CN1216446A - 动物饲料添加剂 - Google Patents

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L·B·詹森
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Abstract

本发明涉及在动物饲料中同时或依次组合使用一种或多种Ⅰ型木聚糖裂解酶和一种或多种Ⅱ型木聚糖裂解酶,本发明也涉及含有这类木聚糖裂解酶组合的动物饲料和动物饲料添加剂。

Description

动物饲料添加剂
本发明涉及动物饲料中一种或多种Ⅰ型木聚糖裂解酶和一种或多种Ⅱ型木聚糖裂解酶的组合使用,如后所述。本发明还涉及含有这类木聚糖裂解酶组合的动物饲料和动物饲料添加剂。
能够用作动物饲料组分的植物原料的量及类型常常受制于动物消化它们的能力。饲料强化酶类是指可以通过改善饲料的易消化性从而增强饲料利用效率的、通常来源于微生物界的酶类。
饲料强化酶类加入动物饲料中,能够改善动物体内对植物细胞壁材料的降解(这部分是由于肠内粘度的降低),使得动物能更好地利用所获得的植物养分。这样,动物的生长率和/或饲料转化率(即相应于体重增量的饲料摄取量)得到了提高。
木聚糖裂解酶(EC 3.2.1.8)是众所周知的饲料强化酶类。一种理论认为,它们的基本作用是减少饲料的粘度,然而另一种理论则强调木聚糖裂解酶能够增加被植物细胞壁所包围的营养物的可获得性。由此,WO 94/21 785中描述了来自棘孢曲霉的木聚糖酶以及它们作为动物饲料添加剂的应用,特别是在具有高含量的阿拉伯木聚糖和葡糖醛酸木聚糖的动物饲料组合物中,例如在含有诸如大麦、小麦、黑麦、燕麦或玉米等谷物的饲料中的应用。
WO 95/23514描述了一种可以减少植物原料粘度并将植物原料分离产生所需组分的工艺,该工艺包括利用一种对水溶性/水不溶性多缩戊糖有特异活性的木聚糖酶制剂来处理植物原料。然而WO 95/23514并没有涉及到木聚糖酶混合物。
根据本发明,已经发现可以根据降解不同底物的方式来区分木聚糖裂解酶。此外本发明还惊人地发现,两种不同类型的木聚糖酶组合作用时与两种酶分别作用时相比较,前者效果要更好一些,即具有协同效果。
因此,本发明的主要目的之一是在动物饲料中组合使用这两种类型的木聚糖裂解酶。具体地说,就是同时或依次使用它们。
本发明的另一主要目的是提供一种动物饲料添加剂,该添加剂可以促进动物饲料中的能量利用。相应地,在一主要方面,本发明提供了含有一种或多种Ⅰ型木聚糖裂解酶与一种或多种Ⅱ型木聚糖裂解酶的混合物的动物饲料添加剂。
本发明可由下述参考附图进一步说明,其中:
图1显示了六种不同木聚糖裂解酶〔即(A)多组分裸木霉(Trichoderma reesi)木聚糖酶制剂;(B)单一组分棘孢曲霉木聚糖酶制剂;(C)单一组分鞋垫腐质霉木聚糖酶制剂;(D)单一组分Thermomyces lanuginosus木聚糖酶制剂;(E)多组分鞋垫腐质霉木聚糖酶制剂;(F)多组分木霉木聚糖酶制剂〕的作用效果。根据实施例1,六种木聚糖酶对小麦悬浮液粘度的作用效果是在所谓的胃蛋白酶期后测得的,并用相应于酶浓度(FXU/g小麦)的相对粘度(%)来表示;
图2显示了与图1相同的六种酶对小麦悬浮液的作用效果,并且也用相应于酶浓度(FXU/g小麦)的相对粘度(%)来表示,但是其数值是在实施例1中所说的胰蛋白酶期后测得的;
