CN1882320A - 减少哺乳动物和鸟类的脂肪堆积物和体重的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种利用视觉上纯沙丁胺醇优对映体来减少哺乳动物和鸟类体内脂肪和/或体重的方法。本发明还公开了一种包含优异构体的食物组合物。

Description

减少哺乳动物和鸟类的脂肪堆积物和体重的方法

本申请要求优先权，该优先权是2003年11月20日申请的序号为60/524,376的临时专利申请，因此，可结合其公开内容作为参考。

本发明的背景

大量的生物活性分子以对映结构体的形式存在。尽管在结构上是一致的，对映结构体可以对生物体系有不同的影响：一个异构体可以有特殊的治疗活性，而其它异构体可以没有治疗活性或者有完全不同于生物活性的形式。

在美国沙丁胺醇被称为舒喘灵。

肾上腺素β-2受体激动剂药物(也被称为β-2激动剂)目前被用作外消旋异构体混合物。例如，外消旋沙丁胺醇是一种包含50％的R-沙丁胺醇和50％的S-沙丁胺醇的混合物。R-异构体与相应的S-异构体在结构上一致，异构体的不同仅在于一个异构体是其它异构体的镜像。具有两个手性中心的分子有四个异构体，如RR-福莫特罗(Formoterol)，SS-福莫特罗(Formoterol)，RS-福莫特罗(Formoterol)和SR-福莫特罗(Formoterol)。外消旋福莫特罗(Formoterol)包含所有四个异构体。治疗活性的β-2激动剂异构体(优对映体)对体内的β-2受体有亲和性，且其通常是R-或RR-异构体，而S-或SS-异构体通常不携带肾上腺素的活性(劣对映体)。除了这种一般规则的存在，一个例子是沙美特罗(Salmeterol)，在此，两个异构体对肾上腺素β-2受体有亲和性。

多数肾上腺素β-2受体激动剂对各种β受体有亲和性。因此如下所示，沙丁胺醇对β-1和β-2受体有亲和性，但对β-3受体没有亲和性。

	对受体的亲和性(Ki)*)
				化合物	β-1(nM)	β-2(nM)	β-3(nM)
RS-沙丁胺醇R-沙丁胺醇S-沙丁胺醇	2,9801,540＞＞10,000	668236＞＞10,000	＞＞10,000＞＞10,000＞＞10,000

^*)关于β-1和β-2的结果来自Penn等1996。关于β-3受体亲和性的结果来自BRIDGE PHARMA，Inc.，Sarasota，Florida，USA。

与β-受体激动剂沙丁胺醇相反，β-受体激动剂克仑特罗(clenbuterol)对全部3种肾上腺素的β-受体：β-1、β-2和β-3有亲和性。

类似沙丁胺醇的β-2激动剂的治疗活性使肾上腺素β-2受体激活，且发起细胞回应，其中大多已知的是支气管平滑肌肉的放松。肾上腺素β-2激动剂也有新陈代谢的效果，就如分解脂肪的效果，但是β-2受体激动剂的分解脂肪效果被描述得微弱甚至最小。β-受体活性的分解脂肪效果被认为是主要由肾上腺素β-3受体的激活所引起的。

目前已发现低剂量R-沙丁胺醇的口服引起体重的大量减轻，这是令人惊奇的，而且很难解释R-沙丁胺醇对肾上腺素β-3受体是没有亲和性的。可以推测R-沙丁胺醇可以通过黑肾上腺皮质激素-4受体的亲和性在CNS内有重要的影响。然而，尽管通过R-沙丁胺醇减少体重对肾上腺素β-受体的影响可以不是唯一的，这种活性立体选择地存在于沙丁胺醇的R-异构体内。

肾上腺素β-激动剂的药理影响、新陈代谢和毒性发生变化，该变化取决于动物种类及所研究的药物。

现在惊奇地发现，沙丁胺醇的R-异构体能有效地并立体选择地降低哺乳动物和鸟类体内的脂肪含量。

沙丁胺醇的S-异构体在该方面是非活性的，且不能降低脂肪。然而，我们已说明R-和S-沙丁胺醇在哺乳动物体内被测试时具有相同的剧烈毒性。沙丁胺醇的S-异构体也会引起平滑肌肉的过度反应，这是严重的且对S-沙丁胺醇有可立体选择的负面影响(Yamaguchi等1996)。

