CS251271B1 - Zařízení pro vnášení vzorku do separační kolony - Google Patents

Abstract

Podstatou zařízení je, že na vstup separační kolony je připojena odbočka z dávkovači kolony, jejíž vstup je opatřen první elektrodou a výstup druhou elektrodou, zatímco separační kolona s detektorem je opatřena třetí elektrodou, vodičem spojenou s druhým napájecím zdrojem, zatímco první napájecí zdroj je spojen s první a druhou elektrodou, která je ještě spojena s druhým napájecím zdrojem. Řešení je určeno zejména pro kapilární elektroforézu.

Description

Vynález se týká zařízení pro vnášení vzorku do separační kolony, například pro kapilární elektroforézu.

Ideálním požadavkem při vnášení vzorku pro kapilární elektroforézu je co nejužší zóna ostře ohraničená základním elektrolytem a koncentračně přizpůsobená základnímu elektrolytu a o koncentraci složek dostatečně nízké pro omezení elektromigrační disperse.

Dosud se vzorek pro elektroforézu vnáší do separační komory pomocí mikrostříkačky přes septum, nebo dávkovacím kohoutem, hydrodynamickým tokem, případně izotachoforetickou migrací. Nevýhoda těchto dosud používaných postupů není zanedbatelná.

Mikrostříkačkou nelze nastříknout dostatečně malá množství vzorku, který současně nevytváří ostře ohraničenou zónu, ale nelze snížit velký objem vzorku i při použití miniaturních kohoutů. Dávkování vzorku hydrodynamickým tokem je provázeno náročnou manipulací, zóny jsou deformované parabolickým profilem toku a odměřování nadávkovaného množství je náročné.

Při využití elektroendoosmózy pro vytvoření hydrodynamického toku se manipulace sice zjednoduší, avšak nevýhoda měření malých množství zůstává. Další nevýhodou pak je, Že vnesené množství složky vzorku je závislé na její mobilitě. Izotachoforetickou migrací lze dávkovat malá množství ve formě ostře ohraničených zón, jejich koncentrace vsak není obecně volitelná.

Tyto dosavadní nevýhody odstraňuje zařízení pro vnášení vzorku do separační kolony, jehož podstatou je, že na vstup separační kolony je připojena odbočka z dávkovači kolony, jejíž vstup je opatřen první elektrodou a výstup druhou elektrodou, zatímco separační kolona s detektorem je opatřena třetí elektrodou, vodičem spojenou s druhým napájecím zdrojem, zatímco první napájecí zdroj je spojen s první a druhou elektrodou, která je ještě spojena s druhým napájecím zdrojem.

Hlavní předností popisovaného zařízení je, že vzorek do separační kolony je vnášen v krátké zóně, přičemž všechny složky vzorku jsou zastoupeny v poměrech v původním vzorku, velikost vneseného vzorku o obsahu několika nl je volitelná a reprodukovatelná. Zařízení podle vynálezu lze snadno automatizovat.

Vynález blíže objasní přiložený výkres, kde je blokové schéma zařízení.

Blokové schéma znázorňuje uspořádání zařízení, které sestává z dávkovači kolony 4_, kterou tvoří kapilára opatřená na vstupu dávkovacím kohoutem 2 ^{a ve} středu odbočkou IQ ústící do separační kolony 2 detektoru 7_.

První elektroda 2/ umístěná na vstupu dávkovači kolony £, je vodičem spojena s prvním napájecím zdrojem 8. Druhá elektroda 2_ na výstupu dávkovači kolony 4 je vodičem spojena jednak s prvním napájecím zdrojem 2 ^a jednak s druhým napájecím zdrojem 2' který je spojen s třetí elektrodou 3 na výstupu separační kolony 6.·

I^Jřed dávkováním je dávkovači separační kolona 2 ^a 2 naplněna základním elektrolytem. Dávkovaný vzorek se přiveden na vstup dávkovači kolony 2 dávkovacím kohoutem 5.· uzavření proudových okruhů mezi třemi elektrodami 2' 2' 2 ^z napájecích zdrojů _8 a 2 jsou iontové složky dávkovaného vzorku unášeny protékajícím elektrickým proudem ve směru k odbočce 22' kde se elektrický proud rozvětví na proud ^na výstupu dávkovači kolony 2 ^{a na} proud ij protékající separační kolonou 2·

Dávkovaný vzorek se působením proudů i^ a i^ rozdělí na dvě části, v nichž zůstane zachováno poměrné zastoupení všech iontových složek shodného znaménka jako u dávkovaného vzorku. Výstupem dávkovači kolony 4_ působením proudu odchází přebytek vzorku. Do separační kolony 2 vstupuje pak působením proudu i^ podíl vzorku k detektoru 7_, který je úměrný poměru odvětveného a celkového proudu.

Vzorek před dávkováním je vhodné rozředit v základním elektrolytu na koncentraci tak nízkou, aby separace nebyla rušena elektroraigrační disperzí. Bude-li elektrický proud z druhého napájecího zdroje jb procházející třetí elektrodou 3^, zvolen lOx menší než proud procházející z prvního napájecího zdroje _8 dávkovači kolonou £ mezi první a druhou elektrodou 1 a 2, pak bude mezi první a druhou elektrodou _1 a 2 procházet devět desetin proudu.

Procházející proudy způsobují pohyb iontových složek dávkovaného vzorku. Pak jedna desetina vzorku bude odcházet do separační kolony čj a devět desetin vzorku odchází k elektrodě 2. Pro projití celého dávkovaného vzorku dávkovači kapilárou je možno proud mezi první a druhou elektrodou 1_ a 2 přerušit a pokračovat v separaci vnesené části vzorku v separační koloně jí k detektoru Ί_, *

Zařízení je určeno například pro kapilární elektroforézu.

Claims (1)

1. Zařízení pro vnášení vzorku do separační kolony, vyznačené tím, že na vstup separační kolony (6) je připojena odbočka (10) z dávkovači kolony (4), jejíž vstup je opatřen první elektrodou (1) a výstup druhou elektrodou (2), zatímco separační kolona (6) s detektorem (7) je opatřena třetí elektrodou (3), vodičem spojenou s druhým napájecím zdrojem (9), zatímco první napájecí zdroj (8) je spojen s první elektrodou (1) a druhou elektrodou (2), která je ještě spojena s druhým napájecím zdrojem (9).