CS208066B1 - Způsob získávání specifických protilátek k jednotlivým barbiturátům - Google Patents
Způsob získávání specifických protilátek k jednotlivým barbiturátům Download PDFInfo
- Publication number
- CS208066B1 CS208066B1 CS781979A CS781979A CS208066B1 CS 208066 B1 CS208066 B1 CS 208066B1 CS 781979 A CS781979 A CS 781979A CS 781979 A CS781979 A CS 781979A CS 208066 B1 CS208066 B1 CS 208066B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- barbiturates
- poisonous
- ofthe specific
- ethyl
- extraction ofthe
- Prior art date
Links
- 229940125717 barbiturate Drugs 0.000 title claims description 22
- 238000000605 extraction Methods 0.000 title 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 title 1
- 230000007096 poisonous effect Effects 0.000 title 1
- 229940124547 specific antidotes Drugs 0.000 title 1
- HNYOPLTXPVRDBG-UHFFFAOYSA-N barbituric acid Chemical compound O=C1CC(=O)NC(=O)N1 HNYOPLTXPVRDBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 8
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 2
- 150000007656 barbituric acids Chemical class 0.000 claims description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 2
- WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N pentobarbital Chemical compound CCCC(C)C1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 229960001412 pentobarbital Drugs 0.000 description 5
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 5
- FTOAOBMCPZCFFF-UHFFFAOYSA-N 5,5-diethylbarbituric acid Chemical compound CCC1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O FTOAOBMCPZCFFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 3
- -1 (carboxymethylimino) -5-ethyl-5 (1-methylbutyl) barbituric acid Chemical compound 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- IUJDSEJGGMCXSG-UHFFFAOYSA-N Thiopental Chemical compound CCCC(C)C1(CC)C(=O)NC(=S)NC1=O IUJDSEJGGMCXSG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VIROVYVQCGLCII-UHFFFAOYSA-N amobarbital Chemical compound CC(C)CCC1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O VIROVYVQCGLCII-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 2
- STDBAQMTJLUMFW-UHFFFAOYSA-N butobarbital Chemical compound CCCCC1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O STDBAQMTJLUMFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000003548 sec-pentyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 229960003279 thiopental Drugs 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- 229960001301 amobarbital Drugs 0.000 description 1
- 229960002319 barbital Drugs 0.000 description 1
- 229960003874 butobarbital Drugs 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- WTYGAUXICFETTC-UHFFFAOYSA-N cyclobarbital Chemical compound C=1CCCCC=1C1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O WTYGAUXICFETTC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004138 cyclobarbital Drugs 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- QYSGYZVSCZSLHT-UHFFFAOYSA-N octafluoropropane Chemical compound FC(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)F QYSGYZVSCZSLHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
Vynález se týká způsobu získávání specifických protilátek k jednotlivým barbiturátům.
Imunospecifické metody stanovení barbiturátů sé dosud prováděly s použitím protilátek proti determinantním skupinám barbiturátů vázaných na nosič s pomocí substituentů na C5. Tento způsob vazby molekuly barbiturátů způsobuje, že protilátky špatně rozlišují barbituráty s různými substituenty na Cs a také špatně rozlišují barbituráty a jejich neúčinné metabolity vznikající z 90 % přeměnou substituentů na C5.
Předkládaný vynález řeší způsob získávání specifických protilátek k jednotlivým barbiturátům. Podstata vynálezu spočívá v tom, že se barbiturát připojí na bílkovinový nosič můstkem, vázaným na C2 uhlíku substituované barbiturové kyseliny, načež se vzniklým antigenem imunizuje.
Získávání specifických protilátek k jednotlivým barbiturátům spočívá v navázání molekuly na nosič v poloze otočené oproti dosud používaným determinantním skupinám o 180° a příslušných haptenů, které umožňují specifické selektivní stanovení různých barbiturátů v biologickém materiálu imunospedfickými metodami.
Vynález umožňuje navázání molekuly barbiturové kyseliny v poloze obrácené vůči nosiči proti dosud užívaným způsobům o 180° to je za uhlík C2 ležící naproti uhlíku Cs. Vznikají tak imunogeny, jejichž determinantní skupiny stimulují tvorbu protilátek, které rozlišují substituenty na C5. Takové protilátky umožňují specifické stanovení jednotlivých barbiturátů vedle jiných barbiturátů i vedle jejich metabolitů.
Podobně přes reaktivní skupiny na druhém uhlíku lze navázat barbituráty na enzymy pro enzymoimunoassae nebo připravit sloučeniny barbiturátů se skupinami na druhém uhlíku schopnými jodace.
Vynález je blíže objasněn v následujících příkladech konkrétního provedení.
Příklad 1
Navázáním 2/karboxymethylimino/-5-ethyl-5/ 1-methylbutyl/barbiturové kyseliny na hovězí albumin v množství 5 molů na mol bílkoviny metodou aktivního esteru byl získán imunogen, který podán 8 králíkům vyvolal za 4 týdny tvorbu specifických protilátek proti determinantní skupině.
