CN211814441U - 一种肝细胞体外消化分离设备 - Google Patents

Abstract

本实用新型公开了一种肝细胞体外消化分离设备，属于肝细胞分离技术领域，它包括消化分离装置、收集管、液体回路系统和旋转加热架，消化分离装置与收集管连通设置，收集管设置在旋转加热架上，液体回路系统与消化分离装置通过管道连通，管道的中段位置设置有蠕动泵。实现一体式消化分离，无需分步，操作更加方便，整个肝细胞的分离消化过程均处于密闭环境，减少被污染的情况发生。

Description

一种肝细胞体外消化分离设备

技术领域

本实用新型涉及肝细胞分离技术领域，尤其涉及一种肝细胞体外消化分离设备。

背景技术

原代猪肝细胞是目前BAL治疗中应用最多的异种肝细胞源，现有成熟的肝细胞分离所采用的方法是酶消化法，该方法是将胶原酶等注入肝脏血管，作用于肝组织，使肝细胞间复杂的纤维连接溶解，从而获得完整的个体肝细胞。对于大动物，如猪，狗和人的肝脏等，由于体积大，灌流液用量大，时间长，无论原位还是体外灌流都无法采用传统的人工注射器注入式灌流，只能选用灌流泵。

但该种方法使得少数设备装置的结构分为多个模块。人员操作繁琐，同一容器中更换放置不同的液体，易导致污染，影响肝细胞的分离。

实用新型内容

本实用新型的目的就在于提供一种肝细胞体外消化分离设备，具有操作简单，且不易出现污染现象的优点。

为了实现上述目的，本实用新型采用的技术方案是：一种肝细胞体外消化分离设备，包括消化分离装置、收集管、液体回路系统和旋转加热架，所述消化分离装置与收集管连通设置，所述收集管设置在旋转加热架上，所述液体回路系统与消化分离装置通过管道连通，所述管道的中段位置设置有蠕动泵；

所述液体回路系统包括灌注液瓶、终止液瓶、消化液瓶和四通阀，所述灌注液瓶、终止液瓶、消化液瓶均分别通过管道与四通阀的三个端口连通，四通阀的另一端口与设置蠕动泵的管道连通设置。

优选的，所述消化分离装置包括管盖、管体、粗滤层和电动旋转十字刀，所述管盖盖设在管体的一端，设置蠕动泵的管道与管盖连通设置，所述管盖上还连通设置有出液管，所述电动旋转十字刀设置在管体内，所述粗滤层与管体的另一端连接，所述粗滤层远离管体的一端与收集管连接，所述收集管靠近粗滤层的一端设置有细滤网。

优选的，所述粗滤层包括连接管和设置在连接管内的粗滤网，连接管的两端分别与管体和收集管螺纹连接。

优选的，所述电动旋转十字刀远离刀刃的一端设置有安装盖，所述管体的侧壁开设有安装口，所述安装盖与安装口通过螺纹连接。

优选的，所述电动旋转十字刀设置为电动旋转十字乳胶刀。

优选的，所述收集管内且靠近端口处设置有一圈凸缘，所述细滤网放置在凸缘上。

优选的，所述出液管远离盖体的一端设置有三通阀，三通阀的剩下的其中一端口通过管道与消化液瓶连通，另一端口通过管道连通设置有废液瓶。

优选的，用于与灌注液瓶、终止液瓶、消化液瓶及废液瓶连通的管道上均固定套设有盖体，多个所述盖体均分别与灌注液瓶、终止液瓶、消化液瓶及废液瓶的瓶口螺纹连接。

优选的，所述旋转加热架包括底座、槽位和设置在底座上的支撑杆，槽位的外侧壁设置连杆，槽位通过连杆与支撑杆转动连接，所述槽位内腔的形状与收集管的形状相匹配。

优选的，还包括传热槽，所述终止液瓶和消化液瓶均放置在传热槽内。

与现有技术相比，本实用新型的优点在于：

一、实现一体式消化分离，无需分步，操作更加方便；

二、电动旋转十字乳胶刀，静置时不会损伤肝脏，转动时，力度较小，可将肝脏破裂；

三、消化分离装置可以拆卸，更易于清洗消毒或适时更换；

四、三通阀，四通阀的设置可控制分流；

五、整个肝细胞的分离消化过程均处于密闭环境，减少在实验过程中肝细胞遭到外界污染的几率。

附图说明

图1为本实施例的整体结构示意图；

图2为收集管与收集管盖的结构示意图。

图中：1、消化分离装置；11、管盖；12、管体；121、安装盖；122、安装口；123、电动旋转十字刀；13、粗滤层；131、连接管；132、粗滤网；2、收集管；21、细滤网；22、凸缘；23、收集管盖；3、液体回路系统；31、灌注液瓶；32、终止液瓶；33、消化液瓶；34、四通阀；35、三通阀；36、废液瓶；4、旋转加热架；41、底座；42、槽位；43、支撑杆；5、蠕动泵；6、盖体；7、传热槽。