图3显示了胃蛋白酶期后测得的两种单个Ⅰ型和Ⅱ型木聚糖酶制剂(即分别为制剂D和A)分别对小麦悬浮液粘度的作用效果、理论计算所得的加和效果以及这两种酶制剂混合物的作用效果之间的比较,作用效果可用相对粘度的百分数表示。栏Ⅰ为制剂A和D的组合作用效果,栏Ⅱ为制剂A和D的理论加和效果,栏Ⅲ为单个制剂D的作用效果,栏Ⅳ为单个制剂A的作用效果;以及
图4与图3一样,显示了相同的两种单个Ⅰ型和Ⅱ型木聚糖酶制剂对小麦悬浮液粘度的作用效果,但此处的作用效果是在胰蛋白酶期后测得的。
Ⅰ型和Ⅱ型木聚糖酶
根据本发明,已经发现了可以通过降解不同底物的方式而区分木聚糖裂解酶。另外还惊人地发现,与两种不同类型木聚糖裂解酶分别作用的效果相比较,这两种酶类的组合作用效果有所增强,即具有协同效果。
可通过如参照其对小麦悬浮液粘度的作用来确定木聚糖裂解酶的类型。如本文所定义,Ⅰ型木聚糖裂解酶可增加小麦悬浮液的起始粘度,而Ⅱ型木聚糖裂解酶不影响或可降低小麦悬浮液的起始粘度。具体地说,前面所说的起始粘度的提高可参见本文的图1和图2,其中显示了起始相对粘度或在低FXU用量时增加的相对粘度。
上述所指的两种不同类型木聚糖裂解酶的组合作用可以是同时作用的(即这两种酶同时具有活性),也可以是依次作用的(即第一种类型的酶先起作用,第二种酶随后作用)。依次作用类型中,在第二种类型酶发挥作用时,第一种酶可以有活性,也可以无活性,即分别为同时并依次作用,及单纯的依次作用。在所有这些情形下均观察到对饲料粘度的协同作用。
实施例1中详细描述了木聚糖裂解酶类型的确定方法。
动物饲料和动物饲料添加剂
本发明提供了含有一种或多种Ⅰ型木聚糖裂解酶与一种或多种Ⅱ型木聚糖裂解酶的混合物的动物饲料及动物饲料添加剂。
具体地说,本发明内容中,动物饲料意指可以被动物咀嚼、食入或消化的任何天然或人工食物、谷物粗粉等等或这类粗粉的组分。
本发明内容中,动物饲料添加剂是含有一种或多种饲料增效酶类及适宜载体和/或赋形剂的酶制剂。具体地说,该酶制剂是以适宜于被添加到动物饲料中的形式提供的。可根据本领域已知方法制备本发明的动物饲料添加剂,并可以干粉制剂或液体制剂的形式提供该添加剂。欲包含于制剂中的酶类可选择性地根据本领域已知方法进行稳定化。
本发明的动物饲料添加剂可能是颗粒状酶产品,该酶产品可能已与饲料组分混合,或更优选地,它可以是预混合物的组分之一。该颗粒状酶产品可以具包膜或不具包膜。优选颗粒酶的颗粒与饲料和预混合物组分的颗粒大小相当。这提供了一条可将酶掺入至饲料中的安全而便利的途径。
另外,本发明的动物饲添加剂可以是已被稳定化的水状或油状浆液的液态组合物。
本发明的动物饲料添加剂可以在体内或体外发挥其作用。可以通过预处理动物饲料而发挥添加剂的作用,必要时可随后灭活这些酶。但是通常木聚糖酶是在体内发挥其作用的,即在消化过程中,它们在动物消化系统内直接作用。本发明的饲料添加剂特别适于添加到含有高含量阿拉伯木聚糖和葡糖醛酸木聚糖的动物饲料组合物如含有诸如小麦、大麦、燕麦、黑麦或玉米等谷物的饲料中。
在一个优选实施方案中,所提供的动物饲料添加剂中Ⅰ型木聚糖裂解酶与Ⅱ型木聚糖裂解酶的比例在约1/9至约9/1之间(由木聚糖裂解酶活性所确定)。即如用FXU表示,木聚糖裂解酶活性总量的10-90%来自Ⅰ型木聚糖裂解酶。
在另一个优选实施方案中,所提供的动物饲料添加剂中Ⅰ型木聚糖裂解酶与Ⅱ型木聚糖裂解酶之比在约2/8至约8/2之间(由木聚糖裂解酶活性所确定)。即如用FXU表示,木聚糖裂解酶活性总量的20-80%来自Ⅰ型木聚糖裂解酶。
在第三个优选实施方案中,所提供的动物饲料添加剂中Ⅰ型木聚糖裂解酶与Ⅱ型木聚糖裂解酶之比约在3/7至7/3之间(由木聚糖裂解酶活性所确定)。即如用FXU表示,木聚糖裂解酶活性总量的30-70%来自Ⅰ型木聚糖裂解酶。
