CN205974545U - 一种用于高效快速纯化牛卵母细胞的新型装置 - Google Patents
一种用于高效快速纯化牛卵母细胞的新型装置 Download PDFInfo
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Abstract
本实用新型公开了一种用于高效快速纯化牛卵母细胞的新型装置,包括磁珠、尖底管、螺口密封盖、插槽和磁条,磁珠置于尖底管内,尖底管的管口可被螺口密封盖盖紧,尖底管的外壁上结合着插槽,磁条可以方便的插入插槽中。将卵丘卵母细胞复合体移入该装置后,置于涡旋振荡器上振荡,振荡过程中,磁珠对卵丘卵母细胞复合体进行反复有力的撞击,可以高效的打散卵丘细胞并使其与卵母细胞干净彻底的分离,从而获得纯的卵母细胞,有效避免卵丘细胞对检测、分析卵母细胞成分产生干扰;使用该装置纯化卵母细胞,操作简便快速,大大节省了实验时间;整个操作在密闭的尖底管中进行,不易被微生物污染。
Description
技术领域
本实用新型属于实验用具领域,具体涉及一种用于高效快速纯化牛卵母细胞的新型装置。
背景技术
卵母细胞是一种特殊而重要的细胞,它不仅含有子代个体的母方基因组,还贮存着大量调控早期胚胎发育的激酶、mRNA、长链非编码RNA、短链非编码RNA等,蕴藏着发育程序的重要信息,是许多细胞生物学、发育生物学、分子遗传学和表观遗传学工作者的研究对象。
人的卵母细胞数量有限、采集不便、涉及伦理问题,很难用于实验研究。牛与人有着很近的亲缘关系,两者基因组同源性超过90%,它的卵母细胞采集方便,因此很多研究者都收集牛卵母细胞作为实验材料。
牛卵母细胞的采集首先是从卵泡中抽吸出卵丘卵母细胞复合体,在这一复合体中,卵母细胞被大量的卵丘细胞紧密包裹。随后需要快速、彻底的去除卵丘细胞,纯化出卵母细胞。
现有的纯化方法是将卵丘卵母细胞复合体放入盛有生理盐水的平皿中,使用手动移液器和100 微升的移液器枪头进行反复的吹吸,靠吹吸的力量使卵丘细胞与卵母细胞分离,而后在体视显微镜下拣出卵母细胞。这一方法存在着严重弊端:
第一,移液器吹吸的力量较小,很难将包裹的卵丘细胞完全、彻底的去除,总有一些卵丘细胞粘附于透明带,这些卵丘细胞的存在影响、干扰了对卵母细胞成分的精确检测、分析。
第二,移液器吹吸的力量较小,需要很长时间的反复操作才能打散卵丘细胞,延长了卵母细胞在体外的暴露时间,影响了实验的准确性。
第三,整个吹吸过程在体外开放式进行,空气中的微生物会混杂其中,这对于精确检测、分析卵母细胞中非编码RNA等物质的种类、数量造成干扰。
第四,用手动移液器进行吹吸,操作稍有不慎,会将卵丘卵母细胞复合体吸入移液器的吸气腔中,造成材料的损失。
发明内容
为解决上述问题,本实用新型提供了一种用于高效快速纯化牛卵母细胞的新型装置。
本实用新型采取的技术方案为:
一种用于高效快速纯化牛卵母细胞的新型装置,包括磁珠、尖底管、螺口密封盖、插槽、磁条,所述磁珠直径70 μm,放于尖底管内,尖底管容积2.5 ml,管口外壁有螺纹,可被螺口密封盖盖紧,尖底管外壁上结合着一个插槽,插槽口径为0.9 cm×0.6 cm,所述磁条可插入插槽中。
作为优选,所述磁珠的材质为Fe2O3,表面经硅烷化处理。
作为优选,所述尖底管和螺口密封盖的材质采用聚苯乙烯,其内壁均经过硅化处理。
作为优选,所述磁条的长度为10 cm,宽度为0.8 cm,高度为0.5 cm。
本实用新型具有以下有益效果:
1、将抽吸得到的卵丘卵母细胞复合体移入尖底管中,将尖底管放于涡旋振荡器上进行高速振荡,振荡过程中磁珠对卵丘卵母细胞复合体产生强大的、反复的撞击作用,打散卵丘细胞,可以干净彻底的将卵丘细胞从卵母细胞的透明带表面脱除,实现两者的完全分离,能够获得纯的卵母细胞。
2、只需要30 s的高速涡旋,磁珠就可将卵丘细胞从透明带表面完全脱除,比起传统的吹吸大大缩短了操作时间。
3、整个操作过程在密闭的尖底管中进行,不易发生细菌、真菌污染。