多数普通的用于人类的β-激动剂的治疗性说明用来治疗哮喘病人或支气管病人的支气管痉挛。R-沙丁胺醇也被说明用于诱导支气管放松并禁止人类怀孕子宫的早熟挛缩，且在家畜中起生长启动子的作用。

发明概述

本发明涉及一种减少哺乳动物及鸟类体内脂肪和/或体重的方法，哺乳动物如牛、猪、马、羊、鹿、狗、猫和人类，鸟类如火鸡、小鸡、鸭子和鹅，该方法通过服用肾上腺素β-2受体激动剂沙丁胺醇的纯的或实质上纯的R-异构体，避免药物的S-异构体中的毒性和负面影响。该方法对超重或肥胖的哺乳动物是特别有用的，包括具有高脂肪含量的人类和家畜，使用该方法通过药物使身体脂肪大量减少。本发明还涉及一种食品组合物，其包括一种视觉上纯的肾上腺素β-2受体激动剂沙丁胺醇的R-异构体或药学上可接受的盐与含有蛋白质的食物材料的混合物，其中包含实质上没有相应劣对映体的R-异构体。

本发明基于令人惊奇地观察到R-沙丁胺醇的施用引起身体脂肪和体重的大量降低，这是令人惊奇的且很难解释该分子对肾上腺素β-3受体有最小的或没有亲和性。因此，R-沙丁胺醇的分解脂肪活性至少与结合的β-2和β-3激动剂的分解脂肪活性相同，如克仑特罗(clenbuterol)。可以推测(尽管本发明在此不受限制)通过在CNS内的重要影响，可能通过对黑肾上腺皮质激素-4受体的亲和性，R-沙丁胺醇引起分解脂肪的活性，尽管这些影响没有在以前的技术中被描述。此外，目前惊奇地发现甚至当药物每天仅服用一次或二次，体重可以减轻。对心脏速度产生影响的R-沙丁胺醇和肾上腺素β-2之间没有相互关系，这是短期的且是化合物对体重的影响，随着时间过去该影响在发展。不管R-沙丁胺醇活性的剂量，该化合物分解脂肪的活性可立体选择地存在于该化合物的R-异构体中。

在小鸡、火鸡、牛、猪、羊、饲养鹿、饲养鱼和其他家畜动物的例子中，它们进入了食物链，存在以下风险：当这些动物吃了药物并被屠杀后，人们吃了被屠杀动物的肉，这些药物可以对人引起负面的影响。然而，在口服后，R-沙丁胺醇的血浆半衰期与RS-沙丁胺醇合成的血浆半衰期相比更短(Boulton等1996；Fawcett等1997)。此外，低治疗剂量的药物尽管对减少体重有效果，但降低了对吃被喂食R-沙丁胺醇的家畜动物的肉的人类的负面影响的风险。

沙丁胺醇的R-异构体没有携带该负面影响，如支气管过度反应，增加的眼压，增加的子宫收缩性或畸形活性，因此该R-异构体比化合物的外消旋混合物更优选。由于毒性的理由，该R-异构体也更优选。这样，本发明提供一种治疗哺乳动物如家畜动物、同伴动物和人类的安全、有效的方法，该方法采用治疗活性的沙丁胺醇异构体，该治疗的目的在于减少所述哺乳动物的脂肪含量和/或体重。

同样惊奇地发现，家畜服用纯的沙丁胺醇的R-异构体，动物服用外消旋肾上腺素β-激动剂如莱克多巴氨(ractopamine)之后出现的大量或所有精神上的兴奋被避免。

发明的详细说明

目前已发现沙丁胺醇的R-异构体可大量降低鸟类和哺乳动物，尤其是超重或肥胖的哺乳动物的体内脂肪含量和体重。相应的S-异构体没有这种活性。据发现治疗非活性的沙丁胺醇S-异构体(LD50；iv老鼠：＜60mg/kg)的剧烈毒性与治疗活性R-异构体(LD50；iv老鼠：＜60mg/kg)的毒性相似。因此，沙丁胺醇的S-异构体有毒性活性，但是没有治疗活性。S-沙丁胺醇已被发现可引起严重的药理性负面影响，如支气管和子宫平滑肌肉的过度反应。

