CS200300B1 - Způsob přípravy suspenze viru spalniček k výrob diagnostických preparátů - Google Patents

Způsob přípravy suspenze viru spalniček k výrob diagnostických preparátů Download PDF

Info

Publication number
CS200300B1
CS200300B1 CS733274A CS733274A CS200300B1 CS 200300 B1 CS200300 B1 CS 200300B1 CS 733274 A CS733274 A CS 733274A CS 733274 A CS733274 A CS 733274A CS 200300 B1 CS200300 B1 CS 200300B1
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
virus
production
medium
measles
diagnostic
Prior art date
Application number
CS733274A
Other languages
English (en)
Inventor
Alexej Izbicky
Original Assignee
Alexej Izbicky
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Alexej Izbicky filed Critical Alexej Izbicky
Priority to CS733274A priority Critical patent/CS200300B1/cs
Publication of CS200300B1 publication Critical patent/CS200300B1/cs

Links

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Description

Vynález se týká způsobu přípravy suspenze viru spalniček k výrob# diagnostických preparátů v bunřčných nebo tkáňových kulturách.
Podle dosud známých způsobů přípravy suspenze viru spalní ček v buněčných kulturách se po aplikaci Inokula produkčního virového kmene používá kultivačního Media břžného typu.tj. bez přlMřsi glukózy a pyruvátu.do kterého se pozdřji vyplavuje virus,produkovaný buňkami.Nevýhodou dosavadních způsobů je,že se nedosahuje optimální produkce viru a dále, že Medium je Metabolizuj1c1mi buňkaMi pomřrn# rychle vyčerpáno.Buňky degeneruj 1,jej 1ch funkční stav se zhoršuje.Aby se tomu zabránilo,je nutné kultivační medium včas nahradit médiem čerstvým.Tim se ovšem přeruší akumulace viru,produkovaného buňkami v médiu,takže lze dosáhnout jen relativně nízké koncentrace virové suspenze.Výmřny media mimo to zvyšuji pracnost postupu 1 eventuální riziko kontaminace kultury.
Účelem vynálezu je odstranit uvedené nedostatky.
Vypález s1 klade za úkol vytvořit takový způsob,u kterého by se dosáhlo zlepšených podmínek pro pomnožováni viru spalniček a současn# 1 možnosti prodloužené akumulace reprodukovaného viru v médiu.
Vytčený úkol se řeší způsobem podle vynálezu,jehož podstata spočívá v tom,že se pomnožováni virového Inokula provádí v bunřčné kultuře s médiem,obsahujicim galaktózu / '» v množství 0,5 až 1,5 g ns 1 litr a pyrohroznan sodný v množství 0,25 až 0,75 g na jeden ί
200 300 litr médi».Médi» tohoto typu bylo užito dosud při kultivaci různých typů buněk/Slonim D., J.B1ol.Stnd.,2,5158,1974; Baugh C.L. et alt,Life Science,6,371-380,1967; Schmidt N.J. v knize Laboratorní vySétřovaci metody virových a rickettsiálních nákaz,Lenette E.H.
•t al.ed.,Prahla 1974/ nebo při pěstováni některých respiračnich virů /Schmidt N.J. v knize Laboratorní vySétřovaci metody virových a rickettsiálních nákaz,Lenette E.H. et al. ed.,Praha 1974/; aplikace při přípravě spalníčkového viru dosud popsána nebyla.
Hlavni výhody způsobu podle vynálezu spočívají v tom,že lze dosáhnout intensivnějšího pomnožování spalníčkového viru a dále,že je možné podstatně prodloužit období akumulace reprodukovaného viru v kultivačním médiu.Užitím způsobu podle vynálezu lze dosáhnout vySSIho celkového výtěžku viru z daných buněčných kultur ve srovnáni se způsobem dosud užívaným.Diky úsporám mateřiálu,respektive nižS1 pracnosti a nižSImu riziku eventuální kontaminace kultur se snižuji náklady pří přípravě suspenze spalníčkového viru pro výrobu diagnostických produktů.
Podstatou vynálezu je tedy aplikace média s galaktózou a pyrohroznanem sodným na buněčné kuItury,1nf1kované virem spalniček s dlem přípravy virové suspenze pro výrobu diagnostických preparátů.
PŘÍKLAD
Na kultury buněk heteroploidni linie Věro /odvozena z Ledvin opice Cercopithecus aethiops/,narostlé v lahvích podle Rouxe/obsah 1200 ml,kuItivačnl plocha stěny 220 cm ?/ do souvislé vrstvy,monolayeru,se ve 100 ml média s galaktózou a pyrohroznanem sodným aplikuje infekční Inokulum neoslabeného viru spalniček laboratorního kmene Edmonston v dávce 0,2 num TKIDg0 na jednu baňku kultury.
Užité médium odpovídá složeni Eagleova minimálního esenciálního média s neesenciálnim1 aminokyselinami /Eagle H«,Science,Washington,130,432-437,1959/ v módifikaci,kdy je glukóza nahražena galaktózou v množství 1 gram na litr a pyrohroznanem sodným v množstvi 0,5 gramu na jeden litr média /Baugh C.L. et al.,L1fe Science,6,371-380,1967/. Médium obsahuje dále příměs 60 mg NsHCOg,tj.0,8 ml komerčního roztoku 7,50% NaHCOg s 0,002% fenolové červeně na 100 ml médie a obvyklou příměs entlbiot1k,100 j.penieillinu a 100 mg streptomycinu na jeden ml média.
Infikované kultury se pak po zazátkovánl inkubuji v horizontální poloze při teplotě * 37 °C.Je-l1 dlem příprava suspenze viru bez ohledu na infekční akti ví tu,prováděj i se zisky např. ve čtyřdenních Intervalech,počínaje 4.dnem po infikováni kultur,eventuálně se provede jednorázový zisk v době před kompletním rozruSenlm kultury.Je-11 dlem produkce suspenzs aktivního víru,prováděj 1 se zisky virové tekutiny častěji,např. ve dvoudenních Intervalech,počínaje 2.dnem po Infikováni.Při opakovaných ziscích se kultivační nádoba naplní novou dávkou 100 ml čerstvého média stejného složeni a inkubuje se znovu do následujícího zisku atd.,až do doby,kdy je větBIna kultury destruována cytopatiekým účinkem virové Infekce,
V konkrétním případě provedeni bylo způsobem podle vynálezu získáno při pomnožování hemaglutinačni aktivity v průběhu 16 dnů 8krát vySSIho,při pomnožování Infekční aktivity v1ru v průběhu 8 dnů 10krát vySSIho celkového výtěžku ve srovnáni se způsobem dosavadním.
200 300
Způsob podle vynálezu se může uplatnit taká nepřímo při výrobř hyperlmunnlch sér.

