CS248612B1 - Industrial mutant Claviceps fusiformis W1 CC-1/85 - Google Patents

Industrial mutant Claviceps fusiformis W1 CC-1/85 Download PDF

Info

Publication number
CS248612B1
CS248612B1 CS883284A CS883284A CS248612B1 CS 248612 B1 CS248612 B1 CS 248612B1 CS 883284 A CS883284 A CS 883284A CS 883284 A CS883284 A CS 883284A CS 248612 B1 CS248612 B1 CS 248612B1
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
mutant
strain
claviceps fusiformis
fusiformis
alkaloid
Prior art date
Application number
CS883284A
Other languages
Czech (cs)
Inventor
Zdenek Rehacek
Premysl Sajdl
Jaroslava Kozova
Vladimir Kren
Viktor Rylko
Original Assignee
Zdenek Rehacek
Premysl Sajdl
Jaroslava Kozova
Vladimir Kren
Viktor Rylko
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Zdenek Rehacek, Premysl Sajdl, Jaroslava Kozova, Vladimir Kren, Viktor Rylko filed Critical Zdenek Rehacek
Priority to CS883284A priority Critical patent/CS248612B1/en
Publication of CS248612B1 publication Critical patent/CS248612B1/en

Links

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Řažení se týká nového průmyslového mutanta houby Claviceps fusiformis W1 produ- .kujicí alkaloid elymoklavin, uložený ve sbírce mikroorganismů Mikrobiologického ústavu ČSAV v Praze 4 pod 6. CC 1/85. Submersní fermentaci tohoto kmene lze několikanásobně zvýžit produkcí klavinových alkaloidů, zejména farmakologicky významného alkaloidu elyaoklavinu.The classification concerns a new industrial mutant of the fungus Claviceps fusiformis W1 producing the alkaloid elymoclavine, deposited in the collection of microorganisms of the Institute of Microbiology of the Czechoslovak Academy of Sciences in Prague 4 under 6. CC 1/85. Submersible fermentation of this strain can be increased several times by the production of clavine alkaloids, especially the pharmacologically important alkaloid elyamoclavine.

Description

Vynález se týká nového průmyslového mutanta kmene Claviceps fusiformis Wi produkující farmaceuticky významný alkaloid elyaoklavin (M.Abe et el., US Pat. 2835675) strukturního vzorceThe invention relates to a new industrial mutant of the Claviceps fusiformis Wi strain producing the pharmaceutically important alkaloid elyaoklavin (M.Abe et al., US Pat. 2835675) of the structural formula

Vzorky mutanta jsou uloženy ve sbírce mikroorganismů Mikrobiologického ústavu ČSAV v Praze 4 pod označením Claviceps fusiformis pod č. CC 1/85.Samples of the mutant are stored in the collection of microorganisms of the Institute of Microbiology of the Czechoslovak Academy of Sciences in Prague 4 under the designation Claviceps fusiformis under no. CC 1/85.

Mutant byl získán ze 70 isolátů připravených níže popsaným mutačním působením ÚV zářením na laboratorní kmen Claviceps fusiformis MI525 (Mikrobiologický ústav ČSAV v Praze 4).The mutant was obtained from 70 isolates prepared by the mutational action of UV radiation on the laboratory strain Claviceps fusiformis MI525 (Institute of Microbiology, Czech Academy of Sciences, Prague 4) described below.

Příprava vysokoprodukčního mutanta. Veákeré statické kultivace kmene probíhaly v temnu při 24+1 °C na agarová půdě T2 (C.Spalla, in Genetice of Industrial Microorganisms. Eds.Preparation of a high-production mutant. All static cultivations of the strain were carried out in the dark at 24+1 °C on T2 agar medium (C.Spalla, in Genetice of Industrial Microorganisms. Eds.

