CZ130093A3 - Polymeric lewis x-saccharides and process for preparing thereof - Google Patents

Polymeric lewis x-saccharides and process for preparing thereof Download PDF

Info

Publication number
CZ130093A3
CZ130093A3 CZ931300A CZ130093A CZ130093A3 CZ 130093 A3 CZ130093 A3 CZ 130093A3 CZ 931300 A CZ931300 A CZ 931300A CZ 130093 A CZ130093 A CZ 130093A CZ 130093 A3 CZ130093 A3 CZ 130093A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
acetyl
formula
benzyl
tri
lewis
Prior art date
Application number
CZ931300A
Other languages
English (en)
Inventor
Richard Prof Dr Schmidt
Alexander Toepfer
Willy Dr Kinzy
Jurgen Dr Hemberger
Original Assignee
Merck Patent Gmbh
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Merck Patent Gmbh filed Critical Merck Patent Gmbh
Publication of CZ130093A3 publication Critical patent/CZ130093A3/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H13/00—Compounds containing saccharide radicals esterified by carbonic acid or derivatives thereof, or by organic acids, e.g. phosphonic acids
    • C07H13/02—Compounds containing saccharide radicals esterified by carbonic acid or derivatives thereof, or by organic acids, e.g. phosphonic acids by carboxylic acids
    • C07H13/04—Compounds containing saccharide radicals esterified by carbonic acid or derivatives thereof, or by organic acids, e.g. phosphonic acids by carboxylic acids having the esterifying carboxyl radicals attached to acyclic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H15/02—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures
    • C07H15/04—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures attached to an oxygen atom of the saccharide radical
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H15/02—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures
    • C07H15/04—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures attached to an oxygen atom of the saccharide radical
    • C07H15/10—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures attached to an oxygen atom of the saccharide radical containing unsaturated carbon-to-carbon bonds

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Description

Řešení se týká způsobu výroby polymemích Lewisových Xsacharidů obecného vzorce I, kde X představuje OC(=NH)CCh (TCAI), Z nebo S; Z představuje OCH2CH(NHeOCuH2u+i)CH(OH)CH= =CHC„H2v+i; S představuje (CH2)qCOOR”; R předtavuje OH, Rsg; Rsg představuje OAc, Obn nebo OBz; R’ představuje OH, OAC nebo OPiv; R” představuje alkyl s 1 až 4 atomy uhlíku, Ac představuje acetyl, Bn představuje benzyl, Bz představuje benzoyl, Piv představuje pivaloyl, n je celé číslo od 0 do 7, q je celé Číslo od 4 do 12, u je celé číslo od 13 do 23 a v je celé číslo od 11 do 17. Dále je předmětem řešení zp&sob výroby odpovídajících meziproduktů, jakož i polymerní Lewisovy X-sacharidy, zejména tetramemí až oktamerní Lewisovy X-antigeny. Polymerní sacharidy je možno syntetizovat s vysokým výtěžkem stereoselektívně.
(21) 1300-93 (13) A3 5(51)
C 08 B 37/00 C07H 15/04
— .\J
Polymerní Lewisovy X-sacharidy a způsob jejich'výroby
Oblast techniky i
I /
L í co t-o
Vynález se týká polymerních Lewisových X-sacharidů a nového efektivního způsobu jejich výroby. Zejména se vynález týká dimerních až oktamerních Lewisových X-derivátů.
Dosavadní stav techniky
Biologický význam, který mají glykokonjugáty, zejména glykolipidy, popřípadě glykosfingolipidy, v roli s tumory sdružených antigenů, v oboru léčení a diagnostiky tumorů (například Hakomori (1985) , Cancer Res. 45, 2405) vyvolal velký zájem o chemickou syntézu především oligosacharidového podílu. Oligosacharidové epitopy mohou fungovat jako hapteny a iniciovat protilátky, kterých lze použít jako potenciálních kandidátů pro terapeutické či diagnostické působení na karcinomy a jejich metastázy nebo ke stimulaci inherentní obrany těla vůči tumorovým buňkám (například Castronovo a další (1989), J. Nati. Cancer. Inst.’ 81 (3) 212).
Známým antigenem sdruženým s tumory je Lewisův antigen X (Le ), jehož oligosacharidová složka se skládá z Gal (1—>4)- : (Fuc—* 3)/GlcNAc. Lewisův antigen je znám ve formě monomeru, dimeru a trimeru (například Holměs a další (1987), J. Biol. Chem. 262, 11331 a 15649).
γ
Dřívější syntézy Le antigenů se soustřeďovaly na různé strategie syntézy, použití různých stavebních prvků syntézy a různých chránících skupin. Tak se například nechaly reagovat
4-G-nechráněné glukosaminové akceptory s galaktosylovými donory a po 3-O-deprotekci byly produkty přikondenzovány k fukosylovému zbytku (například Nicolaůu a další (1990), J. Am. Chem. Soc. 112, 3693; Nicolaou a další (1992), J. Am. Chem. Soc. 114,
3126; Sáto a další (1988), Tetrahedron Lett. 29, 5267; Sáto a další ‘(1987) Carbohydr. Res.. 167, 197; Hindsgaul a další (1982) Carbohydr. Res. 109*, 109; Lónn (1985), Carbohydr. Res. 139,
115; Classon a další (1989), J. Carbohydr. Chem. 8, 543). Alternativně bylo také provedeno prodloužení řetězce odpovídajících derivátů laktosaminu s následnou fukosylací (například Nillson a další (1987), Glycokonjugate J. 4, 219; Nillson a další (1988), Carbohydr. Res. 183, 183)), nebo byla vyvinuta strategie na základě azidolaktosy (například Bommer a další (1990),.Liebígs. Ahn. Chem. 425) . Dalších zlepšení bylo možno dosáhnout uplatněním alfa-fukosylace prostřednictvím fukosylového donoru za použití inverzního postupu (napříklas Schmidt a další (1981), Tetrahedron Lett. 32, 3353) nebo vytvořením -glykosidické vazby prostřednictvím 2-azidoglykosylového donoru za použití nitrilového efektu (například Schmidt a další. (1990) ,. Synlett 694; Vankar a další. (1991), Tetrahedron Lett..47, 9985). Touto metodikou se mimo jiné dosahuje vysoké stereoselektivity, zejména v glykosy lačním stupni, což je žádoucí pro zachování předvídané biologické aktivity.
Přes uvedená, optimalizační opatření je pozorováno, že výtěžky u syntézy známých tetra-, hexa- a oktasacharidů zpravidla se stoupající délkou řetězce významně klesají. V důsledku toho bylo možno očekávat, že při uplatnění známých postupů při syntéze vyšších polymerních oligosacharidů, které jsou pro uvedená použití rovněž velmi zajímavé, se dosáhne ještě nižších výtěžků a tím tedy nedostatečné hospodárnosti.
Především se nedalo očekávat, že u tri-, tetra-, hexanebo dokonce oktamerních Lewisových X-derivátů, tedy oligosacharidů, které se skládají z jedenácti, čtrnácti, dvaceti nebo šestadvaceti monocharidových stavebních prvků, povede použití známého postupu k uspokojivým výtěžkům.
Vyvstal tedy úkol změnit a optimalizovat postupy osvědčeX né pro stavební prvky nižších Le -derivátů tak, aby se také deriváty získávané přes oktasacharidy staly z praktického hlediska dostupné.
Podstata vynálezu ..
Nyní bylo zjištěno, že polymerní Lewisovy X-sacharidy je možno vyrobit libovolným prodloužením řetězce z Le -hexasacharidů, jako výchozí látky, za použití odpovídajících donorních a akceptorních stavebních prvků, přičemž je možno používat tricjiloracetimidátů (TCAI) jako donorních stavebních prvků a jako akceptorních stavebních prvků pak sacharidů se štericky náročnými chránícími skupinami, zejména O-terc.butyldimethylsilylových sloučenin (OTBS), odvozených od řady Le -trisacharidových složek, popřípadě včetně disacharidů fungujících jako akceptory.
Podle vynálezu se uvedené akceptorní sloučeniny vyznačují tím, že obsahují arylidenovou chránící skupinu, zejména 4,6-0- . ·
-benzylidenovou chránící -skupinu, především na koncových kruzích galaktopyranosy, takže je umožněn snadný selektivní přístup k příslušné 3-0-poloze,· která je odpovědná za vlastnosti glyko- *as sylového akceptoru.
X
Kromě toho bylo zjištěno, že Le -hexasacharidy je možno přes odpovídající trisacharidy efektivně vyrábět z lehce při,/ stupného terč.butyldimethylsilyl-2-azido-4,6-0-benzylidenglu' / kopyranosidu nebo odpovídajícího jinak silylovaného a/nebo ary/ lidenovaného 2-azidoglukopyranosidu, který rovněž vykazuje výše uvedený systém ochranných skupin s vlastnostmi, které odpovídají požadovaným donorním a akceptorním funkcím.
Získají se tedy polymerní Le -deriváty se stupněm stereo- .
selektivity od 90 do 100 %, přednostně 95 až 99 % a ve výtěžku mezi 65 a 85 %, přednostně mezi 70 a 80 %, vztaženo vždy na jeden cyklus prodloužení řetězce. Je překvapivé, že výtěžek sloučenin podle vynálezu neklesá se stoupající délkou řetězce, a to například od dimerních přes tetramerní až po oktamerní
Lewisovy X-deriváty. Dokonce i další prodloužení řetězce (kdy n je vyšší než 7, obecné vzorce I a IV) vede k podobným výsledkům, což umožňuje učinit závěr, Že pomocí způsobu podle vynálezu jsou dostupné dokonce vysoce polymerní Lewisovy X-sacharidy.
Předmětem vynálezu je tedy způsob výroby polymerních Lewisových X-sacharidů obecného vzorce I
(I) kde
X představuje
z představuje
s představuje
R představuje
rs9 představuje
R* představuje
R představuje
Ac představuje
Bn představuje
OC(=WCC13 (TCAI) , Z nebo S;
OCH2CH(NHCOCuH2u.+ 1)CH(OH)CH=CHCvH2v + L;
(CH-) COOR;
OH, A,
OAc, OBn nebo Obz;
OH, OAc nebo OPiv;
alkyl s 1 až 4 atomy uhlíku;
acetyl;
benzyl;
Bz představuje benzoyl;
Piv představuje piváloyl;n představuje celé číslo od 0 do 7;
* q představuje celé číslo od 4 do 12;
u představuje celé číslo od 13 do 23; a
(IX)
W představuje O-terc.butyldimethylsilyl (OTBS), O-thexyldimethylsilyl (OTDS) nebo O-terc.butyldifenylsilyl (OTDPS); má shora uvedený význam;
Rx představuje R;
Ar představuje aryl.
Me představuje methyl; a kal představují celé Číslo od 0 do 6;
přičemž pokud Y představuje TCAI, R^ představuje OAc, OBn nebo OBz a když Y má význam W, pak R^ představuje OH;
akceptorním sacharidovým stavebním prvkem obecného vzorce V (V / (y) / ) ,
kde R, Ar, Me a.W mají shora uvedené významy a m představuje celé číslo od 0 do 5;
za vzniku sacharidu obecného vzorce II s delším řetězcem (II /W (x + y)/,kde x představuje číslo-6, 9, 12, 15,
18, 21 a y představuje číslo 3, 6, 9, 12, 15 a 18 a reflektuje počet monosacharidových součástí v dotyčném polysacharidu, přičemž součet x + y nesmí převýšit 24;
(b) převedení na odpovídající donorní sacharid s delším řetězcem obecného vzorce II (II /TCAI/(x + y)/) substitucí volné hydroxyskupiny nebo skupin odpovídajícími chránícími skupinami a substitucí zbytku W zbytkem TCAI;
(c) glykosidace v 1-0-poloze aktivovaného donorního sacharidu ze stupně (h) disacharidem účinkujícím jako akceptor
Kde R a R’ mají shora uvedený význam, za vzniku sacharidu obecného vzorce XV / (x + y + 2)/,
χ* 71 kde R, R', Ar, Me a n mají shora uvedený význam; a (d) redukce azidoskupin na acetamidoskupiny ve sloučenině obecného vzorce IV, odštěpení arylídehových a benzylových zbytků a peroxoacetylace zbytků R a R’, substituce glykosidické acetylskupiny hydroxyskupinou a reakce za vzniku odpovídajícího trichloracetimidátu (X = TCAI) obecného vzorce I a je-li to žádoucí, modifikace zbytku X na Z nebo S a odštěpení chránících skupin {R, R' = OH).
Předmětem vynálezu je dále způsob výroby Lewisových X-hexasacharidů obecného vzorce II {II /TCAI/W/{x)/), k = 0, 1-1, x = 6) , vyznačující se tím, že se nechá reagovat aryliden-2-azidoglukopyranosid vybavený stericky náročnou silylovou chránící skupinou, zejména ale terč.butyldimethylsilyl-2-azido-4,6-0-benzylidenglukopyranosid s trichloracetimidáty odpovídajících monosacharidů za vzniku trisacharidu obecného vzorce II (II /W/(χ)/, k = O, 1=0, χ = 3), z nichž se připraví donorní trisacharid obecného, vzorce II (II /TCAI/(x)/, x = 3) a akceptor4 ní trisacharid obecného vzorce V (V/(y) /, m = 0, y = 3) , které se spolu nechají reagovat za vzniku odpovídajícího hexasacharidu.
Za pomoci způsobu podle vynálezu se mohou syntetizovat také nové polymerni Lewisovy X-sacharidy, zejména tetramerní, hexamerní a oktamerní Lewisovy X-antigeny.
*
Předmětem vynálezu jsou tedy také polymerni Lewisovy X-sacharidy obecného vzorce I, kde symboly a parametry mají shora uvedené významy, přičemž však n představuje celé číslo od 2 do 7 s tím, že- když n představuje číslo 2, X nemá význam Z, kde u má hodnotu. 15, a v má hodnotu 13 a R a R' nepředstavují hydroxy. . Jedná se zejména o:
tetramerní Lewisův X-antigen obecného vzorce I (n = 3) , hexamerní Lewisův X-antigen obecného vzorce I (h.= 5) a oktamerní Lewisův.· X-antigen obecného.vzorce I (n = 7).
Dále jsou předmětem vynálezu polymerni Lewisovy X-sacharidy obecného vzorce II, kde symboly a parametry mají shora uvedený význam, přičemž však k má hodnotu lal představuje celé číslo od 1 do 5, jakož polymerni Lewisovy X-sacharidy obecného vzorce IV, jehož symboly a parametry mají shora uvedený význam, přičemž však n představuje celé číslo od 2 do 7 a konečně polymerni Lewisovy X-sacharidy obecného vzorce V, v němž symboly a parametry mají shora uvedený význam, avšak m představuje celé číslo od 1 do 5 .
Sloučeniny obecného vzorce I, II, IV a V charakterizované v předchozích třech odstavcích jsou vhodné pro použití při diagmorů, jakož i pro výrobu-prctilátek-prcjejich léčení=
Při tom přicházejí v úvahu tumory, které na svém povrchu nesou odpovídající Lewisovy X-antigeny. Jako příklady takových tumorů lze uvést; gastřóiňteštinálňí tumory, karcinom mléčné Žlázy, karcinom ovárií, karcinom jater, karcinom žaludku a karcinom pankreatu. Příprava' takových protilátek se provádí standardními postupy •4 známými z obvyklé literatury (například Harlow, Lané: Antibodies, A Laboratory Manual; Cold Spring Harbor 1988).
Předmětem vynálezu je konečně také použití sloučenin obecného vzorce I, II, IV a V charakterizovaných výše pro výrobu protilátek pro léčení a diagnostikování tumorů.
