v rozmezí 0 až 1,

R⁴ a R⁵ nezávisle znamenají atom vodíku, C1-C6alkyl, aryl, arylCIC6alkyl nebo může skupina NR⁴R⁵ znamenat pyridinyl, pyrrolidinyl, piperidinyl, morfolinyl, azetidinyl, azepinyl, piperazinyl, N-C1C6alkylpiperazinyl nebo 2-(1-methyl-1 H-imidazol-4-yl)-,

R⁶ znamená -OH, -NH₂, -NHCOCH₃ nebo atom halogenu,

R⁷ znamená atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkylaryl nebo -COC1C6alkyl,

X znamená NR⁷, O, S, SO nebo SO2, jakož i soli a solváty těchto sloučenin.

C1 -C6alkyi zahrnuje alifatické uhlovodíkové zbytky, obsahující 1 až 6 atomů uhlíku s přímým nebo rozvětveným řetězcem, nasycené nebo nenasycené. Údaje, týkající se skupin C1-C4alkyl, C1-C5alkyl, C1-C8alkyl je možno interpretovat obdobně. Totéž se týká alkoxyskupiny. S výhodou jsou uvedené skupiny nasycené.

Aryl může obsahovat mono- a bicyklický uhlíkový aromatický kruh, jako fenyl nebo naftyl a také heterocyklický aromatický kruh, obsahující 1 až 3 heteroatomy ze skupiny N, O a S, jde např. o pyridinyl, pyrimidinyl, thiofenyl, imidazolyl, chinolinyl, furanyl, pyrrolyl, nebo oxazolyl, všechny tyto kruhy jsou popřípadě substituovány např. substituentem ze skupiny C1-C6alkyl, atom halogenu, hydroxyskupina, nitroskupina, C1-C6alkoxyskupina, kyanoskupina, aminoskupina, -SO2NH2 nebo -CH2OH.

Jako příklad C3-C8cykloalkylové skupiny ve významu R¹ a R² je možno uvést monocyklické skupiny, jako cyklopentyl nebo cyklohexyl a bicyklické skupiny, jako norbornyl, např. exonorborn-2-yl.

Jako příklad skupiny (aryl)₂CHCH₂- pro R¹ a R² je možno uvést skupinu Ph2CHCH2- nebo obdobnou skupinu, v níž je jedna nebo jsou obě fenylové skupiny substituovány, např. atomem halogenu nebo C1C4alkylovou skupinou.

Příkladem C3-C8cykloalkylC1-C6alkylové skupiny ve významu R¹ a R² může být ethylcyklohexyl.

Příklady C1-C8alkylové skupiny pro R¹ a R² zahrnují (CH₂)₂C(Me)3, -CH(Et)₂ a CH₂=C(Me)CH₂CH₂-.

Jako příklady arylC1-C6alkylové skupiny ve významu R¹ a R² lze uvést -(CH₂)₂Ph, -CH₂Ph, přičemž fenylová skupina může být jednou nebo vícekrát substituovaná atomem halogenu, jako fluoru nebo jodu, aminoskupinou, methoxyskupinou, hydroxyskupinou, skupinou -CH₂OH nebo SO₂ NH₂, dále může jít o -(CH₂)₂-pyridinyl, např. (CH₂)₂-pyridin2-yl, popřípadě substituovaný aminoskupinou, (CH₂)₂-imidazolyl, například 1H-imidazol-4-yl), v této skupině může být imidazolyl popř. N-substituován C1-C6alkylovou skupinou, zvláště methylovou skupinou.

Příkladem R⁴R⁵N-C1-C6alkylové skupiny ve významu R¹ a R², může být ethylpiperidin-1 -yl, ethylpyrrolidin-1 -yl, ethylmorfolin-1-yl, (CH₂)₂NH(pyridin-2-yl) a -(CH₂)₂NH₂.

Jako příklad C1-C6alkyl-CH(CH₂OH)- skupiny je možno ve významu R¹ a R² uvést Me₂CHCH(CH₂OH)-.

Jako příklad skupiny arylC1-C5alkyl-CH(CH₂OH)- ve významu R¹a R² je možno uvést PhCH₂CH(CH₂OH)-, zvláště skupinu

OH /,

Příkladem skupiny arylC1-C5alkyl-C(CH₂OH)₂- ve významu R¹ a R² může být skupina PhCH₂C(CH₂OH)₂-.

• · ··· • ·	99 9 9	9 ·	9 ·	• ·
* · · 9 • · · • 9	• · 9 9 9 9		• · 9 9 · • ·
99 999	9 ·	·· ·	• ·	• ·

Příklady C3-C8cykloalkylové skupiny, substituované jedním nebo větším počtem substituentů -(CH₂)_PR⁶, např. 1, 2 nebo 3 takovými skupinami ve významu R¹ a R² zahrnují 2hydroxycyklopentylovou a 4-aminocyklohexylovou skupinu, zvláště trans-4-aminocyklohexylovou skupinu.

Příkladem skupiny H₂NC(=NH)NHC1-C6alkyl pro R¹ a R² může být skupina H₂NC(=NH)NH(CH₂)₂-.

Příkladem skupiny ^(CHA_X\ z^x ve významu R¹ a R² může být pyrrolidin-3-yl, piperidin-3-yl, piperidin4-yl, tetrahydro-1,1 -dioxidthiofen-3-yl, tetrahydropyran-4-yl, tetrahydothiopyran-4-yl, 1-oxohexáhydro-1.lambda.4-thiopyran-4-yl a

1,1-dioxohexahydro-1.lambda.6-thiopyran-4-yl nebo derivát této látky, v němž je atom dusíku v kruhu substituován C1-C6alkylovou skupinou jako methylovou skupinou, C1-C6alkylacylovou skupinou jako acetylovou skupinou, arylC1-C6alkylovou skupinou nebo benzylovou skupinou.

Jako příklad skupiny C1-C6alkyl-OH ve významu R¹ a R² je možno uvést skupinu -CH₂CH₂OH.

Jako příklad C1-C8halogenalkylových skupin ve významu R¹ a R² lze uvést -CH₂CH₂CI a (CH₃)₂CIC(CH₂)₃-.

Příkladem skupin (CH₂)_cCO(CH₂) —\

XCH₂)_e/ »··· * · · ve významu R¹ a R² mohou být 2-oxopyrrolidin-4-yl, 2-oxopyrrolidin-5yl nebo deriváty těchto skupin, v nichž je atom dusíku v kruhu substituován C1-C6alkylovou skupinou, např. methylovou skupinou nebo benzylovou skupinou.

Příkladem arylové skupiny ve významu R¹ a R² může být fenyl, popř. substituovaný atomem halogenu, jako fluoru, zejména v poloze

4.

Jako příklad skupiny -(CH2)fSO2NH_g(C1-C4alkyl)2-_g ve významu R¹ a R² lze uvést skupiny -(ChUhSC^NHMe a příkladem skupiny (CH2)fSO2NH_g(arylC1-C4alkyl)₂-g může být ve významu R¹ a R²skupina -(CHLhSC^NHCH^Ph.

Jako příklad C1-C6alkylové skupiny ve významu R⁷ je možno uvést methyl, příkladem C1-C6alkylarylové skupiny ve významu R⁷může být benzyl a příkladem COC1-C6alkylové skupiny ve významu R⁷může být -COCH3.

S výhodou neznamenají symboly R¹ a R² současně atomy vodíku.

Výhodným významem pro R¹ je C3-C8cykloalkyl, (aryl)2CHCH₂-, arylC 1 -C6alkyl, C1 -C8alkylaryl, -(CH₂)fSO₂NH_g(C1-C4alkyl)2-g, tetrahydropyran-n-yl nebo tetrahydrothiopyran-n-yl, kde n znamená 3 nebo 4, C3-C8cykloalkylC1-C6alkyl, atom vodíku nebo R⁴R⁵N-C1-C6alkyl, kde NR⁴R⁵ společně tvoří piperidinyl nebo morfolinyl.

Výhodným významem pro R¹ je také C1-C6alkyl-CH(CH2OH)-,

1,1-dioxohexahydro-1.lambda.6-thiopyran-4-yl, N-acetylpiperidin-4-yl,

S-hydroxymethyl-2-fenylethyl, piperidin-4-yl a 1-oxohexa hydro1. lambda. 4-thiopyran-4-yl.

Výhodným významem pro R² mohou být skupiny C1-C6alkyl-OH, H2NC(=NH)NHC1-C6alkyl, R⁴R⁵NC1-C6alkyl, kde NR⁴R⁵ společně tvoří pyridinyl, piperidinyl, morfolinyl nebo 2-(1-methyl-1 H-imidazol-4yl), arylC1-C5alkylCH(CH2OH)-, aryl, C3-C8cykloalkylC1-C6alkyl, tetrahydro-1,1 -dioxidthiofen-3-yl, C3-C8cykloalkyl, C1-C6alkylCH(CH₂OH)-, arylCI-C6alkyl, pyrrolidin-3-yl, 2-oxopyrrolidin-4-yl, 2oxopyrrolidin-5-yl, piperidin-3-yl, arylC1-C6alkyl, jako benzyl, C3C8cykloalkyl, nezávisle substituovaný jednou nebo větším počtem skupin, jako 1, 2 nebo 3 skupinami -(CH₂)_PR⁶, nebo piperidin-4-yl, v němž je atom dusíku v kruhu popřípadě substituován C1-C6alkylovou skupinou.

Výhodným významem pro R² je také C1-C8alkyl nebo R⁴R⁵NC1C6alkyl, kde R⁴ a R⁵ nezávisle znamenají atom vodíku nebo aryl nebo znamená skupina R⁴R⁵N společně pyrrolidinyl.

V případě, že R³ znamená atom halogenu, je výhodný brom nebo chlor, zvláště brom.

R³ s výhodou znamená methyl, ethyl nebo n-propyl.

R³ s výhodou znamená -CH=NOH, cyklopropyl, COOCH₃, COOCH₂CH₃, -CH₂OH, -CH(OH)CH₃ nebo atom halogenu.

Zvláště výhodným významem pro R³ je methyl, ethyl, n-propyl, CH₂OH, -CH(OH)CH₃, -CH=NOH nebo atom halogenu.

··*· ······ ........;·

Zvláště výhodným významem pro R³ je methyl, ethyl, -CH2OH nebo -CH(OH)CH3, zejména methyl, ethyl, nebo -CH₂OH, specificky ethyl nebo -CH₂OH, nejvýhodnějším významem je ethyl.

Zvláště výhodným významem pro R⁴ a R⁵ je nezávisle atom vodíku, C1 -C6alkyl, aryl, arylC1-C6alkyl nebo NR⁴R⁵ znamená pyrrolidinyl, piperidinyl, morfolinyl, azetidinyl, azepinyl, piperazinyl nebo N-C1-C6alkylpiperazinyl.

Zvláště výhodným významem pro R⁴ a R⁵ je atom vodíku, C1C6alkyl nebo aryl nebo tvoří skupina NR⁴R⁵ společně pyrrolidinyl, piperidinyl, morfolinyl, azetidinyl, azepinyl, piperazinyl nebo Nmethylpiperazinyl.

Výhodným významem pro p je 0. R⁶ s výhodou znamená OH nebo NH₂ a zvláště OH.

Symbol q s výhodou znamená 0 nebo 1 a zvláště 0. Výhodným významem pro Y je atom kyslíku a pro Z skupina -COOCH3. Skupina (CH₂)hY(CH₂)iH s výhodou znamená skupinu -(CH₂)i-₂OH. Výhodným významem pro k je 0. Výhodným významem pro u a v je rovněž 0 a pro r a s je 1. Skupina -(CH₂)hCO(CH₂)₀H s výhodou znamená -COCH3. Výhodným významem pro I je 1.

Symboly a a b s výhodou současně znamenají 2. Výhodným významem pro X je skupina NR⁷, O, S nebo SO₂, zvláště O nebo S.

Výhodným významem pro c je 0, přičemž buď d znamená 2 a e znamená 0 nebo d znamená 1 a e znamená 1.

R⁷ s výhodou znamená atom vodíku, C1-C6alkyl, C1 -C6alkylaryl nebo -COCH3, zvláště atom vodíku, benzyl nebo COCH₃, nejvýhodněji atom vodíku.

R³ s výhodou znamená methyl, ethyl nebo n-propyl a R⁷ atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkylaryl nebo -COCH₃.

Zvláště výhodným významem pro R¹ je C4-C7cykloalkyl, zvláště cyklopentyl, Ph₂CHCH₂-, PhCH₂CH₂-, C4-C7alkyl, zvláště (CH₂)₂C(Me)3 nebo -CH(Et)₂ a fenyl, substituovaný jak hydroxyskupinou, tak atomem halogenu, jako fluoru, jde tedy např. o

3- fluoro-4-hydroxyfenyl, dále -(CH₂)₂SO₂NHMe, nebo tetrahydropyrann-yl nebo tetrahydrothiopyran-n-yl, kde n = 4.

Specifickým výhodným významem pro R¹ je atom vodíku, 1Shydroxymethyl-2-methy!propyl, 3-iodofenylmethyl, cyklohexylethyl, benzyl, 1,1-dioxohexahydro-1 .lambda.6-thiopyran-4-yl, Nacetylpiperidin-4-yl, 1S-hydroxymethyl-2-fenylethyl, piperidin-4-yl a 1oxohexahydro-1 .lambda.4-thiopyran-4-yl.

Nejvýhodnějším významem pro R¹ je -CH₂CHPh₂, -CH(Et)₂ nebo fenylethyl.

Výhodným významem pro R² je C2-C4alkyl-OH, H₂NC(=NH)NHC2-C4alkyl nebo R⁴R⁵N-C2-C4alkyl, v němž NR⁴R⁵společně tvoří pyridinyl, piperidinyl, morfolinyl nebo 2-(1-methyl-1 Himidazol-4-yl).

Zvláště výhodným významem pro R² je 2-(1-methyl-1H-imidazol4- yl)ethyl, pyrridín-2-ylethyl, 1S-hydroxymethyl-2-fenylethyl, pyridin-2yl-NH(CH₂)₂-, 4-(H₂NSO₂)-fenylethyl, trans-4-aminocyklohexyl, trans-4-

(CH₂CONH)-cyklohexyl, pyrrolidin-3-yl, 3,4-dimethoxyfenylethyl, Nbenzyl-pyrrolidin-3-yl, pyrrolidin-1 -ylethyl, aminoethyl nebo ethyl.

Nejvýhodnějším významem pro R² je piperidin-1 -ylethyl nebo 2(1 -methyl-1 H-imidazol-4-yl)ethyl.

Nejvýhodnějšími sloučeninami obecného vzorce I jsou následující látky (2R,3R,4S,5S)-2-[6-(2,2-difenylethylamino)-2-(2-piperidin-1ylethylamino)-purin-9-yl]-5-(3-ethylisoxazol-5-yl)-tetrahydrofuran-3,4diol, (2R,3R,4S,5S)-2-(3-ethylisoxazol-5-yl)-5-[6-fenethylamino-2-(2piperidin-1-ylethylamino)-purin-9-yl]-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2S,3S,4R,5R)-2-(3-ethylisoxazol-5-yl)-5-[6-(1-ethylpropylamino)-2-(2 piperidin-1-ylethylamino)-purin-9-yl]-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5S)-2-[6-(1-ethylpropylamino)-2-(2-piperidin-1ylethylamino)-purin-9-yl]-5-[3-(1-hydroxyethyl)isoxazol-5-yljtetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5S)-2-{6-(1-ethylpropylamino)-2-[2-(1-methyl-1 H-imidazol4-yl)-ethylamino]-purin-9-yl}-5-(3-methylisoxazol-5-yl)-tetrahydrofuran

3,4-dioi, (2R,3R,4S,5S)-2-{6-(1-ethylpropylamino)-2-[2-(1-methyl-1 H-imidazol4-yl)-ethylamino]-purin-9-yl}-5-(3-hydroxymethylisoxazol-5-yl)tetrahydrofuran-3,4-diol, jakož i soli a solváty těchto látek.

V obecném vzorci I je znázorněna absolutní stereochemie. V případě, že postranní řetězce obsahují středy chirality, zahrnuje vynález také směsi enanciomerů včetně racemických směsí a diastereomery i jednotlivé enanciomery. Obvykle je výhodné užívat «< «· sloučeniny obecného vzorce I ve formě čištěného jednotlivého enanciomeru.

Součást podstaty vynálezu tvoří také způsob výroby derivátů obecného vzorce I, který spočívá v tom, že se (a) nechá reagovat odpovídající sloučenina obecného vzorce II

kde L znamená odštěpitelnou skupinu, jako atom halogenu, zvláště chloru, nebo chráněný derivát této látky, se sloučeninou obecného vzorce R²NH2 nebo jejím chráněným derivátem, nebo se (b) nechá reagovat odpovídající sloučenina obecného vzorce ill

(!!!) se sloučeninou obecného vzorce IV

·· 9 ·· ···· ···

N-0

HO (IV)

OH kde L znamená odštěpitelnou skupinu, nebo s chráněným derivátem této látky, načež se (c) převede takto získaný derivát obecného vzorce I na jiný derivát obecného vzorce I nebo se (d) odštěpí z chráněného derivátu obecného vzorce I ochranná skupina, načež se popřípadě převede derivát obecného vzorce I nebo jeho sůl na jinou sůl.

Reakce podle postupu (a) se obvykle provádí za zahřívání reakčních složek na teplotu v rozmezí 50 až 150 °C v přítomnosti inertního rozpouštědla, jako DMSO. Derivát obecného vzorce II se obvykle užije ve formě, v níž jsou obě hydroxylové skupiny chráněny, např. acetylovou skupinou.

Při provádění postupu (b) je výhodné použít sloučeninu obecného vzorce IV, v níž jsou 2- a 3-hydroxylové skupiny ribózy chráněny, např. acetylovými skupinami. Odštěpitelnou skupinou L může být hydroxyskupina, s výhodou jde o C1-C6alkoxyskupinu, jako methoxyskupinu nebo ethoxyskupinu, esterovou skupinu, jako acetyloxyskupinu nebo benzoyloxyskupinu nebo atom halogenu. Výhodnou odštěpitelnou skupinou Lje acetyloxyskupina. Reakci je možno uskutečnit smísením reakčních složek v inertním rozpouštědle, jako MeCN v přítomnosti Lewisovy kyseliny, jako TMSOTf a DBU.

Příkladem provedení postupu (c) může být převádění derivátů obecného vzorce I, v nichž R³ znamená atom halogenu, např. bromu, na odpovídající derivát obecného vzorce I, v němž R³ znamená alkyl nebo chráněnou alkoholovou skupinu. Postup je možno uskutečnit např. působením kovového reakčního činidla, jako halogenidu hořečnatého nebo zinečnatého, popř. v přítomnosti dalšího kovu, např. paladia jako katalyzátoru v přítomnosti ligandů, jako PPh3. Deriváty obecného vzorce I, v nichž R³ znamená atom halogenu, např. atom bromu, je možno převést na odpovídající deriváty obecného vzorce I, v nichž R³ znamená alkoxyskupinu působením odpovídajícího alkoxidu kovu, jako KOCH₃ v odpovídajícím alkoholovém rozpouštědle.

Při provádění postupu (d) je možno nalézt poznatky o ochranných skupinách a o způsobu jejich odstranění v souhrnné publikaci TW Greene „Protectiv Groups in Organic Synthesis“ J. Wiley and Sons, 1991. Vhodnými ochrannými skupinami na hydroxylové skupině jsou alkylové skupiny jako methyl, acetalové skupiny, jako acetonidy a acyiové skupiny jako acetyl nebo benzoyl, tyto skupiny je možno odstranit hydrolýzou. Použitelný je také arylalkyl, jako benzyl, který je možno odstranit hydrogenolýzou v přítomnosti katalyzátoru. V hodnými ochrannými skupinami na aminoskupině mohou být sulfonylová, např. tosylová skupina, acylová skupina, jako je benzyloxykarbonyl nebo terč.butoxykarbonyl a arylalkyl, jako benzyl, tyto skupiny je možno odstranit hydrolýzou nebo hydrogenolýzou podle potřeby.

Uskutečnit je možno také další postup (e), který spočívá v tom, že se nechá reagovat odpovídající sloučenina lla ^L

(lla) .0.

kde L znamená odštěpitelnou skupinu, jako atom halogenu, zvláště chloru nebo chráněný derivát této sloučeniny se sloučeninou obecného vzorce R¹NH2 nebo jejím chráněným derivátem.

Reakci je možno uskutečnit za podmínek, které byly popsány svrchu pro postup (a).

Vhodnými solemi sloučenin obecného vzorce I jsou fyziologicky přijatelné soli, např. adiční soli, odvozené od anorganických nebo organických kyselin, jako jsou hydrochloridy, hydrobromidy, sulfáty, fosfáty, acetáty, benzoáty, citráty, sukcináty, laktáty, tertráty, fumaráty, maleáty, 1-hydroxynaftoáty, methansulfonáty a také soli s anorganickými bázemi, např. soli s alkalickými kovy, jako sodné soli. Fyziologicky nepřijatelné soli derivátů obecného vzorce I je možno využít k výrobě těchto derivátů a jejich fyziologicky přijatelných solí. Příkladem takových solí mohou být trifluoracetáty a formiáty.

Vhodnými solváty derivátů obecného vzorce I jsou hydráty.

Adiční soli derivátů obecného vzorce I se kyselinami je možno získat tak, že se na volnou látku obecného vzorce I působí příslušnou kyselinou.

Sloučeniny obecného vzorce II je možno připravit tak, že se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce V

kde L¹ a L² nezávisle znamenají odštěpitelné skupiny, zvláště atomy ' halogenu, jako chloru, nebo chráněný derivát této sloučeniny, se sloučeninou obecného vzorce R¹NH².

Reakce se s výhodou provádí v přítomnosti baze, jako aminu, např. diisopropylethylaminu v rozpouštědle, jako DMF nebo v alkoholu jako isopropanolu při zvýšené teplotě, např. 50 °C.

Sloučeniny obecného vzorce V je možno získat tak, že se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce IV s purinovým derivátem, jako dihalogenpurinem, zvláště 2,6-dichloropurinem za podmínek, jaké byly popsány v případě postupu (b).

Sloučeniny obecného vzorce I je také možno připravit způsobem, analogickým postupu (b).

Sloučeniny obecného vzorce IV nebo jejich chráněné deriváty je možno připravit ze sloučenin obecného vzorce VI

(Ví) tak, že se na sloučeninu vzorce VI působí roztokem kyseliny trifluoroctové ve vodě a pak anhydridem kyseliny octové v ···· ·· · · · • · · · · · · · ··· · · · · · • · · · · · ·· · · · ·· · · · rozpouštědle, jako pyridinu, Et₃N, DCM nebo ve směsi těchto rozpouštědel.

Sloučeniny obecného vzorce IV, v nichž L znamená atom halogenu, je možno připravit z odpovídajícího 5-alkoholu nebo 5esteru, jako acetátu. Reakce se obvykle uskuteční působením bezvodé kyseliny chlorovodíkové nebo bromovodíkové. 5-jodidy je možno připravit přímo působením trimethylsilyljodidu a 5-fluoridy je možno získat působením DAST. Obvykle se postup provádí v inertním rozpouštědle, jako je diethylether, DCM, THF nebo CCI₄.

Sloučeninu obecného vzorce VI, je možno připravit podle následujícího schématu 1.

Obecné podmínky pro stupně 1 až 5 budou odborníkům zřejmé. Je také zřejmé, že reakční činidlo a reakční složky a podmínky, uvedené ve schématu 1 jsou pouze příkladem, takže je možno použít jiné reakční složky i odlišné reakční podmínky k dosažení téže chemické přeměny, je např. možno modifikovat ochranné skupiny. Ve stupni 1 je také např. možno užít jiný alkohol, např. C1-C6alkyla!kohol, čímž se získají odlišné odštěpitelné C1-C6alkyloxyskupiny ve sloučeninách obecného vzorce VI.

Některé sloučeniny obecného vzorce IV, v nichž L znamená OMe, je také možno připravit podle následujícího schématu 1A.

Schéma 1A

O l

Stupeň <^c>

(i) Hydroxylamirn ι/MeOH // ^Νχο (ii) cHCJ/MeOH/ Heat

OH

V případě R³ znamená -CH2OH, jsou vhodnými podmínkami k provádění stupně (b) působením vhodným reakčním činidlem s obsahem lithia, jako je nBuLi/HC^CCH2OTHP a pak BF3.Et2O v přítomnosti inertního rozpouštědla, jako THF při nízkých teplotách, typicky -78 °C. V případě, že R³ znamená alkyl, zvláště ethyl, transformaci je možno uskutečnit při použití Grignardova reakčního činidla, jako MgBrC=C-CH2CH₃ v inertním rozpouštědle, jako THF s následným zpracováním reakční směsi.

Sloučeniny obecného vzorce III je možno připravit např. podle následujícího schématu 2.

Schéma 2

Známá látka

POCI₃, N, N-dimeth anilin· , MeCN, reflc v

Sloučeniny obecného vzorce II je také možno připravit podle následujícího schématu 3:

(Vil)

Schéma 3

CDl, MeNHOMe DCM, r.t. 16h

>··· »

»· ·

Stupen3

HONH^ EtOH r.t3.5h

Stupeň2

R³ = MgCi THF, CTC, 4h.

Výhodnou odštěpitelnou skupinou L je atom halogenu, zvláště chloru.

Obecné podmínky, uvedené pro stupně 1 až 4, jsou odborníkům známé. Je také zřejmé, že reakční činidla a reakční podmínky, uvedené ve schématu 2, jsou pouze příkladem a v řadě případů je možno použít i jiné podmínky k dosažení téže chemické přeměny včetně modifikace ochranných skupin. Tyto možnosti jsou odborníkům rovněž známé.

Podmínky, uvedené ve stupních 1 až 4 schématu 3, jsou rovněž vhodné pro tvorbu substituovaného isoxazolylového kruhu ve sloučeninách obecného vzorce IV, V a VI.

Sloučeniny obecného vzorce II je také možno připravit způsobem, který spočívá v tom, že se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce XI

HO

·« · ·* • · 99 · · • · · · · • · · · · · • · · · ·

999 99 kde L znamená odštěpitelnou skupinu, jako atom halogenu, zvláště chloru, nebo chráněný derivát této sloučeniny s nitriloxidem, odvozeným od sloučeniny obecného vzorce R3CH2NO2. Vhodné podmínky pro tuto reakci byly popsány svrchu ve stupni 5 schématu 1. Je výhodné použít sloučeniny vzorce XI jako derivát, v němž jsou obě hydroxylové skupiny chráněny formou acetylesteru.

Sloučeniny obecného vzorce XI, zvláště ty, v nichž L znamená atom chloru, je možno připravit z odpovídajících dichloropurinových derivátů, které je možno získat ze sloučenin, které jsou produktem schématu 1. Ve stupni 4 se užívají běžné postupy nebo postupy, které budou popsány v následujících příkladech.

Sloučeniny obecného vzorce II je také možno připravit způsobem, který spočívá v tom, že se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce XI nebo její chráněný derivát se sloučeninou obecného vzorce XII

OH (XH)

Hal kde Hal znamená atom halogenu, např. chloru nebo bromu.

Reakce může probíhat tak, že se reakční složky smísí v přítomnosti slabé zásady, např. hydrogenuhličitanu sodného nebo triethylaminu v přítomnosti systému polárních organických rozpouštědel, může jít např. o směs ethylacetátu a vody nebo DMF.

···+ ·· · ·· • · · ·· · · ··· · · · · · ··· · · · · · • · ♦ « · · ··· ·· ·♦· ··

Sloučeniny obecného vzorce II, v nichž R³ znamená CH(OH)CH3, je možno připravit redukcí odpovídajícího methylketonu s použitím běžných reakčních činidel, jako NaBH4. Odpovídající methylketon je možno připravit z derivátu sloučeniny obecného vzorce XII, v němž R³ znamená COCH₃.

Sloučeniny obecného vzorce lla je možno připravit tak, že se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce XIII

(xiii) se sloučeninou obecného vzorce IV za podmínek, obdobných těm, které byly popsány svrchu pro hlavní postup (b).

Sloučeniny obecného vzorce XIII, v nichž L znamená atom chloru, je možno připravit reakcí 2-bromoxanthinu s R²NH₂ a pak s POCI3. Deriváty sloučenin obecného vzorce XIII, obsahující odlišnou odštěpitelnou skupinu L, lze připravit analogickými postupy.

Sloučeniny obecného vzorce R¹NH2, R²NH2 a R³CH₂NO₂ jsou známé látky nebo je možno je připravit běžnými postupy.

Sloučeniny obecného vzorce VII je možno připravit způsobem, popsaným v mezinárodní patentové přihlášce č. WO 94/17090.

·« ···· ··· ··· ··«

Sloučeniny vzorce R³ - = - MgCI je možno připravit známými postupy, např. reakcí methylmagnesiumchloridu s terminální acetylenovou sloučeninou při teplotě 0 až 25 °C v THF.

Sloučeniny obecného vzorce XII jsou známé látky nebo je možno je připravit známými způsoby.

Jak již bylo uvedeno svrchu, některé meziprodukty mohou být použity v chráněné formě. Příklady ochranných skupin a způsoby jejich odštěpení byly popsány svrchu u hlavního postupu (d).

Účinnost sloučenin obecného vzorce I vyvolat inhibici funkce leukocytů, je možno prokázat například schopností těchto látek vyvolat inhibici tvorby superoxidu (O₂‘) z neutrofilů, stimulovaných chemickými látkami, jako N-formylmethionylIeucylfenylalaninem, fMLP. Sloučeniny obecného vzorce I je možno využít k ochraně poškození tkáně, vyvolaného leukocyty u těch onemocnění, kde jsou leukocyty přitahovány do místa zánětlivé reakce.

Příkladem chorobných stavů, v nichž je možno použít sloučeniny podle vynálezu pro jejich protizánětlivý účinek, mohou být choroby dýchacích cest, jako nedostatečnost dýchacího ústrojí u dospělých, ARDS, zánět průdušek včetně chronického zánětu, cystická fibróza, asthma, včetně alergických reakcí, vyvolaných tímto způsobem, rozedma, rýma a septický šok. Dále může jít o onemocnění zažívací soustavy, jako jsou zánětlivá onemocnění střev včetně tračníku, jde např. o Crohnovu nemoc nebo ulcerativní colitis, zánět žaludeční sliznice, vyvolaný Helicobacter pylori a sekundární střevní záněty, vyvolané zářením nebo reakcí na alergen, může také jít o chorobné stavy, vyvolané nesteroidními protizánětlivými látkami. Mimo to je možno sloučeniny podle vynálezu použít k léčení některých kožních onemocnění, jako jsou lupenka, alergická dermatitis a různé reakce, projevující se přecitlivělostí a také k léčení chorob centrálního nervového systému se zánětlivou složkou, jako jsou Alzheimerova nemoc a roztroušená skleróza.

Dalším příkladem chorobných stavů, u nichž je možno úspěšně použít sloučeniny podle vynálezu, jsou onemocnění srdečního a cévního systému, např. periferních cév, poškození při reperfusi a ídiopatický hypereosinofilní syndrom.

Sloučeniny podle vynálezu, které mají schopnost vyvolat inhibici funkce leukocytů, je možno použít k potlačení reaktivity imunitního systému, a tedy k léčení autoimunitních onemocnění, jako je reumatoidní arthritis a cukrovka.

