CS244022B1 - Arylamidy dipeptidů nebo tr(peptidů a C-koncovým S-aralkylcysteinovým zbytkem a způsob jejich Výroby - Google Patents
Arylamidy dipeptidů nebo tr(peptidů a C-koncovým S-aralkylcysteinovým zbytkem a způsob jejich Výroby Download PDFInfo
- Publication number
- CS244022B1 CS244022B1 CS846584A CS658484A CS244022B1 CS 244022 B1 CS244022 B1 CS 244022B1 CS 846584 A CS846584 A CS 846584A CS 658484 A CS658484 A CS 658484A CS 244022 B1 CS244022 B1 CS 244022B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- formula
- compound
- same
- residue
- cys
- Prior art date
Links
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Abstract
Arylamidy dipeptidů nebo tripeptidů s C-koncovým S-aralkylcysteinovým zbytkem obecného vzorce I X - A - B - Cys/Y/ - NH - Z /1/, kde X znaěí alkankarbonylový zbytek Ó2 až Cfi, -karbozyalkankarbonýlový Zbytek C. al C6, A je zbytek glycihu, leuoihu, řenylalaninu, methioninu nebo nula, B je zbytek glycinu, alaninu, leucinu, fenylelaninu nebo methioninu, Y je bensyl nebo p-nitrobenzyl a Z je p-nitrofenyl, jsou nové sloučeniny, použitelná jako chromogenní substráty ke stanoveni aktivit proteolytických enzymů, zejména papainu, a lze je připravit například ze sloučeniny obecného vzorce 11 Cys/Y/ - NH - Z /11/, kďe Y a Z mají výěe uvedený význam, kondenzací β chráněnou sloučeninou W-A nebo W-A-B, kde A a B mají výSe uvedený význam a W je chránící skupina, a potom zavedením zbytku X s výSe uvedeným významem do vzniklého meziproduktu, po odstranění chrániči skupiny V.
Description
Vynález se týká arylamidů dipeptidů nebo tripeptidů s C-koncovým S-arglkylcysteinovým zbytkem obecného vzorce 1,
X - A - B - Cys(Y) - NH - Z (I), ve kterém X značí alkankerbonylový shytok Cg až Cg,
- karboxyalkankarbonylový zbytek C^ až Cg,
A je zbytek glycinu, leucinu, fenylalaninu, methloninu nebo nula,
B je zbytek glycinu, alaninu, leuclnu, fenylalaninu nebo methloninu,
X je benzyl nebo p-nitrobenzyl a
Z je p-nitrofenyl.
Sloučeniny obecného vzorce 1, které jsou nové, jsou použitelné jako specifické chromogenní substráty pro proteolytické enzymy, zejména papain. Papainu se používá ve farmaceutickém průmyslu, např. při výrobě dietetických přípravků, stabilizační přísady do piva, ke zrání masných výrobků. Sledování papainové aktivity, zejména v potravinářském průmyslu je technicky důležité.
Stanovení papainové aktivity v pivu je dosud prováděno např. imunologickými metodami, pravděpodobně pro jeho Širokou substrátovou nespecifičnost. Přestože je publikována řada prací sledující mapování syntetických substrátů pro papain, nebyly dosud objeveny specifická substráty, které by spolehlivě umožňovaly stanovení malých kvant tohoto enzymu.
Autoři vynálezu s překvapením zjistili, že nízkomolekulární peptidy s C-koncovým S-aralkylcysteinovým zbytkem jsou vhodné a velmi specifické substráty pro papain umožňující stanovení spolehlivě 10”? až 10~® g/ml tohoto enzymu. Prakticky to znamená, že tyto syntetické substráty jsou svoji citlivostí a specifičností srovnatelné se stávající běžně zavede nou metodou imunologickou.