Claims (1)

  1. Způsob přípravy suspenze viru spalnítek k výrobř diagnostických preparátů v bunřčných nebo tkáňových kuIturách,vyznačený tím,že pomnožovánl Infekčního inokula se provádí v bunřčné kultuře s médiem,obsahuj1c1m přimřs galaktózy v množství 0,5 až 1,5 g na jeden litr média a pyrohroznanu sodného v množství 0,25 až 0,75 g na jeden litr média.
CS733274A 1974-10-25 1974-10-25 Způsob přípravy suspenze viru spalniček k výrob diagnostických preparátů CS200300B1 (cs)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS733274A CS200300B1 (cs) 1974-10-25 1974-10-25 Způsob přípravy suspenze viru spalniček k výrob diagnostických preparátů

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS733274A CS200300B1 (cs) 1974-10-25 1974-10-25 Způsob přípravy suspenze viru spalniček k výrob diagnostických preparátů

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CS200300B1 true CS200300B1 (cs) 1980-09-15

Family

ID=5422261

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS733274A CS200300B1 (cs) 1974-10-25 1974-10-25 Způsob přípravy suspenze viru spalniček k výrob diagnostických preparátů

Country Status (1)

Country Link
CS (1) CS200300B1 (cs)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Gaush et al. Replication and plaque assay of influenza virus in an established line of canine kidney cells
Leavitt et al. Tunicamycin inhibits glycosylation and multiplication of Sindbis and vesicular stomatitis viruses
Hard Some biochemical aspects of the immune macrophage
Wiktor et al. Chronic rabies virus infection of cell cultures
EP3995573A1 (en) Proteolytic targeted virus, live vaccine thereof, preparation method therefor and use thereof
Merz et al. Biochemical features of mumps virus neuraminidases and their relationship with pathogenicity
McLaren et al. THE MAMMALIAN CELL-VIRUS RELATIONSHIP: V. Susceptibility and Resistance of Cells in Vitro to Infection by Coxsackie A9 Virus
Cords et al. Replication of poliovirus RNA induced by heterologous virus
US3450598A (en) Method for cell propagation
Vonka et al. Thermoinactivation of human cytomegalovirus
CS200300B1 (cs) Způsob přípravy suspenze viru spalniček k výrob diagnostických preparátů
Kono et al. An epidemic of Getah virus infection among racehorses: properties of the virus
Lewis Jr et al. NUTRITIONAL REQUIREMENTS FOR THE PRODUCTION OF HERPES SIMPLEX VIRUS I: Influence of Glucose and Glutamine on Herpes Simplex Virus Production by HeLa Cells
Eger et al. The organization of the proteins of vesicular stomatitis virions: labeling with pyridoxal phosphate
Spendlove et al. TRICINE-buffered tissue culture media for control of mycoplasma contaminants
Hartley et al. Tissue culture cytopathic and plaque assays for mouse hepatitis viruses
Maassab The propagation of multiple viruses in chick kidney cultures
Gavrilov et al. Persistent infection of continuous line of pig kidney cells with a variant of the WSN strain of influenza A0 virus
Fiszman et al. Mode of action of acid pH values on the development of vesicular stomatitis virus
Böttiger et al. Inactivation of poliomyelitis virus by formaldehyde: Incubation time in tissue culture of formalin treated virus
Noronha-Blob et al. Viral interference-mediated selection of a plaque-type variant of influenza virus
Della-Porta et al. An experimental inactivated virus vaccine against bovine ephemeral fever 1. Studies of the virus
CA2687122C (en) Two-step temperature profile for the propagation of viruses
Mallucci Mouse hepatitis virus and interferon production in normal and regenerating liver
Garnett The effect of arginine deprivation on the cytopathogenic effect and replication of human cytomegalovirus