CS203711B1 - Způsob výroby 17^-hydroxy-4-androsten-3-onu, 17a-methyl-17/S- -bydTOxy-4-aiidrosten-3-onu a 17S-hydroxy-4-estreii-3 oiiu značených radioizotopy jodu - Google Patents

Způsob výroby 17^-hydroxy-4-androsten-3-onu, 17a-methyl-17/S- -bydTOxy-4-aiidrosten-3-onu a 17S-hydroxy-4-estreii-3 oiiu značených radioizotopy jodu Download PDF

Info

Publication number
CS203711B1
CS203711B1 CS96979A CS96979A CS203711B1 CS 203711 B1 CS203711 B1 CS 203711B1 CS 96979 A CS96979 A CS 96979A CS 96979 A CS96979 A CS 96979A CS 203711 B1 CS203711 B1 CS 203711B1
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
hydroxy
androsten
steroid
beta
radioactive
Prior art date
Application number
CS96979A
Other languages
English (en)
Inventor
Ivan Kozak
Pavel Dvorak
Richard Hampl
Original Assignee
Ivan Kozak
Pavel Dvorak
Richard Hampl
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ivan Kozak, Pavel Dvorak, Richard Hampl filed Critical Ivan Kozak
Priority to CS96979A priority Critical patent/CS203711B1/cs
Publication of CS203711B1 publication Critical patent/CS203711B1/cs

Links

Landscapes

  • Steroid Compounds (AREA)