在第四个优选实施方案中,所提供的动物饲料添加剂中Ⅰ型木聚糖裂解酶与Ⅱ型木聚糖裂解酶之比约在4/6至6/4之间(由木聚糖裂解酶活性所确定)。即如用FXU表示,木聚糖裂解酶活性总量的40~60%来自Ⅰ型木聚糖裂解酶。
在第五个优选实施方案中,所提供的动物饲料添加剂中Ⅰ型木聚糖裂解酶与Ⅱ型木聚糖裂解酶之比约为5/5(由木聚糖裂解酶活性所确定)。即如用FXU表示,木聚糖裂解酶活性中Ⅰ型和Ⅱ型所占比例大致相等。
在第六个优选实施方案中,所提供的动物饲料添加剂中Ⅰ型木聚糖裂解酶与Ⅱ型木聚糖裂解酶之比约为1/20至20/1(由木聚糖裂解酶活性所确定)。即如用FXU表示,木聚糖裂解酶活性总量的5~95%来自Ⅰ型木聚糖裂解酶。Ⅱ型/Ⅰ型值为1/20的具体实施方案的结果已经非常令人满意了。
其它优选的比率为125∶1、100∶1、75∶1、50∶1和25∶1(Ⅰ型∶Ⅱ型或Ⅱ型∶Ⅰ型)。
单一组分制剂
在一个优选实施方案中,本发明提供了一种动物饲料添加剂,该添加剂中加入了一种或多种以单一组分制剂的形式提供的木聚糖裂解酶。根据本发明内容,单一组分制剂是一种酶制剂,在该制剂中基本上全部木聚糖裂解酶活性(即可测得的木聚糖裂解酶活性)都归因于某一个木聚糖裂解酶组分。该单一组分制剂优选地可通过重组DNA技术途径获得。
在一个更特别的实施方案中,所有木聚糖裂解酶均是以单一组分制剂的形式提供的。
饲料强化酶类
在一个更加优选的实施方案中,本发明的饲料添加剂还含有其它饲料强化酶类。
根据本发明内容,饲料强化酶类含有但并不限于下述酶类:其它的木聚糖裂解酶;α-半乳糖苷酶;β-半乳糖苷酶,特别是乳糖酶;肌醇六磷酸酶;β-葡聚糖酶,特别是内切-β-1,4-葡聚糖酶和内切-β-1,3(4)-葡聚糖酶;木糖苷酶;半乳聚糖酶,特别是阿拉伯半乳聚糖内切-1,4-β-半乳糖苷酶和阿拉伯半乳聚糖内切-1,3-β-半乳糖苷酶;内切葡聚糖酶,特别是内切-1,2-β-葡聚糖酶、内切-1,3-α-葡聚糖酶和内切-1,3-β-葡聚糖酶;果胶降解酶,特别是果胶酶,果胶酯酶、果胶溶酶、聚半乳糖醛酸酶、阿拉伯聚糖酶(arabinanases)、鼠李半乳糖醛酸聚糖酶(rhamnogalacturonases)、鼠李半乳糖醛酸聚糖乙酰酯酶(rhamnogalacturonan acetyl esterases)、鼠李半乳糖醛酸聚糖α-鼠李糖苷酶(rhamnogalacturonan-α-rhamnosidase)、果胶裂解酶和α-半乳糖醛酸糖苷酶(α-galacturonisidases);甘露聚糖酶;β-甘露糖苷酶;甘露聚糖乙酰酯酶;木聚糖乙酰酯酶;蛋白酶和脂解酶诸如脂肪酶和角质酶。
微生物资源
根据本发明,Ⅰ型和Ⅱ型木聚糖裂解酶可以来源于任何来源木聚糖裂解酶。优选木聚糖裂解酶最初来自于微生物源,特别是来自真菌源,细菌源或酵母株系。在重组型木聚糖裂解酶情况下,可以选用任何一种宿主细胞如真菌、细菌、酵母、转基因植物或动物细胞系以生产所述酶。
优选的真菌源木聚糖裂解酶最初来自曲霉属株系特别是棘孢曲霉、泡盛曲霉、黑曲霉、塔宾曲霉,旋孢腔菌属株系特别是碳旋孢腔菌(Cochliobolus carbonum),双担子菌属株系特别是Disporotrichumdimorphosporum,腐质霉属株系特别是鞋垫腐质霉,Neocallimastix株系特别是Neocallimastix patriciarum,Thermomyces株系特别是Thermomyces lanuginosus(同Humicola lanuginosa),或木霉属株系特别是Trichoderma longibrachiatum和裸木霉。
