CS256501B1 - Mikrobiální multlenzymový prostředek - Google Patents
Mikrobiální multlenzymový prostředek Download PDFInfo
- Publication number
- CS256501B1 CS256501B1 CS863804A CS380486A CS256501B1 CS 256501 B1 CS256501 B1 CS 256501B1 CS 863804 A CS863804 A CS 863804A CS 380486 A CS380486 A CS 380486A CS 256501 B1 CS256501 B1 CS 256501B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- protein
- activity
- microbial
- units per
- candida lipolytica
- Prior art date
Links
Landscapes
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Mikrobiální multlenzymový prostředek odbourávající esterové vazby triglyoerolů a uhlíkaté řetězce mastných alkoholů, kyselin a uhlovodíků a jejich derivátů organlokého i syntetického původu, obsahuje lipasy a minimální aktivitou 2 jednotky na mg bílkoviny, oxidoreduktaey β aktivitou alkauhydroxylasy min. 0,5 nkat na mg bílkoviny a alkoholdehydrogenazy e aktivitou min. 0,5 jednotek na mg bílkoviny. Způeob přípravy spočívá v tom, že mikroorganismy rodu Candlda lipolytioa β výhodou mútantní kmen Candida lipolytica OBM 358 ee kultivuje na mediu obsahujícím alkany, ztužený tuk, kvaeničný auto* lyzát, síranové, fosfátové, horečnaté a amonné ionty při teplotě 28 až 37 °C a pH 7 až 9, ze získané biomasy ae extrahuje enzymový komplex, který ee stabilizuje mrazovou sublimací nebo erážeoími metodami.
Description
Vynález se týká mikrobiálního multienzymového komplexu odbourávajícího lipidy a uhlíkaté řetězce a způsobu jeho přípravy.
Je známo, Se řada mikroorganismů, bakterií, plísní a kvasinek může využívat uhlovodíky $ jejich deriváty jakojediného zdroje energie. Nejsnáze asimilovartelnými uhlovodíky jsou alkany s lineárním řetězcem Clo <>18· Odbourávání je uskutečňováno systémem oxidoreduktas, které převádějí uhlovodíky na alkoholy, aldehydy a karboxylové kyseliny. U většiny mikroorganismů iniciačním krokem odbourávání je oxidace terminální methylové skupiny. Karboxylové kyseliny se dále odbourávají beta-oxidací, přičemž dochází k degradaci uhlíkatých řetězců na 2 až 3 uhlíkaté zbytky.
K odbourávání esterických vazeb lipidů je třeba též přítomnost lipasové aktivity. Lipasy katalyzují hydrolyzuesterických vazeb triacylglycerolů nebo dalších lipidů na mastné kyseliny a glycerol ev. jiný přítomný alkohol. Mastné kyseliny a ev. mastné alkoholy jsou odbourávány systémem oxidoreduktas. Kvasinky rodu Candida produkují výše zmíněné enzymové systémy, ovšem při běžných kultivacích pouze v malé míře a s vlastnostmi nevhodnými pro aplikace například při použití pro detergenty, mycí prostředky, při čištění odpadních vod a podobně.
Tyto nevýhody odstraňuje mikrobiální multienzymový pro- · * středek odbourávající esterové vazby lipidů, uhlíkaté řetězce mastných alkoholů a kyselin, uhlovodíků a jejich derivátů organického i syntetického původu podle vynálezu, jehož podstata spočívá v tom, že obsahuje lipasy s minimální aktivitou
- 2 2 jednotky na mg bílkoviny a oxidoreduktasy s aktivitou alkanhydroxylazy min. 0,5 nkat na mg bílkoviny a alkoholdehydrogenazy s aktivitou min. 0,5 jednotek na mg bílkoviny.
Multienzymový prostředek se připravuje kultivací mikroorganismu Candida lipolytica, s výhodou mutantního kmene Candida lipolytica DBM 358 na mediu obsahujícím induktory požadovaných enzymových aktivit, to je alkany, ztužený tuk ev. další sloučeniny a delším uhlíkatým řetězcem, déle kvasničný autolyzát a minerální látky při pH 7 až 9, teplotě 28 až 37 °C.
