CN117897168A - 治疗视网膜血管病变的方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及治疗某些视网膜血管病变，诸如糖尿病性黄斑水肿、糖尿病性视网膜病变和年龄相关性黄斑变性等的方法。所述方法包括通过向患有视网膜血管病变的患者施用治疗有效剂量的本文公开的化合物来治疗所述患者。

Description

治疗视网膜血管病变的方法

相关申请的交叉引用

本申请要求于2021年4月13日提交的美国临时申请号63/174,188、于2021年8月26日提交的美国临时申请号63/237,454、于2022年2月11日提交的美国临时申请号63/309,260以及于2022年3月29日提交的美国临时申请号63/325,056的权益，这些美国临时申请的公开内容通过援引并入本文。

技术领域

本发明涉及治疗某些视网膜血管病变，诸如糖尿病性黄斑水肿、糖尿病性视网膜病变和年龄相关性黄斑变性的方法。

背景技术

病理性血管生成仍然是治疗某些视网膜血管病变，诸如糖尿病性黄斑水肿(DME)、糖尿病性视网膜病变(DR)和年龄相关性黄斑变性(AMD)的主要挑战之一，这些疾病是经常导致视力丧失和失明的严重疾病。

DME是慢性、控制不佳的糖尿病后糖尿病性视网膜病变(DR)的一种并发症，并且是糖尿病患者中最常见的危及视力的视网膜病变形式(Tan等人2016,IDF 2019)。大约每14名糖尿病患者中就有一人患有某种程度的DME(Coney 2019)。使用视网膜图像的糖尿病患者中DR的总体患病率估计为35％，其中危及视力的DR以12％存在(WHO 2015)。患病率取决于糖尿病的类型和疾病的持续时间。对于两种类型的糖尿病，即1型糖尿病(T1D)和2型糖尿病(T2D)，25年病期后，患病率接近30％(Browning等人2018)。

年龄相关性黄斑变性(AMD)是发达国家55岁以上个体严重视力丧失的主要原因，占全球法定失明的6％-9％(Wong等人Lancet Glob.Health(2014)；Jonas等人Asia PacJ.Ophthalmol(2017))。据估计，到2040年，全球约有2.88亿人将受到AMD的影响(Wong等人(2014))。

AMD是一种多因素致盲疾病。此前已有研究证明，氧化应激、衰老、DNA损伤和紫外线辐射可通过影响视网膜色素上皮(RPE)细胞的自噬功能、细胞衰老和免疫炎症反应而导致AMD(Wang等人Oxid Med Cell Longev.2019)。

以往稳定此类眼部疾病患者视力的护理标准涵盖激光光凝疗法、手术玻璃体切除术和维替泊芬(verteporfin)光动力疗法。目前，自2006年批准(雷珠单抗，ranibizumab)和2011年批准/>(阿柏西普，aflibercept)以来，抗血管内皮生长因子(抗VEGF)疗法及其恢复患有此类眼部血管疾病患者视力的能力已得到广泛应用。

然而，此类抗VEGF治疗常常会对健康血管产生脱靶效应。因此，辨别健康血管与患病血管之间的分子差异将有助于进行靶向治疗，该靶向治疗选择性地消除病理性脉管系统，同时保留对生理组织功能至关重要的血管。

抗VEGF护理标准的另一个缺点是，它们需要频繁(例如，每月甚至每两个月进行一次玻璃体内注射)和长期施用，以维持视力增加(Heier等人Ophthalmology2012；119:2537-48；Comparison of Age-Related Macular Degeneration Treatment Trials[CATT]Research Group 2016Ophthalmology 2016；123:1751-61)。这导致患者对这种频繁治疗方案的依从性较差。

还有证据表明，一些患者对抗VEGF治疗的反应不佳，以及一些患者对抗VEGF治疗根本没有反应。参见Brown DM等人,Ophthalmology.2013；120:2013–2022；和Nguyen-KhoaBA等人,BMC Ophthalmol.2012；12:11。

因此，需要开发一种优于标准护理的视网膜血管病变治疗方法。

发明内容

本发明提供了治疗DME或DR或AMD的新方法，这些新方法优于标准护理。

作为公开发明的一部分具体考虑的是：

实施例1.一种治疗患有视网膜血管病变的患者的方法，该方法包括向该患者施用治疗有效剂量的式I化合物的结晶固体葡甲胺盐(化合物-葡甲胺)：

(R)-5-(4-氯苯基)-1-异丙基-2-甲基-4-(3-(4-(4-((4-((1-(苯硫基)-4-(4-((膦酰氧基)甲基)哌啶-1-基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰氨基)苯基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡咯-3-羧酸，其中该治疗有效剂量为每只眼睛至多25ug化合物-葡甲胺。

