CS270963B1 - Method for fermentative preparation of biological active agents - Google Patents
Method for fermentative preparation of biological active agents Download PDFInfo
- Publication number
- CS270963B1 CS270963B1 CS879771A CS977187A CS270963B1 CS 270963 B1 CS270963 B1 CS 270963B1 CS 879771 A CS879771 A CS 879771A CS 977187 A CS977187 A CS 977187A CS 270963 B1 CS270963 B1 CS 270963B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- medium
- lysine
- phenylacetylcarbinol
- preparation
- fermentation
- Prior art date
Links
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 16
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 10
- 239000013543 active substance Substances 0.000 title claims description 6
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims abstract description 24
- 235000019766 L-Lysine Nutrition 0.000 claims abstract description 12
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 claims abstract description 12
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 7
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims abstract description 7
- 239000002699 waste material Substances 0.000 claims abstract description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 5
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 24
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 24
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 15
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 6
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 5
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 4
- 235000012094 sugar confectionery Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 3
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 claims description 3
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 claims description 3
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 claims description 3
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 claims description 3
- OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N Hydrazine Chemical compound NN OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims description 2
- 229910017053 inorganic salt Inorganic materials 0.000 claims 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 abstract description 15
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 abstract description 15
- ZBFFNPODXBJBPW-UHFFFAOYSA-N 1-hydroxy-1-phenylpropan-2-one Chemical compound CC(=O)C(O)C1=CC=CC=C1 ZBFFNPODXBJBPW-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 10
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 abstract description 8
- KWGRBVOPPLSCSI-WPRPVWTQSA-N L-Ephedrine Natural products CN[C@@H](C)[C@H](O)C1=CC=CC=C1 KWGRBVOPPLSCSI-WPRPVWTQSA-N 0.000 abstract description 5
- 239000002994 raw material Substances 0.000 abstract description 4
- KWGRBVOPPLSCSI-UHFFFAOYSA-N d-ephedrine Natural products CNC(C)C(O)C1=CC=CC=C1 KWGRBVOPPLSCSI-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 3
- 229960002179 ephedrine Drugs 0.000 abstract description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 abstract description 3
- 230000000973 chemotherapeutic effect Effects 0.000 abstract description 2
- 239000003181 biological factor Substances 0.000 abstract 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract 1
- 235000013681 dietary sucrose Nutrition 0.000 abstract 1
- 230000000050 nutritive effect Effects 0.000 abstract 1
- 229960004793 sucrose Drugs 0.000 abstract 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 26
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 14
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 10
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 8
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 8
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 8
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 8
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 7
- HUMNYLRZRPPJDN-UHFFFAOYSA-N benzaldehyde Chemical compound O=CC1=CC=CC=C1 HUMNYLRZRPPJDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 5
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 5
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 5
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 4
- VKTCMMONRNFKJD-BYPYZUCNSA-N (2r)-3-aminosulfanyl-2-(ethylamino)propanoic acid Chemical compound CCN[C@H](C(O)=O)CSN VKTCMMONRNFKJD-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 3
- 241000186226 Corynebacterium glutamicum Species 0.000 description 3
- 230000036983 biotransformation Effects 0.000 description 3
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 3
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 3
- QNGNSVIICDLXHT-UHFFFAOYSA-N para-ethylbenzaldehyde Natural products CCC1=CC=C(C=O)C=C1 QNGNSVIICDLXHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- UKAUYVFTDYCKQA-UHFFFAOYSA-N -2-Amino-4-hydroxybutanoic acid Natural products OC(=O)C(N)CCO UKAUYVFTDYCKQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N L-homoserine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCO UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 2