Oxidoreduktasy připravené z Candida lipolytica obsahují asi z 50 % alkanhydroxylasovou aktivitu independentní na NADH. Způsobem izolace enzymového komplexu nedisociuje ani NADH z dependentních hydroxylaz. Suroviny pro přípravu mikrobiálního enzymového komplexu jsou běžně dostupní, nejsou drahé, takže příprava je ekonomicky výhodná a technicky nenáročná. Multienzymový systém pracuje v širokém rozmezí pH a teplot. Nemetabolizuje součásti běžných detergentů.
Příklad 1
V buněčném homogenátu buněk mutantního kmene Candida lipoíytica DBM 358, získaných kultivací na půdě s 1,5 g /UH4/2PO4, 3,2 g /NH4/2SO4, 0,2 g MgSO4. 7H20, 1 g K2S04 na 1 000 ml a 2 až 3 % zdroje uhlíku, pH 7, byly měřeny lipasová, alkanhydroxylasové a alkoholdehydrogenasová aktivity. Buňky po 72 hod. kultivaci při 28 °C byly dešintegrovány v desintegrátoru tak, že odstředěné buňky byly smíchány se stejným vá- . hovým podílem balotin a dvojnásobkem 0,05 M fosfátového pufru pH 7,2. V homogenátu byly proměřeny enzymové aktivity. Výsledky udává tabulka. ·
| zdroj uhlíku | alkanhydroxylasa nkat/mg bílk. | alkoholdehydr. jedn./mg bílk. | lipasa jedn/mg . |
| ztužený tuk | 0,67 | '1,79 | 21,5 |
| kys.· olejová | 0,13 | 3,34 | nést. |
| n-heptan | 0,07 | 1,66 | « |
| n-oktanol | 0,16 | 4,46 - | « |
| alkany | 1,54 | 3,37 | 16,9 |
| alkany + glukosa | 0,43 | 0,75 |
- 3 Příklad 2
Ke 100 ml fosfátového tlumivého roztoku s proměnným pH bylo přidáno 0,1 % hmot. surového multienzymového preparátu připraveného jak uwfieno v příkladu 1. Vzniklý roztok byl použit k odmaštění bavlněných pláten zašpiněných standardní špínou ponořením do roztoku při 50 °C na dobu 15 min. Výsledky odmaštění pláten samotného fosfátového roztoku a fosfátového roztoku s enzymem v závislosti na pH jsou uvedeny v následující tabulce:
| pH | aktivity | odmaštění % | |||
| alkoholde- hydrogenasa | lipasa | alkánhyd- roxylasa | bez eizymu | s enzymy | |
| 6 | 0,21 | 27,0 | 2,1 | 22,4 | 24,0 |
| 7 | 0,97 | 29,6 | 1,5 | 25,9 | 27,0 |
| 8 | 0,75 | 26,9 | 1,7 | 31,8 | 41,3 |
| 9 | 0',32 | 22,5 | 2,2 | 28,0 | 38,6 |
| 10 | nestanového | _____ | ........2Σ»8.............,,,,,.......,,,,·.. |
Claims (2)
- PŘEDMĚT VYNÁLEZU1. Mikrobiální multienzymový prostředek odbourávající esterové vazby triacylglycerolů, uhlíkaté řetězce mastných alkoholů, mastných kyselin, uhlovodíků a jejich derivátů organického i syntetického původu, vyznačující se tím, že obsa huje lipasy s minimální aktivitou 2 jednotky na mg bilkovi ny a oxidoreduktasy s aktivitou alkanhydroxylasy min. 0,5 nkat na mg bílkoviny a alkoholdehydrogenazy s aktivitou min. 0,5 jednotek na mg bílkoviny.