Description

Vynález se týká způsobu výroby radioaktivních jododerivátů 17/2-hydroxy-4-androsten-3-onu (testosteronu), 17a-methyl-17/?-hydroxy-4-androsten-3-onu (methyltestosteronu) a 17/?-hydroxy-4-estren-3-onu (nortestosteronu) s atomem jodu vázaným přímo na steroidní skelet.
Steroidní sloučeniny, obsahující radioaktivní atom buď sloučenině vlastní jako 3H, nebo jiný vhodný isotop jiného prvku (nejčastěji 125I) vázaný přes konjugát steroidu s histaminem nebo tyraminem se jako radioligandy široce používají v radioimunoanalýze (RIA) steroidů. Jiné metody, stanovení hladin steroidů v biologických tekutinách jsou pro jejich nízké koncentrace technicky velmi obtížné. Tritiované steroidy jsou vhodné pro RIA svou. imunoreaktivitou a stabilitou, hlavním jejich nedostatkem je obtížná detekce měkkého β záření tritia, vyžadující, složité, drahé a v ZST nevyráběné scintilační spektometry.
Oproti tomu detekce γ izotopy značených steroidů je podstatně jednodušší á levnější. Jododeriváty steroidů, značené 125I se používají pro RIA stanovení zatím méně často. Atom jodu je v těchto sloučeninách vázán na histaminový nebo tyraminový zbytek, který je připojen ke steroidní molekule. U těchto konjugátů může docházet ze sférických důvodů ke snížení imunoreaktívity oproti původnímu steroidu a rovněž ke zvýšení nespecifické vazby. Syntéza těchto látek je dosti obtížná a vyžaduje komplikovaný separační postup. Stabilita jodovaných konjugátů je nižší než u tritiovaných sloučenin jak v pevném stavu, tak i v roztoku; zvláště pak jsou nestabilní při podání in vivo do organismu. Tato nestabilita může být zvláště nevýhodná v budoucnu, protože v nukleární medicíně se uvažuje o možnostech pozitivní scintigrafie hormonálně dependentních orgánů pomocí specifických radiofarmak značených γ izotopy.
Nedávno byly připraveny jododeriváty některých steroidů, v nichž je atom jodu vázán přímo na steroidní skelet. Této vazby je dosahováno krátkodobým zahřátím směsi steroidu s radioaktivním jodidem'sodným na teplotu 173 až 179 °C (Thakur M. L., Vaters S. L: Evaluatíon of a methodfor the preparation of · high specific activity radioiodinated oestradiol, Int. J. Appl, Radiat. Isotopes 27:585—588, 1976), Autoři však neprovedli podrobnější studium reakčních produktů ani jejich vlastností, včetně možnosti využití pro RIA. V pracech Hampl R., Dvořák P., Lukešová Š., Kozák I., Chrpová M., Stárka L.: The use of Iodina203711 ted steroid as radloligand for testosterone radioimmunoassay, (J. Steroid. Biochem. .9: 771—773, 1978) a Dvořák P., Hampl R., Lukešová Š„ Kozák I., Chrpová M., Stárka L.: Radioimmunoassay of testosteroňe-comparsion of 3H and 125I labeling (Radiochem. Radioanal. Letters 34: 295—300, 1978) autoři tohoto vynálezu srovnali možnost použití 125I a 3H radioligandů k RIA testosteronu.
Většina uvedených nedostatků je odstraněna způsobem výroby 17/3-hydroxy-4-androsten-3-onu, 17i«-methyl-17^-hydroxy-4-androsten-3-onu a 17l3-hydroxy-4-estren-3-onu ze skupiny A4-3-oxo-Cis-steroidů, značených na skeletu radiojodem podle vynálezu, jehož podstatou je úprava beznosičového radioaktivního jodidu sodného tím, že se jeho komerčně dodávaný roztok odpaří do sucha a odparek se extrahuje polárním organickým rozpouštědlem (aceton, methanol, methylethylketon, diethylether). Tím dojde k oddělení příměsí, obsažených jako stabilisátory. v roztoku radiojodidu a ztěžujících provedení reakce. Extrakt se přidá ke steroidu určenému ke značení, přičemž molární poměr steroidu k jodidu sodnému činí 100 : 1 až 1 000 000 :1 a výsledný roztok se odpaří do sucha. Odparek se pak zahřívá v lázni při teplotě ležící mezí teplotou tání příslušného steroidu až 190 °C po dobu 0,5 až 5 minut.
Reakční směs se opakovaně chromatografuje na tenké vrstvě silikagelu s UV 254 absorpčním indikátorem (Silufol UV254), umožňujícím pozorovat A4-3-oxo-Ci9Steroidy v UV světle. Vhodnými soustavami pro chromatografii jsou cyklohexan-ethylacetát 1:1 a benzen-methanol 9:1, v nichž relativní Rf jodovaného imunoreaktivního produktu vzhledem k výchozímu A4-3-oxo-Cigsteroidu činí 0,60 až 0,85. Tento radioaktivní produkt se po eluci použije jako radloligand pro RIA toho steroidu, který byl použit ke značení.
Použitím extrakcí upraveného radioativního jodidu sodného je dosahováno 2 až 5krát vyšších výtěžků .než s neupraveným jodidem a je možné použít radioaktivní jodid sodný různé specifické aktivity a od různých výrobců. Syntéza jododerivátů steroidů je jednodušší než syntéza konjugátů a rovněž i jejich separace je z důvodů jejich vysoké chemické stability jednodušší než u histaminyl- a tyraminylderivátů. Stabilita roztoků steroidů jodovaných přímo na jádře je vyšší než u konjugátů, neboť nedochází k hydrolýze konjugovaných skupin ve vodných roztocích. Výhody jednodušší detekce χ zůstávají rovněž zachovány.
Příklady provedení
Příklad 1
Opravy radioaktivního jodidu sodného
a] Ke komerčně dodávanému Na125I v 0,1 N NaoH o celkové aktivitě 37 MBq se přidá 0,2 ml nasyceného vodného roztoku hydrogenfosforečnanu draselného a směs se odpaří proudem dusíku při teplotě 90 °C. Zbytky vody se odstraní dvojnásobným odpařením s 2 ml 'Směsi methanol-benzen 1:1. Radioaktivní jodid sodný se extrahuje 2 minutovým třepáním s 2 ml acetonu. Acetonový extrakt jodidu se použije pro syntézu.
b) Komerčně dodávaný roztok Na125I ve fysiologickém roztoku o celkové aktivitě 185 MBq se při teplotě 60 až 80 °C odpaří za sníženého tlaku dosucha. Radioaktivní jodid sodný se extrahuje 2 ml methanolu za třepání po dobu 2 minut, Metanolový extrakt jodidu se použije pro syntézu. Příklad 2
Syntézy a vyisolování imunoreaktivních jodovaných značených steroidů
a) K extraktu upraveného radioaktivního jodidu sodného (viz. příklad 1 a) nebo 1 b) se. přidá 0,2 ml (1 mg) acetonového roztoku testosteronu a po promíchání se rozpouštědlo odpaří v proudu dusíku. Zkumavka s odparkem se zahřeje na olejové lázni po dobu 90 s při teplotě 172 až 175 °C. Po ochlazení se tavenina rozpustí v 0,2 ml acetonu a chromatograíuje ná Silufolu UV 254 v soustavě benzen-methanol 9:1. Po vyhodnocení rozdělení radioaktivity se vyeluuje acetonem (5 ml) frakce o R£ — 0,24 až 0,38 (R£ testosteronu = 0,40 až 0,50). Kontrola čistoty vzniklého jododerivátů se provede radioimunologickým srovnáním s 3H testosteronem o specifické aktivitě 740 GBq/mmol. V případě, že produkt vyhovuje pro RIA méně než tritiovaný steroid, chromatografie se opakuje. Takto připravený produkt se použije jako radioligand k RIA testosteronu.
b) K extraktu upraveného radioaktivního jodidu sodného (viz. příklad 1 a) nebo 1 b) se přidá 0,1 ml (0,1 mg) acetonového roztoku methyltestosteronu a po promíchání se rozpouštědlo odpaří v proudu dusíku. Zkumavka s odparkem se zahřeje na olejové lázni po dobu 60 s při teplotě 180 až 182 °C. Po ochlazení se tavenina rozpustí v 0,2 ml acetonu a chromatografuje na Silufolu UV 254 v soustavě benzen-methanol-aceton 9:1:1. Po vyhodnocení rozdělení radioaktivity se vyeluuje acetonem (5 ml) frakce s R{ = 0,23 až 0,35 (Rf methyltestosteronu = 0,51 až 0,60). Kontrola čistoty se provede srovnáním s 3H methyltestosteronem. obdohně jako v příkladu 2 a).
c) K extraktu upraveného radioaktivního jodidu sodného (viz. příklad 1 a) nebo 1 b) se přidá 0,1 ml (0,2 mg) acetonového roztoku nortestosteronu a po promíchání a odpaření rozpouštědla se zkumavka zahře203711 je na olejové lázni po dobu 180 s při teplotě 175 až 180 °C. Tavenina se rozpustí v 0,2 ml acetonu a chromtografuje na Silufolu UV 254 v soustavě cyklohexan-ethylacetát 1:1. Po vyhodnocení rozdělení radioaktivity se vyeluuje acetonem {5 ml) frakce s Rt = 0,18 až 0,33 (Rf nortestosteronu ~ 0,38 až 0,50). Kontrola čistoty se provede srovnáním s 3H nortestosteronem obdobně jako v příkladu 1 b).
Radioaktivní jododeriváty Δ4-3-οχο-Οΐ9steroidních hormonů a syntetických steroidních léčiv je možné využít pro RIA těchto látek v humání i veterinární medicíně, zemědělství a pro účely dopingové kontroly. Využití těchto látek lze očekávat v receptorové analýze in vitro a pro pozitivní scintigrafii hormonálně dependentních orgánů in vivo v nukleární medicíně.

