CS264878B1 - Haemolysating and conversion solution for haemo-particles large-scale computers - Google Patents
Haemolysating and conversion solution for haemo-particles large-scale computers Download PDFInfo
- Publication number
- CS264878B1 CS264878B1 CS873253A CS325387A CS264878B1 CS 264878 B1 CS264878 B1 CS 264878B1 CS 873253 A CS873253 A CS 873253A CS 325387 A CS325387 A CS 325387A CS 264878 B1 CS264878 B1 CS 264878B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- solution
- hemolysis
- conversion
- conversion solution
- cyanide
- Prior art date
Links
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 title claims abstract 5
- 239000002245 particle Substances 0.000 title claims abstract 3
- XTEGARKTQYYJKE-UHFFFAOYSA-M Chlorate Chemical compound [O-]Cl(=O)=O XTEGARKTQYYJKE-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract 4
- -1 C 15 alkyl phenols Chemical class 0.000 claims abstract 3
- XFXPMWWXUTWYJX-UHFFFAOYSA-N Cyanide Chemical compound N#[C-] XFXPMWWXUTWYJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract 3
- 206010018910 Haemolysis Diseases 0.000 claims abstract 3
- 230000008588 hemolysis Effects 0.000 claims abstract 3
- FDIPWBUDOCPIMH-UHFFFAOYSA-N 2-decylphenol Chemical compound CCCCCCCCCCC1=CC=CC=C1O FDIPWBUDOCPIMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract 2
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M Bromide Chemical compound [Br-] CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract 2
- LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M Cetrimonium bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)C LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract 2
- IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide Chemical compound C1CO1 IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract 2
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 claims abstract 2
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 claims abstract 2
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 claims abstract 2
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract 2
- IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M Nitrite anion Chemical compound [O-]N=O IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract 2
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims abstract 2
- 125000005211 alkyl trimethyl ammonium group Chemical group 0.000 claims abstract 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims abstract 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims abstract 2
- SXDBWCPKPHAZSM-UHFFFAOYSA-M bromate Inorganic materials [O-]Br(=O)=O SXDBWCPKPHAZSM-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract 2
- SXDBWCPKPHAZSM-UHFFFAOYSA-N bromic acid Chemical compound OBr(=O)=O SXDBWCPKPHAZSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract 2
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims abstract 2
- 125000001421 myristyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims abstract 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims abstract 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims 3
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 2
- 230000002949 hemolytic effect Effects 0.000 claims 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 claims 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims 1
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 claims 1
- 108700026427 hemiglobincyanide Proteins 0.000 claims 1
- 235000019799 monosodium phosphate Nutrition 0.000 claims 1
- 125000001400 nonyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims 1
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 claims 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 claims 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 claims 1
- AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogen phosphate Chemical class [Na+].OP(O)([O-])=O AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 1
- 230000003381 solubilizing effect Effects 0.000 claims 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 abstract 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 abstract 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 abstract 1
- XYNOIUSAGKNPHO-UHFFFAOYSA-M sodium;hydrogen carbonate;phosphoric acid Chemical compound [Na+].OC([O-])=O.OP(O)(O)=O XYNOIUSAGKNPHO-UHFFFAOYSA-M 0.000 abstract 1