Z.Vaněk, Z.HoStálek, U.Cudlin. Elsevier, Amsterdam 1973, p.393). Půda T2 obsahovala tyto složky (g.L-15: sacharosa 00, L-asparagin i0, Ca(N0^)2<4H20 i, kvasničný extrakt 0.1,Z.Vaněk, Z.HoStálek, U.Cudlin. Elsevier, Amsterdam 1973, p.393). Soil T2 contained the following components (gL -1 5: sucrose 00, L-asparagine i0, Ca(N0^) 2< 4H 2 0 i, yeast extract 0.1,

KH2PO4 0.25, MgS04.7H20 0.25, KC1 0.12, FeSO4.7H2O 0.02, ZnSO4.7H2O 0.015, agar 20, dest.KH 2 PO 4 0.25, MgSO 4 .7H 2 0 0.25, KC1 0.12, FeSO 4 .7H 2 O 0.02, ZnSO 4 .7H 2 O 0.015, agar 20, dest.

HjO, pH 5,2 po sterilizaci v autoklávu 15· min. při 105 °C.HjO, pH 5.2 after sterilization in an autoclave for 15 min. at 105 °C.

Spory 21 dsnní rodičovské kultury Claviceps fusiformis HI525, vyrostlé na seěikmená agarové půdě T2 v Endo zkumavkách, byly smyty s povrchu kultury destilovanou vodou. 5 ml takto získané suspenze obsahující přibližně 1,5 .-10’ spor v 1 ml bylo přeneseno na Petriho misku (0 10 cm) a ozářeno zdrojem UV nastaveným na 10 uJ.m“2.s“’ dávkou 0,1 mUvm“2 (1 OOO erg).Spores of a 21-day-old parental culture of Claviceps fusiformis HI525, grown on T2 agar medium in Endo tubes, were washed from the surface of the culture with distilled water. 5 ml of the suspension thus obtained containing approximately 1.5 .-10' spores in 1 ml was transferred to a Petri dish (0 10 cm) and irradiated with a UV source set at 10 uJ.m" 2 .s"' at a dose of 0.1 mUvm" 2 (1 OOO erg).

Ozářená suspenze spor byla vhodně naředžna dest. vodou a spory obsažené v 5 ml výsledné suspenze byly vysety na povrch agarová půdy T2 v Petriho misce (0 10 cm) a inkubovány 21 dní.The irradiated spore suspension was suitably diluted with distilled water and the spores contained in 5 ml of the resulting suspension were sown on the surface of T2 agar medium in a Petri dish (0 10 cm) and incubated for 21 days.

Kolonie vyrostlé z autogenisovaných spor, byly pak jednotlivě přeneseny na sešikmenou agarovou půdu T2 a inkubovány 21 až 28 dní.Colonies grown from autogenized spores were then individually transferred to T2 agar slants and incubated for 21 to 28 days.

Narostlé kultury byly testovány na schopnost tvořit elymoklavin a další klavinové alkaloidy v podmínkách submersní fermentace (Seháček.et, al., čs. AO 199986).The grown cultures were tested for their ability to form elymoclavine and other clavine alkaloids under submerged fermentation conditions (Seháček et al., Czechoslovak AO 199986).

Alkaloidy byly stanoveny ve fermentační půdá 21 denních submersnlch kultur kalorimetricky (G.J.Banks et sl., J.gen. Mikrobiol 82,345,1974) a metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie (M.Wurst et, al., J.Chromát. 150,477, 1978).Alkaloids were determined in the fermentation broth of 21-day submerged cultures calorimetrically (G.J.Banks et al., J.gen. Mikrobiol 82,345,1974) and by high-performance liquid chromatography (M.Wurst et, al., J.Chromat. 150,477, 1978).

Charakteristika vysokoprodukčního mutanta. Srovnání základních znaků vysokoprodukčního kmene W 1 se znaky rodičovského kmene MI 525 je uvedeno v tab. 1.Characteristics of the high-producing mutant. A comparison of the basic characteristics of the high-producing strain W 1 with those of the parental strain MI 525 is shown in Table 1.

a) Kultivace na agarovém mediu T 2.a) Cultivation on T 2 agar medium.