具体实施方式

下面将对本实用新型作进一步说明。

实施例：

如图1所示，一种肝细胞体外消化分离设备，包括消化分离装置1、收集管2、液体回路系统3和旋转加热架4。

消化分离装置1包括管盖11、管体12、粗滤层13、电动旋转十字刀123，本实施例中选取为电动旋转十字乳胶刀。管盖11顶部内置内螺纹口两个，用于与管道螺纹连接。管体12与管盖11通过螺纹连接；管体12侧壁开设有安装口122，安装口122处设置有与安装口122螺纹连接的安装盖121，安装盖121位于管体12内的一侧与电动旋转十字乳胶刀连接，与电动旋转十字乳胶刀连接电连接的导线则穿过安装盖121与外界电源连接。粗滤层13包括连接管131和设置在连接管131内的粗滤网132，在本实施例中粗滤网132层孔径为200μm。连接管131的一端与管体12螺纹连接，另一端与收集管2螺纹连接。收集管2底部为尖底，收集管2内且靠近端口处设置有一圈凸缘22，细滤网21放置在凸缘22上。其中细滤网21孔径为100μm。本实施例中滤网均为尼龙网格，尼龙网格价格便宜，过滤效果较好。

该种结构使得消化分离装置1中的各个组件均能够单一拆卸和更换，操作人员可根据需要更换不同型号的管盖11、管体12、粗滤层13、电动旋转十字乳胶刀及收集管2进行实验。同时该种拼装结构使得肝细胞处于密封的环境中，减少污染肝细胞的情况发生。

液体回路系统3包括灌注液瓶31、终止液瓶32、消化液瓶33和四通阀34，其中灌注液瓶31、终止液瓶32和消化液瓶33，为聚丙烯材质，且容积为1L液体。灌注液瓶31、终止液瓶32、消化液瓶33均分别通过管道与四通阀34的三个端口连通，四通阀34的另一端口与设置蠕动泵5的管道连通设置。为固定各管道与灌注液瓶31、终止液瓶32、消化液瓶33间的位置关系，管道上均固定套设有盖体6，各盖体6与灌注液瓶31、终止液瓶32、消化液瓶33螺纹连接，在固定管道位置的同时对灌注液瓶31、终止液瓶32、消化液瓶33进行密封，防止污染物进入各瓶中对液体造成污染。在本实施例中为区分各个瓶体所盛液体，设计灌注液瓶31的外壁有黑色三角标志，终止液瓶32的外壁有绿色三角标志，消化液瓶33的外壁有红色三角标志；为使得对应的管道与对应的瓶体连接，设计管道的两端颜色与瓶身上标志对应的颜色相对应，此处的管道均设置为单层液管。在四通阀34上的三个端口涂覆有与之连接的管道的相同颜色，以防止操作人员接错管道。四通阀34剩下的端口处涂覆白色，且通过管道与管盖11上的其中一个螺纹口螺纹连接。在本实施例中，此处管道螺纹口端设有一螺旋管，螺旋管的尾端为一硬质管，螺旋管位于管盖11的内侧，硬质管为肝脏血管结扎连接处，管道为运输液体，并不对液体造成污染，此处在液管的中部位置设置蠕动泵5对液体进行运输。

管盖11的另一个螺纹口螺纹连接有出液管，本实施例中出液管螺纹口端设有一螺旋管，螺旋管位于管盖11的内侧，螺旋管的尾端为一硬质管。

当操作人员需使用时，拉伸螺旋管，方便将肝脏血管与硬质管连接，减少管盖11对操作人员工作造成的干扰；当未使用时，螺旋管整体向管盖11方向缩短。硬质管的设置方便操作人员将门静脉与下腔静脉捆扎在硬质管上。