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Řešení ie týká složení hemolyzačního a konverzního roztoku pro velkokapacitní automatické počítače krevních částic a fotokolorimetrické stanovení hemoglobinu ve formě hemiglobinkyanidu. Osmoticky vyvážený roztok obsahuje v jednom\litru 0,1 až 0,8 g alkalip^ kého kyanidu, 0,05az 0,6 g alkalického .dusitanu, dusičnanu, chlorečnanu a/nebQ. bromičnanu, 5 až 20 g Clo ažCjgalkyltrimetylamoniumbromidu, například tetradecyl- nebo hexadecyltrimetylamoniumbromidu, a 2 až 16 g oxyetylovaného Cg až c15 alkylfenolů, například oxyetylovaného nonyl- nebo decylfenolu, obsahujícího 50 až 60 % hmot. etylenoxidu. Optimální hodnota pH a stabilita vlastností roztoku je zajištěna přítomností 7 až 9 g chloridu sodného p. a·, 0,3 až 1,0 g chloridu draselného p. a., 0,45 g dihydrogenfosforečnanu sodného a 4,90 g hydrogenfosforečnanu dvoj sodného v jednom litru roztoku.The solution relates to the composition of hemolysis a conversion solution for high capacity automatic blood particle computers and photocolorimetric determination of hemoglobin in the form hemiglobinkyanide. Osmotically balanced solution contains 0.1 to 0.8 g of alkali in one liter cyanide, 0.05 g and 0.6 g of alkaline nitrite, nitrate, chlorate and / or. bromate, 5 to 20 g of C 1 to C 18 alkyltrimethylammonium bromide, for example tetradecyl or hexadecyltrimethylammonium bromide, and 2 to 16 g oxyethylated C 8 to C 15 alkyl phenols, for example oxyethylated nonyl- or decylphenol, % containing 50 to 60 wt. ethylene oxide. Optimal pH and stability of properties the solution is provided by the presence of 7 to 9 g sodium chloride p., and 0.3 to 1.0 g of chloride of potassium p. a., 0.45 g of dihydrogen phosphate sodium bicarbonate and 4.90 g of hydrogen phosphate sodium in one liter of solution.
Description
Předmětem vynálezu je hemolyzační a konverzní roztok pro velkokapacitní automatické počítače krevních částic a fotokolorlmetrické stanovení hemoglobinu ve formě hemiglobinkyanidu, obsahující alkalický kyanid, anorganické oxidační činidlo, hemolyzační činidlo ze skupiny halogenidů alkyltrimetylamonia a dále solubilizační a emulgační přísadu v osmoticky vyváženém tlumivém roztoku.The present invention provides a hemolysing and conversion solution for high-capacity automatic blood particle counters and a photo-colorimetric determination of hemoglobin in the form of a hemiglobin cyanide containing an alkaline cyanide, an inorganic oxidizing agent, an alkyltrimethylammonium halide hemolysing agent and a solubilizing and emulsifying additive in an osmotically balanced buffer.
Měření počtu krevních částic spočívá nejčastěji na principu indikace změn vodivosti elektrolytu protékajícího kalibrovaným otvorem. V okamžiku průchodu částic, například erytrocytů nebo leukocytů, nastává zmenšení průřezu kalibrovaného otvoru, které je indikováno jako elektrický impuls. Tyto impulsy jsou po zesílení elektronicky sečítány za celou dobu průtoku konstantního objemu zředěné krve. Amplituda elektrických impulsů je přitom úměrná průřezu případně velikosti částice, takže tímto způsobem lze stanovit distribuci velikostí erytrocytů a leukocytů. Po hemolýze erytrocytů a kvantitativní konverzi hemoglobinu na hemiglobinkyanid (kyanmethemoglobin) se fotokolorimetricky nebo spektrofotometricky (v souladu s doporučením International Comittee on the Standardization for Hematology) stanovuje také koncentrace hemoglobinu.The measurement of blood particle counts is most often based on the indication of changes in the conductivity of the electrolyte flowing through the calibrated opening. At the moment of passage of particles, such as erythrocytes or leukocytes, there is a reduction in the cross-section of the calibrated orifice, which is indicated as an electrical pulse. After amplification, these pulses are summed electronically for the entire flow of a constant volume of diluted blood. The amplitude of the electrical impulses is proportional to the cross-section or particle size, so that the distribution of erythrocyte and leukocyte sizes can be determined in this way. Following hemolysis of erythrocytes and quantitative conversion of hemoglobin to hemiglobin cyanide (cyanmethemoglobin), hemoglobin concentrations are also determined by photocolorimetry or spectrophotometry (as recommended by the International Committee on Standardization for Hematology).
