CS206004B1 - Stromatolysující činidlo k elektronickému počítání leukocytů - Google Patents
Stromatolysující činidlo k elektronickému počítání leukocytů Download PDFInfo
- Publication number
- CS206004B1 CS206004B1 CS390879A CS390879A CS206004B1 CS 206004 B1 CS206004 B1 CS 206004B1 CS 390879 A CS390879 A CS 390879A CS 390879 A CS390879 A CS 390879A CS 206004 B1 CS206004 B1 CS 206004B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- agent
- leucocites
- stromatolysing
- electronic counting
- leukocytes
- Prior art date
Links
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 claims description 13
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 4
- FXQJFHYFOGHZTB-UHFFFAOYSA-M carbethopendecinium bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCCC([N+](C)(C)C)C(=O)OCC FXQJFHYFOGHZTB-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 13
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 11
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 9
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical group Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 125000001453 quaternary ammonium group Chemical group 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 description 2
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 2
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 2
- ZLNOZGKIDHOPCS-UHFFFAOYSA-N (1-ethoxy-1-oxohexadecan-2-yl)-trimethylazanium Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCC([N+](C)(C)C)C(=O)OCC ZLNOZGKIDHOPCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M Bromide Chemical compound [Br-] CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M Cetrimonium bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)C LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010018910 Haemolysis Diseases 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000001206 effect on leukocytes Effects 0.000 description 1
- VUFOSBDICLTFMS-UHFFFAOYSA-M ethyl-hexadecyl-dimethylazanium;bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CC VUFOSBDICLTFMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 230000008588 hemolysis Effects 0.000 description 1
- 230000002934 lysing effect Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 238000000034 method Methods 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 239000002023 wood Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Description
Vynález se týká činidla, které destruuje erytrocyty při elektronickém počítání leukocytů. Při elektronickém stanovení počtu obecně jakýchkoliv částic prochází otvorem o známé velikosti současně elektrický proud a suspenze počítaných částic. Při průchodu částice otvorem klesá elektrická vodivost díky zmenšení účinné plochy, kterou může procházet proud. Vzniká úbytek napětí, který přístroj registruje jako impuls. Při počítání leukocytů ovšem měrným otvorem procházejí i erytrocyty, jejichž počet v krvi výrazně převažuje, á ty při stanovení leukocytů z celé krve interferují. Proto je zapotřebí je destruovat.
K destrukci erytrocytů při elektronickém počítání leukocytů je principiálně vhodný každý prostředek, který v minimálním časovém intervalu zničí dokonale všechny erytrocyty, aniž by jakkoliv poškodil ve vzorku přítomné leukocyty. Nejjednodušším prostředkem popsaným v literatuře je kyselina chlorovodíková [R. Otis and R. Tennant: Am. J. Clín. Pathol. 35, 383 (1961).] Tento postup se však vzhledem k nedokonalé lýze erytrocytů a tím zachování zbytků stromat ve vzorku neosvědčil. Nejdéle používaným prostředkem k tomuto účelu je roztok saponinu [W. Richar and E. Breakell: Amer. J. Clin. Pathol. 31, 384 (1959)], který je účinnější než kyselina chlorovodíková, avšak vzhledem ke stále ještě nedokonalé stromatolýze, omezené trvanlivosti (cca 1 týden za chladu) a relativně dlouhé době nutné ke stromatolýze není roztok saponinu optimálním činidlem k hemolýze erytrocytů před počítáním leukocytů. 'V současné době nejmodernější činidla používají jako účinnou látku kvarterní amonné báze: hexadecyltrimethylamoniumbromid a hexadecylethyldimethylamoniumbromid [W. Elliot and J. Wood: Amer. J. Clin. Pathol. 51, 298 (1969)]. Rada firem vyrábí svá vlastní činidla, jejichž složení tají, a proto nelze říci, která látka je v jejich případě aktivní lýzující složkou, lze však předpokládat, že Se jedná o jednu z výše uvedených kvarterních amonných bází. Jejich přednostmi jsou: a) prakticky neomezená životnost činidla, b) dokonalá lýze erytrocytů, c) široký časový interval, ve kterém lze leukocyty počítat: leukocyty lze počítat ihned po přidání činidla, přičemž počet leukocytů se nemění po dobu alespoň 30 minut. Pro úplnost je třeba uvést činidlo složené z Tritonu X—100 a kyseliny octové (V. Bičík: osobní sdělení), které se svými vlastnostmi blíží činidlům připraveným z kvarterních amonných bází, avšak při jeho užití je ucpávána apertura měřicího přístroje patrně řetězci bílkovin, takže toto činidlo je oproti kvarterním amonným bázím krokem zpět. ,
Podstatou vynálezu je použití 1-ethoxykarbonylpentadecyltrimethylamoniumbromidu jako účinné složky v činidle připraveném ke stromatolýze červených krvinek při elektronickém počítání krvinek bílých. Tato látka svými povrchově aktiv206004 nimi účinky dokonale rozštěpí erytrocyty v čase řádově stanoveném na sekundy, přičemž její účinek na leukocyty se začne projevovat až po 35 minutách, takže leukocyty lze přesně a spolehlivě elektronicky počítat v intervalu 0 až 30 mi.nut od přidání činidla. Vysvětlit podstatu jevu, především proč jedno činidlo je lepší, než druhé, není, vzhledem k tomu, že se jedná o biologický systém, jednoduché. Štěpení erytrocytů selektivně povrchově aktivními látkami je dáno rozdílnou rezistencí morfólogické membrány erytrocytů a leukocytů, přičemž selektivitu lze ovlivnit změnou pH prostředí.