Mimo to je možno sloučeniny podle vynálezu využít k inhibici tvorby metastáz a k vyvolání hojení ran.

Je zřejmé, že v případě, že se uvádí možnost léčení, týká se tato možnost také prevence uvedených stavů.

Jak již bylo uvedeno svrchu, jsou sloučeniny obecného vzorce I použitelné v lidském nebo veterinárním lékařství, zejména jako protizánětlivé látky.

Součást podstaty vynálezu tedy tvoří deriváty obecného vzorce I nebo jejich fyziologicky přijatelné soli nebo solváty pro použití v lidském nebo veterinárním lékařství, zvláště při léčení nemocných se zánětlivými stavy, u nichž dochází k poškození tkání působením leukocytů.

Součást podstaty vynálezu tvoří rovněž použití derivátů obecného vzorce I nebo jejich fyziologicky přijatelných solí nebo solvátů pro výrobu farmaceutických prostředků, určených pro léčení zánětlivých stavů, zejména u nemocných, u nichž dochází k poškození tkání působením leukocytů.

Sloučeniny podle vynálezu je možno zpracovávat na farmaceutické prostředky jakýmkoliv obvyklým způsobem. Vynález se rovněž týká farmaceutických prostředků s protizánětlivým účinkem, které jako svou účinnou složku obsahují deriváty obecného vzorce I nebo jejích fyziologicky přijatelné soli nebo solváty, popřípadě spolu s fyziologicky přijatelnými nosiči nebo pomocnými látkami. Tyto farmaceutické prostředky se obvykle připravují běžným míšením složek.

Sloučeniny podle vynálezu mohou být zpracovány pro perorální, parenterální, místní nebo rektální podání, s výhodou pro podání parenterální nebo místní, např. ve formě aerosolu. Nejvýhodnější způsob podání je místní podání do plic, např. ve formě aerosolu nebo ve formě suchého prášku.

Tablety a kapsle pro perorální podání mohou obsahovat běžné pomocné látky, jako pojivá, např. sirup, akaciovou gumu, želatinu, sorbitol, tragakanth, povařený škrob, celulózu nebo polyvinylpyrrolidon, dále plniva, jako jsou laktóza, mikrokrystalická celulóza, cukry, kukuřičný škrob, fosforečnan vápenatý nebo sorbitol, kluzné látky, jako jsou stearan hořečnatý, kyselina stearová, mastek, polyethylenglykol nebo oxid křemičitý, desintegrační činidla, jako bramborový škrob, sodnou sůl zesítěné karmelózy nebo sodnou sůl glykolátu škrobu a také smáčedlo, jako laurylsulfát sodný. Tablety mohou být povlékány známým způsobem. Kapalné prostředky pro perorální podání mohou mít formu suspenze, roztoku nebo emulze ve vodě nebo v oleji, sirupu nebo elixíru nebo může jít o suchý prášek, určený pro smísení s vodou nebo jiným vhodným prostředím těsně před použitím. Tyto kapalné prostředky mohou obsahovat běžné přísady, jako suspenzní činidla, např. sorbitolový sirup, methylcelulózu, glukózový sirup, želatinu, hydroxymethylcelulózu, karboxymethylcelulózu, gel stearanu hlinitého nebo hydrogenované jedlé tuky, dále emulgační činidlo, jako jsou fecithin, » sorbitanmonooleát nebo akaciová guma, prostředí nevodné povahy včetně poživatelných tuků, jako jsou mandlový olej, frakcionovaný kokosový olej, estery typu olejů, propylenglykol nebo ethylalkohol a také konzervační prostředky, jako methyl- nebo propyl-p-hydroxybenzoát nebo kyselinu sorbovou. Prostředky tohoto typu mohou také obsahovat různé pufry, látky pro úpravu chuti, barviva a/nebo sladidla, např. mannitol.

Pro podání vstřebáváním ústní sliznicí může mít prostředek formu tablet nebo kosočtverečných tablet, připravených běžnými postupy.

Sloučeniny podle vynálezu mohou být zpracovány také na čípky, které obvykle obsahují běžný základ pro výrobu čípků, jako kakaové máslo nebo jiné glyceridy.

Sloučeniny podle vynálezu je možno zpracovat pro parenterální podání ve formě jednorázové injekce nebo kontinuální infuse, přičemž léková forma může být rozdělena na dávky, uložené např. do ampulí, lékovek, infusí malého objemu, předem naplněných injekčních stříkaček, nebo může jít o lahvičky s obsahem většího počtu dávek a s přísadou konzervačního prostředku. Pokud jde o formu těchto prostředků, může jít o roztoky, suspenze nebo emulze ve vodné nebo nevodném prostředí, popřípadě s obsahem pomocných látek, jako jsou antioxidační činidla, pufry, antimikrobiální látky a/nebo látky pro • *·· • · ·

úpravu osmotického tlaku. Účinná složka může být dodávána také v práškové formě, určené pro smísení s vhodným prostředím, jako sterilní bezpyrogenní vodou těsně před podáním. Tento suchý prášek může být dodáván jako aseptický prášek v jednotlivých sterilních nádobkách nebo je možno plnit do nádobek aseptický sterilní roztok a tento roztok pak lyofilizovat.

Pod místním podáním se rozumí také podání insuflací a inhalací. Jako příklad různých typů prostředků pro místní podání je možno uvést mazání, krémy, emulze, prášky, pesary, spreye, aerosoly, kapsle nebo ampule pro použití v inhalačním nebo insuflačním zařízení a roztoky pro rozprášení nebo kapky, např. oční nebo nosní kapky.

Mazání a krémy mohou být připraveny při použití vodného nebo olejového základu s přidáním různých zahušťovadel a/nebo gelů a/nebo rozpouštědel. Takový základ může např. obsahovat vodu a/nebo olej, jako kapalný parafin nebo rostlinných olej, např. arašídový olej, ricinový olej nebo rozpouštědlo, jako polyethylenglykol. Použitelnými zahušťovadly jsou např. měkký parafin, stearan hlinitý, cetostearylalkohol, polyethylenglykoly, mikrokrystalický vosk a včelí vosk.

Emulze mohou být připraveny na vodné nebo olejové bázi a budou obvykle také obsahovat nejméně jedno emulgační činidlo, stabilizační činidlo, dispergační činidlo, suspenzní činidlo nebo zahušťovadlo.

Prášky pro zevní použití mohou být vytvořeny s jakýmkoliv základem, základem může být např. mastek, laktóza nebo škrob. Kapky je možno připravit při použití jednoho nebo většího počtu dispergačních činidel, solubilizačních činidel nebo suspenzních činidel a vodné nebo nevodné baze.

Spreye je možno připravit např. jako vodné roztoky nebo suspenze nebo aerosoly, uložené do tlakových balení spolu s vhodným hnacím prostředkem, např. dichlorodifluoromethanem, trichlorofluoromethanem, dichlorotetrafluoroethanem, 1,1,1,2,3,3,3-heptafluoropropanem, 1,1,1,2-tetrafluorethanem, oxidem uhličitým nebo jiným vhodným plynem.

Spreye pro aplikaci na nosní sliznici je možno připravit s použitím vodného nebo nevodného nosného prostředí s různými přísadami, jako zahušťovadly, pufry, kyselinami nebo zásadami pro úpravu pH, osmatického tlaku, tyto prostředky mohou obsahovat také antioxidační činidlo.

Je také možno připravit kapsle nebo ampule, např. z želatiny nebo blistry s použitím laminované hliníkové fólie pro použití v inhalačním nebo insuflačním zařízení. Tyto obaly obsahují práškovou směs sloučeniny podle vynálezu a vhodné práškové baze, jako laktózy nebo škrobu.

Roztoky pro inhalaci nebo pro rozprašování je možno připravit rovněž při použití vodného nosného prostředí a dalších přísad, jako kyseliny nebo zásady, pufru, látek pro úpravu osmotického tlaku nebo antimikrobiálních látek. Tyto prostředky je možno sterilizovat filtrací nebo zahříváním v autoklávu nebo je možno je dodávat v nesterilní formě.

Farmaceutické prostředky podle vynálezu je také možno použít v kombinaci s jinými účinnými látkami, např. protizánětlivými látkami, jako kortikosteroidy, může jít např. o fluticasonpropionát, beclomethasondipropionát, mometasonfuroát, triamcinolonacetonid nebo -budesonid nebo může jít o látky typu NSAID, jako cromoglycat sodný nebo také o beta-adrenergní látky jako salmeterol, salbutamol, formoterol, fenoterol nebo terbutalin a soli těchto látek nebo také o antiinfekční látky, jako antibiotika nebo protivirové látky.

Podle vynálezu je tedy možno kombinovat deriváty obecného vzorce I nebo jejich fyziologicky přijatelné soli nebo solváty s jinými účinnými látkami, např. protizánětlivými látkami, jako kortikosteroidy nebo NSAID.

Svrchu uvedená kombinace může být upravena na farmaceutický prostředek, který pak obsahuje sloučeninu podle vynálezu, další účinnou látku a farmaceuticky přijatelný nosič.

Jednotlivé složky uvedených kombinací je možno podávat současně nebo následně v kombinovaných farmaceutických prostředcích nebo odděleně. Příslušné dávky jednotlivých účinných látek budou odborníkům zřejmé.

Sloučeniny podle vynálezu je možno podávat v množství např. 0,01 až 500 mg/kg hmotnosti, s výhodou 0,01 až 100 mg/kg hmotnosti 1 až 4krát denně. Přesná dávka účinné látky bude záviset na věku a celkovém stavu nemocného a také na zvoleném způsobu podání.

Některé svrchu popsané meziprodukty jsou nové látky, které rovněž tvoří součást podstaty vynálezu.

Sloučeniny podle vynálezu mají tu výhodu, že jsou účinnější, selektivnější, vyvolávají menší počet vedlejších účinků, jejich účinek je prodloužený a sloučeniny jsou dobře biologicky dostupné při výhodných způsobech podání, mají menší systemickou účinnost při podání inhalací nebo mají větší počet žádoucích vlastností než známé látky, užívané ke stejnému účelu.

Sloučeniny podle vynálezu mají zvláště tu výhodu, že mají vyšší selektivitu pro podtyp 2a receptoru adenosinu ve srovnání s jinými podtypy těchto receptorů, zejména pro podtypy A1 a A3 ve srovnání se známými látkami.

Účinnost sloučenin podle vynálezu může být zkoušena in vitro i in vivo podle následujících zkoušek:

1. Agonistický účinek proti podtypům 2a, 1 a 3 receptorů adenosinu.

Selektivnost sloučenin podle vynálezu proti různým podtypům receptoru adenosinu byla stanovena na vaječníkových buňkách čínského křečka, CHO po transfekci genem pro příslušný lidský receptor adenosinu, podle postupu podle publikace Castanon a Spevak, 1994. Buňky CHO byly rovněž podrobeny transfekci cyklickými prvky AMP, podporujícími gen pro vylučování alkalické fosfatázy placentou, SPAP podle Wood, 1995. Účinek zkoumaných látek je možno stanovit jejich účinkem na základní koncentraci cAMP (A2a) nebo na koncentraci cAMP po podání forskolinu (A1 a A3), stanovení se provádí na základě změn SPAP. Tímto způsobem je možno stanovit hodnoty EC₅₀ pro jednotlivé látky jako poměr k účinnosti neselektivního agonisty, kterým je

N-ethylkarboxamidadenosín, NECA.

2. Nahromadění eosinofilů v plicích, vyvolané antigenem u sensitizovaných morčat.

Morčatům, senzitizovaným vaječným albuminem byl podán mepyramin v dávce 1 mg/kg ip pro jejich ochranu proti anafylaktickým křečím průdušek. Pak se podává sloučenina podle vynálezu inhalací po dobu 30 minut ve formě aerosolu, a to těsně před podáním ovalbuminu v průběhu 30 minut ve formě aerosolu, vytvořeného z roztoku ovalbuminu při koncentraci 50 mikrogramů/ml. Po 24 hodinách se morčata usmrtí a plíce se promyjí. Pak se stanoví celkový a diferenciální počet leukocytů v kapalině, vymyté z průdušek a z plicních sklípků a stanoví se dávka zkoumané látky, která vyvolá 50% snížení hromadění eosinofilů, ED₅₀ podle Sanjar a další 1992.

Praktické provedení vynálezu bude osvětleno následujícími příklady, které mají sloužit k ilustraci, avšak nikoliv k omezení rozsahu vynálezu. Dále budou uvedeny podrobnější údaje o svrchu zmíněných literárních citacích.

Literatura:

Asako H, Wolf, RE, Granger, DN (1993), Gastroenterology 104, pp 31-37; Burkey TH, Webster, RO, (1993), Biochem. Biophys Acta 1175, pp 312-318; Castanon MJ,'Spevak W, (1994), Biochem. Biophys Res. Commun. 198, pp 626-631;

Cronstein BN, Kramer SB, Weissmann G, Hirschhorn R, (1983), Trans. Assoc. Am. Physicians 96, pp 384-91;

Cronstein BN, Kramer SB, Rosenstein ED, Weissmann G, Hirschhorn R, (1985), Ann N.Y. Acad. Sci. 451, pp 291-301;

Cronstein BN, Natme D, Ostad E, (1993), J. Ciin. Invest. 92, pp 2675-82; Cronstein BN, Naime D, Ostad E, (1994), Adv. Exp. Med. Biol., 370, pp 411-6; Cronstein BN, (1994), J. Appl. Physiol. 76, pp 5-13;

Dianzani C, Brunelleschi S, Viano I, Fantozzi R, (1994), Eur. J. Pharmacol 263, pp 223-226;

Elliot KRF, Leonard EJ, (1989), FEBS Letters 254, pp 94-98;

Green PG, Basbaum Al, Helms C, Levine JD, (1991), Proč. Nati. Acad Sci. 88, pp 4162-4165;

Hirschom R, (1993), Pediatr. Res 33, pp S35-41;

Kohno Y; Xiao-duo J; Mawhorter SD; Koshiba M; Jacobson KA. (1996).BIood 88 p3569-3574.

Peachell PT, Lichtenstein LM, Schieimer RP, (1989), Biochem Pharmacol 38, pp 1717-1725;

Richter J, (1992), J. Leukocyte Biol. 51, pp 270-275;

Rosengren S, Bong GW, Firestein GS, (1995), J. Immunol. 154, pp 5444-5451; Sanjar S, McCabe PJ, Fattah D, Humbies AA, Pole SM, (1992), Am. Rev. Respir. Dis. 145, A40;

Skubitz KM, Wickman NW, Hammerschmidt DE, (1988), Blood 72, pp 29-33 Van Schaick EA; Jacobson KA; Kim HO; Ijzerman AP; Danhof M. (1996) Eur J Pharmacol 308 p311-314.

Wood KV. (1995) Curr Opinion Biotechnology 6 p50-58.

• ···♦ • ·	• 9 9 9	9 9 9	99 • 9	• ·
• · · ·	• 9	•	9 9
• ·	• 9 9	•	9 9 9
• ·	• 9	9	9 9
• · · · 9	• 9	9 9 9	• ·	9 ·

Ο-ϊ-^-1-S-Š-X______Z-Z-S-Š.l-S-S-H,

Me zip rodu k ty

Meziprodukt 1)

Příprava 3-ethy1-5-(6R-methoxy-2,2-dimethyl-tetrahydro-(3sR, 6aR)-furo-/3,4-d//1,3/-dioxol-4S)-isoxazolu

Ku směsi, připravené smícháním 0,271 g, («1,37 mmolu),

4R-e thiny 1-6 R-methoxy-2,2-dime thyl-tetrahydro-(3«R,6eR)-furo/3,4-d//1,3/-dioxolu, ( viz referát v odborném časopise Helv. Chim.Acta,63,1181 - 1 189,/1980/’, a 0,328 ml, ( 3,01 mmolu ), fenylisokyanátu, ve 1,50 ml, vysušeného toluenu, byla přidána po kapkách, v atmosféře dusíku, během 5,0 minut, směs, získaná smícháním 0,134 ml, ( 1,51 mmolu), 1-nitropropsnu, a 0,038 ml, ( 0,27 mmolu), triethylaminu, v 1,0 ml, vysušeného toluenu. Během této operace se pomalu vytvořila sraženina.

Výsledná reakční směs byla poté zahřívána po dobu 18,00 hodin v tepelném rozmezí od 73,0 až 82,0°C. Po ochlazení byls směs důkladného promytí s etherem, a poté se směsí 40%ního ethylacetát : cyklohexsn, bylo rozpouštědlo za vakua odstraněna.

Bylo získáno 0,487 g, světle hnědě zbarvené pevné látky, která byla poté zpracována urychlenou sloupcovpu chromatografií, za použití směsi nejprve 20%ní, poté 25%ní a nakonec se 30%ní směsí ethylacetát : cyklohexan, jako elučního činidla.

Bylo získáno 0,329 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě čiré látky, olejovité konzistence.

Chromátografie na tenké vrstvě (TLC), za použití směsi 4O%ního ethylacetátu : cyklohexánu* detekce- v tanku s jodovými parami.

• · • · 4

R_f * 0,49;

Meziprodukt 2)

Meziprodukt 2a)

Příprava 4R,5S-dÍ8cetoxy-2S-(3-ethyl-isox8zol-5-yl)~tetrahydro-fur8n-3R-yl-esteru kyseliny octové

Meziprodukt 2b)

Přípravě 4R,5R-diacetoxy-2S-(3-ethyl-isoxazol-5-yl)-tetrahydro-3R-yl-esteru kyseliny octové

Roztok, připravený rozpuštěním 0,355 g., ( 1,,32 mmolu ), Meziproduktu 1), t.j. 3-ethyl-5-(6R-methoxy-2,2-dimethyl-tetrahydro-(3aR,68R)-furo-/3,4-d//1,3/-dioxol-4S-yl)-isoxazoi; získaného,v rámci předcházejícího, výše popssného Meziproduktu 1), ve směsi 5,0 ml, kyseliny trifluoroctové, a 0,005 ml, vody, byl míchán při teplotě místnosti po dobu 27,0 hodin, a poté byl za vakua odpařen.

Vzniklý zbytek byl v atmosféře dusíku, po trojnásobném zpracování s toluenem, rozpuštěn v 10,0 ml, dichlormethanu, a ku získanému roztoku, vychlazenému na teplotu 0°C, bylo při dáno 0,048 g, ( 0,40 mmolu), 4-(Ν,Ν-dimethylaminopyridinu, dá le 8,30 ml, ( 60,00 mmolu), triethylaminu a nakonec 2,49 ml, ( 26,40 mmolu), acetanhydridu.

Vzniklá reakční směs byla míchána v rozmezí teplot od • · ··

0°C až po teplotu místnosti přes noc, a poté byla za vakua odpařena. Bylo získáno 1,34 g, zbytku ve formě hnědě zbarvené kapaliny, která byla dále zpracována urychlenou sloupcovou chromátografií, za postupného použití 20%ní, 30%ní a poté 40%ní směsi ethylacetátu v hexanu, jako elučního činidla.

Bylo získáno 0,192 g, žádaného, v nadpise uvedeného Mezoproduktu 2a), ve formě slabě hnědě zbarvené látky, olejovíté konzistence.

TLC,( směs 40%ního ethylacetátu v cyklohexanu, detekce za použití molybdenanu amonného jako reagens).

R_f = 0,28,o;

a

0,16 g, žádaného, v nadpise uvedeného Meziproduktu 2b), ve formě slěbě hnědě zbarvené látky, olejovité konzistence.

TLC,( směs 40%ního ethylacetátu v cyklohexanu, detekce za použití molybdenanu amonného, jako reagens ).

R_f = 0,22,0;

Meziprodukt 3)

Příprava 4R-a ce toxy-2R-(2,6-dichlor-purin-9-yl)-5S-(3-ethylisoxazol-5-yl)-tetrahydrofuran-3R-yl-esteru kyseliny octové

Ku směsi, připravené smícháním 0,909 g,( 2,67 mmolu), směsi Meziproduktu 2a), a fiteziproduktu 2b), získané v rámci předcházející, výše popsané přípravy Meziproduktu 2), ve

5,0 ml, acetonitrilu, bylo přidáno při teplotě 0°C,, v 8 tmoafeře dusíku, postupně 0,779 g, ( 4,00 mmolu), 2,6-dichlorpurinu, dále 0,692 ml, ( 4,53 mmolu), 1,8-dÍ8zebieyklo-/5.4.0/undec-7-enu, a 0,99 ml, ( 5,06 mmolu), trimethylsilyl-trifluorme thanaulfonátu ( triflátu), a vzniklá reakční směs byla poté míchána při teplotě místnosti, po dobu 20,0 hodin.

Poté byla směs smíchána se 30,0 ml, nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného, a po trojnásobné extrakci vždy se 40,0 ml, ethylacetátu, bylo získáno 3,54 g, hnědě zbarvené kapaliny, která byla přečištěna urychlenou sloupcovou chromátografií, za použití směsi nejprve 40%ního, a proté 50%ního ethylacetátu v cyklohexanu, jako elučního činidls.

Bylo získáno 0,798 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě krémově-bíle zbarvené látky, pěnovitého charakteru.

TLC, ( směs 60%ního ethylacetátu v cyklohexanu, detekce za použití molybdenanu amonného jako reagens, nebo detekce pod ultra fialovou lampou).

R_f = 0,25,o;

Meziprodukt 4)

Příprava methoxymethylamidu kyseliny (3aS,4S,6R,6aR)-6-/2chlor-6-( 2,2-difenyl-ethylamino)-purin-9~yl/-2,2-dimethyltetrahydro-furo-/3,4-d//1,3/-dioxol-4-karboxylové

Ku roztoku, připravenému rozpuštěním 6,015 g, ( 11,23 mmolu), kyseliny (3aS,4S,6R,6aR)-6-/2-chlor-6-(2,2-difenyle thylamino)-puron-9-y1/-2,2-dime thy1-te trehydro-furo-/3,4-d//1,3/-dioxol-4-karboxyloyé, (připravené dle Postupu 4), ·♦··

publikovaného v rámci Mezinárodní patentové přihlášky, číslo ^0/94/17090), ve 30,0 ml, vysušeného dihchlormethanu, bylo přidáno za stálého míchání, v atmosféře dusíku, 2,37 g,( 14,60 mmolu), karbonyl-diimidazolu? a vzniklá reakční směs byla míchána po dobu 1,0 hodiny.

Ku reakční směsi, připravené výše popsaným způsobem, byl přidán dichlormethanový roztok, ( 25,80 mmolu), N,O-dimethylhydroxylaminu, získaný alkalizací 10,0 ml, vodného roztoku 2,75 g, příslušného hyekr ©chloridu, a vychlazeného na teplotu 0°C, s vodným roztokem hydroxidu sodného, a následnou, trojnásobnou extrakcí vždy s 5,0 ml, dichlormethanu, a vysušením extraktu síranem sodným).

Tato směs byla poté, co byla smíchána při teplotě místnosti po dobu 60,0 hodin, smíchána se 40,0 ml, 10%ního vodného roztoku kyseliny citrónové, ( kyselina citrónová = kyselina 2-hydroxypropan-1,2,3-trikarboxylová )ζ ( hmoznost/objem), a po oddělení organické a vodné fáze byla organická vrstva promyta se 40,0 ml, 8%ního ( hmotnost/objem), vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného, a po vysušení se síranem sodným byla zfiltrována, a rozpouštědlo bylo z filtrátu zs vakua odstraněno.

Bylo získáno 6,66 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě krémově-bíle zbarvené látky, pěnovitého chsrakateru.

TLC,( 100% ethylacetát, detekce za použití ultrafialové lampy) R_f = o,5i;

Meziprodukt 5) • ···· ·· * ·· · ·· · · · ·· · · ·· ···· · · * · · *

I · . · · · · · · · • · · · · · · · «·· ··· ·· ··· ·· ···

Příprava 1- [6R-/2-ehlor-6-( 2,2-difenyl-ethylamino)-purin~9y 1/-2,2-dime thy1-tetrahydro-(3sS ₁6aR)-furo-/3,4-d//1,3/-di oxol 4S-ylJ -pent-2-yn-1-onu

Tetrahydrofuranový roztok chlořmegnesium-ethylacetylidu, byl připraven v atmosféře dusíku, v tepelném rozmezí od 0°C až po teplotu místnosti, za míchání směsi, získané smícháním cca 10,0 ml, ethylacetylenu, a 8,70 ml, ( 26,00 mmolu), 3M roztoku methylmagnesiumchloridu, v tetrahydrofuranu, přes noc·

Ku výsledné, šedě zbarvené reakční směsi rosolovitého charaketru, udržované v etmosfeře dusíku, a vychlazené na teplotu 0°C, byl přidán toztok, získaný rozpuštěním 5,012 g, (8,66 mmolu)J Meziproduktu 4), t,j. methoxymethylamid kyseliny ( 3aS,4S,6R,6aR)-6-/2-chlor-6-(2,2-difenyl-ethylamino)-purin9-yl/-2,2-dimethy1-tetrahydro-furo-/3,4-d//1,3/-dioxol-4-karboxylové, získaného v rámci výše popsané přípravy Meziproduktu 4), ve 40,0 ml, vysušeného tetrahydrofuranu.

Vzniklá reakční směs byla poté, co byls míchána při teplo tě 0°C, po dobu 4,0 hodin, smíchána s 50,0 ml, nasyceného vodného roztoku chloridu amonného, a poté byla 3x extrahována vždy s 50,0 ml, ethylacetátu. Po oddělení organické a vodné fáze,-byly ethylacetátové extrakty vysušeny se síranem hořečnatým, a poté byly za vakua odpařeny.

Bylo získáno 4,91 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě krémově-bíle zbarvené látky, pěnovitého charakteru·

TLC,( směs ethylacetát : cyklohexan, v poměru 7,0 : 3,OJ detekce pod ultrafialovou lampou).

R_f = 0,54,o;

999» • 9 9 9 • 9 · • · «99 999 *

9 ·

· ·· • 9 9

9 · 9

9«

9 · * ·

9 *·*

Meziprodukt 6)

Příprava 1- £6R-/2-chlor-6-( 2,2-difenyl-ethylsmino)-purin9-yl/-2,2-dimethy1-tetrahydro-(3eS,6sR)-furo-/3,4-d//1,3/-dioxol-4S-ylJ -penten-1,3-dion-3-oximu

Za stálého míchání, a při teplotě místnosti, bvl.ku roztoku, připravenému rozpuštěním 0,116 g, ( 0,203 mmolu), Meziproduktu 5), t.j. 1-£ 6R-/2-chlor-6-(2,2-difenyl-ethylemino)purin-9-yl/-2,2-dimethy1-tetrahydro-(3aS,6aR)-furo-/3,4-d//1,3/dioxol-4S~ylJ-pent-2-yn-1-on, získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného postupu přípravy Meziproduktu 5), přidán vodný roztok ,(0,019 ml,^ 0,304 mmolu), ( 50%ní, hmotnostní %, ve vodě), hydroxylaminu, a vzniklá reakční směs byla poté, co byla míchána po dobu 19,0 hodin, za vakua odpařena.

Vzniklý zbytek byl vytřepán mezi 5,0 ml, 0,1M roztoku kyseliny chlorovodíkové, a 10,0 ml, ethylacetátu, a po oddělení vodné a organické fáze, byla vodná vrstv8 2x extrahována,vždy s 5,0 ml, ethylacetátu. Spojené organcké ethylácetátové ectrakty byly vysušeny se síranem horečnatým, a poté byly za vakua odpařeny.

Bylo získáno 0,121 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě pevné látky, gumovité konzistence.

Kombin.systém kapalinové chromatografie a hmotnostní spektrometrie, System A : = LC/MS systém A :

R = 4,78 minutJ m/z : 605,0,( MH⁺ pro sloučeninu v oc sumárního vzorce C^H.^ ^ClNgO^)^

Meziprodukt 7) ·

• 000 • 0 0 • 000 • •0 0·· · • · 0 · • · • 0 0

000 ··

«

0

Přípr8V8 (2R,'3R, 4S, 5S)-2-/2-chlor-6-(2,2-difenyl-ethvlamino)purin-9-yl/-5-(3-ethyl-isoxazol-5-yl)-tetrahydro-furan-3, 4-diolu

Roztok, připravený rozpuštěním 0,12 g,( 0,1.99 mmolu), 1^6R-/2-chlor-6- (2,2-dif enyl-e thy lamino )-purin-9-yl/-2,,2-dimethy1-tetrahydro-(3eS,6aR)-furo-/3,4-d//1,3/-dioxol-4S-yl^-pentan-1,3-dion-3-oximu, t.j. Meziprodukt 6), získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného postupu přípravy Meziporoduktu 6), ve směsi 8,0 ml kyseliny octové a 1,0 ml, vody, byl zahříván při teplotě 100,Ó°C po dobu 4,50 hodiny.

Po ochlazení byla reakční směs za vakua odpařena, a byl získán zbytek, ve formě hnědě zbarvené látky, gumovité konzistence, který byl přečištěn pomocí urychlené sloupcové chromatograf ie, za použití směsi nejprve 50%ního , a poté 70%ního ethylacetátu v cyklohexanu, jako elučního činidla.

Bylo získáno 0,073 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě bezbarvé pevné látky, gumovité konzistence.

TLC, ( 100%ní ethylecetát, detekce pod svtělem ultrafialové lampy).

R_f = 0,43;

Meziprodukt 8)

Příprava 4R-ecetoxy-2R-/2-chlor-6- ( 1 -e thy 1-pr opy lamino.)-purin-9-yl/-5S-(3-ethy1-isoxazol-5-yl)-tetrahydrofuran-3R-ylesteru kyseliny octové

Směs, připravená smícháním 0,518 g, ( 1,10 mmolu), 4.Racetoxy-2R-(2,6-dichlor-purin-9-yl)-5S-(3-ethyl-isoxazol-5-yl)4etrahydrofuran-3R-yl-esteru kyseliny octové, t.j. Meziprodukt

3), získaného v rámci výše popsaného postupu přípravy Meziproduktu 3), dále 0,29 ml, diisopropylethylaminu,( 1,65 mmolu), a 0,14 ml, ( 1,21 mmolu), 1-ethylpropylaminu, byla míchána v isopropanolu, při teplotě 50,0°C, po dobu 21 hodin.

Poté bylo rozpouštědlo z reakční směsi za vakuaodstraněno, a bylo získáno 0,528 g žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě hnědě zbarvené látky, gumovité konzistence.

TLC,( oxid křemičitý, směs cyklohexan : ethylacetát,( 1 : 1)J R_f = 0,19;

Meziprodukt 9)

Příprava 2-chlor-N-( 1-ethylpropyl)-adenosinu

Směs, připravená smícháním 10,10 g, ( 22,60 mM), 2,6-dichlor-9-( 2,3,5-tri-0-acetyl-beta-D-ribofuranosyl)-9H-purinu;

( viz odborný časopis Canad.J.Chem.,59,(17),2608,/1981/, autoři M.J.Bobins, a B.Uznanski), dále 300,0 ml, isopropanoluj 5,0 g, uhličitanu draselného, a 2,17 g, ( 24,84 mM), 1-ethylpropy laminu, byla míchána při teplotě 20,0°C, po dobu 24,0 hodin Poté byla reakční směs zahřívána při teplotě 54ýO°C po dobu 73,0 hodin.

