CN1340707A - 尿hcg值多水平测定方法 - Google Patents
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Abstract
本发明是一种尿HCG值多水平测定方法,包括制备由手持端、测试端、显示区纤维膜层、位于测试端和显示区纤维膜层两层之间的金标抗体层组成的尿HCG值测试条;显示区上有测试条有效显示线、尿HCG值下限测试线、上限测试线和辅助测试线。观察被测尿液与测试条产生的显色反应,可以读出被测尿液HCG值是否大于预设值及其范围。
Description
本发明是关于尿HCG(人体绒毛膜促性腺激素)值多水平测定方法,通过检查尿HCG是否达到或超出某一预先确定的值,可以作为女子妊娠尿HCG值的半定量测定,属于化学、医药技术领域。
抗孕激素米非司酮配伍前列腺素用于终止闭经≤49天怀孕女子的早孕,其完全流产率可达90%以上,大量临床应用已证实这是一种安全、有效的非手术流产方法。应用该方法的最大问题是由于个体差异的存在,造成在相同的规定闭经时间段内的用药者,用药后其完全流产率上下波动却很大和药物流产后阴道出血持续时间比较长。
目前,国内外对于采用药物终止早孕的适用对象,所限定的孕日是距上次月经闭经日≤49天。但由于个体差异的存在,常常出现月经周期不规则,排卵提前或延迟,受孕日期有先后的情况,按停经天数计算孕日就有偏差。
临床研究发现,孕囊的大小与药物流产完全率和药物流产后阴道出血持续时间有强相关性。有研究表明(生殖与避孕1996 16 103-107),在药物流产前24小时以内测定尿HCG值、并用阴道B超测定孕囊直径的大小,用来分析它们与药物流产的关系,结果观察到孕囊直径的大小和尿HCG值能更实际地反映孕期。尿HCG值≤1250mIU/ml或孕囊直径<10mm的,药物完全流产率最高,分别为100%、96%;药物流产后阴道出血持续时间最短,分别为9.6天、11.2天。孕囊直径越小、尿HCG值越低,药物完全流产率越高、药物流产后阴道出血持续时间越短。尿HCG值与药物完全流产率呈负相关,r=-0.92(P<0.01),孕囊直径越大,药物完全流产率越低,二者呈负相关,r=-0.31(P<0.01)。
另有研究表明(中国计划生育学杂志1998 35 114-115)孕囊直径与药物流产后阴道出血持续时间呈正相关,r=0.169(P<0.001)。
为了缩短药物流产后阴道出血持续时间,可采取下列方法:
1、对于孕囊直径大于12.5mm者,如原经期<5天,则出血时间仍
较短;但如原经期≥5天,则出血时间就会较长。后者如改用阴
道后穹隆给予前列腺素则出血时间短于口服。
2、有研究报道(中国计划生育学杂志1998 35 121-122;中国计划
生育学杂志1998 34 82-83),服米非司酮配伍米索前列醇后加
服米非司酮50mg,旨在通过延长有效血药浓度加速蜕膜变形、
剥离、排出而缩短阴道出血时间,可以提高药物完全流产率、明
显缩短药物流产后阴道出血的持续时间。或者在应用前列腺素6
小时后孕囊仍未排出者,再加服米索前列醇600μg,可使其中
67.44%的对象排出孕囊,提高药物完全流产率。
3、有研究报道(生殖与避孕1996 16 199-202),服用米非司酮同
时加服紫草水煎剂,可使药物完全流产率高达99.00%,显著高
于不加药对照组的92.33%(P<0.01)。另有研究报道(Shanghai
Med J,1998 21 444-446),服用米非司酮同时加服氨甲碟呤每