Komerční velkokapacitní plnoautomatické přístroje jsou řešeny tím způsobem, že samostatně zpracují odebrané vzorky krve. Například Coulter Counter Model S měří automaticky celkem 7 hodnot významných z hlediska hematologického vyšetření pacienta. Pro jedno takové měření je zapotřebí 1 ml krve, ze které přístroj odpipetuje objem pro následující automatické ředění krve ve dvou stupních isotonickým roztokem; po promíchání se v prvém modulu přístroje stanovují počty leukocytů a koncentrace hemoglobinu, druhý ve více naředěném vzorku krve stanoví počty erytrocytů a jejich střední objem. Každý z obou modulů je vybaven blokem tří spojených počítacích trubic s kalibrovaným otvorem. Soubor údajů je přiváděn do vyhodnocovacího bloku, kde se dále vypočítají hodnoty HCT, MCH a MCHC. Všech sedm charakteristických údajů se poté vytiskne na identifikační kartu pacienta. Srovnatelné velkokapacitní počítače krevních částic s automatizovaným provozem vyráběné jinými firmami vycházejí ze stejného principu funkce. Technické možnosti dané rozsahem zkoušek hematologických charakteristik pacientů a jejich kapacita však mohou být do jisté míry rozdílné.Commercial, high-capacity, fully-automatic devices are designed to process blood samples separately. For example, the Coulter Counter Model S automatically measures a total of 7 values relevant to the patient's hematology. For one such measurement, 1 ml of blood is required, from which the device pipetts the volume for subsequent automatic blood dilution in two stages with isotonic solution; after mixing, the first module of the instrument determines the leukocyte counts and hemoglobin concentration, the second in a more diluted blood sample determines the erythrocyte counts and their mean volume. Both modules are equipped with a block of three connected counting tubes with a calibrated bore. The data set is fed to the evaluation block where the HCT, MCH and MCHC values are further calculated. All seven characteristic data are then printed on the patient identification card. Comparable, large-capacity, automated-operation blood particle counters manufactured by other companies are based on the same principle of operation. However, the technical possibilities given by the extent of testing of patients' haematological characteristics and their capacity may vary to some extent.
Všechny přístroje pro hodnocení hematologických údajů využívající změn vodivosti elektrolytu vyžadují k provozu speciální roztoky, jejichž vlastnosti, zvláště rychlost hemolýzy erytrocytů a rychlost konverze hemoglobinu na hemiglobinkyanid jsou přizpůsobeny časovému sledu jednotlivých fází pracovního cyklu. Hemolyzační a konverzní roztok přitom nesmí ovlivňovat objem leukocytů po hemolýze a musí zamezit agregaci stromat erytrocytů, popřípadě srážení proteinů krevní plazmy.All haematological data evaluation devices using electrolyte conductivity changes require special solutions to operate, whose properties, particularly the rate of erythrocyte hemolysis and the rate of conversion of hemoglobin to hemiglobin cyanide, are adapted to the sequence of work cycle phases. The haemolysis and conversion solution must not affect the leukocyte volume after hemolysis and must prevent the aggregation of erythrocyte stroma or the precipitation of blood plasma proteins.
Souhrnně je možno požadavky vlastností hemolyzačního a konverzního roztoku pro velkokapacitní automatické počítače krevních částic a stanovení hemoglobinu ve formě hemiglobinkyanidu formulovat takto: rychlá hemolýza erytrocytů, osmotická vyváženost, vyloučení cizích suspendovaných částic, rychlá přeměna hemoglobinu na hemiglobinkyanid a stabilita vlastností v době skladováni.In summary, the requirements for the properties of hemolysis and conversion solutions for large capacity automatic blood particle counters and hemiglobin cyanide hemoglobin determination can be formulated as follows: rapid erythrocyte hemolysis, osmotic balance, excretion of foreign suspended particles, rapid conversion of hemoglobin to hemiglobinkyanide and storage stability.