V předchozím a následujícím textu mají následující zkratky tyto významy:
TCAI trichloracetimidát,
OTBS O-terc.butyldimethylsilyl, .♦V**·
TBAF tetrabutylamoniumfluorid,
TMSOTf ester trimethylsilyltrifluormethansulfonové kyseliny,
DBU ' 1,8-diazabicyklo/5.4.0/undec-7-en,
OTDŠ O-thexyldimethylsilyl,
OTDPS O-terc.butyldifenylsilyl.
...... S- představuje raménko (CH?) COOR, kde R” představu je alkyl
Z q s 1 až 4 atomy uhlíku a q může nabývat shora uvedených hodnot. Alkyl přitom může mít řetězec přímý nebo rozvětvený a konkrétně představuje methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, sek.butyl a terč.butyl. R představuje přednostně methyl nebo ι , hodnotu_. 6. az _10./_2e jména .ale / Zvláště přednostním raménkem je zbytek -(CH2)gCOQEt.
Z má shora uvedený význam, přednostně však představuje OCH2CH(NHCOC15H31)CH(OH)CH=CHC13H27 (ceramid). Parametr u může nabývat hodnot od.13 do 23, přednostně 15 až 20, zejména však 15 a parametr w může nabývat hodnot od 11 do 17, přednostně 13 až 15,. zejména však 13. W představuje stericky náročnou (objemnou) silylovou chránící skupinu, jako například OTBS, OTDS nebo OTDPS. Zvláštní přednost se dává OTBS.
představuje chránící skupinu a představuje O-acetyl, nebo 0-benzoyl.
. 1 (1.1 až 1.5) oředstavuie neidůležitější sloučeAr představuje substituovaný nebo nesubstituovaný aryl nebo heteroaryl, přednostně ale fenyl. Přednostní chránící skupinou každého galaktopyranosidového kruhu je tedy benzyliden. Kromě arylidenových chránících skupin podle vynálezu je také použitelný - i když omezeně - isopropyliden.
Rsg 0-benzyl
Obr niny způsobu podle vynálezu. Čísla se vztahují k odpovídajícím označením v příkladech.
V následujícím textu je obecně popsán způsob podle vynálezu. Stupně tohoto postupu, které odpovídají standardním postupům organické chemie, jako například zavedení a odštěpení chránících skupin, nejsou blíže vysvětlovány. Co se jichž týče, lze odkázat na standardní literaturu (například T. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis., 1981, John Wiley and Sons; Methods in Carbohydrate Chemistry, sv·. I až VIII, Academie Press.
Při způsobu podle vynálezu se pracuje přednostně s chránícími skupinami uvedenými v předchozím i následujícím textu (OAc, OBn, OBz, N^, OPiv); je však možno také používat jiné známé chránící skupiny s vhodným-účinkem na zavádění a odštěpování. Postup za použití trichloracetimidátu byl ve shora uvedené literatuře dostatečně popsán jak obecně, tak pro syntézu definovaných oligosacharidů. Podrobnosti o způsobu podle vynálezu se lze dozvědět z příkladu.
Výchozí sloučeniny pro syntézu podle vynálezu jsou sacharidové sloučeniny obecného vzorce II. 2 nich se způsobem podle vynálezu připravuje jak donorní, tak akceptorní stavební prvek (vzorce V) a z těchto prvků se v opakujících se cyklech syntézy buduje polymerní řetězec.
Nejmenší jednotkou jsou azidotrisacharidy obecného vzorce II (k = 0, 1 = 0). Tyto ústřední základní složky, které sestávají z galaktopyranosového, fukopyranosového a glukopyranosového kruhu, lze připravit způsobem podle vynálezu z odpovídajících monosacharidových stavebních prvků o sobě známými postupy, přičemž se přednostně vychází ze snadno dostupného terc.butyldimethylsilyl-2-azido-4,6-O-benzylidenglukopyranosidu. Vhodné jsou však i odpovídající jinak chráněné 2-azidoglukopyranosidy. Jednotlivě jsou uvedeny v příkladech 1 až 8. Tabulka I (A, B) poskytuje klasifikaci sloučenin obecného vzorce II a V, kde W'představuje například OTBS.
Tabulka I (A) v
Sloučeniny typu II /Y/(Y)/. Y = TCAI nebo OTBS; x = počet monosacharidových jednotek; z = počet trisacharidových jendotek;
A = číslo syntetizované sloučeniny (příkladu); R5^, kal mají * význam uvedený shora.
Typ x/z Ri k 1 A
II [OTBS] 3/1 - 0 0 8
II [TCAI] 3/1 - 0 0 10
II [OTBS] 6/2 OH ‘ ' 0 1 13
II [TCAI] 6/2 Rs<3 0 1 16
II [OTBS]1’ 9/3 OH 1 1 38
II ÍTCAIJU 9/3 R3<J 1 1 41
11' [OTBS]1’ 12/4 • OH 1 2 52
II [TCAI]D 12/4 R’9 ’ 1 2 55
II [OTBS]11 15/5 OH 1 3 -
II [OTBS]1’ 18/6 OH 1 4 -
II [OTBS]1* 21/7 OH 1 5
II [OTBS]1’ 24/8 OH 1 6 —
II [OTBS]2^ 24/8 OH δ 1 -
II [OTBS-] 31 2478 OH 3- ' 3
Označení^ uvedené u typů sloučenin se vztahuje na sloučeniny, které lze připravit z hexasacharidového donoru a odpovídajícího akceptorového stavebního prvku.
Jak dokládá tabulka I, je také možná kombinace donoru s delším řetězcem s odpovídajícím akceptorním sacharidem s řetěz2) cem kratším /například ' : zde se jedná o vazbu mezi 21-sacha3) ridovým donorem a trisacharidovým akceptorem; : koncenzace dv.ou dodekasacharidů.
Tabulka I (B)
Sloučeniny typu V /(y)/. Symbol Y = počet jednotek monosacharidu; z = počet jednotek trisacharidu; A = číslo syntetizované sloučeniny (příklad), m má význam uvedený shora.
Typ y/z m A
V [OTBS] 3/1 0 12
V [OTBS] 6/2 1 51
V [OTBS] 9/3 2 -
V [OTBS] 12/4 3 -
V [OTBS] 15/5 4 -
V [OTBS] 18/6 5
Tabulka II představuje reakce různých sloučenin obecného vzor-
ce II (II. /TCAI/OTBS (x)/) a obecného vzorce V (V /OTBS (y)/) ,
kde W opět představuje pouze jako příklad OTBS.
Tabulka ll
Hodnoty uvedené v závorce odpovídají počtu jednotek monosacharidu v příslušné sloučenině; A = číslo syntetizované sloučeniny (příklad); B = reakční podmínky (tabulka III); C = očekávatelný výtěžek v % (í 5 %) a X má význam uvedený u obecného vzorce I.
Edukt -> Produkt A B C
II[OTBS(3)] II(TCAI (3)] 10 a 95
ÍI[OTBS(3) ] V[OTBS(3)] 12 b 90
II [TCAI (3) ]+V(OTBS (3) ] II[OTBS(6)] 13 c 80
II[OTBS(6>] II(TCAI (6)] 16 d 95
II(TCAI(6)] + III (2) IV(8) 26 c 75
IV(8) I[X(8) ] 27-37 e-k 75
II (TCAI (6) ]+V[0TBS(3) ] II[OTBS(9) ] ; 38 c 75
II(OTBS(9) J II[TCAI(9)] . 41 ď 90
II(TCAI(9)] + 111(2) -IV (11) · · · - -.42 ----- c------- .. 70,-
IV(ll) I (X<11) I 42-49 e-k 75
II[OTBS(6)] V[0TBS (6) ] 51 b 85
II [TCAI (6) ]+V(OTBS (6) ] II[OTBS(12)] 52 c 80
II[OTBS(12) ] II[TCAI(12)) 55 d 95
II(TCAI(12)] + III(2) IV(14) 56 c ' 75
IV(14) I(X(I4)] 57-63 e-k 75
Tab. II (pokračování)
Edukt --—> Produkt A B c
II[OTBS(9) ] V [OTBS (9) 1 - b 85
II[TCAI(9)J+V(OTBS{9)] II (OTBS (18) 1 - c 80
II[OTBS(18)] II[TCAI(18) J - d 90
II[TCAI(18)3 + III(2) IV(20) - c 80
IV (20) I[X(20)] — e-k 75
II[OTBS(12)J V[0TBS(l2) 1 - b 85
II(TCAI (12)3 +VI0TBS(12)] II [OTBS (24) 3 - c 75
II(OTBS(24)] II [TCAI (24) ] - d 90
IIfrCAI(24)] + 111(2) IV(26) - : C 70
IV(26) I (X(26) ] — e-k 75
II[OTBS(9)] V(0TBS(9)] - b 85
II(OTBS<15)3 V[OTBS(15) ] - b 80
II[OTBS(18)] V[0TBS(18) 3. - b 80
II[OTBS(15) ] II [OTBS (15) 3 - d 95
II(OTBS(21) ] II [OTBS (21) 3 - d -
II(TCAI(9)]+V[OTBS(3)] II[OTBS(12) ] - c 85
II(TCAI(6)}+V[OTBS(9)) II [OTBS (15) 1’ - c 85
II (TCAI (9) ]+V[0TBS(6) ] II [OTBS (15) ] - c 80
II[TCAI(12)]+V[0TBS(3)j II (OTBS (15)J - e 85
II[TCAI(6)]+V[OTBS(12) ] II(OTBS (18) } - c 80
II[TCAI(12)]+V(OTBS(6)] II[OT3S(18) 1 - c 80
II[TCAI(15)]+V[0T3S(3)] II[OT3S(18) ] - c 85
II[TCAI(6)]+V(0T3S(15)] II (0T3S (21) ] - c -
II[TCAI(9)]+V(0T3S(12)] II(OT3S(21) 3 c -
II(TCAI(12)3+V[0TBS(9) } II[0T3S<21) 3 - c -
II[TCAI(15)]+V[OTBS(6)] II [OTBS (21) ] - c -
II[TCAI(18))+V(QT3S(3) J 11 [OTBS (211 ! c -
'íi
Edukt ---> 4 Produkt A B C
II(TCAI(6)]+V[OTBS(18) ] II{OTBS(24)] - C 80
II(TCAI(9) ]+V(OTBS(l5)} II{OTBS(24) ] - c 80
II[TCAI(15)]+V(OTBS(9)) II(OTBS(24)] - c 80
II[TCAI (18)]+V[OTBS(6)] II{OTBS(24)] - c 80
II(TCAI(15)] + III(2) IV(17) - c 75
II (TCAI (21) ] + III (2) IV (23) - c. -
IV(17) IIXÍ17)) - e-k 75
IV (23) I [X (23) ] - e-k 70
Tabulka III konkretizuje reakční podmínky uvedené v tabulce „ II. Přitom se výchozí látky, zejména rozpouštědla, katalyzátory a redukční činidla, mohou nahradit jinými odpovídajícími ekvivalenty, které jsou pro tyto účely v organické chemii obvyklé,pokud není uvedeno jinak. Reakční podmínky platí také pro použití sloučenin obecného vzorce II a V, v nichž W nepředstavuje OTBSCa z nepředstavuje ;ceramid (u = 15, 1 · Αν = 13) .
Jednotlivé reakční kroky se provádějí přednostně tak, jak je to specifikováno v tabulce a detailně popsáno v příkladech.
- Tabulka III
Reakční stupeň použité látky/podmínky a zavedení TCAI (1) b arylidenace c glykosidace d zavedení TCAI (2) a převedení N3 ——>HNAc f peracetylace g glykosidická OH h zavedení TCAI (I) i zavedení Z a S
1) TBAF;
2) CCIjCN, DBU
1) NaOCH3/CH3OH;
2) ArCH(OCH3)2, p-TsOH
CH3CN, TMSOTf . (-40 °C)
1) AcjO/pyridin;
2) TBAF, THF;
3) CCI3CN, DBU
1) HjS, pyridin, H2O
2) Ac2O/pyridin
1) Pd/C; H2 , AcOH/CH3OH/4ioxan
2) Ac2O/pyridin......,
N2H4.x AcOH jako v a
S: S-OH, TMSOTf, CH2C12
Z (ceramid) :
1) 2-azido-3-benzoyloxy4-oktadecen-1-o1,
A
CH2C12, TMSOTf; \
2) H2S, pyridin, H2O; (3-dímethylamínopropyl)'Ν' -ethylkarbodiimid,
CisHjjCOOH
NaOCH3, CH3OK.
deprotékče.'
Glykosidace (reakce c) se provádí přednostně v nitrilu jako rozpouštědle, například acetonitrilu, takže již není třeba vyrábět donorní stavební prvky v anomernické čistotě. To zpravidla umožňuje kvantitativní syntéza trichloracetimidátu. Účelně se přidává katalyzátor, například trimethylsilyltrifluormethansulfonát (TMSOTf) za reakční teploty od -30 do -8G°C, přednostně -40°C.
$ Pro výrobu příslušných třichloracetimidátů (reakce a, d) jsou nutná jen malá množství báze (například DBU, 0,1 až 1 %), takže isomer izace trichloracetimidátu není významná.
Disacharidové sloučeniny obecného vzorce III, zejména sloučeninu 25 lze. snadno syntetizovat podle předpisu, který popsali Sáto a další (1988, Tetrahedron Lett. 29, 4097).
Hexasacharid 13 (příklad 13) se podle popsaného způsobu získá v krystalické formě, a je tedy zvláště vhodný jako snadno isolovatelný a kvantitavině čistý meziprodukt pro výstavbu polymerních sacharidových řetězců.
Trichloracetimidátový zbytek sloučeniny obecného vzorce I je mošno - je-li to Žádoucí - nahradit některým ze shora uvedených ramének S, nebo zbytkem Lewisova X-antigenu Z, o sobě známými postupy (reakce i, k) . Raménko S se zavádí přednostně jako ·· S-OH při teplotě místnosti za katalytického účinku například
TMSOTf s výtěžkem 75 až 90 %. Zbytek Z se přednostně zavádí ve dvou krocích, a to v případě, že představuje ceramid, přes sloučeninu (2S,3R,4E)-2-azido-3-benzoyloxy-4-oktadecen-l-ol, 'kyselinu palmitovou a hydrochlorid N-(3-diaminopropyl)-Ν'-ethylkarbodiimidu. Po úplné.deprotekci příslušné polysacharidové části se získají odpovídající di- až oktamerní Lewisovy X-antigeny obecného vzorce I (η - 1 až 7) .
Následující příklady mají za úkol podrobněji osvětlit vynález.
DG = chromatografie na tenké- vrstvě18
Příklady provedeni vynálezu
Příklad 1 terc.butyldimethylsilyl-2-azido-2-desoxy-/3“D-glukopyranosid (1) :
Sloučenina 1 se připraví podle předpisu, který popsali Kinzy a Schmidt (Liebigs Ann. Chem. 1985, 1537 až 1545).
Příklad2 terč .butyldimethylsilyl-2-azido-4,6-0-benzyliden-2-desoxy-β-D-glukopyranosid (2) :
Sloučenina 1 (14,37 g, 45 mmol) v absolutním acetonitrilu (350 ml) se smísí s benzaldehyddimethylacetalem (10,3 g, 67,5 mmol) a p-toluensulfonovou kyselinou (80 mg) . Po jedné hodině při teplotě místnosti se přidá bezvodý uhličitan draselný (2 g) a směs se 30 minut třepe, načež se přefiltruje a zkoncentruje za vakua. Zbytek se přečistí flash chromatografíí, čímž se získá sloučenina 2 (17,06 g, 93 %) ve formě bezbarvého sirupu.
DC /petrolether/methylester kyseliny octové, 5 : 1/: Rf 35 0,34 .
Příklad 3
2,3,4-tri-O-benzyl-0l^J-L-fukopyranosa (3) :
Sloučenina 3 se připraví podle předpisu, který popsali
Dejter-Juszynski a Flowers (Carbohydr. Res. 18 (1971) 219 až
226).
