CN1611196A - 简化的双袖套大鼠原位肝移植方法 - Google Patents

Abstract

简化的双袖套大鼠原位肝移植方法， 该方法包括供、受体腰背部垫高、腹壁横切口、弹性拉钩的牵引、供肝开放灌注、自体血液回输、肝上下腔静脉(SVC)的四方向牵引、SVC的“三定点”、“三缝一拉”的缝合方法、小针钩驱气。该方法使手术野显露更佳，操作视野广阔，更好地显露SVC，并可减少对肝脏的翻动及损伤，降低了手术的难度，使SVC缝合均匀、整齐、对合良好、光滑，避免血管膜内翻及前后壁缝闭在一起，加快吻合速度，缩短无肝期及手术时间，除气泡操作简单、确切、迅速。明显提高肝移植手术的成功率。特别适合初学者运用。

Description

简化的双袖套大鼠原位肝移植法

技术领域

本发明涉及大鼠肝移植的手术方法，由此，采用本方法可以明显缩短无肝期，简化手术，大大的提高大鼠原位肝移植的术后生存率。

背景技术

大鼠原位肝移植是研究有关肝脏再生、缺血再灌注损伤、器官保存、免疫等常用的动物模型，最早由Lee报道，不仅吻合PV、SVC、IVC、胆管，而且吻合肝动脉，肝移植手术成功(Lee S，Charter AC，Chandler JG，et al.A technique for orthotopic live transplantation in therat.Transplantation，1973，16(6)：664～67)，随后Lee又简化手术方式，不吻合肝动脉，肝移植仍成功(KamadaN，Calne RY.Orthotopic liver transplantation in the rat：Technique using cuff forportal vein anastomosis and biliary drainage.Transplantation，1979，28(1)：47～51)。1979年Kamada报道用双袖套法进一步简化了手术，虽然Miyata用三袖套法进一步的简化了手术方式，但术后生存率较低(Miyata M，Fisher H，Fuhs M，et al.A simple method for orthotopic livertransplantation in the rat：cuff technique for three vascularanastomosis.Transplantation，1980，30(4)：335～36)，故多数学者推崇双袖套法大鼠肝移植。由于双袖套法大鼠肝移植仍有较大的难度，初学者仍不易掌握，主要的困难是：1如何充分的显露手术野；2如何快捷高质量的进行肝上下腔静脉(SVC)的吻合。无论对初学大鼠肝移植的人员，还是对已成功的掌握大鼠肝移植模型的人员来说，正确克服上述两个困难是成功进行大鼠肝移植的保证。因此，国内外不少学者探索对对双袖套法大鼠肝移植进行改进(Kamada N，Calne RY.A surgical experience with five hundred thirty liver transplants in the rat.Surgery.1983，93：64-9。Peng Y，Gong JP，Yan LN，et al.Improved two-cuff technique fororthotopic liver transplantation in rat.Hepatobiliary Pancreat Dis Int.2004；3：33-7)

所以，需要探索出一种更为有效的双袖套法大鼠肝移植手术方法，以满足实际工作的要求。

发明内容

简化的双袖套法大鼠原位肝移植方法，该方法包括供、受体腰背部垫高、腹壁横切口、弹性拉钩的牵引、供肝开放灌注、自体血液回输、肝上下腔静脉(SVC)的四方向牵引、SVC的“三定点”、“三缝一拉”的缝合方法、小针钩驱气。该方法使手术野显露更佳，操作视野广阔，更好地显露SVC，并可减少对肝脏的翻动及损伤，降低了手术的难度，使SVC缝合均匀、整齐、对合良好、光滑，避免血管膜内翻及前后壁缝闭在一起，加快吻合速度，缩短无肝期及手术时间，除气泡操作简单、确切、迅速。明显提高肝移植手术的成功率。特别适合初学者运用。

腰背交界处垫高，脐以上，肋弓以下，腋后线以前的横切口，拉钩的一端固定在鼠板上，另一端钩在季肋部上，可充分暴露，使手术野显露更佳，操作视野广阔，更好地显露SVC，并可减少对肝脏的翻动及损伤，降低了手术的难度。可棉球局部压迫腹壁切口进行止血，效果好。

供肝门静脉灌注时不结扎门静脉(PV)。既可以向PV边插管边排管中的气泡，又便于万一灌注压力过高时，灌注液自此口流出。

自体血液回输。受鼠肝切除前经门静脉灌注生理盐水使肝内的血液回流到下腔静脉。受体的PV阻断后，在PV分叉处穿刺PV注射2ml平衡液，使受肝变灰白，明显增强了大鼠在无肝期的对有效循环量锐减的耐受性，减轻了有效循环量锐减引起的休克。

SVC的“四牵三定点三缝一拉”法吻合

SVC吻合是受体手术的难点。“四牵”法，即供、受体SVC吻合端的左右侧壁的缝线向左右、前壁向上下的牵引。“三定点”法，即供、受体SVC吻合端的左右侧壁缝线向左右牵引、缝合完后壁后，将SVC吻合端原向上下牵引的缝线改为向前吊起牵引固定，可确保吻合口均匀、整齐、光滑，避免血管膜内翻及前后壁缝闭。“三缝一拉”法，即连续缝合3针再一起收线。本方法使SVC缝合均匀、对合良好而且加快吻合速度，缩短了无肝期。

针钩去除气泡。进行PV及肝下下腔静脉吻合时驱除待吻合血管内的气泡时，可将注射器针头针尖弯成钩，制成“小针钩”，钩住少许血管断端前壁向前提拉以撑开血管壁作牵引，在推注生理盐水排气泡同时插入套管完成吻合。操作简单、确切、迅速，无需助手协助。