本发明依赖β-2受体激动剂R-沙丁胺醇的活性提供身体脂肪含量的降低，而同时避免来自所述肾上腺素β-受体激动剂的S-异构体的负面影响。这样，在本方法中，一种实质上没有相应S-异构体的纯的或实质上纯的沙丁胺醇的优对映体能被单独施用或结合至少一种其它药物附加施用于鸟类如火鸡、小鸡、鸭子和鹅，施用于哺乳动物如牛、猪、马、羊、鹿、狗、猫和人类，其中身体脂肪和/或体重的降低是被渴望的。在此使用的沙丁胺醇的R-异构体指视觉上纯的α′[(特丁基氨基)甲基]-4-羟基-m-二甲苯-α，α′-二醇(α′[(tert-butylamino)methyl]-4-hydroxy-m-xylene-α，α′-diol)的R(+)-异构体及其任何生物学上可接受的盐或酯；克仑特罗(clenbuterol)指4-氨基-α-[(特丁基氨基)甲基]-3，5-二氯苄醇(4-amino-α-[(tert-butylamino)methyl]-3，5-dichlorobenzylalcohol)及其任何生物学上可接受的盐或酯；沙美特罗(Salmeterol)指4-羟基-α′-[[[6-(4-苯基丁氧基)-己基]氨基]甲基]-m-二甲苯-α，α′-二醇(4-hydroxy-α′-[[[6-(4-phenylbutoxy)-hexylamino]methyl]-m-xylene-α，α′-diol)及其任何生物学上可接受的盐或酯，特布它林(Terbutaline)指1-(3，5-二羟基-苯基)-2-(特丁基氨基)乙醇(1-(3，5-dihydroxy-phenyl)-2-(tert-butylamino)ethanol)及其任何生物学上可接受的盐或酯。

通过本领域技术人员所知的方法，视觉上纯的和实质上纯的肾上腺素β-激动剂是容易得到的，如通过将合成的中间产物或解析外消旋沙丁胺醇分解为异构体(Hamied等WO 02/48090；Gao等USP 5,399,765；Gao等USP 5,545,745；Ferrayoli等2000)。

在此使用的术语“实质上纯的”意思是至少存在约85％的优对映体和15％或少于15％的劣对映体，优选至少存在约95％的优对映体，更优选至少存在约98％的优对映体。

在本方法中，肾上腺素β-受体激动剂的活性单一异构体或多个异构体，例如，但不限于，沙丁胺醇，克仑特罗(clenbuterol)，福莫特罗(Formoterol)，莱克多巴氨(ractopamine)，沙美特罗(Salmeterol)或特布它林(Terbutaline)施用于鸟或哺乳动物，其中体内脂肪含量的减少和/或体重的降低是被渴望的。例如，为了减少体内脂肪含量和/或降低体重，给一个超重或肥胖的人服用R-沙丁胺醇，其不会增加由相应S-异构体产生的支气管负面影响或CNS负面影响的风险。

在该方法中，优对映体形式的沙丁胺醇可以以任何合适的方法被施用，该方法包括肠胃外施用，经皮质施用，皮下施用，静脉内施用，肌内施用或口服、局部施用、直肠施用，通过吸入剂或含有药物的注射液。被施用药物的形式(如吸入剂，粉末，粒状，片剂，胶囊，溶液乳液，透皮贴剂等)取决于施用的方法。优选的施用方法是口服方法，将沙丁胺醇的优对映体混合到鸟类或动物的食物中或以片剂或类似形式给人类施用。口服片剂可以是众多可控制释放类型片剂或胶囊中的一种。此外，其它优选的施用形式是通过吸入剂或透皮贴剂，通过磺基转移酶和其它代谢酶会降低或避免肠胃代谢及肝首次通过的新陈代谢；如可以设计传输体系延缓吸收速度，这样来降低最大的血浆药物浓度(C_max)。