V porovnání s touto metodou je metoda pomocí syntetických substrátů jednoduěěí, časově méně náročnější a tím ekonomicky výhodnější. Předností nových syntetických substrátů jsou zřejmé z tabulky Γ, která udává kinetické konstanty hydrolýzy. Kinetická data syntetických substrátů obecného vzorce 1 jsou lepSí než kinetická data pro papainové substráty publikované např. v Biochem. <J. 219, 325 (1984).
Tabulka 1
Kinetické konstanty chromogenních substrátů Štěpených papainem při 25 °C
| Substrát | (mil) | kcat Ca“’) | kcat/KM (M''.s’) |
| Suc-Gly-Cys(Bzl)-NAn | 5,6 | 0,18 | 32 |
| Suc-Gly-Gly-Óy s(Bz1)-NAn | 2,8 | 0,16 | 57 |
| Suc-Ala-Cys(Bzl)-NAn | 2,0 | 1,2 | 600 |
| Suc-Leu-Leu-Cys(Bzl)-NAn | 0,11 | 2,2 | 20 000 |
| Suc = sukcinyl; NAn x p-nitroanilid | Bzl 1 | benzyl | |
| Alenin (Ala), leucin (Leu), | cystin (Cys) jsou L-konfigurace, |
Arylamidy dipeptidů a tripeptidů s C-koncovým S-aralkylcysteinovým zbytkem obecného vzorce 1 lze podle vynálezu připravovat několika způsoby. Například tak, že se nejprve sloučenina obecného vzorce 11
Cya(Y) - NH - Z (IX), ve kterém Y a Z značí totéž co ve vzorci I, kondenzuje s W-A-B, kde A a B značí totéž co ve vzorci I a W chránící chráněnou sloučeninou W-A nebo skupinu, například benzyloxy3 karbonylovou, načež se do připraveného meziproduktu, po odstranění chránící skupiny V, zavádí zbytek X, kde X značí totéž co ve vzorci I, nebo tak, že sa sloučenina obecného vzorce II
Cys(X) - NH - 3 (II), ve kterém X a Z značí totéž co ve vzorci I, kondenzuje s chráněnou sloučeninou X-A nebo X-A-B, kde X a A a Bznačí totéž co ve vzorci I, za vzniku sloučeniny obecného vzorce I, nebo tak, že se nejprve sloučenina obecného vzorce II
Cys(X) - NH - Z (II), ve kterém X a Z značí totéž co ve vzorci I kondenzuje se sloučeninou obecného vzorce III W - Β (III), ve kterém B značí totéž co ve vzorci I a V chránící skupinu, například banzylozykarbonylovou, načež se vzniklá sloučenina obecného vzorce IV
W - B - Cya(X) - HH - Z (IV), ve kterém B a X a Z značí totéž ce ve vzorci I a V totéž co vo vzorci III, po odstranění chránící skupiny W, kondenzuje se sloučeninou obecného vzorce V
W - A (V), ve kterém A značí totéž co ve vzorci I a I totéž co ve vzorci III, načež se po odstranění chránící skupiny W do vzniklého peptidu vestaví zbytek X, nebo tak, že sloučenina obecného vzorce II
Cys(X) - NH - Z (II), kde X a Z značí totéž co ve vzorci I, kondenzuje ae sloučeninou obecného vzorce VI X - Β (VI), nebo se sloučeninou obecného vzorce VII
X-A-B (VII), ve kterých X a A a B značí totéž co ve zorci I, za vzniku sloučeniny obecného vzorce 1.
Kondenzační reakce byly provedeny azidovou metodou a karbodiimidovou metodou, ale stejně tak lze použít i jiné metody užívané v syntose peptidů.