Poté, co bylo rozpouštědlo z reakční směsi za vakua odstraněno, bylo ku zbytku přidáno 50,0 ml, vody, a tato směs byla 3x extrahována, vždy s 80,0 ml, ethylečetátu. Spojené extrakty byly vysušeny se síranem hořečnatým, 8 bylo získáno 9,44 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě krémově, až slabě hnědě zbarvené látky, pánovitého charakteru.

LC/MS systém A:

R - 2,66 minutJ m/z : 372,0, ( MH⁺)J ····· ·· · ·· • · · · · · · ··· ···· · · · ··

·..· .:. ·..· .

Meziprodukt 10)

Příprava ^6R-/2-chlor-6-(1-ethy1-propylamino)-purin-9y1/-2,2dimethyl-tetrahydro-(38R,6eR)-furo-/3,4-d//1,3/-dioxolA-4R-yl^ methanolu

Směs, připravená smíchání® 9,300 g, ( 22,60 mulu), 2chlor-N-(1-ethylpropyl)-adenosinu; t.j. Meziprodukt 9), získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného postupu přípravy Meziproduktu 9), dále 35,0 ml, 2,2-dimethoxypropanu, a 8,100 g, kyseliny para-toluensulfonové, ve 250,θ ml, acetonu, byla míchána při teplotě 20,0°C, po dobu 22,0 hodin.

Poté, po odstranění rozpouštědla z reakční směsi za vakua, bylo ku zbytku přidáno 200,0 ml ethylacetátu, a tato směs byla 3x vytřepána vždy se 70,0 ml, nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Po oddělení vodné a organické fáze byly spojené organické extrakty extrahovány s 50,0 ml, ethylacetátu, a spojené organické extrakty byly vysušeny se síranem hořečnatým, a rozpouštědlo bylo za vakua odstraněno.

Přečištěním zbytku za použití urychlené sloupcové chromatografie, za použití oxidu křeničitého, a postupné eluce se směsí 50%ního, 6O%ního a nakonec 70%ního ethylacetátu v cyklohexanu, bylo získáno 5,67 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě bíle zbarvené látky, pěnovítéhocharakteru.

TLC, ( oxid křemičitý, směs 50%ního ethylacetátu v cyklohexanu)J

R_f = 0,17·,,

Meziprodukt 11)

Přípravs (3aS,4S,6R,6aR)-6-/2-chlor-6-(1-ethy1-propylamino)— purin-9-y1/-2,2-dime thyl-tetrahydro-furo-/3,4-d//1,3/-di oxol4-karboxylové kyseliny

Ku intenzivně míchanému roztoku, připravenému rozpuštěním 2,02 g, ( 4,90 mmolu), £6R-/2-chlor-6-( 1-ethy1-propylamino)-purin-9-y1/-2,2-dime thyl-te trahydro-(3aR,6aR)-furo-/3,4-d/ /1,3/-dioxol-4R-ylJ -methanolu, t.j. Meziprodukt 10), získaného postuppm, popsaným výše v rámci přípravy zmíněného meziproduktu, ve směsi 76,0 ml, ethylacetátu, a 51,0 ml, nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného, a vychlazené předem v průběhu 30,0 minut ne teplotu 0°C, a obsahujícího 0,059 g bromidu draselného, a 0,004 £72,2,6,6-tetraměthyl—1—piperidinyl oxy-volného radikálu,(TEMPO), bylo přidáno postupně, po kapkách a během 10,0 minut,o, 156 g, pevného hydrogenuhličitanu sodného, dále 2,70 ml, vodného roztoku chlornanu sodného, ( obsahujícího 13% aktivního chloru), a cca 0,50 ml, vody.

Po uplynutí 30,0 minut, a 2,0 hodin, byla ku reakční směsi přidána stejná množství výše zmíněných re.agens, t.j. bromid draselný, volný radikál 2,2,6,6-tetramethyl-1-piperidinyloxy, hydrogenuhličitan sodný, a chlornan sodný ve vodě.

Poté byla reakční směs nalita do směsi, připravené smícháním 100,0 ml, vody, a 50,0. ml., ethylacetátu, a obsahující 10,0 g, síranu sodného. Vodná, alkalicky reagující vrstva byla po ochlazení ns teplotu 0°C, a po okyselení na pH 2,0, extrahována 2x vždy se 100,0 ml, ethylacetátu. Po oddělení organické a vodné fáze byly spojené extrakty vysušeny se síranem hořečnatým. Původní organická vrstva byls oddělena a 2x promyta vždy se 100,0 ml, vody.

Získaný vodný promývací roztok byl okyselen na pH 3,0, a poté byl 2x extrahován vždy s 50,0 ml, ethylacetátu.Spojené ethylácetátové extrakty byly vysušeny se síranem hořečnatým, a poté byly za vakua odpařeny.

Bylo získáno 1,309 g, v nadpise uvedené, žádané sloučeniny, ve formě bíle zbarvené látky pěnovitého charakteru.

LC/MS systém B:

- 3,25 minutJ m/z = 426,0 MH⁺*

Meziprodukt 12)

Příprava. methoxymethyl-amidu kyseliny (3aS,4S,6R,6aR)-6-/2chlor-6-( 1-ethy1-propylamino)-purin-9-yl/-2,2-dimethy1-tetrati,ydro-f uro/3,4-d//1,3/-dioxol-4-karboxylové

Ku roztoku, připravenému za stálého míchání rozpuštěním 0,700 g, ( 1,65 mmolu), (3eS,4S,6R,6aR)-6-/2-chlor-6-(1-ethylpropylamino)-purin-9-yl/-2,2-dimethyl-tetrahydro-furo-/3,4/ /1,3/-dioxol-4-karboxylové, t.j. Meziprodukt 11), získaného, v rámci předcházejícího, výše popsaného postupu, ve 10,0 ml, dichlormethanu, bylo přidáno v atmosféře dusíku, při teplotě 20,0°C, 0,348 g, ( 2,15 mmolu), karbonyldiimidazolu.

Po uplynuti 2,0 hodin, byl po trojnásobné extrakci, vždy s 1,50 ml, dichlormethanu , vodného : roztoku příslušného hydochloridu, zalkalizovaného vodným 2N roztokem hydroxidu sodného, a po vysušení extraktu síranem sodným, ku kterému bylo přidáno 4,50 ml, dichlormethanu + 0,50 ml rozpouštědla pro vypláchnutí , získán Ν,Ο-dimethylhydroxylamin.

Poté, co byla reakční směs míchána při teplotě 20,0°C po dobu 3 dnů, byle naředěna se 40,0 ml, dichlormethanu, a poté postupně promyta se 40,0 ml, kyseliny citrónové ~ kyselina 2hydroxypropan-1,2,3-trikarboxylová, ( 1Ο%ηί, hmotnost/objem), a poté se 40,0 ml, nasyceného vodného roztoku hydrogenuhlifiitanu spdného, a po vysušení se síranem hořečnatým, bylo rozpouštědlo za vakua odstraněno.

Bylo získáno 0,624 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě bíle znarvené látky, pěnovitého charakteru.

TLC,( oxid křemičitý, samotný ethylacetát,detekce pod světlem ultrafioalové lampy):

R_f = 0,40;

Me ziprodukt 13) — £6R,-/2-chlor-6-( ethyl-propyl8mino)-purin-9-yl/-2>2-dimethyl-tetrahydro-(3aS,6aR)-furo-/3,4-d//1,3/-dioxol-4S-ylJ pent-2-yn-1-onu

Ku přebytku ( cca 3,0 ml), ethylacetylénu, nekondenzovaného v reakční baňce, do které byl v atmosféře dusíku, a při teplotě minus 78y.0°C předložen 1,0 ml, tetrahydrof uranu, bylo přidáno 1,90 ml, ( 5,69 mmolu), třímolárního roztoku methy1megnesiumchloridu v tetrahydrofuranu, a vzniklá reakční směs byla po vytemperování na teplotu 0°C míchána po dobu 6,0 hodin

Poté bylo ku reakční směsi přidáno při teplotě 0°C přívod nou trubičkou 0,533 g, ,(..1,14 mmolu), methoxy.methyl-amidu .kyše liny .(3aS,4S,6R,6aR)-6-/2-ehlor-5-(1-ethy1-propylamino)-purin-9-y1/-2,2-dime thyl-te trahydro-furo-/3,4-d//1,3/-dioxol-4ksrboxylové , t.j, Meziprodukt 12), získený v rámci předcházejícího, výše popsaného postupu přípravy Meziproduktu 12), ve 6,0 ml, vysušeného tetrahydrofurenu.

Po uplynutí 1,0 hodiny, byl ku reakšní směsi přidán při teplotě 0°C, nasycený vodný roztok chloridu amonného, (10,0 ml), a tato směs byla 3x extrahována vždy s 10,0 ml, ethylacetátu.Po oddělení vodné 8 organické fáze, byly ethylacetátové extrakty vysušeny se síranem hořečnatým, a rozpouštědlo bylo za vakua odstraněno.

Bylo získáno 0,577 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě slabě hnědě zbarvené látky, gumovité konzistence.

···· • · ·

5Ό

TLC, ( oxid křemičitý, směs 50%ního ethylacetátu v cyklohexenu, detekce se světlem ultrafialové lampy)

R_f = 0,33;

Meziprodukt 14)

Příprava (2R,3R,4S,5S)-2-/2-chlor-6~(1-ethy1-propylamino)-purin 9-y1/-5-( 3-ethyl-isoxazol-5-yl)-tetrahydro-furan-3,4-diolu

Směs, připravená smícháním 0,577 g, ( 1,25 mmolu), 16R,-/2-chlor-6-( ethyl-propylamino)-purin-9-yl/-2,2-dimethyltetrahydro-(3aS,6aR)-furo-/3,4-d//1,3/-dioxol-4S-ylJ -pent-2-yn 1-onu, t.j. Meziprodukt 13), získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného postupu, a hydroxylaminu, ( 50%ní ( hmotnostní poměry), roztok ve vodě, 0,13 ml, 1,88 mmolu), ve 3,0 ml, ethanolu, byla míchána při teplotě 20,Ó°C, po dobu 6,0 hodin»

Poté, co byla vzniklá reakční směs ponecháne stát v klidu při teplotě 20,tí°C, po dobu 3,0 dnů, bylo rozpouštědlo za vakua, odstraněno, a.bylo nahraženo se 24,0 ml, kyseliny octové, a se 3,0 ml, vody, a reakční směs byle poté zahřívána za refluxu pod zpětným chladičem, po dobu 2,0 hodin, a poté ještě při teplotě 100,0°C, po dobu 3,0 hodin.

Po ochlazení byla reakční směs odpařens do sucha, a následně byla 2x azeotropicky zpracována s toluenem. Přečištěním zbytku, za použití urychlené sloupcové chromátografie, a směsi 50%ního, 60%ního a nakonec 70%ního ethylacetátu v cyklohexanu, jako elučního činidla, bylo získáno 0,435 g_t žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě slabě hnědě zbarvené látky, gumovité konzistence.

TLC, ( oxid křemičitý, ssmotný ethylacetát, detekce pod světlem ultrafialové lampy):

0,44;

· ·

M e ziprodukty 15a) a 15b)

Meziprodukt 15a)

Příprava 2S,4R,- diacetoxy-5R-ethinyl-tetrahydro-furen-3R-yl esteru kyseliny octové, a

Meziprodukt 15b)

Příprava 2R,4R-diacetoxy-5R-ethinyl-tetr8hydro-furan-3R-ylesteru kyseliny octové

Ve směsi, připravené smícháním 0,20 ml, vody, a 1,80 ml, kyseliny trifluoroctové bylo mícháno při teplotě místnosti, po dobu 1,0 hodiny, 0,104 g, ( 0,53 mmolu), 4R-ethinyl-6R-methoxy2,2-dimethy1-tetrahydro-(3aR,6aR)-furo-/3,4-d//1,3/-dioxolu, ( viz také odborný časopis Helv.Chim.Acta, 63,1181 -1189,/1980/)

Poté, co byly z reakční směsi odstraněny těkavé složky, (za vakua), byl získaný zbytek míchán při teplotě místnostise směsí 0,50 ml, ( 5,25 mmolu),acetanhydridu,. 1,6.5 ml, (11,80 mmolu), triethylaminu, a 0,019 g, ( 0,16 mmolu), 4-dimethylaminopyridinu, v 5,0 ml, vysušeného dichlormethanu, po dobu 19,50 hodiny»

Poté, co byla směs za vakus vysušena, byla 2x azeotropicky zpracována s toluenem, a výsledný, temně hnědě zbarvený zbytek byl chromatografován ne sloupci s oxidem křemičitým, za použití nejprve směsí 20%ního, a poté 30%ního ethylacetátu v cyklohexanu, a bylo získáno 0,039 g, žádaného, v nadpise uvedeného Meziproduktu.· 15a), ve formě bezbarvé látky, gumovité konzistence.

TLC, ( 50%ní směs ethylacetátu v cyklohexenu, detekce za použití molybdenanu amonného v rozitoku,).

• ··· · ··

9 999

9999 9 9

R_f = O,43J dále bylo získáno 0,038 g, Meziproduktu 15b), ve formě bezbarvé látky, gumovité konzistence, která při stání při teplo tě místnosti tuhla do formy jehliček voskovitého charakteru.

TLC,( 50%ní směs ethylacetátu v cyklohexanu, detekce s molybdenanem amonným v roztoku )·

R_f » 0,36;

Meziprodukt 16)

Příprava 4R-acetoxy-2R-(2,6-dichlor-purin-9-yl)-5R-ethinyl-tetrahydro-furan-3R-yl-esteru kyseliny octové

Ku směsi, připravené v atmosféře dusíku smícháním 0,098 g, (0,36 mmolu), směsi Meziproduktů 15a), a 15b), připravené v rámci předcházejícího, výše popsaného postupu, dále 0,106 g, (.0,55 mmolu), 2,6-dichlorpurinu, 8 0,094 ml, (0,62 mmolu),

1,8-diazabicyklo-/5.4.0/-undec-7-enu, v 0,70 ml, acetonitrilu, a vychlazené na teplotu 0°C, bylo přidáno po kapkách 0,135 ml, ( 0,69 mmolu), trimethylsilyl-trifluormethansulfonátu, 8 vzniklá reakční směs byla po vytemperování na teplotu místnosti míchána po dobu 18,50 hodiny.

Poté byle reakční směs smíchána s 5,0 ml, nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného, a následně byla extrahována 3x vždy s 5,0 ml, ethylacetátu.Po oddělení vodné a organické fáze byly ethylácetátové extrakty vysušeny se síranem hořečnatým, a odpařeny.

· 99 9

Výsledný, hnědě zbarvený zbytek, byl zpracován urychlenou sloupcovou chromátografií, za použití oxidu křemičitého, a směsi 5O%ního ethylacetátu v cykloxanu, jako elučního činidla.

Bylo získáno 0,096 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě bíle zbarvené, pevné látky.

TLC, ( 50%ní směs ethylacetátu v cyklohexanu, detekce za použití roztoku molybdenanu amonného)

R_f = 0,25;

Meziprodukt 17)

Příprava 4R-acetoxy-2R-/2-chlor-6-( 1-ethyl-propylamino)-purin 9-yl/-5R-ethinyl-tetrahydro-furan-3R-yl-esteru kyseliny octové

Směs, připravená smícháním 1,111 g, ( 2,78 mmolu), 4R-a.ce toxy-2R-(2,6-dichlor-purin-9-yl)-5R-ethinyl-tetrahydro-furan3R-yl-esteru kyseliny octové, t.j. Meziprodukt 16), získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného postupu.přípravy, a dále 0,34 ml, ( 2,92 mmolu), 1-ethylpropylaminu, a 0,534 ml, ( 3,06 mmolu), di-isopropylethylaminu, v 10,0 ml, N,N-dimethyl formamidu, byla zahřívána při teplotě - 50,0°C po dobu 17,50 hodiny.

Poté byla většina N,N-dimethylformsmidu z reakční směsi na rotační odparce za vakua odstraněna, a výsledný zbytek byl neředěn se 30,0 ml, nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Tato směs byla.poté extrahována nejprve s 50,0 ml, a poté 2x vždy s 25,0 ml, ethylacetátu, a byla získána hnědě zbarvená látka, pěnovitého charaketru, ( 1,249 g. ), která byla přečištěna za použití systému Variam Mega Bonded -ířlut, a patron, obsahujích 10 g, oxidu křemičitého, ( objem φ φφφφ φφ · φφ φ φφ · φ φ φφ φ φ φφ φ φ φφ φ φ · φ φ φ • φ φ φ φ φ φ φφ φφφ φφ φφφ ty ml), θ směsi 50%ního ethylacetátu v eyklohexanu, jako elučního činidla.

fíylo získáno 1,135 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě slabě hnědě zbarvené látky, pěnovitého charakteru.

TLC,( 50%ní směs ethylacetátu v eyklohexanu, detekce ζβ použi( tí ultrafialového světla )_T

R_f = 0,29;

Meziprodukt 18)

Příprava 4-acetoxy-5S-(3~brom-isoxazol-5-yl)-2R-/2-chlor-6( 1-ethy1-propylamino)-purin-9-yl/-tetrahydro-furan-3R-yl esteru kyseliny octové

Směs, připravená smícháním 0,035 g, (0,17 mmolu), dibromformaldoximu, 8 0,052 g, ( 0,12 mmolu), 4R-acetoxy-2R-/2-chlor6-( 1-ethy1-propylamino)-purin-9-yl/-5R-ethinyl-tetrahydro-furan-3R-yl esteru kyseliny octové, t.j. Meziprodukt 17), získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného postupu přípravy, ve 4,0 ml, ethylacetátu, a 0,20 ml, vody, byla intenzivně míchána za přítomnosti 0,11 g, ( 1,26 mmolu), pevného hydrogenuhličitanu sodného, při teplotě místnosti, po dobu 89,0.hodin.

Poté bylo ku reakční směsi přidánodalších 0,035 g, ( 0,17 mmolu), dibromformaldoximu, dále 0,1 Kg, (1,26 mmolu), pevné formy hydrogenuhličitanu sodného, a 0,20 ml, vody, a po uplynutí, dalších 21,0 hodin, byla reakční směs neředěna s 5,0 ml, vody, a poté byla 3x extrahována vždy s 5,0 ml, ethylacetátu.

Po oddělení vodné a organické fáze, byly organické extrakty za vakua odpařeny, a získaný surový produkt byl rozpuštěn ve 2,0 ml, toluenu. !

• 9 99 9 Μ 9 99 · •99 9 9 99 9999

9999 99 9 99 9

999 9 99 9 9 9

9999 999 tdané, v nadpise uvedené sloučeniny, rvené látky, gumovité konzistence.

Získaný roztok byl nanesen na zařízení Verian Mega Bond Elut, ( patrona o objemu 20,0 ml, 5,0 g. oxidu křemičitého) a eluován postupně se 30%ní, 40%ní, 50%ní, 60%ní, a poté 70%ní směsí ethylacetátu v cyklohexánu.

Frakce, obsahující produkt, byly spojeny, a odpařeny. Bylo získáno 0,043 g, žá ve formě slěbě h&ědě zba

LC/MS Systém B:

R = 3,66 minut, m/z

571,0 MH pro sloučeninu sussár79 35 ního νζοΓ:σβ_-0₂.·|.Κ> · Br^JOg *,

19)

Meziprodukt

Příprava 4R-acetoxy-5S-(3-acetyl-isoxazol-5-yl)-2R-/2-chlor6~( 1-.ethyl-propylamino)-purin-9-yl)-tetrahydro-furan-3R-ylesteru kyseliny octové

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci předcházející přípravy Meziproduktu 18), byl připraven v nadpise uvedený Meziprodukt 19), ζθ použití 0,021 g, ( 0,17 mmolu), N-hydro_Xy-.2-oxo-propionimidoýi.chloridu, a dalšího množství reagens, přidaných po 89,0 hodinách, t.j. Q,O21 g, ( 0,1? mmolu), Nhydroxy-2-oxo-propionimidoylchloridu,. dále 0,11 g, ( 1,26 mmolu), pevné formy hydrogenuhličitanu sodného, a 0,20 ml, vody, a po 180,0 hodinách ještě 0,075 g, ( 0,62 mmolu), N-hydroxy2-oxo-propionimidoylchloridu, a 0,16 g, ( 1,26 mmolu), pevné formy hydrogenuhličitanu sodného.

Po uplynutí dalších 24,0 hodin při teplotě místnosti,.bylo izolováno 0,043 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě hnědě zbarvené látky, gumovité konzistence.

9999 • 99 «

9 99

9 9 • 99 «

£G

9 9

999

9 9

9 99 9

LC/MS System B;

R^ = 3,51 minut, m/z

535,0 MH pro sloučeninu Sumárního vzorce ^C23^H27 ^C1W

Meziprodukt 20)

Příprava 4R-a ce toxy-2R-/2-chlor-6-( 1-ethvl-propylamino)-purin9-yl/-5S-( 3-methyl-isoxazol-5-yl)-tetrahydro-furan-3R-yl-esteru kyseliny octová

Ku roztoku, připravenému rozpuštěním 0,10 g,( 0,22 mmolu), 4R-aee toxy-2R-/2-chlor-6-( 1-e thy1-propylamino)-purin-9-yl/-5Rethinyl-tetrahydro-furan-3R-yl.esteru kyseliny octové, t.j. Meziprodukt 17), získaného v rámci výše popsaného postupu přípravy Meziproduktu 17), dále 0,031 ml, ( 0,22 mmolu), triethylaminu, 8 0,063 ml,( 0,58 mmolu), fenylisokyanátu, ve 1,0 ml, vys toluenu, v atmosféře dusíku, byl přidán za stálého míchání roztok, získaný rozpuštěním 0,021 ml, ( 0,29 mmolu), nitroethanu, v 1,0 ml, vysušeného toluenu , a vzniklá reakční směs byla zahřívána při teplotě 80,0°C, po dobu 21,0 hodin.

Po ochlazení, byla reakční směs nanesena na zařízení Varian Mega Bond elut, ( za použití patron o objemu 20,0 ml, náplň 5,0 g. oxidu křemičitého), a 30%ní až 60%ní směsi ethylacetátu v cyklohexánu, jako elučního činidla.

Frakce, obsahující produkt byly spojeny, a za vakua byly odpařeny. Výsledný materiál byl rozpuštěn ve 2,0 ml, toluenu, a získaný roztok byl po zfiltrování přes chomáč vaty přímo nanesen na další zařízeni Varian Mega Bond Elut, ze použití patrony o objemu 20,0 ml, a nápžně 5,0 g, oxidu křemičitého, a eluce se 200,0 ml, 20%ní směsi ethylacetátu v cyklohexenu, a poté se 100,0 ml, 30%ní směsi ethylacetátu v cyklohexánu, 8 >

s?

nakonec vždy s 50,0 ml, 40%ní, 50%ní a 60%ní směsi ethylacetátu v icyklohexanu, jako elučního činidla.

Bylo získáno 0,099 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny ve formě krémově-bíle zbarvené látky, pěnovitého charakteru.

LC/MS System B:

R ^s minutj m/z = 507,0, MH⁺ pro sloučeninu sumárního vzorce ^C22^27^^^^^N6^6*

Meziprodukt 21)

Příprava 4R.acetoxy-2R-/2-chlor-6-( 1-ethyl-propylamino)-purin-9-yl/-5S-(3-propyl-isoxazol-5-yl)-tetrahydro-fursn-3R-yl esteru kyseliny octové

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci předcházející přípravy Meziproduktu 20), byla připravena žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, za použití 0,031 ml, ( 0,29 mmolu), nitrobutanu.Po uplynutí 21,0 hodin byla přidána směs, získaná smícháním více fenylisokyanátu, ( 0,063 mlj 0,58 mmolu), a 0,031 ml, ( 0,29 mmolu), nitrobutanu ve 0,50 ml, vysušeného toluenu.

Pg uplynutí dalších 23,0 hodin, kdy byla reakční směs za hřívána při teplotě 80,0°C, bvlo izolováno 0,093 g, žádsné, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě krémově-bíle zbarvené látky, pěnovitého charakteru)

LC/MS System B:

R 5= 3,68 minuty m/z - 535,0 MH⁺ pro sloučeninu sux 35 márního vzorce ClN^Ogí · ·· « • 9·· · · · « • 9 9 9 9 « • 9 · · « · « • 9··« ··· ··· ··· 99 ··« ·« ···

Meziprodukt 22)

Příprava 4R-ace toxy-2R-/2-chlor-6-( 1-e thy1-propylamino)-purin-9-yl/-5S-/4-( tetr8hydro-pyr8n-2-yl-oxymethyl)-isoxazol5-yl/-tetrahydro-furan-3R-yl esteru kyseliny octové

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci přípravy Meziproduktu 20), byla připravena žádaná, v nadpise uvedená slou čenina, zs použití 0,045 ml, ( 0,29 mmolu), 2-(2-nitroethoxy)tetrahydropyránu. Poté bylo přidáno další množství reagens, t.j. 0,063 ml, ( 0,58 mmolu), fenylisokyanátu, a 0,045 ml, ( 0,29 mmolu), 2-( 2-nitroethoxy)-tetrahydropyranu, v 0,50 ml vysušeného toluenu během 21,0 hodin. Po uplynutí dalších 120,0 hodin, kdy byla reakční směs zahřívána při teplotě 80,0°C, bylo izolováno 0,113 g, žádaného produktu, ve foemě slabě hnědě zbarvené látky, pěnovitého charakteru.

LC/MS System B:

-h

R ~ 3,64 minut; m/z = 607,0 MH pro sloučeninu sumárního vzorce ^27^35^^^^6 θ6*

Meziprodukt 23)

Příprava (2R,3R,4S,5S)-2-/2-chlor-6-( 1-ethy1-propylamino)-purin-9-y 1/-5-/3- (1 -hydroxy-e thyl-')«isoxažol-5-yl/-te trahydrofuran-3,4-diolu

Ku roztoku, připravenému rozpuštěním 42,0 mg,. ( 0,08 mmolu) , 4R-acetoxy-5S-(3-acetyl-isoxazol-5-yl)-2R-/2-chlor-6-(1ethyl-propylamino)-purin-9-yl/-tetrahydro-furan-3R-yl-esteru • ···· ·· « ·· « • ♦ · · ·· · · ·« • · ·· ·· « ·· _β kyseliny octové,, t.j. Meziproduktu 19), v 1,0 ml, methanolu, bylo přidáno v atmosféře dusíku, za stálého míchání, a při teplotě 0°C, 12,0 mg( 0,31 mmolu), tatrahydroboritanu sodného. Po uplynutí 4,0 hodin, byla reakční ,směs odpařena, a bylo získáno 0,057 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě slabě hnědě zbarvené, pevné látky,(v poměru izomerů 2:1).

LC/MS System A:

R. = 4,12, a 4,23 minut, v poměru 2 : 1J m/z - 453,0

M pro sloučeninu sumárního vzorce o,₉h₂₅ ^35cin₆o₅;

Meziprodukt 24)

Příprava (2R,3R,4S,5S)-2-/2-chlor-6-(1-ethy1-propylamino)-purin-9-y1/-5-(3-hydroxyme thyl)-isoxazol-5-yl)-te trahydro-fursn3,4-diol-trifluoracetátu

Směs, připravená smícháním 0,061 g, ( 0,10 mmolu), 4Racetoxy-2R-/2-chlor-6-( 1-e thy 1-pr opy lamino /)-purin-9-yl/-5S/3-tetrahydro-pyran-2-yl-pxymethyl)-isoxszol-5-yl-tetrahydrofuran-3R-yl esteru kyseliny octové, t.j. Meziproduktu 22), získaného v rámci výše popsané'přípravy, a 0,01 ml, 25%ního roztoku ( hmotnostní $), methoxidu sodného, ve 2,0 ml, methanolu, byla míchána při teplotě místnosti po dobu 19,0 hodin.

Poté bylo ku reakční směsi přidáno 0,10 ml, kyseliny octové, a směs byla za vakua odpařena. Výsledný zbytek bvl rozpuštěn ve směsí, získané smícháním 0,90 ml, tetrahydrofuranu, a 0,10 ml, vody, a tato směs byla míchána při teplotě 0°C po dobu 6,0 hodin.

Po odstranění těkavých složek bylo získáno P,10 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny,, ve formě hnědě zbarevého zbytku.

LC/MS System A :

R. - 4,05 minutJ m/z = 439,0 MH , pro sloučeninu sumárního vzorce ^C18^23^{J C}^6°5*

Meziprodukt 24) ( Alternativní příprava )

Příprava (2R,3R,4S,5S)-2-/2-chlor~6-(1-ethyl-propylamino)-purin-9-yl/-5-(3-hydroxymethyl-isoxazol-5-yl)-tetrahydro-furan3,4-diolu, trifluoracetátu

Ku roztoku, připravenému rozpuštěním 0,104 g, ( 0,20 mmolu) , 4R-acetoxy*5S-(3«8cetoxymethyl)-isox8zol-5-yl)-2R-/2-chlor

6-( 1-e thy1-propylamino)-purin-9-y1/-te trahydro-furan-3R-ylesteru kyseliny octové, t.j. Meziproduktu 34), získaného-v rámci dále popsaného postupu přípravy, bylo přidáno 0,10.ml, 25%ní ho roztoku methoxidu sodného v methanolu, a tato reakční směs byla míchána po dobu 30,0 minut.

Poté, po přidání 0,10 ml, kyseliny octové, byla směs odpařena do sucha, a vzniklý zbytek bvl smíchán s 1,80 ml, kyseliny trifluoroctové, a 0,20 ml, vody,.a tato směs byla míchána při teplotě 0°C, po dobu 2,0 hodin, a poté byla odpařena do sucha.

Bylo získáno 0,082 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny ye formě hnědě zberevené, pevné látky.

LC/MS System G' :

R_t - 2,83 minut; m/z = 439,0 MH⁺;

Meziprodukt 25)

Příprsva (2R,3R,4S,5S)-2-/2-chlor-6-(3-jod-benzylamino)-purin9-yl/-5-(3-ethyl-isoxazol-5-yl)-tetrahydro-furan-3,4-dioluacetátu

Směs, připravená smícháním 0,032 g, ( 0,12 mmolu), m-jodbenzylaminu.hydrochloridu, dále 0,046 ml, diisopropylethylamini nu, a 0,050 g, (0,11 mmolu), 4R-acetoxy-2R-(2,6-dichlor-purin9-yl) -5S-(3-ethyl-isoxa zol-5-yl)-te trahydro-furan-3R-y1-es teru kyseliny octové, t.j. Meziproduktu 3), získaného .postupem, popsaným v rámci přípravy výše, ve 2,0 ml, isopropanolu, byle zahřívána při teplotě 50,0°C, po dobu 24,0 hodin.

Po dalším přidání 0,032 g, ( 0,12 mmolu), m-jodbenzylaminu, a 0,22 ml, diisopropylethylaminu,byla tato-reakční směs zahřívána při teplotě 50,0°C po dobu 8,0 hodin. Poté bylo rozpouštědlo ze směsi za vakua odstraněno, a zbytek byl rozpuštěn ve 2,0 ml, bezvodého methanolu, a za stálého míchání, byl získaný roztok smíchán během 1,0 hodiny, při teplotě 20,0°C, se 0,25 ml, 25%ního ( hmotnostní %), roztoku methoxidu sodného v methanolu.^ Po přidání 1,0 ml, kyseliny octové bylo rozpouštědlo ze směsi za vakua odstraněno, a zbytek byl přečištěn urychlenou sloupcovou chromátografií, za použití oxidu křeničitého, a směsi 50%ního cyklohexanu v ethylacetátu, jako elučního činidla.