实施例2.根据实施例1所述的方法，其中该式I化合物的结晶固体葡甲胺盐中的葡甲胺以1至3的化学计量比存在。

实施例3.根据实施例2所述的方法，其中该式I化合物的结晶固体葡甲胺盐在2℃至8℃的温度下稳定12个月或更长时间。

实施例4.根据实施例1至3中任一项所述的方法，其中该患者具有在70至20个早期治疗糖尿病性视网膜病变研究(ETDRS)字母之间的基线最佳矫正视力(BCVA)，或斯内伦视力表(Snellen chart)上的基线20/40至20/400。

实施例5.根据实施例1至4中任一项所述的方法，其中该患者先前已在基线处接受过抗血管内皮生长因子(抗VEGF)治疗。

实施例6.根据实施例5所述的方法，其中利用抗VEGF治疗的先前治疗发生在前6个月期间。

实施例7.根据实施例6所述的方法，其中该患者还呈现出以下中央子域厚度(CST)：≥350um，如通过SD-OCT在基线处所测量的；≥150μm，如通过SD-OCT在基线处所测量的；≥200μm，如通过SD-OCT在基线处所测量的；≥250μm，如通过SD-OCT在基线处所测量的；≥300μm，如通过SD-OCT在基线处所测量的；≥350μm，如通过SD-OCT在基线处所测量的。

实施例8.根据实施例1至7中任一项所述的方法，其中该患者具有在基线处<12％、在基线处<11％、在基线处<10％、在基线处<9％、在基线处<8％、在基线处<7％、在基线处<6％、在基线处<5％、在基线处<4％、在基线处<3％、在基线处<2％、在基线处<1％的血红蛋白A1C(HbA1C)。

实施例9.根据实施例1至8中任一项所述的方法，其中该患者具有在基线处≤23mmHg、在基线处≤22mmHg、在基线处≤21mmHg、在基线处≤20mmHg、在基线处≤19mmHg、在基线处≤18mmHg、在基线处≤17mmHg、在基线处≤16mmHg、在基线处≤15mmHg、在基线处≤14mmHg、在基线处≤13mmHg、在基线处≤12mmHg、在基线处≤11mmHg、在基线处≤10mmHg、在基线处≤9mmHg、在基线处≤8mmHg、在基线处≤7mmHg、在基线处≤6mmHg、在基线处≤5mmHg、在基线处≤4mmHg、在基线处≤3mmHg、在基线处≤2mmHg、在基线处≤1mmHg的眼内压(IOP)。

实施例10.根据实施例1至19中任一项所述的方法，其中该化合物-葡甲胺的治疗有效剂量为每只眼睛0.5ug、1ug、2ug、2.5ug、3ug、4ug、5ug、6ug、7ug、8ug、9ug、10ug、11ug、12ug、13ug、14ug、15ug、16ug、17ug、18ug、19ug、20ug、21ug、22ug、23ug、24ug或25ug。

实施例11.根据实施例1至10中任一项所述的方法，其中该化合物-葡甲胺的治疗有效剂量为每只眼睛0.5μg-1μg之间、每只眼睛1μg-2μg之间、每只眼睛2μg-2.5μg之间、每只眼睛2.5μg-3μg之间、每只眼睛3μg-4μg之间、每只眼睛4μg-5μg之间、每只眼睛5μg-6μg之间、每只眼睛6μg-7μg之间、每只眼睛7μg-8μg之间、每只眼睛8μg-9μg之间、每只眼睛9μg-10μg之间、每只眼睛10μg-11μg之间、每只眼睛11μg-12μg之间、每只眼睛12μg-13μg之间、每只眼睛13μg-14μg之间、每只眼睛14μg-15μg之间、每只眼睛15μg-16μg之间、每只眼睛16μg-17μg之间、每只眼睛17μg-18μg之间、每只眼睛18μg-19μg之间、每只眼睛19μg-20μg之间、每只眼睛20μg-21μg之间、每只眼睛21μg-22μg之间、每只眼睛22μg-23μg之间、每只眼睛23μg-24μg之间或每只眼睛24μg-25μg之间。

实施例12.根据实施例1至11中任一项所述的方法，其中该化合物-葡甲胺的治疗有效剂量为每只眼睛0.5–2ug之间、每只眼睛2–4ug之间、每只眼睛3–5ug之间、每只眼睛4–6ug之间、每只眼睛5–7ug之间、每只眼睛6–8ug之间、每只眼睛7–9ug之间、每只眼睛8–10ug之间、每只眼睛9-11ug之间、每只眼睛10–15ug之间、每只眼睛15–20ug之间、每只眼睛20–25ug之间。

