CS230983B1 - Sposob izolácie termolabilného enterotoxínu bakterií Bschericbia coli - Google Patents
Sposob izolácie termolabilného enterotoxínu bakterií Bschericbia coli Download PDFInfo
- Publication number
- CS230983B1 CS230983B1 CS831376A CS137683A CS230983B1 CS 230983 B1 CS230983 B1 CS 230983B1 CS 831376 A CS831376 A CS 831376A CS 137683 A CS137683 A CS 137683A CS 230983 B1 CS230983 B1 CS 230983B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- enterotoxin
- isolating
- coli
- bschericbia
- thermolabile
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Description
1 230 983
Vynález sa týká spo sobu izolácie a výroby terraolabilné-ho enterotoxínu baktérií Escherichia coli, ktorý slúži buď kimunizacii prašných prasnic, alebo telných krav osve, aleboako doplnok k iným vakcínam proti črevným zápal om a hnačkám.
Kolienteritídu akolihnačky novorodených teliat a prasiatsposobujú enteropatogenně baktérie Escherichia coli, ktoré saadherujú na črevnú stenu postihnutých zvierat a potom vylučo-váním enterotoxínov sposobujú črevný zápal a hnačky, v dósled-ku ktorých novorodenci často hynú. Zdolanie tohoto črevnéhozápalu je velmi vážným problémom* Najúspešnejším postupom jeimunizácia zvierat antigénom adherencie, ktorý zabraňujebaktériám přilnut’ ku črevnej stene a tým aplikovat? v potreb-nom množstve svoje toxíny a tak sposobovať onemocnenie. Na-priek zníženiu adherencie však v niektorých prípadoch baktériepasážujúce črevným traktom stačía vylúčiť také množstvá enterotoxínu, že k ochoreniu dojde. Tým sa vytvára situácia, keďvedla imunizácie voči antigénom adherencie je potřebná zviera-tá imunizovat’ aj voči enterotoxínu* Izelácia enterotoxínovv priemyselnom měřítku je však velmi zložitá, protože vyžadu-je niekolkostupňové chemické izolačně postupy a nákladnézariadenia* 230 983
Uvedené nedostatky v podstatné j raiere odstraňujeuvedený sposob izolácie termolabilného enterotoxínu baktériíEscherichia coli podlá vynálezu, ktorého podstata spočívá vtom, že sa enterotoxín z rozbitých bakteriálnych tiel po ichodstředění izoluje izaelektrickou autofokusáciou do takejkoncentrácie, že vykazuje jasnú přecipitačnú líniu v agarevoči antiséru anti Ent až do riedenia 1 i 64· Výhodou uvedeného spósobu výroby termolabilného enterotoxínu je jednoduchost, energetická nenáročnost*, vylúčenietrvalej obsluhy aparatúry a potřeby chemikálií, pretožeseparácia prebieha jedine v apyrogénnej sterilnej destilova-nej vod·· Příklad·
Baktérie Escherichia coli, produkujúce tělový termo-labilný enteraíoxín sa po bežnej kultivácii, zabezpecujúcejvysoký obsah tohoto enterotoxínu v telách baktérií odstrediaa bakteria bez supermatantu sa resuspenduje v 2 % roztokunátrlumlaurylsulíátu, čiže nátriumdodecylsulíátru v steril-nej deštilovanej vod· pri teplot· 4 °C pomocou homogenizáto-ra po dobu 5 až 10 min pri 3 000 1/min a teplote 4 °C· Týmsposobem nastane rozbitie baktérií· Potom sa homogenát od-středí pri 100 000 m«s”2 pri teplote 4 °C po dobu jednejhodiny a supematant, ktorého vodivost sa upraví na hodnotydo SOO^uS přidáním sterilnej destilovanej vody, alebo přidá-ním ďalšieho substrátu následnou homogenizáciou ďalšiehobakterínu v tom istom roztoku, sa aplikuje do horizontálnejizoelektroíokusačnej velkokapacitnej aparatúry s mechanickystabilizovaným deleným roztokom· Do aparatúry sa aplikuje 3 230 983 jednosměrný elektrický prúd maximálně 3 VA a roztok fokusujepri teplete 4 °C kým neklesne pod 3 mA pri napatí 1. 000 V.
Po fokusácii sa zmeria vo všetkých priehradkách aparatury pH.Termolabilný enterotoxín fokusuje automaticky k pH 6· - 7. Vtomto rozmedzí interferuje len minimum iných hielkovín, ktorémáju izoelektrické pí vačšinou okolo pH 5,5. Z priebradok spH v rozmedzí 6 až 7 sa zhromažďuje termolabilný enterotoxín· » Jeho koncentrácia sa upraví tak, aby vykazoval difúziou vagare zřete Hni přecipitačnú líniu voči antiséru Ent alebocholerovému antiséru aj pri riedení 1 : 64. Po dosiaBnutítejto koncentrácie sa k roztoku termolabilného enterotoxínubuď přidá vhodné adjuvans, například olejové a podává sa akosamostatná imunizačná vakcína parenterálne, subkutánne alebointramuskuláme injekčne v dávke 2 ml asi 6 týždňov předpórodom prašnéj prasnici, či telnej krave, alebo sa používáako přídavek k vytvoreniu komplexněj imunizačnej vakcínyspolečné například s K 88 alebo K 99 antigénom.