Bližěí podrobnosti přípravy vyplývají z následujících příkladů provedení:
Přikladl p-Nitroenilid benzyloxykarbonylalanyl-S-benzylcysteinu
K roztoku p-nitroanilidu S-benzylcysteinu (3,35 g; 10 mmolů) a benzyloxykarbenylalaninu (2,25 g; 10 mmolů) v dimethylformamidu (60 ml) ochlazenému na 0 °C byl přidán Ν,ίί’-dicyklo hexylkarbodiimid (2,2 g).
o . Po 2 h míchání při 0 C a 12 h stání při teplotě místnost byla vyloučená N,N -dlcyklohexylmočovine odfiltrována, promyta dimethylformamidem a filtrát byl vakuově odpařen. Odparek byl rozpuštěn v octanu ethylnatém (100 ml) a roztok byl postupně protřepán 1 H kyse•V lineu chlorovodíkovou a 5% hydrogenuhličitanem sodným, vodou, vysušen bezvodým síranem sodným, vakuová odpařen. Pevný odparek byl krystalován z 2-propanolu (25 ml) přídavkem petroletheru. Bylo získáno 3,8 g (7) %) produktu. Vzorek k analýze byl krystalován obdobná, t.t. 156 až 157 *C.
p-Nitroanllld 3-karbexypropionylalanyl-S-benzylcyateinu
K roztoku p-nltroanilidu benzyloxykarbonylalanyl-S-benzylcyateinu (1,6 g; 3 mmoly) v ledová kyselině octová (3 ml) byl přidán 36% bromovodík v kyselino octová (3 ml). Po 1 h stání při teplotě místnoti byl k roztoku přidán ether (50ml) a vyloučený hydrobromid byl odfiltrován, 2 h auěen v exeikátoru nad foeforpentoxidem a hydroxidem sodným, potom byl rozpuštěn v metanolu (20 ml) a deienisován na středně baeickám anexu Wofatit L 150 v metanolu.
Metanolický eluát byl odpařen, odparek byl vysuSen azeotropickou destilací ze směsi metanol-benzen a tetrahydrofuran-benze. Odparek byl rozpuštěn v dimethylformamidu (5 ml) a byl přidán anhydrid kyseliny jantarová (600 mg) a reakční eměe byla zahřívána 2 h při 80 °C.
Potom byl reakční roztok vakuově odpařen, produkt byl vyzrážen přídavkem vody (5 ml) a zfiltraván. Krystalizací z 2-prapanolu a vody bylo získáno 720 mg (48%) produktu. Vzorek k analýze byl krystalován obdobně, t.t. 189 až 191 *C.
Příklad 2 p-Nitroanilid benzyloxykarbonylglycyl-S-benzylcysteinu
Byl připraven obdobným způsobem jako odpovídající benzyloxykarbonylderivát uvedený v příkladě 1. Krystalizací z octanu ethylnatáho a petroletheru byl získán produkt ve výtěžku 68 % a t.t. 95 až 97 ®C.
p-Nitroanilid 3-karboxypropionylglycyl-S-benzylcyatelnu
Byl připraven obdobným způsobem jako odpovídající 3-karboxypropionylderivát uvedený v příkladě 1. Krystalizací z 2-propanolu.a vody byl získán produkt ve výtěžku 51 % a t.t.
182 až 183 °C.
Příklad 3 p-Nitroanilid benzyloxykarbonylglycyl-glycyl-S-benzyl-cysteinu
Byl připraven obdobným způsobem jako odpovídající benzyloxykarbonylderivát uvedený v příkladě 1, z příslušného benzyloxykarbonylglycyl-glycinu a p-nltroanilidu S-benzylcysteinu karbodiimidovou metodou. Krystalisací z 2-propanolu a petroletheru byl získán produkt ve výtěžku 65 % a t.t. 124 až 126 °C.
Shodný produkt byl získán karbodiimidovou metodou z benzyloxykarbonylglycinu a p-nitroanilidu glycyl-S-benzylcyeteinu získaného podle příkladu 2; t.t. 125 až 127 °C.
p-Nitreanilid 3-karboxypropionylglycyl-glycyl-S-benxylcysteinu
Byl připraven obdobným způsobem jako odpovídající 3-karbexypropionylderivát uvedený v příkladě 1. Krystalizací z dimethylformamidu a 2-propanolu byl získán produkt ve výtěžku 53 % a t.t. 182 až 184 eC.