Mutant W 1 roste na agarovém mediu T 2 při teplotě 24 +Ί °C v souvislé bohatě zvrásněné vrstvě tvořené šedým myceliem a oválnými konidiemi. Do media vylučuje fialový pigment.Mutant W 1 grows on T 2 agar medium at 24 +Ί °C in a continuous, richly wrinkled layer formed by grey mycelium and oval conidia. It secretes a violet pigment into the medium.

b) Submersní kultivaceb) Submerged cultivation

Submersní kultivace nového kmene W 1 i rodičovského kmene MI 525 byla provedena při teplotě 24+1 °C na rotačním třepacím stroji i v laboratorním fermentoru na upraveném fermentač ním médiu CS2 tis. A0 199986). Submersní kultury kmene W i se vyznačuji vláknitým, větveným mnohobuněčným myceliem, které vytváří četné mikro- a makrokor.idie a na konci fermentace seSubmerged cultivation of the new strain W 1 and the parent strain MI 525 was carried out at a temperature of 24+1 °C on a rotary shaker and in a laboratory fermenter on modified fermentation medium CS2 tis. A0 199986). Submerged cultures of strain W i are characterized by a filamentous, branched multicellular mycelium, which forms numerous micro- and macrocor.idia and at the end of fermentation

240612 se rozpadá na blastoarthrospóry. Submersní vývoj kmene W 1 je provázen tvorbou fialového exocelulárního pigaentu.240612 disintegrates into blastoarthrospores. Submerged development of strain W 1 is accompanied by the formation of a purple exocellular pigment.

Ve srovnáni s rodičovským kmenem Claviceps fusiformis WI 525 se mutant W t vyznačuje téměř trojnásobně vyěší produkci olymoklavinu a polovičním obsahem nežádoucích exogenních glukanů. V podmínkách submersní fermentace produkuje v 1 1 media 4,2 g klavinových alkaloidů, * tohe 2,5 g elymoklavinu. Průvodní alkaloidy jsou agroklavin a chanoklavin. Srovnání základních znaků vysokoprodukčního mutanta W 1 se znaky rodičovského kmene C.fusiformis W1525 je uvedeno v tab. 1. Mutant podle vynálezu je uchován v temnu při 4 °C, zabezpečen proti vysychání media, a to ve formě 21 denních kultur vyrostlých na seěikmenám mediu T2 v Endo zkumavkách při teplotě 24 + 1 °C. Uchovávaná kultury jsou pravidelně přeočkovávány ve tříměsíčních intervalech.In comparison with the parent strain Claviceps fusiformis WI 525, the mutant W t is characterized by almost three times higher production of olymoclavin and half the content of undesirable exogenous glucans. Under conditions of submerged fermentation, it produces 4.2 g of clavine alkaloids in 1 l of medium, of which 2.5 g of elymoclavin. The accompanying alkaloids are agroclavin and chanoclavin. A comparison of the basic characteristics of the high-production mutant W 1 with the characteristics of the parent strain C.fusiformis W1525 is shown in Table 1. The mutant according to the invention is stored in the dark at 4 °C, protected against drying out of the medium, in the form of 21-day cultures grown on T2 medium slices in Endo tubes at a temperature of 24 + 1 °C. The stored cultures are regularly re-inoculated at three-month intervals.

Vynálezem chráněný vysokoprodukční mutant Claviceps fusiformis W 1, zabezpečuje klíčový úsek velkokapacitní přípravy elymoklavinu submersní fermentací.The high-production mutant Claviceps fusiformis W 1, protected by the invention, provides a key part of the large-scale preparation of elymoclavin by submerged fermentation.