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019797 dipotassium phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- WPLOVIFNBMNBPD-ATHMIXSHSA-N subtilin Chemical compound CC1SCC(NC2=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C(C)CC)C(=O)NC(=C)C(=O)NC(CCCCN)C(O)=O)CSC(C)C2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C1NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C1NC(=O)C(=C/C)/NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)CNC(=O)C(NC(=O)C(NC(=O)C2NC(=O)CNC(=O)C3CCCN3C(=O)C(NC(=O)C3NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(=C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(CCCCN)NC(=O)C(N)CC=4C5=CC=CC=C5NC=4)CSC3)C(C)SC2)C(C)C)C(C)SC1)CC1=CC=CC=C1 WPLOVIFNBMNBPD-ATHMIXSHSA-N 0.000 description 2
- NZWPVDFOIUKVSJ-YFKPBYRVSA-N (2s)-2,6-diamino-n-hydroxyhexanamide Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)NO NZWPVDFOIUKVSJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonium chloride Substances [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000017060 Arachis glabrata Nutrition 0.000 description 1
- 244000105624 Arachis hypogaea Species 0.000 description 1
- 235000010777 Arachis hypogaea Nutrition 0.000 description 1
- 235000018262 Arachis monticola Nutrition 0.000 description 1
- 241000186146 Brevibacterium Species 0.000 description 1
- 241000186216 Corynebacterium Species 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 108010009736 Protein Hydrolysates Proteins 0.000 description 1
- 241000235070 Saccharomyces Species 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 1
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 1
- 239000003674 animal food additive Substances 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 229940044683 chemotherapy drug Drugs 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 1
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 1
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010979 pH adjustment Methods 0.000 description 1
- 235000020232 peanut Nutrition 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Způsob fernentační přípravy biologicky aktivních látek (57) Řešení se týká fermentační přípravy L-lysinu nebo fenylacetylkarbinolu na živných kultivačních médiích, které jako zdroj uhlíku obsahují cukrovinářský cukerný odpad místo standardně používané potravinářské sacharosy. Tím se značně zlevní fermentační příprava uvedených látek. L-lysin se používá jako biofaktor v krmných směsích a fenylacetylkarbinol je základní surovinou pro přípravu chemoterapeutika efedrinu.The present invention relates to the fermentation preparation of L-lysine or phenylacetylcarbinol on nutrient culture media which contain sugar confectionery waste as a carbon source instead of the standardly used food sucrose. This greatly reduces the fermentation preparation of said substances. L-lysine is used as a biofactor in compound feed and phenylacetylcarbinol is an essential raw material for the preparation of the chemotherapeutic drug ephedrine.
Vynález se týká způsobu fermentační přípravy biologicky aktivních látek typu L-lysinu nebo fenylacetylkarbinolu (dále FAK).The invention relates to a process for the fermentative preparation of L-lysine or phenylacetylcarbinol (hereinafter FAK) biologically active substances.
Současné postupy fermentační přípravy fenylacetylkarbinolu používají v kultivačních médiích uhlíkaté substráty, jako jsou sacharosa, resp. glukosa, jako zdroje dusíku jsou používány kukuřičný extrakt, amonné soli a jiné dusíkaté substance. Při fermentační přípravě L-lysinu se používají jako hlavní zdroje uhlíku sacharosa nebo melasa, jako dusíkaté zdroje různé typy hydrolyzátů bílkovinných substrátů, kukuřičný extrakt, amonné soli aj. Nevýhodou dosavadních postupů fermentační přípravy fenylacetylkarbinolu nebo fermentační přípravy L-lysinu je vysoká spotřeba potravinářské sacharosy při výrobě obou typů biologicky aktivních látek a její poměrně vysoká cena. Tato skutečnost nepříznivě ovlivňuje výrobní náklady u obou fermentačních procesů a zároveň odčerpává důležitou surovinu.Current processes for the fermentation preparation of phenylacetylcarbinol use carbonaceous substrates such as sucrose, respectively, in culture media. glucose, corn extract, ammonium salts and other nitrogenous substances are used as nitrogen sources. In the fermentation preparation of L-lysine, the main sources of carbon are sucrose or molasses, as nitrogen sources various types of protein substrate hydrolysates, corn extract, ammonium salts etc. The disadvantage of the current processes of fermentation preparation of phenylacetylcarbinol or fermentation preparation of L-lysine production of both types of biologically active substances and its relatively high cost. This fact adversely affects the production costs of both fermentation processes and at the same time drains off the important raw material.