Claims (3)

  1. pRedmě
    1. Způsob výroby 17/S-hydroxy-4-androsten-3-onu, 17a-methyl-17/í-hydroxy-4-androSten-3-onu a 17(?-hydroxy-4-estren-3-onu značených radioizotopy jodu, vyznačující se tím, že se vodný roztok beznosičového radioaktivního jodidu sodného odpaří dosucha, odparek se extrahuje polárním organickým rozpouštědlem a výsledný extrakt se přidá k výše uvedenému steroidu určenému ke značení, přičemž molární poměr steroidu k jodidu' sodnému činí 100:1 až 1000 000 :1, získaný roztok se odpaří dosucha a odparek se zahřívá při teplotě v rozmezí teploty tání příslušného steroidu až 190 °C, načež se reakční směs chromavynAeezutografuje pro oddělení žádoucího imunoreaktivního radioaktivního produktu od příměsí.
  2. 2. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že pro extrakci beznosičového radioaktivního jodidu sodného se jako polárního rozpouštědla používá methylethylketonu, methanolu, acetonu a. diethyletheru.
  3. 3. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že pro oddělení žádoucího radioaktivního produtu od příměsí se používá opakovaná chromatografie na tenké vrstvě silikagelu v soustavách cyklohexan-ethylacetát 1: fa benzen-methanol 9 :1.
CS96979A 1979-02-13 1979-02-13 Způsob výroby 17^-hydroxy-4-androsten-3-onu, 17a-methyl-17/S- -bydTOxy-4-aiidrosten-3-onu a 17S-hydroxy-4-estreii-3 oiiu značených radioizotopy jodu CS203711B1 (cs)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS96979A CS203711B1 (cs) 1979-02-13 1979-02-13 Způsob výroby 17^-hydroxy-4-androsten-3-onu, 17a-methyl-17/S- -bydTOxy-4-aiidrosten-3-onu a 17S-hydroxy-4-estreii-3 oiiu značených radioizotopy jodu