Příklad 4
0-(2,3, 4-tri-0-benzyJ.-a/[l-fukopyranosyl) -trichloracetimidát (4) :
K roztoku sloučeniny 3 (10,0 g, 23,0 mmol) v absolutním dichlormethanu (50 ml) se přidá trichloracetonitril (10 g) a DBU (7 kapek). Po 30 minutách se lehce nažloutlý roztok zkoncentruje za vakua a přečistí na krátkém silikagelovém sloupci /petrolether/methyl-ester kyseliny octové, 3 : 1, + 1 % triethylaminu/. Tak se získá sloučenina 4 (11,85 g, 89 %) v poměru
- 1 : 4, ve formě bezbarvého oleje, který pozvolna tuhne.
DC /petrolether/methylester kyseliny octové, 3 : ly+ 1 % triethylaminu/: Rf = 0,76 pro #-trichloracetimidát, Rf = 0,50 pro /i-trichloracetimidát. Pro /i-trichloracetimidát platí následující hodnoty: /<X/20 = -16,0 (c = 1, CHC13) .
Příklad 5 terč . butyldimethylsilyl-O-(2, 3,4-tri-O-benzyl-a-L-fukopyranosyl) - (1-» 3) -2-azido-4, 6-0-benzyliden-2-áesoxy-J3-D-clukopyranosid (5) :
Sloučenina 2 (2,93 g, 7,19 mmol) se pod atmosférou argonu rozpustí v co nejmenším množství absolutního diethyletheru a smísí s 0,lM roztokem trimethylsilyltrifluormethansulfonátu (1 ml) . Za míchání se ke směsi pomalu přikape koncentrovaný roztok sloučeniny 4 (6,5 g, 11,25 mmol) v absolutním diethyletheru. Pět minut po dokončení přídavku trichloracetimidátu se směs neutralizuje hydrogenuhličitanen sodným (asi 0,5 g) , přefiltruje se a zkoncentruje za vakua. -Produkt se přečistí chromatografií za použití směsi petroletheru a methylesteru kyseliny octové, 7:1, jako elučniho činidla, čímž se získá sloučenina 5 (5,35 g, 85 %), ve formě bezbarvé pěny; DC /petrolether/methylester kyseliny octové, 5 : 1/: R- = 0,54 7(1 E /#/ = -7 ,0 (c = 1, CHCI-).
Příklad 6 terč. buty ldimethyl sily 1-0- (2,3,4-tri-O-benzyl-a-L-fukopyranosyl) - (1—> 3) -2-azido-6-o-benzyl-2-desoxy-p-D-glukopyranosid (6) :
Roztok sloučeniny 5 {10 g, 12,13 mmol) a natriumkyanborhydridu (7,6 g, 121 mmol) v absolutním tetrahydrofuranu (250 ml)
O se míchá s molekulárním sítem (4 A ). Pak se přikapává nasycený roztok chlorovodíku v diethyletheru tak dlouho, až směs vykazuje kyselou reakci. Do reakční nádoby se přidá pevný hydrogenuhličitan sodný, diethylether (400 ml) , jakož i nasycený roztok hydrogenuhl ičitanu sodného (100 ml) a směs se přefiltruje přes skelnou vatu. Organická fáze se oddělí, zkoncentruje za vakua a přečistí flash chromatografií (petrolether/methylester kyseliny octové (gradient 6 : 1 až 5,5 : 1)/. Získá se sloučenina 6 (6,72 g, 67 %) ve formě bezbarvé pěny. DC (petrolether/methyl20 ester kyseliny octové (4 : 1) : R^ = 0,48, /0(/ = -30,0 (c = 2,
CHC13))._
Příklad 7
0- (2,3,4,6-tetra-O-acetyl-a-D-galaktopyranosyl) trichloracetimidát (7):
Sloučenina 7 se připraví podle předpisu, který popsali Schmidt, Michel a Roos (Liebigs Ann. Chem. 1984, 1343 až 1357).
Příklad 8 texc.b utyldimethylsilyl-O- (2,3,4,6-tetra-O-acetyl-f)-D-galaktopyranosyl) -(1-+ 4) -[ (2,3, 4-tri-0-benzyl-<x-L-fukopyranosyl) (1-4 3) ]-2-azido-6-0-benzyl-2-desoxy-JJ-D-glukopyranosid (8):
Ákceptor 6 (9,0 g, 10,89 mmol) a trichloracetimidát 7 (10,72 g, 21,78 mmol) se rozpustí v co nejmenším množství diethyletheru. K roztoku se za míchání přikape roztok trimethylsilyltrifluormethansulfonátu (0,15 ml) v diethyletheru (4 ml). Po skončení přídavku katalyzátoru se směs nechá ještě 20 minut stát, načež se neutralizuje hydrogenuhličitanem sodným (asi 2 g) , poté se přefiltruje a zkoncentruje za vakua. Flash chromatografií (toluen/aceton (gradient 16 ; 1 až 15 : 1 až 14 :
: 1)) se získá sloučenina 8 (8,94 g, 71 %) , DC (toluen/acetoii, 10 : 1): Rf = 0,47, /Λ/20 » - 19,0 (c = 1, CHCl-j) .
Příklad 9
2,3, 4, 6-tatra-O-acetyl-p-D-galaktopyranósyl-(l-> 4)-((2,3,4eri-O-benzyl-a-L-fukopyranosyl) -(1—* 3)1 -2-azido-6-0-benzyl2-desoxy-a/p-D-glukooyranosa (9):
K roztoku sloučeniny 8 (5,0 g, 4,32 mmol) v absolutním tetrahydrofuranu (50 ml) se při -45°C za míchání přidá ledová kyseliny octová (0,25 ml, 4,3 mmol). Ke směsi se přikape ÍM roztok tetřábutylamóniumťluoridu v tetrahydrofuranu (5 ml). Směs se zahřeje na 0°C a zředí diethyletherem (500 ml). Organická fáze se promyje nasyceným roztokem chloridu sodného (3 x 80 ml) a za vakua se zkoncentruje a podrobí flash chromatografií (petrolether/methylester kyseliny octové, 5 : 4). Získá se sloučenina 9 (4,32 g, 95*%) ve formě bezbarvé pěny.
DC (petrolether/methylester kyseliny octové, 5 : 4, R^ « = 0,36, /#/20 = -7,5 (c = 1, CHC13).
Příklad 10
O- (2,3,4,6-tetra-0-acetyl-f}-D-galaktopyranosyl) - (1-¼ 4) [ (2,3, 4-tri-O-benzyl-a-L-fukopyranosyl) - (1—> 3) ] -2-azido-6-Obenzyl-2-desoxy-a/p-D-glukopyranosyltrichloracetimidát (10)
K roztoku sloučeniny 9 (2,19 g, 2,08 mmol) v absolutním dichlormethanu (100 ml) se přidá trichloracetonitril (10 g) a DBU (tři kapky), Po 15 minutách se směs zkoncentruje za vakua a eluuje se ze sloupce silikagelu za použití směsi petrol etheru a methýlesteru kyseliny octové, 3 : 2, + 1 % triethylaminu, jako elučního činidla. Získá se sloučenina 10 (2,47 g, 100 %) v poměru A· β = 4 : 5, ve formě bezbarvé pěny.
Příklad 11 terc.butyldimethylsilyl-0-fS-D-galaktopyranosyl-<l-t4)-I2,3,4tri-C—benzyl-a-L-fukopyranosyl)-(!-» 3) l-2-azido-6-O-benzyl-2desoxy-P-D-glukopyranosid (11) :
Sloučenina 8 (4,2 g, 3,63 mmol) se rozpustí v absolutním methanolu (asi 200 ml). Roztok se smísí s'2M roztokem methoxidu sodného. Získaný roztok se přes noc nechá stát a násle(R) dujícího dne se neutralizuje prostřednictvím Amberlite IR 120 (Rohm a Haas), načež se ionex odfiltruje. Zbytek se zkoncentruje za vakua a dvakrát se odpaří s toluenem. Sloučenina 11 (3,22 g) se získá kvantitativně, bez dalšího čištění v analytické čistotě. DC (toluen/aceton, 1 : 1)R^ = 0,6,
M/20 = -47,0 (c = 1, CHC13).
Příklad 12 terč.buty ldimethylsilyl-O- (4,6-0-benzyliden-p-D-galaktopyranosyl) - (l-> 4)-(2,3,4-tri-O-benzyl-a-L-fukopyranosyl) (l-*3) ]-2-azido-6-0-benzyl-2-desoxy-|}-D-glukopyranosid (12) :
K roztoků sloučeniny 11 (3,5 g, 3,5 mmol) v absolutním aceton nitrilu (150 ml) se přidá benzaldehyddimethylacetal (1,1 g, mmol) a kyselina p-toluensulfonová (200 mg). Směs se nechá hodinu stát při teplotě místnosti, načež se k ní přidá bezvodý uhličitan dras*elný (asi 2 g) a získaná směs se 30 minut třepe. Poté se přefiltruje, zkoncentruje za vakua a eluuje ze sloupce silikagelu za použití směsi petroletheru a methylesteru kyseliny octové (gradient 7 : 4 až 7 : 5 až 7 : 6 až 1 : 1), jako,.elučního činidla. Sloučenina 12 vznikne jako bezbarvá pěna (3,22 g, 88 %) .
DC /petrolether/methylester kyseliny octové, 1 : 1) : R- = 0,46 r
M/ = -96,0 (c = 1, CHC1J.
* o
Příklad 13 terč .butyldimethylsilyl-O-(2,3,4,6-tetra-O-acety Ι-β-D-galak, : - Ί'·,1 topyranosyl) -(l-»4)-((2,3,4-tri-O-benzyL-a-L-fukopyranosyl) ' ·' ? fe (l-»3) ] -(2-azido-6-0-benzyl-2-desoxy-(3-D-gLukopyranosyI) -(1—>
3)-<4,6-0-benzyliden-p-D-galaktopyranosyl)-(l-*4)-({2,3,4tri-0-benzyl-a-L-fukopyranosyl)-(l-> 3)]-2-azido-6-O-benzyl'2-desoxy-^-D-glukopyranosič (13) : ®
J
K roztoku sloučeniny 10 (4,75 g, 4,0 mmol) a sloučeniny. - 12 (4,84 g, 4,5 mmol) v absolutním acetonitrilu (60 ml) se při -40°C přikape 0,05M roztok trimethylsilyltrifluormethansulfonátu (0,8 ml) . Po 10 minutách se k roztoku přidá hydrogenuhličitan sodný (asi 0,5 g) a směs se zahřeje na teplotu místnosti.
Směs se přefiltruje a zkoncentruje za vakua. Produkt se podrobí chromatografií na krátkém sloupci silikagelu za použití směsi petroletheru a methylesterů kyseliny octové (3 : 2). Pěna, která vznikla při zkoncentrování se rozpustí v diethyletheru (60 ml). K roztoku se přidá petrolejový benzín (20 ml) a vyloučí se krystaly. Získá se sloučenina 13 ve formě bezbarvých krystalů (6,72 g, 80 %). DC (toluen/methylester kyseliny octové, 4 : 1) : Rf = 0,38, /oč/20 = -56,5 (c = 1, CHC13) , teplota tání 195°C.
Příklad 14 terč .butyldimethylsily 1-0- (2,3,4,6-tetra-0-acetyl-p-D-galaktopyranosyl) - <1—> 4) — t (2,3,4-tri-O-benzyl-a-L-fukopyranosyl) (l—>3) ] - (2-azido-6-0-benzyl-2-desoxy-{J-D-glukopyranosyl) -(1—>
3) -(2-O-acetyl-4, 6-O-benzyliden~[5-D-galaktopyranosyl) - (1-4
4) -[(2,3,4-tri-0-benzyl-a-L-fukopyranosyl)- (1-»3) ]-2-azido6-0-benzyl-2-desoxy-p-D-glukopyranosid (14) :
Sloučenina 13 (6,20 g, 2,95 mmol) se rozpustí ve směsi pyridinu a acetanhydridu (1 : 1, 30 ml) a získaný roztok se přes noc nechá stát. Příštího rána se roztok za vakua zkoncentruje a dvakrát se odpaří . s toluenem. Flash chromatografií (petrolether/methylester kyseliny octové, 5 : 3) se získá sloučenina 14 (6,13 g, 97 %}. DC (petrolether/methylester kyseliny octové, 2 : 1) : R^ = 0,22, /^/^θ « -70,5 (c = 1, CHCl^) .
Příklad 15
0- (2,3,4,6-tetra-O-acetyl^p-D-galaktopyranosyl) - (1—4 4) [(2,3,4-tri-O-benzyl-a-L-fukopyranosyl) -{l-> 3)]-(2-azido-6-Obenzyl-2-desoxy-p-D-glukopyranosyl) — (1—4 3) — (2-O-acetyl-4,6-0ben2yliden-f}-D-galaktopyranosyl) -íl-»4) -[ (2,3,4-tri-O-benzylα-L-fulopyranosyl) - (l-> 3) ] -2-azido-6-O-benzyl-2-desoxy-a/p-0glukopyranosa (15): ·
Roztok sloučeniny 1.4 (5,83 g, 2,72 mmol) v absolutním tetra hydrofuranu (50 ml) se nechá reagovat s ledovou kyselinou octovou (0,16 ml, 2,72 mmol) a ÍM roztokem tetrabutylamoniumf luoridu v tetrahydrofuranu (3,4 ml) způsobem popsaným v příkladu 9. Přečištění se provádí na krátkém sloupci silikagelu za použití směsi petroletheru a methylesteru kyseliny octové (gradient 1 : 1 až 4 : 5) , jako elučního činidla. Získá se sloučenina 15 (5,41 g, 98 %) ve formě bezbarvé pěny. DC (petrolether/raethyl ester kyseliny octové, 1 : 1) : R^ = 0,30, /#/ = -55,5 (c = 1, chci3 ) .
Příklad 16
O- (2,3,4,6-tetra-0-agetyl-p-D-galaktopyranosyl) — (l—>4) — [(2,3,4-O-benzyl-a-L-fukopyranosyl) — (1—>3) j — (2-azido-6-Obenzyl-2-desoxy-{3-D-glukopyranosyl) - (l-> 3) - (2-O-acetyl-4,6-0benzy 1 iden-fJ-D-galaktopyranosy 1) - (1 -> 4) - [ (2,3,4-tri-O-benzylα-L-fukopyranosyl) — (1—> 3) ]-2-azido-6-O-benzyl-2-desoxy-a/J$-Dglukopyranosyltrichlorimidát (16)
K roztoku sloučeniny 15 (5,41 g, 2,67 mmol) v absolutním dichlormethanu (150 ml) se přidá třichloracetonitril (20 g) a DBU (5 kapek). Získaná směs se nechá 30 minut stát, načež se zkoncentruje1za vakua a produkt se přečistí flash chromatogra fií (petrolether/methylester kyseliny octové, 1 : 1,+ 1 % tri ethylaminu). Získá se sloučenina 16 (5,8 g, 100 %) v poměru^.
ťX:|i = 1 : 2, ve formě bezbarvé pěny. DC {petrolether/methylester kyseliny octové, 1 : 1): R- = 0,56 pro ít-trichloracet20 imidát, Rf = 0,62 pro β-trichloracetimidát, /«/ » -46,0 (c = 1, CHCl^) pro 0(-trichloracet imidát, /0(7 = -62,0 (c = 1
CHCl^) pro β-trichloracetimidát. t
Příklad 17
Benzyl-O- (2,4, 6-tri-0-benzyl-|5-D-galaktopyranosyl) - <1—> 4) —
3, 6-di-0-benzyl-2-0-pivaloyl-[$-D-glukopyranosid (25) :
Sloučenina 25 se připraví způsobem, který popsal Sáto a další (Tetrahedron Lett. 29 (1988) 4097 až 4100).