Uvedené nevýhody odstraňuje způsob fermentační přípravy biologicky aktivních látek typu fenylacetylkarbinolu nebo L-lysinu kultivací produkčních mikroorganismů v tekutých živných médiích obsahujících zdroje uhlíku, dusíku, vitaminů a anorganických solí, za aerobních podmínek, podle vynálezu, jehož podstata spočívá v tom, Že se biologicky aktivní látky získají kultivací produkčních mikroorganismů na fermentačních médiích, které jako zdroje uhlíku obsahují 5 až 204 hmot, cukrovinářského cukerného odpadu s obsahem 48 až 504 hmot, redukujících látek sacharidického charakteru a 0,04 až 0,064 hmot, dusíku, přičemž celkový obsah aminodusíku ve fermentačním médiu činí 0,5 až 1,54 hmot.The aforementioned disadvantages are overcome by a process for the fermentative preparation of biologically active substances of the phenylacetylcarbinol or L-lysine type by culturing the production microorganisms in liquid nutrient media containing sources of carbon, nitrogen, vitamins and inorganic salts, under aerobic conditions according to the invention. they are obtained by culturing the production microorganisms on fermentation media containing 5 to 204 masses as carbon sources, sugar confectionery waste containing 48 to 504 masses, reducing substances of a saccharide nature and 0.04 to 0.064 masses, nitrogen, the total amino nitrogen content in the fermentation medium 0.5 to 1.54 wt.
Způsob podle vynálezu se provádí tak, že se produkční mikroorganismus Sacharomyces coreanus CCM 3395 nebo Corynebacterium glutamicum nebo Orevibacterium flavum kultivuje na tekutém živném médiu, které kromě obvyklých zdrojů dusíku, vitaminů a anorganických solí obsahuje jako náhradní zdroj uhlíku cukrovinářský cukerný odpad z výroby řady produktů, který obsahuje 48 až 504 hmot, redukujících látek sacharidické povahy typu glukosy. Kultivací produkčních mikroorganismů Corynebacterium nebo Brevibacterium se získá L-lysin a kvasinky Sacharomyces coreanus CCM 3395 se používají к blotransformaci benzaldehydu na fenylacetylkarbinol při současné náhradě dalšího množství jinak nutné sacharosy cukrovinářským cukerným odpadem, přičemž výsledky fermentaci jsou stejné jako při klasickém fermentačním postupu.The process according to the invention is carried out by culturing the production microorganism of Saccharomyces coreanus CCM 3395 or Corynebacterium glutamicum or Orevibacterium flavum on a liquid nutrient medium containing, in addition to the usual sources of nitrogen, vitamins and inorganic salts, which contains 48 to 504 masses of a glucose-reducing sugar. Cultivation of the production microorganisms Corynebacterium or Brevibacterium yields L-lysine and the yeast Sacharomyces coreanus CCM 3395 is used to blot the benzaldehyde to phenylacetylcarbinol while replacing the additional amount of otherwise required sucrose with the sugar waste, the fermentation results being the same as in a conventional fermentation process.
Způsob podle vynálezu značně zlevňuje fermentační přípravu L-lysinu, který se používá především jako doplněk krmných směsí a fenylacetylkarbinolu, který je základní surovinou pro přípravu chemoterapeutika efedrinu.The process of the invention greatly reduces the fermentation preparation of L-lysine, which is used primarily as a feed additive and phenylacetylcarbinol, which is the basic raw material for the preparation of the ephedrine chemotherapeutic.
Výhodou způsobu podle vynálezu je úspora potravinářské sacharosy a zužitkování levného cukerného odpadu z cukrovínářských výrob.The advantage of the method according to the invention is the saving of food sucrose and utilization of cheap sugar waste from confectionery production.
Způsob podle vynálezu je následujícími příklady provedení pouze doložen, nikoliv omezen.The process according to the invention is illustrated, but not limited, by the following examples.