- 2. Způsob přípravy mikrobiálního multienzymového prostředku podle bodu 1, vyznačující se tím, že mikroorganismy rodu Candida lipolytica s výhodou mutantní kmen Candida lipolytica DBM 358 se kultivuje na mediu obsahujícím alkany, ztu« žený tulř, kvasničný autolyzát, síranové, fosfátové, hořeČnaté a ammonné ionty při teplotě 28 až 37 °C a pH 7 až 9, ze získané biomasy se extrahuje enzymový komplex, který se stabilizuje mrazovou sublimací nebo srážecími metodami.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS863804A CS256501B1 (cs) | 1986-05-27 | 1986-05-27 | Mikrobiální multlenzymový prostředek |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS863804A CS256501B1 (cs) | 1986-05-27 | 1986-05-27 | Mikrobiální multlenzymový prostředek |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS380486A1 CS380486A1 (en) | 1987-09-17 |
| CS256501B1 true CS256501B1 (cs) | 1988-04-15 |
Family
ID=5379192
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS863804A CS256501B1 (cs) | 1986-05-27 | 1986-05-27 | Mikrobiální multlenzymový prostředek |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS256501B1 (cs) |
-
1986
- 1986-05-27 CS CS863804A patent/CS256501B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS380486A1 (en) | 1987-09-17 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Bati et al. | Biomodification of fats and oils: Trials withCandida lipolytica | |
| Boenigk et al. | Fermentation of glycerol to 1, 3-propanediol in continuous cultures of Citrobacter freundii | |
| Wynn et al. | Biochemical events leading to the diversion of carbon into storage lipids in the oleaginous fungi Mucor circinelloides and Mortierella alpina | |
| Bruinenberg et al. | An enzymic analysis of NADPH production and consumption in Candida utilis | |
| Vargas et al. | Optimization of lipase production by Penicillium simplicissimum in soybean meal | |
| Brandberg et al. | The fermentation performance of nine strains of Saccharomyces cerevisiae in batch and fed-batch cultures in dilute-acid wood hydrolysate | |
| Kitamoto et al. | Production of mannosylerythritol lipids as biosurfactants by resting cells of Candida antarctica | |
| US5093256A (en) | Essentially purified, thermostable and alkalophilic lipase from bacillus sp. a30-1 atcc 53841 | |
| Lanser et al. | Regioselectivity of new bacterial lipases determined by hydrolysis of triolein | |
| Certik et al. | Effect of nitrogen sources on the activities of lipogenic enzymes in oleaginous fungus Cunninghamella echinulata | |
| Kosaric et al. | The role of nitrogen in multiorganism strategies for biosurfactant production | |
| Kinderlerer | Fungal strategies for detoxification of medium chain fatty acids | |
| Mauersberger et al. | Substrate specificity and stereoselectivity of fatty alcohol oxidase from the yeast Candida maltosa | |
| Kato et al. | Purification and properties of glucose-6-phosphate dehydrogenase and 6-phosphogluconate dehydrogenase from a methanol-utilizing yeast, Candida boidinii | |
| EP0344163A1 (en) | Process for the preparation of xylitol from xylose by cultivating candida guilliermondii | |
| Skoog et al. | Ethanol reassimilation and ethanol tolerance in Pichia stipitis CBS 6054 as studied by 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy | |
| Liu et al. | Cultural conditions and some properties of the lipase of Humicola lanuginosa S-38 | |
| Sztajer et al. | The effect of culture conditions on lipolytic productivity of microorganisms | |
| CS256501B1 (cs) | Mikrobiální multlenzymový prostředek | |
| FR2598156A1 (fr) | Glucose deshydrogenase et son procede de production | |
| Egli | Regulation of protein synthesis in methylotrophic yeasts: repression of methanol dissimilating enzymes by nitrogen limitation | |
| Turcotte et al. | Biosynthesis of lipids by Rhodosporidium toruloides ATCC 10788 | |
| Vongsuvanlert et al. | Characterization of D-sorbitol dehydrogenase involved in D-sorbitol production of a methanol yeast, Candida boidinii (Kloeckera sp.) No. 2201 | |
| Yasuhara et al. | Induction of catalase activity in a methanol-utilizing yeast, Kloeckera sp. No. 2201 | |
| Jeffries | Effects of nitrate on fermentation of xylose and glucose by Pachysolen tannophilus |