Příklad 18
Bánzyl-O- (2,3,4,6-tetra-O-acetyl-p-D-galaktopyranosyl) (l->4) -((2,3,4-tri-O-benzyl-a-L-fukopyranosyl) -(l->3) ] (2-azido-6-0-benzyl-2-déšoxy-p-D-glukopyranosyl) — (1—► 3) (2-O-acetyl-4,6-O-benzyliden-(3-D-galaktopyranosyl) — (1—* 4) — ((2, 3,4-tr i-O-benzyl-a-L-fukopyranosyl) -(1-4 3) ] - (2-azido-6O-benzyl-2-desoxy-0-D-glukopyranosyl) - (1-4 3) -(2,4, 6-tri-Obenzyl-Ji-D-galaktopyranosyl) -(1-44)-3,6-di-O-benzyl-2-O-pivalcyl-|3-D-glukopy$íosÍd (26) :
Při teplotě -40°C se k roztoku sloučeniny 16 ve formě %/β směsi (1,35 g, 623 ^umoU a akceptoru 25 (1,21 g, 1,25 mmol) v acetonitrilu (5 ml) přikape 0,05M roztok trimethylsilyltrifluormethansulfonátu (0,3 ml). Po 15 minutách se směs neutralizuje hydrogenuhličitanem sodným (asi 0,3 g). Poté se roztok zahřeje na teplotu místnosti a hydrogenuhličitan sodný se odfiltruje. Zbytek se přečistí flash chromatografií za použití . směsi petroletheru a methylesteru kyseliny octové (gradient 2 : 1 až 3 : 2), jako elučního Činidla. Sloučenina 26 se získá ve formě bezbarvé pěny (1,37 g, 74 %) . DC (petrolether/methylester kyseliny octové 3 : 2) : R^ = 0,42, ,/^Γ/^θ = -71,0 (c = 1, chci3).
Příklad 19
Benzyl-O-{2,3,4,6-tetra-0-acetyl-{}-D-galaktopyranosyl) (1-4 4)-( (2,3,4-tri-0-benzyl-a-L-fukopyranosyl)-(l-4 3) )-(2acetamido-6-0-benzyl-2-desoxy-jJ-D-glukopyranosyl) - <1—4 3) (2-O-acetyl-4,6-O-benzyliden-P-D-galaktopyranosyl) - (1-4 4) (2,3,4-tri-O-benzyl-a-L-fukopyraijosyl) -(1-4 3) ]-(2-acetámido-6-0-benzyl-2-desoxy-p-D-glukopyranosyl) - (1-4 3)-(2,4,6tri-O-benzyl-p-D-galaktopyranosyl) - (1-44) -3,6-di-O-benzyl2-0-oivaloyl-|3-D-glukopyranosid (27) :
Azidosloučenina 26 (1,37 g, 416/Umol) se ve směsi pyridinu a vody (asi 100 ml) nechá 30 minut reagovat se sirovodíkem. Poté se směs nechá stát několik dní při teplotě místnosti. Následně se provede N-acetylace ve směsi pyridinu a acet anhydridu 1 : 1. Po flash chromatografií (toluen/aceton, gradinet 4 : 1 až 3 : 1) se získá sloučenina 19 ve formě bezbarvé pěny (1,23 g, 88 %) . DC (toluen/aceton, 5 : 2) : Rf = 0,43 /Of/20 = -44,0 (c = 1, CHC13).
- . 27
P ř ί k 1 a d 2 O
Acetyl-O- (2, 3,4,6-tetra-O-acetyl-fJ-D-galaktopyranosyl)(1-44)-((2,3,4-tri-0-acetyl-a-L-fukopyranosyl)-(l-43) ]-(2acetamido-6-0-acetyl-2-desoxy-p-D-glukopyranosyl) - (1-» 3) (2,4, 6-tri-O-acetyl-p-D-galaktopyranosyl)-(1-44)-( (2,3,4tri-O-acetyl—a-L-fukopyranosyl) - (1—4 3) ] - (2-acetamido-6-0acetyl-2-desoxy-fÍ-D-glukopyranosyl) - (1-4 3) -(2,4,6-tri-O-acetyl^-p-D-galaktopyranosyl) - (1-4 4) -3, 6-di-Q-acetyl-2-O^pivaΙογΙ-α/β-D-glukopyranosid (28) :
Sloučenina 27 (1,34 g, 406 yUitiol) se hydrogenuje za přítomnosti palladia na uhlí (10%, 800 mg, ve směsi kyseliny octové, methanolu a dioxanu 1 ; 1 ; 1 (90 ml) pod atmosférou vodíku a tlaku 0,4 MPa po dobu 48 hodin. Z roztoku se dekantací odstraní palladium na uhlí a poté se roztok přefiltruje přes křemelihu.
Palladium na uhlí se několikrát vypere v methanolu a získaný roztok se znovu dekantuje a přefiltruje. Poté se roztok nechá reagovat se směsí pyridinu a acetanhydridu (1 : 1). Flash chro* matografií za použití směsi toluenu, acetonu a methanolu, gradient 11 : 6 : 0,3 až 10 : 6 : 0,3, se získá bílý prášek (769 J mg, 80 %) . DC (toluen/aceton/methanol, 7 : 6 : 0,3) : 0,45S, /Of/20 = -35,0 (c = 1, CHC13) .
Příklad 21
2,3,4, 6-Tetra-O-acetyl-j3-D-galaktopyranosyl-(l'-4 4)-( (2,3,4tri-O-acetyl^-L-fukopyranosyl) - (1-4 3) ] - (2-acetamido-6-OacetyI-2-desoxy-fJ-D-glukopyranosyl) - (l-> 3) - (2, 4, 6-tri-o-acetyH-D-gal-aktopyranosyl) - (1-4 4) -((2, 3,4-tri-O-ačetyl-a-Lfukopyranosyl) - (1-4 3) J -(2-acetanido-6-O-acetyl-2-desoxy-0-D9lukDpyranoSyl,-(l->3,-(2,4,6-cri-0-aceEyl-^D-galaktopyran°syl, -(1-4 4) -3, 6-di-0-acetyl-2-Q-pivaloyl-<x/(^-D-glυkopyranosa (29):
Peracetylovaná sloučenina 28 (758 mg, 320/Umol) se rozpustí v absolutním dimethylformamidu (20 ml) a při 50°C smísí s hydrazinacetátem (59 mg’ 640/umol). Směs se nechá 30 minut stát a poté se zředí ethylesterem kyseliny octové (150 ml) a promyje se nasyceným roztokem chloridu sodného (30 ml) . Vodná váze se reextrahuje ethylesterem kyseliny octové (2 x 60 ml). Spojené organické extrakty se zkoncentrují za vakua a přečistí flash chromatografií (toluen/methanol, gradient 10 : 1 az 9 : 1) .
Získá se sloučenina 29 (670 mg, 90 %) , ve formě bílého prášku.
DC (toluen/aceton/methanol 6:6: 0,3): = 0,47, /#/ = -37,0, (c = 1, chci3).
Příklad 22
O- (2,3,4,6-Tetra-0-acetyl-p-D-galaktopyranosyl) -(1-44) £(2,3,4-tri-O-acetyl-a-L-fukopyranosyl) - (1—> 3) ]-(2-acetamido6-0-acetyl-2-desoxy-fr-D-glukopyranosyl) - (l-> 3) -(2,4,6-tri-Oacetyl-{3-Ď-galaktopyranosyl) - <1-4 4) - [ (2,3,4-tri-O-acetyl-a-Lfukopyranosyl) — (1—> 3) ] - (2-acetamido-6-0-acetyl-2-desoxy-fi-Dglukopyranosy1) - (1—» 3)-(2,4,6-tri-O-acetyl-p-D-galaktopyraňosyl) - (1-4 4) -3,6-di-O-acetyl-2-0-pivaloyl-ct-D-glukopyranosyl trichloracetimidát (30) :
Sloučenina 29 (658 mg, 283/Umol) se rozpustí v absolutním dichlormethanu (20 ml) . Roztok se smísí s trichlor acetonitri lem (1 ml) a DBU (1 kapka). Po 30 minutách se směs zkoncentruje za vakua a přečistí na krátkém sloupci silikagelu za použití směsi toluenu a methanolu, 10 : 1, jako elučního Činidla.
Získá se bílý prášek (608 mg, 87 %) . DC (toluen/aceton/methanol, 7:6: 0,3): Rf = 0,48, /O*/20 = -25,5 (c = 1, CHCl-j) .
Příklad 2 3
8-ethoxykarbonyloktan-l-ol (31) :
Sloučenina 31 se připraví podle předpisu, který popsali Gerlach'a další (1978 Helv. Chim. Acta, 61 (4) (1978) 1226).
Příklad 24
8-Ethoxykarbonyloktyl-o- (2,3,4,6-tetra-0-acetyl-p-D-galaktopyranosyl- (1-44)-((2,3, 4-tri-O-acetyl-a-L-fukopyranosyl) -(1—>
3, ] — (2—acetamido-6-0—acetyl—2-desoxy—β—D—glukopyranosyl)— (1—4
3) — <2,4, 6-tri-0-acetyl-f}-D-galaktopyranosyl) -(1—>4) — ((2,3,4tri-o-acetyl-a-L-fukopyrancsyl) - (1->3) ]-(2-acetaraido-5-0-acetyl-2-desoxy-0-D-glukopyranosyl) -<l->3) -(2, 4, 6-tri^0-acetylβ-D-galaktopyranosyl) - (1-4 4) -3, 6-di-0-acetyl-2-0-pivaloy Ι-β-Dglukopyranosid (32):
Trichloracetimidát 30 (233 mg, 94,5^nol) a sloučenina připravená podle příkladu 23, která slouží jako raménko, (5 kapek, asi 0,23 mmol) se rozpustí v absolutním dichlormethanu (2 ml). Získaný roztok se míchá 3 hodiny s molekulárním sítem (4 Á)
Poté se k němu přikape 0,01M roztok trimethylsilyltrifluormethán sulfonátu (0,5 ml). Směs se po 30 minutách neutralizuje hydrogenuhličitanem sodným, přefiltruje se a zkoncentruje za vakua. Flash chromatografíí (toluen/methanol, gradient 12 : 1 až 10 : 1 až 9 : 1) se získá sloučenina 32 (175 mg, 75 %).
DC (toluen/aceton/methanol, 7:6: 0,3): Rf = 0,47, /a/20 = -48,0 (c = 1, CHClj)..
Příklad 25
8-Ethoxykarbonyloktyl-O- (β-D-galaktopyranosyl- < 1—> 4) - [ (a-Lfutopyranosyl) — (1—*3))-(2-acetamido-2~desoxy-{J-D-glukopyranosyl) - (1-»3) - (β-D-galaktopyranosyl) - (1-4 4) -((a-L-fukopyranosyl) - (I-» 3) ]-(2-acetamido-2-desoxy-p-D-glukopyranosyl) - (1-4 3) - (β-D-galaktopyranosyl) - (1->4) -β-D-glukopyranosid (33):
Sloučenina 32 (168 mg, 68,2 yumol) se rozpustí v absolutním methanolu (40 ml) . ^Roztok se smísí s ÍM roztokem methoxidu sodného (0,5 ml) a směs se míchá 24 hodin při 45°C a poté se neutra (R) lizuje za použití Amberlite IR 120, přefiltruje se a za vakua zkoncentruje. Zbytek se vyjme do absolutního ethanolu (100 ml) a smísí se s 0,5M roztokem methoxidu sodného (1 ml). Vzniklá směs (R) se 24 hodin míchá, neutralizuje se za použití Amberlite IR 120, přefiltruje se a zkoncentruje za vakua. Získá se téměř bezbarvá sloučenina. Nepatrné znečištění je možno odstranit flash chromatografií na krátkém sloupci s náplní šilikagel RP 18 za použití směsi methanolu a vody, 1 : 1, jako elučního činidla. Získá se ethoxykarbonylokt-l-yl-dimer-Lewis-X (105 mg, 90 %) .
DC (methylester kyseliny octové/isopropanol/voda, 3:3:2):
Rf = 0,43, RP 8-DC (methanol/voda, 1 : 1) : Rf = 0,37, /tf/20 = -57,0 (c = 1, MeOH).
Příklad 26 (2S,3R,4E)-2-azido-3-benzoyloxy-4-oktadecen-l-ol (34):
Sloučenina 34 se získá podle předpisu, který popsal Zimmermann (Tetrahedron Lett. 27 (1986) 481; Angew. Chem. 98 (1986) 722) .
Přík-lad 27
0- (2,3,4,6-Tetra-O-acetyl-p-D-galaktopyranosyl) -d->4) ((2,3,4-tri-O-acetyl-a-L-fukopyranosyl)-(l->3) J-(2-acetamido6-0-acetyl-2-desoxy-P-D-glukopyranosyl) - (l-> 3) -(2,4,6-tri-Oacety Ι-β-D-galakt opyranosy l)-(l->4)-((2,3,4 -tri-O-acetyl -a-Lfukopyranosyl) - (1—>3) ] - (2-acetamidoH>-0-acetyl-2-desoxy-{3-Dglukopyranosyl) - (l->3) -(2,4,6-tri-0-acetyl-p-D-galaktopyranosyl)-(l->4) -(3, 6-di-0-acetyl-2-0-pivaloyl-p-D-glukopyranosyl) - (1—> 1) - (2S, 3R, 4E) -2-azido-3-O-benzoyl-4-oktadecen-l, 3diol (35):
Roztok trichloracetimidátu 30 (137 mg, 55,5/Umol) a akceptoru 34 (48 mg, 111. ^umol) v absolutním dichlormethanu (1 ml) se smísí s 0,0 IM roztokem trimethylsilyltrifluormethansulfonátu (3 ml), způsobem podle příkladu 24. Flash chromatografií (toluen/methanol, gradient 13 : 1 až lí : 1) se získá sloučenina 35 (114 mg, 75 %) ve formě bílého prášku. DC (toluen/aceton/methanol, 7:6: 0,3): Rf = 0,55, /^/ = -44,0 (c-= 1, CHCl-j) .
Příklad 28 £-(2,3,4, 6-tetra-O-acetyl-fS-D-galaktopyranosyI) — (I—> 4) ((2,3,4-tri-O-acetyl-a-L-fukopyranosyl)-(l->3) ]-(2-acetamido6-O-acetyI-2-desoxy-p-D-gLukopyranosyl) — (1—> 3) -(2,4,6-cri-OacetyΙ-β-D-galaktopyranosy 1} - (1 -> 4) - [ (2,3,4-tri-O-acetyl-a-Lfukepyrancsyl) - (1—»3) j - (2-ac2tamido-o-Q-2cetyl-2-cesoxy-^-Dglukopýranosyl) - (1—>3)-(2,4, í-tri-O-acetyl-p-D-galak-opyra?.- osyl) - (Í-* 4)-(3, 6-di-Q-acetyl-2-0-pivaloyl-p-D-giukopyr=h- osyl) - (l-> 1) - (2S, 3R, 4E) -3-O-ben2cyl-2-hexádekanamibo-4-okzadecen-1,3-diol (36):
Roztokem sloučeniny 34 (114 mg, 41,6/umol) v pyridinu (10 ml) a vodě (2,ml) se probublává sirovodík. Po 3 dnech se roztok při 20°C za vakua zkoncentruje. Pevný zbytek se ihned rozpustí v absolutním dichlormethanu (5 ml) a na roztok se působí kyseli nou palmitovou (25 mg, lOO^umol) a hydrochloridem N-(3-dimethyl· aminopropyl) -N'-ethylkarbodiimidu (E. Merck, Darmstadt, SRN) (29 mg, 150 yumol) . Po 18 hodinách se roztok zředí dichlormetha· nem (50 ml) a promyje vodou (20 ml). Organická fáze se zkoncentruje za vakua. Flash chromatografií (toluen/methanol, gradient 12 : 1 až 11 : 1) se získá sloučenina 36 (105 mg, 85 %) ve formě bílého prášku. DC (toluen/aceton/methanol, 7 : 6 : 0,3):
Rf = 0,55, M/20 * -35,0 (c = 1, CHClj) .