Příklad 4 p-Nitroanilid benzyloxykarbonylleucyl-leucyl-S-benzylcysteinu
K roztoku hydrazidu benzyloxykarbonylleucyl-leucinu (3,95 g; 10 mmolů) v tetrahydrofuranu (80 ml) a 20% kyseliny chlorovodíkové (4 ml), vychlazenému na -15 °C byl přidán roztok dusitanu sednéhe (700 mg) ve vodě (2,8 ml). Po 8 min, (míchání a chlazení (-10 °C) byl k reakSnímu rozteku přidán předchlazený (-15°C) octan ethylnatý (150 ml) a pe 2 min míchání byla organické fáze pretřepéna předchlazeným roztokem (nasyceným) hydrogenuhličitanu sodného v 16,8% roztoku chloridu sodného, vysušena bezvedým síranem sedným a přidána k roztoku nitroanilidu S-benzylcysteinu (3,30 g; 10 mmolů) v dimethylformamidu (30 ml).
Po 12 h stání při +3 °C byl reakSní roztek vakuové odpařen a odparek byl vysrážen vodou (50 ml); po 12 h stání při +3 °C byl produkt odfiltrován, promyt vodou a krystalován z vroucího etanolu (40 ml) a vody (200 ml). Bylo získáno 5,6 g (81 %) produktu o t.t. 148 až 150 °C.
p-Nitreanilid 3-karboxypropionylleucyl-leucyl-S-benzylcysteinu
Byl připraven obdobným způsobem jako odpovídající 3-karboxypropionylderivát uvedený v příkladu 1. Krystallsací z 2-propanolu a vody byl získán produkt ve výtěžku 54 % a t.t.
160 až 162 °C.
Příklad 5 p-Nitreanilid terč. butyloxykarbonylalanyl-methionyl-S-benzylcysteinu
Byl připraven obdobným způsobem jako odpovídající benzylexykarbonylderivét z p-nitreanilidu S-benzylcysteinu a příslušného terč. butyloxykarbonylalanyl-methioninu kerbodiimidovou methodou ve výtěžku 82 % a t.t. 129 až 132 °C.
p-Nitroanilid 3-karbexypropionylalanyl-methionyl-S-benzylcysteinu
Působením 211 chlorovodíku v kyselině octové byla odstraněna terč. butyloxykarbonylová skupina, získaný hydrochlorid byl deionisovén na Wefatitu L 150 a zpracován jak dále uvedeno v příkladě 1. Krystalizací z octanu ethylnatéhe byl získán produkt ve výtěžku 52 % e t.t. 139 až 142 ®C.
Příklad6 p-Nitroanilid benzyloxykarbonylglycyl-leucyl-S-benžylcysteinu
Byl získán azidovou methodou z příslušného hydrazidu benzyloxykarbonylglycyl-leucinu a p-nitroanilidu S-benzylcysteinu jak uvedeno v příkladě 4, ve výtěžku 6.9 % a t.t. 177 až 180 °C.
p-Nitroanilid 3-karboxypropionylglycyl-leucyl-S-benzyloysteinu
Byl připraven obdobným způsobem jak uvedeno v příkladě ů, ve výtěžku 52»i% a t.t. 126 až 129 °C.
Příklad 7 p-Nitroanilid benzyloxykarbonylleucyl-alanyl-S-benzylcysteinu
Byl připraven azidovou metodou z příslušného hydrazidu benzyloxykarbonylleucyl-alaninu a p-nitroanilidu S-benzylcysteinu jak je uvedeno v příkladě 4, ve výtěžku 71 % a t.t. 168 až 172 °C.
p-Nitroanilid 3-karboxypropionylleucyl-alanyl-S-benzylcysteinu
Byl připraven obdobným způsobem jak je uvedeno v příkladě 1,ve výtěžku 49 56 a t.t. 205 až 208 0 C.