Průběh přeměny hemoglobinu na hemiglobinkyanid lze sledovat velmi dobře spektrofotometricky s využitím rychlého záznamu ve vymezeném rozsahu spektra. Nárůst koncentrace hemiglobinkyanidu účinkem hemolyzačního a konverzního roztoku hodnotíme podle absorbance při vlnové délce 540 nm.The course of the conversion of hemoglobin to hemiglobinkyanide can be monitored very well spectrophotometrically using a fast recording in the defined spectrum range. The increase in hemiglobin cyanide concentration by the effect of hemolysis and conversion solutions is evaluated by absorbance at 540 nm.
Rychlost hemolýzy erytrocytů je závislá na volbě hemolyzující složky roztoku, kterou je obvykle některá z kvartérních amoniových solí, nej častěji tetradecyltrimetylamoniumbromid, hexadecyltrimetylamoniumbromid, etylhexadecyldimetylamoniumbromid, popřípadě jejich směsi. Rychlost hemolýzy narůstá s koncentrací uvedených účinných látek v roztoku. Podle praktických zkušenosti lze rychlost hemolýzy v požadovaném rozsahu regulovat volbou druhu a koncentrace kvartérních amoniových solí.The rate of erythrocyte hemolysis is dependent on the choice of the hemolyzing component of the solution, which is usually one of the quaternary ammonium salts, most often tetradecyltrimethylammonium bromide, hexadecyltrimethylammonium bromide, ethylhexadecyldimethylammonium bromide, or mixtures thereof. The rate of hemolysis increases with the concentration of the active compounds in solution. According to practical experience, the rate of hemolysis can be controlled to a desired extent by selecting the type and concentration of quaternary ammonium salts.
Velikost a stabilita rozměrů leukocytů po hemolýze erytrocytů účinkem hemolyzačního a konverzního roztoku je závislá především na osmotiokých poměrech. Nezměněná velikost leukocytů je za předpokladu isotoničnosti zředěné krve podmíněna v zásadě hodnotou osmolality hemolyzačního a konverzního roztoku, která má být na úrovni 330 Í10 mOsmol/1. Přílišné odchylky od stanovené osmolality roztoku se korigují obsahem osmoticky aktivních neutrálně reagujících anorganických solí, například chloridu sodného nebo chloridu draselného.The size and stability of leukocyte dimensions after haemolysis of erythrocytes by the effect of haemolysis and conversion solutions is mainly dependent on osmotiocy ratios. Unchanged leukocyte size, assuming isotonicity of the diluted blood, is basically determined by the value of the osmolality of the haemolysis and conversion solution, which is to be 330 Í10 mOsmol / l. Excessive deviations from the determined osmolality of the solution are corrected by the content of osmotically active neutral reacting inorganic salts, for example sodium chloride or potassium chloride.
Reakce roztoku se má pohybovat v mirně alkalické oblasti s rozsahem hodnot pH mezi 7,5 až 9,0. Mírná alkalita hemolyzačního a konverzního roztoku je potřebná nejen z hlediska zajištění požadované reaktivity účinných složek, ale také proto, aby bylo zabráněno hydrolýze alkalických kyanidů spojené s únikem toxického HCN. Optimální hodnoty pH a současně stability vlastností hemolyzačního a konverzního roztoku pro velkokapacitní automatické počítače krevních částic dosáhneme tím, že pro rozpouštění účinných látek zvolíme tlumivý roztok na bázi hydrogenfosforečnanu sodného.The reaction of the solution should be in a slightly alkaline range with a pH range of between 7.5 and 9.0. The mild alkalinity of the hemolysis and conversion solutions is needed not only to ensure the desired reactivity of the active ingredients, but also to prevent the hydrolysis of the alkali cyanides associated with the release of toxic HCN. Optimum pH values and stability of hemolysis and conversion solutions for high-capacity automatic blood particle counters can be achieved by selecting a buffer solution based on sodium hydrogen phosphate to dissolve the active substances.