实施例13.根据实施例1至12中任一项所述的方法，其中在施用该治疗有效剂量之前，首先将该化合物-葡甲胺以负荷剂量施用至患者的眼睛中。

实施例14.根据实施例13所述的方法，其中该化合物-葡甲胺的负荷剂量为每只眼睛0.5μg-1μg之间、每只眼睛1μg-2μg之间、每只眼睛2μg-2.5μg之间、每只眼睛2.5μg-3μg之间、每只眼睛3μg-4μg之间、每只眼睛4μg-5μg之间、每只眼睛5μg-6μg之间、每只眼睛6μg-7μg之间、每只眼睛7μg-8μg之间、每只眼睛8μg-9μg之间、每只眼睛9μg-10μg之间、每只眼睛10μg-11μg之间、每只眼睛11μg-12μg之间、每只眼睛12μg-13μg之间、每只眼睛13μg-14μg之间、每只眼睛14μg-15μg之间、每只眼睛15μg-16μg之间、每只眼睛16μg-17μg之间、每只眼睛17μg-18μg之间、每只眼睛18μg-19μg之间、每只眼睛19μg-20μg之间、每只眼睛20μg-21μg之间、每只眼睛21μg-22μg之间、每只眼睛22μg-23μg之间、每只眼睛23μg-24μg之间或每只眼睛24μg-25μg之间。

实施例15.根据实施例13所述的方法，其中该化合物-葡甲胺的负荷剂量为每只眼睛0.5–2ug之间、每只眼睛2–4ug之间、每只眼睛3–5ug之间、每只眼睛4–6ug之间、每只眼睛5–7ug之间、每只眼睛6–8ug之间、每只眼睛7–9ug之间、每只眼睛8–10ug之间、每只眼睛9-11ug之间、每只眼睛10–15ug之间、每只眼睛15–20ug之间、每只眼睛20–25ug之间。

实施例16.根据实施例13至15中任一项所述的方法，其中该化合物-葡甲胺的负荷剂量为每只眼睛50ul的总体积。

实施例17.根据实施例1至13中任一项所述的方法，其中将该治疗有效剂量的化合物-葡甲胺经玻璃体内施用至患者的眼睛中。

实施例18.根据实施例14至16中任一项所述的方法，其中将该负荷剂量的化合物-葡甲胺经玻璃体内施用至患者的眼睛中。

实施例19.根据实施例1至12、17中任一项所述的方法，其中将该治疗有效剂量的化合物-葡甲胺每2个月、每3个月、每4个月、每5个月、每6个月、每7个月、每8个月、每9个月、每10个月、每11个月、每12个月一次经玻璃体内施用至患者的眼睛中。

实施例20.根据实施例1至12、17中任一项所述的方法，其中将该治疗有效剂量的化合物-葡甲胺每2–3个月、每3–4个月、每5–6个月、每6–7个月、每8–9个月、每9–10个月、每11–12个月一次经玻璃体内施用至患者的眼睛中。

实施例21.根据实施例1至12、17、19至20中任一项所述的方法，其中将该治疗有效剂量的化合物-葡甲胺以每2个月单剂量、每3个月单剂量、每4个月单剂量、每5个月单剂量、每6个月单剂量、每7个月单剂量、每8个月单剂量、每9个月单剂量、每10个月单剂量、每11个月单剂量或每12个月单剂量经玻璃体内施用至患者的眼睛中。

实施例22.根据实施例1至12、17、19至20中任一项所述的方法，其中将该治疗有效剂量的化合物-葡甲胺以每2–3个月单剂量、每3–4个月单剂量、每5–6个月单剂量、每6–7个月单剂量、每8–9个月单剂量、每9–10个月单剂量、每11–12个月单剂量经玻璃体内施用至患者的眼睛中。

实施例23.根据实施例1至12、17、20至22中任一项所述的方法，其中将该治疗有效剂量的化合物-葡甲胺以单剂量经玻璃体内施用至患者的眼睛中一次。

实施例24.根据实施例23所述的方法，其中将该治疗有效剂量的化合物-葡甲胺以单剂量经玻璃体内施用至患者的眼睛中一次，不与之前的负荷剂量结合。

实施例25.根据实施例13至16、18中任一项所述的方法，其中将经玻璃体内施用至患者的眼睛中的负荷剂量按以下方式施用：每月一次IVT注射，持续2个月；或每月一次IVT注射，持续3个月；或2个月内至少一次IVT注射；或2个月内至少两次IVT注射；或2个月内至少三次IVT注射；或3个月内至少三次IVT注射；或3个月内至少两次IVT注射。

实施例26.根据实施例25所述的方法，其中在施用该治疗有效剂量之前，该负荷剂量之后有至少2个月、至少3个月、至少4个月、至少5个月、至少6个月、至少7个月、至少8个月、至少9个月、至少10个月、至少11个月、至少12个月的治疗间隔。

实施例27.根据实施例1至26中任一项所述的方法，其中该患者显示出自基线至少40μm、自基线50μm、自基线至少60μm、自基线至少70μm、自基线至少80μm、自基线至少90μm的CST降低，如通过SD-OCT所测量的。

实施例28.根据实施例1至27中任一项所述的方法，其中该患者进一步显示出与基线相比不存在黄斑流体，如通过SD-OCT所评估的。

实施例29.根据实施例1至27中任一项所述的方法，其中该患者进一步显示出与基线相比不存在渗出物，如通过SD-OCT所评估的。

实施例30.根据实施例1至29中任一项所述的方法，其中该患者不需要超过2次抗VEGF治疗抢救，或不需要超过3次抗VEGF治疗抢救，或不需要超过4次抗VEGF治疗抢救，或不需要超过5次抗VEGF治疗抢救。