Tabulka 1Table 1

Kultura na agarové půdě T2 Submersní kultura^Culture on agar medium T2 Submerged culture^

ZnakCharacter

kmen W1 strain W1 kmen MT525 strain MT525 kmen W1 strain W1 kmen MI525 strain MI525 Nárůst Increase bohatý v souvilé vrstvě rich in the social stratum sporý v jednotlivých koloniích rare in individual colonies dobrý good bohatý rich Zbarvení vzdušného mycelia Coloration of the aerial mycelium šedé gray hnědobílé brown and white - - - - Konidie Conidia oválné oval oválné oval makrokonidie mikrokonidie macroconidia microconidia protáhle oválné elongated oval Rozpustný pigment Soluble pigment fialový purple hnědočervený red-brown tmavofialový dark purple hnědorůžový brownish pink Exogenní glukany - -1 , Exogenous glucans - -1 , 20 20 40 40

tg.L-'ltg.L-'l

Celkové Total alkaloidy (g.L”’) alkaloids (g.L”’) 4,2 4.2 1,2 1.2 Elymokla- Elymokla- vin (g.L-’) vin (g.L-’) 2,5 2.5 0,9 0.9 § V upravené fermentační půdě CS2 § In modified fermentation medium CS2 (čs. autorské osvědčení 199986) (Czech copyright certificate 199986)

PŘEDMĚT V Y H i. L SZUSUBJECT V Y H i. L SZU

Claims (1)

Průmyslový mutant houby Claviceps fusiformis W1 CC - 1/85 produkující alkaloid elymoklavin.Industrial mutant Claviceps fusiformis W1 CC - 1/85 producing elymoclavin alkaloid.
CS883284A 1984-11-19 1984-11-19 Industrial mutant Claviceps fusiformis W1 CC-1/85 CS248612B1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS883284A CS248612B1 (en) 1984-11-19 1984-11-19 Industrial mutant Claviceps fusiformis W1 CC-1/85

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS883284A CS248612B1 (en) 1984-11-19 1984-11-19 Industrial mutant Claviceps fusiformis W1 CC-1/85

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CS248612B1 true CS248612B1 (en) 1987-02-12

Family

ID=5439423

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS883284A CS248612B1 (en) 1984-11-19 1984-11-19 Industrial mutant Claviceps fusiformis W1 CC-1/85

Country Status (1)

Country Link
CS (1) CS248612B1 (en)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Puhalla et al. Genetics and nutritional requirements of Endothia parasitica
Khalil et al. Morphological changes of conidiogenesis in two aspergillus species
Bidochka et al. Development of the entomopathogenic fungus Beauveria bassiana in liquid cultures
Tansey Isolation of thermophilic fungi from alligator nesting material
Singh et al. Optimization of different process variables for the production of an indolizidine alkaloid, swainsonine from Metarhizium anisopliae
Taber Evidence for the existence of acid-sensitive actinomycetes in soil
CN109097407B (en) A kind of method for producing cercosporin
CN109055237B (en) Cercosporin producing strain and application thereof
Glen-Bott Helicodendron giganteum n. sp. and other aerial-sporing Hyphomycetes of submerged dead leaves
CN116656511B (en) A chemically induced strain of Helminthosporium spp. Q06 and its application
CS248612B1 (en) Industrial mutant Claviceps fusiformis W1 CC-1/85
US3428526A (en) Production of radicicol
CN110128392A (en) It is a kind of by compound isolated in aspergillus flavus secondary metabolite
US4894341A (en) Production of cyanide hydratase
CN101486974B (en) Endogenetic fungus for producing paclitaxel
US2458495A (en) Processes of fermentation
Abdou et al. Effect of culture medium and light on sporulation of two peanut leaf spotting fungi, Cercospora arachidicola Hori and Cercosporidium personatum (Beck & Curtis) Deighton
Erviö Certain parasites of fungal sclerotia
Willetts A comparison between Ophiobolus graminis and Ophiobolus graminis var. avenae
Voglmayr Two new aero-aquatic species of the hyphomycete genus Helicodendron from Austria
WO1990009433A1 (en) Microbiological chiral reduction of carbonyl groups and novel microorganism
CS204303B1 (en) Industrial mutant of fungi claviceps purpurea cp 7/274 ccm f-632
Greene Variation in single spore cultures of Aspergillus fischeri
US5457039A (en) Method for hyper-production of monascus pigments
CN112868670B (en) Novel application of Burkholderia polyphylla WS-FJ9