优选的细菌源木聚糖裂解酶来源于枯草杆菌属株系特别是短小芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌,网球菌属株系特别是嗜热网球菌,小四孢菌属株系特别是柔曲小四孢菌,链霉菌属株系,栖热孢菌属株系特别是那不勒斯栖热袍菌、海栖热袍菌和温泉栖热袍菌,或红嗜热盐菌属(Rhodothermus)株系。
在一个优选实施方案中,本发明的动物饲料添加剂中含有以单一组分制品形式提供的来自Thermomyces lanuginosus株系的Ⅰ型木聚糖裂解酶。
在另一个优选实施方案中,本发明的动物饲料添加剂中含有以单一组分制剂形式提供的来自木霉属株系的Ⅱ型木聚糖裂解酶。
木聚糖裂解酶活性
木聚糖裂解酶活性可用FXU单位表示,其测定是以remazol-木聚糖(经Remazol亮蓝R染色的4-O-甲基-D-葡糖醛酸-D-木聚糖,Fluka公司)作底物,在pH 6.0环境下进行的。
木聚糖酶样品与底物remazol-木聚糖一起温育。利用乙醇作终止反应剂沉淀未被降解的着色底物背景。上清中保留的蓝色深浅度(可在585nm处进行光谱测定)与木聚糖酶活性成正比,再在标准反应条件(即在0.1M磷酸缓冲液,pH 6.0,50.0℃下反应30分钟)下相对于酶标准确定木聚糖酶单位。
本发明可参考以下实施例进一步阐明,但这些实施例不以任何方式限制本发明的要求范围。
实施例1
木聚糖裂解酶类型的确定
本实施例显示如何通过木聚糖裂解酶对小麦悬浮液粘度的作用方式来区分木聚糖裂解酶,以及如何将它们分另归类于Ⅰ型和Ⅱ型木聚糖裂解酶。Ⅰ型木聚糖裂解酶可增加小麦悬浮液的起始粘度,而Ⅱ型木聚糖裂解酶作用后则不影响或者会降低小麦悬浮液的起始粘度。
已经证实,前肠消化液粘度是影响对经烤焙的小麦和大麦食品的消化能力的主要营养限制因素。已经发现,消化液粘度的降低与鸡饲料转化效率的提高密切相关。
在本实施例中,测定了六种不同的木聚糖裂解酶对小麦悬浮液起始粘度的作用活性:
A)多组分裸木霉(Trichoderma reesei,原先被称作Trichodermalongibrachiatum)木聚糖酶制剂(酶复合体,NovozymTM431,可从丹麦Novo NordiskA/S公司获得);
B)单一组分棘孢曲霉木聚糖酶制剂,可根据WO 94/21785的实施例3获得;
C)单一组分鞋垫腐质霉木聚糖酶制剂,可根据WO 92/17573的实施例1获得;
D)单一组分Thermomyces lanuginosus木聚糖酶制品,可根据WO96/23062的实施例1-3获得;
E)多组分鞋垫腐质霉木聚糖酶制剂(酶复合体,Bio-Feed PlusCT,可从丹麦Novo Nordisk A/S公司获得);以及
F)多组分木霉木聚糖酶制剂(酶复合体,AvizymeTM1300,可从芬兰Finnfeeds公司获得)。
酶活测定是在模拟家禽的胃肠内部环境条件下进行的。因此分别进行了两次测定,一次是在与胃蛋白酶一起温育45分钟(胃蛋白酶期,即模拟胃部环境)后测得的,另一次是在与胰蛋白酶一起再温育120分钟(胰蛋白酶期,即模拟小肠消化环境)后测得的。