实施例31.根据实施例30所述的方法，其中该患者不需要任何抗VEGF治疗抢救。

实施例32.根据实施例1至31中任一项所述的方法，其中该患者显示出以下改善：BCVA较基线的至少5个ETDRS字母改善、BCVA较基线的至少6个ETDRS字母改善、BCVA较基线的至少7个ETDRS字母改善、BCVA较基线的至少8个ETDRS字母改善、BCVA较基线的至少9个ETDRS字母改善、BCVA较基线的至少10个ETDRS字母改善、BCVA较基线的至少15个ETDRS字母改善、或BCVA较基线的至少20个ETDRS字母改善。

实施例33.根据实施例1至32中任一项所述的方法，其中该患者显示出以下改善：BCVA较基线的介于5-7个ETDRS字母改善、BCVA较基线的介于6-8个ETDRS字母改善、BCVA较基线的介于善7-9个ETDRS字母改善、BCVA较基线的介于10-15个ETDRS字母改善、BCVA较基线的介于15-20个ETDRS字母改善、BCVA较基线的介于20-25个ETDRS字母改善、BCVA较基线的介于25-30个ETDRS字母改善。

实施例34.根据实施例1至43中任一项所述的方法，其中该患者显示出：眼部无血管面积较基线的至少0.10mm²减少，或眼部无血管面积较基线的至少0.20mm²减少，或眼部无血管面积较基线的至少0.30mm²减少，或眼部无血管面积较基线的至少0.40mm²减少，或眼部无血管面积较基线的至少0.50mm²减少，或眼部无血管面积较基线的至少0.60mm²减少，或眼部无血管面积较基线的至少0.70mm²减少，或眼部无血管面积较基线的至少0.80mm²减少，或眼部无血管面积较基线的至少0.90mm²减少，或眼部无血管面积较基线减少至少1.0mm²，均通过荧光血管造影术(FA)或光学相干断层扫描血管造影术(OCT-A)进行测量。

实施例35.根据实施例1至34中任一项所述的方法，其中该患者具有糖尿病性视网膜病变严重程度量表(DRSS)较基线的2步改善。

实施例36.根据实施例1至35中任一项所述的方法，其中该患者显示出新血管形成相对于基线的消退，如通过FA或OCT-A所测量的。

实施例37.根据实施例1至36中任一项所述的方法，其中该视网膜血管病变是糖尿病性黄斑水肿(DME)。

实施例38.根据实施例1至36中任一项所述的方法，其中该视网膜血管病变是糖尿病性视网膜病变(DR)。

实施例39.根据实施例1至36中任一项所述的方法，其中该视网膜血管病变是年龄相关性黄斑变性(AMD)。

实施例40.根据实施例39中任一项所述的方法，其中该视网膜血管病变是地图状萎缩(GA)。

实施例41.根据实施例38所述的方法，其中该患者在基线处还呈现出非增殖性糖尿病性视网膜病变。

实施例42.根据实施例38所述的方法，其中该患者在基线处还呈现出增殖性糖尿病性视网膜病变。

附图说明

图1描绘了如实例1中所述的I期单次上升剂量递增、安全性和毒性研究的示意图。

图2描绘了如实例2中所述的DME 2a期概念验证研究的示意图。

图3示出了DME患者的BCVA相对于基线的变化，作为实例1中所述的I期研究的结果。请注意，取自已发表的VISTA研究的阿柏西普数据叠加在数据上，仅用于比较目的。在所有研究剂量下，8名患者中有6名在2周时显示出ETDRS字母较基线有所增加。4周时，8名患者中有7名显示出ETDRS字母较基线有所增加，并且在12周时，8名患者中有6名显示出ETDRS字母较基线有所增加。

图4示出了nAMD患者的BCVA相对于基线的变化，作为实例1中所述的I期研究的结果。在所有研究剂量下，4名患者中有3名在2周时显示出ETDRS字母较基线有所增加，而4名患者中有2名在4周时显示出ETDRS字母较基线有所增加。12周时，4名患者中有2名显示出ETDRS字母较基线有所增加。请注意，一名患者被施用了抗VEGF抢救治疗。

图5示出了DME患者的CST相对于基线的变化，作为实例1中所述的I期研究的结果。在所有研究剂量下，7名患者中有3名在2周时CST较基线下降，并且7名患者中有2名在4周时显示出较基线下降。12周时，7名患者中有4名显示出较基线下降。

图6示出了nAMD患者的CST相对于基线的变化，作为实例1中所述的I期研究的结果。在所有研究剂量下，4名患者中有2名在2周时CST较基线下降，并且4名患者中有3名在4周时显示出较基线下降。12周时，4名患者中有3名显示出较基线下降。请注意，一名患者被施用了抗VEGF抢救治疗。