具体手术方法

1供体手术

乙醚麻醉后，腰垫横行垫高，取腹部横切口，由剑突到耻骨联合的中点向两侧延至腰大肌前。持针器钳夹剑突向头侧牵引固定，弹性拉钩牵拉季肋部，游离肝下下腔静脉(IVC)，游离、结扎、切断右肾静脉。结扎切断右肾上腺静脉。结扎切断肝后食管段之间的血管支，缝扎左膈静脉，在距肝门分叉约0.5cm处胆总管前壁做一斜切口，插入胆管支架管并固定。结扎幽门静脉、肝总动脉，游离门静脉(PV)至脾静脉汇合处。阴茎背静脉注射肝素生理盐水1ml，阻断PV及脾静脉，切开PV，向PV边插管边排管中的气泡，不封闭PV的插管处，注射器持续低压4℃生理盐水灌注肝脏，在灌注的同时剪开下腔静脉放血。灌注速度控制在2～3ml/min，以PV无扩张、肝不肿胀为宜，灌注肝脏8～10ml，依次切断PV、IVC，剪断SVC。取出供肝置4℃生理盐水中。

2修整供肝

按Kamada法修肝及套管后，修整SVC，用8/0缝线在左右两侧及前壁中点各缝一支持线。将各肝叶复位，纱布包裹。

3受体手术

受体术前30分钟注射阿托品同时皮下注射青霉素20IU。入腹腔及暴露方法、游离肝脏、处理右肾上腺静脉、肝与食管段之间血管支、左膈静脉及韧带同供体手术，分离IVC至右肾静脉上缘。结扎并切断肝固有动脉、胆总管上端。加深麻醉。用7/0缝线在受体PV左右支预缝置牵引线，左侧穿过残留的胆管系膜，右侧贯穿肝实质。

待麻醉处于第III期第三级后，停止麻醉，受体的PV阻断后，在PV分叉处穿刺PV注射2ml平衡液，使受肝变灰白。在右肾静脉上方阻断IVC，用哈巴狗钳阻断SVC，剪断SVC，于门静脉牵引线肝侧切断门静脉、动脉、胆管的分支，切断IVC。哈巴狗向头侧翻转固定在橡皮泥上。用供肝的SVC支持线在受体SVC断端两侧各缝合结扎固定一针，并向两侧牵引，SVC两断端的前壁上下牵引。先由左至右连续外翻缝合后壁，用8/0缝线将供、受体前壁中点缝合单结结扎后向头侧牵引，再由右向左连续缝合前壁。吻合SVC前后壁均连续缝合3针后再一起拉线。结束吻合前驱气。向外上方牵引PV左右支缝线，在PV分叉处切开，瞬间开放PV约0.5秒后再阻断PV，用接注射器的“小针钩”撑开PV管壁，同时冲洗供、受体管腔，将供体PV套入受体PV腔内并结扎固定，线结在供体套管固定线以下。恢复PV血供，去除SVC阻断钳。在受体IVC断端两侧用7/0缝线各吊一针牵引线，向外上方牵引，同法吻合IVC。将受体胆总管前壁剪成V形口，将已入供体胆管支架管另一端经此口套入胆总管，并固定，用大网膜覆盖胆管吻合处。棉球吸尽腹腔积液，肠管复位，两层缝合腹壁。经阴茎背静脉注肝素生理盐水1ml。颈背部皮下注射生理盐水5ml～10ml。

术后灯照保温0.5至1h，单笼喂养。术后三天内除给予饲料、水外，另给予10％葡萄糖水喂养。

Claims (9)

1简化的双袖套大鼠原位肝移植方法，该方法包括供、受体腰背部垫高、腹壁横切口、弹性拉钩的牵引、供肝开放灌注、自体血液回输、肝上下腔静脉(SVC)的四方向牵引、SVC的“三定点”、“三缝一拉”的缝合方法、小针钩驱气。该方法使手术野显露更佳，操作视野广阔，更好地显露SVC，并可减少对肝脏的翻动及损伤，降低了手术的难度，使SVC缝合均匀、整齐、对合良好、光滑，避免血管膜内翻及前后壁缝闭在一起，加快吻合速度，缩短无肝期及手术时间，除气泡操作简单、确切、迅速。明显提高肝移植手术的成功率。特别适合初学者运用。

2根据权利要求1的方法，所述的供、受体为大鼠，所述的腰背部指腰背交界处，所述的腹壁横切口指脐以上，肋弓以下，腋后线以前的横切口。

3根据权利要求2的方法，所述弹性拉钩的牵引指拉钩的一端固定在鼠板上，另一端钩在季肋部上。

4根据权利要求3的方法，所述供肝开放灌注指门静脉灌注时不结扎门静脉。

5根据权利要求4的方法，所述自体血液回输指受鼠肝切除前经门静脉灌注生理盐水使肝内的血液回流到下腔静脉。

6根据权利要求5的方法，所述SVC的四方向牵引指供、受体SVC吻合端的左右侧壁向左右、前壁向上下的牵引。

7根据前述任一权利要求的方法，其中所述SVC的“三定点”指供、受体SVC吻合端的左右侧壁向左右、前壁向前的牵引固定。

8根据前述任一权利要求的方法，其中所述“三缝一拉”的缝合指进行SVC吻合时，连续缝合三针后在一次收紧缝线。

9根据前述任一权利要求的方法，其中所述小针钩驱气指用针尖背折弯的小号注射针接盛生理盐水的注射器去除正在吻合的血管中的气泡。