Jestliže chceme získat počty leukocytů, které odpovídají skutečnosti, pak v naředěném roztoku krve a také použitém hemolyzačním a konverzním činidle nesmí být přítomny suspendované částice v takové míře, která by mohla ovlivnit naměřené hodnoty. Druh a také původ cizích částic může přitom být v zásadě dvojí. Měření leukocytů v naředěném vzorku může nepříznivě ovlivnit agregace částic vznikajících rozpadem obalů erytrocytů (stromata). Jestliže použijeme vhodný tenzid jako solubilizátor, působí tento proti agregaci stromat a naopak účinně podporuje jejich další rozpad (stromatolýza). Jiným, mnohdy vydatným zdrojem suspendovaných částic v roztoku jsou nečistoty přítomné v použitých chemikáliích. Částice suspendované v samotném hemolyzačním a konverzním roztoku se odstraňují tlakovou ultrafiltrací přes membránové ultrafiltry s póry velikosti 0,2 až 0,6 ,um. últrafiltrace připraveného roztoku je zařazena na závěr technologického postupu jeho výroby.If we want to obtain the corresponding leukocyte counts, suspended particles must not be present in the diluted blood solution as well as the haemolysis and conversion reagent used to an extent that could affect the measured values. The nature and origin of the foreign particles can in principle be twofold. Measurement of leukocytes in the diluted sample may adversely affect aggregation of particles resulting from the disintegration of erythrocyte shells (stroma). Using a suitable surfactant as a solubilizer, it counteracts the aggregation of the stroma and conversely effectively promotes their further disintegration (stromatolysis). Another, often abundant source of suspended particles in solution are impurities present in the chemicals used. The particles suspended in the hemolysis and conversion solutions alone are removed by pressure ultrafiltration through membrane ultrafilters having a pore size of 0.2 to 0.6 µm. filtration of the prepared solution is included at the end of the technological process of its production.
Z hlediska časového programu velkokapacitních automatických počítačů krevních částic a současně hemoglobinometrů je velmi důležitá rychlost oxidace hemoglobinu na hemiglobin, která musí odpovídat pracovnímu programu přístroje. Úplné konverze na hemiglobinkyanid musi být dosaženo v době před zahájením fotokolorimetrického měření jeho koncentrace. Oxidace hemoglobinu na hemiglobin probíhá již účinkem kvartérnioh amoniových solí, přičemž rychlost oxidace je pro jednotlivé typy odlišná. Proces oxidace je však třeba v zájmu zvýšení celkové rychlosti konverze zintenzívnit. Z těchto důvodů byl experimentálně sledován vliv přísady oxidačních činidel na rychlost konverze hemoglobinu na hemiglobin. Oxidovadla pro účely průzkumu byla vybrána tak, aby nedocházelo k ovlivnění ostatních popsaných funkcí hemolyzačního a konverzního roztoku a případnému poklesu jeho stability. Těmto požadavkům vyhověly zejména alkalické dusitany, dusičnany, chlorečnany a bromičnany, přidávané v množství 0,05 až 0,8 g/1 roztoku. Příliš vysoký obsah oxidačních činidel může způsobit snížení stability hemolyzačního a konverzního roztoku a tím zkráceni doby jeho použitelnosti. Jako nejúčinnější se ukázala zejména přísada dusičnanu draselného nebo bromičnanu draselného v množství 0,1 až 0,3 g/1.The rate of hemoglobin oxidation to hemiglobin oxidation is very important for the time program of large-capacity automatic blood particle counters and hemoglobinometers. Complete conversion to hemiglobin cyanide must be achieved before photocolourimetric measurement of its concentration has begun. Oxidation of hemoglobin to hemiglobin occurs already under the effect of quaternary ammonium salts, and the rate of oxidation is different for each type. However, the oxidation process needs to be intensified to increase the overall conversion rate. For these reasons, the effect of the addition of oxidizing agents on the rate of conversion of hemoglobin to hemiglobin was studied experimentally. The oxidants for the purpose of the survey were chosen so as not to affect the other described functions of the haemolysis and conversion solution and any decrease in its stability. In particular, alkaline nitrites, nitrates, chlorates and bromates added in an amount of 0.05 to 0.8 g / l of the solution complied with these requirements. Too high a content of oxidizing agents may reduce the stability of the hemolysis and conversion solutions and thus shorten its shelf life. In particular, the addition of potassium nitrate or potassium bromate in an amount of 0.1 to 0.3 g / l has proved to be most effective.