图7描绘了如实例3中所述的nAMD 2a期概念验证研究的示意图。

图8显示了DME患者24周内BCVA的平均变化，作为如实例1中公开的I期研究中所述单次注射式I化合物的结果。

图9描绘了在实例1中所述的I期研究中，在单次注射式I化合物之后在4周、8周、12周和24周时测量的达到等于或大于5个字母的阈值BCVA增加或等于或大于10个字母的BCVA增加的DME患者的百分比。

图10描绘了在实例1中所述的I期研究中，使用抗VEGF疗法未达到2期DME抢救标准的DME患者的百分比，该标准为+75μm或-10个ETDRS字母。

图11示出了8名DME患者的高剂量队列在接受单次注射式I化合物之后随访至24周的CST平均变化。参见实例1。

图12示出了在所有测试剂量下通过ETDRS在10名患者中测量的个体AMD患者BCVA变化图。五名患者接受了抗VEGF抢救治疗，如“Gold”轮廓所示。参见实例1。

图13示出了9名AMD患者在单次注射式I化合物后1周、2周、4周、8周、12周和24周时通过ETDRS字母±SEM测量的BCVA平均变化的意向性治疗(ITT)分析，其中6名AMD患者接受了抗VEGF抢救治疗，而3名没有接受该治疗。参见实例1。

图14示出了10名AMD患者在单次注射式I化合物后1周、2周、4周、8周、12周和24周时通过μm±SEM测量的CST平均变化的意向性治疗(ITT)分析。参见实例1。

图15示出了两种钠盐形式(Na盐)与葡甲胺盐形式在新西兰白兔玻璃体液、视网膜和晶状体中的分布的比较。参见实例4和表1。

具体实施方式

I.定义

如本文所用，术语“大约”是指本技术领域技术人员容易知道的各个值的通常误差范围。本文对“大约”值或参数的提及包括(和描述)针对该值或参数本身的实施例。

如本文所用，“施用”意指向患有本文中的视网膜血管病变的患者给予一定剂量的化合物-葡甲胺的方法。本文所述方法中使用的组合物可以，例如，经玻璃体内(例如，通过玻璃体内注射)、眼部(例如，通过眼部注射)或眼内(例如，通过眼内注射)施用。施用方法可以根据各种因素(例如，所施用的化合物或组合物，以及所治疗的病症、疾病或障碍的严重程度)而变化。

如本文所用，术语“抗VEGF治疗”或“抗VEGF疗法”意指任何目前批准的用于治疗视网膜血管病变的抗VEGF药物。此类批准的药物包括，例如，(雷珠单抗)或/>(阿柏西普)以及任何批准的雷珠单抗或阿柏西普生物类似药。

如本文所用，涉及患者的术语“基线”表示在用本发明治疗之前向主治医疗保健专业人员呈现的患者诊断。

如本文所用，“最佳矫正视力”(BCVA)是指使用眼镜或隐形眼镜可实现的最佳视力矫正的测量结果。它可以使用早期治疗糖尿病性视网膜病变研究(ETDRS)方案进行测量。

如本文所用，“CST”代表中央子域厚度的变化，也称为中心凹厚度，其被定义为中央1mm网格中黄斑的平均厚度。平均黄斑厚度被定义为九个切片的厚度平均值。例如，与基线相比，CST的临床有意义的变化可以是降低50μm至100μm。

如本文所用，“早期治疗糖尿病性视网膜病变研究”(ETDRS)，与字母改善相关使用，是一种用于评估视力的测量类型，其中图表上使用的符号或字母的几何级数被称为最小分辨率角的对数(logMAR)。每行含有相同数量的符号或字母，每行值等于0.1个对数单位，或比前一行小25％(当从图表顶部开始时)。要求患者在规定的距离处读取一系列已知高度的字母，所读取的最小易读字母表示近距或远距视力的程度。这种标准化允许近距和远距视力水平评估的一致性。正常视力被认为是4米距离处的80个ETDRS字母。具有临床意义的ETDRS改善是在4米距离处与基线相比增加10-15个ETDRS字母。

如本文所用，“渗出物”或“视网膜渗出物”是指从受损毛细血管渗漏的脂质残留物，其可能存在于患有DR、DME或AMD的患者中。具体地，AMD患者中存在的渗出物可能是视网膜下液(SRF)。这是由于黄斑下异常血管渗漏所致。可替代地，AMD患者中存在的渗出物可能是视网膜内液(IRF)，其是与OCT上视网膜组织反射率降低相关的视网膜增厚增加。最后，AMD患者中存在的渗出物可能是囊样水肿。这种多囊样(囊状)流体区域出现在黄斑中，并导致视网膜肿胀或水肿。

如本文所用，“谱域光学相干断层扫描”(SD-OCT)是一种提供高分辨率结构图像和精确视网膜厚度测量的技术。它是早期检测黄斑水肿或视网膜渗出物以及随访糖尿病性黄斑病变的首选技术。