对病人或特定动物施用药物的量在个体的基础上被决定，且基于选择的种类的药物的药理学潜能，施用的方法，哺乳动物或鸟类的大小和寻找的结果。一般，足够降低身体脂肪和/或减少体重的优对映体药物的量被施用。实际的剂量(每次施用的量)和每天的施用次数取决于特定的哺乳动物体内药物的药动力特性和药物的新陈代谢。例如，约10至3000微克视觉上纯的沙丁胺醇的R-异构体可以不同形式的吸入设备给予，如计量剂量吸入器及喷雾器，通过口服方法(如粉末，颗粒，片剂或液体)，每天被施用一至四次(或没有限制地施用于动物)，每次0.01至200毫克，其对哺乳动物而言是足够的剂量能产生所需的效果。对人类适合的口服剂量包括从每天一次到每天4次，剂量范围在0.5mg到5mg。对动物适合的剂量可以被施用在食物材料内，其中所述食物材料中沙丁胺醇的R-异构体浓度按重量计算可以在约1ppm到约20ppm的范围内。

R-沙丁胺醇，R-克仑特罗(clenbuterol)，RR-福莫特罗(Formoterol)或RR-莱克多巴氨(ractopamine)的剂量可以更低，与有R-沙丁胺醇的情况相比该剂量也可以更少发生。药物剂量可以更高或更低，与上文所述的相比，施用可以发生得更多或更少，这是由人道的医师或兽医决定的。在本发明的方法中，β-2受体激动剂沙丁胺醇的优对映体可制备成片剂或相似形式用来给危急中的人类口服。该药物也可以透皮贴剂的形式被施用。

在本发明的方法中，β-2受体激动剂沙丁胺醇的优对映体可制备成干粉或颗粒并混合进哺乳动物的食物中。根据本领域技术人员所知的任何方法，该药物可以被预先混合入浓缩液中，或者该药物可以被混合进与实际饲养相联系的最终的动物食物中。该药物也可以喝水的方式给动物施用，或利用注射或部分注射的设备使该药物在肠胃外传输到动物中。当施用于人类时，本发明的药物可以胶囊，片剂，颗粒，粉末或液体，喷雾，气溶胶，注射剂等形式被施用。包括在特定剂型中的成分--除了本发明的药物外--首先被施用的组合物的方式所决定。例如，以液体形式施用的组合物可以包括除药物以外的溶液载体，乳化剂，调味剂，抗菌或抑菌剂和/或着色剂。以粉末或颗粒形式施用的剂型可以包括填充机(如乳糖)，粘合剂(如羧甲基纤维素，阿拉伯树脂，凝胶)，辅助调味剂和/或着色剂。用于雄性动物的方法来制备片剂，胶囊，糖浆，吸入溶液，透皮传输体系(贴剂)是本领域技术人员公知的制药方式。

本发明选择的化合物(R-沙丁胺醇)是低毒性的，且负面影响很小，可长期施用以延长生命期间，所述生命期间，有好几年，或者与被认为必要的治疗活性同样长的时间。

已知的R-沙丁胺醇的负面影响包括心动过速和心颤。这些负面影响和其它负面影响是短期的，并与药物的血浆浓度有联系。通过使用药物传输体系，这些负面影响可以被减轻或完全避免，该药物传输体系能缓慢释放本发明药物到系统循环。该缓慢释放传输体系包括被设计用来缓慢释放活性成分的片剂或胶囊。

在本发明的方法中，选择的药物的R-异构体可与一个或更多其它活性化合物一起被施用。改进或延长β-2激动剂的治疗效果的化合物，例如，延缓或抑制化合物的吸收或新陈代谢降低的化合物(如对乙酰氨基酚或磷酸二酯酶抑制剂)也可以与优对映体β-激动剂一起施用以改进治疗活性。除R-沙丁胺醇以外的引起脂肪减少或体重降低的其它药物可以结合本发明被选择的药物以得到改进的治疗活性及进一步降低身体脂肪或体重。

本发明的优对映体受体激动剂可以同肾上腺素β-受体阻抑物一起被施用，所述的β-受体阻抑物以一定的剂量、方式或形式被施用，其抑制或降低β-受体的间接负面影响，但是没有抑制或降低减少脂肪或体重的治疗活性。

