CS223417B1 - Polymerní látky s protinádorovou aktivitou a způsob jejich přípravy - Google Patents

Polymerní látky s protinádorovou aktivitou a způsob jejich přípravy Download PDF

Info

Publication number
CS223417B1
CS223417B1 CS535481A CS535481A CS223417B1 CS 223417 B1 CS223417 B1 CS 223417B1 CS 535481 A CS535481 A CS 535481A CS 535481 A CS535481 A CS 535481A CS 223417 B1 CS223417 B1 CS 223417B1
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
antitumor activity
sbipe
activity according
acetone
polymeric substance
Prior art date
Application number
CS535481A
Other languages
English (en)
Inventor
Ekaterina I Zacharieva
Milka P Georgieva
Vladimir S Kabaivanov
Jindrich Kopecek
Karel Ulbrich
Original Assignee
Ekaterina I Zacharieva
Milka P Georgieva
Vladimir S Kabaivanov
Jindrich Kopecek
Karel Ulbrich
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ekaterina I Zacharieva, Milka P Georgieva, Vladimir S Kabaivanov, Jindrich Kopecek, Karel Ulbrich filed Critical Ekaterina I Zacharieva
Priority to CS535481A priority Critical patent/CS223417B1/cs
Publication of CS223417B1 publication Critical patent/CS223417B1/cs