Vynález muže nájsť široké uplatnenie pri priemysel-nej výrobě imunizačných vakcín a v živočíšnej velkovýroba.
Claims (1)
- 4 P RE DUET VílílLEZlI 230 983 Spósob izolácie termolabilného enterotoxínu baktériíEscherichia coli vyznačujúci sa tým, že sa enterotoxín zrozbitých bakteriálnych tiel po ich odstředění izoluje izo-elektrickou autoíokusáciou do takej koncentrácie, že vykazu-je jasnu precipitačnú líniu v agare voči antiséru anti Ent,alebo cholerovému antiséru až do riedenia 1 : 64· t «I
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS831376A CS230983B1 (sk) | 1983-02-28 | 1983-02-28 | Sposob izolácie termolabilného enterotoxínu bakterií Bschericbia coli |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS831376A CS230983B1 (sk) | 1983-02-28 | 1983-02-28 | Sposob izolácie termolabilného enterotoxínu bakterií Bschericbia coli |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS137683A1 CS137683A1 (en) | 1984-02-13 |
| CS230983B1 true CS230983B1 (sk) | 1984-09-17 |
Family
ID=5347984
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS831376A CS230983B1 (sk) | 1983-02-28 | 1983-02-28 | Sposob izolácie termolabilného enterotoxínu bakterií Bschericbia coli |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS230983B1 (cs) |
-
1983
- 1983-02-28 CS CS831376A patent/CS230983B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS137683A1 (en) | 1984-02-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Mach et al. | Secretory IgA, a major immunoglobulin in most bovine external secretions | |
| Klobasa et al. | Maternal-neonatal immunoregulation in swine. II. Influence of multiparity on de novo immunoglobulin synthesis by piglets | |
| Strockbine et al. | Characterization of monoclonal antibodies against Shiga-like toxin from Escherichia coli | |
| Hurley et al. | Perspectives on immunoglobulins in colostrum and milk | |
| Harrell et al. | Humoral factors important in resistance of salmonid fish to bacterial disease. II. Anti-Vibrio anguillarum activity in mucus and observations on complement | |
| Allen et al. | The relative distribution of IgM and IgA cells in intestinal mucosa and lymphoid tissues of the young unweaned pig and their significance in ontogenesis of secretory immunity | |
| Jones et al. | Effects of stressors on immune parameters and on the faecal shedding of enterotoxigenic Escherichia coli in piglets following experimental inoculation | |
| Porter et al. | Secretory IgA and antibodies to Escherichia coli in porcine colostrum and milk and their significance in the alimentary tract of the young pig | |
| Bush et al. | Absorption of colostral immnunoglobulins by newborn dairy calves | |
| CA2267421A1 (en) | Oral administration of chicken yolk antibodies to treat disease | |
| US6663873B2 (en) | Antigenic preparation for treatment or prevention of helicobacter infection | |
| Vihan | Immunoglobulin levels and their effect on neonatal survival in sheep and goats | |
| Nansen | Selective immunoglobulin deficiency in cattle and susceptibility to infection | |
| Ogra et al. | Immunosuppressive activity of mouse amniotic fluid | |
| EP0074240B1 (en) | Antibodies specific to endotoxins | |
| Guentzel et al. | Use of fluorescent antibody in studies of immunity to cholera in infant mice | |
| WO1994006474A1 (en) | ANTIBODY TREATMENT OF $i(HELICOBACTER PYLORI) | |
| CS230983B1 (sk) | Sposob izolácie termolabilného enterotoxínu bakterií Bschericbia coli | |
| Hilbink et al. | Non-specific seroreactions against Brucella abortus in ruminants in New Zealand and the presence of Yersinia enterocolitica 0: 9 | |
| EP1057895A1 (de) | Fusionsprotein das das Fragment B des Shigatoxins enthält, dieses enthaltende (Impf-)Stoffzusammensetzung und Verfahren zu dessen Herstellung | |
| Rabin et al. | Nonpathogenicity of antiintestinal antibody in the rabbit | |
| Heddle et al. | The effect of lysozyme on the complement-dependent bactericidal action of different antibody classes | |
| Angus | Cryptosporidiosis and AIDS | |
| Fallon | The effect of different methods of feeding colostrum on calf blood serum immunoglobulin levels | |
| CS276181B6 (sk) | Spůsob izolácie povrchového antigénu 987-p baktérií Escherichia coli |