如本文所用，“血红蛋白A1c”(HbA1C)是一项指示患者过去2至3个月平均血糖水平的测试。它也被称为糖化血红蛋白测试或糖化血红蛋白。HbA1C通常用于诊断糖尿病前期和糖尿病。一般来说，正常的HbA1C水平低于5.7％，5.7％至6.4％的水平一般表示糖尿病前期，并且6.5％或更高的水平一般表示糖尿病。

如本文所用，“眼内压”(IOP)是眼睛内部的流体压力。IOP的测量值受角膜厚度和硬度的影响。一般来说，正常眼内压在10mmHg与20mmHg之间。

如本文所用，“患者”如果单独使用(例如，“……用治疗有效剂量的化合物-葡甲胺治疗的患者……”)意指患有视网膜血管病变的患者。相反，“DME患者”意指患有特定视网膜血管病变DME的患者。进一步，“AMD患者”意指患有特定视网膜血管病变AMD的患者。进一步，“DR患者”是意指患有特定视网膜血管病变DR的患者。

如本文所用，“视网膜血管病变”是指涉及致病性血管生成(诸如例如，糖尿病性黄斑水肿、糖尿病性视网膜病变和年龄相关性黄斑变性)的眼部疾病。其他眼部疾病可包括例如地图状萎缩。

如本文所用，“治疗(treatment和treat或treating)”是指试图改变接受治疗的个体的自然病程的临床干预，并且可以为了预防或在临床病理学过程中进行。本文所要求保护的治疗方法的期望效果包括但不限于预防DME、DR或AMD的发生或复发，减轻DME、DR或AMD的症状，减少DME、DR或AMD的任何直接或间接病理后果，降低DME、DR或AMD的疾病进展速度，改善或减轻DME、DR或AMD的疾病状态，以及缓解或改善DME、DR或AMD的预后。

组合物和方法

本发明提供了用于治疗某些视网膜血管病变，诸如糖尿病性黄斑水肿(DME)、糖尿病性视网膜病变(DR)和年龄相关性黄斑变性(AMD)的方法。

DME是慢性、控制不佳的糖尿病后糖尿病性视网膜病变(DR)的一种并发症，并且是糖尿病患者中最常见的危及视力的视网膜病变形式。大约每14名糖尿病患者中就有一人患有某种程度的DME。世界卫生组织2015年报告称，使用视网膜图像的糖尿病患者中DR的总体患病率估计为35％，其中危及视力的DR以12％存在。患病率取决于糖尿病的类型和疾病的持续时间。对于两种类型的糖尿病，即1型糖尿病和2型糖尿病，25年病期后，患病率接近30％。在美国，估计至少有550万40岁以上的个体在不存在DME的情况下患有DR，另外还有80万至100万患者患有DME。据估计，只有40％的人得到诊断和治疗，并且约5％的人得到诊断和观察。

糖尿病性黄斑水肿(DME)是继发于糖尿病性视网膜病变(DR)的黄斑增厚，是由于血-视网膜屏障缺陷导致血管渗漏和流体积聚而引起的。参见Bhagat N等人,SurvOphthalmol.2009；54:1–32。DME与多种炎症因子的表达有关，包括血管内皮生长因子(VEGF)、细胞间粘附分子-1(ICAM-1)、白细胞介素-6(IL-6)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和白细胞淤滞。参见Funatsu H等人,Ophthalmology.2009；116:73–79；和Miyamoto K等人,Proc Natl Acad Sci USA.1999；96:10836-10841。此外，这些因子的表达与视网膜血管通透性以及疾病的严重程度有关，从而证实了它们的重要致病作用。

DR：糖尿病性视网膜病变的患病率随着年龄的增长而增加，并且是50岁以上人群失明的最常见原因。它是一种多因素障碍，高血糖对细胞产生毒性作用，并且炎性细胞因子参与糖尿病性眼疾病的许多方面。糖尿病性视网膜病变涉及毛细血管基底膜增厚，并阻止周细胞接触毛细血管内皮细胞。周细胞的丧失会增加毛细血管的渗漏，并可能导致血-视网膜屏障的破坏。毛细血管减弱会导致动脉瘤形成和进一步渗漏。高血糖的持续时间和严重程度是与糖尿病性视网膜病变发展相关的一个因素。高血糖的这些影响也会损害视网膜的神经元功能。这是糖尿病性视网膜病变的早期阶段，被称为非增殖性糖尿病性视网膜病变。