4、在涡旋振荡过程中,卵母细胞有坚韧的透明带保护,完好无损,而相当一部分卵丘细胞被磁珠撞击碎裂,使得后期从体视显微镜下分拣卵母细胞时,操作难度大大降低。
附图说明
图1为本实用新型用于高效快速纯化牛卵母细胞的新型装置的结构示意图(磁条未插入插槽)。
图2为本实用新型用于高效快速纯化牛卵母细胞的新型装置的结构示意图(尖底管经涡旋振荡后,磁条正在插入插槽)。
具体实施方式
为了使本实用新型的目的及优点更加清楚明白,以下结合实施例对本实用新型进一步详细说明。应当理解,此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本实用新型,并不用于限定本实用新型。
如图1所示,本实用新型实施例提供了一种用于高效快速纯化牛卵母细胞的新型装置,包括磁珠1、尖底管2、螺口密封盖3、插槽4和磁条5。其特征在于,所述磁珠1置于尖底管2内,尖底管2的管口可被螺口密封盖3盖紧,尖底管2的外壁上结合着插槽4,磁条5可以方便的插入插槽4中。
所述磁珠1的材质为Fe2O3,表面经硅烷化处理,以保证振荡后分离出来的卵母细胞不会沾在磁珠表面。
所述尖底管2和螺口密封盖3的材质采用聚苯乙烯,其内壁均经过硅化处理。
所述磁条5的长度为10 cm,宽度为0.8 cm,高度为0.5 cm,可以方便的插入插槽4中。
实施例
向放有磁珠的尖底管中,加入0.8 ml生理盐水,和螺口密封盖一起置于高压蒸汽灭菌锅内灭菌,灭菌完毕冷却至37°C 。将抽吸所得的牛卵丘卵母细胞复合体移入尖底管内,旋紧螺口密封盖,将尖底管置于涡旋振荡器上,高速振荡30 s,直立静置5 s。立即将磁条插入插槽,磁珠都被吸附到磁条一侧的管侧壁上,用移液器从对侧移出细胞悬液至35 mm平皿,体视显微镜下拣出卵母细胞。整个过程操作简便快捷,体视显微镜下分拣时,卵丘细胞数量已较少,对卵母细胞的干扰较小,可以很容易的拣出卵母细胞;拣出的卵母细胞透明带表面未粘附卵丘细胞,非常干净。利用该装置,高效、快捷的获得了纯的牛卵母细胞。
以上所述仅是本实用新型的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本实用新型原理的前提下,还可以作出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本实用新型的保护范围。
Claims (2)
1.一种用于高效快速纯化牛卵母细胞的新型装置,其特征在于,包括磁珠(1)、尖底管(2)、螺口密封盖(3)、插槽(4)和磁条(5),所述磁珠(1)置于尖底管(2)内,尖底管(2)的管口可被螺口密封盖(3)盖紧,尖底管(2)的外壁上结合着插槽(4),磁条(5)可以方便的插入插槽(4)中。
2.根据权利要求1所述的一种用于高效快速纯化牛卵母细胞的新型装置,其特征在于,尖底管(2)和螺口密封盖(3)均采用有机高分子材料聚苯乙烯制成,无色透明。
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CN201620925979.8U CN205974545U (zh) | 2016-08-24 | 2016-08-24 | 一种用于高效快速纯化牛卵母细胞的新型装置 |
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Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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CN109280637A (zh) * | 2018-10-26 | 2019-01-29 | 安徽农业大学 | 一种高效去除猪未成熟卵母细胞周围卵丘细胞的方法 |
CN110229781A (zh) * | 2019-06-11 | 2019-09-13 | 深圳海思安生物技术有限公司 | 细胞分离方法 |
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