Byla získána žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, ve formě bíle zbarvené pevné látky,( 0,035 g), po předcházejícím mechenickéψ zpracování, a vyjmutí s methanolem.

a

TLC, ( oxid křemičitý, směs 50%ního ethylacetátu v cyklohexanu):

R_f = 0,17-,

9 9 999 • 9 9 ·

9 9 · 9

9 9 9

999 99 999

Meziprodukt 26)

Příprava (2R,3R,4S,5S)-2-/2-chlor-6-(1S-hydroxymethyl-2-fenyl ethylamino)-purin-9-yl/-5-(3-ethyl-isox8zol-5-yl)-tetrahydrofuran-3,4-diol-acetátu

Směs, připravená smícháním 0,053 g, ( 0,152 g),3^(S)-(-)2-amino-3-fenylpropanolu, déle 0,067 ml,. (0,39 mmolu), diisopropylethylaminu, e O,152.g, ( 0,32 mmolu), 4R-acetoxy-2R-(2,6dichlor-purin-9-yl)-5S-(3-ethyl-isoxazol-5-yl)-tetrahydro-furan3R-yl-esteru kyseliny octové, t.j. Meziproduktu 3), získaného postupem popsaným v rámci přípravy výše, ve 2,0 ml, isopropanolu, byla zahřívána při teplotě 50,0°C po dobu 17,0 hodin.

Poté, co bylo rozpouštědlo z reakční směs za vakua odstraněno, byl zbytek rozpuštěn ve 2,0 ml, bezvodého methanolu, a za stálého míchání, byl získaný roztok smíchán během 1,0 hodiny, při teplotě 20,0°C, se 0,25 ml, 25%ního roztoku( hmotnostní %), methoxidu sodného v methanolu.

Poté bylo ku směsi přidáno 0,50 ml, kyseliny octové, a rozpouštědlo byla za vakua odstraněno. Zbytek byl přečištěn urychlenou sloupcovou chromátografií, za použití oxidu křeničitého, a ethylacetátu, jako elučního činidla.

Bylo získáno 0,112 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě křehké, bíle zbarvené látky, pěnovitého charakteru.

TLC, ( samotný ethylacetát, oxid křemičitý ):

R_f = 0,26;

• · · ·· • · · · · · · · · · ···· · · · 9 9

Meziprodukt 27)

Příprava 2-( pyridin-2-yl-emino)-ethylaminu

Ku 76,0 g, ( 126,6 mmolu ), 1,2-diaminoethanu, bylo přidá no po kapkách, za stálého míchání, a v atmosféře dusíku 10,0 g ( 63,30 mmolu), 2-brompyridinu, a vzniklá reakční směs byla poté mícháne nejprve při teplotě 20,0°C, po dobu 4,0 hodin, a poté ještě byla zahřívána za refluxu pod zpětným chladičem po dobu 24,0 hodin.

Po následném zahuštění reakční směs za vakua, byl zbytek přečištěn urychlenou sloupcovou chromátografií, za použití oxidu křemičitého, a směsi dichlormethan : ethanol : amoniak, ( 30 : 8 : 1,0), jako elučního činidla, y bylo získáno 1,23 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě červěně zbarvené látky, olejovité konzistence.

TLC,( oxid křemičitý, směs dichlormethan : ethanol : amoniak, ( v poměru 30 : 8 : 1,0):

R_f = 0,14;

Hmotnostní spektrometrie: m/z, 138,0,( MH pro sloučeninu sumárního vzorce );

Meziprodukt 28)

Příprava (2R,3R,4S,5R)-2-£6- ( 1-ethy1-propylamino )-2-/2-( 1· me thyl-1H-imida zol-4-y1)-e thylamino/-purin-9-y1J -5-e thinylte trahydro-furan-3,4-diolu

Směs, připravená smícháním 0,45 g, ( 1,00 mmolu),4R?-acetoxy-2R-/2-chlor-6-( 1-ethyl-propylamino)-purin-9-ylA5E-ethinyltetrahydro-furan-3R-yl- esteru kyseliny octové, t. j..Meziproduktu 17'),(získaného v rámci přípravy, popsané výše),a 6,97 mmolu 1-methylhistaminu, získaného ze 1,38 g, příslušného dihydrochloridu, neutralizací se 0,48 g, pevného hydroxidu sodného v 5,0 ml, methanolu, a následnou.filtrací, s odpařením za vakua) , a 1,0 ml, di-isopropylethyleminu, ve 3,0 ml, vysušeného dimethylsulfoxidu , byla zahřívána v reakční baňce s kulatým dnem, v 8tmosfeře dusíku, nejprve při teplotě 95,O°C po dobu 114,0 hodin, a poté ještě po dobu 71,0 hodin při teplotě 11O,O°C.

Po přidání dalšího množství ( 6,97 mmolu), 1-methylhistaminu, ( získaného ze 1,38 g, příslušného dihydrochloridu postupem popsaným výše ), bylB po uplynuti 24,0 hodin ochlazená reakční směs zředěna s dichlormethanem, a poté byla nanesena na zařízení Varian Mega Bond Elut, ( patrona o objemu 50,0 ml, náplň 10,0 g, oxidu křemičitého), a patrona byla eluována za odsávání nejprve s 50,0 ml, dichlormethanu, poté 2x vždy s 50,0 ml, ethylacetátu, a poté postupně,s 5%ní, 1Ο%ϊϊί, a nakonec s 20%ní směsí methanolu v ethylacetátu tak, že při každém zvýšení byla eluce prováděna 2x se 50,0 ml směsi.

Eluáty z dichlormethanu až ze 1Ο%ηί směsi 10%ního methanolu v ethylacetátu, byly spojeny, 8 odpařeny, a byla získána látka olejovité konzistence. Zbytkový dimethyIsulfoxid byl ze vysokého vakua odstraněn.

Výsledný, hnědě zbarvený zbytek, byl rozpuštěn ve 30,0 ml, dichlormethanu.q získaný roztok byí nanesen na zařízení Varian Mega Bond Elut, ( patrona o obsahu 50,0 ml, náplň 10,0 g, oxidu křemičitého), a eluován vždy s 50,0 ml, 50%ní. ' až 90%ní směsi ethylacetátu v cyklohexanu, po každém zvýšení koncentrací směsi o 10%, a poté po použití 100%ního ethylacetátu, byla eluce prováděna dále se čtyřnásobnou eluxí s 50,0 ml, se směsí 10%ního methanolu v ethylacetátu, poté s dvojnásobnou elucí se směsí I5%ního methanolu Jv.íethylacetétu, a nakonec se dvojnásobnou elucí se směsí 20%ního methanolu v

65· ethylacetátu, ( vždy a 50,0 ml ),

Bylo získáno 0,126 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě slabě hnědě zbarvené látky, pěnovitého charakteru.

LC/MS System B:

R^ = 2,10 minuty, m/z = 455,0 MH⁺*

Meziprodukt 29)

Příprava (2R,3R,4S,5S)-2-/2-chlor-6-(1S-hyd oxymethyl-2-methyl· propylamino)-puron-9-yl/-5-(3-e thyl-isoxazol-5-yl)-te trahydrofuran-3,4-diol-acetátu

Směs, připravená smícháním 0,063 g, ( 0,35 mmolu), L-2amino-3-methylbutanolu, dále 0,067 ml, ( 0,39 mmolu), diisopropylethylaminu, a 0,148 g, ( 0,32 mmolu), 4R-acetoxy-2R-(2,

6-dichlor-purin-9-yl)-5S-(3-ethyl-isoxazol-5-yl)-tetrahydrofuran-3R-yl esteru kyseliny octové, t.j. Meziproduktu 3), získaného postupem, popsaným v rámci přípravy výše ), ve 2,0 ml, isopropanolu, byla zahřívána při teplotě 50,0°C, po dobu 26,0 hodin.

Po odstraněni rozpouštědla z reakční směsi, byl vzniklý zbytek rozpuštěn ve 2,0 ml, methanolu( bezvodého), a ku získanému roztoku bylo za stálého míchání, při teplotě 20,0°C, po dobu 1,50 hodiny, přidáno 0,25 ml, 25%niho roztoku( hmotnostní %), methoxidu sodného, a poté, po přidání 1,0 ml, kyseliny octové, bylo rozpouštědlo ze směsi odstraněno ( za vakua). Po přečištění zbytku za použití urychlené sloupcové chromátografie, a oxidu křemičitého a nejprve samotného ethylace tátu, a poté ještě se směsí 10%ního methanolu v ethylace• ··· • ί ·· • i ·

GG acetátu, j8ko ©lučních činidel.

Bylo získáno 0,126 g, žádaného, v nadpise uvedeného produktu ve formě krémově zbarvené látky, pěnovitého charakteru.

TLC,( oxid křemičitý, samotný ethylacetát):

R_f = 0,21;

Me ziprodukt 30)

Příprava methoxymethylamidu kyseliny (3aS,4S,6R,6aR)-6-methoxy2,2-dime thy1-te trahydro-furo-/3,4-d//1,3/-di oxol-4-karboxylové

Ku směsi, připravené smícháním 5,00 g,( 22,90 mmolu), ( 3aS,4S,6R,6aR)-me thoxy-2,2-dime thy1-te trahydro-furo-/3,4-d/ /1,3/-dioxol-4-karboxylové kyseliny, připravené analogickým postupem, popsaným v rámci Mezinárodní patentové přihlášky, číslo WO 98/28319, a použitého i ve výše popsaném postupu přípravy Meziproduktu-1), ve 100,0 ml, dichlormethanu, bylo přidáno 4,83 g, ( 29,80 mmolu), karbonyldiimidazolu ve 50,0 ml, dichlor methanu, tak, že přidávání probíhalo po částech, v atmosféře dusíku, při teplotě místnosti, a za míchání po dobu 1,0 hodiny.

V rámci další operace byl připraven za použití 4,47 g, ( 45,80 mmolu), Ν,Ο-dimethyIhydroxylaminu.hydrochloridu, rozpuštěného ve ίΟΟ',Ό mlj 2,0 M roztoku hydroxidu sodného, roztok, který byl 2x extrahován a 50,0 ml, dichlormethanu. Po oddělení organické a vodné fáze byly organické extrakty spojeny, a byly po přidání ku reakční směsi, připravené v rámci výše popsané operace, míchány po dobu 24,0 hodin.

Poté, po odpaření rozpouštědla, byl výsledný zbytek vyjmut do 150,0 ml, ethylacetátu, promyt s 50,0 ml, nasyceného vodného roztoku kyseliny citrónové( kyseliny 2-hydroxypropan····

9 9

1,2,3-trikarboxylová, dále s 50,0 ml, nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného, a nakonec s 50,0 ml,, nasyceného vodného roztoku chloridu sodného.

Po následném vysušení se síranem hořečnatým, bylo rozpouštědlo za vakua odpařeno, a bylo získáno 5,786 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě slabě hnědě zbarvené látky, olejovité konzistence.

Hmotnostní spektrometrie; m/z; = 262,0,(MH⁺ pro sloučeninu sumárního vzorce C^H^NO^;

Meziprodukt 31)

Příprava 1 -(6R-me thoxy-2,2-dime thy1-tetrahydro-(3aS,6aR)-furo/3,4-d//1,3/-dioxol-4S-yl)-4-( tetrahydro-pyran-2-yl-oxy)-but2-yn-1-onu

Ku roztoku, připravenému rozpuštěním 1,609 g, ( 11,48 mmolu) , tetrahydro-2-(2-pr©panyloxy)-2H-pyranu, ve 20,0 ml, tetrahydrofuranu, bylo přidáno při teplotě minus 78,0°C, v atmosféře dusíku, a za stálého míchání po dobu 20,0 minut, 7,70 ml, (11,48 mmolu), 1,6M roztoku n-butyllithia v hexanech.

Poté, po přidání 1,79 g, ( 12,61 mmolu), borontrifluoriddiethyletherátu ku reakční směsi, byla směs míchána po dobu 30,0 minut.Poté byl ku směsi přidán roztok, získaný rozpuštěním 1,0 g, ( 3,82 mmolu), (3aS,4S,6R,68R)-6-methoxy-2,2-dimethyl-tetrahydro-furo-/3,4-d//1,3/-dioxol-4-karboxylové kyseliny methoxymethylamidu, t.j. Meziproduktu 30), připraveného v rámci předcházejícího, výše popsaného postupu, ve 2,0 ml, tetrahydrofuranu, a vzniklá reakční směs byla míchána při teplotě minus 78,0°C, v atmosféře dusíku, po dobu 3,0 hodin.

• ··»· ·· · ·· • * · * · · · « * « • · · · · · · · · • · · · · · φ «· ··· ·· «··

Poté byla reakční směs smíchána se 100,0 ml, nasyceného vodného roztoku chloridu amonného, a následně byla extrahována 3x vždy se 100,0 ml, ethylacetátu. Po oddělení organické a vodné fáze byly spojené organické extrakty vysušeny se síranem hořečnatým, a po odstranění rozpouštědla za vakua, byl získán surový produkt, ve formě hnědě zbarvené látky, olejovité konzistence,( 2,52 g).

Část, t.j. 0,50 g, surového produktu, získaného v rámci předcházející, výše popsané operace, byla přečištěna zs použití urychlené sloupcové chromátografie, ( Biotage, s předloženou náplní 40,0 g, oxidu křemičitého, a za použití směsi 10%ního ethylacetátu v cyklohexanu, jako elučního činidla.

Bylo získáno 0,182 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě bezbarvé látky, olejovité konzistence.

Hmotnostní spektrometrie; m/z; = 341,O,(MH⁺ pro sloučeninu sumárního vzorce C^H^O? .

Meziprodukt 32)

Příprava 4R-acetoxy-2S-(3-acetoxymethyl-isox8zol-5-yl)-5R-methoxy-tetrahydro-furan-3R-yl esteru kyseliny octové

Ku roztoku, připravenému rozpuštěním 3,18 g,( 9,34 mmolu), 1-(6R-me thoxy-2,2-dime thy1-te trahydro-(3aS,6aR)-furo-/3,4-d/ /1,3/-dioxol-4S-y1)-4-( te trahydro-pyran-2-y1-oxy)-but-2-yn1-onu, t.j. Meziproduktu 31), získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného postupu), ve 30,0 ml, methanolu, bylo přidáno 1,15 ml,(18,60 mmolu), 50%ního ( hmotnostní %), roztoku hydroxylaminu ve vodě, a vzniklá reakční směs byla míchána v, • ···· ·· · ·· « • · · · φ «· φ · «· • ··· φ · φ «« φ • * · · · · · · V ·

9 9 9 9 9 · Φ ··· ·♦· ·· ··· 99 ··· &

atmosféře dusíku, při teplotě místnosti, po dobu 16,0 hodin..

Po odstranění rozpouštědla odpařením bylo získáno 3,40 g, žlutě zbarvené látky, olejovité konzistence.

Část, t.j. 1,0 g, výše zmíněné látky olejovité konzistence, byla rozpuštěna ve 30,0 ml, methanolu, a po přidání 1,0 ml, 37%ní kyseliny chlorovodíkové , byl vzniklý roztok míchán při teplotě 50,0°C, v atmosféře dusíku, po dobu 24,0 hodin, a poté ještě byl zahříván za refluxu pod zpětným chladičem dalších 16,0 hodin.

Po ochlazení byla reakční směs neředěna se 30,0 ml, methanolu, a poté bylo 50% rozpouštědla odstraněno odpařením, a nahraženo se 2,0 ml, pyridinu, a 30,0 ml, toluenu. Tato smě» byla poté odpařena do sucha, a byla získána temně hnědě až Černě zbarvená viskózní látka, olejovité konzistence.Ku tomuto zbytku bylo přidáno,postupně 20,0 ml, pyridinu, dále

4-N,N-dimethylaminopyridin, a 4,0 ml, acetanhydridu.Teto směs byla poté míchána po dobu 3,0 hodin, a po odstranění rozpouštědla odpařením, byl zbytek vyjmut do 150,0 ml, dichlormethanu, a postupně promyt s 5°,0 ml, kyseliny citrónové = kys2-hydroxypropen-1,2,3-trikarboxylová, dále 8%ním vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného ,( 100,0 ml), a se 100,0 ml, solanky, a poté, po vysušení se síranem hořečnatým, bylo rozpouštědlo za vakua odstraněno, a vzniklý zbytek byl přečištěn za použití urychlené sloupcové chromátografie, ( Biotage), s předloženou náplní 40,0 g, oxidu křemičitého, a eluce se směsí ethylacetát : cyklohexan, (2 : 1,0).

Bylo získáno 0,841 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě žlutě zbarvené látky, olejovité konzistence.

TLC,( oxid křemičitý, samotný ethylacetát):

R_f = 0,66;

ί • · * · > · · » *··*·· ·· ··· · · «··

Me ziprodukt 33)

Příprava 4R-acetoxy-5S-(3-acetoxymethyl-isoxazol-5-yl)-2R( 2,6-dichlor-purin-9-yl)-tetrahydro-furan-3R-yl-esteru kyseliny octové

Ku 0,158 g, ( 0,84 mmolu), 2,6-dichlorpurinu, bylo přidáno 5,0 ml, 1,1,1,3,3,3-hexamethyldisilizanu, a vzniklá reakční směs byla míchána v 8tmosfeře dusíku, při teplotě 100,0°C po dobu 16,0 hodin.

Po ochlazení bylo rozpouštědlo z reakční směsi odpařeno, s zbytek byl ezeotropicky zpracován s 5,0 ml bezvodého toluenu, a po následném odpaření do sucha byla získána bíle zbarvená, pevná látka amorfního charakteru, ku které bylo přidáno 1,35 ml, roztoku, získaného rozpuštěním 0,100 g, ( 0,279 mmolu), 4R-acetoxy-2S-(3-scetoxymethyl4isoxazol-5-yl)^5R-methoxy-tetrahydro-furan-3R-yl-esteru kyseliny octové, t.j. Meziproduktu 32), ( připravené v rámci předcházejícího, výše popsaného postupu), ve 1,35 ml, bezvodého acetonitrilu. Po přidání dalších 2,0 ml, bezvodého acetonitrilu, byla reakční směs ochla z ena..na -te pl o tu_; 0 °C, „a .za,, stál éhoymi cháni, by 1 o. k. ní.... přidáno 0,165 ml, ( 0,92 mmolu), trimethylsilyltrifluormethyIsulfonátu,( TMSOTf).

Po následném vytemperování na teplotu místnosti během 20,0 minut, byla směs zahřívána za míchání, při teplotě 80,0°C, po dobu 20,0 hodin.Po ochlazení byla směs poté nalita-do 20,0 ml, 8%ního vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného, a poté byla extrahována 2x vždy se 30,0 ml, ethylacetátu. Po vysušení získaného extraktu se síranem hořečnatým, byla směs odpařena, a byla získána hnědě zbarvená látka, gumovité konzistence, která byla přečištěna urychlenou sloupcovou chromá tografii, ( Biotege), s předem naplněným sloupcem se 8,0 g oxidu křemičitého, a za použití směsi ethylacetát : cyklohexan, jako elučního činidla.

Bylo získáno 0,140 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeninv ♦ ··♦· ·· 9 99 9

9 9 9 99 9 « 99

9 99 9 9 9 9 9 · : ι:

··· 999 99 999 99 999 ve formě bíle zbarvené, krystalické látky.

TLC, ( oxid křemičitý, samotný, ethylacetát): R_f = 0,55;

Meziprodukt 34)

Příprava 4R-acetoxy-5S-(3-ace toxymethyl-isoxazol-5-y1)-2R/2-chlor-6-(1-e thy1-propylamino)-purin-9-yl/-te trahydro-furan3R-yl esteru kyseliny octové

Ku roztoku,, připravenému rozpuštěním 0,1.00 g, (0,194 mmolu), 4R-a c e t oxy- 5 S- (3-e c e t oxyme thy 1-i s oxa z ol-5 -y 1) - 2R- (2,6 -d i ehlor-purin-9-yl)-tetrahydro-furan-3R-yl-esteru kyseliny octové, í.j. Meziproduktu 33), získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného postupu, ve 5,0 ml, isopropylalkoholu, bylo přidáno 0,025 g, ( 0,29 mmolu), 1-ethylpropylaminu, a 0,033 g, ( 0,252 mmolu), Ν,Ν-diisopropylethylaminu, a vzniklá reakční směs byla zahřívána za míchání, při teplotě 50,0°C, po dobu 16,0 hodin.

Po odstranění rozpouštědla odpařením bylo získáno 0,l04g žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě žlutě zbarvené látky, gumovité konzistence.

LC/MS System C:

R - 3,50 minuty, m/z - 565,0 MH⁺;

• 9·♦· 99 9

9 9 9 9 ♦ 9 • 9 9 9 9 9 9

9 9

9 9 9

9«

Meziprodukt 35)

Příprava 1-(6R-me thoxy-2,2-dime thy1-1e trahydro-(3aS,6sR)-furo/3,4-d//1,3/-dioxol-4S-yl)-pent-2-yn-1-onu

Ku cca 20,0 ml, 1-butynu, nekondenzovanému v atmosféře dusíku, a při teplotě minus 78,0°C, do reakční baňky, bylo přidáno 140,0 ml, tetrahydrofuranu, a následně , během 10,0 minut, 25,0 ml, ( 75 molu), 3M roztoku methylmagnesiumchloridu.

Vzniklá reakční směs byla po vytemperování na teplotu místnosti míchána péé dobu 5,0 hodin, a po ochlazení ns teplotu 0 - až 5,0°C, byl přidán během 20,0 minut roztok, získaný rozpuštěním 21,07 g, methoxymethylamidu kyseliny (3aS,4S,6R, 6aR)-6-methoxy-2,2-dimethyl-tetrahydro-furo-/3,4-d//1,3/-dioxol-4-karboxylové, t.j. Meziproduktu 30), ( 80,73 mmolu), ve 40,0 ml, tetrahydrofuranu.

Tato reakční směs byla poté míchána při teplotě 0 sž 5°C, po dobu 1,0 hodiny, 8 poté byle ponechána stát v klidu při teplotě 4,0°C přeé noc. Poté bvlo ku reakční směsi přidáno při teplotě 0 až 5°C, a za stálého míchání, 200,0 ml, 3O%ního roztoku chloridu amonného, a následně ještě 150,0 ml, 2M roztoku kyseliny chlorovodíkové.

Poté byla směs 2x extrahována vždy se . 200,0 ml, ethylace-i tátu, a po oddělení vodné a organické fáze, byly organické extrakty spojeny, a po vysušení se síranem sodným, bylo rozpouštědlo za vakua odstraněno. Zbytek byl přečištěn pomocí urychlené sloupcové chromatografie, za použití oxidu křeničitého, a směsi hexan : ethylacetát, jako elučního činidla.

Bylo získáno 13,76 g, Žádané^ v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě bíle zharvené, pevné látky.

TLC,( oxid křemičitý, 20%ní směs ethylacetátu v hexanu):

R_f = 0,36;

·· 999 99 999

Meziprodukt 36)

Příprava 1-(6R-me thoxy-2,2-dime thy1-te trahydro-(3aS,6eR)-furo /3,4-d//1,3/-dioxol-4S-yl)-pentsn-1,3-dion-3-oximu

Směs, připravená smícháním 15,02 g, ( 59,10 mmolu).,, 1(6R-me thoxy-2,2-dime thy1-te trehydro-(3sS,6aR)-furo-/3,4-d/..

/1,3/-dioxol-4S-yl)-pent-2-yn-1-onu, t.j. Meziproduktu 35), získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného postupu, se 300,0 ml, methanolu, byla dále smíchána se.7,20 ml,(235,20 mmolu), 50%ního vodného roztoku hydroxylaminu, 8 vzniklá reakční směs byla míchána při teplotě 22,0°C po dobu 5,0 hodin.

Poté byla reakční směs zahuštěna, výsledný zbytek ve for mě bíle zbarvené látky, byl vyjmut do.500,0 ml, ethylacetátu, a získaný roztok byl postupně promyt se 100,0 ml, vody, a se 100,0 ml, solanky, a po vysušení se síranem sodným, bylo rozpouštědlo za vakua odstraněno.

Bylo získáno 15,81 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeni ny,(která byla za vysokého vakua přes noc vysušena), ve formě bíle zbarvené, pevné látky.

TLC,( Oxid křemičitý, diethylether, hexan):

R_f - 0,10;

Meziprodukt 37)

Příprava 2-(2-piperidin-1-y1-ethylamino)-1,9-dihydro-purin6-onu

Směs, připravená smícháním 6,0.g,( 28,00 mmolu), 2-brom· hypoxanthinu, a 7,0 ml,( 56,0 mmolu), 2-piperidinethylaminu, • 9*99 ««9 _ . 999 999 99 ·99 ·· 999 ve 30,0 ml,, 2-methoxyethanolu, byla zahřívána za refluxu pod zpětným chladičem přes noc:. Poté, po,ochlazení reakční směsi na teplotu místnosti, vznikla žlutě zbarvená sraženina.Další sraženina byla získána po přidání 50,0 ml vody.

Po míchání po dobu 1,0 hodiny, byla suspenze zfiltrováne, a získaná pevná látka byla promyta s vodou, a vysušena za vakua, a bylo tak připraveno 5,60 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny.

LC/MS System C :

= 0,82 minut; m/z = 263,0 MH⁺;

Meziprodukt 38)

Příprava (6-chlor-9H-purin-2-yl)-(2-piperidin-1-yl-ethyl)-8minu

Ku směsi, připravené smícháním 4,0 ml, (3l,00mmolu),N,Ndimethylanilinu, a 30,0 ml, ( 314,0 mmolu), oxychloridu fosforečného, míchané při teplotě,místnosti po dobu 10,0 minut, bylo přidáno po částech 5,50 g, ( 20,00 mmolu), 2-(2-piperidin1-yl-ethylamino)-1,9-dihydro-purin-6-onu,t.j.Meziproduktu 37), získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného postupu, a vzniklá reakční směs byla zahřívána za refluxu pod zpětným chladičem po dobu 15,0 minut.

Po ochlazení byl ze směsi odpařen za vakua oxychlorid fosforečný, a zbytek byl zpracován azeotropicky, za trojnásobného použití 50,0 ml toluenu. Po přečištění zbytku pomocí urychlené sloupcové chromatografie, (Biotage), se sloupcem naplněným s 90,0 g, oxidu křemičitého, a za použití směsi 10% methanolu/ehloroformu/1% amoniaku, jako elučního činidla, bylo získáno 4,980 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, • 999

9« 9 9 9 9 9 9*·

999 999 · 9

9 9 9 9 9999 9 9 9 9 9 9 9

..............

ve formě slabě žlutě zbarvené, pevné látky.

LC/MS System C:

R^ = 1,61 minuty; m/z = 281,0 MH⁺;

Meziprodukt 39)

Příprava N6-(2,2-difenyl-ethyl)-N2-(2-piperidin-1-yl-ethyl)9H-purin-2,6-diaminu

Směs, připravená smícháním 5,000 g,(17,80 mmolu), (6chlor-9H-purin-2-yl)~(2-piperidin-1-yl-ethyl)-aminu, t.j. Meziproduktu 38), získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného postupu, dále 6,20 ml, Ν,Ν-diisopropylethylaminu,(36,0 mmolu) jS ,5,2QO_vg·, ( 27_¥0 mmolu) , 2-difenyle thy laminu, ve

100,0 ml, isopropanolu, byla zahřívána za refluxu pod zpětným chladičem přes noc.

Poté, co bylo rozpouštědlo po ochlazení z reakční směsi za vakua odstraněno, byl zbytek přečištěn pomocí urychlené sloupcové chromátografie,za použití sloupce( Biotage), naplněného s 90,0 g. oxidu-křemičitého, a směsi 5% methanolu/chloroformu/ a 1% amonieku, jako elučního činidla.

Bylo získáno 4,500 g, žádané^ v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě bíle zbarvené, pevné látky.

LC/MD System C:

R^ = 2,47 minutyj m/z = 442,0 MH⁺;

* ·0

0000 00 • 0 0 0

0000 0 0 0 00 0

000· 0 0 · • •0 000 00 ·00 00 00«

Μ e ziprodukt 40)

Příprava 4H-a ce toxy-2S- (3-e thy 1-i s oxa zol-5-y1) -5R*-me thoxy-tetrahydro-Tfuran-3R'-yl esteru kyseliny octové

Ku směsi, připravené smícháním 15,76 g,( 54,91 mmolu),

-(6R-me thoxy-2,2-dime thy,1-te trahydro-(3aS,6aR)-furo-/3,4-d/ /1,3/-dioxol-4S-yl)-pentan-1,3-dion-3-oximu, t.j. Meziproduktu 36), získaného v rámci výše popsaného postupu, se 400,0 ml, methanolu, bylo přidáno 25,0 ml, koncentrované kyseliny chlorovodíkové,, a vzniklá reakční směs byla zahřívána ^!ze refluxu pod zpětným chladičem, po dobu 22,0 hodin.

Poté byla směs za sníženého tlaku zahuštěna, a 2x spoluodpařena se směsí methan/toluen. Vzniklý zbytek byl rozpuštěn ve 200,0 ml, dichlormethanu, a získaný roztok byl smíchán postupně se 100,0 ml, pyridinu, dále se 30,0 ml, acetanhydridu, ( 318,00 mmolu), e se 0,064 g, 4-dimethylaminopyridinu, a vzniklá reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 16,0 hodin. Poté byla směs neředěna se 200,0 ml, dichlormethanu, a poté postupně promyta s 8%ním vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, ( 400,0 ml), dále 3x vždy se 300,0 ml, 2M roztoku kyseliny chlorovodíkové, a oddělená vodná vrstva byla extrahována se 100,0 tul, dichlormethanu.

Spojené organické vrstvy byly poté vysušeny se síranem sočným, a rozpouštědlo bylo za vaku8 odstraněno. Zbytek, ve formě hnědě zbarvené látky, byl přečištěn za použití urychlené sloupcové chromatografie, a za použití oxidu křemičitého, a směsi hexan : ethylacetát,( 1,0 : 1,0), jako elučního činidla.

Bylo získáno 5,710 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě oranžově zbarvené látky, olejovíté konzistence.

TLC.; ( oxid křemičitý, směs 50%ního ethylacetátu v hexanu):

R_f = 0,38;

• ···· ·* * ·· ♦ · · « · ·· · · · • ··« · · · » ·

1ΊMeziprodukt 41)

Příprava 4S-acetoxy-5S-/6-(2,2-difeny1-ethylamino )-2B- (2-piperidin-1-yl-ethylamino)-purin-9-yl/-2-( 3-ethyl-isoxazol-5-yl)tetrahydro-furan-3R-yl esteru kyseliny octové

Suspenze, připravená smícháním 0,500 g,, ( 1,00 mmol ),

N6-(2,, 2-difeny1-ethyl-)-N2-(2-piperidin-1-yl-ethyl)-9B-purin2,6-diaminu_F t.j. Meziproduktu 39), získaného v rámci výše popsaného postupu, se 5,0 mi; 1,1,1,3,3,3-hexamethyldisilazanu, byla zahřívána za refluxu pod zpětným chladičem po dobu 3,50 hodiny._:

Poté,, po odstranění rozpouštědla za vakua, byl vzniklý zbytek zpracován 3x a 5»0 ml, toluenu,( bezvodého),. a ku zbytku, ve 2,0 ml, acetonitrilu, bylo přidáno 0,420 g,. (1,..30 mmolu), 4R-a ce toxy-2S-(3-e thy1-i soxazol-5-y1)-5®-me thoxy-te trahydrofuran-3H-yl esteru kyseliny octové, t.j. Meziproduktu 40), získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného postupu, a 0,16 ml, ( 1,00 mmol), 1,8-diazabicyklo-/5.5.0/-undec-7-enu, a ku vzniklé reakční směsi, ochlazené na teplotu 0°C, bylo přidáno 0,60 ml, ( 3,30 mmolu), trimethylsilyltrifluormethylsulfonátu.