Reakcí s alkalickými kyanidy se hemiglobin dále převádí na hemiglobinkyanid (kyanmethemoglobin). Rychlost této reakce je úměrná především koncentraci přítomného alkalického kyanidu v roztoku. Z hlediska zachování příznivých hygienických pracovních podmínek v hematologických laboratořích je žádoucí obsah alkalických kyanidů v hemolyzačním a konverzním roztoku udržovat na co nejnižší úrovni, přípustné dosahovanou reaktivitou.Reaction with alkaline cyanides further converts hemiglobin to hemiglobin cyanide (cyanmethemoglobin). The rate of this reaction is proportional to the concentration of alkali cyanide present in the solution. In order to maintain favorable hygienic working conditions in haematological laboratories, it is desirable to keep the content of alkali cyanides in the hemolysis and conversion solutions as low as possible, permissible by the reactivity achieved.
K uspokojení dané potřeby při respektování shora zmíněných požadavků směřuje hemolyzační a konverzní roztok pro velkokapacitní automatické počítače krevních částic a fotokolorimetrické stanovení hemoglobinu ve formě hemiglobinkyanidu, obsahující alkalický kyanid, anorganické oxidační činidlo, hemolyzační činidlo ze skupiny halogenidů alkyltrimetylamonia a dále solubilizační a emulgačni přísadu v osmoticky vyváženém tlumivém roztoku, podle vynálezu, jehož podstata spočívá v tom, že jeden litr hemolyzačního a konverzního roztoku Obsahuje 0,1 až 0,8 g alkalického kyanidu,To meet this need, the hemolysis and conversion solution for high-capacity automatic blood particle counters and photo-colorimetric determination of hemoglobin in the form of hemiglobinkyanide containing alkaline cyanide, inorganic oxidizing agent, hemolysing agent from the alkyltrimethylammonium halide group and solubilizing and emulsifying additive are directed A balanced buffer solution according to the invention, characterized in that one liter of hemolysis and conversion solution contains 0.1 to 0.8 g of alkaline cyanide,
0,05 až 0,6 g alkalického dusitanu, dusičnanu, chlorečnanu a/nebo bromičnanu, až 20 g Clo až C18 alkyltrimetylamoniumbromidu, například tetradecyl- nebo hexadecyltrimetylamoniumbromidu a až 16 g oxyetylovaného Cg až C^g alkylfenolu, například oxyetylovaného nonyl- nebo decylfenolu, obsahujícího 50 až 60 % hmot. etylenoxidu.0.05 to 0.6 g of alkali nitrite, nitrate, chlorate and / or bromate, up to 20 g of C 1-10 to C 18 alkyltrimethylammonium bromide, for example tetradecyl or hexadecyltrimethylammonium bromide, and up to 16 g of oxyethylated C 8 to C 6 alkylphenol, for example oxyethylated nonyl- or decylphenol containing 50 to 60 wt. ethylene oxide.
Hemolyzační a konverzní roztok obsahuje dále v jednom litru až 9 g chloridu sodného p. a.,The haemolysis and conversion solution also contains up to 9 g of sodium chloride per liter,
0,3 až 1,0 g chloridu draselného p. a.,0.3 to 1.0 g of potassium chloride p.a.,
0,45 g dihydrogenfosforečnanu sodného a0.45 g of sodium dihydrogen phosphate and
4,90 g hydrogenfosforečnanu dvojsodného.4.90 g disodium hydrogen phosphate.