利用肾上腺素β-激动剂的减少脂肪治疗或减少体重治疗可以且应该与适当的生活类型的改进相结合，如改良的饮食习惯和增加锻炼。

两种(或更多)药物(本发明视觉上纯的活性药物与其它药物一起)以混合物的形式被施用或单独施用。例如，它们可以单独的胶囊，片剂，颗粒，粉末或液体，喷雾剂，气溶胶，注射剂等或单独的药物形式被施用。包含于特定剂型的成分-除了本发明药物和另一种药物或其它药物-首先以混合物施用的方式被决定。例如，以液体形式施用的混合物除该药物以外可以包括溶液载体乳化剂，调味剂，抗菌或抑菌剂和/或着色剂。以粉末或颗粒形式施用的剂型可以包括填充机(如乳糖)，粘合剂(如羧甲基纤维素，阿拉伯树脂，凝胶)，辅助调味剂和/或着色剂。

一般，根据本发明的方法，视觉上活性的沙丁胺醇优对映体单独或结合另一种药物被施用到动物、鸟类或人类，有必要周期性地或连续地降低身体脂肪和/或降低体重。

在排除由外消旋沙丁胺醇中劣对映体施用于人类和人类食用的喂食药物的家畜动物的肉所引起的不想要的负面影响的同时，本组合物和方法提供了有效的治疗。这些负面影响包括但不限于支气管过度反应，增强的子宫收缩，增强的眼压，中枢神经系统影响如攻击，战栗，颤抖和头昏眼花，心脏血管的负面影响，该影响由外消旋沙丁胺醇和其它β-2激动剂的外消旋混合物中的S-异构体引起。因此通过沙丁胺醇的纯的R-异构体的施用，能延长持续时间的相应劣对映体的负面影响会被减弱或避免。

生物效果

背景

从先前技术可以不同的外消旋的β-2激动剂可以被用来改进饲养动物的行为。改进的行为包括增加的效率(喂食克/获得体重克)和增加的肌肉重量。然而，据报导，在饲养动物体内包括家禽由β激动剂导致的脂肪降低被描述得很少或不存在。这样，通过对于鸡进行的试验，Dalrymple等(Poultry Science，1984，63：2376-2383)报道了β-2激动剂克仑特罗(Clenbuterol)不能减少公鸡的腹部脂肪层，但能够减少8.5％母鸡的脂肪层(表3，第2380页和第2381页上的表4)。Rehfeldt等(Brit.Poultry Science，1997，38：366-373)发现在喂食外消旋的克伦特罗之后脂肪层在公鸡体内仅被减少了6.0％而在母鸡体内减少了8.5％(表1，第368页)。Hamano等(Brit.Poultry Science 1998，39：117-122)也用外消旋的克伦特罗喂食鸡，没有发现任何β-2激动剂对腹部脂肪量的影响(表2，第119页)。

新研究

目前两个对适合烤焙的小鸡的研究正在进行。第一个研究在考虑小鸡用药安全性的条件下来比较R-沙丁胺醇和RS-沙丁胺醇的效果。第二个研究用来研究R-沙丁胺醇对身体脂肪的影响。选择小鸡作为试验目标的原因有二：安全性试验必须适用大量的动物，鉴于明显的实用性理由，用适合烤焙的小鸡来做这个安全性试验要比用哺乳动物更好。既然第二个研究包括对体内脂肪影响的评估，选用小鸡是因为它的腹部脂肪很容易测得。

研究同样在肥胖的动物中进行，从而R-沙丁胺醇的效果可以与安慰剂(媒介)治疗的效果进行比较。

1、用鸡进行安全研究。

这个临床研究采用三顿饭进行喂食。基础(对照)餐是基于玉米和大豆餐并且被表达含有20％天然蛋白质，3200kcal AME/kg，1.05％赖氨酸和0.78％甲硫氨酸+胱氨酸混合物。RS-沙丁胺醇(10ppm)和R-沙丁胺醇(5ppm)加入对照餐形成两种试验餐。每一种餐准备60公斤，药物按照试验工具的标准操作步骤混合到餐中。混匀后，餐被低温颗粒化(65℃)。在混合之后按照预先设定的间隔立即对测试物浓度进行分析。分析结果确定了已获得预想的测试物浓度并且“食物中的药物”在化学上是稳定的。