Links

Landscapes

  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Description

Vynález se týká polymérních látek s protinádorovou aktivitou a způsobu jejich výroby.
Je známé navázání biologicky aktivních látek na polymery pomocí tak zvaných distančních skupin (Ringsdorf n., J. Polym. Sci, Polym. Symp. 51, 135 — 153, 1957, Kopeček J., Polymers in Medicine 7, 191 — 220, 1977), které umožňují jejich výhodné pojení a uvolnění. K nim patří ve vodě rozpustné kopolymery, které obsahují oligopeptické řetězce (Ulbrich K., Zacharieva I. E., Obererěigner B., Kopeček J., Biomaterials, 1, 199, 1980) enzymaticky degradovatelné in vitro papainem (Ulbrich K., Zacharieva I. E., Oberereigner B., Kopeček J., Biomaterials, 1, 199, 1980), chemotrypsinem, trypsinem (Ulbrich K., Strohalm J., Kopeček J., Makromol. Chem., in press.), tritozomem (Dunkan R., Lloyd Y., B., Kopeček J., Biochchem. Blophys. Res. Comim., 284 — 290, 94, 1, 1980). Struktura polymeru se musí zvolit tak, aby vazba účinné látky vycházela ze specifické aminokyseliny pro enzym vyvolávající štěpení.
V literatuře nejsou údaje o využití polymerních nosičů cytostatik tohoto typu.
Nedostatkem uvedených cytostatik je jejich toxicita, tj. působí škodlivě na proliferační buňky, jako například kostní dřeně, lymfatické tkáně, gastrointestinálního traktu, genitourinálního epitelu a nespecifita jejich účinku.
Předmětem vynálezu je polymerní látka s protinádorovou aktivitou na bázi kopolymerú N- (2-hydroxypropyl) -methakrylamidu a methakrylamidu obecného vzorce
r-
1 3
-CHfC- * I X -CHfC “ 1
CO ---, 1 < co < | >
NH
I
CH-OH
I
CW, i
CO
I
NH
I λ
SBfPE kde x = 85 — 97 mol. y = 3 — 15 mol. proč. o mol. hmotnosti Mw = 15 — 40 000, R je enzymaticky štěpitelná distanční jednotka a —X—SBIPE je nízkomolekulární látka s protinádorovým účinkem, vázána na nosič kovalentní vazbou.
Boční distanční jednotkou může být s výhodou glycin (Gly) nebo glycin-leucin-(Gly-Leu-j.
Podstata způsobu přípravy látky podle vynálezu spočívá v tom, že polymerní nosič se rozpustí v suchém dimethylsulfoxidu a za míchání v přítomnosti triethylaťninu se přidá NHz—X—SBIPE a nechá se reagovat po dobu 20 hodin a získaný produkt se izoluje srážením do směsi aceton : diethyléter (3:1) s následným, přečišťováním pomocí dvojnásobného rozpuštění v metanolu a srážení do siměsi aceton : diethyl (3 : lj.
V případě, že se používá NH2—Phe—SBIPE postupuje se podle vynálezu tak, že se nejdříve připraví NH2—Phe—SBIPE, a to tak, že se hydrochlorid isopropylesteru sarkolysinu nechá v přítomnosti triethylaminu reagovat s benzyloxykarbonyl-phenylalaninem (BOC—Phe—OH] při —10 až —5 °C v tetrahydrofuranu metodou DCCI, poté se blokující benzyloxykarbonylová skupina (BOC) odstraní roztokem HC1 v methanolu a fenylalanylsarkolysinhydrochlorid se isoluje filtrací a přidá se za míchání do roztoku polymeru v suchém dimethylsulfoxidu, případně dimethylformamidu v přítomnosti triethylaminu a nechá při pokojové teplotě reagovat po dobu asi 20 hodin a získaný produkt se izoluje srážením do směsi aceton : diethyléter (3:1) s následným přečišťováním pomocí dvojnásobného rozpuštění v metanolu a srážení do směsi aceton : diethyléter (3 : lj.
Látky s protinádorovou aktivitou podle vynálezu mají sníženou toxicitu, zvýšenou specifitu a prolongovaný účinek působení.
Problém je řešen pomocí kovalentně vázaného určitého aktivního cytostatika s ve vodě rozpustným kopolymerem na bázi N- (2-hydroxypřopyl) -methakrylamidu (HPMA) a methakrylamidu s bočním řetězcem prodlouženým oligopeptidickými jednotkami, podléhajícími enzymatickému štěpení.
Jako aktivního cytostatika se použije isopr opylester p di- (2-chlorethyl) -aminof enylalaninu (sarkolysin — SBIPE] a jako polymerního1 nosiče kopolymér N-(2-hydroxypropylj-methakrylamidu (HPMA) a methakrylamidem, u kterého jsou methakrylamidové skupiny prodlouženy o boční řetězce, obsahující jednotky schopné enzymatického štěpení.
Obecný vzorec syntetizovaných sloučenin s předpokládanou protinádorovou aktivitou ίθ
P—NH—X—SBIPE, kde P je polymerní nosič připravený podle schématu 1,
SCHÉMA 1 _x = 85 až 90 mol. %, y = 5 až 15 mol. %,
Mw = 15 — 40 000, a X = O nebo -Phe-.
Pro sledování vlivu délky bočního řetězce na protinádorovou aktivitu byl v jedné skupině polymerních nosičů
R = —NH—CH2—, tj. — Gly— a ve druhé
R = —NH—CHz—NH—CH-CH2CH—(CI-l3)z, tj. —Gly—Leu—.
V případě, že R = —Gly—, X = O, používá se jako nízkomolekulárního cytostatika
SBIPE a při přípravě sloučeniny s protinádorovou aktivitou podle vynálezu obecného vzorce se postupuje jednostupňové podle schéma tu 2, tj. Ρ + NH2—X-SBIPE;
P—NH—X—SBIPE
__
CHX 1 *
-CHz-C* 1 CO
-CHý-Ck * 1 J X
+ NH^X-SeiPE
CO I
NH
CH-OH
I
CH„
CH,
CO I
NH
I
CH~
I z CH-OH I
CHO
★ H0C6H^N0£
NH
I
SBIPE
SCHÉMA 2
V případě, když R = —Gly—Leu— a X = = —NH—CH— CH2C6H5, tj. —Phe— je příCO prava protinádorové sloučeniny dvoustupňová. V prvním stupni se připraví HC1—Phe—SBIPE (f enylalanylsarkosinhydrochlorid), který se v druhém stupni nechá reagovat s polymerním nosičem.
I. stupeň. — Tvorba produktu NH2—X—SBIPE (NHz—PHE—SBIPE) vychází z reakce benzyloxykarbonyl-phenylalaninu (BOC—PHE—OH) s hydrochloridem isopropylesteru sarkolyslnu v přítomnosti triethylaminu. Reakce probíhá v tetrahydrofuranu metodou DCC1 (dicyklohexylkarbodiimidovou). Použité roztoky jsou přibližně 20% koncentrace. BOS — blokáda se odstraňuje 20% hmot. roztokem HC1 v methanolu. Proces probíhá podle schématu 3.
DCClttťC)
BOC-Pk.e-Ořf * HCl. NH^CH—CH^H^N (CH^CH^CÍ)^
COOCH (CH5)2
HCl(CH3OH)
BOC~Ph.e-NH~CI-i~CH£CéH^N (CH^CH^Cí )£ *
COOCH (CH^
- :: -pi^-NH-CH-CH^H^N (CH^CH^CÍ nebo HCl~Ph* -SBIPE COOCH (CH3)z v tetrahydroíuranu THF; (C2H5)0N
SCHÉMA 3
Reakční produkt HCl—Phe—SBIPE — fenylalanylsarkolyslnhydrochlorid byl přečištěn rekrystalizací z éteru.
II. stupeň. — Polymerní nosič obsahující aktivní skupiny, se rozpouští v suchém dimethylsulfoxidu v poměru ONp : NH2 = 1:2 v přítomnosti ekvivalentního množství triethylaminu. Reakce probíhá za míchání při laboratorní teplotě během 20 hodin. Reakční produkt se izoluje srážením do směsi aceton : diethyléter (3:1) a přesrážením z methanolu do aceton : diethyléter (3 : lj. Produkt se suší při laboratorní teplotě za vakua do konstrantní hmotnosti. Obsah vázaného cytostatika se vypočte z obsahu Cl.
Následující příklady vynález osvětlují, aniž by ho omezovaly.
Příklad 1
Polymerní nosič se připravuje radikálovou srážecí polymerizaci v prostředí acetonu při koncentraci monomerů 12,5 % hmot. (90, 93, 95 % hmot. HPMA a 10, 7, 5 % hmot. komonoímeruj, 0,6 % hmot. azobisísobutyronitrilu jako iniciátoru v ampulích při 50 °C, reakční doba 48 hodin. Polymer se odfiltruje a promyje dvakrát acetonem a éterem. Suší se do konstatní váhy ve vakuu při laboratorní teplotě.
Příklad 2
Meziprodukt NH2—Phe—SBIPE byl připraven podle schématu 3.
Byl připraven asi 20% roztok BOC—Phe—OH v suchém tetrahydrofuranu. V přítomnosti ekvimolárního množství dicyklohexylkarbodiimidu (DCCI) a hydrochloridu isopropylesteru sarkolysinu při —5 CC v přítomnosti tríetylaminu a za energického ml· cháni byl připraven BOC—Phe—SBIPE. Blokáda byla odstraněna rozpouštěním připraveného produktu (?0% hmot. roztok) v methanolu nasyceném HCl za míchání při laboratorní teplotě. Hydrochlorid připraveného produktu byl izolován filtrací.
Příklad 3
P—NH—X—SBIPE byl připraven rozpuštěním P v dimetylsulfoxidu (20% hmot. roztok). Za míchání se přidá HCl. NH2—X—SBIPE, poměr ONp : NH2 = 1:2 a ekvimolární množství tríetylaminu, počítáno na HCl. Po 20 hodinách míchání při pokojové teplotě se polymerní sloučenina izoluje vysrážením do směsi éter : aceton (1:3). Následuje dvakrát srážení z methanolu do směsi éter : aceton (1:3). Připravený produkt bul sušen při laboratorní teplotě do konstantní hmotnosti.
Osah cytostatika se určí z obsahu chloru.
Pomocí GPC chromatografie byla_ pro zkoušení in vivo- izolována frakce s Mw ~ co 24 000. UV spektroskopie prokázala, že polymerní frakce neobsahuje volný sarkolysin.