Příklad 1Example 1
Kmenem Corynebacterium glutamicum, který se vyznačuje resistencí к S-aminoethyl-L-cysteinu a L-lysinhydroxamátu, se zaočkuje 500 ml varná baňka, která obsahuje 50 ml inokulačního média o tomto složení; sacharosa techn. 30g, octan sodný kryst. 20 g, kukuřičný extrakt 30g, voda dest. ad 1 000 ml; pH média 6,8 až 7,0. Kultivace probíhá za aerobních podmínek při teplotě 29 °C na rotační třepačce s frekvencí otáčení 220 x min.“1 po dobu 18 až 24 hodin. Vyrostlou kulturou se v množství 10 4 obj. zaočkuje 500 ml varná baňka, která obsahuje 20 ml fermentačního média o tomto složení: cukrovinářský cukerný odpad 100g, kukuřičný extrakt 5 g, síran amonný kryst. 25 g, hydrogenfosforečnan draselný 1g, síran hořečnatý kryst. 0,1 g, uhličitan vápenatý mletý 35 g, voda dest. ad 1 000 ml; pH média 6,8 až 7,0. Kultivace probíhá za aerobních podmínek při 29 °C za úpravy pH pomocí 10 4 obj. roztoku amoniaku na pH 7,0. Produkce L-lysinu dosahuje 16g za 72 hodin kultivace, což odpovídá výtěžku při fermentaci s 50g sacharosy/1 fermentačního média.A 500 ml boiling flask containing 50 ml of inoculum medium of this composition is inoculated with the Corynebacterium glutamicum strain, which is characterized by resistance to S-aminoethyl L-cysteine and L-lysine hydroxamate; sucrose techn. 30g, sodium acetate crystal. 20 g, corn extract 30g, water dest. ad 1000 ml; pH of the medium 6.8 to 7.0. Cultivation takes place under aerobic conditions at 29 ° C on a rotary shaker with a rotation speed of 220 x min. 1 for 18 to 24 hours. A 500 ml boiling flask containing 20 ml of a fermentation medium of the following composition is inoculated in a volume of 10 4 vol. Of the grown culture: sugar refuse 100g, corn extract 5 g, ammonium sulfate. 25 g, potassium hydrogen phosphate 1g, magnesium sulfate crystals. 0.1 g, calcium carbonate ground 35 g, water dest. ad 1000 ml; pH of the medium 6.8 to 7.0. Cultivation takes place under aerobic conditions at 29 ° C with pH adjustment with 10 4 vol. Ammonia solution to pH 7.0. L-lysine production reaches 16g per 72 hours of culture, which corresponds to the fermentation yield with 50g sucrose / l fermentation medium.
CS 270963 8181 270963 81
Příklad 2Example 2
Kmenem 8revibacterium flavum, který vyžaduje к růstu homoserin a dále je resistentní vůči S-aminoethyl-L-cysteinu, se zaočkuje baňka s inokulačním médiem, jak je uvedeno v příkladu 1. Vyrostlou kulturou se v množství 10% obj. zaočkuje 500 ml varná baňka, která obsahuje 20 ml fermentačního média o tomto složení: cukrovinářský cukerný odpad 100g, hydrolyzát arašídové mouky 150 ml, kukuřičný extrakt 10 g, síran amonný kryst. 10 g, hydrogenfosforečnan draselný 1g, síran hořečnatý kryst. 0,1 g uhličitan vápenatý mletý 30 g, voda ad 1 000 ml; pH média 6,8 až 7,0. Kultivace probíhá za stejných podmínek, jak popisuje příklad 1; produkce L-lysinu dosahuje 23 g/1 média za 72 hodin kultivace, což plně odpovídá výtěžku při fermentaci s 50 g sacharosy/1 média.The 8revibacterium flavum strain, which requires homoserine to grow and is further resistant to S-aminoethyl-L-cysteine, is seeded with the inoculum medium flask as described in Example 1. A 500 ml boiling flask is inoculated with 10% vol. containing 20 ml of fermentation medium of the following composition: sugar refuse 100g, peanut flour hydrolyzate 150 ml, corn extract 10 g, ammonium sulfate crystals. 10 g, potassium hydrogen phosphate 1g, magnesium sulfate crystals. 0.1 g ground calcium carbonate 30 g, water ad 1000 ml; pH of the medium 6.8 to 7.0. The cultivation is carried out under the same conditions as described in Example 1; L-lysine production reaches 23 g / l medium in 72 hours of culture, which fully corresponds to the fermentation yield with 50 g sucrose / l medium.