因此准备了两份样品和两份对照溶液(空白样品,作对照),每份溶液含有溶于12ml胃蛋白酶溶液中的8.00克小麦。该胃蛋白酶溶液是将1.042克胃蛋白酶溶于250ml 0.1N HCl中制得的。搅拌2分钟后,将待测木聚糖酶样品溶液加入到上述两份样品中,此时计作0时刻(t=0)。对照中加入同体积的1M NaHCO3
在40℃下搅拌并温育45分钟(t=45)后,在其中一份样品中加入4ml 1M NaHCO3溶液,随即将该样品冷却至0℃。此样品代表胃蛋白酶期。同样,在t=45时,向其中一份对照溶液中加入4ml 1MNaHCO3
同时(t=45),向另一份样品中加入4ml胰蛋白酶溶液的上清液,该胰蛋白酶溶液是将200mg胰蛋白酶溶于50ml 1M NaHCO3中制得的。在40℃下搅拌并温育120分钟(t=165)后,将样品冷却至0℃。该样品代表胰蛋白酶期。同样在t=165时,向另一份对照溶液中加入4ml1M NaHCO3
经离心后,利用18号锭子,于40℃在Brookfield DV-111粘度计中测定两份样品的上清液的粘度,样品粘度是相对于空白样品粘度而测得的。
这些测定结果在附图1-2中以剂量/反应的形式给出。从这些图中可以看出,上面指定为C、D和E的木聚糖裂解酶代表Ⅰ型木聚糖裂解酶,它们可增加小麦悬浮液的起始粘度;而上面指定为A、B和F的木聚糖裂解酶则代表Ⅱ型木聚糖裂解酶,它们可降低小麦悬浮液的起始粘度。
实施例2
Ⅰ型和Ⅱ型木聚糖裂解酶混合物的作用效果
本实施例显示了Ⅰ型和Ⅱ型木聚糖裂解酶混合物降低小麦悬浮液粘度的作用效果。
运用上述实施例1中的方法,测定了Ⅰ型木聚糖酶C、D和E与Ⅱ型木聚糖酶A和B的组合作用效果。
如表1所示(与实施例1一样),Ⅰ型木聚糖酶的活性各不相同,而在胰蛋白酶期后可使粘度降低30%(制剂A和B)或60%(制剂B)剂量下Ⅱ型木聚糖酶的活性则保持稳定;即,对于制剂B来说,在0.01FXU/g小麦的酶活性下得到的相对粘度为0.7,在0.12 FXU/g的酶活性下得到的相对粘度为0.4;对于制剂A来说,在0.20 FXU/g小麦的酶活性下,得到的相对粘度约为0.7(图2)。
表1显示加入不同的木聚糖酶组合物以及单加Ⅰ型酶类后体外检测系统的相对粘度。此粘度值是对未加酶类的平行温育组的相对粘度。
如果仅用Ⅱ型木聚糖酶,必须使用相当高的酶量方能降低粘度。然而,同时加入Ⅱ型木聚糖酶时,即便在Ⅰ型+Ⅱ型木聚糖酶的总浓度小于单加Ⅰ型木聚糖酶时为观察到粘度变化而需加入的酶浓度下,仍可降低粘度。例如,当将0.12 FXU的木聚糖酶B和0.25 FXU的木聚糖酶C(即总活性0.37 FXU)混合使用时,在胃蛋白酶期可使粘度降低大约50%-相比较而言,若不与Ⅱ型木聚糖酶混合使用,甚至多达1.2 FXU的木聚糖酶C的作用也只会使粘度降低11%。通常酶的价格由其活性确定,因此,使用Ⅰ型和Ⅱ型酶混合物时就可以降低酶的价格。
表1小麦悬浮液的相对粘度
    Ⅱ型Ⅰ型 木聚糖酶C 木聚糖酶D 木聚糖酶E
 FXU/g小麦  0.25  0.3  0.6  1.2  0.22  0.56  1.12  0.1  0.3  0.7
未混合 胃蛋白酶期胰蛋白酶期  179150  170146  121118  8962  180140  161117  12279  123158  178139  139109
+木聚糖酶B 胃蛋白酶期0.01      胰蛋白酶期  11899  10682  8470  9776  9570  8358
+木聚糖酶B 胃蛋白酶期0.12      胰蛋白酶期  4936  5239  5434  9776  9570  8358  4938  5140  5440