Příklad 29
O- (β-D-Galaktopyrangsyl) - (1—>4) — ((Ot-L-fukopyranosyl) -{l->
3) ] - (2-acetamido-2-desoxy-JJ-D-glukopyranosyl) — (1—>3) — (β-D— galaktopyranosyl)-(l->4)-[ (a-L-fukopyranosyl)-(l->3) ]-<2acetamido-2-desoxy-^-D-glukopyranosyl) - (1—> 3) - (β-D-galaktopyranosyl) - (1-4 4) - (β-D-glukopyr anosyi) - (l-> 1) - (2S, 3R, 4E)-2-hexadekanamido-4-oktadecen-l, 3-diol (37):
K roztoku sloučeniny 36 (100 mg, 33,7/Umol) v absolutním methanolu (30 ml) se přidá 1M roztok methoxidu sodného {0,5 ml) á směs se míchá 24 hodin při 45°C. Poté se neutralizuje za použi tí AmberliteIR 120, přefiltruje se a zkoncentruje za vakua.
Zbytek se chromatografuje na sloupci silikagelu RP 18 za použití směsi methanolu a vody, gradient 12 : 1 až 14 : 1 až 16 : 1, jako elučního činidla. Po deprotekci se glykosfingolipid 37 (62 mg, 90 %) rozpustí ve vodě a lyofilizuje. DC (methylester kyseliny octové/isopropy lalkohol/voda, 7 : 6 : 4) : R- = 0,5, L
RP 8-DC (methanol/voda, 9 : 1) : R^ = 0,33, /<X/ = -46,0 (c = 1, MeOH).
Příklad 30 terc.butyldimethylsilyl-O- (2,3,4, S-tetra-O-acetyl-Ji-D-galaktopyranosyl) -(1—>4) -((2,3,4-tri-O-benzyl-ct-L-fukopyranosyl) - (1—> 3) ] - (2— azido-6-0-benzyl-2-desoxy~J3-D-glukopyranosyl) - (l-> 3) - (2-O-acetyl-4,6-O-benzyliden-p-D-galaktopyranosyl) - (1—>4) -((2,3,4-tri-O-benzyl-a-L-fukopyranosyl) -(1->
3) ] - (2-azido-6-O-benzyl-2-desoxy-£-D-glukopyranosyl) - (1—>3) (4, 6-0-benzyliden-fi-D-galaktopyranosyl) - (l-> 4) - [<2,3,4tri-O-benzyl-a-L-fukopyranosyl) - (1—>3) ] -2-azido-6-O-benzyl-2desoxy-p-D-glukopyranosid (38):
Ke směsi trichloracetimidátu 16 (1,72 g, 790/Umol) (příklad 16) a akceptoru 12 (1,13 g, 1,05 mmol) (příklad 12) v absolutním acetonitrilu (20 ) se při -40°C přikape 0,05M roztok trimethylsilyltrif luormethansui fonátu. Po obvyklém zpracování a flash/chromatografii (toluen/aceton, gradient 5 : 1 až 4 : 1) se získá sloučenina’ 38 (1,73 g, 71 %) . DC (petrolether/methylester kyseliny octové, 4 : 3) : R^ = 0,35, /0(/ = -83,0 (c = 1, chci3).
Příklad 31 terč .butyldimethylsilyl-O- (2,3,4, 6-tetra-O-acetyl-^-Dglaktopyranosyl) — {1—> 4) — ((2,3,4-tri-O-benzyl-a-L-fukopyranosyl) — (1—> 3) )-{2-azido-6-O-benzyl-2-desoxy-f3-D-glukopyranósyl) - (2-O-acetyl-4,6-O-benzyliden-fS-D-galaktopyranosyl) (1—^4) -((2,3,4-tri-O-benzyl-a-L-fukopyraňosyl) - (1—> 3) ] (2-azido-6-O-benzyl-2-desoxy-fl-D-glukopyranosyl) - (l-> 3) (1—* 3) — (2-O-acetyl-4, 6-0-benzyliden-^-D-galaktopyranosyl) (l->4) -[{2,3,4-tri-0-ben2yl-a-L-fukopyranosyl)-(l-> 3) ]-2azido-6-0-benzyl-2-desoxy-f}-D-glukopyranosid (39) :
Sloučenina 38 (1,70 g, 551/Umol) se nechá 24 hodin reagovat se směsí pyridinu a acetanhydridu (1 : 1, 10 ml) . Roztok se zkoncentruje za vakua a odpaří se s toluenem. Flash chromatograf ií (petrolether/methylester kyseliny octové, 4 : 3) se získá sloučenina 39 (1,62 g, 94 %). DC (petrolether/methylester kyseliny octové, 4 : 3):-R^ = 0,35, /^Γ/^θ = —84,8 (c = 1, CHCl·^) p i i k l'a d 32
O- (2,3,4,6- etra-O-acetyl-p-D-galaktopyranosy 1) - (l-> 4) [(2,3, 4-tri-0-benzyl-a^L-fukopyranosyl)-(l->3) l-(2-azido-6-Obenzyl-2-desoxy-^-D^glukopyranosyl) — (1—> 3) -(2-O-acetyl-4, 6-0ben2y liden-{S-D-galaktopyranosy 1) - (1->4) - ((2,3,4-tri-0-benzylα-L-fukopyranosyl) - (l-> 3) ] - (2-azido-6-0-benzyl-2-desoxy-^-Dglukopyranosyl) — {1—>3) - (2-O-acetyl-4,6-O-benzyliden-J3-D-galaktopyranosyl) -(l->4) -((2,3,4-tri-O-benzyl-a-L-fukopyranosyl) - (1—> 3) ] -2-azido-5-0-benzyl-2-desoxy-a/|^D-glukopyranosa
.. {40) : : ,
Roztok sloučeniny 39 (1,40 g, 448/Umol) v absolutním tetrahydrofuránu (20 ml) se nechá reagovat s ledovou kyselinou octo4 vou (26/ul, 448/Umol) a 1M roztokem tetrabutylamoniumfluoridu (1 ml) způsobem popsaným v příkladu 9. Flash chromatograf ií (petrolether/methylester kyseliny octové, 4 : 5) se získá sloučenina 40 (1,23 g, 91 %). DC (petrolether/methylester kyseliny octové, 1 : 1) : R = 0,23, /<%/20 = -73,0 (c = 1, CHCip .
Příklad 33
O- (2,3,4,6-tetra-0-acetyl-^-D-galaktopyranosyI) - < 1—»4) ((2,3,4-tri-0-benzyl-<x-L-fukopyranosyl) -(l->3) ] - (2-azido-6-0benzyl-2-desoxy-|i-D-glukopyranosyl) — (1—> 3) — (2-O-acetyl-4,6-0benzyliden-p-D-galaktopyranosyl) -(1—>4)-[ (2,3,4-tri-O-benzylα-L-fukopyranosyl) - (l-> 3) ] - <2-azido-6-0^benzyL-2-desoxy-p-D1 glukopyranosyl) — (1 —> 3 > — (2-O-acetyl-4,6-O-benzyliden-{3-D-galaktopyranosyl) — (1—>4) -[ (2,3,4-tri-Q-benzyl-a-L-fukopyranosyl) - (l-> 3) ]-2-azido-6-0-benzyl-2-desoxy-a/p-D-glukopyranosa (41) :
K roztoku sloučeniny 40 (980 mg, 325/Umol) v absolutním dichlormethanu (30 ml) se přidá trichloracetonitril (3,0 ml) a DBU (1 kapka). Po 30 minutách se roztok za vakua zkoncentrúje
Flash chromatografií (toluen/aceton, 5 : 1/+ 1 % triethylaminu) se získá trichloracetimidát 41 (943 mg, 92 %) v poměru = 1 : 2. DC (toluen/aceton, 5 : Γ) :R, = 0,22 pro <3(-trichloracet 2Π imidát, = 0,29 pro A-trichloracetimidát, - -62,0· £ * 20 (c = 1, CHCip pro ^(-trichloracetimidát, 7^/ a -73,5 (c = 1, CHCl-j) pro fl-trichloracetimidát.
Příklad 34
Benzyl-O- (2,3,4,6-tetra-O-acetyl-p-D-galaktopyranosyl) - (l->
4) -{(2, 3,4-tri-O-benzyl-a-L-fukopyranosyl)-(l->3) ]-(2-azido6—O-benzyl-2-desoxy-{5-£)—glukopyranosyl) - < 1—> 3) - (2-O-acetyl35
4, e-O-benzyliden-p-D-galaktopyranosyl) — (1—>4) —[(2,3, 4-tri-0benzyl-<x-L-fukopyranosyl)— (1—>3)} — (2-azido-6-0-benzyl-2desoxy-{3-D-glukopyraposyl) - (l->3)-(2-0-acetyl-4,6-0-benzyliden-fr-D-galaktopyranosyl) -(1-4 4)-( (2,3,4-tri-O-benzyl-a-Lfukopyranosyl) - (1-* 3) ]- (2-azido-6-O-benzyl-2-desoxy-fi*D-glukopyranosyl) - < 1—> 3) — (2,4, 6-tri-O-benzyi-|J-D-galaktopyranosyl) - (1—* 4) -3, 6-di-0-benzyl-2-0-pivaloyl-p-D-glukopyranosid (42) :
Trichloracetimidát 41 (662 mg, 210/Umol) a akceptor 25 (305 mg, 315/Umol) se nechají reagovat v acetonitrilu (3 ml) při -40°C způsobem popsaným v příkladu 18. Flash chromatografií (toluen/aceton, gradient 8 : 1 až 7 : 1) se získá sloučenina 42 (598 mg, 72 %). DC (toluen/aceton, 6 : 1): Rf = 0,34, /(ý/20 = -84,0 (c = 1, CHC13).
·«» .“JÍ,»
Příklad 35
Benzyl-O- (2, 3, 4, fi-tetra-O-acetyl-p-D-galaktopyranosyl) - (1—>
4) -í (2, 3, 4-tri-0-benzyl-a-L-fukopyranosyl)-(l->3) ]-(2-acet- >
amido-6-C-benzyl-2-cesoxy-p-D-glukopyranosyl) - (1—»3) — (2H0acetyl-4, 6-O-benzyliden-|3-D-galaktopyranosyl) — (1—>4) -[ (2,3,4tri-O-benzyl-a-L-fukopyranosyl) -(1-+3)1- (2-acetamido-6-C-benzyl-2-desoxy-p-D-glufc5?yranosyl) - (!-»3) - (2-O-acetyl-4, 6-0benzyliden-{3-D-galaktopyranosyl) - (1—>4) - ((2,3,4-tri-0-benzylα-L-fukopyranosyl) - (l-> 3) J - (2-acetamido-6-0-benzyl-2-desoxyβ-D-glukopyranosyl) -(l-> 3)-(2,4,6-tri-O-benzyl-p-D-galaktopyranosyl) - (1—> 4) -3, 6-di-0-benzyl-2-0-pivaloyl-{3-0-glukopyranosid (43) :
Roztokem sloučeniny 42 (591 mg, 149/Umol) v pyridinu (40 ml) a vodě (14,5 ml) se způsobem popsaným v příkladu 19 vede sirovodík. Následnou N-acetylací ve směsi pyridinu a acetanhydri du, 1 : 1 se po flash chromatografií (petrolether/methylester kyseliny octové, gradient 6 : 7 až 5 : 6 až 4 : 5) získá sloučenina 43 (520 mg, 86 %). DC (petrolether/methylester kyseli9Ω ny octové, 4 : 5) : Rf = 0,52 [(/( ~ -84,0 (c - 1, CHCl^) .
Příklad 36
Acety 1-0’ (2,3,4,6-tetra-O-acetyl-p-D-galaktopyranosyl) - (l->
4) — f (2,3,4-tri-0-acetyl-<x-L-fukopyranosyl)-(l->3) ]-(2-acetamido-6-0-acetyl-2-desoxy-fJ-D-glukopyranosyl) - (1—> 3) -(2,4, 6tri-0-acetyl-p-D-galaktopyranosyl)-(l->4) -((2,3,4-tri-0-acetyl-a-L-fukopyranosyl) - (1—»3) ]- (2-acetamido-6-O-acetyl-2desoxy-p-D-glukopyranosyl) — < 1—> 3) -(2,4,6-tri-0-acetyl-fJ-Dgalaktopyranosyl) - (I—>4) - ((2,3,4-tri-O-acetyl-a-L-fukopyranosyl) -{!-*3) ] - (2-acetamido-6-0-acetyl-2-desoxy-^-D-glukopyranosyl) - (l-> 3) -(2,4,6-tri-O-acetyl-f3-D-galaktopyranosyl) - (1-»
4)-3, 6-di-0-acetyl-2-0-pivaloyl-a/p-D-glukopyranosid (44) :
Sloučenina 43 (346 mg, 85,5 yiimol) se hydrogenuje způsobem popsaným v příkladu 20, za přítomnosti palladia na uhlí (10%, 200 mg) ve směsi kyseliny octové, methanolu a dioxanu (1 : 1 : 1, 30 ml) pod atmosférou vodíku za tlaku. 0,4 MPa po dobu 48 hodin. Na produkt se následně působí směsí pyridinu a acetanhydridu (1 : i) . Flash chromatografií (toluen/aceton/ /methanol, gradient 9 : 6 0,3 až 8 : 6 : 0,3.) se získá slou cenina 44 (214 mg, 78 %) ve formě bílého prášku. DC (toluen/ 20 /aceton/methanol, 7:6: 0,3): R^ = 0,31, /<// = -45,0 (c - 1, chci3).
Příklad 37
2.3.4.6- tetra-O-acetyl-f3-D-galaktopyranosy 1) -(l-»4)-[(2,3,4tri-O-acetyl-a-L-fukopyranosyl) -(l-»3) ]-(2-acetamido-6-0acetyl-2-desoxy-^D-glukopyranosyl) - < 1—> 3) - (2,4,6-tri-0-acetyl-p-D-galaktopyranosyl) -(l->4) -[ (2,3,4-tri-O-acetyl-a-Lfukopyranosyl) — (1—»3) ] - (2-acetamido-6-O-acetyl-2-desoxy-H> glukopyranosyl) - (1—> 3) -(2,4, e-tri-O-acetyl-p-Dygalaksopyranosyl) - (1—> 4)-((2,3,4-tri-O-acetyl-ar-L-fukopyranosyl) - (l->
3) ] - (2-acetamido-6-0-acetyl-2-desoxy-p-D-glukopyranosyl) (l-* 3)-(2,4,6-t ri-O-acety Ι-β-D-galaktopyranosyl) - (1—» 4) 3.6- di-O-acetyl-2-O-pivaloyl-<x/|J-D-glukopyranosa (45):
Sloučenina 44 (145 mg, 45,1/Umol) se způsobem popsaným v příkladu 21 nechá^reagovat v absolutním dimethylfořmamidu (5 ml) s hydrazinacetátem (9,2 mg, lOO^umol) . Dále se pracuje jako obvykle. Flash chromatografií (toluen/aceton/methanol, gradient 8,5 : 6 : 0,3 až 7,5 : 6 : 0,3) se získá sloučenina (125 mg, 87 %) . DC (dichlormethan/methanol, 20 : 1) :
Rf = 0,10, /Λ?20 = -48,0 (c = 1, CHClj).