Tím je zaručeno jeho osmotické vyvážení, optimální hodnota pH a stabilita.This ensures its osmotic balance, optimum pH and stability.
K přípravě hemolyzačního a konverzního roztoku podle vynálezu se používá uzavřené aparatury zhotovené z chemického skla, které má dostatečnou odolnost proti agresivním sloučeninám. Složky roztoku se rozpouštějí za stálého míchání v destilované nebo demineralizované vodě teploty 20 až 30 °C v pořadí uvedeném v jednotlivých příkladech provedeni. Další chemikálie se přidává vždy až po úplném rozpuštění předchozí. Po zamíchání roztoku a 24hodinovém stání se provádí kontrolní měření hodnoty pH (8,5 ±0,5) a osmolality (330 ±10 mOsmol/1). Odchylky od stanovených hodnot se korigují přísadou NaCl, KCÍ, NaH2PO4, Na2HPO4, případně destilované nebo demineralizované vody. Jako závěrečná operace je zařazena tlaková ultrafiltrace připraveného roztoku, jejíž výsledek se kontroluje měřením obsahu částic využitím automatických počítačů téhož principu a provedení, pro které je hemolyzační a konverzní roztok určen. Příklady provedeníFor the preparation of the haemolysis and conversion solution according to the invention, closed apparatuses made of chemical glass are used which have sufficient resistance to aggressive compounds. The components of the solution are dissolved, with stirring, in distilled or demineralized water at a temperature of 20 to 30 ° C in the order given in the individual examples. The next chemical is added only after the previous one has completely dissolved. After stirring the solution and standing for 24 hours, control measurements of pH (8.5 ± 0.5) and osmolality (330 ± 10 mOsmol / L) are made. Deviations from the stated values are corrected by addition of NaCl, KCl, NaH 2 PO 4 , Na 2 HPO 4 , or distilled or demineralized water. As a final operation, the pressure ultrafiltration of the prepared solution is included. Examples
Přiklad 1Example 1
Hemolyzační a konverzní roztok pro velkokapacitní automatické počítače krevních částic a stanovení hemoglobinu ve formě hemiglobinkyanidu se připraví postupným rozpouštěním níže uvedených substancí v destilované vodě:The haemolysing and conversion solution for high-capacity automatic blood particle counters and the determination of hemoglobin in the form of hemiglobinkyanide are prepared by successively dissolving the following substances in distilled water:
Po kontrole pH a osmolality a případně úpravě těchto hodnot se roztok zbaví suspendovaných částic dvojnásobnou tlakovou filtrací přes membránový filtr 0,45/im.After checking the pH and osmolality and optionally adjusting these values, the solution is freed from the suspended particles by two-fold pressure filtration through a 0.45 µm membrane filter.
Přiklad 2Example 2
Hemolyzační a konverzní roztok pro velkokapacitní automatické počítače krevních částic a stanovení hemoglobinu ve formě hemiglobinkyanidu se získá rozpuštěním jednotlivých chemikálií v uvedeném pořadí v destilované vodě:The haemolysis and conversion solution for high-capacity automatic blood particle counters and the determination of hemoglobin in the form of hemiglobin cyanide are obtained by dissolving individual chemicals in the following order in distilled water:
Po kontrole hodnot pH a osmolality se roztok zbaví suspendovaných částic dvojnásobnou tlakovou ultrafiltrací membránovým filtrem 0,45 ^pm.After checking the pH and osmolality, the solution was freed from the suspended particles by two-fold ultrafiltration through a 0.45 µm membrane filter.