+木聚糖酶A 胃蛋白酶期0.2       胰蛋白酶期  8762  7755  7750  7762  7455  6448  4936  5239  5434
另外,还将Ⅰ型和Ⅱ型两种木聚糖酶制剂(分别为制剂D和A)对小麦悬浮液粘度的作用效果与这两种制剂混合物的作用效果以及理论计算的加和作用效果都进行了比较。制剂D选用了3个活性水平,制剂A选用了一个活性水平(该活性水平可降低粘度30%,即相对粘度为0.7)。这些实验结果见图3和图4。
图3显示胃蛋白酶期(温育45分钟后,参看实施例1)后测得的作用效果,图4显示胰蛋白酶期(温育165分钟后,参看实施例1)后测得的作用效果。这些附图中作用效果用相对粘度百分数表示。
每组的第一栏(Ⅰ)代表使用制剂D和A混合物所得的实际相对粘度。因此,在图3和图4的第一组的栏(Ⅰ)中,使用了酶量为0.22 FXU/g小麦的制剂D和酶量为0.2 FXU/g小麦的制剂A的混合物;在第二组中,栏(Ⅰ)使用了酶量为0.56 FXU/g小麦的制剂D和酶量为0.2 FXU/g小麦的制剂A的混合物;在第三组中,栏(Ⅰ)使用了酶量为1.12 FXU/g小麦的制剂D和酶量为0.2 FXU/g小麦的制剂A的混合物。
图3和图4中每一组的第二栏(Ⅱ)代表利用倍增统计模型(amultiplicative statistical model)计算得出的混合物作用所得的理论粘度。因此,如图3中,第一组的栏(Ⅱ)代表使用0.22 FXU/g小麦的制剂D和酶量为0.2 FXU/g小麦的制剂A所得的理论加和效果,第二组的栏(Ⅱ)代表使用酶量为0.56 FXU/g小麦的制剂D和酶量为0.2 FXU/g小麦的制剂A所得的理论加和效果,第三组的栏(Ⅱ)代表使用酶量为1.12 FXU/g小麦的制剂D和酶量为0.2 FXU/g小麦的制剂A所得的理论加和效果。
每组的第三和第四栏(Ⅲ和Ⅳ)分别代表单独使用制剂D和A时所测得的实际相对粘度。因此,例如图3的第一组栏Ⅲ和栏Ⅳ分别代表使用酶量为0.42 FXU/g小麦的制剂D和酶量为0.42 FXU/g小麦的制剂A的作用效果。
从这些图中可以明显看出,使用制剂A和D测得的实际粘度比计算的累加值要低,这是由于这些酶之间存在协同作用。
目前推测Ⅰ型木聚糖酶如制剂D优先或初始(低用量下)作用于不溶性木聚糖(占木聚糖总量的约80-90%),由此释放出可溶性戊聚糖,因而使粘度增加。然而这些戊聚糖却是Ⅱ型木聚糖酶如制剂A的优选作用底物,因此当Ⅰ型和Ⅱ型木聚糖酶组合作用时,它们可降解更多的木聚糖并且使粘度充分降低,甚至最初被木聚糖所包埋的其它养分也变得有营养价值。
通常总活性较低时其协同作用最明显。这可能是因为当Ⅰ型木聚糖酶活性较高时,它们也会降解可溶性戊聚糖,因此会降低协同作用效果。
此外,统计数字表明,在胃蛋白酶期协同作用效果最强,这可能是由于此处粘度降低程度比胰蛋白酶期小,因而更有可能得到改善。

Claims (23)

1.在动物饲料中同时和/或依次地组合使用一种或多种Ⅰ型木聚糖裂解酶和一种或多种Ⅱ型木聚糖裂解酶的方法。
2.含有一种或多种Ⅰ型木聚糖裂解酶与一种或多种Ⅱ型木聚糖裂解酶的混合物的动物饲料。
3.一种动物饲料添加剂,该添加剂中含有一种或多种Ⅰ型木聚糖裂解酶与一种或多种Ⅱ型木聚糖裂解酶的混合物。
4.按照权利要求3的动物饲料添加剂,其中Ⅰ型木聚糖裂解酶与Ⅱ型木聚糖裂解酶的比率在约1/9至9/1范围内(由木聚糖裂解活性确定)。
5.按照权利要求3的动物饲料添加剂,其中Ⅰ型木聚糖裂解酶与Ⅱ型木聚糖裂解酶的比率在约2/8至8/2范围内(由木聚糖裂解活性确定)。