初孵雏公鸡(Cobb)来自商业化孵卵所。小鸡在环境监控房中用电子孵化器孵育并且它们从第1到12天食用商业化的烤焙定制餐。当这些小鸡长到12天时被转移到大一点的箱子里。在第14天，分别称重并且按照体重分类。总共72只鸡(一致的体重)被选出分成测试组，使每个测试组的平均重量基本相等。3顿餐(对照餐；含有10ppm RS-沙丁胺醇的对照餐；含有5ppm R-沙丁胺醇的对照餐)中的每一餐随机分配。从14天到28天进行喂食并且在第29天进行屠宰。食物和水随意提供。这些鸡每天至少照看3次，观察是否有反常举动和行为。每天记录死亡率。

我们从试验设备的动物伦理委员会获准进行该项试验。

表1.RS-和R-沙丁胺醇对Cobb烤焙小鸡的剧烈毒性影响，14天到28天开始添加RS-或R-沙丁胺醇(共14天)

处理	死亡率(超过24只鸡)
		对照10ppm RS-沙丁胺醇*)5ppm R-沙丁胺醇	0/242/240/24

^*)10ppm RS-沙丁胺醇包含5ppm R-沙丁胺醇+5ppm S-沙丁胺醇

表2.R-和S-沙丁胺醇在Cobb烤焙小鸡肝脏中的组织浓度，4天到28天开始添加RS-或R-沙丁胺醇(共14天)

处理	浓度(药物ng/克肝脏)
				R-沙丁胺醇	S-沙丁胺醇	总沙丁胺醇
	对照10ppm RS-沙丁胺醇*)5ppm R-沙丁胺醇	0.018.323.4	0.043.00.0				0.061.323.4

^*)10ppm RS-沙丁胺醇包含5ppm R-沙丁胺醇+5ppm S-沙丁胺醇

结果与讨论

这一试验中的死亡率(见表1)仅当小鸡用RS-沙丁胺醇喂食时才发生。可以认为这组较高的死亡率是由于S-沙丁胺醇的添加而导致的。

这个发现的重要性：RS-沙丁胺醇在10ppm剂量时能够导致死亡。RS-沙丁胺醇剂量的增加将会进一步导致更高的死亡率。在用R-沙丁胺醇喂食的小鸡组和对照组中没有出现死亡。

组织药物浓度(见表2)在本试验中采用肝脏组织。用5ppm R-沙丁胺醇或者10ppm RS-沙丁胺醇喂食后R-沙丁胺醇的浓度分别是18.3和23.4ng/g。令人惊讶地，在喂食RS-沙丁胺醇动物的体内S-沙丁胺醇的组织浓度大约是R-沙丁胺醇的浓度的两倍。这可能是由于S-沙丁胺醇相对于R-沙丁胺醇的较慢代谢和/或排泄，因为鸡不表达R-或S-沙丁胺醇代谢酶(Fawcett和Aberg，待发表)。S-沙丁胺醇排泄的的立体-选择延迟真的是非常惊人并且之前没有被描述肾上腺素β-2激动剂。

这些发现的重要性：惊奇地发现喂食R-沙丁胺醇动物的组织药物浓度(23.4ng/g组织)仅仅是喂食外消旋物动物体内发现的组织药物浓度(61.3ng/g)的1/3。这样，通过喂食R-沙丁胺醇可以使动物和食用动物的人类的毒性影响风险大大减少。

2、用鸡进行功效研究

这个临床学研究采用三顿饭进行喂食。基础(对照)餐是基于玉米和大豆餐并且含有18.9％天然蛋白质，3200kcal AME/kg，1.01％赖氨酸和0.76％甲硫氨酸+胱氨酸混合物。R-沙丁胺醇(5ppm)加入对照餐形成试验餐。每一种餐准备60公斤，药物按照试验工具的标准操作步骤混合到餐中。混匀后，餐被低温颗粒化(65℃)。在混合之后按照预先设定的间隔立即对餐的沙丁胺醇浓度进行分析。分析结果确定已获得预想浓度并且“食物中的药物”的化学稳定性是测试时间的至少2倍。