Příklad 3Example 3
Kmenem Corynebacterium glutamicum, který vyžaduje homoserin a je resistentní vůči S-aminoethyl-L-cysteinu, se zaočkuje baňka s inokulačním médiem, jak je uvedeno v příkladuThe Corynebacterium glutamicum strain, which requires homoserine and is resistant to S-aminoethyl-L-cysteine, is seeded with an inoculum medium flask as shown in the example.
1. Vyrostlou kulturou se v množství 10% obj. zaočkuje 500 ml varná baňka s fermentačním médiem o složení, jak je uvedeno v příkladu 2. Kultivace probíhá za standardních podmínek * a je dosahováno produkce 20g L-lysinu/1 média za 72 hodin kultivace, což plně odpovídá výtěžku při fermentaci s 50g sacharosy/1 fermentačního média.1. Inoculate the grown culture at a volume of 10% by volume with a 500 ml boiling flask with a fermentation medium of the composition as shown in Example 2. Cultivation takes place under standard conditions * and produces 20 g of L-lysine / 1 medium in 72 hours of cultivation. which fully corresponds to the fermentation yield with 50g sucrose / l fermentation medium.
* Příklad 4* Example 4
Varné baňky o objemu 500 ml se plní 150 ml kultivačního média o tomto složení: cukrovinářský cukerný odpad 50 g, sacharosa 10 g, kukuřičný extrakt 30 g, síran hořečnatý kryst. 0,56 g a dihydrogenfosforečnan draselný 0,6 g, voda ad 1 000 ml; ve srovnání s dosud používaným médiem byl obsah sacharosy snížen ze 30 g/1 média na 10 g sacharosy/1 média. Po zaočkování baněk kmenem Sacharomyces coreanus CCM 3395 probíhala kultivace za aerobních podmínek na třepačce při 28 °C po dobu 21 hodin. Dále byla prováděna biotransformace benzaldehydu na PAK obvyklým způsobem. Dosažená produkce Činila 1 103 mg/FAKu/100 ml, což odpovídá produkci FAKu dosahované na původním médiu ve 100 ml.500 ml beakers are filled with 150 ml of culture medium of the following composition: sugar confectionery waste 50 g, sucrose 10 g, corn extract 30 g, magnesium sulphate crystals. 0.56 g and potassium dihydrogen phosphate 0.6 g, water ad 1000 ml; the sucrose content was reduced from 30 g / l medium to 10 g sucrose / l medium compared to the medium used so far. After inoculation of the flasks with Sacharomyces coreanus CCM 3395, aerobic cultivation was performed on a shaker at 28 ° C for 21 hours. Furthermore, biotransformation of benzaldehyde to PAK was carried out in the usual manner. The production achieved was 1,103 mg / FAK / 100 ml, which corresponds to the production of FAK achieved on the original medium in 100 ml.
Příklad 5Example 5
Varné baňky o objemu 500 ml se plní 150 ml kultivačního média o tomto složení: cukrovinářský cukerný odpad 100 g, kukuřičný extrakt 30 g, síran hořečnatý kryst. 0,56 g, dihydrogenf osf orečnan draselný 0,6 g, voda ad 1 000 ml; z média byla vypuštěna sacharosa používaná v koncentraci 30 g/1 média. Baňky byly po zaočkování kmenem Sacharomyces coreanus CCM 3395 ” kultivovány, jak je uvedeno v příkladu 1. Při biotransformaci bylo dosaženo produkce 1 118 mg/FAKu/100 ml, což představuje produkci dosahovanou na původním médiu.500 ml flasks are filled with 150 ml culture medium of the following composition: sugar refuse 100 g, corn extract 30 g, magnesium sulphate crystals. 0.56 g, potassium dihydrogen phosphate 0.6 g, water and 1000 ml; sucrose used at a concentration of 30 g / l medium was discarded from the medium. The flasks were cultured as in Example 1 after inoculation with Sacharomyces coreanus CCM 3395 ”strain. Biotransformation produced 1118 mg / FAK / 100 ml, which is the production achieved on the original medium.