日3次,每次5mg,再配伍米索前列醇,则药物完全流产率从
常规服药组的84%提高到95.31%,未见任何副反应;虽然白细
胞比用药前略有轻度下降,但在正常范围内,红细胞和血红蛋白
无明显变化。
女子怀孕早期尿HCG值与孕囊直径大小有正相关性。有研究报道(中国计划生育学杂志1998 35 114-115)尿HCG测量值与孕囊三经平均值有下列关系:
尿HCG值为312-1250mIU/ml时,孕囊直径为7.1±3.2mm(2.3-17.6);尿HCG值为2500-10000mIU/ml时,孕囊直径为12.3±4.8mm(3.3-6.6);尿HCG值为20000-40000mIU/ml时,孕囊直径为18.4±5mm(10-31.3);尿HCG值>80000mIU/ml时,孕囊直径为21.9±4.4mm(17-32)。
由于孕囊直径的大小与药物完全流产率及药物流产后阴道出血持续时间呈强相关性,因此在筛选药物流产的对象时,以孕囊直径的大小来判断给药的途径、用药剂量、确定是否需要加服其它药物,以提高药物完全流产率、减少药物流产后阴道出血持续时间是行之有效的。针对我国开展药物流产的实际情况,能配合使用阴道B超作为诊断手段来筛选药物流产对象,还有一定的困难。如果采取测试血样中的HCG值来筛选药物流产对象,需要在二天后才能得到结果,操作也极不方便,从而对于抗早孕诊断上没有实际意义。而使用测定尿的HCG值作为筛选药物流产对象的手段,就显得特别简单、有效、方便,在临床上具有重要的意义。
目前常用的测定尿HCG值的诊断试剂有:乳胶试剂;羊红血球凝聚抑制试剂;放免药盒;酶标试剂等。但是,乳胶试剂和酶免试剂一般只能对尿HCG值定性,放免和酶免的定量试剂必须配备放免和酶免仪。使用羊红血球凝聚抑制试剂能半定量地测定尿液的HCG值,灵敏度高,不需要特殊仪器设备,但使用时需要新鲜配置抗体与抗原试剂,操作上比较复杂。
本发明的目的是为了克服现有的尿HCG值测定方法的缺陷,提供一种对由于女子妊娠引起尿HCG值变化的多水平测定方法,作为女子是否妊娠的鉴别方法,并为药物流产中如何选择用药量、给药途径、是否需要加服其他药物,以及对药物流产后对象动态监护的参考数据的测定,提供一种快速、方便的测试方法。通过检查尿HCG是否达到或超出某一预先确定的值,可以方便地测出多水平的妊娠尿HCG值,测定的结果可靠性强。
本发明提出的这种对由于女子妊娠引起尿HCG值变化的多水平测定方法,得出的半定量指示的意义及其具体应用如下:
1、尿HCG值的测定可以用来在药物流产前对早孕女子进行筛选分类:
当尿HCG值<1250mIU/ml时,进行药物流产可以应用目前常规的用药量:米非司酮总量150mg,口服米索前列醇600μg,药物完全流产率可以达到98-100%;
当尿HCG值处于1250mIU/ml-10000mIU/ml之间时,进行药物流产可采取加服米非司酮50mg或者加服米索前列醇200μg的方法以提高药物完全流产率;
当尿HCG值>10000mIU/ml时,进行药物流产必须增加其他配伍药物,才能使药物完全流产率接近98%。建议加服紫草或氨甲碟呤。
所以,进行药物流产时如何选择用药量、给药途径、是否需要加服其他药物,必须根据尿HCG值而决定,以提高药物完全流产率。
2、可以在药物流产胎囊排出后用尿HCG值的测定来进行监护:
有研究报道(生殖与避孕1996 16 103-107),对药物流产胎囊排出后的对象用尿HCG值的测定来进行动态监护,发现尿HCG值的下降可以分为三种类型:
①迅速下降型:其92%的药物流产对象阴道出血不超过3周,以后一般也不会发生大出血;
②阶梯样下降型:其58%的药物流产对象阴道流血时间在3周以内;
③平台样下降型:这是值得注意的情况,其76%的药物流产对象阴道出血时间会超过3周,大出血多发生在药物流产后的第21天左右和转经时。
所以,在药物流产过程中,宜对药物流产对象用尿HCG值的测定来进行动态监护,如果发现尿HCG值的下降呈平台样下降型,伴有阴道出血时间长,出血时多时少,色鲜红者,建议施行刮宫术,时间以21天左右为限;以免长期阴道出血,以致最终发生大出血的危险。
可见尿HCG值的测定在临床上具有重要的意义;而且,不同水平尿HCG值的测定在对于药物流产前对早孕女子进行筛选分类、在药物流产后进行监护,更具有不可替代的作用。
本发明提供的这种对由于女子妊娠引起尿HCG值变化的多水平测定方法,其工作原理是采用在定性的克隆抗体技术的基础上,研制出来的β-HCG酶标测定技术。采用本发明的尿HCG值多水平测定方法制出的多水平尿HCG值测试条,其结构如下:
1、多水平尿HCG值测试条由手持端、测试端、显示区纤维膜层、位于测试端和显示区纤维膜层两层之间的金标抗体层组成;
这里所述的测试端为普通的滤纸等吸水材料;
这里所述的显示区纤维膜层一般为硝酸纤维膜层,醋酸纤维膜层,或硝酸、醋酸混合纤维膜层等组成;
手持端位于与测试条的测试端相对的另一端,它可以由与显示区纤维膜层不相同的材料制成,也可以由与显示区纤维膜层相同的材料制成。在后一种情况下,手持端可以是显示区纤维膜层的延长部分。
2、显示区纤维膜层上有由IgG抗体涂附而成的测试条有效显示线,这样的测试条有效显示线至少有一条;
3、显示区纤维膜层上还有由能与人体绒毛膜促性腺激素(HCG)产生显色反应的抗HCG抗体涂附而成的尿HCG值测试线,包括:下限测试线、辅助测试线和上限测试线。下限测试线和上限测试线各为一条,辅助测试线至少为一条;
各条测试线由不同含量的抗HCG抗体涂附而成。以对于尿HCG值分别为小于25mIU/ml、在25-1250mIU/ml之间、在1250-10000mIU/ml之间、大于10000mIU/ml等四种情况需要鉴别为例,相对应于上述需要鉴别的后三种情况而言,各条测试线分别称为下限测试线(尿HCG值在25-1250mIU/ml之间)、辅助测试线(尿HCG值在1250-10000mIU/ml之间)、上限测试线(尿HCG值大于10000mIU/ml);各条测试线所含的抗HCG抗体的量,应按下列原则确定:
对于尿HCG值小于25mIU/ml时,下限测试线和其余各条测试线均不应呈现紫色;
对于尿HCG值在25-1250mIU/ml之间时,下限测试线能够呈现紫色,而其余各条测试线均不应呈现紫色;
对于尿HCG值在1250-10000mIU/ml之间时,下限测试线和辅助测试线应能够呈现紫色,而其余各条测试线均不应呈现紫色;
对于尿HCG值>10000mIU/ml时,下限测试线、辅助测试线和上限测试线均应呈现紫色。
如果对于需要鉴别的尿HCG值为与上述例子中不相同的情况下,可以按照上例,相对应于需要鉴别的不同情况,分别确定测试线的数目:
例如,确定了下限值、上限值、辅助值1、辅助值2....辅助值N(N为辅助值的个数)的数值及其个数,则辅助测试线的数目为N个,测试线的总数目应为N+2;辅助值的个数N一般为2-4。
各测试线所含的抗HCG抗体的量,应按同样的原则确定。即:能够区分需要鉴别的尿HCG的不同的值或其范围。