糖尿病性视网膜病变也是神经视网膜的退行性疾病，与临床血管疾病发作之前神经元功能的改变有关。糖尿病患者的视网膜毛细血管可能会闭塞，从而引起视网膜局部缺血。非灌流型组织通过从现有血管引发新血管生长(即，血管生成)来做出反应。这些新血管也会导致视力丧失，这种情况被称为增殖性糖尿病性视网膜病变，因为新血管很脆弱，并且容易将血液渗入眼睛中。在晚期增殖性糖尿病性视网膜病变中，随之而来的是血管生成性、VEGF介导的反应与视网膜新血管形成，从而使眼睛因玻璃体出血或牵拉性视网膜脱离而面临严重视力丧失的进一步风险。如果不进行治疗，可能会出现不可逆的血管或神经元损伤，这强调了早期干预的必要性。

AMD：年龄相关性黄斑变性(AMD)是视力损害和严重视力丧失的主要原因。它在全球视力损害原因中排名第三，致盲率为8.7％。

AMD是由视网膜中央部分退化引起的，并且是一种多因素障碍，其发病机制涉及补体、脂质、血管生成、炎症和细胞外基质途径的失调。AMD病理学的特征在于，黄斑中视网膜色素上皮细胞与底层脉络膜之间逐渐积累特征性黄色沉积物，被称为玻璃膜疣(例如，细胞外蛋白质和脂质的堆积)，据信该沉积物随着时间的推移会损害视网膜。

AMD有两种基本类型：“干性”和“湿性”。大约85％至90％的AMD病例为“干性”(萎缩性)类型或地图状萎缩(GA)，而10％-15％为“湿性”(渗出性)类型或新生血管性AMD(nAMD)。干性AMD的定义是黄斑中视网膜色素上皮(RPE)和光感受器细胞逐渐丧失。受干性AMD影响的患者由于光感受器细胞及其密切相关的视网膜色素上皮(RPE)细胞死亡以及玻璃膜疣沉积而逐渐丧失中心视力。湿性AMD的特征在于黄斑上皮下异常血管的生长。由于脉络膜毛细血管中的异常血管穿过布鲁赫膜生长(例如，脉络膜新血管形成)，湿性AMD会导致视力丧失。临床上，它分为早期(中等大小的玻璃膜疣和视网膜色素变化)至晚期(新生血管和萎缩)。

本发明的组合物：最近显示，视网膜中的病理性脉管系统选择性地参与细胞衰老(参见Crespo-Garcia等人,Cell Metabolism 2021,33,1-15)。已开发出一种衰老性Bcl-xL抑制剂，其可在不改变眼睛中的健康驻留细胞的情况下清除组织中的衰老细胞，用于施用至患有DME、DR和AMD的患者。通过这种方式，选择性地去除由此类衰老细胞分泌的促炎因子，即衰老相关分泌表型(SASP)。

在所要求保护的发明的一些实施例中，用于治疗患有DME或DR或AMD的患者的化合物是式I化合物的结晶固体葡甲胺盐(也称为“化合物-葡甲胺”)，其中式I是：

式I化合物也被称为(R)-5-(4-氯苯基)-1-异丙基-2-甲基-4-(3-(4-(4-((4-((1-(苯硫基)-4-(4-((膦酰氧基)甲基)哌啶-1-基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰氨基)苯基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡咯-3-羧酸。在所要求保护的发明的其他实施例中，化合物-葡甲胺用于治疗患有DME、DR或AMD的患者，其中葡甲胺以1至3的化学计量比存在。在另一个实施例中，化合物-葡甲胺在2℃至8℃的温度下稳定12个月或更长时间。参见国际申请PCT/CN2020/127666，其通过援引以其全文并入本文。

式I化合物是钠盐形式。它在2℃至8℃下不稳定。作为一种潜在的商业治疗剂，这种不稳定性是不可行的。因此，生成了该化合物的更稳定的盐形式，即化合物-葡甲胺，如PCT/CN2020/127666中所公开的。将化合物-葡甲胺的药代动力学与式I化合物的钠盐形式的药代动力学进行比较，以便能够向监管机构提供桥接数据，以允许在临床试验中及以后用化合物-葡甲胺替代式I化合物，而不影响患者安全或功效。参见实例4、图15和表1。

剂量：在所要求保护的发明的一些实施例中，如上所述的用于治疗DME、DR、AMD患者的化合物-葡甲胺的治疗有效剂量为每只眼睛约0.5μg、每只眼睛约1μg、每只眼睛约2μg、每只眼睛约2.5μg、每只眼睛约3μg、每只眼睛约4μg、每只眼睛约5μg、每只眼睛约6μg、每只眼睛约7μg、每只眼睛约8μg、每只眼睛约9μg、每只眼睛约10μg、每只眼睛约11μg、每只眼睛约12μg、每只眼睛约13μg、每只眼睛约14μg、每只眼睛约15μg、每只眼睛约16μg、每只眼睛约17μg、每只眼睛约18μg、每只眼睛约19μg、每只眼睛约20μg、每只眼睛约21μg、每只眼睛约22μg、每只眼睛约23μg、每只眼睛约24μg或每只眼睛约25μg。在其他实施例中，如上所述的化合物-葡甲胺的治疗有效剂量为每只眼睛50μl的总体积。