Poté, po vytemperování směsi na teplotu místnosti, byla směs zahřívána za refluxu pod zpětným chladičem přes noc.Po ochlazení byla směs nalita do 10,0 ml, nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného, a poté byla 3x extrahována, vždy s 15,0 ml ethylacetátu. Po oddělení vodné 8 organické fáze byly spojené organické extrakty promyty s 10,0 ml vody, a po vysušení se sírahem hořečnatým, bylo rozpouštědlo za vakua odstraněno.

Zbytek byl přečištěn pomocí urychlené sloupcové chromatografie, za použití sloupce (Biotage), naplněného s 8,0 g oxidu křemičitého, a směsi 5% methanolu/chloroformu/1% amoniaku, jako elučního činidla.

Bylo získáno 0,198 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě slabě hnědě zbarvené, pevné látky.

···· • · *

LC/ffiS System C:

R_t - 2,89 minuty; m/z - 722,0 MH⁺;

Příklady

Příklad. 1 )

Příprava (2R,3R,4S,5S)-2-/6-(2,2-difenyl-ethylamino)-2y( 2-piperidin-1-y1-ethylamino)-purin-9-y1/-5-(3-ethy1-i s οχβ zol-5-y1)tetrahydro-furan-3,4-diol-diformiátu

Směs, připravená smícháním O,OP g,, ( 0,043 mmolu),4Racetoxy-2R-(2,6-dichlor-purin-9-y1)-5S-(3-ethy1-isoxazol-5-y1)tetrahydro-furan-3R-yl esteru kyseliny octové, t.j. Meziproduktu 3),. získaného v rámci postupu, popsaného výše, a dále 0,1 mmolu/ml 2,2-difenylethylaminu v isoprópanolu,(0,581 ml, 0,058 mmolu), a 0,345 ml,( 0,069 mmolu), 0,2 mmolu/ml diisopropylethylaminu, byle v uzavřené reakční trubici,( ns př, Reactivial^^EO, zahřívána při teplotě 53,O°C, po dobu 16,0 hodin.

Poté, co byly těkavé složky pomocí proudu dusíku z reakční směsi odstraněny, byl ku vzniklému zbytku přidán 2-piperidin-1-y1-ethylamin,( 0,044 gj 0,344 mmolu), a 0,20 ml, dimethylsulfoxidu, a tato směs byla zahřívána při teplotě 92,O°C po dobu 4,0 dnů,.

Výsledný surový produkt byl přečištěn autopreparativní • 9·· · 9 vysokovýkonnou kapalinovou chromátografií( HPLC), a po vymražení( lyofilizaci), bylo získáno 0,0029 g, Žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě slabě hnědě zbarvené, pevné látky.

LC/MS System B:

R_t = 4,24 minutyj m/z = 639,0 MH⁺J

V rámci Příkladu 1), uvažujeme i o použití alternativního postupu, za použití reakce (2R,3R,4S,5S)-2-/2-chlor-6-(2,2difeny 1-ethylamino)-purin-9-y1/-5-(3-ethyl-isoxazol-5-yl)-tetrahydro-furan-3,4-diolu, t.j. Meziproduktu 7), získaného v rámci postupu, popsaného výše, s 2,-piperidin-1-y1-ethylaminem, v dimethylsulfoxidu, za zvýšené teploty.

Příklad 1 ) ( Alternativní příprava )

Příprava 2R-/6-(2,2-difenyl-ethylamino)-2-(2-piperidin-1-yle thylamino)-purin-9-y1/-5S-(3-e thy1-i soxazol-5-yl)-tetrahydro furan-3R,4S-diol-trifluoracetátu

Roztpk, připravený rozpuštěním 0,125 g, ( 0,10 mmolu), 4S-ace toxy-5S-/6- (2,2-dif eny 1-e thy lamino ),-2R- (2-piperidin-1 y1-ethylamino)-purin-9-y1/-2-(3-ethy1-isoxazol-5-yl)-tetrahydro furan-3R-yl esteru kyseliny octové, t.j. Meziproduktu 41), získaného v rámci postupu popsaného výše), v 5,0 ml 1Q%ního amoniaku v methanolu, byl míchán při teplotě místnosti přes noc.

Po odpaření rozpouštědla z reakční směsi ze vakua, byl zbytek přečištěn preparativní vysokovýkonnou kapalinovou chro• ««·· ·· φ ·· • » · 9 9 99 9 9 9

999. 99 · «·

999 99 999

So matografií, za použití gradientově eluce s 5%ním až 95%ním acetonitrilem.

Bylo získáno 0,100 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny.

LC/MS System C:

R = 2,77 minut; m/z = 639,0 MH⁺;

Příklad 2)

Příprava (2R,3R,4S _t5S)-2-/6-(2,2-difenyl-ethylemino)-2-(2-morfolin-4-yl-ethylamino)-purin-9-yl/-5-(3-ethyl-isox8zol-5-yl) tetrahydro-furan-3,4-diol-d£formiátu

Analogickým postupe^,popsaným výšs v rámci předcházejícího Příkladu 1), bylo připraveno za použití 0,045 g,( 0,344 mmolu) _r 2-( morfolin-4-yl)-ethylaminu, po následné lyofilizaci, 0,01 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě hnědě zbarvené,, pevné látky,

LG./MS System B::

' R. - 4,07 minut; m/z - 641,0 MH⁺;

v

Příklad 3)

Příprava (2R,3R,4S,5S)-2-(3-ethyl-isoxazol-5-yl)-5-/6-fenethylamino-2-( 2-piperidin-1-yl-ethylamino)-purin-9-yl)-tetrahydro furan-3,4-diol- diformiátu ···· ·· · 99 · • « · · · ·· t » · · • ··· · · · · · · • · · * · ···· · • · · 9 · · · ·

999 999 99 999 99 999

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 1), byla připravena v nadpise uvedená, žádaná sloučenina, za použití 0,581 ml,( 0,058 mmolu); 0,1 mmol/ml, roztoku fenylaethylaminu, v isopropanolu, a 0,045 g,( 0,344 mmolu), 2-Í2-piperidin-1-yl)-ethylaminu.

Směs, připravená smícháním 0,02 g,( 0,043 mmolu), 4R-acetoxy-2R-(2,6-diehlor-purin-9-yl)-5S-(3-ethyl-isoxazol-5-yl)-tetrahydro-furan-3H-yl-esteru kyseliny octové, t.j. Meziproduktu 3), získaného v rámci výše popsaného postupu, dále 0,581 ml, ( 0,058 mmolu),0,1 mmol/ml roztoku fenylethylaminu v isopropanolu, a 0,345 ml, ( 0,069 mmolu); 0,2 mmol/ml roztoku diisopropylethylaminu v isopropanolu, byla zahřívána v uzavřené reakční trubici ,( na př. Reacti-viaV při teplotě 53,O°C, po dobu 16,0 hodin.

Poté byly těkavé složky z reakční směsi v proudu dusíku odstraněny, a ku vzniklému zbytku bylo přidáno 0,045 g,( 0,344 mmolu), 2-piperidin-1-yl-ethylaminu, a 0,20 ml, dimethylsulfoxidu, a tato směs byla zahřívána při teplotě 92,0°C, po dobu 4 dnů,. Výsledný surový produkt byl přečištěn pomocí auio preparativní vysokovýkonné kapelinové chromatografie, (HPLG.), a po následné lyofilizaci bylo získáno 0,004 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě hnědě zbarvené, pevné látky.

LC/MS System B:

R^ = 3,90 minutj m/z - 583,0 MH⁺;

Příklad 4)

Příprava (2R,3R,4S,5S)-2-/6-(2,2-difeny1-ethylamino )-2-(2-hydroxy-e thylamino)-purin-g-y1/-5-(3-e thy 1-isoxe zol-5-yl)-te tra hydro-furan-3„4-diol-formiátu

• ·· • •	···· • ··«	• t • · • ·	• ·· «	·· ♦ · • ·	• ·
		«·	···	• ·	• ·

Směa, připravená smícháním 0,50 ml, ( 0,047 mmolu),. 4Raeetoxy-2R-(2,6-dichlor~purin-9-yl)-5S-(3-ethyl-isoxazol-5-yl)tetrahydro-furan-3R-y1-esteru kyseliny octové, t.j. Meziproduktu 3) ,₇ ( 0,044 g/ml), získaného v rámci výše popsaného postupu přípravy, a 0,013 ml,( 0,074 mmolu), diisopropylethylaminu, by(R) la zahřívána v uzavřené reakční trubici,/ na př. Reacti-vial ), při teplotě 53,O°G, po dobu 16,0 hodin.

Poté byly těkavé složky z reakční směsi v produ dusíku odstraněny,; a ku zbytku bylo přidáno 0,017 g,.( 0,28 mmolu), ethanolaminu, a 0,10 ml, dimethylsulfoxidu.

Poté byla reakční směs zahřívána při teplotě 90°C po dobu 5 dnů_r Výsledný surový produkt byl přečištěn autopreparativní vysokovýkonnou kapalinovou chromátografií( HPLC), a po následné lyofilizaci bylo získáno 0,007 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě hnědě zbarvené,, pevné látky.

LC/MS System ffi:

R-^ = 2,98 minutj m/z - 572,0 MH⁺;

P ř í k 1 a d 5)

Příprava (2S,3S_r4R,5R)-2-(3-ethyl-isoxazol-5-yl)-5-[6- (1éthyl-propylamino)-2-/2-(1-methyl-1H-imidazol-4-yl)-ethylamino/~purin-9-yl^-tetrahydro-furan-3,4-diol-diformiátu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci předcházejícího, Příkladu 4), byla za použití 0,005 g,( 0,056 mmolu), • ···· ·· · ·· ·· · · · ·· · · · • ··· · · · 9 ·

9·· 9 · ·

9· ·99 ·· 999 /3

1-ethylpropylaminu, a 0,035 g,( 0,28 mmolu), 2-(1-methyl-1Himidazol-4-yD-e thy laminu, ( připraveného z příslušného dihydrochloridu neutralizací s mírným přebytkem pevného hydroxidu sodného v methanolu,, a odpařením těkavých složek z reakční směsi v proudu dusíku), a zahříváním vzniklé reakční směsi při teplotě 90„0°C, po dobu 5 dnů.

Po následné lyofilizaci bylo získáno 0,009 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě slabě hnědě zbarvené, pevné látky.

LC/MS System A:

R^ ~ 3,61 minutj m/z = 526,0 MH⁺;

Příklad 6)

Příprava (2S,3S,4R,5R)-2-(3-ethy1-isoxazol-5-y1)-5-/6-(1-e thy1propylamino )-2-(2-piperidin-1-y1-e thylamino)-purin-9-yl/-tetrahydro-f uran-3,4-diol-diformiátu

AnalogicKým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 4), byla za použití 0,005 g,( 0,056 mmolu), 1-ethylpropylaminu, a 0,036 g,( 0,28 mmolu), 2-(2-piperidin-1-yl)-ethylaminu, zahřívaných ve formě reakční směsi při teplotě 90,0°C, po dobu 5,0 žádaná, v nadpise uvedená sloučenina.

Směs, připravená smícháním 0),50 ml, ( 0,047 mmolu), 4Race toxy-2R-(2,6-dichlor-purin-9-yl)-5S-(3-e thyl-isoxazol-5-yl)tetrahydro-fursn-3R-yl esteru kyseliny octové, t.j. Meziproduktu 30, ( 0,044 g/ml),dále 0,005 g, ( 0,056 mmolu), 1-ethylpropylaminu, a 0,013 ml,( 0,074 mmolu), diisopropylethylaminuj byla zahřívána v uzavřené reakční trubici,( na př.Reacti-vial ), při teplotě 53»O°C, po dobu 16,0 hodin.

Poté byly z reakční směsi odstraněny v proudu dusíku těkavé složky, a ku zbytku bylo přidáno 0,036 g,(0,28 mmolu),2piperidin-1-yl-ethylaminu, a 0,10 ml, dimethylsulfoxidu, a teto směs byla zahřívána při teplotě 90,0°C po dobu 5 dhů.

Výsledný surový produkt byl přečištěn pomocí autopreparativní vysokovýkonné kapalinové chromátografie,(HPLC), a po následné lyofilizaci bylo získáno 0,004 g, Žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě hnědě zbarvené,, pevné látky.

LC/MS System A:

R^ - 3,76 minut; m/z - 529,0 MH⁺;

Příklad 7)

Příprava (2R,.3R,4S,5S)-2- {6-(3,3-dimethy 1-butylamino)-2-/2( 1-methyl-1H-imidazol-4-yl)-ethylamino/-purin-9- yij -5-(3ethyl-isoxazol-5-yl)-tetrahydro-furan-3,4-diol-diformiátu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 4), bylo za použití 0,006 g,( 0,056 mmolu), 3,3-dimethyIbutylaminu, a 0,035 g,( 0,28 mmolu), 2-(1-methyl-lH-imidazol-4-yl)ethylaminu, ( připraveného analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 5), a zahříváním reakční směsi při teplotě 90,0°C, po dobu 5 dnů, 8 po následné lyofilizsci, připraveno 0,007 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě hnědě zbarvené, pevné látky.

LC/MS System A:

R = 3,80 minuty; m/z = 540,0 MH⁺;

v • ···

999 9«

Pří kle d 8)

Příprava (2S,,3S„4R, 5R)-2-(3-ethyl-is,oxazol-5-yl )-5-/6-( cyklopentylamino)-2-(2-piperidin-1-yl-ethylamino)-purin-9-yl/-tetrahydro-furan-3,4-diol-diformiátu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 4), bylo za použití 0,005 g,( 0,056 mmolu), cvklopentylaminu, a 0,036 g,( 0,28 mmolu), 2-piperidin-1-yl-ethylaminu, a po zahřátí vzniklé reakční směs při teplotě 90,0°C po dobu 5 dnů, a následné lyofilizaci, připraveno 0,003 g,, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě hnědě zbarvené, pevné látky.

LC/MS System

R^ - 3,44 minut; m/z = 527,0 MH⁺;

Příklad. 9)

Příprava N-£ 2-/9-/5S-(3-ethyl-isoxazol-5-yl)-3R,4S-dihvdroxytetrshydro-furan-2R-y1/-6-(tetrahydro-thiopyran-4-yl-amino)9H-purin-2-yl-amino/-e thylj -guanidinu diformiátu

Směs, připravená smícháním 0,15 g,(0,32 mmolu), 4R-acetoxy—2R—(2,6-dichlor-purin-9-yl)-5S-(3-ethyl-isoxazol-5-yl)-tetr8hydro-furan-3R-yl-esteru kyyelinv octogé, t.j. Meziproduktu 3), získaného v rámci výše popsaného přípravy, dále 0,041 g, ( 0,35 mmolu), tetrahydro-thiopyran-4-yl-aminu, a 0,139 ml, ( 0,80 mmolu), diisopropylethyl8minu,. ve 2,50 ml,, isopropanolu, ’ · (r) byla zahřívána v uzavřené reakční trubici,( na př. Reacti-viel ) při teplotě 50,0°C, po dobu 19,0 hodin.

• ·

Poté, co byly těkavé složky v produ dusíku z reakční směsi odstraněny, byl vzniklý zbytek rozpuštěn v 0,60 ml, dimethyl sulf oxidu.,,

Jedna šestina vzniklého roztoku byla přenesena do další uzavřené reskční trubice, a po přidání 0,021 ml,.( 0,32 mmolu), ethylendiaminu_r byla reakční směs zahřívána v tepelném rozmezí

90,.0 až 92,0°©, po dobu 3- dnů. Poté,, po ochlazení na teplomístnosti, byla reakční směs naředěna s 0,50 ml, 50%ního vodného ethanolu, a bylo k ní přidáno 0,016 g,( 0,11 mmolu), 1Hpyrazol-karboxamidinu.hydrochloridu, a 0,007 g,( 0,11 mmolu), imidazolu, a tato směs byla zahřívána při teplotě 60,0°C po dobu 4,0 dnů.

Poté, po přidání dalších 0,016 g,( 0,11 mmolu).,, 1H-pyrazol-karboxamidinu.hydrochloridu, a 0,007 g,( 0,11 mmolu), imidazolu, byla reakční směs zahřívána dále po dobu 4 dnů. Poté, po odstranění těkavých složek v proudu dusíku, byl výsledný zbytek ve formě surového produktu přečištěn autopreparativní vysokovýkonnou kapalinovou chromá tograf ií( HPLC,), a po následné lyofilizaci bylo získáno 0,003 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě slěbě hnědě zbarvené,, pevné látky.

LC/MS System Bi

R^ - 2,47 minut; m/z - 533,0 MH⁺;

Příklad 10)

Příprava (2S,_;3S,.4R>5R)-2-(3-ethyl-isoxazol-5>yl)-5-/6-(3fluor-4-hydroxy-fenylamino)-2-(2-piperidin-1-yl-ethylamino)purin-9-yl/-tetrahydro-furan-3,4-diol-diformiátu • · · · ·

Směs, připravená smícháním 0,15 g,( 0,32 mmolu), 4R-acetoxy-2R-(2,6-dichlor-purin-9-y1)-5S-(3-ethy1-i s oxa zol-5-y1) - te— trahydro-furan-3R-yl esteru kyseliny octové, t.j.Meziproduktu

3), získaného v rámci výše popsaného postupu, 8 0,139 ml,(0,80 mmolu), diisopropylethylaminu, ve 2,50 ml, isopropanolu, byla / n zahřívána v uzavřené reakční trubici,( na př.Reacti-vial ), při teplotě 50,0°C, po dobu 19,0 hodin.

Poté, co byly těkavé složky v proudu dusíku z reakční směsi odstraněny, byl výsledný zbytek rozpuštěn v 0,60 ml, dimethylsulfoxidu, a jedns šestina ze získaného roztoku byla přenesena do další uzavřené reakční trubice, a a po přidání 0,041 g ( 0,32 mmolu), 2-piperidin-1-y1-ethylaminu, byla směs zahřívána v tepelném rozmezí 90,0 až 92_rO°C po dobu 4 dnů.

Výsledný surový produkt byl přečištěn pomocí autopreparativní vysokovýkonné kapalinové chromatografie,(HPLC), a po následné lyofilizaci bylo získáno 0,01 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě s nádechem do bělá, slabě hnědě zbarvené, £evné látky.

LC/MS System A:

R^ - 3,53 minuty*, m/z = 569,0 MH⁺;

Příklad 11)

Příprava methylamidu diformiátu kyseliny 2-/9-/5S-(3-ethylisoxazol-5-yl)-3R,4S-dihydroxy-tetrahydro-furan-2H*-yl/-2-piperidin-1-y1-e thylamino)-9H-purin-6-yl-amino/-ethansulfonové

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci předcházejícího Příkladu 10), bylo za použití 2-aminoethylsulfonové ky• ·

Μ seliny-methylemidu,_; a 0,041 g, ( 0,32 mmolu), 2-piperidin-1-ylethylaminu, a po zahřívání reakční směsi při teplotě 90,0°C po dobu 4 dnů,, a následné lyofilizeci , připraveno 0,011 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě s nádechem do bělá, slabě hnědé zbarvené,.úlevné látky.

LC/MS System A:

R, - 3,41 minutyJ m/z - 580,0 MH⁺;

V

Příklad 12)

Příprava (2S.3S,4R,5R)-2-(3*ethvl-isoxezol-5-y1)-©-/2-(2-piperidin-1-yl-ethylamino )-6-( tetrahydro-thiopyran-4-yl-aminoípurin-9-yl/-tetrahydro-furan-3,4-diol-diformiátu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 10), bylo za použití 0,04 g,( 0,35 mmolu), tetrahydro-thiopyran-4yl-aminu, a 0,041 g, ( 0,32 mmolu),, 2- piperidin-1-yl-e thy laminu, a po zahřívání reakční směs při teplotě 90,0°C, po dobu 3 dnů, a po následné lyofilizaci, připraveno 0,011 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě s nádechem do bělá, slabě hnědě zbarvené, pevné látky.

LC/MS System B;:

R_t « 2,33 minutyj m/z = 559,0 MH⁺J

P ř í k 1 a.ď 13) « · η

Příprava (2S,,3S-,,4B,5K)-2-(3-ethyl-isoxazol-5-yl)-5-/2-(2-pyrmdin-2-yl-ethylamino)-6-( tetrahydro-pyrsn-4-yl-amino)-purin-9y1/-te trahydro-furan~3,4-di ol-diformiátu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 10), bylo ζθ použití 0,035 g,( 0,35 mmolu), tetrehydropyran-4-ylaminu, a 0,039 g,( 0,32 mmolu), 2-pyridin-2-yl-ethylaminu, a po zahřívání reakční směs při teplotě 90,0°C po dobu 10 dnů, a po následné lyofilizaci, připraveno 0,013 g, žádané,, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě hnědě zbarvené, pevné látky.

LC/MS System Et:

R = 2,21 minuty; m/z = 537,0 MH⁺;

p ř i > 1 :a d H)

Příprava (2S,3S„4E,5R)-2-(3-ethyl-isoxszol-5-yl)-5-/2-(2-piperidin-1-yl-ethylamino)-6-(tetrahydro-pyran-4-yl-amino)-purin9—yi/-tetrahydro-furan-3,4-diol-difořmi átu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 10), bylo za použití 0,035 g,( 0,35 mmolu), tetrahydropyren-4-ylaminu, a 0,041 g,( 0,32 mmolu), 2-piperidin-1-yl-ethylaminu, a po zahřívání reakční směs při teplotě 90,0°C, po dobu 3 dnů, a po následné lyofilizaci, připraveno 0,004 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě hnědě zbarvené, pevné látky.

LC/MS System B:

R = 2,17 minuty; m/z = 543,0 MH⁺;

• · • · «·9 999 <?0

Příklad 15)

Příprava (2S, 3S ,.4R, 5R0-2- (3-e thyl-isoxazol-5-yl )-5-/2- (1Shydroxymethyl-2-feny1-ethylamino)-6-(tetrahydro-pyran-4-ylamino)-purin-9-yl/-tetrahydro-furan-3,4-diol-formiátu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 10), bylo za použití 0,035 g,( 0,35 mmolu), tetrshydropyran-4-ylaminu, a 0,048 g,( 0,32 mmolu), (S)-(-)-í-amino-3-fenyl-1-propanolu, a po zahřívánín reakční směsi při teplotě 90,0°G po dobu 12 dnů, a po následné lyofilizaci, připraveno 0,015 g žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě žlutavo-hnědě zbarvené, pevné látky.

LC/MS System E:

R = 2,64 minutyj m/z = 566,0 MH⁺;

v

Příklad, 165

Příprava (2R_r3E'_T4S,.5S)-2-£ 6-(2,2-difeny1-ethylamino)-2-/2( pyridin-2-yl-amino)-ethylamino/-purin-9-yl^ -5-(3-ethyl-Lsoxazol-5-yl)-tetrahydro-fursn-3,4-diol-diformiátu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 1), bylo za použití 0,047 g,( 0,344 mmolu), 2-(pyridin-2-vl-amino) ethylaminu, a po zahřívání reakční směsi při teplotě 92,O°G, po dobu 4 dnů, a po následné lyofilizaci, připraveno 0,004 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě hnědě zbarevené pevné látky.

LC/MS System B:

R^ - 4,27 minutyj m/z - 648,0 MH⁺;

·

9 •

Příklad 17)

Příprava (2R,3R,4S,5S)-2-/6-(2,2-difeny1-ethylamino)-2-(1Shydroxymethyl-2-fenyl-ethylamino)-purin-9-yl/-5-(3-ethyl-isoxazol-5-yl )-te trahydro-f uran-3,4;-diol-f ormiátu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 1), bylo za použití 0,104 g,( 0,688 mmolu), (S)-(-)-2-amino-3fenyl-1-propanolu, a po zahřívání reskční směsi při teplotě 92,O°CL, po dobu 9 dnů, a po následné lyofilizaci, připraveno 0,0054 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny,, ve formě hnědě zbarvené_v pevné látky.

LC/MS System B:

R^ - 4,67 minutyj m/z - 662,0 MH ;

Příklad 18)

Příprava 4—(2— ^6-amino-9-/5S-(3-ethyl-isoxazol-5-yl)“3R,4Sdihy droxy-te trahydro-f uran-2R-yl/-9H-purin-2-yl-amino^-ethyl )benzensulfonamidu. formiátu

Bo roztoku 0,13 g,( 0,28 mmolu),_: 4R-acetoxy-2R-(2,6-dichlor-purin-9-yl)-5S-(3-ethyl-isoxazol-5-yl)-tetrahydro-furan3R-yl- esteru kyseliny octové, t.j. Meziproduktu 3), získaného v rámci výše popsaného postupu přípravy, v 10,0 ml, tetrahydrofuranu, bylo za stálého míchání, v atmosféře dusíku, a při teplotě minus 78,0°C, nakondenzováno cca 20,0 ml plynného amoniaku, a vzniklá reakční směs byla míchána při teplotě míst nosti přes noc.Po odpaření směsi za vakua, bvlo získáno 0,153 g, žlutě zbarvené látky, pěnovitého charakteru.

• · · ·

Jedna šestina tohoto materiálu, ( 0,0255,>g) hýla zahřívána spolu se O\O69 g,( 0,344 mmolu),_; 4-(2-aminoethyl)-benzensulfonamidu v 0,20 ml, dimethylsulfoxidu, při teplotě 92,O°C, po dobu 4 dnů. Výsledný surový produkt byl přečištěn autopreparativní vysokovýkonnou kapalinovou chromátografií,(HPLC) a po následné lyofilizaci bylo získáno 0,002 g, žádané, v nad pise uvedené sloučeniny, ve formě slabě hnědě zbarvené,pevné látky.

LC/MS System B:

B_t = 3,47 minut; m/z = 531_r0;

Příklad 19)

Příprava (2R,3R,4S,5S)-2-/2-( trans-4-amino-cyklohexylamino)6-(2,2-difenyl-e thylamino)-purin-9-yl/-5-(3-ethyl-isoxazol-5yl)-te trahydro-furan-3,4-diol-diformi átu

-Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 4), bylo za použití 0,032 g,( 0,28 mmolu), trans-cyklohexan-1,4diaminu, a po zahřívání reakční směsi při teplotě 90,0°C, po dobu 5 dní, a po následné lyofilizaci, získáno 0,005 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě slabě hnědě zbar vené, pevné látky.

LC/MS System B:

R = 2,62 minuty; m/z = 625,0 MH⁺;

• · • · ·

Příklad 20)

Příprava (2S,.3S,,4R,,5S)-2-(3-ethyl-isoxazol-5-yl)-5- { 6— < 3— jod-benzylamino )-2-/2-(1-me thyl-1H-imidazol-4-y1)-e thylamino/purin-9-ylJ -tetrehydro-furan-3 ,4-diol-diformiátu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 4), bylo za použití 0,013 g,( 0,056 mmolu), 3-jodbenzylaminu, 8 0,035 g,( 0,28 mmolu), 2-(1-methyl-lH-imidazol-4-yl)-ethylaminu,(připraveného z příslušného dihydrochloridu neutralizací s mírným nedostatkem pevného hydroxidu sodného v methanolu), a odpařením těkavých složek z reakční směsi v proudu dusíku při teplotě 90,0^0, po dobu 5 dní, získáno po následné lyofilizaci 0,011 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve for-r mě slabě hnědě zbarevné, pevné látky.

LC/MS System A:

R^ = 3,64 minuty; m/z = 672,0 MH⁺;

Příklad; 21 )

Příprava (2K,3R,4S,5S)-2-{ 6-(2-cyklohexyl-ethylsmino)-2-/2(1-methyl-1H-imidazol-4-yl)-ethylamino/-purin-9-ylJ -5-( 3e thy1-i s oxa z ol-5-y1)-1etrahydro-furan-3,4-di ol-dif ormi átu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 4), bylo za použití 0,007 g,( 0,056 mmolu), 2-cvklohexylethylaminu, a 0,035 g,( 0,28 mmolu ), 2-(1-methyl-1H-imidszol-4-yl)ethylaminu,( připraveného z příslušného dihydrochloridu neutralizací s mírným nedostakem pevného hydroxidu sodného v methanolu), a odpařením těkavých složek z reakční směsi v proudu dusíku, při teplotě 90,0°C, po dobu 5 dnů, získáno po následné lyofilizaci 0,009 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě slabě hnědě zbarvené_r pevné látky.

LG/MS System A::

R = 3,70 minuty; m/z - 566,0, MH⁺;

Příklsd 22)

Příprava (2R_ř3R,.4S _r5S )-2-/6- (2-cvklohexyl-ethylamino )-2-(1Shydroxy-methy1-2-fenyl-ethylamino)-purin~9-y1/-5-(3-ethy1-isoxazol-5-yl)-tetrahydro-furan-3,4-diolu. formiátu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 4), bylo za použití 0,007 g, ( 0,056 mmolu),, 2-cyklohexylethylaminu, a (S)-(-)-2-amino-3-fenyl-1-propanolu_r a po zahřívání reakční směsi nejpreve při teplotě 90,0°C, po dobu SP dnů, a poté ještě při teplotě 100,0°C, po dobu 3 dnů, a následné, konečné lyofilizaci, připraveno 0,006 g, žádané,, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě slabě hnědě zbarvené, pevné látky.

LC/MS System A::

R_t = 4,53 minutyj m/z = 592,0, MH⁺;

Příklad 23)

Příprava N.-(2-| 6-( 2,2-difenyl-ethylamino)-9-/5S-(3-ethylisoxazol-5-yl)-3R,4S-dihydroxy-tetnahydro-fur8n-2K-yl/-9H-purin

2-yl-aminoJ-ethyl)-guanidinu» diformiátu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 4), bylo za použití 0,017 g, ( 0,28 mmolu), ethylendiaminu, a po zahřívání reakční směsi při teplotě 90,0°c, po dobu 2 dnů, a po následné lyofilizaci, připraveno 0,009 g,( 2R,3R,4S,5S)-2/2-(2-amino-ethylamino )-6-(2,2-difeny1-ethylamino)-purin-9-yl/5-(3-ethyl-iisoxazol-5-yl)-tetrahydro-furen-3,4-diolu. diformiátu, ve formě slabě hnědě zbarvené, pevné látky.

LC/MS' System A:

R = 2,61 minutyj m/z = 571,0, MH⁺;

V předcházející, výše popsané operaci získaný amin, byl zahříván s 0,002 g,( 0,03 mmolu), imidazolu, a s 5,0 mg,(0,03 mmolu), IH-pyrazol-karboxiamidinu. hydrochloridu, ve směsi 0,25 ml, vody,, a 0,25 ml, ethanolu, při teplotě 62,0°C, po dobu 24,0 hodin. Po odstranění rozpouštědla byl vzniklý zbytek přečištěn autopreparativní vysokovýkonnou plynovou chromátografií

%· (HPLG). a po následné lyofilizaci, bylo získáno 0,001 g_r žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě slabě hnědě zbarvené,, pevné látky.