6.按照权利要求3的动物饲料添加剂,其中Ⅰ型木聚糖裂解酶与Ⅱ型木聚糖裂解酶的比率在约3/7至7/3范围内(由木聚糖裂解活性确定)。
7.按照权利要求3的动物饲料添加剂,其中Ⅰ型木聚糖裂解酶与Ⅱ型木聚糖裂解酶的比率在约4/6至约6/4范围内(由木聚糖裂解酶活性确定)。
8.按照权利要求3的动物饲料添加剂,其中Ⅰ型木聚糖裂解酶与Ⅱ型木聚糖裂解酶的比率约为5/5(由木聚糖裂解活性确定)。
9.按照权利要求3的动物饲料添加剂,其中Ⅰ型木聚糖裂解酶与Ⅱ型木聚糖裂解酶的比率约在1/20至20/1的范围内(由木聚糖裂解活性确定)。
10.按照权利要求3的动物饲料添加剂,其中Ⅰ型木聚糖裂解酶与Ⅱ型木聚糖裂解酶的比率约为20/1(由木聚糖裂解活性确定)。
11.按照权利要求3-10中任一项的动物饲料添加剂,其中至少有一种木聚糖裂解酶是来自鞋垫腐质菌的Ⅰ型木聚糖裂解酶。
12.按照权利要求3-10中任一项的动物饲料添加剂,其中至少有一种木聚糖裂解酶是来自Thermomyces lanuginosus的Ⅰ型木聚糖裂解酶。
13.按照权利要求3-12中任一项的动物饲料添加剂,其中至少有一种木聚糖裂解酶是来自棘孢曲霉的Ⅱ型木聚糖裂解酶。
14.按照权利要求3-12中任一项的动物饲料添加剂,其中至少有一种木聚糖裂解酶是来自木霉属株系的Ⅱ型木聚糖裂解酶。
15.按照权利要求14的动物饲料添加剂,其中木聚糖裂解酶是来自Trichoderma longibrachiatum或裸木霉株系的Ⅱ型木聚糖裂解酶。
16.按照权利要求3-15中任一项的动物饲料添加剂,其中至少有一种木聚糖裂解酶是以单一组分制剂形式提供的。
17.按照权利要求12的动物饲料添加剂,其中来自Thermomyceslanuginosus株系的Ⅰ型木聚糖裂解酶是以单一组分制剂的形式提供的。
18.按照权利要求14或15的动物饲料添加剂,其中来自木霉属株系的Ⅱ型木聚糖裂解酶是以单一组分制剂的形式提供的。
19.按照权利要求3-18中任一项的动物饲料添加剂,其中所有木聚糖裂解酶均以单一组分制剂形式提供。
20.按照权利要求3-19中任一项的动物饲料添加剂,该添加剂还含有一种或多种其它饲料强化酶类。
21.按照权利要求20的动物饲料添加剂,其中所述的其它饲料强化酶类选自含有下述酶的组中:其它木聚糖酶、α-半乳糖苷酶,β-半乳糖苷酶特别是乳糖酶,肌醇六磷酸酶,β-葡聚糖酶特别是内切-β-1,4-葡聚糖酶和内切-β-1,3(4)-葡聚糖酶,木糖苷酶,半乳聚糖酶特别是阿拉伯半乳聚糖内切-1,4-β-半乳糖苷酶和阿拉伯半乳聚糖内切-1,3-β-半乳糖苷酶,内切葡聚糖酶特别是内切-1,2-β-葡聚糖酶、内切-1,3-α-葡聚糖酶和内切-1,3-β-葡聚糖酶,果胶降解酶特别是果胶酶、果胶酯酶、果胶溶酶、聚半乳糖醛酸酶、阿拉伯聚糖酶、鼠李半乳糖醛酸聚糖酶、鼠李半乳糖醛酸聚糖乙酰酯酶、鼠李半乳糖醛酸聚糖α-鼠李糖苷酶、果胶裂解酶和α-半乳糖醛酸糖苷酶,甘露聚糖酶,β-甘露糖苷酶,甘露聚糖乙酰酯酶,木聚糖乙酰酯酶,蛋白酶和脂解酶如脂肪酶和角质酶。
22.制备权利要求2的动物饲料的方法,其中该饲料与一种或多种Ⅰ型木聚糖裂解酶和一种或多种Ⅱ型木聚糖裂解酶相混合。
23.制备权利要求3的动物饲料添加剂的方法,其中一种或多种Ⅰ型木聚糖裂解酶和一种或多种Ⅱ型木聚糖裂解酶与适当的载体和/或赋形剂相混合。
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