出液管的另一端连通设置有三通阀35，该三通阀35上该处端口，涂覆成白色以起标识作用。三通阀35剩下的两端口中，其一涂覆红色，通过管道与消化液瓶33连通，此处管道为单层液管，且两端与消化液瓶33及三通阀35间的连接关系均为螺纹连接，以使得连接关系稳固。在本实施例中管道与消化液瓶33的连接位置位于消化液瓶33的侧壁且靠近瓶底设置，以便于后期消化液瓶33中的液体排出。

三通阀35上最后剩下的端口涂覆为黄色并与管道螺纹连接，在管道的另一侧设置承接废液的废液瓶36，为固定管道与废液瓶36间的位置，该管道上固定套设盖体6与废液瓶36的瓶口螺纹连接。

为便于操作人员拉动两液管与管盖11连接，两液管靠近管盖11的一段设置为螺旋形，使得该液管在一定程度上能够进行拉伸。

为使得终止液瓶32和消化液瓶33内的液体的温度均相仿于体温的温度，在试验时，将终止液瓶32和消化液瓶33均放置在传热槽7内，并向传热槽7内倒入水对终止液瓶32和消化液瓶33内液体进行隔水加热，以使得灌注液瓶31、终止液瓶32、消化液瓶33内液体能够均匀加热，且加热温度不高，易于控制。防止较高的温度对终止液瓶32和消化液瓶33内液体的性能造成破坏。在本实施例中传热槽7由铝合金材质制成，铝合金材质导热性能较好，当操作人员对传热槽7进行加热时，传热槽7能够快速的使得传热槽7内的液体升温，减少不必要的热能的消耗。

旋转加热架4包括底座41、槽位42和设置在底座41上的支撑杆43，槽位42的外侧壁设置连杆，槽位42通过连杆与支撑杆43转动连接。槽位42内腔的形状为中空漏斗形，容纳收集管2和部分的消化分离管。本实施例中旋转加热架4由铝合金材质制成，使得旋转加热架4整体的导热性较好。

如图2所示，在本实施例中还设置有与收集管2螺纹连接的收集管盖23，当实验完成后与收集管2连接，防止在运输过程中杂质进入收集管2内。

操作过程：

S1、传热槽7和可旋转加热架4置于热台上，热台温度为37.5℃，灌注液瓶31常温放置、终止液瓶32和消化液瓶33放置于传热槽7内，分别对应装上4℃预冷的灌注液、37.5℃预热的终止液和消化液。

S2、依次连接管路，开通四通阀34灌注液端口(黑色)，启动蠕动泵5，让灌注液充满液管，排尽空气时，关闭蠕动泵5。

S3、麻醉猪，注射肝素钠，腹腔消毒后，开腹暴露肝脏，结扎上腔静脉和肝动脉，血管钳分别夹住门静脉和下腔静脉后，离血管夹一段距离截断血管，取出肝脏，清理干净肝脏外表面的血液，将肝脏的门静脉与中段部分设置蠕动泵的液管的硬质管端口连接，并结扎密封；将肝脏的下腔静脉连接出液管的硬质管端口，并结扎密闭；取下血管夹，将肝脏整体置于消化分离装置1内；管体12与管盖11的螺纹连接，至此，管路完全密闭；将连接好的消化分离装置1与收集管2放置在可旋转加热架4上，水平放置；保持开启四通阀34灌注液端口(黑色)，开启三通阀35的黄色端口，开启蠕动泵5，按100～500ml/min灌注清洗肝脏，直至单层液管中流出的液体澄清时，暂停蠕动泵5，开启三通阀35的红色端口，开启四通阀34消化液液端口(红色)，开启蠕动泵5，按50～200ml/min循环灌注消化肝脏，直至肝脏胞膜内组织龟裂。液化时，暂停蠕动泵5，四通阀34终止液端口(绿色)，关闭三通阀35，可旋转加热架4从水平调至倾斜，肝脏拉伸螺旋管而自然滑落靠近电动旋转十字乳胶刀，开启电动旋转十字乳胶刀。破裂肝脏胞膜，肝内液化的组织流出，此时开启三通阀35的黄色端口，开启蠕动泵5，按100～200ml/min灌注入终止液，可旋转加热架4从倾斜调至垂直，终止液混杂组织液依次经粗滤层13和细滤网21，过滤流入收集管2。关闭蠕动泵5和四通阀34。收集好滤液后，取下收集管2，取下细滤网21，盖上收集管盖23，放入离心机低速离心，沉淀肝细胞，清洗两次后，进一步经细胞计数，铺板培养获得的肝细胞。