Příklad 3Example 3
Hemolyzační a konverzní roztok pro velkokapacitní automatické počítače krevních částic a stanovení hemoglobinu ve formě hemiglobinkyanidu se získá postupným rozpouštěním níže uvedených chemikálií v destilované vodě:The hemolysis and conversion solution for high-capacity automatic blood particle counters and the determination of hemoglobin in the form of hemiglobinkyanide is obtained by successively dissolving the following chemicals in distilled water:
Připravený roztok se dále podrobí dvojnásobné tlakové ultrafiltraci membránovými filtry o velikosti pórů 0,45/im.The prepared solution is further subjected to double pressure ultrafiltration with 0.45 µm membrane filters.
Destilovanou vodu je možno ve všech uvedených příkladech provedení vynálezu nahradit vodou demineralizovanou.Distilled water can be replaced by demineralized water in all of the examples.
Claims (4)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS873253A CS264878B1 (en) | 1987-05-07 | 1987-05-07 | Haemolysating and conversion solution for haemo-particles large-scale computers |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS873253A CS264878B1 (en) | 1987-05-07 | 1987-05-07 | Haemolysating and conversion solution for haemo-particles large-scale computers |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS325387A1 CS325387A1 (en) | 1988-12-15 |
| CS264878B1 true CS264878B1 (en) | 1989-09-12 |
Family
ID=5372050
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS873253A CS264878B1 (en) | 1987-05-07 | 1987-05-07 | Haemolysating and conversion solution for haemo-particles large-scale computers |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS264878B1 (en) |
-
1987
- 1987-05-07 CS CS873253A patent/CS264878B1/en unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS325387A1 (en) | 1988-12-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CA1117401A (en) | Multi-purpose blood diluent for use in electronic blood analysis instrumentation | |
| US4529705A (en) | Reagent for combined diluting and lysing whole blood | |
| US4528274A (en) | Multi-purpose blood diluent and lysing agent for differential determination of lymphoid-myeloid population of leukocytes | |
| US4185964A (en) | Lysing reagent | |
| US5227304A (en) | Method for counting whole blood diluent and detergent reagent system | |
| US4346018A (en) | Multi-purpose blood diluent and lysing agent for differential determination of lymphoid-myeloid population of leukocytes | |
| US5262329A (en) | Method for improved multiple species blood analysis | |
| US5834315A (en) | Cyanide-free reagent and method for hemoglobin determination and leukocyte differentitation | |
| JP3529786B2 (en) | Cyanide-free assay method and reagents for hemoglobin and leukocytes in whole blood | |
| US6632676B1 (en) | Multi-purpose reagent system and method for enumeration of red blood cells, white blood cells and thrombocytes and differential determination of white blood cells | |
| JPS60500097A (en) | How to differentiate the volume of white blood cell populations | |
| US20040241769A1 (en) | Multi-purpose reagent system and method for enumeration of red blood cells, white blood cells and thrombocytes and differential determination of white blood cells | |
| IE41665B1 (en) | Multi-purpose diluent for use in blood analysis by electronic instrumentation | |
| CN102226804A (en) | A hemolyzing agent for five-classification counting of blood leukocytes and its use | |
| CN110470587B (en) | Basophilic granulocyte counting kit for five-classification hematology analyzer | |
| CN107144519A (en) | Hemolyzing agent for blood cell analyzer and preparation method thereof | |
| AU2005297497B2 (en) | Lysing reagent for simultaneous enumeration of different types of blood cells in a blood sample | |
| JPS6179163A (en) | Reagent for measuring blood cell | |
| JPH10307135A (en) | Method for detecting abnormal shape of erythrocyte | |
| CN102053068A (en) | Serum iron content detection method and special standard substance thereof | |
| DE69625581T2 (en) | Cyanide-free reagent and method for the determination of hemoglobin and leukocyte differentiation | |
| CS264878B1 (en) | Haemolysating and conversion solution for haemo-particles large-scale computers | |
| US20230047876A1 (en) | Green concentrated reagent for hemotology systems | |
| JP3929283B2 (en) | Bone marrow nucleated cell classification and counting method | |
| US6890756B2 (en) | Method of using cyanide-free lyse solution to emulate a cyanide-containing lyse solution in the measurement of hemoglobin |