Claims (7)

  1. PŘEDMĚT
    1. Polymerní látka s protinádorovou aktivitou na bázi kopolymerů N-(2-hydroxypropyl]-methakrylamidu a methakrylamidu obecného vzorce
    r > CH, í 3 -Cl-L-C- * 1 X -ch9-c ~ 1 co ř° J k 1 > NH 1 R I CHZ CO 1
    CH-OH
    I kde x = 85 až 97 mol. %, y = 3 až 15 mol. procent o mol. hmotnosti Mw = 15 až 40 000, R je enzymaticky štěpltelná distanční jednotka a —X—SBIPE je nízkomolekulární látka s protinádorovým účinkem, vázána na nosič kovalentní vazbou.
  2. 2. Polymerní látka s protinádorovou aktivitou podle bodu 1, vyznačená tím, že jako boční distanční jednotka je R = —Gly—.
  3. 3. Polymerní látka s protinádorovou aktivitou podle bodu 1, vyznačená tím, že jako boční distanční jednotka je
    R = —Gly—Leu—.
  4. 4. Polymerní látka s protinádorovou aktivitou podle bodů 1 a 2, vyznačená tím, že
    VYNÁLEZU
    X = 0, a jako nízkomolekulární cytostatikum je použit isopropylester sarkolysinu.
  5. 5. Polymerní látka s protinádorovou aktivitou podle bodů 1, 3 a 4, vyznačená tím, že X = —Phe—.
  6. 6. Způsob přípravy polymerní látky s protinádorovou aktivitou podle bodů 1 až 5, vyznačený tím, že polymerní nosič se rozpustí v suchém dimethylsulfoxidu a za míchání v přítomnosti triethylaminu se přidá NHz—X—SBIPE a nechá se reagovat po dobu 20 hodin a získaný produkt se izoluje srážením do směsi aceton : diethyléter (3 : lj s následným přečišťováním pomocí dvojnásobného rozpuštění v metanolu a srážení do směsi aceton : diethyléter (3:1).
  7. 7. Způsob přípravy polymerní látky s protinádorovou aktivitou podle hodů 1 až 6, vyznačený tím, že se nejdříve připraví NHž—Phe—SBIPE, a to tak, že se hydroehlorid isopropylesteru sarkolysinu nechá v přítomnosti triethylaminu reagovat s benzyloxykarbonyl-phenylalaninem (BOC—Phe—OA) při —10 až —5 °C v tetrahydrofuranu metodou DCCI, poté se blokující benzyloxykarbonylová skupina (BOC) odstraní roztokem HC1 v methanolu a fenylalanylsarkolysinhydrochlorid se izoluje filtrací a přidá se za míchání do roztoku polymeru v suchém dimethylsulfoxidu, případně dimethylformamidu v přítomnosti triethylaminu a nechá při pokojové teplotě reagovat podobu asi 20 hodin a získaný produkt se izoluje srážením do směsi aceton—diethyléter (3:1) s následným přečišťováním pomocí dvojnásobného rozpuštění v methanolu a srážení do směsi aceton : diethyléter (3 : lj.
CS535481A 1981-07-13 1981-07-13 Polymerní látky s protinádorovou aktivitou a způsob jejich přípravy CS223417B1 (cs)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS535481A CS223417B1 (cs) 1981-07-13 1981-07-13 Polymerní látky s protinádorovou aktivitou a způsob jejich přípravy