本文中应用了具体个例对本实用新型的原理及实施方式进行了阐述，以上实施例的说明只是用于帮助理解本实用新型的方法及其核心思想；同时，对于本领域的一般技术人员，依据本实用新型的思想，在具体实施方式及应用范围上均会有改变之处，对本实用新型的变更和改进将是可能的，而不会超出附加权利要求所规定的构思和范围，综上所述，本说明书内容不应理解为对本实用新型的限制。

Claims (10)

1.一种肝细胞体外消化分离设备，其特征在于，包括消化分离装置(1)、收集管(2)、液体回路系统(3)和旋转加热架(4)，所述消化分离装置(1)与收集管(2)连通设置，所述收集管(2)设置在旋转加热架(4)上，所述液体回路系统(3)与消化分离装置(1)通过管道连通，所述管道的中段位置设置有蠕动泵(5)；

所述液体回路系统(3)包括灌注液瓶(31)、终止液瓶(32)、消化液瓶(33)和四通阀(34)，所述灌注液瓶(31)、终止液瓶(32)、消化液瓶(33)均分别通过管道与四通阀(34)的三个端口连通，四通阀(34)的另一端口与设置蠕动泵(5)的管道连通设置。

2.根据权利要求1所述的一种肝细胞体外消化分离设备，其特征在于，所述消化分离装置(1)包括管盖(11)、管体(12)、粗滤层(13)和电动旋转十字刀(123)，所述管盖(11)盖设在管体(12)的一端，设置蠕动泵(5)的管道与管盖(11)连通设置，所述管盖(11)上还连通设置有出液管，所述电动旋转十字刀(123)设置在管体(12)内，所述粗滤层(13)与管体(12)的另一端连接，所述粗滤层(13)远离管体(12)的一端与收集管(2)连接，所述收集管(2)靠近粗滤层(13)的一端设置有细滤网(21)。

3.根据权利要求2所述的一种肝细胞体外消化分离设备，其特征在于，所述粗滤层(13)包括连接管(131)和设置在连接管(131)内的粗滤网(132)，连接管(131)的两端分别与管体(12)和收集管(2)螺纹连接。

4.根据权利要求2所述的一种肝细胞体外消化分离设备，其特征在于，所述电动旋转十字刀(123)远离刀刃的一端设置有安装盖(121)，所述管体(12)的侧壁开设有安装口(122)，所述安装盖(121)与安装口(122)通过螺纹连接。

5.根据权利要求4所述的一种肝细胞体外消化分离设备，其特征在于，所述电动旋转十字刀(123)设置为电动旋转十字乳胶刀。

6.根据权利要求2所述的一种肝细胞体外消化分离设备，其特征在于，所述收集管(2)内且靠近端口处设置有一圈凸缘(22)，所述细滤网(21)放置在凸缘(22)上。

7.根据权利要求2所述的一种肝细胞体外消化分离设备，其特征在于，所述出液管远离盖体(6)的一端设置有三通阀(35)，三通阀(35)的剩下的其中一端口通过管道与消化液瓶(33)连通，另一端口通过管道连通设置有废液瓶(36)。

8.根据权利要求7所述的一种肝细胞体外消化分离设备，其特征在于，用于与灌注液瓶(31)、终止液瓶(32)、消化液瓶(33)及废液瓶(36)连通的管道上均固定套设有盖体(6)，多个所述盖体(6)均分别与灌注液瓶(31)、终止液瓶(32)、消化液瓶(33)及废液瓶(36)的瓶口螺纹连接。

9.根据权利要求1所述的一种肝细胞体外消化分离设备，其特征在于，所述旋转加热架(4)包括底座(41)、槽位(42)和设置在底座(41)上的支撑杆(43)，槽位(42)的外侧壁设置连杆，槽位(42)通过连杆与支撑杆(43)转动连接，所述槽位(42)内腔的形状与收集管(2)的形状相匹配。

10.根据权利要求1所述的一种肝细胞体外消化分离设备，其特征在于，还包括传热槽(7)，所述终止液瓶(32)和消化液瓶(33)均放置在传热槽(7)内。

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