初孵雏公鸡(Cobb)来自商业化孵卵所。小鸡在环境监控房中用电子孵化器孵育并且它们从第1到14天食用商业化的烤焙定制餐。当这些小鸡长到15天时被转移到大一点的箱子里并喂食烤焙用完成餐(18.9％天然蛋白质)。在第21天，分别称重并且按照体重分类。动物(一致的体重)被分成每测试组24只。(特别照顾组另外饲养)。3顿餐中的每一餐随机分配给测试组。从21天开始喂食并且在第42天进行屠宰。试验过程中食物和水随意提供。在每周固定间隔记录体重。这些鸡每天至少照看3次，观察是否有反常举动和行为。

我们从试验设备的动物伦理委员会获准进行该项试验。

结果：

         表3.R-沙丁胺醇对研究动物体内脂肪和体重的影响

组和R-沙丁胺醇口服剂量

腹部脂肪层(％BM)

对获得体重的影响(克)

公鸡
			对照5ppm10ppm母鸡对照5ppm10ppm	1.981.641.632.221.791.77	196818861887167516461614

N＝24只鸡/测试组。

腹部脂肪层的重量占总体重的百分比(BM)。

获得体重参考21到42天获得。

R-沙丁胺醇对体内脂肪的影响惊人地被关注并且公鸡体内脂肪层在喂食5ppm和10ppm R-沙丁胺醇时分别减少了17.2％和17.7％。母鸡脂肪层分别减少了19.4％和20.3％。R-沙丁胺醇的施用导致的体重的减轻相对于其他β-受体激动剂是增加体重而言是惊人的。这样，作为例子，Dalrymple等，1984(Poultry Science 1984，63：2376-2383)报道了适合烤焙的小鸡体重通过外消旋克仑特罗(racemic clenbuterol)而增长，这是另一种肾上腺素β-激动剂。

这些发现的重要性：我们发现喂养5ppm或10ppm剂量的R-沙丁胺醇的动物脂肪层惊人地小。这个针对脂肪组织发展的重要影响表明R-沙丁胺醇不但激活脂解(作用)并且抑制动物体内肝脂肪的生成。特别有趣的是脂肪含量会由于R-沙丁胺醇而减少，不但在雌性动物中是如此，在雄性动物中也一样。这与之前的技术大不相同。这样，Dalrymple等(Poultry Science，1984，63：2376-2383)Zhou和Hahn(Brit.PoultryScience，1994，35：355-361)和Rehfeldt等(Brit.PoultryScience，1997，38：366-373)报道雄性动物体内的外消旋β-2激动剂没有或几乎没有效果。这个发现的重要性在于，目前用来在家畜工业中产生大量脂肪的方法几乎是一片空白。脂肪的生产对家畜工业是非常昂贵的，并且保存过量脂肪在这个产业中是昂贵并且存在问题的。

3、用幼龄肥胖哺乳动物进行功效研究。

利用公知方法，R-沙丁胺醇口服喂食幼龄肥胖哺乳动物以研究测试物对体重和体内脂肪发展的影响。初步结果表明R-沙丁胺醇显著减少了肥胖幼龄动物的体内脂肪，从而证实了利用R-沙丁胺醇减少体内脂肪沉积并且抑制肥胖在哺乳动物体内的发展。

4、用成年肥胖哺乳动物进行功效研究。

利用公知方法，R-沙丁胺醇口服喂食幼龄肥胖哺乳动物以研究测试物对体重和体内脂肪的影响。初步结果表明R-沙丁胺醇显著减少了肥胖成年动物的体内脂肪，从而证实了利用R-沙丁胺醇减少肥胖哺乳动物体内脂肪沉积。

等价物

本领域技术人员能够认识到，或者说能够判断，仅采用常规试验，有许多等价物可以特定体现本发明的描述。这些等价物，也包括所有其他β-肾上腺素激动剂的活性异构体，包括，但不限于克仑特罗(Clenbuterol)，沙美特罗(Salmeterol)，特布它林(Terbutaline)，芬诺特罗(Fenoterol)，福莫特罗(Formoterol)，海索那林(Hexoprenaline)，异丙肾上腺素(Isoprenaline)，瑞尼特罗(Riniterol)，异他林(Isoetharine)，异丙喘宁(Metaproterenol)，瑞普罗特瑞罗(Reproterenol)，塞曼特罗(Cimaterol)，丙卡特罗(Procaterol)，卡布特罗(Carbuterol)，妥布特罗(Tulobuterol)，吡布特罗(Pibuterol)，马布特罗(Mabuterol)，比托特罗(Bitolterol)，莱克多巴氨(Ractopamine)，和班布特罗(Bambuterol)。所有这些都可以包含在本发明和下述权利要求的范围之内。正在研究中的β-2激动剂的优对映体液包含其中，例如：溴沙特罗(Broxaterol)，依坦特罗(Etanterol)，伊莫特罗(Imoxiterol)，耐米特罗(Namiterol)，吡库特罗(Picumeterol)，RP 58802，RU 42173，和ZK 90055。