Použitím 1 —ethoxykarbonylpentadecyltrimethylamoniumbromidu jako účinné složky ve stromatolýzujícím činidle je možné vzhledem k vyššímu. účinku snížit používaný objem činidla, aniž by se tím nepříznivě ovlivnila některá-z výše uvedených eharákťeřistik. Činidlo lze za pomoci 1-ethoxykarbonylpentadecyltrimethylamonium. bromidu připravit jak pro manuální, tak i pro automatizovaný provoz. Pro manuální provoz se připraví činidlo následovně:
Příklad provedení <
10,0 g l-ethbxykarbonylpentadecyltrimethylamoniumbromid se rozpustí v 0,1 M kyselině chlorovodíkové, kterou se doplní objem činidla na 100,0 ml. Složení činidla pro automatický provoz nelze takto jednoduše uvést, protože různé přístroje různých firem užívají různé poměry objemů roztoků, á proto se bude složení činidla pro jednotlivé přístroje lišit.
Claims (1)
- Použití 1-ethoxykarbonylpentadecyltrimethylamoniumbromidu jako účinné složky ve stromaYN Á LEZ U s .· tolýzujíchn činidle pro elektronické počítání leukocytů.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS390879A CS206004B1 (cs) | 1979-06-07 | 1979-06-07 | Stromatolysující činidlo k elektronickému počítání leukocytů |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS390879A CS206004B1 (cs) | 1979-06-07 | 1979-06-07 | Stromatolysující činidlo k elektronickému počítání leukocytů |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS206004B1 true CS206004B1 (cs) | 1981-06-30 |
Family
ID=5380516
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS390879A CS206004B1 (cs) | 1979-06-07 | 1979-06-07 | Stromatolysující činidlo k elektronickému počítání leukocytů |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS206004B1 (cs) |
-
1979
- 1979-06-07 CS CS390879A patent/CS206004B1/cs unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0424871B1 (en) | Leukocytes and hemiglobin in blood | |
| US5686308A (en) | Reagent and method for differential determination of leukocytes in blood | |
| Corash et al. | Heterogeneity of human whole blood platelet subpopulations. I. Relationship between buoyant density, cell volume, and ultrastructure | |
| US6221668B1 (en) | Hematology control and system for multi-parameter hematology measurements | |
| ES2284160T3 (es) | Sistema reactivo multiuso capaz de lisar rapidamente muestras de sangre completa. | |
| US5786224A (en) | Reagent and method for differential determination of leukocytes in blood | |
| US5227304A (en) | Method for counting whole blood diluent and detergent reagent system | |
| JP3391451B2 (ja) | 白血球類縁体用の血液対照組成物，およびその調製方法および使用方法 | |
| AU592754B2 (en) | Hematology control compositions for three populations of leukocytes; and methods for their preparation and use in whole blood control systems | |
| EP0874988B1 (en) | Reagent and method for differential determination of leukocytes in blood | |
| US6114130A (en) | Reagent for measurement of the haemoglobin and determination of the leukocytes in a blood sample | |
| HK10586A (en) | Differential determination of lymphoid-myeloid population of leukocytes and multi-purpose blood diluent and lysing agent therefor | |
| EP0872734B1 (en) | Reagent for measurement of leukocytes and hemoglobin concentration in blood | |
| US4962038A (en) | Multi-purpose blood diluent and lysing agent for differential determination of lymphoid-myeloid population of leukocytes | |
| US5843608A (en) | Reagent and method for differential determination of leukocytes in blood | |
| JPH07181177A (ja) | 白血球分析用試薬 | |
| EP0305491A1 (en) | LEUKOCYTE ISOLATION AND IDENTIFICATION SYSTEM. | |
| NO904963D0 (no) | Fremgangsmaate og reagens for cytometrisk bestemmelse av leukocytter. | |
| CN1811417B (zh) | 用于将动物血中的白细胞分类的方法及试剂 | |
| US5196346A (en) | Reagent and method of using same for automatically counting basophilic leukocytes in the blood in resistivity variation measuring apparatus | |
| CS206004B1 (cs) | Stromatolysující činidlo k elektronickému počítání leukocytů | |
| Maxie et al. | A comparative study of the diseases in cattle caused by Theileria parva or T. Lawrencei: II. Hematology, clinical chemistry, coagulation studies and complement | |
| Fisher et al. | Human whole-blood granulocyte aggregation in vitro | |
| Singh et al. | Stability of clinical chemistry and hematological analytes in preserved plasma and blood obtained from Wistar rats | |
| Schultz | A comparison of commercial kit methods for assay of vitamin B12 in ruminant blood |