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS96979A CS203711B1 (cs) 1979-02-13 1979-02-13 Způsob výroby 17^-hydroxy-4-androsten-3-onu, 17a-methyl-17/S- -bydTOxy-4-aiidrosten-3-onu a 17S-hydroxy-4-estreii-3 oiiu značených radioizotopy jodu

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CS203711B1 true CS203711B1 (cs) 1981-03-31

Family

ID=5342908

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS96979A CS203711B1 (cs) 1979-02-13 1979-02-13 Způsob výroby 17^-hydroxy-4-androsten-3-onu, 17a-methyl-17/S- -bydTOxy-4-aiidrosten-3-onu a 17S-hydroxy-4-estreii-3 oiiu značených radioizotopy jodu

Country Status (1)

Country Link
CS (1) CS203711B1 (cs)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Boyd et al. Se-75-labeled bile acid analogs, new radiopharmaceuticals for investigating the enterohepatic circulation
Lindner et al. Radiosynthesis of [18F] SiFA lin-TATE for clinical neuroendocrine tumor positron emission tomography
Uhl et al. Radionuclides in drug development
Kulmala et al. Specific in vivo binding of 77Br-p-bromospiroperidol in rat brain: A potential tool for gamma ray imaging
Gildersleeve et al. Synthesis of a high specific activity 125I-labeled analog of PK 11195, potential agent for SPECT imaging of the peripheral benzodiazepine binding site
EP3452436A2 (en) In-kit preparation of gallium-68 labelled radiopharmaceuticals
Baranowska‐Kortylewicz et al. Radiolabeling kit/generator for 5‐radiohalogenated uridines
Rasheed et al. 177Lu‐5‐Fluorouracil a potential theranostic radiopharmaceutical: radiosynthesis, quality control, biodistribution, and scintigraphy
CS203711B1 (cs) Způsob výroby 17^-hydroxy-4-androsten-3-onu, 17a-methyl-17/S- -bydTOxy-4-aiidrosten-3-onu a 17S-hydroxy-4-estreii-3 oiiu značených radioizotopy jodu
Ahmed et al. Automated synthesis of 11β-methoxy-4, 16α-[16α-18F] difluoroestradiol (4F-M [18F] FES) for estrogen receptor imaging by positron emission tomography
US5019323A (en) Method of producing Iodine-124 and meta-iodobenzylguanidine containing Iodine-124
Bilton et al. Preparation and evaluation of 99mTc-labeled tridentate chelates for pre-targeting using bioorthogonal chemistry
US3743713A (en) Preparation of radioactive mono and di-iodosulfobromophthalein
Jeon et al. An optimized protocol for the efficient radiolabeling of gold nanoparticles by using a 125I-labeled azide prosthetic group
Scharl et al. Rapid liver metabolism, urinary and biliary excretion, and enterohepatic circulation of 16alpha-radioiodo-17beta-estradiol
CN115808338B (zh) 一种放射性同位素标记纳米量子点的方法
Saji et al. Preparation of 123I-labeled 2′-iodospiperone and imaging of D2 dopamine receptors in the human brain using SPECT
Epperly et al. Radiotoxicity of 17α-[125I] iodovinyl-11β-methoxyestradiol in MCF-7 human breast cancer cells
Foged et al. 11C-and 76Br-labelled NNC 22-0010, selective dopamine D1 receptor radioligands for PET
Huang et al. Halogen Labeled Compounds (F, Br, At, Cl)
Wiebe et al. Iodoazomycin Riboside [l-(5′-iodo-5′-deoxyribofuranosyl)-2-nitroimidazolel, a Hypoxic Cell Marker In Vivo Evaluation in Experimental Tumors
Neto et al. Evaluation of novel radioiodinated C7-substituted Δ6, 7-estradiol derivatives for molecular recognition of ER-positive breast tumours
Basmadjian et al. Structure biodistribution relationship of radioiodinated tropeines: search for a molecular probe for the characterization of the cocaine receptor
Zivanovic et al. The stability and distribution of Tc-HIDA in vivo and in vitro
Friedel et al. Radiosynthesis and Preclinical Evaluation of 18F-Labeled Estradiol Derivatives with Different Lipophilicity for PET Imaging of Breast Cancer