Příklad 38
0^(2, 3,4, 6-tetra-O-acetyl-β-ϋ-galaktopyranosyl) -(1-+4) ( (2,3,4-tri-0-acetyl-a-L-fukopyranosyl)-(l—+3) ]-(2-acetamido6-0-acetyl-2-desoxy-p-D-glukopyranosyl) -(1-+3) -{2,4, 6-tri-Oacetyl-p-D-galaktopyranosyl) -(1-+4) -4 (2,3,4-tri-O-ačetyl-a-Lfukopyranosyl) -(1-+3))- (2-acetamido-6-O-acetyl-2-desoxy-p-Dglukopyranosyl) -(1-+3) - (2,4, 6-tri-O-acetyl-fi-D-galaktopyranosyl) -(1-+4) -[ (2,3, 4-tri-0-acetyl-a.-L-fukopyranosyl)-(1-+3) ](2-acetamido-6-0-acetyl-2-desoxy-j3-D—glukopyranosyl) -(1—+3) (2,4, S-tri-O-acetyl-p-Q-galakcopyranosyl) - (1-+ 4) -3, 6-di-Oacetyl-2-0-pivaloyl-<x/|}-D-glukopyranosyltrichloracetimiáát (46) :
Roztok sloučeniny 45 (114 mg, 35,8/Umol) v absolutním dichlormethanu (5 ml) se směsí s trichlorácetonitrilem (1 ml) a DBU (1 kapka) . Směs se po 30 minutách zkoncentruje za vakua a zbytek se podrobí flash chromatografií {dichlormethan/methanol, gradient 20 : 1 až 17,5 : 1 až 15 : 1) . Získá se sloučenina (109. mg, 89 %) . DC (toluen/aceton/methanol, 7:6:· 0,3):
Rf = 0,31, /íX/20 = -29,5 (c = 1, CHC13).
Příklad 39
O-(2,3, 4,6-Tetra-O-acetyl-[3-D-galaktopyranosyl) -(1-+4) ( (2,3,4-tri-0-acetyl-a-L-fukopyranosyl)-(l—+3) )-(2-acetamido6-0-acetyl-2-desoxy-^-D-glukopyranosyl)-(1—*3)-(2,4, 6-tri-Oacetyl-p-D-galaktopyranosyl) -(1-+4) -[ (2,3, 4-tri-O-acetyl-ct-Lf ukopyranosyl) -(1-+3)) = (2-acst«mido-S-C-acaty l-2-ie3Cxy-{3-Dglukopyranosyl) -(1-+3)-(2,4, 6-tri-O-acetyl-(J-D-gal=ktcpyran38 osyl) -(1-+ 4) -[ (2,3,4gtri-O-acetyl-a-L-fukopyranosyl) — (1—>
3) ]-(2-acetamido-6-O-acetyl-2-desoxy-0-D-glukopyranosyl)(1-+3)-(2,4,6-t ri-O-acety Ι-β-D-galak topy ranosyl)-(1-+4)3, 6-di-0-acetyl-2-0-pivaloyl-fW>-glukopyranosyl) - (1-+
1) - (2S, 3R, 4E) -2-azido-3-0-benzoyl-4-oktadecen-l, 3-diol (47) :
Roztok trichloracetimidátu 46 (60,4 mg, 17,7/Umol) a akceptóru 34 (15 mg, 35,4/umol) v absolutním dichlormethanu (1 ml) sje míchá s molekulárním sítem (4 Á) . Po 4 hodinách se přikape 5mM roztok trimethylsilyltrifluormethansulfonátú (0,35 ml).
Dále se pracuje způsobem popsaným v příkladu 24. Flash chromatografií (toluen/aceton/methanol, 10,5 : 6 : 0,4) se získá sloučenina 47 (46,5 mg, 73 %) . DC (toluen/aceton/methanol, 7:6: 0,3 Rf = 0,40, Z^C/20 = -53,0 (c = 1, CHC13).
Příklad 40
O- (2,3,4, 6-Tetra-0-acetyl-j3-D-galaktopyranosyl) - (1-+4)[(2,3,4-tri-O-acetyl-a-L-fukopyranosyl) - (1-+ 3) ]-(2-acetamido6-0-acetyl-2-desoxy-p-D-glukopyranosyl) -(1-+3)-(2,4,6-tri-Oacetyl-p-D-galaktopyranosyl) -(1-+4)-((2,3,4-tri-O-acetyl-a-Lfukopyranosyl) — (1—+ 3) ] - (2-acetamido-6~0-acetyl-2-desoxy-{3-Dglukopyranosyl) - (1-+3) - (2, 4, 6-tri-Oacetyl-0-D-galaktopyranosyl)-(1-+4)-( (2, 3,4-tri-O-acetyl-a-L-fukopyranosyl)-(l-+
3) ]-(2-acetamido-6-0-acetyl-2-desoxy-p-D-glukopyranosyl) (1—♦ 3) -(2,4,6-tri-O-acetyl-P-D-galaktopyranosyl) -(1-+4)3, 6-di-0-acetyl-2-0-pivaloyl-(J-D-glukopyranosyl) - (1—+1) (2S, 3R, 4E) -3-0-benzoyl-2-hexacéfcanamido-4-oktadecen-l, 3-diol (48) :
Roztokem sloučeniny 47 (27,6 mg, 7,63/umol) v pyridinu (10 ml) a vodě (2 ml) se vede sirovodík. Po 3 dnech se směs při 20°C zkoncentruje za vysokého vakua. Zbytek se rozpustí v absolutním dichlormethanu (2 ml). Na roztok se působí kyselinou palmitovou (5 mg, 20/Umol)., jakož i hydrochloridem N-(3-dimethylaminopropyl)-fa'-ethylkarbodimidu (5 mg, 30/umol) . Dále se pracuje způsobem popsaným v příkladu 28. Flash chromatografií (toluen/aceton/methanol, 10,5 : 6 : 0,3) se získá sloučenina 48 (24,2 mg, 84 %) . DC (toluen/aceon/methanol, 7 6 : 0,3):
Rf = 0,40, /tf/ υ = -45,0 (c = 1, CHC13).
1 P ř í k 1 a d ' 4 1
Or (β-D-gaiaktopyranosyl) - (1-44)-( (α-L-fukopyranosyl) - (1-4
3) ] - (2-acetamido-2-desoxy-p-D-glukopyranosyl) - (1-43) - (β-Dgalaktopyranosyl) - < 1—* 4) - [α-L-fukopyranosyl) - (1-4 3) ] - (2acetamido-2-desoxy-p-D-glukopyranosyl) - (1—4 3) - (β-D-galaktopyranosyl) - (1—4 4) - í (α-L-fukopyranosyl) - (1—4 3)1- (2-acetamido2-desoxy-JS-D-glukopyranosyl) - (1-4 3) - (β-D-galaktopyranosyl) - s (1-4 4) - (β-D-glukopyranosyl) -(1-41)- (2S, 3R, 4E) -2-hexadekanamido-4-oktadecen-l,3-diol (49):
K roztoku sloučeniny 48 (20,6 mg, 5,45/umol) v absolutním.^ methanolu. (6 ml) se přidá 0,2M roztok methoxidu sodného (0,25 ml) . Směs se míchá 24 hodin při 45°C, neutralizuje se přidáním í R)
Amberlite IR 120, přefiltruje se a zkoncentruje za vakua. Zbytek se přečistí chromatografií za použití silikagelu RP 18 a směsi methanolu a vody (gradient 9 : 1, 11 : 1, 12,5 : 1) se získá Lex-antigen (12,3 mg, 88’%). DC (methylester kyseliny octové/isopropanol/voda, 7 : 6 : 4) : Rf » 0,23, RP 8:-DC (methanol/voda, 10 : 1): Rf = 0,42, /tf/20 = -55,0 (c = 1, MeOH).
Příklad 42 terč.butyldimethy lsily l-O-(β-D-galaktopyranosyl) -(1-4 4)[ (2,3,4-tri-O-benzyl-a-L-fukopyranosyl) -(1-4 3) ] - (2-azido6-0-benzyl-2-desoxy-fl-D~glukopyranolsyl) - (1-4 3)-(4,6-O-benzy'4 O liden-JJ-D-galaktopyranosyl)- (1-4 4) -((2, 3,4-tri-O-benzylα-L-fukopyranosyl) - tl-> 3) ] -2-a2Ído-6-0-benzyl-2-desoxy-f5-Dglukopyranosid (50) :
Sloučenina 13 (819 mg, 390/Umol) (příklad 13) se suspenduje v absolutním methanolu. Při teplotě nad 45°C se k suspenzi přidá 1,5M ro2tok methoxidu sodného (10 kapek) . Po 2 hodi(R) nách se na světlý roztok působí Amberlite' IR 120 a roztok se- přefiltruje. Koncentrací za vakua se získá sloučenina 50 (764 mg, 100 %) . DC (toluen/aceton, 5 : 3): R^ = 0,37, /#/20 = -82,0 (c = 1, CHCI,).
- J
Příklad 43 terc.butyldimethylsilyl-O- (4,6-0-benzyliden“^-D-galak.topyranosyl)-(1—>4) -(.(2,3,4-tri-O-benzyl-a-L-fukopyranosyl)-(l->3) )(2-azido-6-0-benzyl-2-desoxy-pH3-glukopyranosyl) - (1-4 3) -4,6O-benzyliden-p-D-galaktopyranosyl) -(l->4) -((2,3,4-tri-O-benzyl-a-L-fukopyranosyl) - (1-> 3) ]-(2-azido-6-0-benzyl-2-desoxyβ-0-glukopyranosid (51) :
Roztok sloučeniny 50 (758 mg, 387/umol) v absolutním acetonitrilu (50 ml) se způsobem popsaným v příkladu 12 nechá reagovat s benzaldehyddimethylacetalem (147 mg, 968/Umol) a kyselinou p-toluensulfonovou (30 mg). Dále-se pracuje jako obvykle. Flash chromatografií (petrolether/methylester kyseliny octové (gradient 3 : 2 až 5 : 4 až 1 : 1) se získá sloučenina 51 (627 mg, 86 %) ;
DC (petrolether/methylester kyseliny octové, 1 : 1): Rf = 0,36, /ď/20 = -112,0 (c = 1, CHC13).
Příklad 44 terc.butyldimethylsilyl-O-(2,3,4,6-tetra-O-acetyl-{J-D-galaktopyranosyl) - (1—> 4) - ((2,3,4-tri-O-benzyl-a-L-fukopyranosyl) - (1-4 3) ] - (2-azido-6-O-benzy 1-2-desoxy-^-D-glukopyran41 osyl) -(1,->3) - (2-O-acetyl-4, 6-O-benzyliden-p-D-galaktopyranosyl) - (1-4 4)-( (2, 3, <-tri-O-benzyl-a-L-fukopyranosyl) - (1-43) ] 2-azido-6-0-benzyl-2-desoxy-^-D-glukopyranosyl)-(1-4 3)-(4, 6O-benzyliden-p-D-galaktopyranosyl) -(1—4 4)-[(2,3,4-tri-0-benzýl-a-L-fukopyranosyl) -(1-43)]-(2-azido-6-0-benzyl-2-desoxyβ-0-glukopyranosyl) - (1—» 3)-(4, 6-O-benzyliden-p-D-galaktopyranosyl)- (1—>4)- [ (2,3,4-tri-O-benzyl-a-L-fukopyranosyl)- (l->3) ] 2-azido-6-0-benzyl-2-desoxy^p-D-glukopyranosid (52) :
|L í
K roztoku trichlořacetimidátu 16 (626 mg, 288 mmol) a akceptoru 51 (727 mg, 360/umol) (příklad 43) v absolutním acetonitrilu (12 ml) se přikape při -40°C 0,05M roztok trimethylsilyltrifluormethansulfonátu (0,15 ml). Dále se pracuje výše popsaným způsobem. Flash chromatografií (petrolether/methylester kyseliny octové, gradient 3 : 2 až 5 : 4) se získá sloučenina 52 (859 mg, 77 %) . DC (petrolether/methylester kyseliny octové, 1:1):
Rf = 0,63, /tf/20 = - 101,0 (c = 1, CHC13).
Příklad 45 terč.butyldimethylsilyl-O-(2, 3,4, S-tetra-O-acetyl-p-D-calakcopyranosyl)-(1—4 4)-[(2,3,4-tri-O-benzyl-a-L-fukopyranosyl) (1—>3) ]-(2-azido-6-0-behzyl-2-desoxy-J}-D-glukppyranosyi)-{l->
3) - (2-C-acstyl-4,6-O-benzyliden-[J-D-galcktopyrancsyl) - (1-4
4) -((2,3, 4-tri-O-benzyl-a-L-fufeopyrancsyl)-(1-»3)J-(2-azido6-0-bénzyl-2-desoxy-p-D-glukopyranosyl) - (l-> 3) - (2-O-acetyl4,6-O-benzyliden-J3~D-galaktopyranosyl)-(í->4)-[ (2,3,4-tri-Obenzyl^-a-L-fukopyranosyl) - (l-> 3) ] -2-azido-6-Q-benzyl-2desoxy-{3-D-glukopyranosyl) - (1-4 3) -(2-O-acetyl-4, 6-O-benzyliden-£-D-galaktopyranosyl)-(l->4)-( (2,3, 4-tri-O-benzyl-a-Lfukopyranosyl) -(l-> 3) ] -2-azido-6-Q-benzyl-2-desoxy-^-D-glukopyranosid (53):
Sloučenina 52 (579 mg, 144/umol) se po dobu 24 hodin podrobí působení směsi pyridinu a acetanhydridu (1 : 1, 6 ml) .
Směs se za vakua zkoncentruje a odpaří s toluenem. Flash chromatograf ií (petrolether/methylester kyseliny octové, gradient : 2 až 5 : 4) se získá sloučenina 53 (594 mg, 100 %).
DC (petrolether/methylester kyseliny octové, 5 : 4) : « 0,40 /#/ = -97,0 (c = 1, CHC13).
Příklad 46
0-(2,3,4,6-tetra-O-acetyl-^-D-galaktopyranosyl)-(l->4)((2,3,4-tri-O-benzyl-a-L-fukopyranosyl)-(l->3) )-<2-azido-6-Ofc>énzyl-2-desoxy-íJ-D-glukopyranosyl) - (1—>3> - (2-O-acetyl-4, 6-Obenzyliden-^-D-galaktopyranosyl) - (l-> 4) -((2,3,4-tri-O-benzylα-L-fukopyranosyl) — (1—>3)] — (2-azido-6-0-benzyl-2-desoxy-p-Dglúkopyranosyl) - (1—> 3) - (2-O-acetyl-4, 6-O-benzyliden-J3-D-galaktopyranosyl) — (1—>4) — í (2,3,4-tri-O-benzyl-a-L-fukopyranosyl) -(l->3) I-(2-azido-6-0-benzyl-2-desoxy-ř-D-glukopyranosyl) - (l-> 3) - (2-O-acetyl-4, e^-benzyliden-^-D-galaktopyranosyl)-(l->4) -[ (2, 3, 4-tri-Q-benzyl-a-L-fukopyranosyl)-(l->3) ]2-azido-6-0-benzyl-2-desoxy-o/p-D-glukopyranosa (54) :
Na roztok sloučeniny 53 (582 mg, 141^umol) v absolutním tetrahydrofuranu (10 ml) se způsobem popsaným v příkladu 9 působí ledovou kyselinou octovou (8/Ul, 141/umol) á ÍM roztokem tetrabutylamoniumfluoridu (0,3 ml) . Flash chromatografií (petrolether/methylester kyseliny octové, gradient 1 : 1 až 5 : δ až : 5) se získá sloučenina 54 (531 mg, 94 %}. DC (petrolether/ /methylester kyseliny octové, 4 : 5) : R^ = 0,58, /£/ = -91,0 (c = 1, chci3).