- Příklad 6- Example 6
Fermentační tank o objemu 1000 1 se plní 8001 kultivačního média o tomto složení: cukrovinářský cukerný odpad 50g, sacharosa 10 g, kukuřičný extrakt 30g, síran hořečnatý kryst. 0,56 g, dihydrogenfosforečnan draselný 0,6 g, voda ad 1 000 ml; pH média se upraví na 5,0 a sterilizace média se neprovádí. Fermentační tank se zaočkuje 3 1 kultury Sacharomyces coreanus CCM 3395 a kultivace se provádí po dobu 20 hodin při teplotě 28 °C, vzdušnění 300 1.minl.míchání, s frekvencí otáček 300 x.min”^. Dále probíhá biotransformace benzaldehydu na FAK obvyklým způsobem. V tomto měřítku bylo dosaženo produkce 1 157 mg FAKu/lOOml, což odpovídá produkci dosahované na původním médiu.A 1000 L fermentation tank is filled with 8001 culture medium of the following composition: sugar refuse 50g, sucrose 10 g, corn extract 30g, magnesium sulfate crystals. 0.56 g, potassium dihydrogen phosphate 0.6 g, water and 1000 ml; The pH of the medium is adjusted to 5.0 and the medium is not sterilized. The fermentation tank was inoculated with 3 L of Sacharomyces coreanus CCM 3395 culture and cultivated for 20 hours at 28 ° C, aeration of 300 rpm, with a rotational speed of 300 x min-1. Furthermore, biotransformation of benzaldehyde to FAK takes place in the usual manner. At this scale, a production of 1157 mg FAK / 100ml was achieved, which corresponds to that achieved on the original medium.
Claims (1)
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CS879771A CS270963B1 (en) | 1987-12-23 | 1987-12-23 | Method for fermentative preparation of biological active agents |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CS879771A CS270963B1 (en) | 1987-12-23 | 1987-12-23 | Method for fermentative preparation of biological active agents |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CS977187A1 CS977187A1 (en) | 1990-01-12 |
CS270963B1 true CS270963B1 (en) | 1990-08-14 |
Family
ID=5446476
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CS879771A CS270963B1 (en) | 1987-12-23 | 1987-12-23 | Method for fermentative preparation of biological active agents |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CS (1) | CS270963B1 (en) |
-
1987
- 1987-12-23 CS CS879771A patent/CS270963B1/en unknown
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CS977187A1 (en) | 1990-01-12 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP4197754B2 (en) | Method for producing lactic acid or succinic acid | |
KR100198039B1 (en) | Method for preparing L-glutamic acid by fermentation | |
US4574117A (en) | Stabilization of phenylalanine ammonia-lyase in a bioreactor using reducing agents | |
JPH0710235B2 (en) | Method for producing orotic acid by fermentation | |
HU202590B (en) | Process for producing l-treonine | |
CS270963B1 (en) | Method for fermentative preparation of biological active agents | |
US3189526A (en) | Method of producing l-homoserine by fermentation | |
US3087863A (en) | Amino acid synthesis | |
US4904587A (en) | Production of D-ribose | |
KR910002850B1 (en) | Mycrobi for producing l-lysing and process for preparing l-lysin from it | |
JP3074781B2 (en) | Production method of L-lysine by fermentation method | |
KR910008636B1 (en) | Method for preparing L-arginine | |
KR920005749B1 (en) | Method for producing l-arginine and new microorganism | |
KR830002485B1 (en) | Process for preparing l-loucine by semi-continue-ous fermentation | |
KR0146493B1 (en) | Process for producing l-alanine by fermentation | |
KR910002860B1 (en) | Method for preparing l-glutamin acid by fermentation | |
KR830001260B1 (en) | Method for preparing L-glutamine by fermentation | |
KR100317902B1 (en) | A microorganism producing glutamic acid and a method for producing glutamic acid using said microorganism | |
RU2059726C1 (en) | Strain of bacterium corynebacterium sp - a producer of l-leucine | |
KR900007000B1 (en) | Novel candida utilis and process for production of protein | |
KR900000938B1 (en) | Method for preparing L-glutamic acid by fermentation | |
RU2099423C1 (en) | Method of citric acid producing | |
JPS58216693A (en) | Preparation of l-glutamic acid or sodium l-glutamate by fermentation method | |
JPS5857156B2 (en) | Production method of coenzyme Q↓1↓0 by fermentation method | |
SU654681A1 (en) | 541-p/47 coryuebacterium glutamicum strain as producer of l-glutamic acid |