LC/MS System A:

R - 3,84 minuty; m/z - 613,0 MH⁺;

v

Příklad; 24)

Příprava N-(4-£ 6-(2,2-difenyl-ethylamino)-9-/5S-(3-ethyl-iiSoxazol-5-yl)-3R,4S-dihydroxy-tetrahydro-furan-2R-yl/-9H-purin-2· yl-amino^- cyklohexyl)-acetamidu. formiátu

V nadpise uvedená, žádaná sloučenina, byla v množství 0,003 g, ve formě slabě hnědě zbarvené, pevné látky, jako vedlejší produkt reakce, popsané výše v rámci Příkladu 19), a po následné lyofilizaci, jsko posledního stupně izolace zmíněné sloučeniny, připravena.

LC/MS'System B:

R - 3,02 minutyj m/z - 667,0 MH⁺;

Příklad 25)

Příprava methylemidu kyseliny 2-/9-/5S-(3-ethyl-isox_Pzol-5-yl)3R,4S-dihydroxy-tetrehydro-furan-2R-yl/-2-(2-guanidin-ethylamino)¹

9H-purin-6-yl-amino/-eth8nsulfonové, diformiátu • ·♦· ·· · ·♦ ;

• · ·· ς í *:

• · * ϊ Σ i ; ι · · ♦ ·

·. ... .· ···

7?

Analogickým postupem, popssným výše v rámci Příkladu 9), bylo za použití 0,041 g„( 0,35 mmolu), methylamidu kyseliny 2-aminoethyIsulfonové, a po lyofilizaci,, připraveno 0,013 g, Žádané,, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě hygroskopické, £mědě zbarvené, pevné látky.

LC/MS System A:

R = 3,38 minuty; m/z - 554,0 MH⁺;

t

Příklad 26)

Příprava N-(2-{ 6-(1,1-dioxo-hexahydro-1-l8mbda-6-thiopyran4-yl-amino)-9-/5S~(3-ethyl-isoxazol-5-yl)-3R,4S~dihydroxy-tetrahydro-furan-2R-yl/-9H-purin-yl-aminoJ -ethyl)-guanidinu. diformiátu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 9), bylo za použití 0,052 g,( 0,35 mmolu), 1,1-dioxo-hexahydro-1lambda-6-thiopyran-4-yl-8minu, 8 po zahřívání reakční směsi při teplotě 50,0°C, po dobu 4 dnů,, a poté ještě za přítomnosti 0,0:21· ?ml,( 0,32 mmolu), ethylendiaminu, při teplotě 90,0°C po dobu 5 dnů, a po následné konečné lyofilizaci, připraveno 0,002 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě oranžovo-hnědě zbarvené, pevné látky.

LC/MS System B:

R^ « 2,31 minuty; m/z - 565,O,MH ;

····

444 »4

4

9

9·9

Příklad 27)

Příprava methylamidu kyseliny 2-/9-/5Si(3-ethyl-isoxszol-5-yl)3R,4S-dihydroxy~tetrahydro-furan-2H-yl/-2-(1S-hydroxymethyl-2feny1-e thylamino) -9H«purin-6-y l-amino/-e thansulf onové... f ormi átu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 10), bylo za použití 0,048 g,( 0,35 mmolu), methylamidu kyseliny 2-aminoethylsulfonové, a velkého přebytku (S)-(-)-2-amino-3fenyl-1-propanolu,_: a po zahřívání reakční směsi při teplotě 90,0°C, po dobu 12 dnů, a následné konečné lyofilizaci, připraveno 0,014 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě žlutavě-hnědě zbarvené, pevné látky.

LC/MS System A:

R - 3,88 minutyJ m/z = 603,,0 MH⁺J v

Příklad 28)

Příprava 1-£ 4-/9-/5S-(3-ethyl-isoxazol-5-yl)-3R,4S-dihvdroxytetrahydro-furan-2R-yl/-2-(1S-hydroxymethyl-2-fenyl-ethylamino)9H-purin-6-yl-emino/-piperidin-1-yl^ -ethanonu. formiátu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 10), bylo za použití 0,050 g, (0,35 mmolu), 1-(4-aminopiperidin-1-yl) ethanonu, a velkého přebytku (S)-(-)-2~amino-3-fenyl-1-propanolu, a po zahřívání reakční směsi při teplotě 90,0°G, po dobu 12 dnů, a konečné následné lyofilizaci, připraveno 0,022 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě hygroskopické, hnědě zbarvené, pevné látky.

LC/MS System Bi

R - 2,57 minuty; m/z = 607,0 MH⁺;

Příklad 29)

Příprava 1-(&-{ 2-( trans-4-amino-cyklohexylamino)-9-/5S-(3ethyl-isoxazol-5-yl)-3R,4S-dihydroxy-tetrahydro-furan-2R-yl/9H-purin-6~yl-amino^ -piperidin-1-yl)-ethanonu. diformiátu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 10),_:bylo za použití 0,050 g,( 0,35 mmolu), 1-(4-aminopiperidin-1yl)-ethanonu, a 0,037 g,(O,32 mmolu), trans-cyklohexan-1,4-diaminu, a po zahřívání reakční směsi při teplotě 90,0°C po dobu 3 dnů, a konečné následné lyofilizaci, připraveno 0,013 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě hnědě zbarvené, pevné látky.

LC/MS System B:

R_t ~ 2,09 minuty; m/z - 570,0 MH⁺;

P ř í k 1 e di 30)

Příprava (2R,3R,4S,5S)-2-(3-ethyl-isoxazol-5-yl)-5-/3-(2-pyridin-2-yl-e thylamino)-6-(tetrahydro-thiopyran-4-yl-amino)-purin9-yl/-tetrahydro-furan-3,4-diolu, diformiátu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 1Q), /fOO

·«· ··· «>

bylo za použití 0,037 g,( 0,35 mmolu),. tetrahydro-thiopyran4-yl-aminu,₍ a 0,039 g,,( 0,32 mmolu),. 2-pyridin-2-yl-ethylaminu, a po zahřívání reakční směsi při teplotě 90,0°C, po dobu 7 dní, a následné konečné lyofilizaci,, připraveno 0,01 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě temně hnědě zbarvené, pevné látky.

LC/MS5 System ffi::

R^ = 2,41 minutyJ m/z = 553,0 MH⁺J

Příklad 351 )

Příprava (2R,3R„4S,5S )-2-/6-(1,1-dioxo-hexahydro-1-l8mbda-6thiopyran-4-yl-amino)-2-(2-piperidin-1-y1-ethylamino)-purin9-yl/-5-( 3-e thy1-i soxa zol-5-y1)-tetrahydro-furan-3,4-diolu. diformiátu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 10), bylo za použití 0,052 g,( 0,35 mmolu), 1,l-dioxo-hexahydro-1lambda-6-thiopyran-4-yl-eminu, a po zahřívání reakční směsi při teplotě 50,0°C, po dobu 4 dnů, a přidání 0,041 g,( 0,32 mmolu), 2-piperidin-1-yl-ethyl8minu, a dalším zahřívání reakční směsi při teplotě 90,Q°C po dobu 5 dnů, a následné konečné lyofilizaci, připraveno 0,006 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě slabě hnědě zbarvené, pevné látky.

LC/MS System B:

R ~ 2,17 minuty; m/z, = 591,0 MH⁺;

• ··· ··♦

999

Příklad 32)

Příprava (2R,3R,4S,5S)-2-/2-( trans-4-amino-cyklohexylamino)6-( 1,1-dioxo-hexahydro-1-lambda-6-thiopyran-4-yl-amino)-purin 9-y1/-5-(3-ethyl-isoxazol-5-yl)-tetrahydro-furan-3,4-diolu. diformiátu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 10), bylo za použití 0,052 g,( 0,35 mmolu), 1,l-dioxo-hexahydro-llembda-ó-thiopyran^-yl-aminu, a po zahřívání reakční směsi při teplotě 50,0°G,, po dobu 4 dnů, a přidání 0,037 g,( 0,32 mmolu), trans-cyklohexan-1,4-diaminu, a delším zahřívání reakční směsi při teplotě 90,0°c, po dobu 5 dnů, 8 následné konečné lyofilizaci, připraveno 0,008 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě slabě hnědě zbarvené, pevné látky.

LC/MS System :

R_t = 2,12 minutyJ m/z - 577,0 MH⁺;

Příklad 33> a 33B)

Příprava N-(2-^ 6-(1-acetyl-piperidin-4-yl-amino)-9-/5S-(3ethyl-isoxazol-5-yl)-3R>4S-dihydroxy-tetrahydro-furan-2R-yl/purin-2-yl-aminoJ -ethyl)-guanidinu, ve směsi 1,0 : 1,0, se

N-^2-/9-/5S-(3-ethy1-isoxazol-5-yl)-3Ry4S-dihydroxy-tetrahydro furan-2R-y1/-6-( piperidin-4-yl-amino)-9H-purin-2-yl-amino/ethylř -guanidinem. diformiátem

999· ♦· • · · ··· ♦ ·

9· · • * ·

9 · · ·

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 9), bylo za použití 0,050 g, ( 0,35 mmolu), 1-(4-aminopiperidin-1-yl) ethanonu, a po provedení konečné lyofilizace, připraveno 0,003 g směsi, ( 1,0 : 1,0), v nadpise uvedených., sloučenin, ve formě slabě hnědě zbarvené, pevné látky.

LC/MS System B::

R - 2,25 a 2,13 minuty’, m/z = 558,0 a 516,0 MH⁺;

Příklaďy 34A) a 34B)

Příprava (2S,3S,4R,5R)-2-(3-(3-ethyl-isoxazol-5-y1)-5-/2-(1Shydr oxymethy1-2-fenyl-ethylamino)-6-( tetrahydro-thiopyran-4y1-amino)-purin-9-yl/-te trahydro-furen-3,4-diolu, ve směsi 1,0 : 1,0 se (2S, 3S ,,4B,,5R) -2- (3-e thyl-isoxazol-5-y 1 )-5-/2- (1 S-hydroxyme thyl2-fenyl-ethylamino)-6-(1-oxo-hexahydro-l-lambda-4-thiopyran-4yl-amino)-purin-9-yl/-tetrahydro-furan-3,4-dioelem. formiátem

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 10), bylo za použití 0,052 g,( 0,35 mmolu), tetrahydro-thiopyran-4yl-aminu,, a velkého přebytku (S)-(-)-2-8mino-3>fenyl-1-propanolu, a po zahřívání reakční směsi na teplotu 90,0°C, po dobu 12 dnů, připraveno pó'následné, konečné lyofilizaci, 0,008 g, směsi v nadpise uvedených, žádaných sloučenin, ve formě oranžovo-hnědě zbarvené, pevné látky.

LC/MS System B:

R = 2,90 minuty, a 2,50 minuty; m/g =

582,0 a 598,0’, • ••Φ φφ φφ · φ φφφ φ φ φ φ φφφ φφφ

Pří kle d. 35)

Přípravě (2S'^;,3S',4R,5B)-2-(3-ethyl-isoxazol-5j-yl)-5-/6-( 1 -ethylpropylamino)-2-(1S-hydroxymethyl-2-feny1-ethylamino)-purin~9yl/-tetnshydro-furan-3,4-diolu. formiátu

Směs, připravená smícháním 0,046 g, ( 0,09 mmolu), 4R-acetoxy-2R-/2-chlor-6-(1-ethyl-propylamino)-purin-9-yl/-5S-(3ethyl-isoxazol-5-yl)-tetrahydrofuran-35-yl esteru kyseliny octové, t.j. Meziproduktu 8), získaného v rámci výše popsaného postupu přípravy, 8 0,130 g,( 0,89 mmolu)_t 3-(S)-(-)-2-amino3-fenyl-propanolu, v 0,50 ml, bezvodého dimethylsulfoxidu, by(r) zahřívána v uzavřené reakční trubici,( na př. Reacti-vial ), při teplotě 90,0°C, po dobu 175,50 hodiny.

Poté, co bylo ku směsi přidáno dalších 0,130 g,( 0,89 mmolu), 3-(S)-(-)-2-amino-3-fenyl-propanollu, byla reakční směs zahřívána při teplotě 90,0°G, po dobu 67,0 hodin. Poté byla reakční směs neředěna se směsí acetonitrilu, a vody, (1,0 . 1,0), obsahující 0,1% kyseliny mravenčí, až na objem 2,0 ml, byla přečištěna pomocí autopreparativní vysokovýkonné kapalinové chromatografie,( HPCL), 8 poté byla lyofilozovánaBylo získáno 0,017 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě krémově zbarvené,, pevné látky.

LC/MS System B:

R - 2,91 minuty; m/z = 552,0 MH⁺J v

Příklad 36)

• ···♦ a a	99 9 9	9 9 9	99 9 9	9 9
• · · · • 9 y ·	9 9 9 9 9 • 9	9 9 9	9 9 9 9 · 9 9
• 9 999	99	999	99	9 9

Přiklaď 36)

Příprava (2S,3S',4R,5E.)-2-(3-ethy 1-isoxazol-5-y 1)-5-/6-(1-ethyl propylamino)-2-(pyrrolidin-3R-yl-amino)-purin-9-yl/-tetrshydro furan-3, 4-diolu. dif ormiátu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 35), bylo za použití 0,117 g,( 0,89 mmolu), (3R)-(+)-3-sminopyrrolidinu, a po zahřívání reakční směsi při teplotě 90,0°C po dobu 177,50 hodiny, a konečné následné lyofilizaci, připraveno 0,020 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě béžové zbarevné, pevné látky,

LC/MS System EB:.

- 2,35 minutyj m/z = 487,0 MH⁺;

Příklad 37)

Příprava (2S,3S,4R,5E)-2-(3-ethyl-isoxazol-5-yl)-5-/6-(1-ethyl propylamino)-2-(2-pyridin-2-yl-ethylamino)-purin-9-yl/-tetrahydro-furan-3,4-diolu. diformiátu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 36), bylo za použití 0,110 g,( 0,89 mmolu), 2-(2-aminoethyl)-pyridi nu, a po zahřívání reakční směsi při teplotě 90,0°C, po dobu 177,50 hodiny, a konečné následné lyofilizaci, připraveno 0,020 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě béžové zbarvené, pevné látky.

LC/MS System ®:;

E_t = 2,44 minutyj m/z = 523,0 MH⁺;

• 000 • · 0

000

0 0 0 00 0 0« 0«· • 00

0«·

Přiklaď 38)

Příprava (2S,3S,4R,5R)-2-(3-e thy1-i soxa z ol-5-y1)-5-/6-(1-ethy1pr opy lamino )-2-( 2-morf olin-4-y 1-e thy lamino) -purin-9-y 1/- te trahydro-furan-3j4- diolu. diformiátu

Směs, připravená smícháním 0,020 g, ( 0,045 mmolu), (2R, 3R,4S,5S)-2-/2-chlor-6-(1-ethy1-propylamino)-purin-9-yl/-5( 3-ethyl-isoxazol-5-yl)-tetrahydro-furan-3,4-diolu, t.j. Meziproduktu 14), získaného v rámci výše popsaného postupu přípravy, a 0,060 g,( 0,46 mmolu), 2-ethylamino-morfolinu, ve 0,50 ml, dimethyIsulfoxidu, byla zahřívána při teplotě 90,0°C, po dobu 19,0 hodin, v uzavřené reakční trubici, ( na př. Reactiv vial^(R)).

Poté byla reakční směs naředěna se směsí acetonitrilu a vody, ( 1,0 : 1,0), obsahující 0,1% kyseliny mravenčí, až na objem 2,0 ml, 8 poté byla přečištěna pomocí autopreparativní vysokovýkonné kapalinové chromátografie,( HPLC), a následně byla lyofilizováne.

Bylo získáno 0,017 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě béžově zbarvené, pevné látky.

LC/MS System :

R^ « 3,57 minutyj m/z = 531,0 MH⁺;

Přiklad 39)

Příprava (2R, 3R,.4S, 5S )-2-/2- (trans-4-amino-cvklohexylamino)-6( 1-ethy1-propylamino)-purin-9-y1/-5-(3-e thy1-i s oxe z ol-5-y1)te trahydrofuran-3,4-diolu. diformi átu

8999 • · 9

9

9 ·

99

9

9 9

9« 999

Anslogickým postupem, popssným výše v rámci Příkladu 35),. bylo za použití 0,101 g,( 0,89 mmolu), trans-1,4-diaminocyklohexanu, s po zahřívání reakční směsi při teplotě 90,0°C.po dobu 177,50 hodiny, a dalším přidání 0,101 g,( 0,89 mmolu), trans

1,4-diaminocyklohexanu, a zahříváním reakční směsi při teplotě 90,0°C, po dobu 67,0 hodin, a následné? konečné lyofilizaci, připraveno 0,017 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě hnědě zbarvené, pevné látky.

LC/MS System B:

R^ = 2,21 minutyj m/z - 515,0 MH⁺J

Příklad 40) ^říprava N-2-/9-/5S-(3-ethyl-isoxazol-5-yl)-3R,4S-dihydroxyte trahydrofuran-2R-y1/-6-(1-e thy1-propylamino)-9H-purin-2-y1amino/-ethyl^ -guanidinu. diformiátu

Analogickým postupem^, popsaným-výše v rámci Příkladu 35), byla za použití 0,054-g,( 0,89 mmolu), připravena reakční směs, která byla zahřívána-při teplotě 90,0°C, po dobu 86,50 hodiny.

Poté.bylo ku reakční směsi přidáno 0,061 g,(0,89 mmolu), imidazolu, a 0,132 g,( 0,89 mmolu), 1H-pyrazolkarboxamidinu, a tato směs byle zahřívána při teplotě 90,0°C, po dobu 18,0 hodin.

Po následné konečné lyofilizaci bylo získáno 0,015 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě krémově zbarvené, pevné látky.

LC/MS System A:

R - 3,45 minutyj m/z = 503,0 MH⁺J ·· «·· • · • · ·*· ·<· ·· »··

Příklad 41)

Příprava (,2R,3R,4S,5S )-2-/6-(3,3-dime thy 1-buty lamino )-2-(2piperidin-1-y1-ethylamino)-purin-9-y1/-5-(3-ethyl-isoxazol-5y1)-te trahydro-furan-3,4-di olu. diformiátu

Směs, připravená smícháním 0,025 g, 4R-acetoxy-2R-(2,6di chlor-purin-9-yl)—5S—(3-e thy1-i s oxa zol-5-y1)-te trahydro-furan-3R-yl esteru kyseliny octové, t.j.Meziproduktu 3), získaného v rámci postupu přípravy popsaného výše, dále 0,005 g,

3,3-dimethylbutylaminu, a 0,007 g, N,N-diisopropylethylaminu, ve 0,70 ml, isopropanolu, byla ponechána stát v klidu při teplotě místnosti po dobu 16,0 hodin.

Poté, po odstranění rozpouštědla, bylo ku zbytku přidáno

0,05 ml, 2-piperidinethylaminu, a 0,05 ml, dimethylsulfoxidu, a vzniklá reakční směs byla zahřívána v uzavřené reakční tru(R) bici,( na př.Reacti-vial ), při teplotě 90,0 C, po dobu 32,0 hodin. Poté, po přidání 0,05 ml, 2-piperidinethylaminu, byla reakční směs zahřívána při teplotě 110,0°C po dobu dalších 16,0 hodin,

Po přečištění pomocí autopreparativní vysokovýkonné kapalinové chromá tograf ie , ( HPLC), 8 následném vymražení lyofiliZ8cí, bylo získáno 0,005 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě žlutě zbarvené, pevné látky.

LG/MS System A:

R_t = 3,52 minutyj m/z = 543,0 MH⁺;

Příklad 42)

Ί0ί

Příprava (2R,3R,4S,5S)-2-/6-(3,3-dimethy1-butylamino )-2-(2morfolin-4-yl-ethylamino^-purin-9-y1/-5-(3-ethyl-isoxazol-5yl)-te trahydro-furan-3,4-diolu,diformiátu

Analogickým postupem, popsaným výše y rámci Příkladu 41), bylo za použití 0,05 ml, 4-(2-aminoethyl)-morfolinu, a po zahřívání reakční směsi při teplotě 90,0°G po dobu 32,0 hodin, a dalším přidání 0,05 ml, 4-(2-aminoethyl)-morfolinu, a dalším zahřívání reakční směsi při teplotě 11O,O°C po dobu 16,0 hodin, a konešné lyofilizaci, připraveno 0,004 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě bkeděhnědě zbarvené, pevné látky.

LC/MS System B:

R_t = 2,48 minuty*, m/Z = 545,0 MH⁺;

Příklad 43)

Příprava (2R,3R,4S,5S)-2-f 6-henzylamino-2-/2-( 1-methyl-1Himidazol-4-yl)-ethylamino/-purin-9-ylJ -5-(3-ethyl-isoxazol5-.yl)-te trahydro-furan-3,4-diolu. dif ormiátu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 41), bylo za použití 0,006 g, benzylaminu, a zpracování reakční směsi při teplotě místnosti po dobu 16,0 hodin, a poté, po přidání 0,033 g, 2-(1-methyl-1H-imidazol-4-yl)-ethylaminu, a po zahřívání reakční směsi při teplotě 90,0°C, po dobu 32,0 hodin, a dalším přidání 0,033 g, 2-(1-methy1-1H-imidazol-4-yl)-ethy1eminu, a dalším zahřívání reakční směsi při teplotě 110,0°C po dobu 16,0 hodin, a následné lyofilizaci, připraveno 0,009 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě krémově zbarvené látky.

LC/MS Sytém A;;

R_t = 3,43 minutyj m/z - 546,0 MH⁺;

Přiklaď 44)

Příprava (24,3R,4S, 5S)-2-/6-benzylamino-2-(2-piperidin-1 -yle thylamino)-purin-9-y1/-5-(3-e thy1-i s oxa zol-5-y1)-te trahydrofuran-3,4-diolu. diformiátu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 41) bylo za použití 0,006 g, benzylaminu, a při zpracování reakční směsi při teplotě místnosti po dobu 16,0 hodin, a poté, po přidání 0,05 ml, 2-piperidinethylaminu, a po zahřívání reakční směsi při teplotě 90,0°C, po dobu 32,0 hodin, po dalším přidání 0,05 ml, 2-piperidinethylaminu, a zahřívání reakční směsi při teplotě 110,0°C po dobu 16,0 hodin, a následné konečné lyofilizaci, bylo získáno 0,005 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě bleděžlutě zbarvené, pevné látky

LC/MS System B;

R = 2,48 minutyj m/z = 549,0 MH⁺;

Příklad 45)

Příprava (2S,3S_ř4R_t5R)-2-(3-ethy1-isoxazol-5-y1)-5-/6-(1Shydroxyme thy1-2-feny1-ethylamino)-2-(2-piperidin-1-yl-e thyl • ··« • · ·

4?o

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 41), bylo za použití 0,008 g, (S)-(-)-2-amino-3-fenyl-1-propanolu, a po zpracováni reakční směsi při teplotě místnosti po dobu 16,0 hodin, a poté po přidání 0,05 ml, 2-piperidinethy laminu , a zahříváni reakční směsi při teplotě 90,0°C po dobu 32,0 hodin, a.pojdalším přidání 0,05 ml, 2-piperidinethylaminu, a delším zahřívání reakční směsi při teplotě 110,0°C po dobu 16,0 hodin, a následné lyofilizaci, připraveno 0,006 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě bledě žlutě zbarvené, pevné látky.

LC/MS System BY

R^ - 2,40 minutyj m/z = 593,0 MH⁺;

Př í k 1 8 d 46)

Rříprava (2R,3R,4S,5S)-2-/2-( cyklopentylamino)-6-(1-ethy1propylamino)-purin-9-yl/-5-(3-ethy1-isoxazol-5-yl)-tetrahvdrofuran-3,4-diolu. formiátu

Roztoky připravený smícháním 0,206 g, ( 0,472 mmolu), (2S, 3S,4R,5R)-2-(3-ethyl-isoxazol-5-y1)-5-/2-(2-piperidín-1-yle thylamino)-6-( tetrahydro-pyran-4-yl-amino)-purin-9-yl/*te trahydro-furan-3,4-diolu. doformiátu, t.j. Meziproduktu 14), získaného postupem přípravy popsaným výše, se 2,20 ml, vysušeného dimethylsulfoxidu, byl v množství 0,10 ml_r( 0,021 mmolu),. přidán, ku 0,011 g,( 0,126 mmolu), cvklopentylaminu, předloženého v uzavřené reakční trubici, ( na př.Reacti-vial '), o objemu 1,0 ml,

Poté byla reakční směs zahřívána při teplotě 90,0°C, po dobu 114,75 hodiny, a výsledný surový produkt byl přečištěn ····· ·· · · · • · · ···· ··· • · · · ·· · · · • ···· · · · ··· ··· ·· ··· ·· ·♦· pomocí autopřeparativní vysokovýkonné kapalinové chromatogřafie„ (HPLC), a následnou lyofilizaci, a bylo získáno 0,00-1 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě bíle zbarvené, pevné látky.

LC/MS'· System Et:

R^ s 3,07 minuty; m/z = 486,0, MH⁺*

Příklad 47)

Příprava (2R, 3H,.4S, 5S )-2-,/2·» (3,4-dime thoxyfenyl-ethylamino )-6(1-ethyl-propylemino)-purin-9-yl/-5-(3-ethyl-isoxazol-5-yl)-tetrahydro-furan-3,4-diolu. formiátu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci předcházejícího Příkladu 46), bylo za použití 0,023 g,( 0,126 mmolu), 3,4dimethoxyf enyl-e thy laminu, a po zahřívání re akční¹·? směsi při teplotě 90,0°C, po dobu 73,50 hodiny, a následné konečné lyofilizaci, připraveno 0,003 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě bíle zbarvené, pevné látky.

LC/MS System A'·.:

R = 4,28 minutyj m/z = 582,0, MH⁺;

Příklad 48)

Příprava (2R.3R,4S,5S)-2-/2-/2-(4-tetrahydropyranyl)-amino)-6 (1-ethyl-propylamino)-purin-9-yl/-5-(3-ethyl-isoxazol-5-yl)tetrahydro-furan-3,4-diolu.formiátu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 46), bylo za použití 0,013 g,( 0,126 mmolu), tetrahydro*pyran-4-y1aminu, a po zahřívání reakční směsi při teplotě 90,0°C po dobu 204,75 hodiny, 8 dalším přidání 0,013 g,(0,l26 mmolu), tetrshydro-pyran-4-yl-aminu, a zahříváním reakční směsi při teplotě 110,0°C po dobu dalších 67,0 hodin, a následné konečné lyofilizaci, připraveno 0,001 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě slabě hnědě zbarvené, pevné látky.

LC/MS System B:

R = 2,73 minuty; m/z = 502,0 (MH5⁺J v

Příklad 49)

Příprava (2R,3R,4S,5S)-2-/2-(1-benzyl-pyrrolidin-3S-1-yl-8mino)6-(1-ethy1-propylamino)-purin-9-yl/-5-(3-e thyl-isoxazol-5-yl)tetrahydro-furan-3,4-diolu. formiátu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 46), bylo za použití 0,022 g,( 0,126 mmolu), (3S)-(+)-1-benzyl-3aminopyrrolidinu, a po zahřívání reakční směsi při teplotě 90,0°C, po dobu 204,75 hodiny, připraveno po konečné následné lyofilitaci, 0,006 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě slabě hnědě zbarvené, pevné látky.

LC/MS System B:

R_t - 2,59 minuty; m/z = 577,0 MH⁺;

φ φ φ · • · · · ·· · · · • · · · · φ φ · φ φ φ φ · φ · · φφφφφφ φφ φ φ φ φ φ

Příklad 5©)

Příprava 5-(52-/ 6-(1-ethyl~propylamino)-2-/2-(1-methyl-1Himidazol-4-yl)-ethylamino/-p.urin-9-ylX -3S_r4R^dihydroxy-tetrahydro-furan-2S-yl)-isoxazol-3-karb8ldehyd-oximu. diformiátu

Siněs, připravená smícháním 0,016 g, ( 0,13 mmolu), N-hydroxy-2-hydroxyimino-acetimidoy1-chloridu, 8 0,02 g,( 0,044 mmolu), (2R,3R,.4S,5R)-2-£ 6-( 1-ethy1-propylamino )-2-/2-(1me thy1-1H-imidazol-4-y1)-e thylamino/-purin-9-ylj -5-ethinyltetrahydro-furan-3,4-diolu, t.j. Meziproduktu 28), získaného v rámci postupu přípravy popsaného výše, ve 2,0 ml, ethylacetátu,,, a 0,10 ml, vody,, byla intenzivně míchána spolu s 0,081 g, (0,96 mmolu), pevné formy hydrogenuhličitanu sodného, při teplotě místnosti.

Poté,., co byla vzniklá reakční směs míchána po dobu 169,50 hodiny,, bylo přidáno dalších 0,032 g, (0,26 mmolu), N-hydroxy2-hydroxyiminoacetimidoy1-chloridu, dále 0,162 g, pevné formy hydrogenuhličitanu sodného, 8 0,10 ml vody, e stejné množství po 4 dnech. Po uplynutí dalších 20,0 hodin, byla reakční směs neředěna s 5,0 ml, vody, a poté byla 2x extrahována vždy se 3,0 ml, ethylacetátu.

Po oddělení organické a vodné fáze, byly spojené organické extrakty odpařeny, a výsledný surový produkt byl přečištěn autopreparativní vysokovýkonnou kapslinovou chromátogragií, a po následné lyofilizaci, bylo získáno 0,001 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě krémově-bíle zbarvené,, pevné látky.

LC/MS System C:

= 2,25 minutyj m/z - 541,0,, MH⁺J • ···· ♦ · · ·· · • · · · · · · · · · · • · · · · · · · · · • · ··· · · ···

Příklad 51 )

Příprava (2S,3S,4R,5R)-2-(3-ethyl-is oxazol-5-y1)-5-/6-(1Shydroxymethyl-2-fenyl-ethylamino)-2-(2-morfolin-4-y1-ethylamino )-purin-9-yl/-tetrahydro-furan-3,4-diolu. diformiátu

Směs, připravená smícháním .0,025 g, 4R-acetoxy-2R-(2,6dichlor-purin-9-yl)-5S-(3-ethyl-isoxezol-5-yl)-tetrahydro-ďuran-3R-y1-esteru kyseliny octové, t.j,Meziproduktu 3), získaného v rámci postupu přípravy popsaného výše, dále 0,008 g, (S)-(-)-2-amino-3-fenyl-1-propanolu, a 0,007 g, N,N-diisopropylethylaminu, ve 0,70 ml, isopropanolu, byla ponechána stát v klidu při teplotě místnosti po dobu 16,0 hodin.

Poté, po odstranění rozpouštědla za vakua, bylo ku směsi přidáno 0,05 ml, 4-(2-aminoethyl)-morfolinu, a 0,05 ml, dimethylsulfoxidu, a tato reakční směs byla zahřívána v uzavřené reakční trubici, (na př. Reacti-vial^), při teplotě 90,0°c, po dobu 32,0 hodin.