本领域技术人员会认识到本发明有很多制药学上可以接受的药的盐形式，例如，硫酸盐(sulfate)，延胡索酸盐(fumarate)，氢溴酸盐(hydrobromide)，二氢氯化物(dihydrochloride)，甲烷磺酸盐(methanesulphonate)，羟基萘甲酸盐(hydroxynaphthoate)，氢氯化物(hydrochloride)或者其他适当的氢氧化物形态中的一个或几个。所有这些形态都包含在本发明和权利要求的范围内。

Claims (15)

1、一种减少哺乳动物和鸟类体内脂肪和/或体重的方法，其中包含施用于所述的哺乳动物或鸟类的一种治疗有效量的肾上腺素β-2受体激动剂沙丁胺醇的优对映体R-异构体或者一种药学上可接受的盐，其中所述沙丁胺醇的R-异构体或者盐实质上没有相应劣对映体的S-异构体。

2、一种减少哺乳动物和鸟类体内脂肪和/或体重的方法，其中包含施用于所述的哺乳动物或鸟类的一种治疗有效量的肾上腺素β-2受体激动剂沙丁胺醇的优对映体或者一种药学上可接受的盐，其中当最小化或者排除存在于劣对映体S-异构体的负面影响，其中所述沙丁胺醇的R-异构体或者盐实质上没有相应劣对映体的S-异构体。

3、如权利要求1或2所述的方法，其中所述沙丁胺醇优对映体的视觉纯度按重量计算要高大约85％。

4、如权利要求1或2所述的方法，其中所述沙丁胺醇优对映体的视觉纯度按重量计算要高大约98％。

5、如权利要求1或2所述的方法，其中所述的哺乳动物选自由牛、猪、马、羊、鹿、狗、猫和人类组成的组。

6、如权利要求1或2所述的方法，其中所述的鸟类选自由火鸡、鸡、鸭和鹅组成的组。

7、如权利要求1或2所述的方法，其中所述的哺乳动物是人类。

8、如权利要求1或2所述的方法，其中所述的哺乳动物是狗。

9、如权利要求1或2所述的方法，其中所述的哺乳动物是猫。

10、如权利要求1或2所述的方法，其中所述的有效量肾上腺素β-2受体激动剂沙丁胺醇的优对映体R-异构体或者一种药学上可接受的盐与包含蛋白质的食物材料混合。

11、如权利要求10所述的方法，其中所述食物材料中的所述沙丁胺醇R-异构体的浓度按重量计算从大约1ppm到大约20ppm。

12、如权利要求10所述的方法，其中所述哺乳动物或者鸟类按照口服剂型被口服喂食视觉上纯的沙丁胺醇R-异构体，包含大约0.5mg到大约5mg的视觉上活性的沙丁胺醇R-异构体，其实质上没有相应劣对映体S-异构体。

13、如权利要求10所述的方法，其中所述哺乳动物或者鸟类按照肠胃外的施用方式被施用视觉上纯的沙丁胺醇R-异构体，包含每日剂量从0.5mg到5mg的视觉上活性的沙丁胺醇R-异构体，其实质上没有相应劣对映体S-异构体。

14、如权利要求1或2所述的方法，其中所述哺乳动物或鸟类是超重的或肥胖的。

15、一种食物组合物，其包含有效量视觉上纯的肾上腺素β-2受体激动剂沙丁胺醇的R-异构体或药学上可接受的盐与含有蛋白质的食物材料的混合物，它减少哺乳动物或鸟类体内脂肪和/或体重，所述食物组合物实质上没有相应劣对映体的S-异构体。