Protilátky u 3 z 8 králíků vázaly 125J značenou 2/2-imidazolylethylimino/-5-ethyl-5/l-methylbuthyl/barbiturovou kyselinu ještě při zředění sera 1 : 500. Pentobarbital 5-ethyl-5/l-methylbutyl/ barbiturová kyselina, která má stejné substituenty na C5 jako barbiturát vázaný v determinantní skupině, vytěsňuje hapten z 50 % v koncentraci 208 088 i 10_6mol/l. Podobně i když v menším vytěsňoval i jodovaný hapten i thiopental, který je 2-thio derivát předchozího barbiturátu a má tedy stejné C5 substituenty. Ostatní barbituráty ve srovnání s pentobarbitalem vytěsňovaly hapten o koncen! traci 5.10-6 se stejným účinkem vesměs až při koncentracích více než 20 X vyšších. Výjimku tvořil
5-butyl-5-ethyl barbiturová kyselina, jejíž účinnost byla jen 10 x nižší než u pentobarbitalu.
; Byly testovány:
5,5-diethylbarbiturová kyselina ,H
0.
ch7ch / ?cz
CH-CH„-CH„-CH 3 2 z |
CH
Z \c \ z
C-N
Z \
5-cyklohexenyl-5-ethylbarbiturová kyselina 5-ethyl-5/3-methylbutyl/barbiturová kyselina 5-ethyl-5/l-methylbutyl/barbiturová kyselina j 5-ethyl-5/l-methylbutyl/-2-thiobarbiturová j kyselina
Příklad 2
K testování vazby protilátek proti pentobarbitalu byl použit značený derivát pentobarbitalu vzorce:
=N-C-C-N-C-C-C I I I I \
Η Η Η H
N
Struktura haptenu byla prokázána jednak chromatografií produktů hydrolýzy jednak studiem spekter. Poloha 125J nebyla určena.
Vytěsňovací křivky pro pentobarbital a thiopental, které mají stejné substituenty na C5 jako determinantní skupina byly prakticky identické. Ostatní barbituráty vytěsňovaly stejně jako pentobarbital při koncentraci 5.10“6, až při více než lOnásobných koncentracích (amobarbital, barbital, cyklobarbital, butobarbital).
Vynález lze použít pro přípravu komerčních setů pro stanovení individuelních preparátů barbiturátů v biologickém materiálu vedle jiných barbiturátů a jejich metabolitů.
Claims (1)
- PŘEDMĚTZpůsob získávání specifických protilátek k jednotlivým barbiturátům, vyznačený tím, že sebarbiturát připojí na bílkovinový nosič můstkem, váza- ,VYNÁLEZU ným na C2 uhlíku substituované barbiturové kyseliny, načež se vzniklým antigenem imunizuje.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS781979A CS208066B1 (cs) | 1979-11-15 | 1979-11-15 | Způsob získávání specifických protilátek k jednotlivým barbiturátům |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS781979A CS208066B1 (cs) | 1979-11-15 | 1979-11-15 | Způsob získávání specifických protilátek k jednotlivým barbiturátům |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS208066B1 true CS208066B1 (cs) | 1981-08-31 |
Family
ID=5428020
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS781979A CS208066B1 (cs) | 1979-11-15 | 1979-11-15 | Způsob získávání specifických protilátek k jednotlivým barbiturátům |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS208066B1 (cs) |
-
1979
- 1979-11-15 CS CS781979A patent/CS208066B1/cs unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US3822245A (en) | Opium alkaloid specific antibodies | |
| US4399121A (en) | Iodothyronine immunogens and antibodies | |
| US4902630A (en) | Fluorescence polarization immunoassy and reagents for measurement of c-reactive protein | |
| CN101571539B (zh) | 检测头孢类药物的酶联免疫试剂盒及其应用 | |
| JPH0475465B2 (cs) | ||
| US4026879A (en) | Antigen-containing propranolol derivatives | |
| JPS6018940B2 (ja) | 免疫学的分析法 | |
| US4036823A (en) | Barbituric acid antigenic conjugates, their preparation, antibodies and use | |
| US3952091A (en) | Simultaneous multiple radioimmunoassay | |
| CA1096774A (en) | Radioimmunoassay for methadone | |
| CN106324240A (zh) | 检测毒死蜱的酶联免疫试剂盒及其应用 | |
| US5164504A (en) | Haptens, tracers, immunogens and antibodies for immunoassays for cotinine derivatives | |
| Rubin | The immune response against hapten‐autologous protein conjugates in the mouse. I. Specificity of antibodies produced during the primary response against dinitrophenylated mouse serum albumin | |
| US5741715A (en) | Quinidine immunoassay and reagents | |
| US3809782A (en) | Tubocurarine antigens and antibodies specific therefor | |
| CS208066B1 (cs) | Způsob získávání specifických protilátek k jednotlivým barbiturátům | |
| FR2518096A1 (fr) | Procede et reactifs de determination immunologique par polarisation de fluorescence | |
| GB1589921A (en) | Radioimmunoassay for the determination of cholecalciferol | |
| Jacobs et al. | Complement-Fixation Tests on Rabbits with Brown-Pearce Carcinoma. | |
| Tully | Erythrocyte-modifying capacity and serological reactivity of cell components of human mycoplasma (PPLO) strains | |
| CA2067124A1 (en) | Cationized carriers for immunogen production | |
| US5356820A (en) | Haptens, tracers, immunogens and antibodies for immunoassays for propoxyphene | |
| Wong et al. | Further Studies on Type-Specific Protein of Corynebacterium diphtheriae. | |
| Hendler et al. | Reported gamma glutamyl activation of peptide-bond synthesis | |
| EP0370960A1 (en) | Neopterin as a marker in a diagnostic screening test kit to detect retrovirus diseases |