Příklad 8 p-Nitroanilid benzyloxykarbonylleucyl-S-benzylcysteinu
Byl připraven karbodilmldovou metodou z benzyloxykarbonyllaucinu a p-nitroanilidu S-banzylcysteinu jak uvedeno v příkladě 1, ve výtěžku 55 56 a t.t. 141 až 143 °C.
p-Nitroanilid 3-kerboxyproplonyllucyl-S-benzylcysteinu
Byl připraven obdobným způsobem jak uvedeno v příkladě 1, ve výtěžku 56 56 a t.t. 189 až 192 °C.
Claims (5)
1. Arylamidy dipeptidů nebo tripaptidů a C-koneovým S-aralkylcysteinovým zbytkem obecného vzorce 1
X - A - B - Cys(Y) - KH - Z (I), ve kterém X značí alkankarbonylový zbytek Cg až Cg, - karbozyalkankarbonylový zbytek až Cg,
A je zbytek glycinu, leucinu, fenylalaninu, methioninu nebo nula,
B je zbytek glycinu, slaninu, leucinu, fenylalaninu nebo methioninu,
Y je benzyl nebo p-nitrobanzyl a
Z je p-nitrofenyl.
2. Způsob výroby sloučenin obecného vzorce I podle bodu 1, vyznačující se tím, Se se nejprve sloučenina obecného vzorce II
Cys(Y) - NH - Z (II), ve kterém Y a Z značí totéž co ve vzorci I, kondenzuje s chrénénou sloučeninou V-A nebo W-A-B, kde A a B značí totéž co ve vzorci I a W chránící skupinu, například benzyloxykarbonylovou, načež sa do připraveného meziproduktu, po odstraněni chránící skupiny W, zavádí zbytek X, kde X značí totéž co ve vzorci I.
3. Způsob výroby sloučenin obecného vzorce I podle bodu 1, vyznačující se tím, že se sloučenina obecného vzorce II
Cys(Y) - NH - Z (II), ve kterém Y a Z značí totéž co ve vzorci I, kondenzuje a chráněnou sloučeninou X-A nebo X-A-B, kde X a A a B značí totéž co ve vzorci I za vzniku sloučeniny obecného vzorce I.
4. Způsob výroby.sloučenin obecného vzorce I podle bodu 1, vyznačující se tím, že se nejprve sloučenina obecného vzorce II
Cys(Y) - NH - Z (II), ve kterém Y a Z značí totéž co ve vzorci I, kondenzuje se sloučeninou obecného vzorce III (III),
7 244022 ve kterém B značí totéž co ve vzorci I a W chrániči skupinu, například benzyloxykarbonylovou, načež se vzniklá sloučenina obecného vzorce IV
W - B - Cys(Y) - NH - Z (IV), ve kterém B a Ϊ a Z značí totéž co ve vzorci I a W totéž co ve vzorci III, po odstranění chránící skupiny W, kondenzuje se sloučeninou obecného vzorce V
W - A (7), ve kterém A značí totéž co ve vzorci I a W totéž co ve vzorci III, načež se po odstranění chrénicí skupiny W do vzniklého peptidu vestaví zbytek X s významem uvedeným ve vzorci I.
