CS218549B1 - Víceúčelová kultivační komůrka pro buněčné kultury - Google Patents

Abstract

Vynález využívá dobrých optických vlastností kultivačních misek, které jsou hermeticky uzavřeny uzavíracím ‘prstencovým krytem. Tento kryt umožňuje libovolnou manipulaci s kultivačním prostředím, například periodickou výměnu média, zahojení na perfúzni systém, přidání látek do kultivačního prostředí, odebírání vzorků kultivačního prostředí přímo v průběhu pozorování. Tyto vlastnosti jsou nepostradatelné například 'při 'časosběrné mikrokmematografii buněk pěstovaných in vitro.

Description

Vynález se týká víceúčelové kultivační komůrky pro buněčné kultury, opatřené kultivační mlskou.

Pokusy na buňkách, tkáních nebo organismech in vitro mají v biologii a medicíně stále větší význam. V mnoha těchto experimentech je třeba provádět přímé mikroskopické pozorování živých organismů v průběhu řady dnů a týdnů. V těchto pokusech je z technického hlediska největším problémem kultivačně pozorovací komůrka, na kterou je kladena celá řada velmi náročných a mnohdy protichůdných požadavků. V posledních letech bylo ve světové literatuře popsáno několik typů komůrek. Z nich některé mají výborné optické vlastnosti, ale hůře se hodí pro pěstování buněk, jiné jsou vhodné pro kultivaci buněk, ale neumožňují kvalitní mikroskopická pozorování. Vždy je manipulace s 'komůrkami poměrně pracná a navíc není možné přímé srovnání výsledků získaných v těchto komůrkách a výsledků získaných ve standardních kultivačních miskách.

Uvedené nedostatky odstraňuje podle vynálezu víceúčelová kultivační komůrka pro buněčné kultury, opatřená kultivační miskou. Její podstata spočívá v tom, že kultivační miska je opatřena uzavíracím prstencovým krytem, v jehož středové části je pomocí dalšího prstence uchyceno mezi dvěma těsněními krycí sklo a jímž procházejí manipulační trubičky, přičemž kultivační miska a uzavírací prstencový kryt jsou sevřeny mezi horním a Spodním dílem držáku pomocí svorníků a stahovacích matek.

Výhody komůrky podle vynálezu spočívají především ve stabilní konstrukci, jednoduché a rychlé montáži a v možnosti sterilizovat celý systém, který je zhotoven z materiálů pro buňky ne toxických. Komůrka umožňuje provádět pozorování jak v normálním, tak invertovaném mikroskopu při použití fázového kontrastu a poskytuje možnost libovolné manipulace s kultivačním prostředím na stolku mikroskopu.

Claims (1)

1. PŘEDMĚT

   Víceúčelová kultivační komůrka pro buněčné kultury, opatřená kultivační miskou, vyznačená tím, že kultivační miska (1) je opatřena uzavíracím prstencovým krytem (2), V jehož středové části je pomocí dalšího prstence (5) uchyceno mezi dvěma těsKomůrka umožňuje dlouhodobé mikroskopické pozorování živých buněk, tkání a organismů pěstovaných in vitro. Při pozorování jsou zachovány stejné podmínky jako v paralelních pokusech, ve kterých se provádí například biochemické nebo jiné stanovení.

   Víceúčelová kultivační komůrka podle vynálezu je dále blíže popsána na příkladu němž je nakreslena komůrka ve schematickém provedení v řezu.

   Kultivační miska 1 je opatřena uzavíracím prstencovým krytem 2, který je vyroben z netoxické nerezové oceli. V tomto prstencovém krytu 2 je pomocí dalšího prstence 5 hermeticky upevněno kulaté krycí sklo 5. Těsnění 8 je zhotoveno z netoxické silikonové pryže. Díly 3, 4 držáku, který 'spojuje obě uvedené části pomocí stahovacích matek 9, jsou zhotoveny z nekorodujících kovů. Pomocí manipulačních trubiček 6 z nerezové oceli je umožněna manipulace s médiem. Kultivační miska 1, ať skleněná, nebo z plastické hmoty, ve které se buňky standardně pěstují, má dobré optické vlastnosti. Proto část kultivačního systému tvoří kultivační miska. 1. Toto řešení má tu výhodu, že při pozorování jsou buňky ve stejných podmínkách jako v paralelních pokusech. Navíc je možno kteroukoliv kultivační misku 1 v pokusu kdykoliv začít pozorovat nebo filmovat. Soustava manipulačních trubiček 6 umožňuje výměnu média v průběhu pozorování, přidání různých látek k buňkám, odběry vzorků média na analýzu, případně je možno napojit celý systém na perfúzní pumpu a kultivovat buňky v rovnovážném otevřeném systému za optimálních podmínek. Vkultivačním systému je také dost prostoru pro plynnou fázi, to je vzduch + 5% CO2, která je při kultivaci buněk in vitro velmi tvoří držák, který pevně spojí dvě předešlé části a navíc umožní upevnění kultivačního systému na stolek mikroskopu a pomocí zabudovaných mikrometrických posunů i přesnou lokalizaci objektu v zorném poli.

   vynálezu něními (8) krycí sklo (7) a jímž procházejí manipulační trubičky (6 ], přičemž kultivační miska (1) a uzavírací prstencový kryt (2J jsou sevřeny mezi horním dílem (3) držáku a spodním dílem (4) držáku pomocí svorníků a stahovacích matek (9).