Příklad 47
O- (2, 3, 4,6-tetra-0-acetyl-fJ-D-galaktopyranosyl) — (1—> 4) [(2,3,4-tri-O-benzyl-a-L-fukopyranosyl) - (l-> 3) ]- (2-azido-6-Obenzyl-2-desoxy-ji-D-glukopyranosyl) - (l-> 3) - (2-O-acetyl-4, 6-0benzyliden-fy-0-galaktopyranosyl) -(1—>4) -[ (2,3,4-tri-O-benzylα-L-fukopyranosyl) - (1—> 3) ] - (2-azido-6-O-benzyl-2-desoxy-^-Dglukopyranosyl) -{l-> 3) - (2-O-acetyl-4,6-0-benzyliden-^-D-galaktopyranosyl) -(l-> 4) -[(2,3,4-tri-O-benzyl-a-L-fukopyranosyl) - < 1—>3) ] - (2-azido-6-0-benzyl-2-desoxy-|3-D-glukopyrandsyl) - (l-> 3) - (2-O-acetyl-4,6-0-benzyliden-^-D-galaktopyranosyl)-(l-44)-[ (2,3,4-tri-0-benzyl-a-L-fukopyranosyl)-(l~>3) ]2-azido-6-0-benzyl-2-desoxy-a/p-D-glukopyranosyltrichlor- f acetimidát (55):
Roztok sloučeniny 54 (525 mg, 131/umol) v absolutním dichlormethanu (20 ml) se smísí s trichloracetonitrilem (1,0 ml) , a DBU 1 (1 kapka). Po 30 minutách se směs zkoncentruje za vakua. F-lash chromatografií (toluen/aceton, (gradient 5 : 1 až 4:1) + 1 % triethylaminu) se získá sloučenina 55 (495 mg, 91 %) , jako 0Ó//3 - směs s poměrem d.: 3 = 1 : 2; = 0,47 (pro oba anomery) .
Příklad 48
Benzyl-O- (2,3,4,6-tetra-0-acetyÍ-fJ-D-galaktopyranosyl) - (1-*
4)-[ (2,3,4-tri-O-benzyl-a-L-fukopyranosyl)-(l->3) ]-(2-azido6-0-benzyl-2-desoxy-(3-D-glukopyranosyl) - (1-> 3) - (2-O-acetyl4,6-O-benzyliden-J3-D-galaktopyranosyl) -<l-»4)-[ (2,3, 4-cri-Obenzyl-a-L-fukopyranosyl) - (l->3) ] -(2-azido-6-0-benzyl-2desoxy-^-D-glukopyranosyl) - (l-> 3) - (2-O-acetyl-4,6-0-benzyliden-p-D-galaktopyranosyl) - (l-> 4) - ((2, 3, 4-tři-O-benzyl-a-Lfukopyranosyl, - (1—> 3) ] - <2-azido-6-0-benzyl-2-desoxy-p-D-glu44 kopyranosyl) - (l-> 3) - <2-O-acetyl-4,6-0-benzyliden-fi-D-galáktopyranosyl) -(!-»4)-((2,3,4-tri-O-benzyl-a-L-fukopyranosyl) (1—> 3} ] - (2—azido-6-0-benzyl-2-desoxy-|3-D-glukopyranosyl) - (1-4
3) -(2,4,6-tri-0-benzyl-|J-D-galaktopyranósyl)-(l—>4)-3, 6-di-Obenzyl-2-0—pivaloyl-p-D-glukopyranosid (56):
Trichloracetimidát 55 (389 mg, 93,9/umol) a akceptor 25 (136 mg, 141/umol) se způsobem popsaným v příkladu 18 nechají reagovat v acetonitrilu (2 ml) při -40°C. Flash chromatografií (toluen/aceton, gradient 9 : 1 až 7 : 1 až 6 : 1) se získá sloučenina 56 (358 mg, 77 %) . DC (toluen/aceton, 5 : 1:
Rf - 0,37, /cč/20 - -92,5 (c = 1, CHC13) .
Příklad 49
Benzyl-O-(2,3,4,6-tetra-O-acetyl-P-D-galaktopyranosyl) -(1-4
4) -[ (2,3,4-tri-O-benzyl-a-L-fukopyranosyl)-(1->3) ]-(2-acetamido-6-Ó-benzyl-2-desoxy-f3-D-glukopyranosyl) - (1-+ 3) - (2-0acetyl-4, 6-0-benzylicien-|3-D-galaktopyranosyl) - (I—>4) -{(2,3,4tri-O-benzyl-a-L-fukopyrar.osyl) - (l->3) ] -(2-acetamižo-5-0-benzyl-2-desoxy-|3-D-glukopyranosyl) — (1—> 3) -(2-O-acetyl-4,6-0benzy liden-p-D-galakt opy ranosyl) -(1-44) —((2,3,4-tri-0-benzyla-L-fukopyranosyl) - (1-4 3) ] - (2-acetamido-6-0-benzyl-2-desoxyβ-D-glukopyranosyl) - (l-> 3) - (2-O-acefcyl-4, 6-0-benzyliden-fS-Dgalaktopyranosyl) - (l->4) -((2,3, 4-tri-0-benzyl-<x-L-fvkopyranosyl) - (1—4 3) ] - (2-acetamido-6-0-benzyl-2-desoxy-(J-D-glukopyranosyl) - (1-4 3)-(2,4, 6-tri-O-benzyl-^-D-galaktopyranosyl, - (1-*
4)-3,6-di-O-benzyl-2-O-pivaloyl-p-D-glukopyranosid (57) :
Roztokem sloučeniny 56 (349 mg, 70,6/Umol) v pyridinu (40 ml) a vodě (15 ml) se vede sirovodík tak, jak je to popsáno v příkladu 19. Po N-acetylaci ve směsi pyridinu a acetanhydridu , (1 : 1) a flash ohromatografii (petrolether/methylester kyseli. ny octové, gradient 4 : 5 až 3 : 4 až 2 : 3) se získá sloučenina 57 (305 mg, 85 %). DC.(petrolether/methylester kyseliny octové, 3 : 4): R. = 0,26, /<Z/20 = -55,0'(c = 1, CHCI,) .
J £ J .
$ P ř í k 1 a d 5 0
Acetyl-O- (2,3,4,6-tetra-O-acetyl-p-D-galaktopyranosyl) (1—+ 4) - [ (2,3,4-tri-O-acetyl-a-L-fukopyranosyl) - (1-43} ] - (2acetamido-6-0-acetyl-2-desbxy-^-D-glvkopyranosyl) - (1-4 3) (2,4,6-tri-0-acetyl-p-D-galaktopyranosyl) - (l-> 4) -((2,3,4tri-O-acetyl-a-L-fukopyranosyl) - (1-* 3) ] - (2-acetamido-6-O-acetyl-2-desoxy-p-D-glukopyranosyl) -<l->3) - (2,4,6-tri-O-acetylβ-D-galaktopyranosyl)-(l-> 4)-((2,3,4-tri-O-acty1-a-L-fukopyranosyl) - (l->3) ]- (2-acetamido-5-O-acetyl-2-desoxy-^-D-glU’kopyranosyi) -(l-*3) -(2,4,6-rri-O-acetyl-{J-D-galaktopyranosyl) -(1-44) -[ (2,3, 4-cri-O-acecyl-a-L-fukopyranosyl) -(1—>
3) ] - í2-ace~amido-6-O-acecyl-2-desoxy-fJ-D-glukopyrancsyl) - {1 —>
3) - (2,4, 6-fri-0-actyl-J3-D-galakt:opyranosyl) -{1—>4) -3, 6-di-Oacetyl-2-0-pivaloyl-a/j}~D-gÍukcpyranošid (53) :
Sloučenina 57 (300 mg, 59,0/Umol) se způsobem popsaným ' v příkladu 20 hydrogenuje za přítomnosti palladia na uhlí (10%,
150 mg) ve směsi kyseliny octové, methanolu a dioxanu (1:1:
¢,, : 1, 30 ml) pod atmosférou vodíku za tlaku 0,4 MPa po dobu 48 hodin. Produkt se poté podrobí působení směsi pyridinu a acetanhydridu (1 : 1). Flash chromatografií (dichlormethan/methanol, gradient 97 : 3 až 96 : 4 až 95 : 5 až 94 : 6) se získá sloučenina 58 (193 mg, 81 %). DC (toluen/aceton/methanol,
6:6: 0,3): Rf = 0,41, /tf/20 = -48,0 (c = 1, CHC13).
Příklad 51
2,3,4, S-Tetra-O-acetýl-p-D-galaktopyranosyi) - (l-> 4) -((2,3,4tri-O-acetyl-a-L-fukopyranosyl) - (1-4 3) ] - (2-acetamido-6-0-acetyl-2-desoxy-p-D-glukopyranosyl) - {1—»3) -(2,4,6-tri-O-acetylβ-D-ga lák t opy r anosyl) - (1—> 4)-((2,3,4-tri-O-acetyl-ct-L-fukopyranosyl) - (1—*3) ]- (2-acetamido-6-0-acetyl-2-desoxy-p-D-glukopyranosyl) - (1-4 3) -(2,4,6-tri-0-acetyl-j3-D-galaktopyranosyl) (l->4)-[ (2,3,4-tri-0-actyl-a-L-fukopyranosyl)-(l-43) ]—<2— acet amido-6-0-acetyl-2-desoxy-{3-D-glukopY ranosy 1) -(1-43)(2, 4, 6-tri-0-acetyl-f3-D-galaktopyranosyl)-(l-»4)-( (2,3,4tri-O-acetyl-a-L-fukopyranosyl) — (1—* 3) ] - (2-acetamido-6-O-acetyl-2-desoxy-Ji-D-glukopyranosyl) - (1—> 3) -{2,4,6-tri-O-actylβ-D-galaktopyranosyl) - (1—>4) -3,6-di-0-acetyl-2—0-pivaloylα/β-D-glukopyranosa (59) :
Sloučenina 58 (186 mg, 46,0/Umol) se způsobem popsaným v příkladu 21 nechá reagovat v absolutním dimethylformamidu (6 ml) s hydrazinacetátem (9,2 mg, . lOO^umol) . Dále se pracuje jako obvykle. Flash chromatografií (dichlormethan/methanol, gradient 25 : 1 až 20 : 1 až 15 : 1) se získá sloučenina 59 (163 mg, 88 %) . DC (dichlormethan/methanol, 19 : 1):
Rf = 0,12, /OC/20 = -53,5 (c = 1, CHCl3) .
Příklad 52
O- (2,3,4,6-Tetra-0-acetyl-{3-D-galaktopyranosyl) -(l->4) [ (2,3,4-tri-O-acetyl-a-L-fukopyranosyl) -(1-4 3)]-(2-acetamido-6-0-acetyl-2-desoxy-JS-D-glukopyranosyl) - (1-4 3)-(2,4,6tri-O-acetyl-{J-D-galaktopyranosyl) -(1-4 4)-( (2,3,4-tri-O-acetyl-<x-L-fukopyranosyl) - (1—> 3) ] - (2-acetamido-6-0-acetyl-2desoxy-P-D-glukopyranosyl) - (1-4 3) -(2,4, 6-tri-O-acetyl-fÍ-Dgalaktopyranosyl) - (1-4 4) -((2,3,4-tri-O-actyl-a-L-fukopyran47 osyl) -(1-43) )- (2-acetamido-6-O-acetyl-2-desoxy-p-D-glukopyranosyl) - (l->3) -12, 4,6-tri-O-acetyl-{J-D-galaktopyranosyl) - (1—>
4) -[ (2, 3,4-tri-0-acetyl-<x-L-fukopyranosyl} - (1-4 3) ]- (2-acetamido-6-O-acetyl-2-desoxy-£-D-glukopyranosyl) -(1—> 3) -(2,4, 6t ri-O—acetyl-JJ-D-galak topyranosyl) - (1-4 4) -3, 6-di-Q-acetyl2—O-pivaloyl-α/β-D—glukopyranosyltrichloracetimidát (60) ;
K roztoku sloučeniny 59 (156 mg, 38,8/Umol) v absolutním dichlormethanu (6 ml) se přidá trichloracetonitril (1 ml) a DBU (1 kapka). Po 30 minutách se směs zkoncentruje za vakua.
P-lash chromatografíí (dichlormethan/methanol, gradient 20 : 1 až 17,5 : 1 až 15 : 1) se získá sloučenina 60 (141 mg, 89 %) ve formě &άβ - směsi v poměru 0C‘- = 3 : 1. DC (dichlormethan/ /methanol, 16 : 1): R^ = 0,31 (pro oba anomery). j
A'
Příklad 53
O-(2,3,4,6-tetra-0-acetyl-p-D-galaktopyranosyl) - (1-44) [ (2,3,4-tri-O-acetyl-a-L-fukopyranosyl)-(1-4 3) J-(2-acetamido5-0-acetyl-2-desoxy-fJ-D-giukopyranosyl)-(l-4 3l-(2,4,6-tri-0- « acetyl-β-D-calaktopyranosyl)-(1-+4)-( (2,3, 4-cri-O-acetyl-a-Lfukopyranosyl) - (1—4 3) ] - (2-acetamido-6-O-acetyl-2^desoxy-{J-Dglukopyranosyl)-(1-4 3)-(2,4,6-tri-0-acetyl-J3-D-galaktopyranosyl) - (1-4 4)-((2,3,4-t ri-O-acty Ι-α-L-f ukopyranosy 1) -(1-43)](2-acetamido-6-0-acetyl-2-desoxý-($vD-glukopyranosyl) - (1—4 3) (2,4,6-tri-0-acetyl-p-D-galaktopyranosyl)-(1—44)-((2, 3,4-triO-acetyl-a-L-fukopyranosyl) - (1-4 3) J-(2-acetamido-6-0-acetyl2-desoxy-(J-D-glukDpyranosyl) - (1-4 3) - (2,4,6-tri-O-actyl-p-D-galaktopyranosyl) -(1-4 4) -(3, 6-di-O-acetyl-2-O-pivaloyl-j3-Dglukopyranosyl)-(1-41)-(2S,3R,4E)-2-azido-3H0-benzoyl-4-oktadecen-1,3-diol (61):
Roztok trichloracetimidátu 60' (134 mg, 32,8/umol) a akceptoru 34 (28,2 mg, 65,6/umol) v absolutním dichlormethanu (2 ml) se míchá s molekulárním sítem (4 Á). Po 6 hodinách se ke směsi přikape Ο,ΟΙΜ roztok trimethylsilyltrifluormethansulfonátu. Zpracování reakční směsi se provede způsobem popsaným v příkladu 24. Flash chromatografií (dichlormethan/methanol, gradient 25 : 1 až 22,5 : 1 až 20 : 1) se získá sloučenina 61 (110 mg,
%) . DC (toluen/aceton/methanol, 7:6: 0,3): = 0,45, /ťít?20 = -54,0 (c = 1, CHC13) .
Příklad 54
0-(2,3,4, 6-Tetra-O-acetyl-f3-D-galaktopyranosy 1.) - (1—> 4 )[-(2,3,4-tri-O-acetyl-a-L-fukopyranosyl) - (l-> 3) ] - (2-acetamido6-0-acetyl-2-desoxy-{5-D-glukopyranosyl) - (1-» 3) - (2,4, 6-tri-Oacetyl-p-D-galaktopyranosyl) - (l-> 4) -[ (2,3,4-tri-O-acetyl-a-Lfukopyranosyl) - (1—> 3) 1 - (2-acetamido-6-O-acetyI-2-cesoxyrP-Dglukopyranosyl) - (1-4 3) -{2, 4, S-tri-O-acetyl-p-D-galaknopyranosyl) - (l-> 4) -((2,3,4-tri-O-actyl-a-L-fukopyranosyl) -(1-» 3) ](2-acetamido-6-0-acetyl-2-desoxy-p-D-glukopyranosyl) - (1-4 3) (2,4, 6-tri-O-acetyl-p-D-gaiaktopyranosyl)-(l-4 4)-[ (2,3,4-triO-acetylra-L-fukopyranosyl) - (1-* 3) ] - (2-acetamido-6-O-acetyl2-desoxy-ř-D-glukopyranosyl)-(l-*3)-(2,4, 6-tri-O-acetyl-p-Dgalaktopyranosyl) - (1—4 4) - (3,6-di-0-acetyl-2-0-pivaloyl-fJ-Dglukopyranosyl) - (1—> 1) - (2S, 3R, 4E) -3-0-benzoyl-2-hexandekanamido-4-oktadecen-l,3-diol (62):
Roztokem sloučeniny 61 (104 mg, 23,7/Umol) v pyridinu (10 ml) a vodě (2 ml) se vede sirovodík. Po 3 dnech se směs zkoncentruje za vysokého vakua. Zbytek se ihned rozpustí v absolutním dichlormethanu (5 ml). Roztok se nechá reagovat s kyselinou palmitovou (20 mg, 80/Umol) , jakož i hydrochloridem N-(3-dimethylaminopropyl)-Ν'-ethy lkarbodiimidu (23 mg, 120 ^umol) . Směs se zpracuje způsobem popsaným v příkladu 28. Flash chromatografií (dichlormethan/methanol, gradient 25 : 1 až 23 : 1 až 20 : 1) se získá sloučenina 62 (92,3 mg, 85 S) . DC (toluen/ /aceton/methanol, 6:7: 0,3): R^ = 0,64, /<X/20 = -47,0 (c = 1, CHCLj) .