只要测试条上的金标抗体层没有失效,测试条有效显示线就应呈现紫色。
测试条下限测试线、辅助测试线、上限测试线、有效显示线等各条线的相对位置可以按照使用习惯排列,一般从测试端向手持端的方向,依次按下限测试线、辅助测试线、上限测试线、有效显示线的顺序在显示区纤维膜层上排列,但并非一定要按照这样的顺序排列。例如,各下限测试线、辅助测试线、上限测试线的相对位置可以相互改变。
测试条下限测试线、辅助测试线、上限测试线、有效显示线等各条线之间有一个空白区域,它不涂附任何能与人体绒毛膜促性腺激素(HCG)产生显色反应的抗HCG抗体。该空白区域的存在,可以分隔开上述各条线,以有利于观察测试结果,并可避免各条线之间的相互干扰。
下面以三水平尿HCG值测试条为例,说明本发明所述的尿HCG值多水平测定方法的使用:
这里选择的下限值为25mIU/ml、上限值为10000mIU/ml、辅助值为1250mIU/ml、辅助值的个数为1,辅助测试线的数目为1。只要尿HCG值大于25mIU/ml下限测试线就显示颜色,只要尿HCG值大于1250mIU/ml辅助测试线就显示颜色,只要尿HCG值大于10000mIU/ml上限测试线就显示颜色。
测试尿液时,手持测试条的手持端,将测试端插入被测女子尿液中,尿液被吸入测试端,然后通过金标抗体层进入显示区纤维膜层,尿液沿测试条逐渐上升,越过测试条上的各条测试线以及测试条有效显示线,到达测试条顶端,即取出测试条。根据测试条是否显示颜色、以及显示颜色的测试条的不同,能够表示不同的尿HCG值。
1、显示区纤维膜层上的测试条有效显示线如果呈现紫色,表示该测试条是有效的,同时;
2、如果由抗HCG抗体涂附而成的下限测试线呈现紫色,表示被测尿液为阳性,尿HCG值>25mIU/ml;
3、如果由抗HCG抗体涂附而成的尿HCG值辅助测试线呈现紫色,而且紫色的颜色深度与测试条有效显示线的颜色深度相当,表示尿HCG值相当于1250mIU/ml;如果辅助测试线紫色的颜色深度浅于测试条有效显示线的颜色深度,表示尿HCG值在25-1250mIU/ml之间。辅助测试线紫色的颜色深度与测试条有效显示线的颜色深度接近的程度,与尿HCG值接近1250mIU/ml值的程度是平行的;
4、如果尿HCG值辅助测试线呈现紫色,其颜色深度与测试条有效显示线的颜色深度相当;同时由抗HCG抗体涂附而成的尿HCG值上限测试线也呈现紫色,其紫色的颜色深度浅于测试条有效显示线的颜色深度,表示尿HCG值在1250-10000mIU/ml之间;
5、如果测试条有效显示线、下限测试线、尿HCG值辅助测试线、尿HCG值上限测试线均呈现紫色,而且测试条有效显示线紫色的颜色深度与其余三条线紫色的颜色深度相当,则表示被测尿液的尿HCG值>10000mIU/ml;
6、如果各条测试线均不呈现紫色,则表示被测尿液的尿HCG值小于25mIU/ml。
采用本发明所述的对由于女子妊娠引起尿HCG值变化的多水平测定方法制出的多水平尿HCG值测试条,不但能完全取代现有的定性尿HCG早孕诊断试纸,而且还能反映出被测尿中HCG值所处的量值水平。本发明所述的尿HCG值多水平测定方法,可以作为女子是否妊娠的鉴别方法,并为药物流产中如何选择用药量、给药途径、是否需要加服其他药物,以及对药物流产后对象动态监护的参考数据的测定,提供了一种快速、方便的测试方法,不需要其他仪器设备的配合,具有重要的实际意义。
以下的实施例将进一步说明本发明。
实施例一、
通过检查尿HCG是否达到或超出预设值的尿HCG值多水平测定方法,包括:
步骤一:制备由手持端、测试端、显示区纤维膜层、位于测试端和显示区纤维膜层两层之间的金标抗体层组成的多水平尿HCG值测试条。显示区纤维膜层为硝酸纤维膜层,测试端为普通的滤纸,手持端位于与测试条的测试端相对的另一端,显示区纤维膜层上有由IgG抗体涂附而成的测试条有效显示线,还有由能与人体绒毛膜促性腺激素(HCG)产生显色反应的抗HCG抗体涂附而成的尿HCG值下限测试线、辅助测试线和上限测试线。
确定待测尿的HCG值下限值为25mIU/ml、上限值为10000mIU/ml、辅助值为1250mIU/ml,辅助测试线为一条。配制不同含量的、能与人体绒毛膜促性腺激素(HCG)产生显色反应的抗HCG抗体,使满足:
1、只要尿HCG值大于25mIU/ml,所配抗HCG抗体就发生显色反应,将其涂附在显示区纤维膜层上,作为下限测试线;
2、只要尿HCG值大于1250mIU/ml,所配抗HCG抗体就发生显色反应,将其涂附在显示区纤维膜层上,作为辅助测试线;
3、只要尿HCG值大于10000mIU/ml,所配抗HCG抗体就发生显色反应,将其涂附在显示区纤维膜层上,作为上限测试线;
4、将IgG抗体涂附在显示区纤维膜层上,作为测试条有效显示线;
5、各下限测试线、辅助测试线、上限测试线、有效显示线等各条线之间的间隔为2毫米至5毫米。
步骤二:将测试条的测试端插入被测女子尿液中,尿液被吸入测试端,然后通过金标抗体层进入显示区纤维膜层,尿液沿测试条逐渐上升,越过测试条上的各条测试线以及测试条有效显示线;到达测试条顶端,即取出测试条。观察产生的显色反应,如果:
测试条有效显示线呈现紫色,说明测试数据有效,同时:
各条测试线均不呈现紫色,表示被测尿液HCG值小于25mIU/ml;
下限测试线呈现紫色,但辅助测试线、上限测试线均不呈现紫色,表示被测尿液HCG值在25-1250mIU/ml;
辅助测试线呈现紫色、但上限测试线不呈现紫色,表示被测尿液HCG值在1250-10000mIU/ml;
上限测试线呈现紫色,表示被测尿液HCG值大于10000mIU/ml。
实施例二、
按照实施例一所述尿HCG值多水平测定方法,但步骤一中的测试条手持端是显示区纤维膜层的延长部分。
实施例三、
按照实施例一、或二所述尿HCG值多水平测定方法,但步骤一中的测试条显示区纤维膜层为醋酸纤维膜层,或硝酸、醋酸混合纤维膜层。
实施例四、
通过检查尿HCG是否达到或超出预设值的尿HCG值多水平测定方法测试女子尿液HCG值,作为女子早孕检查和选择药物流产方式的方法:
按照实施例一、二或三的方法测试女子尿液HCG值,如果:
各条测试线均不呈现紫色,表示被测尿液HCG值小于25mIU/ml,被测女子未怀孕;
下限测试线呈现紫色,但辅助测试线、上限测试线均不呈现紫色,表示被测尿液HCG值在25-1250mIU/ml,被测女子可能怀孕,进行药物流产可以应用目前常规的用药量:米非司酮总量150mg,口服米索前列醇600μg,药物完全流产率可以达到98-100%;
辅助测试线呈现紫色、但上限测试线不呈现紫色,表示被测尿液HCG值在1250-10000mIU/ml,被测女子可能怀孕,进行药物流产可采取加服米非司酮50mg或者加服米索前列醇200μg的方法以提高药物完全流产率;
上限测试线呈现紫色,表示被测尿液HCG值大于10000mIU/ml,被测女子可能怀孕,进行药物流产必须增加其他配伍药物,才能使药物完全流产率接近98%。建议加服紫草或氨甲碟呤。
实施例五、
