CS211856B1

CS211856B1 - Method of automatic izoelectric focussing

Info

Publication number: CS211856B1
Application number: CS490079A
Authority: CS
Inventors: Oto Sova
Original assignee: Oto Sova
Priority date: 1979-07-13
Filing date: 1979-07-13
Publication date: 1982-02-26

Abstract

Vynález sa týká spQsobu samočinného izoelektrického fokusovania látok biologického charakteru a organických chemikálií. Podstata spQsobu samočinného izoelektrického fokusovania spočívá v tom, že na zmesi látok biologického charakteru pokial' ich roztok mávodivost do μδ a koncentrácia dělených látok nepřesahuje 5 g/100 ml sa»pósobí jednosměrným elektrickým prúdom po dobu 6 až 72 hodin. Vynález je výhodný pre získanie extrémně čistých látok při výrobě liečiv, antibiotik, sér, očkovacích látok apod.The present invention relates to a self isoelectric method focusing substances of a biological nature and organic chemicals. The essence of self isoelectric mode Focusing on the mixture of substances biological nature, as long as their solution has a ductility to μδ and the concentration of the divided substances does not exceed 5 g / 100 ml electric current for 6 to 72 hours. The invention is advantageous for obtaining extremely pure substances in the manufacture of medicines, antibiotics, \ t vaccines and the like.

Description

Vynález sa týká sposobu samočinného izoelektrického fokusovania látok biologického charakteru a organických chemikálií v širokom rózmedzí obsahu do 1500 litrov aj viac.The invention relates to a process for the automatic isoelectric focusing of substances of biological character and organic chemicals in a wide range of up to 1500 liters or more.

Doteraz sa .izoelektrické fokusovante používalo výlučné tak, že k deliacej zmesi pri fokusovaní v koloně, alebo do nosiča sa přidával obsah 2 až 4 % špeciálneho amfolytického pufru žladúceho rozmedzia pH. Tieto pufre sú cenove velmi nevýhodné a nateraz je ich potřeba úplné krytá dovozom. Izoelektrická fokusácia takto v technologickom měřítku znamená značnú finančnú záťaž a preto nateraz nenašla uplatnenle v praxi.Until now, isoelectric focusing has been used exclusively by adding a content of 2-4% of a special ampholytic buffer cooling the pH range to the separating mixture when focusing in the column or carrier. These buffers are very costly, and for the time being, they need to be fully covered by imports. Isoelectric focusing thus entails a considerable financial burden on a technological scale and has therefore not yet been found to be practicable in practice.

Túto nevýhodu podstatné odstraňuje předmětný vynález.This disadvantage is substantially eliminated by the present invention.

Podstata spůsobu samočinného izoelektrického fokusovania podfa vynálezu spočívá v tom, že zmesi látok biologického charakteru pokial ich roztok má vodivost do 400 pS a koncentrácla dělených látok nepřesahuje 5 g/100 ml vplyvom jednosměrného elektrického prúdu v gradlentovom usporiadaní v izoelektrickofokusačnej koloně fokusuji! po dobu 6 až 72 hodin. .The principle of the automatic isoelectric focusing method of the present invention is that mixtures of biologicals have a conductivity of up to 400 pS and the split concentrate does not exceed 5 g / 100 ml due to the direct current in the gradient arrangement in the isoelectric-focusing column! for 6 to 72 hours. .

Vynález umožňuje pri poměrně nízkých nákladoch uskutečňovat izoelektrické fokusovanie hlavně v technologickej praxi, kde je možné pri vlacstupňovom delení systémom: samofokusovanle — Izolácla skupiny žiadaných látok —- dalšie samofokusovanie — izolácia čistejšej látky — klasické dočistenie extrémně čistej látky izoelektrickým fokusováním — dosahovat jemnější a jemnější gradient ,pH a tým neustále čistejšie látky bez náročných zariadení a bez vysokéj spotřeby energie.The invention makes it possible, at relatively low cost, to perform isoelectric focusing mainly in technological practice, where it is possible in a single stage system by: self-focusing - isolation of desired substance groups - additional self-focusing - purification of isolation , pH and thus increasingly cleaner substances without demanding equipment and without high energy consumption.

PříkladExample

Vadný roztok delenej látky, napr. sérum, llečivo, antibiotikum, farbivo apod. v kóncentrácii do 5 % a celkovej vodivosti do 400 ,uS sa rozdělí na dve časti, k jednej sa přidá 15 až 45 % sacharózy a potom sa Izoelektrofokusačná kolona žiadúcich rozmerov plní gradientovým systémem. Po naplnění kolony, podobné ako při klasickej fokusácli sa přidá organická báza ku katodě a organická kyselina k anóde. Po zapojení jednosměrného prúdu dochádza v priebehu 24 až 72 hodin k fokusácil, kde každá látka obsažená v delenom roztoku sa zhromaždí prí svojom izoelektr-ickom bode, vytvoriac tak ostrú frakciu čistej látky. Pri tomto sposobe si gradient pH vytvára delená zmes látok samočinné, pričom gradient nie je vždy plynulý, ale podstata Izoelektrického fokusovania ostává zachovaná.A defective solution of the separated substance, eg serum, drug, antibiotic, dye, etc. in a concentration of up to 5% and a total conductivity of up to 400 µS is divided into two portions, one is added 15 to 45% sucrose and then an isoelectrofocusing column of desired dimensions filled with a gradient system. After loading the column, similar to the conventional focus, an organic base to the cathode and an organic acid to the anode are added. After the direct current has been connected, within 24 to 72 hours, the focuses occur where each substance contained in the split solution is collected at its isoelectric point to form a sharp fraction of the pure substance. In this manner, the pH gradient is formed by a split mixture of substances, the gradient being not always continuous, but the essence of isoelectric focusing is retained.

Vynález je výhodný pře získavanie extrémně čistých látok v technologickom měřítku pri výrobě liekov, antibiotik, sér, očkovacích látok, diagnostik, potravin, extraktov, farbív apod.The invention is advantageous in obtaining extremely pure substances on a technological scale in the manufacture of medicaments, antibiotics, sera, vaccines, diagnostics, foodstuffs, extracts, dyes and the like.

Claims

SUBJECT

A method of automatic isoelectric focusing, characterized in that mixtures of substances of biological nature when the solution of the invention has a wilderness of up to 400 and the concentration of the divided substances does not exceed 5 g / 100 ml are applied by direct current - for 6 to 72 hours.