Příklad 55
O- (P-D-Galaktopyrano^yl) - (1—> 4) - (α-L-fukopyranosyl) - (1-4 3) ] (2-acetamido-2-desoxy-f3-D-glu kopyranosy 1) -(1-43)- (β-D-galaktopyranosyl) -(1-44)-( (α-L-fukopyranosyl) -(1-4 3) ]-(2-acetamido2-desoxy-f3-D-glukopyranosyl) - (1-4 3) - (β-D-galaktopyranosyl) - (1-4 4)-[ (α-L-fukopyranosyl)-(l-»3) ]-(2-acetamido-2-desoxy-^Dglukopyranosyl)-(1-4 3)- (β-D-galaktopyranosyl) -(1-44)-( (a-Lfukopyranosyl) - (1-4 3) ] - (2-acecamido-2-cÍesoxy^3-D-glukQpyranošyl) -(1-4 3) -(p-D-calákcopyranosyl) -(1-4 4) - (β-D-glukopyrandsyl) -(1—41) - (2S, 3R, 4E) -2-hexadekanamido-4-okradecen-l, 3-diol (63):
K roztoku sloučeniny 62 (87,5 mg, 19,1/Umol) v absolutním / ·*' methanolu (30 ml) se přidá ÍM roztok methoxidu sodného (0,25. ml) a směs se míchá 24 hodin při 45°C. Poté se směs neutralizuje Amberlite' ' IR 120, přefiltruje a za vakua zkoncentruje. Zbytek se přečistí chromatografií za použití silikagelu RP 18 a směsi methanolu a vody (gradient 8 : 1 až 12 : 1 až methanol), čímž se získá tetramerní Lex-antigen · (54,2 mg, 91 %). DC (dichlormethan/methanol/voda, 7 : 7 : 2): Rf = 0,35, ŘP 8-DC (raěthanol/voda 9 : 1) : Rf = 0,32, /<X/20 = -57,5 (c = 1, MeOH).

Claims (17)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY ί
    1. Způsob výroby polymerních Lewisových X-sacharidů obecného vzorce I, (I)
    X z
    s
    R
    RS^
    R'
    R
    Ac
    Bn
    Bz
    Piv n
    q u
    v představuje OC(=NH)CCl3 (TCAI), Z nebo S;
    představuje OCH2CH(NHCOCuH2u + χ)CH(OH)CH-CHCvH2v + χ;
    představuje (CH,) COOR;
    z q představuje OH, RSg;
    představuje představuje představuje představuje představuje představuje představuje představuje představuje představuje představuje
    OAc, OBn nebo Obz;
    OH, OAc nebo OPiv;
    alkyl s 1 až 4 atomy uhlíku;
    acetyl;
    benzyl;
    benzoyl;
    pivaloyl;
    celé číslo od 0 do 7; celé číslo od 4 do 12;
    celé číslo od 13 do 2 3; a celé číslo od 11 do 17;
    II při němž se vychází z hexasacharidového stavebního prvku, vyznačující se tím, že se provedou následující kroky:
    (a) glykosidace v 1-O-poloze aktivovaného donorního sacharidového stavebního prvku (II /TCAI/(x)/) zvoleného ze souboru zahrnujícího sloučeniny obecného vzorce II
    Y představuje OC(=NH)CC13 (TCAI) nebo W;
    W představuje O-terc.butyldimethylsilyl (OTBS), O-thexyl dimethyIsilyl (OTDS) nebo O-terc.butyldifenylsilyl (OTDPS) ;
    *R má shora uvedený význam;
    představuje R;
    Ar představuje aryl,
    Me představuje methyl; a kal představují celé číslo od 0 do 6;
    přičemž pokud Y představuje TGAI, R^ představuje OAc, OBn nebo QBz a když Y má význam W, pak R^ představuje OH;
    akceptorním sacharidovým stavebním prvkem obecného V2orce
    V (V /(y)/ ) ,
    III kde R, Ar, Me a W mají shora uvedené významy a m představuje celé číslo od 0 do 5;
    za vzniku sacharidu obecného vzorce II s delším řetězcem (II /W (x + y)/, kde x představuje číslo 6, 9, 12, 15,
    18, 21 a y představuje Číslo 3, 6, 9, 12, 15 a 18 a reflektuje počet monosacharidových součástí v dotyčném polysacharidu, přičemž součet x + y nesmí převýšit 24;
    (b) převedení na odpovídající donorní sacharid s delším řetězcem obecného vzorce II (II /TCAI/(x + y)/) substitucí volné hydroxyskupiny nebo skupin odpovídajícími chránícími skupinami a substitucí zbytku W zbytkem TCAI;
    (c) glykosidace v 1-O-poloze aktivovaného donorního sacharidu ze stupně (b) disacharidem účinkujícím jako ákceptor obecného vzorce III (III) kde R a R' mají shora uvedený význam,
    IV (d) redukce azidoskupin na acetamidoskupiny ve sloučenině obec- &
    něho vzorce IV, odštěpení arylidenových a benzylových 2bytků a peroxoacetylace zbytků R a R', substituce glykosidické acetylskupiny hydroxyskupinou a reakce za vzniku odpovídá- -i jícího trichloracetimidátu {X = TCAI) obecného vzorce I a je-li to žádoucí, modifikace zbytku X na Z nebo S a odštěpení chránících skupin (R, R' = OH) .
  2. 2. -Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že se použije Sloučeniny-obecného vzorce II, u níž je koncový galaktopyranosový kruh acetylován.
  3. 3. Způsob podle nároku 1 nebo 2, vyznačující se t í m , že se použije pivaloylované sloučeniny obecného vzorce III (R' = OPiv).
  4. 4. Způsob podle některého z nároků laž3, vyznačující se t í m , že se glykosidace provádí v nitrilu, jako rozpouštědle.
  5. 5. Způsob podle některého z nároků 1 až 4, vyznačující se t í m , že se jako hexasacharidového stavebního prvku použije sloučeniny 13 (obr. 1 (1.1)).
  6. 6. Způsob podle některého z nároků laž5, vyznačující se t í m , že se použijí odpovídající sloučeniny, v nichž
    W představuje O-terc.butyldimethylsilyl (OTBS), Ar představuje fenyl, u má hodnotu 15 a v má hodnotu 13.
  7. 7. Polymerní Lewisovy X-sacharidy obecného vzorce I, kde symboly a parametry mají význam uvedený v nároku 1, přičemž však n představuje celé číslo od 2 do 7 s tím, že když n má hodnotu 2, X. nemá význam Z, r a R* nepředstavují hydroxyskupiny.
  8. 8. Tetramerní Lewisův X-antigen obecného vzorce I (n = 3) ;
    hexamerní Lewisův X-antigen obecného vzorce I (n = 5) ;
    oktamerní Lewisův .X-antigen obecného vzorce I (h = 7).
  9. 9. Polymerní Lewisův X-sacharid obecného vzorce II, kde symboly a parametry mají význam uvedený v nároku 1, přičemž však k má hodnotu 1 a 1 představuje celé číslo od 1 do 5.
  10. 10. Polymerní Lewisův X-sacharid obecného vzorce IV, kde symboly a parametry mají význam uvedený v nároku 1, přičemž však n představuje celé číslo od 2 do 7.
  11. 11. Polymerní Lewisův X-sacharid obecného vzorce V, kde symboly a parametry mají význam uvedený v nároku 1, přičemž však.m představuje celé číslo od 1 do 5.
  12. 12. Způsob výroby hexamerních Lewisových X-sacharidů obecné ho vzorce II (II /TCAI/W/(x)/) , k = 0, 1=1, x = 6),
    VI vyznačující se tím, že se nechá reagovat 2-azidoarylidenglukopyranosid vybavený stericky náročnou silylovou chránící skupinou á trichloracetimidáty odpovídajících monosacharidů za vzniku trisacharidu obecného vzorce II (II /W/(x)/, k = 0, 1=0, x=3), z něhož se připraví donorní trisacharid obecného vzorce II (II /TGAI/(x)/, x = 3) a akceptorní trišacharid obecného vzorce V (V /(y)/, m = 0, y = 3) , které se nechají vzájemně reagovat za vzniku odpovídajícího hexasacharidu.
    •1
  13. 13. Způsob podle nároku 12, vyznačující se. tím, že se použije terč.butyldimethylsilyl-2-azido-4,6-O-benzylidenglukopyranosidu.
  14. 14. Způsob výroby Lewisových X-sacharidů obecného vzorce IV, vyznačující se tím, že se použije donorního sacharidu obecného vzorce II (II /TCAI/(x)/) podle nároku l(c).
  15. 15. Způsob výroby .Lewisových X-sacharidů obecného vzorce
    V, vyznačující se tím, že se odštěpí chránící skupiny koncového kruhu galaktopyranosy sloučeniny obecného vzorce II (II /W/(x)/, k = 0, 1=0) a polohy 4 a 6 se arylidenují, přednostně benzylidenují.
  16. 16. Způsob výroby Lewisových X-sacharidů obecných vzorců I, IV a V, podle některého z nároků 1 až 6 nebo 14 až 15, vyznačující se tim, že.se použije hexasacharidů obecného vzorce II, které byly připraveny způsobem podle nároku 12.
  17. 17. Použití sloučenin obecných vzorců I, II, IV a V podle nároků 7 až 11 pro. výrobu protilátek pro léčení a diagnostiku tumorů.
    MP-795-93-HO •Λ·* • CA
    ϊ
CZ931300A 1992-06-30 1993-06-29 Polymeric lewis x-saccharides and process for preparing thereof CZ130093A3 (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE4221444A DE4221444A1 (de) 1992-06-30 1992-06-30 Polymere Lewis X-Saccharide und Verfahren zu ihrer Herstellung

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CZ130093A3 true CZ130093A3 (en) 1994-01-19

Family

ID=6462149

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ931300A CZ130093A3 (en) 1992-06-30 1993-06-29 Polymeric lewis x-saccharides and process for preparing thereof

Country Status (15)

Country Link
EP (1) EP0578026A1 (cs)
JP (1) JPH0656901A (cs)
KR (1) KR940005675A (cs)
CN (1) CN1082055A (cs)
AU (1) AU4146293A (cs)
CA (1) CA2099306A1 (cs)
CZ (1) CZ130093A3 (cs)
DE (1) DE4221444A1 (cs)
HU (1) HUT67179A (cs)
MX (1) MX9303902A (cs)
NO (1) NO932378L (cs)
PL (1) PL299500A1 (cs)
SK (1) SK67893A3 (cs)
TW (1) TW260674B (cs)
ZA (1) ZA934660B (cs)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5977328A (en) * 1997-03-12 1999-11-02 Krepinsky; Jiri J. Polyvalent carbohydrate molecules
CN108892740B (zh) * 2018-06-19 2022-01-25 艾立斯特(合肥)生物科技有限公司 一种3,6位支化葡聚六糖的合成方法

Also Published As

Publication number Publication date
HUT67179A (en) 1995-02-28
DE4221444A1 (de) 1994-01-05
CN1082055A (zh) 1994-02-16
SK67893A3 (en) 1994-01-12
CA2099306A1 (en) 1993-12-31
HU9301893D0 (en) 1993-09-28
KR940005675A (ko) 1994-03-22
PL299500A1 (en) 1994-03-07
AU4146293A (en) 1994-01-06
ZA934660B (en) 1994-01-12
NO932378L (no) 1994-01-03
EP0578026A1 (de) 1994-01-12
NO932378D0 (no) 1993-06-29
JPH0656901A (ja) 1994-03-01
TW260674B (cs) 1995-10-21
MX9303902A (es) 1993-12-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Mathieux et al. Synthesis of glycopeptide sequences of repeating units of the mucins MUC 2 and MUC 3 containing oligosaccharide side-chains with core 1, core 2, core 3, core 4 and core 6 structure
US4362720A (en) Synthesis of 2-amino-2-deoxyglycoses and 2-amino-2-deoxyglycosides from glycals
Dullenkopf et al. N-trichloroethoxycarbonyl-glucosamine derivatives as glycosyl donors
US4308376A (en) Synthesis of 2-amino-2-deoxyglycoses and 2-amino-2-deoxyglycosides from glycals
Kinzy et al. Application of the trichloroacetimidate method to the synthesis of glycopeptides of the mucin type containing a β-D-Galp-(1→ 3)-D-GalpNAc unit
Kovac et al. Synthesis of ligands related to the O-specific antigen of type 1 Shigella dysenteriae. 3. Glycosylation of 4, 6-O-substituted derivatives of methyl 2-acetamido-2-deoxy-. alpha.-D-glucopyranoside with glycosyl donors derived from mono-and oligosaccharides.
US5874411A (en) Oligosaccharide glycosides having mammalian immunosuppresive and tolerogenic properties
CZ23894A3 (en) Enzymatic method of hydrocarbon synthesis
Hashihayata et al. Convergent total syntheses of oligosaccharides by one-pot sequential stereoselective glycosylations
Feng et al. Synthesis of a Forssman antigen derivative for use in a conjugate vaccine
Ohtsuka et al. Synthetic studies on glycosphingolipids from the Protostomia phyla: syntheses of arthro-series glycosphingolipids
US5438124A (en) Glycosylating reagent for the synthesis of linear and other α-L-fucosyl oligosaccharides
WO1993024506A1 (en) IMMUNOSUPPRESSIVE AND TOLEROGENIC MODIFIED LEWISC AND LacNAc COMPOUNDS
CZ130093A3 (en) Polymeric lewis x-saccharides and process for preparing thereof
EP0317572A4 (en) PROCESS FOR THE PREPARATION OF PERACETYL OXAZOLINES.
EP1626053B1 (en) Method of alpha-selective glycosylation
Kunetskiy et al. Synthesis of blood group A and B (type 2) tetrasaccharides. A strategy with fucosylation at the last stage
Magnusson et al. Regio-and stereoselective methods of glycosylation
Kanie et al. Synthesis of a precursor of 3-O-(2-acetamido-2-deoxy-3-O-methyl-α-d-galactopyranosyl)-4-O-(4-O-methyl-β-d-glucopyranosyluronic acid)-l-fucose
US5527891A (en) Stereodirected process for synthesis of α-N-acetylgalactosaminides
CA1111417A (en) Synthesis of 2-amino-2-deoxyglycoses and 2-amino-2- deoxyglycosides from glycals
CA1111418A (en) Synthesis of 2-amino-2-deoxyglycoses and 2-amino-2- deoxyglycosides from glycals
Eichler et al. Synthesis of a single repeat unit of type VIII Group B Streptococcus capsular polysaccharide
Kunz et al. Recent advances in the synthesis of glycopeptides
Lou et al. Oligosaccharide Synthesis by Remote Activation: O-Protected 3-Methoxy-2-pyridyloxy (MOP) Glycosyl Donors