通过检查尿HCG是否达到或超出预设值的尿HCG值多水平测定方法测试女子尿液HCG值,作为药物流产后进行监护的方法:
按照实施例一、二或三的方法测试女子尿液HCG值,如果发现尿HCG值的下降呈平台样下降型,伴有阴道出血时间长,出血时多时少,色鲜红者,应施行刮宫术,时间以21天左右为限;以免长期阴道出血,以致最终发生大出血的危险。
实施例六、
按照实施例一、二所述尿HCG值多水平测定的方法,但步骤一中的测试条显示区纤维膜层上的辅助测试线为2-4条。
实施例七、
按照实施例三所述尿HCG值多水平测定的方法,但步骤一中的测试条显示区纤维膜层上的辅助测试线为2-4条。
Claims (5)
1、一种尿HCG值多水平测定方法,包括:
步骤一:制备由手持端、测试端、显示区纤维膜层、位于测试端和显示区纤维膜层两层之间的金标抗体层组成的尿HCG值测试条;
这里的显示区纤维膜层为硝酸纤维膜层,测试端为普通滤纸,手持端位于与测试条的测试端相对的另一端,显示区纤维膜层上有由IgG抗体涂附而成的测试条有效显示线,还有由能与人体绒毛膜促性腺激素(HCG)产生显色反应的抗HCG抗体涂附而成的尿HCG值下限测试线和上限测试线;
步骤二:将测试条的测试端插入被测尿液中,尿液被吸入测试端,然后通过金标抗体层进入显示区纤维膜层,越过测试条上的各条测试线以及测试条有效显示线,到达测试条顶端,观察产生的显色反应,读出被测尿液HCG值是否大于预设值,其特征在于显示区纤维膜层上还有由能与人体绒毛膜促性腺激素(HCG)产生显色反应的抗HCG抗体涂附而成的尿HCG值辅助测试线;
这里待测尿的预设HCG值的下限值为25mIU/ml、上限值为10000mIU/ml、辅助值为1250mIU/ml,辅助测试线为一条;
下限测试线涂附的能与人体绒毛膜促性腺激素(HCG)产生显色反应的抗HCG抗体的含量,满足在尿HCG值大于25mIU/ml时就发生显色反应;
辅助测试线涂附的能与人体绒毛膜促性腺激素(HCG)产生显色反应的抗HCG抗体的含量,满足在尿HCG值大于1250mIU/ml时就发生显色反应;
上限测试线涂附的能与人体绒毛膜促性腺激素(HCG)产生显色反应的抗HCG抗体的含量,满足在尿HCG值大于10000mIU/ml时就发生显色反应;
各下限测试线、辅助测试线、上限测试线、有效显示线等各条线之间的间隔为2毫米至5毫米;
测试后观察产生的显色反应,如果测试条有效显示线呈现紫色,说明测试数据有效,同时:
各条测试线均不呈现紫色,表示被测尿液HCG值小于25mIU/ml;
下限测试线呈现紫色,但辅助测试线、上限测试线均不呈现紫色,表示被测尿液HCG值在25-1250mIU/ml;
辅助测试线呈现紫色、但上限测试线不呈现紫色,表示被测尿液HCG值在1250-10000mIU/ml;
上限测试线呈现紫色,表示被测尿液HCG值大于10000mIU/ml。
2、按权利要求1所述的尿HCG值多水平测定方法,其特征在于步骤一中的测试条手持端是显示区纤维膜层的延长部分。
3、按权利要求1、2所述的尿HCG值多水平测定方法,其特征在于步骤一中的测试条显示区纤维膜层为醋酸纤维膜层,或硝酸、醋酸混合纤维膜层。
4、按权利要求1、2所述的尿HCG值多水平测定方法,其特征在于步骤一中的测试条显示区纤维膜层上的辅助测试线为2-4条。
5、按权利要求3所述的尿HCG值多水平测定方法,其特征在于步骤一中的测试条显示区纤维膜层上的辅助测试线为2-4条。
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