Po přidání dalších 0,05 ml, 4-(2-aminoethyl)-morfolinu, byla reakční směs zahřívána při teplotě 110,0 C po dobu 16,0 hodin.

Po přečištění ( dvojnásobném), pomocí aUtopreparativní vysokovýkonné kapalinové chromátografie,(·(HPLC), následovaném lyofilizaci, bylo získáno 0,004 g,·žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě bíle zbarvené, pevné látky.

LC/MS System B:

R_t - 2,40 minutyj m/z ~ 595,0 (MH⁺)J

Příklad 52) ••••0 00 0 ·· ·

Příprava (2S,3S _r4R.,5R)-.2-(3-e thy1-i s oxa z ol-5-y1)-6-/6-benzylamino-2-(2-pyridin-2-y1-ethylamino)-purin-9-yl/-tetrahydrofuran-3,4-diolu. diformiátu

Směs, připravená smícháním 0,025 g, 4R-8cetoxy-2R-(2,6d i chlor-purin-9-y1)-5S-(3-e thy1-i s oxa z ol-5-y1)-1e trahydro-furan-3R-yl esteru kyseliny octové, t.j. Meziproduktu 3), získaného v rámci výše popsané přípravy, dále 0,006 g, benzylaminu, e 0,007 g, Ν,Ν-diisopropylethylaminu, v 0,70 ml, isopropanolu, byl8 ponechána stát v klidu při teplotě místnosti po dobu 16,0 hodin.

Poté, co bylo rozpouštědlo z reakční směsi za veka odstraněno, bylo ku směsi přidáno 0,05 ml, 2-(2-aminoethyl)-pyridinu, a 0,05 ml, dimethylsulfoxidu, a tato reakční směs byla zahřívána v uzavřené reakční trubici,( na př. Reacti-vial ), při teplotě 90,0°C, po dobu 32,0 hodin. Poté, po přidání 0,05 ml, 4-(2-aminoethyl)-morfolinu, byla reakční směs zahřívána při teplotě 11O,O°C po dobu dalších 16,0 hodin.

Po dvojnásobném přečištění pomocí autopreparativní vysokovýkonné kapalinové chromátografie,(HPLC), a následné lyofilizaci,, bylo získáno 0,002 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě krémově zbarvené, pevné látky.

LC/MS System? El

R?^ - 2,56 minutyj m/z - 543,0 (MH⁺);

Příklad 53)

Příprava (2S,3S„4R_r5R7-2-(3-ethy1-isoxazol-5>yl)-^ 6-(lAethylpropylamino )-2-/2-(pyridin-2-yl-amino)-ethylamino/-purin-9-ylJ -tetrahydro-furan-3,4-diolu.diformiátu

·· ··· ·· · ··

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 46), bylo ze použití 0,017 g,( 0,126 mmolu), 3-(pyridin-2-yl-amino)ethylaminu, a po zahřívání reakční směsi při teplotě 90,0°c, po dobu 73,50 hodiny, a následné konečné lyofilizaci,, připraveno 0,005 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny,, ve formě bíle zbarvené, pevné látky.

LC/MS System

- 3,41 minutyj m/z - 538,0 MH⁺*

Příklad 5:4)

Příprava (2R,3R_r4S_r5S)-2-/6-(1-ethyl- propylamino)-2-(2-piperidin-1-y1-ethylamino)-purin-9-y1/-5-/3-(1-hvdroxy-ethy1-isoxazol-5>yl/-tetrehydro-furan-3,4-diolu. diformiátu

Analogickým postupem, popsaným dále v rámci Příkladu 67), bylo za použití 0,022 g,( 0,04 mmolu), (2R,3R,4S,5S)-2-/2-chlor 6-(1-e thy1-propylamino)-purin-9-y1/-5-/3-(1-hvdroxy-e thy1)-i s oxazol-5-yl/-tetrehydro-furan-3,4-diolu,. t.j. Meziproduktu 23)_ř( získaného v rámci výše popsaného postupu přípravy), připraveno po následné, konečné lyofilizaci, 0,004 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě slabě hnědě zbarvené, pevmé látky.

LC/MS· System A:

R = 3,25 minuty; m/z = 545,0, MH⁺;

•··· 00 0 0 · 0

Příklad: 55)

Příprava (2R, 3R,-4S, 5S)-2-/6-(1-ethy1-propylamino)-2-(2-piperxdin-1-yl-ethylamino)-purin-9-yl/-5-(3-methyl-isoxazol-5-yl )▼ tetrahydro-furan-3,4-diolu. diformiátu

Analogickým postupem, popsaným dále v rámci Příkladu 67), bylo za použití 0,022 g,, 4B5^eé|€^^s2ífe-/2-ěhHj>*-6-(1-ethylpropylamino)-purin-9-yl/-5S-(3-methyl-isoxazol-5-yl)-tetrahydro furan-3R*-yl esteru kyseliny octové, t.j. Meziproduktu 20), ( 0,45 mmolu), ( získaného v rámci výše popsaného postupu přípravy), a po zahřívání reakční směsi v tepelném rozmezí od 90,0 do 95,O°C, po dobu 57,0 hodin, a po následné konečné lyofilizaci, připraveno 0,008 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě krémově-bíle» zbarvené,'•pevné látky.

LC/MS System A”:

R = 3,38 minuty J m/z - 515,0 MHiJ v

Příklad 56)

Příprava (2R_r3R>4S_r5S)-2-/6-(1-ethyl-propylamino)-2-(2-piperidin-1-yl-ethylamino)-purin-9-yl/-5-(3-propyl-isoxazol-5>-yl)tetrahydro-furan-3,4-diolu. diformiátu

Analogickým postupem, popsaným dále v rámci Příkladu 67), bylo za použití 0,027 g,( 0,045 mmolu), 4R-acetoxy-2R-/2-chlor6-( 1-ethyl-propylamino)-purin-9-yl/-5S-(3-propyl-isoxazol-5“ yl)-tetrahydro-furan-3R*-yl esteru kyseliny octové, t.j. Meziproduktu 21), získaného v rámci výše popsaného postupu přípravy, ~a po zahřívání reakční směs v tepelném rozmezí 90,0 až 95,O°C,

• • · « e	e · « · • • · ·	·* • · • ·	* • · •	• · · • · · · • · 9
		··	9 · ·	99 99

po dobu 57,0 hodin,, a po následné konečné lyofilizaci,, připraveno 0,01 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě krémově-bíle zbarvené, pevné látky,

LC/MS System A:

®t ~ 3,60 minutyj m/Z = 543,0, MH⁺J

P ř í k 1 a d 57)

Příprava (2R,3R, 4S,5S)-2-/6-(1-ethy1-propylamino)-2-(2-piperidin-1-yl-ethylamino)-purin-9-yl/-5-(3-hydroxymethy 1-i s oxa z ol5- yl)-tetrahydro-furan-3,4-diolu. diformiátu

Analogickým postupem, popsaným dále v rámci Příkladu 67), bylo za použití 0,028 g,( 0,051 mmolu), (2R,3R,4S,5S)-2-/2-chlor

6- (1-ethy1-propylamino)-purin-9-y 1/-5-( 3-hvdroxymethyl-isoxazol-5-yl)-tetrahydro-furan-3,4-diol-trifluoracetátu, t.j. Meziproduktu 24), získaného postupem přípravy popsaným výše, 8 po zahřívání reakční směsi při teplotě 95,O°C, po dobu 16,50 hodiny,., a po následné konečné lyofilizaci, připraveno 0,002 g, žádané,, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě hnědě zbarvené, pevné látky,

LC/MS System A;

= 3,21 minutyj m/z - 531,0, MH⁺J

Příklad 58)

Příprava (2R, 3R,4S'> 5S9-2- ^6-(1 -e thy 1-pr opy lamin o )-2-/2- (1 methyl-1H-imidazol-4-yl)-ethylamino/-purin-9-ylJ -5-/3-(1-hydroxy-ethyl)-isoxazol-5-yl/-tetrahydro-furan-3,4^diolu. diformiátu

Směs, připravená smícháním 0,022 g,(0,04 mmolu), (2R,3R, 4S,5S)-2-/2-chlor-6-(1-ethyl-propylamino)-purin-9-y1/-5-/3( 1-hydroxy-ethyl)-isoxazol-5-yl/-tetrahydro-furan-3,4.diolu, t.j. Meziproduktu 23), získaného postupem přípravy popsaným vý še,a 0,038 g,( 0,30 mmolu), 2-( 1-methyl-1H-imidezol-4-yl)ethylaminu, ( připraveného z příslušného dihydrochloridu neutralizací sjmírným nedostatkem pevného hydroxidu sodného v methanolu, a odpařením těkavých složek z reakční směsi v proudu dusíku, v 0,1 OD ml, vysušeného dimethylsulfoxidu, byla zahříř T?) vána v uzavřené reakční trubici,( na př, Beacti-vial , při teplotě 110,P°C, po dobu 28,50 hodiny.

Výsledný surový produkt byl přečištěn pomocí autopraparetivní vysokovýkonné kapalinové chromátografie,( HPLC), a po následné, konečné lyofilizaci, bylo získáno 0,001 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě slabě hnědě zbarvené, pevné látky.

LC/MS System A:

R^ - 3,17 minutyj m/z = 542,0, MH⁺;

Příklad) 59)

Příprava (2Ε,3Ε',43,53)-2-6-(1-ethy 1-propylamino)-2-/2-( 1methyl-1H-imida zol-4-yl)-e thylamino/-purin-9-y1J -5-(3-methy 1isoxazol-5-yl)-tetrahydro-furan-3,4-diolu. diformiátu

Ί2.0

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci předcházejícího Příkladu 58), bylo za použití 0,022 g,( 0,045 mmolu), 4Racetoxy-2R<-/2-chlor-6-( 1-ethy1-propylamino)-purin-9-y1/-5S(3-methyl-isoxazol-5-yl)-tetrahydro-furan-3R-yl-esteru kyseliny octové, t.j. Meziproduktu 20)_ř získaného postupem přípravy popsaného výše, a po zahřívání reakční směsi při teplotě 110,0 °S,. po dobu 28,50 hodiny, a následné konečné lyofilizaci, připraveno 0,0.19 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě Ctyněéě zbarvené, pevné látky.

LC/MS; System A:

R_t = 3,23 minutyJ m/z = 512,0, MH⁺J

Pří k 1 a d; 60)

Příprava (2R„3R_r4S,5S)-2-6-(1-ethy1-propy lamino )-2-/2-( 1methyl-1H-imida zol-4-yl)-ethylamino/-purin-9-y1^ -5-(3-propy1isoxazol-5-yl)-tetrtahydro-furan-3^4-diolu. diformiátu

Analogickým postupem, popsaným býše v rámci Příkladu 58), bylo za použití 0,027 g, ( 0,045 mmolu), 4R’-acetoxy-2R-/2-chlor 6-( 1 -ethy1-propylamino)-purin-9-yl/-5S-(3-propyl-isoxazol-5yl)-tetrahydro-furan-3R-yl esteru kyseliny octovéJct.j. Meziproduktu 21), získaného postupem přípravy popsaným výše, a po zahřívání reakční směsi při teplotě 11O,Ú°C, po dobu 28,50 hodiny, a následné konečné lyofiližaci, připraveno 0,011 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě krémově-bíle zbarvené,, pevné látky.

LC/MS System A:

R^ = 3,42 minutyJ m/z = 540,0, MH⁺J

42.4 • 4444 44 4 44 · •· · 4 444 4 444

4444 44 * 4 4 ·

44·· ···· ·

4444 444

444 444 44 444 44 444

P ř í k 1 8 ČC 61 )

Příprava t2R,3B,4S_r5S)-2- { 6 )(1-ethyl-propylamino )-2-/2-(0me thyl-1H-imida zol-4-yl)-e thylamino/-purin-9-y1^ -5-(3-hydroxy-methyl-isoxszol-5-yl)-tetrahydro-furan-3,4-diolu. diformiátu

Po.přípravu žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, byl použit analogický postup, popsaný výše v rámci Příkladu 58), kdy byla připravena směs smícháním 0,028 g, ( 0,051 mmolu), (2R, 3R,4S,5S)-2-/2-chlor-6-( 1-ethyl-propylamino)-purin-9-yl/-5-(3hydroxyme thy 1-i soxazol-5-yl )-te trahy dro-furan-3,4-di olu-rtrifluoracetátu, t.j. Meziproduktu 24), získaného postupem přípravy popsaným výše), a 0,038 g,( 0,30 mmolu), 2-(1-methyl-1Himidazol-4-yD-ethylaminu, ( připraveného z příslušného dihydrochloridu neutralizací s mírným nedostakem pevného hydroxidu sodného v methanolu, a odpařením těkavých složek z reakční směsi v proudu dusíku), ve 0,10 ml, vysušeného dimethylsulfoxidu, která byla zahřívána v uzavřené reakční trubici,( na př_TReacti-viel^(fí'), při těplotě H0,0°C, po dobu 16,50 hodiny,

Výsledný surový produkt byl přečištěn pomoci autoprepar8tivní, vysokovýkonné kapalinové chromatografie,( HPLC), a za použití konečné, následné lyofilizaci.

Bylo získáno 0,007 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě hnědě zbarvené, pevné látky.

LC/MS System A:

R = 3,12 minutyj m/z = 528,0, MH⁺J

Příklad 62) /in

Příprava (2S,3S,4R,5R)-2-(3-ethyl-isoxazol-5-yl)-5-£ 6-(1Shydroxymethyl-2-fenyl-ethyl8mino)-2-/2-(pyridin-2-yl-amino)ethylamino/-purin-9-ylJ -tetrahydro-furan-3,4-diolu.diformiátu

Z roztoku, připraveného rozpuštěním 0,110 g,(0,22 mmolu), (2R,,3R,,4S_r5S)-2-/2-chlor-6-( lS-hydroxymethyl-2-fenyl-ethylamino)-purin-9-yl/-5-(3-ethyl-isoxazol-5-yl)-tetrahydro-furan-3,4diol-aeetátu, t.j. Meziproduktu 26), získaného v rámci pos$ůpu přípravy popsaného výše, ve 2,50 ml, vysušeného dimethylsulfoxidu, byl·* odebrán alikvotní podíl 0,50 ml,( 0,044 mmolu), ktef \ rý byl přidán v uzavřené reakční trubici, ( na př, Reacti-vial ), ku 0,060 g,( 0,44 mmolu), 2-(pyridin-2-yl-amino)-ethylaminu, t.j. Meziproduktu 27), získaného postupem přípravy popsaného výše), a vzniklá reakční směs byla zahřívána při teplotě 90,0 C°, po dobu 80,0 hodin.

Po přečištění surového produktu autopreparativní vysokovýkonnou kapalinovou chromstografii,( HPLC), a po následném, konečném vymrazení( lyofilizaci), bvlo získáno 0,016 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě bělavě zbarvené, pevné látky.

LC/MS System A:

R_t = 3,52 minuty; m/z = 602,0 MH⁺J

Příklad 63)

Příprava (2S,3S,4R , 5R)-2-(3-ethyl-isoxazol-5-y1-5-/6-(1S-hydroxyme thy1-2-fenyl-e thylamino)-2-(2-pyrrolidin-1-yl-ethylamino)-purin-9-yl/-tetrahydro-furan-3,4-diolu.diformiátu

9 999 99 · ·· ·

9 9 9 9 99 9999

999 999 999

9999 9999 ·

9999 999

999 999 99 9·9 99 999

42$

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci předcházejícího Příkladu 62), bylo za použití 0,050 g,( 0,44 mmolu), 1(2-aminoethyl)-pyrrolidinu, a po zahřívání reakční směsi při teplotě 90,0°C, po dobu 80,0 hodin, a následné konečné lyofilizaci, připraveno 0,024 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě bíle zbarvené, pevné látky.

LC/MS System A:

R.*. = 3,43 minuty; m/z - 579,0, MH⁺J

Příklad 64)

Příprava (2R,3R,4S,5S)-2-/2-(2-amino-ethylamino)-6-(1S-hydroxyme thyl-2-feny1-e thylamino)-purin-9-y1/-5-(3-e thy1-i s oxa zol-5-y1) tetrahydro-furen-3,4-diolu, diformiátu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 62), bylo za použití 0,026 g,,( 0,44 mmolu), ethylendiaminu, a po zahřívání reakční směsi při teplotě 90,0°C, po dobu 20,0 hodin, a následné, konečné lyofilizaci, připraveno 0,018 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě bělavě zbarvené, pevné látky.

LC/MS System A:

R^ = 3,36.minutyJ m/z - 525,0, MH *

Příklad 65)

Příprava (2S, 3S,4R,5E^:)-2-(3-e thy 1-i soxazol-5-y 1)-5-/6-(3-jodbenzy lamino )-2- (,2-piperidin- 1-y 1-e thy lamino )-purin-9-yl/-tetra hydro-furan-3,4-diolu. diformiátu ···· »« · ·· · • · 9 · · 9 9 9 9

999 9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9

999 99 999 99 999

Roztok,, připravený rozpuštěním 0,015 g,( 0,026 mmolu), (2R>„3R>4S _r5S )-2-/2-chlor-6- (3-jod-benzylamino )-purin-9-yl/-5( 3-ethyl-isoxazol-5-yl)-tetrehydro-furan-3,4-diol-acetátu,, t. j.Meziproduktu 25), získaného v rámci postupu přípravy popsané ho výše, ve 1,0 ml, vysušeného dimethylsulfoxidu, byl přidánu ku 0,016 g,( 0,13 mmolu), 2-piperidinethylaminu, předloženému v uzavřené reakční trubici,( na př. Reecti-vial^ ;,a tato reakční směs byla zahřívána při teplotě 90,0°c, po dobu 76,0 hodin.

Po přečištění surového produktu, pomocí autopreparativní vysokovýkonné kapalinové chromatografie, a následné konečné lyofilizaci, bylo získáno 0,003 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě bělavě zbarvené, pevné látky,

LC/MS System A:

R_t - 4,56 minutyj m/z = 592,0, MH⁺;

Příklad 66)

Příprava (2R„3R,4S,5S)-2-/2-ethylamino-6-(3-jod-benzylamino)purin-9-yl/-5-(3-ethyl-isoxazol-5-yl)-tetrahydro-furan-3,4diolu. formiátu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci předcházejícího Příkladu 65),, bylo za použití 0,017 g,( 0,44 mmolu), ethylaminu,/ 70%ní (hmotnostní %) roztok ve vodě), a po zahřívání reakční směsi při teplotě 90,0°c, po dobu 76,0 hodin, s po následné konečné lyofilizaci, připraveno 0,004 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě bělavě zbsrvené, pevné látky.

LC/MS System A:

R_t - 3,64 minutyJ m/z = 675,0, MH⁺;

• ·«·· · ·· ··· · » ·· «·· • >·· · · · 9 9 • · β 9 9 9 · 9 ·

9·· 99 999

Příklad 67)

Příprava (2S,3S,4R_r,5R)-2-(3-brom-isoxazol-5-yi)-5-/6-(1-ethylpropylamino)-2-(2-piperidin-1-yl-ethylamino)-purin-9-yl/-tetrehydro-furan-3,4-diolu. diformiátu

Směs, připravená rozpuštěním 0,021 g,( 0,037 mmolu), 4Race toxy-5S-(3-brom-isoxazol-5-yl)-2R-/2-chlor-6-(1-ethyl-propylamino)-purin-9-yl/-tetrahydro-furan-3R-yl esteru kyseliny octové, t.j. Meziproduktu 18), získaného v rámci postupu přípravy popsaného výše), a 0,038 g,( 0,3 mmolu), piperidin-1-yl-2-ethylaminu, v 0,10 ml, vysušeného dimethylsulfoxidu, byla zahřívána v uzevřené reakční trubici, ( ne př. Reacti-vial^'), při teplotě 90,0°C, po dobu 28,50 hodiny.

Výsledný surový produkt byl přečištěn pomocí autopreparativní vysokovýkonné kapalinové chromatografie, (HPLG), s po následné, konečné lyofilizaci bylo získáno 0,003 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě krémově-bíle zbarvené pévisté, látlsgr.

LC/MS System A:

R-4. = 3,48 minuty! m/z = 579,0„MH⁺ pro sloučeninu sumář· t VQ ního vzorce ^C24^H35 ^Brl%⁰4» /!2£

•	·«·«	··	•	··
··	•	•	•	··	• 9	• ·
•	···	9	•	•	9 9
•		··	···	··	··

Ρ ř ί k 1 a d 68)

Příprava ethylesteru kyseliny 5-(5S>- £6-(1-ethy1-propylamino)2-/2-(1-methyl-1H-imidazol-4-yl)-ethylamino/-purin-9-ylJ -3S, 4R-dihydroxy-tetnahydro-furan-2S-yl)-isoxazol-3-karboxylové. diformiátu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 50), byla připravena smícháním 0,02 g,( 0,13 mmolu), ethylesteru kyseliny chlorhydroxyiminooctové, a.0,081 g,(O,96 mmolu), pevné formy hydrogenuhličitanu sodného reakční směs, ku které bylo přidáno po zpracování po dobu 169,50 hodiny dalších 0,129 g, ( 0,845 mmolu), ethylesteru kyseliny chlorhydroxyiminooctové, a 0,322 g,( 3,83 mmolu), pevné formy hydrogenuhličitanu sodného, a po dalších 4,0 dnech, ještě 0,04 g, (0,26 mmolu), ethylesteru kyseliny chlorhydroxyiminooctové, 8 0,162 g,( 1,92 mmolu), pevné formy hydrogenuhličitanu sodného.

Po následném, konečném vymrazení ( lyofilizaci) bylo získáno 0,002 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě slěbě hnědě zbarvené,, pevné látky.

LC/MS System C:

R = 2,39 minutyj m/z = 570,0, MH⁺J v

Příklad 69)

Příprava (2S,3S,4R, 55)-2-(3-ethyl-isoxazol-5-y1)-5-/6-(1S-hydro xymethyl-2-methy1-propylamino)-2-(2-pyrrolidin-1-yl-ethylamino) purin-9-yl/-tetnahydro-fursn-3,4-diolu, diformiátu

Z roztoku,, připraveného rozpuštěním 0,113 g,( 0,25 mmol).

(2R, 3R_r4S,.5S )-2-/2-chlor-6- (1 S-hydroxyme thy 1-2-me thy 1-pr opy 1amino)-purin-9-y1/-5-(3-e thy1-i s oxa zol-5-y1)-te trahy dro-furan3,4-diol-acetátu, t.j. Meziproduktu 29), získaného v rámci postupu přípravy popsaného výše,v 7,0 ml, vysušeného dimethylsulfoxidu,. byl odebrán alikvotní podíl 1,0 ml, který byl přidán ku 0,041 g,( 0,36 mmolu)_r 1-(2-aminoethyl)-pyrrolidinu, předloženého v uzavřené reakční trubici,( na úř. Reacti-vial ), a vzniklá reakční směs byla zahřívána při teplotě 90,0°C, po dobu 90,0 hodin.

Po přečištění surového produktu eutoúrejSarativné vysokovýkonnou kapalinovou chromátografií,( HPLC), a po následné, konečné lyofilizaci, bylo získáno 0,005 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě hnědě zbarvené látky, gumovité konzistence.

LC/MS System C:

R^ = 2,20 minutyJ m/z = 531,0 MH^J

Přiklaď 70)

Příprava (2S_r3S_ř4R,_;5R )-2-( 3-e thy l-isoxazol-5-yl)-5-/6- (1 S-hydroxyme thyl-2-methyl-propylamino-2-(2-piperidin-1-yl-ethylamino )-purin-9-yl/-tetrahydro-furan-3,4-diolu. diformiátu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci předcházejícího Příkladu 69), bylo ze použití 0,044 g,( 0,36 mmolu),_: 2piperidinethylaminu, a po zahřívání reakční směsi při teplotě 90,0°C, po dobu 90,0 hodin,_s a následné, konečné lyofilizaci, připraveno 0,009 g, žádamé, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě hnědě zbarvené látky, gumovité konzistence.

· · ·

9 99 · • 9 9 9

9

LC/MS System C:

R = 3,39 minuty; m/z = 545,0, MH⁺;

Přiklaď 7Ό

Příprava (2S,3S,4R,5R)-2-(3-ethyl-isoxazol-5-yl)-5-{ 6—(1S— hydroxyme thy 1-2-me thy 1-pr opylamino )-2-/2-( pyridin-2-yl-amino)ethylamino/-purin-9-ylJ -tetrahydro-furan-3,4-diolu.diformiátu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 69), bylo za použití 0,049 g,( 0,36 mmolu),. 2-(pyridin-2-y1-amino)ethylaminu,, t.j. Meziproduktu 27), získaného v rámci postupů přípravy popsaného výše, a po zahřívání reakční směsi při teplotě 90,0°0, po dobu i59,0 hodin, a po následné, konečné lyofilizaci, připraveno 0,011 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě slabě hnědě zbarvené látky, pěnovitého charakteru.

LC/MS System C:

R_t = 3,39 minuty; m/z - 554,0, MH⁺;

Přiklaď 72)

Příprava (2S„3S,4R,5R)-2-(3-ethyl-isoxazol-5.’-yl)-5- £ 6-(1Shydroxyme thyl-2-me thyl-prony lamino )-2-(1 S-hydroxyme thyl-2-f e nyl-ethylsmino)-purin-9-ylč -tetrahydro-furan-3,4-diolu. diformiátu

Analogickým postupem, popssným výše v rámci Příkladu 69), bylo za použití 0,054 g,( 0,36 mmolu), 3-(S)-(-)-2-amino-3>fenyl-propanolu,. a po zahřívání reakční směsi při teplotě 90,0°C, po dobu 159,.0 hodi^ a následné, konečné lyofilizaci, připraveno 0,006 g, žádané,, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě žlutě zbarvené látky, pěnovitého charakteru.

LC/MS System C:

R = 2,79 minuty; m/z = 568,0; MH⁺;

Výsledky biologických pokusů

Sloučeniny z jednotlivých příkladů byly podrobeny zkouškám na účinnost proti podtypům receptorů, výsledky jsou uvedeny v následující tabulce:

Příklad č.	A2a	A3	A1
1	0.52	>436	288.5
2	0.43	>545	88.9
3	1.32	>375	231
4	0.92	>267	109.3
5	0.11	>237	30.1
6	0.49	>393	66.4
7	0.35	>312	>=309.4
3	0.67	>310	49.1
9	2.05	>323	132.3
10	2.07	>180	59.38

130 t · t · · • ·' 99 9 9 9 9

Příklad č.	A2a	A3	A1
11	3.66	>303	32.9
12	3.39	>410	260.3
13	3.03	>146	61.9
14	4.99	>254	77.1
15	3.66	>146	26.05
16	0.35	>1004	442
17	0.34	>298	1172
18	0.72	>460	2580
19	2.41	>295	670.2
20	2.04	>267	310.9
21	1.55	>267	1624.29
22	9.17	>254	8026.2
23	13.4	>282	>=3263
24	0.23	>248	573.6
25	5.46	>198	103.8
26	6.89	>286	273.3
27	3	>273	3.18
28	14.5	>263	165.8
29	5.03	>298	27.24
30	4.58	>257	108.8
31	10.59	>310	577.2
32	3.79	>176	31.75
33	13.44	>365	1281.4
34	2.92	>198	19.86
35	2.53	>223	89.16
36	4.7	>207	68.32
37	2.65	>207	136.56

131

Příklad č.	A2a	A3	A1
38	5.29	>737.	44.1
39	2.12	>85	86.8
40	3.38	>88	70.53
41	27.39	>395	2907.96
42	41.06	>395	1369.08
43	3.53	>335	672.4
44	10.3	>221	725.4
45	1.93	>189	54.04
46	20.06	>518	148.72
47	10.42	>363	148.34
48	11.48	>363	177.71
49	7.79	>350	28.28
50	7.26	>113	>6188
51	4.86	>340	22.53
52	21.63	>340	1359.98
53	2.11	>229	128.9
54	0.066	>350	10.18
55	0.175	>353	155.3
56	5.19	>525	101.31
57	0.79	>525	80.76
58	0.244	>525	812.2
59	0.13	>385	194.3
60	4.53	>248.4	155.86
61	0.09	>314	38.58
62	1.03	>303	21.37
63	10.57	>262	148.43
64	16.03	>262	44.21

132 (··· ·· » · · · »· · 9 9

Příklad č.	A2a	A3	A1
65	4.74	>262	128.27
66	8.32	>262	189.98
67	2.59	>238	219.1
68	30.23	>113	60.30
69	23.73	>180	298.75
70	27.39	>184	149.86
71	12.75	>184	79.51
72	5.39	>158	23.79

Hodnoty, uvedené v tabulce jsou hodnoty EC₅₀ ve srovnání s NECA.