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS535481A CS223417B1 (cs) 1981-07-13 1981-07-13 Polymerní látky s protinádorovou aktivitou a způsob jejich přípravy

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CS223417B1 true CS223417B1 (cs) 1983-10-28

Family

ID=5398286

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS535481A CS223417B1 (cs) 1981-07-13 1981-07-13 Polymerní látky s protinádorovou aktivitou a způsob jejich přípravy

Country Status (1)

Country Link
CS (1) CS223417B1 (cs)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Ulbrich et al. Polymers containing enzymatically degradable bonds V. Hydrophilic polymers degradable by papain
ES2404685T3 (es) Derivados heterobifuncionales de poli(etilenglicol) y métodos para su preparación
Kopeček et al. Polymers containing enzymatically degradable bonds, 1. Chymotrypsin catalyzed hydrolysis of p‐nitroanilides of phenylalanine and tyrosine attached to side‐chains of copolymers of N‐(2‐hydroxypropyl) methacrylamide
Yang et al. Synthesis of biodegradable multiblock copolymers by click coupling of RAFT-generated heterotelechelic polyHPMA conjugates
JP5944836B2 (ja) 高分子薬物送達結合体ならびにその製造および使用方法
EP0187547B1 (en) Synthetic polymeric drugs
Ulbrich et al. Poly (ethylene glycol) s containing enzymatically degradable bonds
AU764144B2 (en) Polyamide chains of precise length, methods to manufacture them and their conjugates
WO1995017886A1 (en) Water soluble non-immunogenic polyamide cross-linking agents
Subr et al. Release of macromolecules and daunomycin from hydrophilic gels containing enzymatically degradable bonds
Ulbrich et al. Polymers containing enzymatically degradable bonds, 3. Poly [N‐(2‐hydroxypropyl) methacrylamide] chains connected by oligopeptide sequences cleavable by trypsin
WO1995005200A1 (en) Drug delivery agents incorporating mitomycin
US6316585B1 (en) Process for the preparation of enzymatically degradable polymers
SK286284B6 (sk) Funkcionalizované polyméry alfa-aminokyselín a spôsob ich prípravy
US4097470A (en) Preparation of biogically active substances bearing -NH2 groups in a form releasable by enzymatic cleavage
Ulbrich et al. Polymer‐bound derivatives of sarcolysin and their antitumour activity against mouse and human leukaemia in vitro
JPH07206927A (ja) アミジノフェニルアラニン誘導体、その製造方法、その使用およびそれを抗凝血剤として含有する組成物
CS223417B1 (cs) Polymerní látky s protinádorovou aktivitou a způsob jejich přípravy
CN104371098A (zh) 多分支亲水性聚合物-异氰酸酯衍生物
EP1320553A1 (en) Novel polymer compounds
Parejo et al. Controlled release of NSAIDs bound to polyacrylic carrier systems
Pechar et al. Synthesis of poly (ethylene glycol) block copolymers as potential water-soluble drug carriers
Ulbrich et al. Hydrophilic polymers for drug delivery
Ulbrich et al. In vitro release of chloramphenicol from poly [N-(2-hydroxypropyl) methacrylamide] carriers by Cathepsin B
Sintov et al. Polymeric drug delivery of enzymatically degradable pendant agents: Peptidyl-linked procainamide model system studies