5. Způsob výroby sloučenin obecného vzorce I podle bodu 1, vyznačující se tím, že se sloučenina obecného vzorce II
Cys(Y) - NH - Z (II), kde Y a Z značí totéž co ve vzorci I, kondenzuje se sloučeninou obecného vzorce 71 X-B (VI), nebo se sloučeninou obecného vzorce 711
X - A - Β (VII), ve kterých X a A a B značí totéž co ve vzorci I, za vzniku sloučeniny obecného vzorce I.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS846584A CS244022B1 (cs) | 1984-08-31 | 1984-08-31 | Arylamidy dipeptidů nebo tr(peptidů a C-koncovým S-aralkylcysteinovým zbytkem a způsob jejich Výroby |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS846584A CS244022B1 (cs) | 1984-08-31 | 1984-08-31 | Arylamidy dipeptidů nebo tr(peptidů a C-koncovým S-aralkylcysteinovým zbytkem a způsob jejich Výroby |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS658484A1 CS658484A1 (en) | 1985-09-17 |
| CS244022B1 true CS244022B1 (cs) | 1986-07-17 |
Family
ID=5413248
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS846584A CS244022B1 (cs) | 1984-08-31 | 1984-08-31 | Arylamidy dipeptidů nebo tr(peptidů a C-koncovým S-aralkylcysteinovým zbytkem a způsob jejich Výroby |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS244022B1 (cs) |
-
1984
- 1984-08-31 CS CS846584A patent/CS244022B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS658484A1 (en) | 1985-09-17 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4996358A (en) | Hydroxylamine bearing amino acid derivatives as collagenase inhibitors | |
| EP0000063B1 (en) | Dipeptide derivatives of 7-(n-alpha-substituted or non-substituted x-arginyl)-amino-4-methyl-coumarin | |
| US4189604A (en) | Bestatin | |
| JP2594014B2 (ja) | ヒドロキサム酸誘導体 | |
| EP0004256B1 (en) | Easily split substrates for the quantification of proteases, a process for their production and a method for the quantification of proteases | |
| US4713369A (en) | Oligopeptidylargininol derivatives and their homologs, a process for their preparation, their use and agents containing them | |
| US4857656A (en) | Active esters used for production of esters or amides and process for producing esters or amides | |
| US5272151A (en) | Aminoacyl and oligopeptidyl derivatives of allopurinol exhibiting immunostimulatory activity, and pharmaceutical formulations containing these substances | |
| US4528133A (en) | Biologically active tripeptide and tetrapeptide alkylamides, and method for the preparation thereof | |
| JPS63250360A (ja) | サイモペンチンレトロ−インバーソ類似体及びそのフラグメント | |
| US3772265A (en) | Process for production of diketopiperazine dihydroxamates and intermediates therefor | |
| US6077962A (en) | N-3, 3-dimethylbutyl-L-aspartic acid and esters thereof, the process of preparing the same, and the process for preparing N-(N-(3,3-dimethylbutyl) -α L-aspartyl)-L- phenylalanine 1-methyl ester therefrom | |
| SE452318B (sv) | Aminosyror till anvendning som mellanprodukter vid framstellning av bestatiner | |
| Calveras et al. | Influence of N-amino protecting group on aldolase-catalyzed aldol additions of dihydroxyacetone phosphate to amino aldehydes | |
| US4554100A (en) | Alkylamides of carboxyalkanoyl peptides and method for preparation thereof | |
| IE42785B1 (en) | L-3-(3,4-dihydroxyphenyl)-2-methyl-alanine peptides | |
| CS244022B1 (cs) | Arylamidy dipeptidů nebo tr(peptidů a C-koncovým S-aralkylcysteinovým zbytkem a způsob jejich Výroby | |
| GB1582420A (en) | Phenylamino phenylacetic acid amide compounds and processes for their preparation | |
| US3891692A (en) | N-(cyclopropylalkoxycarbonyl)amino acids | |
| JPS59499B2 (ja) | ペプチド誘導体 | |
| US5216125A (en) | Active ester used for production of acylated amino acids | |
| US3948971A (en) | N-protected-α-amino acid compounds | |
| JP2929555B2 (ja) | 色素原基質 | |
| Yamada et al. | Studies of unusual amino acids and their peptides. VIII. The syntheses of an iminohexapeptide as a model of bottromycin and its related iminopeptides. | |
| EL‐NAGGAR et al. | Synthesis of some 3‐hydroxynaphthalene‐2‐carbonylamino acid and dipeptide derivatives |