Zkratky

TMSOTf trimethylsilyltrifluoromethylsulfonát

THP tetrahydropyran

TMS trimethylsilyl

TFA kyselina trifluoroctová

DMF N,N-dimethylformamid

HMDS 1,1,1,3,3,3-hexamethyldisilazan

NECA N-ethylkarboxamidadenosin

DMAP 4-dimethylaminopyridin

TEMPO 2,2,6,6-tetramethy!-1-piperidinyloxy-, volný radikál

DBU 1,8-diazabicyklo[5.4.0]undec-7-en

BSA bistrimethylsilylacetamid

DCM dichloromethan

DAST fluorid diethylaminosíry • · · · • 9

133 •

· ·

•999 99

Ph	fenyl
CDl	karbonyldiimidazol
NSAID	nesteroidní protizánětlivá látka
THF	tetrahydrofuran
Ac	acetyl, CH₃CO
Me	methyl
Et	ethyl
DMSO	dimethylsulfoxid

Zastupuje:

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. 2-(purin-9-yl)-tetrahydrofuran-3,4-diolové deriváty obecného vzorce I kde R¹ a R² a nezávisle volí ze skupiny:

(i) C3-C8cykloalkyl, (ii) atom vodíku, (iii) (aryl)2CHCH₂-, (iv) C3-C8cykloalkylC1-C6alkyl, (v) C1-C8alkyl, (vi) arylC1-C6alkyl, (vii) R⁴R⁵N-C1-C6alkyl, (viii) C1-C6alkyl-CH(CH₂OH)-, (ix) arylC1-C5alkyl-CH(CH₂OH)-, (x) arylC1-C5alkyl-C(CH₂OH)₂-, (xi) C3-C8cykloalkyl, nezávisle substituovaný jedním nebo větším počtem, např. 1, 2 nebo 3 skupinami -(CH₂)_PR⁶, (xii) H₂NC(=NH)NHC1-C6alkyl, (xiii) skupina obecného vzorce (CH₂)

X (Ch/

135 nebo obdobná skupina, v níž je jeden atom uhlíku methylenové skupiny, sousedící se skupinou X nebo oba tyto atomy, substituovány methylovou skupinou, (xiv) -C1-C6alkyl-OH, (xv) -C1-C8halogenalkyl, (xvi) skupina obecného vzorce (CH₂)_cCO(CH₂)_d

WX (xvii) aryl a (xviii) -(CH₂)fSO₂NH_g(C1-C4alkyl)2.g nebo -(CH₂)_fSO₂NH_g(arylC1-C4alkyl)₂._g,

R³ znamená methyl, ethyl, -CH=CH₂, n-propyl, -CH₂CH=CH₂, CH=CHCH₃, isopropyi, isopropenyl, cyklopropyl, cyklopropenyl, cyklopropylmethyl, cyklopropenylmethyl, -CH(OH)CH₂, -(CH₂)_qhalogen -(CH₂)_hY(CH₂)iH, -(CH₂)_kZ, -(CH₂)_hCO(CH₂)_oH, -(CH₂)_rS(O)_t(CH₂)_sH nebo -(CH₂)_kC((CH₂)_uH)=NO(CH₂)_vH,

Y znamená O, S nebo N(CH₂)jH,

Z znamená -COO(CH₂)iH nebo <ON(CH₂)_mH((CH₂)_nH), a a b nezávisle znamenají celá čísla 0 až 4 za předpokladu, že a+b je v rozmezí 3 až 5, c, d a e nezávisle znamenají celá čísla 0 až 3 za předpokladu, že c+d+e je v rozmezí 2 až 3, f znamená 2 nebo 3 a g znamená celé číslo 0 až 2, p znamená 0 nebo 1, q znamená celé číslo 0 až 3, h znamená celé číslo 0 až 2, i znamená celé číslo 0 až 2, přičemž h+i je v rozmezí 0 až 3, j znamená celé číslo 0 až 2, přičemž h+i+j je v rozmezí 0 až 3,

136 ··*♦ ·· 1 · · . • · · «· · · · ··· ·· · · * •» ··· ·· * k znamená O nebo 1,

I znamená 1 nebo 2, přičemž k+l je v rozmezí 1 až 2, man nezávisle znamenají celé číslo 0 až 2, přičemž k+m+n je v rozmezí 0 až 2, o znamená celé číslo 0 až 2, přičemž h+o je v rozmezí 0 až 2, r a s nezávisle znamenaní 1 nebo 2, přičemž r+s je v rozmezí 2 až 3, t znamená 1 nebo 2, u a v nezávisle znamenají 0 nebo 1, přičemž k+u+v je v rozmezí 0 až 1,

R⁴ a R⁵ nezávisle znamenají atom vodíku, C1-C6alkyl, aryl, arylCIC6alkyl nebo může skupina NR⁴R⁵ znamenat pyridinyl, pyrrolidinyl, piperidinyl, morfolinyl, azetidinyl, azepinyl, piperazinyl, N-C1C6alkylpiperazinyl nebo 2-(1-methyl-1H-imidazol-4-yl)-,

R⁶ znamená -OH, -NH₂, -NHCOCH₃ nebo atom halogenu,

R⁷ znamená atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkylaryl nebo -COC1C6alkyl,

X znamená NR⁷, O, S, SO nebo SO₂, jakož i soli a solváty těchto sloučenin.
2. Deriváty obecného vzorce I podle nárokul, v nichž R³ znamená methyl, ethyl nebo n-propyl a R⁷ znamená atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkylaryl nebo -COCH₃.
3. Deriváty obecného vzorce I podle nároku 1 nebo 2, v nichž R a R² neznamenají současně atomy vodíku.
4. Deriváty obecného vzorce I podle některého z nároků 1 až 3, v nichž R¹ je C3-C8cykloalkyl, (aryl)₂CHCH₂-, arylC 1 -C6alkyl,

C1-C8alkylaryt, -(CH₂)fSO₂NH_g(C1-C4alkyl)₂-g, tetrahydropyran-n-yl nebo tetrahydrothiopyran-n-yl, kde n znamená 3 nebo 4, C3-C8cykloalkylC1-C6alkyl, atom vodíku nebo R⁴R⁵N-C1-C6alkyl, kde NR⁴R⁵ společně tvoří piperidinyl nebo morfolinyl.

137
5. Deriváty obecného vzorce I, podle některého z nároků 1 až 3, v nichž R¹ je C1-C6alkyl-CH(CH₂OH)-, 1,1-dioxohexahydro-1 .lambda.6-thiopyran-4-yl, N-acetylpiperidin-4-yl, 1 S-hydroxymethyl-2-fenylethyl, piperidin-4-yl a 1-oxohexahydro-1 .lambda.4-thiopyran-4-yl.
6. Deriváty obecného vzorce I, podle některého z nároků 1 až 3, v nichž R¹ znamená -CH₂CHPh₂₎ -CH(Et)₂ nebo fenylethyl.
7. Deriváty obecného vzorce I, podle některého z nároků 1 až 6, v nichž R² znamená skupiny C1-C6alkyl-OH, H2NC(=NH)NHC1-C6alkyl, R⁴R⁵NC1-C6alkyl, kde NR⁴R⁵ společně tvoří pyridinyl, piperidinyl, morfolinyl nebo 2-(1-methyl-1H-imidazol-4-yl), arylCI-C5alkylCH(CH2OH)-, aryl, C3-C8cykloalkylC1-C6alkyl, tetrahydro-1,1-dioxidthiofen-3-yl, C3-C8cykloalkyl, C1-C6alkyl-CH(CH₂OH)-, arylCI-C6alkyl, pyrrolidin-3-yl, 2-oxopyrrolidin-4-yl, 2-oxopyrrolidin-5-yl, piperidin-3-yl, arylC 1 -C6alkyl, jako benzyl, C3-C8cykloalkyl, nezávisle substituovaný jednou nebo větším počtem skupin, jako 1, 2 nebo 3 skupinami -(CH₂)_PR⁶, nebo piperidin-4-yl, v němž je atom dusíku v kruhu popřípadě substituován C1-C6alkylovou skupinou.
8. Deriváty obecného vzorce I podle některého z nároků 1 až 6, v nichž R² je C1-C8alkyl nebo R⁴R⁵NC1-C6alkyl, kde R⁴ a R⁵ nezávisle znamenají atom vodíku nebo aryl nebo znamená skupina R⁴R⁵N společně pyrrolidinyl.
9. Deriváty obecného vzorce I podle některého z nároků 1 až 6, v nichž R² znamená piperidin-1 -ylethyl nebo 2-(1-methyl-1 H-imidazol-4-yl)ethyl.
10. Deriváty obecného vzorce I podle některého z nároků 1 a 3 až 9 v nichž R³ znamená -CH=NOH, cyklopropyl, COOCH3, -COOCH₂CH₃,

138

-CH2OH, -CH(OH)CH₃ nebo atom halogenu.
11. Deriváty obecného vzorce I podle některého z nároků 1 až 9, v nichž R³ znamená methyl, ethyl nebo n-propyl.
12. Deriváty obecného vzorce l podle některého z nároků 1 a 3 až 9 v nichž R³ znamená ethyl nebo -CH₂OH.
13. Deriváty obecného vzoce I podle některého z nároků 1 až 9, v nichž R³ znamená ethyl.
14. Deriváty obecného vzorce I podle některého z nároků 1 až 13, v nichž R⁴ a R⁵ je nezávisle atom vodíku, C1-C6alkyl, aryl, arylCIC6alkyl nebo NR⁴R⁵ znamená pyrrolidinyl, piperidinyl, morfolinyl, azetidinyl, azepinyl, piperazinyl nebo N-C1-C6alkylpiperazinyl.
15. Deriváty obecného vzorce I podle některého z nároků 1 až 13, v nichž R⁴ a R⁵ je nezávisle atom vodíku, C1-C6alkyl nebo aryl nebo tvoří skupina NR⁴R⁵ společně pyrrolidinyl, piperidinyl, morfolinyl, azetidinyl, azepinyl, piperazinyl nebo N-methylpiperazinyl.
16. Derivát obecného vzorce I, kterým je (2R,3R,4S,5S)-2-[6-(2,2-difenylethylamino)-2-(2-piperidin-1-yl-ethylamino)-purin-9-yl]-5-(3-ethylisoxazol-5-yl)-tetrahydrofuran-3,4-diol nebo jeho sůl nebo solvát.
17. Derivát obecného vzorce I, kterým je (2R,3R,4S,5S)-2-(3-ethylisoxazol-5-yl)-5-[6-fenethylamino-2-(2-piperidin-1-yl-ethylamino)-purin-9-yl]-tetrahydrofuran-3,4-diol nebo jeho sůl nebo solvát.
18. Derivát obecného vzorce I, kterým je

139 « <

• * ·· • * * (2S,3S,4R,5R)-2-(3-ethylisoxazol-5-yl)-5-[6-(1-ethylpropylamino)-2-(2 -piperidin-1-ylethylamino)-purin-9-yl]-tetrahydrofuran-3,4-diol nebo jeho sůl nebo solvát.
19. Derivát obecného vzorce I, kterým je (2R,3R,4S,5S)-2-{6-(1-ethylpropylamino)-2-[2-(1-methyl-1H-imidazol-4-yl)-ethylamino]-purin-9-yl}-5-(3-hydroxymethylisoxazol-5-yl)-tetrahydrofuran-3,4-diol nebo jeho sůl nebo solvát.
20. Deriváty obecného vzorce I, ze skupiny (2R,3E,4S,5S)-2-[6-(2,2-difenylethylamino)-2-(2-morfolin-4-ylethylamino)-purin-9-yl]-5-(3-ethylisoxazol-5-yl)-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3E,4S,5S)-2-[6-(2,2-difenylethylamino)-2-(2-hydroxyethylamino)-purin)-9-yl]-5-(3-ethylisoxazol-5-yl)-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2S,3S,4R,5R)-2-(3-ethylisoxazol-5-yl)-5-{6-(1-ethylpropylamino)-2-[2

-(1-methyl-1H-imidazol-4-yl)-ethylamino]-purin-9-yl}-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5S)-2-{6-(3,3-dimethylbutylamino)-2-[2-(1-methyl-1H-imidazol-4-yl)-ethylamino]-purin-9-yl}-5-(3-ethylisoxazol-5-yl)-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2S,3S,4R,5R)-2-(3-ethylisoxazol-5-yl)-5-[6-(cyklopentylamino)-2-(2-piperidin-1-yl-ethylamino)-purin-9-yl]-tetrahydrofuran-3,4-diol,

N-{2-[9-[5S-(3-ethylisoxazol-5-yl)-3R,4S-dihydroxytetrahydrofuran-2R

-yl]-6-(tetrahydrothiopyran-4-ylamino)-9H-purin-2-ylamino]-ethyl}-guanidin, . 1

140 (2S,3S,4R,5R)-2-(3-ethylisoxazol-5-yl)-5-[6-(3-fluoro-4-hydroxyfenylamino)-2-(2-piperidin-1-ylethylamino)-purin-9-yl]-tetrahydrofuran-3,4-diol, methylamid kyseliny 2-[9-[5S-(3-ethylisoxazol-5-yl)-3R,4S-dihydroxytetrahydrofuran-2R-yi]-2-(2-piperidin-1-ylethylamino)-9H-purin-6-ylamino]-ethansulfonové, (2S,3S,4R,5R)-2-(3-ethylisoxazol-5-yl)-5-[2-(2-piperidin-1-yl-ethylamino)-6-(tetrahydrothiopyran-4-ylamino)-purin-9-yl]-tetra hyd rof u ra n-3,4-d i o I, (2S,3S,4R,5R)-2-(3-ethylisoxazol-5-yl)-5-[2-(2-pyridin-2-yl-ethylamino)-6-(tetrahydropyran-4-ylamino)-purin-9-yl]-íetrahydrofuran-3,4-diol, (2S,3S,4R,5R)-2-(3-ethylisoxazol-5-yl)-5-[2-(2-piperidin-1-ylethylamino)-6-(tetrahydropyran-4-ylamino)-purin-9-yl]-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2S,3S,4R>5R)-2-(3-ethylisoxazol-5-yl)-5-[2-(1S-hydroxymethyl-2-fenylethylamino)-6-(tetrahydropyran-4-ylamino)-purin-9-yl]-terahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5S)-2-{6-(2,2-difenylethylamino)-2-[2-(pyridin-2-ylamino)-ethylamino]-purin-9-yl}-5-(3-ethylisoxazol-5-yl)-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5S)-2-[6-(2,2-difenylethylamino)-2-(1S-hydroxymethyl-2-fenylethylamino)-purin-9-yl]-5-(3-ethylisoxazol-5-yl)-tetrahydrofuran-3,4-diol,

4-(2-{6-amino-9-[5S-(3-ethylisoxazol-5-yl)-3R,4S-dihydroxytetrahydrofuran-2R-yl]-9H-purin-2-ylamino}-ethyl)-benzensulfonamid, (2R,3R,4S,5S)-2-[2-(trans-4-aminocyklohexylamino)-6-(2,2-difenyiethylamino)-purin-9-yl]-5-(3-ethylisoxazol-5-yl)-tetrahydrofuran141

« ··** ·· • · • 9 • » H * • 9 9 999 • · • · 9 · * • · » · * • · 9 9 • · « · 9 · · ♦ · • · ♦ • · 9 9

-3,4-diol, (2S,3S,4R,5R)-2-(2-ethylisoxazol-5-yl)-5-{6-(3-jodobenzylamino)-2-[2 -(1-methyl-1H-imidazol-4-yl)-ethylamino]-purin-9-yl}-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5S)-2-{6-(2-cyklohexylethylamino)-2-[2-(1-methyl-1 H-imidazol-4-yl)-ethylamino]-purin-9-yl}-5-(3-ethylisoxazol-5-yl)-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5S)-2-[6-(2-cyklohexylethylamino)-2-(1S-hydroxymethyl-2-fenylethylamino)-purin-9-yl]-5-(3-ethylisoxazol-5-yl)-tetrahydrofuran-3,4-diol,

N-(2-{6-(2,2-difenylethylamino)-9-[5S-(3-ethylisoxazol-5-yl)-3R,4S-dihydroxytetrahydrofuran-2R-yl]-9H-purin-2-ylamino}-ethyl)-guanidin,

N-(4-{6-(2,2-difenylethylamino)-9-[5S-(3-ethylisoxazol-5-yl)-3R,4S-dihydroxytetrahydrofuran-2R-yl]-9H-purin-2-ylamino}-cyklohexyl)-acetamid, methylamid kyseliny 2-[9-[5S-(3-ethylisoxazol-5-yl)-3R,4S-dihydroxytetrahydrofuran-2R-yl]-2-(2-guanidinoethylamino)-9H-purin-6-ylamino]-ethansulfonové,

N-(2-{6-(1,1-dioxohexahydro-1 .lambda. 6-thiopyran-4-ylamino)-9-[5S-(3-ethylisoxazol-5-yl)-3R,4S-dihydroxy-tetrahydro-furan-2R-yl]-9H-purin-2-ylamino}-ethyl-guanidin, methylamid kyseliny 2-[9-[5S-(3-ethylisoxazol-5-yl)-3R,4S-dihydroxytetrahydrofuran-2R-yl]-2-(1S-hydroxymethyl-2-fenylethylamino)-9H-purín-6-ylamino]-ethansulfonové,

1-{4-[9-[5S-(3-ethylisoxazol-5-yl)-3R,4S-dihydroxytetrahydrofuran-2R-yl]-2-(1S-hydroxymethyl-2-fenylethylamino)-9H-purin-6-ylamino]-piperidin-1-yl}-ethanon,

1-(4-{4-amino-cycklohexylamino)-9-[5S-(3-ethylisoxazol-5-yl)-3R,4S-dihydroxytetrahydrofuran-2R-yl]-9H-purin-6-ylamino}-piperidin-1-yl)-ethanon, (2R,3R,4S,5S)-2-(3-ethylisoxazol-5-yl)-5-[2-(2-pyridin-2-ylethylamino) • Μ»

-6-(tetrahydrothiopyran-4-ylamino)-purin-9-y!]-tetrahydrofuran-3,4-diol (2R,3R,4S,5S)-2-[6-(1,1-dioxohexahydro-1.lambda.6-thiopyran-4-ylamino)-2-(2-piperidin-1-ylethylamino)-purin-9-yl]-5-(3-ethylisoxazol-5-yl)-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5S)-2-[2-(trans-4-aminocyklohexylamino)-6-(1,1-dioxohexahydro-1. lambda.6-thiopyran-4-ylamino)-purin-9-yl]-5-(3-ethylisoxazol-5-yl)-tetrahydrofuran-3,4-diol,

N-(2-{6-(1-acetylpiperidin-4-ylamino)-9-[5S-(3-ethylisoxazol-5-yl)-3R,4S-dihydroxytetrahydrofuran-2R-yl]-9H’purin-2-ylamino}-ethyl)-guanidin,

N-{2-[9-[5S-(3-ethylisoxazol-5-yl)-3R,4S-dihydroxytetrahydrofuran-2R-yl]-6-(piperidin-4-ylamino)-9H-puriri'2-ylamino]-ethyl}-guanidin, (2S,3S,4R,5R)-2-(3-ethylisoxazol-5-yl)-5-[2-(1S-hydroxymethyl-2-fenylethylamino)-6-(tetrahydrothiopyran-4-ylamino)-purin-9-yl]-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2S,3S,4R,5R)-2-(3-ethylisoxazol-5-yl)-5-[2-(1S-hydroxymethyl-2-fenylethylamino)-6-(1-oxohexahydro-1.lambda.4-thiopyran-4-ylamino)

-purin-9-yl]-tetrahydrofuran-3,4-diol), (2S,3S,4R,5R)-2-(3-ethylisoxazol-5-yl)-5-[6-(1-ethylpropylamino)-2-(1S-hydroxymethyl-2-fenylethylamino)-purin-9-yl]-tetrahydrofuran-3,4·

-diol, (2S,3S,4R,5R)-2-(3-ethylisoxazol-5-yl)-5-[6-(1-ethylpropylamino)-2-(pyrrolidin-3R-ylamino)-purin-9-yl]-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2S,3S,4R,5R)-2-(3-ethylisoxazol-5-yl)-5-[6-(1-ethylpropylamino)-2-(2-pyridin-2-ylethylamino)-purin-9-yl]-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2S,3S,4R,5R)-2-(3-ethylisoxazol-5-yl)-5-[6-(1-ethylpropylamino)-2-(2-morfolin-4-ylethylamino)-purin-9-yl]-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5S)-2-[2-(trans-4-aminocyklohexylamino)-6-(1-ethylpropylamino)-purin-9-yl]-5-(3-ethylisoxazol-5-yl)-tetrahydrofuran-3,4-diol,

N-{2-[9-[5S-(3-ethylisoxazol-5-yl)-3R,4S-dihydroxytetrahydrofuran-2R-yl]-6-(1-ethylpropylamino)-9H-purin-2-ylamino]-ethyl}-guanidin, • ·· 9

999

143

9 9 *9 (2R,3R,4S,5S)-2-[6-(3,3-dimethylbutylamino)-2-(2-piperidin-1-ylethylamino)-purin-9-yl]-5-(3-ethylisoxazol-5-yl)-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5S)-2-[6-(3,3-dimethylbutylamino)-2-(2-morfolin-4-ylethylamino)-purin-9-yl]-5-(3-ethylisoxazol-5-yl)-tetrahydrofuran-3,4-diol], (2R,3R,4S,5S)-2-{6-benzylamino-2-[2-(1 -methyl-1 H-imidazol-4-yl)-ethylamino]-purin-9-yl}-5-(3-ethylisoxazol-5-yl)-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5S)-2-[6-benzylamino-2-(2-piperidin-1-ylethylamino)-purin'

-9-yl]-5-(3-ethylisoxazol-5-yl)-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2S,3S,4R,5R)-2-(3-ethylisoxazol-5-yl)-5-[6-(1S-hydroxymethyl-2-fenylethylamino)-2-(2-piperidin-1-ylethylamino)-purin-9-yl]-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5S)-2-[2-(cyklopentylamino)-6-(1-ethylpropylamino)-purin-9

-yl]-5-(3-ethylisoxazol-5-yl)-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R₎4S,5S)-2-[2-(3,4-dimethoxyfenylethylamino)-6-(1-ethylpropylamino)-purin-9-yl]-5-(3-ethylisoxazol-5-yl)-tetrahydro-furan

-3,4-diol, (2R,3R,4S,5S)-2-[2-(4-tetrahydropyranylamino)-6-(1-ethylpropylamino)-purin-9-yl]-5-(3-ethylisoxazol-5-yl)-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5S)-2-[2(1-benzylpyrrolidin-3S-1-ylamino)-6-(1-ethylpropylamino)-purin-9-yl]-5-(3-ethylisoxazol-5-yl)-tetrahydrofuran-3,4-diol,

5-(5R-{6-(1-ethylpropylamino)-2-[2-(1 -methyl-1 H-imidazol-4-yl)-ethylamino]-purin-9-yl}-3S,4R-dihydroxytetrahydrofuran-2S-yl)-isoxazole-3-karbaldehydoxim, (2S,3S,4R,5R)-2-(3-ethylisoxazol-5-yl)-5-[6-(1S-hydroxymethyl-2-fenylethylamino)-2-(2-morfolin-4-ylethylamino)-purin-9-yl]-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2S,3S,4R,5R)-2-(3-ethylisoxazol-5-yl)-5-[6-benzylamino-2-(2-pyridin999·

144 ·· ♦ • 999

-2-ylethylamino)-purin-9-yl]-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2S,3S,4R,5R)-2-(3-ethylisoxazol-5-yl)-5-{6-(1-ethylpropylamino)-2-[2-(pyridin-2-ylamino)-ethylamino]-ethylamino]-purin-9-yl}-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5S)-2-[6-(1-ethylpropylamino)-2-(2-piperidin-1-ylethylamino)-purin-9-yl]-5-[3-(1-hydroxyethyl)-isoxazol-5-yl]-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5S)-2-[6-(1-ethylpropylamino)-2-(2-piperidin-1-ylethylamino)-purin-9-yl]-5-(3-methylisoxazol-5-yl)-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5S)-2-[6-(1-ethylpropylamino)-2-(2-piperidin-1-ylethylamino)-purin-9-yl]-5-(3-propylisoxazol-5-yl)-tetrahydrofuran-3,4

-diol, (2R,3R,4S,5S)-2-[6-(1-ethylpropylamino)-2-(2-piperidin-1-ylethylamino)-purin-9-yl]-5(3-hydroxymethylisoxazol-5-yl)-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5S)-2-{6-(1-ethylpropylamino)-2-[2-(1-methyl-1H-imidazol-4-yl)-ethylamino]-purin-9-yl}-5-[3-(1-hydroxyethyl)-isoxazol-5-yl]-tetrahydrOfuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5S)-2-{6-(1-ethylpropylamino)-2-[2-(1-methyl-1H-imidazol-4-yl)-ethylamino]-purin-9-yl}-5-(3-methylisoxazol-5-yl)-tetrahydrofuran

-3,4-diol, (2R,3R,4S,5S)-2-{6-(1-ethylpropylamino)-2-[2-(1-methyl-1 H-imidazol-4-yl)-ethylamino]-purin-9-yl}-5-(3-propylisoxazol-5-yl)-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2S,3S,4R,5R)-2-(3-ethylisoxazol-5-yl)-5-{6-(1S-hydroxymethyl-2-fenylethylamino)-2-[2-(pyridin-2-ylamino)-ethylamino]-purin-9-yl}-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2S,3S,4R,5R)-2-(3-ethylisoxazol-5-yl)-5-[6-(1S-hydroxymethyl-2-fenylethylamino)-2-(2-pyrrolidin-1-ylethylamino)-purin-9-yl]-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5S)-2-[2-(2-aminoethylamino)-6-(1S-hydroxymethyl-2145

• 9 «*« 9 9 9# 9 9 9 9 9 9 • 9 9 9 • 9 9 9 9 9 • 9 * 9 9 9 · » · · • · 9 * 9 9 99 999 9 9 999 9 9 *·

-fenylethylamino)-purin-9-yl]-5-(3-ethylisoxazol-5-yl)-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2S,3S,4R,5R)-2-(3-ethylisoxazol-5-yl)-5-[6(3-jodobenzylamino)-2-(2-piperidin-1-ylethylamino)-purin-9-yl]-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5S)-2-[2-ethylamino-6-(3-jodobenzylamino)-purin-9-yl]-5-(3-ethylisoxazol-5-yl)-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2S,3S,4R,5R)-2-(3-bromoisoxazol-5-yl)-5-[6-(1-ethylpropylamino)-2-(2-piperidin-1-ylethylamino)-purin-9-yl]-tetrahydrofuran-3,4-diol, ethylester kyseliny 5-(5R-{6-(1 -ethylpropylamino)-2-[2-(1 -methyl-1 H-imidazol-4-yl)-ethylamino]-purin-9-yl}-3S,4R-dihydroxytetrahydrofuran-2S-yl)-isoxazol-3-karboxylové, (2S,3S,4R,5R)-2-(3-ethylisoxazol-5-yl)-5-[6-(1S-hydroxymethyl-2-methylpropylamino)-2-(2-pyrrolidin-1-ylethylamino)-purin-9-ylj-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2S,3S,4R,5R)-2-(3-ethylisoxazol-5-yl)-5-[6-(1S-hydroxymethyl-2-methylpropylamÍno)-2-(2-piperidin-1-ylethylamino)-purin-9-ylj-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2S,3S,4R,5R)-2-(3-ethylisoxazol-5-yl)-5-{6-(1S-hydroxymethyl-2-methylpropylamino)-2-[2-pyridin-2-ylamino)-ethylamino]-purin-9-yl}-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2S,3S,4R,5R)-2-(3-ethylisoxazol-5-yl)-5-{6-(1S-hydroxymethyl-2-methylpropylamino)-2-(1S-hydroxymethyl-2-fenylethylamino)-purin-9-yl}-tetrahydrofuran-3,4-diol, nebo jeho sůl nebo solvát.
21. Farmaceutický prostředek, v y z n a č u j í c í se tím, že jako účinnou složku obsahuje derivát obecného vzorce I podle některého z nároků 1 až 20 nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl nebo solvát ve směsi s jedním nebo větším počtem fyziologicky přijatelných ředidel nebo nosičů.

146 v ·99« • 9 · • ··· ♦ · ·

9 ♦ ·· • * · · * ·

9 9 9 9 *

9 9 • 99 • «

9 9»

9 · 9 9 9
22. Derivát obecného vzorce I podle některého z nároků 1 až 20 nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl nebo solvát pro použití jako léčivo.
23. Použití derivátu obecného vzorce I podle některého z nároků 1 až 20 nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli nebo solvátu pro výrobu farmaceutického prostředku pro léčení zánětlivých onemocnění, jako astmatu nebo chronických obstruktivních plicních chorob, COPD.
24. Způsob léčení nebo profilaxe zánětlivých onemocnění, jako je astma nebo COPD, vyznačující se tím, že se podává účinné množství derivátu obecného vzorce I podle některého z nároků 1 až 20 nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli nebo solvátu.
25. Způsob výroby derivátů obecného vzorce I podle některého z nároků 1 až 20, v y z n a č u j í c í se t í m, že se (a) nechá reagovat sloučenina obecného vzorce II kde R¹ má význam z nároků 1, 3 až 6 a 16 až 20 a R³ má význam z nároků 1, 2, 10 až 13 a 16 až 20 a L znamená odštěpitelnou skupinu, nebo chráněný derivát této látky se sloučeninou obecného vzorce R²NH₂ nebo jejím chráněným drivátem, kde R² má význam, uvedený v některém z nároků 1, 3, 7 až 9 a 16 až 20,

147 • *99 9 • · * 9

9 *·· ·

8 9 9 « (b) nechá reagovat sloučenina obecného vzorce III kde R¹ má význam, uvedený v některém z nároků 1, 3 až 6 a 16 až 20 a R² má význam, uvedený v některém z nároků 1, 3, 7 až 9 a 16 až 20, se sloučeninou obecného vzorce IV (IV) kde R³ má význam, uvedený v některém z nároků 1, 2, 10 až 13 a 16 až 20 a L znamená odštěpitelnou skupinu, nebo s chráněným derivátem této sloučeniny, nebo se (c) převede sloučenina obecného vzorce I na jinou sloučeninu obecného vzorce I nebo se (d) odstraní ochranné skupiny z chráněné sloučeniny obecného vzorce I, načež se v případě potřeby převede sloučenina obecného vzorce I nebo její sůl na jinou sůl.

• 9

148 « · « · ♦ · • 9 9 9

999 9 · • •99 ♦· • 9 999 ··
26. Způsob výroby derivátu obecného vzorce I podle některého z nároku 1 až 20, v y z n a č u j í c í se t í m, že se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce Ha kde R² má význam, uvedený v některém z nároků 1, 3, 7 až 9 a 16 až 20 a R³ má význam, uvedený v některém z nároků 1, 2, 10 až 13 a 16 až 20 a L znamená odštěpitelnou skupinu, nebo její chráněný derivát se sloučeninou obecného vzorce R¹NH₂nebo jejím chráněným derivátem, kde R¹ má význam, uvedený v některém z nároků 1, 3 až 6 a 16 až 20.
27. Sloučenina obecného vzorce II kde R¹ má význam, uvedený v některém z nároků 1, 3 až 6 a 16 až 20 a R³ má význam, uvedený v některém z nároků 1, 2, 10 až 13 a 16 až

149 • 00*0 · ·· « 0 · 00

9000 00 * » 0 0 0 0 ·

0 0 0 »· • 00 000 00 00·

20 a L znamená odštěpitelnou skupinu, nebo její chráněný derivát, jako meziprodukt pro výrobu derivátu obecného vzorce I.
28. Sloučenina obecného vzorce lla kde R¹ má význam, uvedený v některém z nároků 1, 3, 7 až 9 a 16 až 20 a R³ má význam, uvedený v některém z nároků 1,2, 10 až 13 a 16 až 20 a L znamená odštěpitelnou skupinu, nebo její chráněný derivát, jako meziprodukt pro výrobu derivátu obecného vzorce I.
29. Sloučenina obecného vzorce IV (IV) kde R³ má význam, uvedený v některém z nároků 1,2, 10 až 13 a 16 až 20 a L znamená odštěpitelnou skupinu, nebo její chráněný derivát jako meziprodukt pro výrobu derivátů obecného vzorce I.

150

9 «9 · 4 ··· • · 4 • 4 ··· ·*
30. Sloučenina obecného vzorce IV podle nároku 29, kterou je sloučenina obecného vzorce VI (VI) kde R³ má význam z některého z nároků 1, 2, 10 až 13 a 16 až 20.
31. Sloučenina obecného vzorce V kde R³ má význam z některého z nároků 1,2, 10 až 13 a 16 až 20 a L¹a L² nezávisle znamenají odštěpitelné skupiny, nebo chráněný derivát této sloučeniny jako meziprodukt pro výrobu derivátů vzorce I.
32. Sloučenina obecného vzorce Vlil

9 9

9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9

99 999 99 999 (Vlil)' kde R¹ má význam, uvedený v některém z nároků 1, 3 až 6 a 16 až 20 a L znamená odštěpitelnou skupinu nebo chráněný derivát této sloučeniny.
33. Sloučenina obecného vzorce IX¹ (IX)¹ kde R¹ má význam, uvedený v některém z nároků 1, 3 až 6 a 16 až 20 a R³ má význam, uvedený v některém z nároků 1, 2, 10 až 13 a 16 až 20 a L znamená odštěpitelnou skupinu, nebo chráněný derivát této sloučeniny.

152 ···· ··· ·· • · · • ·

9 9 9

9 9

99 9 99

99 999
34. Sloučenina obecného vzorce X (X)' kde R¹ má význam, uvedený v některém z nároků 1, 3 až 6 a 16 až 20 a R³ má význam, uvedený v některém z nároků 1, 2, 10 až 13 a 16 až 20 a L znamená odštěpitelnou skupinu nebo chráněný derivát této sloučeniny.