在所要求保护的发明的一些实施例中，如上所述的用于治疗DME、DR或AMD的化合物-葡甲胺的治疗有效剂量为每只眼睛0.5μg-1μg之间、每只眼睛1μg-2μg之间、每只眼睛2μg-2.5μg之间、每只眼睛2.5μg-3μg之间、每只眼睛3μg-4μg之间、每只眼睛4μg-5μg之间、每只眼睛5μg-6μg之间、每只眼睛6μg-7μg之间、每只眼睛7μg-8μg之间、每只眼睛8μg-9μg之间、每只眼睛9μg-10μg之间、每只眼睛10μg-11μg之间、每只眼睛11μg-12μg之间、每只眼睛12μg-13μg之间、每只眼睛13μg-14μg之间、每只眼睛14μg-15μg之间、每只眼睛15μg-16μg之间、每只眼睛16μg-17μg之间、每只眼睛17μg-18μg之间、每只眼睛18μg-19μg之间、每只眼睛19μg-20μg之间、每只眼睛20μg-21μg之间、每只眼睛21μg-22μg之间、每只眼睛22μg-23μg之间、每只眼睛23μg-24μg之间或每只眼睛24μg-25μg之间。在其他实施例中，本文所述的化合物-葡甲胺的治疗有效剂量为每只眼睛50μl的总体积。

在所要求保护的发明的其他实施例中，如上所述的用于治疗DME、DR或AMD的化合物-葡甲胺的治疗有效剂量为每只眼睛0.5–2μg之间、每只眼睛2–4μg之间、每只眼睛3–5μg之间、每只眼睛4–6μg之间、每只眼睛5–7μg之间、每只眼睛6–8μg之间、每只眼睛7–9μg之间、每只眼睛8–10μg之间、每只眼睛10–15μg之间、每只眼睛15–20μg之间、每只眼睛20–25μg之间。在其他实施例中，本文所述的化合物-葡甲胺的治疗有效剂量为每只眼睛50μl的总体积。

监测和诊断视网膜血管病变的方法：本领域已知的标准化眼科检查技术包括例如详细的裂隙灯生物显微镜评估，其允许评估眼睑、眼附属器、睫毛、角膜表面、前房、瞳孔、晶状体、玻璃体腔和视网膜中央解剖结构，包括视神经和黄斑。另一种方法是前房角镜检查，其允许详细检查前房角。间接检眼镜检查允许评估视网膜周边，这对于监测玻璃体和周边视网膜障碍很重要。

视力的功能测试是本领域已知的，并且包括例如最佳矫正视力、对比视力和低亮度视力、色觉(包括Ishihara和Farnsworth Munsell测试)和视野评估(包括Humphrey自动视野检查和显微视野检查)、泪液产生(Schirmer测试)和测量眼内压(IOP)的眼压计。这些与结构测试结合使用，该结构测试包括例如前段和后段照片、角膜厚度测量、超声波、超声波生物显微镜、光学相干断层扫描(OCT)、光学相干断层扫描血管造影术(OCTA)、荧光血管造影术(FA)、静脉荧光素血管造影术(IVFA)和眼底自发荧光(FAF)。计算机断层扫描(CT)或磁共振成像(MRI)扫描等成像技术用于评估眼部、眼周和眼眶结构，以及大脑中视神经、视觉通路和视觉皮层的颅内部分。这些测试可以使眼睛和周围结构的结构完整性和厚度可视化，并评估血流和循环。还使用视网膜、视神经和视觉通路/皮层的高级功能测试，包括电生理测试，诸如全视野和多焦点视网膜电图、视觉诱发电位和微视野检查，以诊断和监测疾病进展和疗法的效果。本领域技术人员将能够采用本领域已知的适当方法来诊断、测量和监测本文所述的视网膜血管病变。

患者：在所要求保护的发明的一些实施例中，将如上所述的治疗有效剂量的用于治疗患有DME的患者的化合物-葡甲胺施用于不仅患有DME而且患有糖尿病性视网膜病变(DR)的患者。在其他实施例中，DME患者不仅患有DME，而且患有非增殖性DR。在其他实施例中，DME患者还患有增殖性DR。

在所要求保护的发明的一些实施例中，如上所述的治疗有效剂量的化合物-葡甲胺用于治疗患有AMD的患者。具体地，所述AMD患者可能患有干性AMD或GA。具体地，所述AMD患者可能患有湿性AMD或nAMD。在所要求保护的发明的其他实施例中，用如上所述的治疗有效剂量的化合物-葡甲胺治疗的AMD患者在治疗之前具有在70至20个早期治疗糖尿病性视网膜病变研究(ETDRS)字母之间的基线最佳矫正视力(BCVA)，或斯内伦视力表上的基线20/40至20/400。

在所要求保护的发明的一些实施例中，用如上所述的治疗有效剂量的化合物-葡甲胺治疗的DME、DR或AMD患者在用所要求保护的发明进行治疗之前，曾接受过抗血管内皮生长因子(抗VEGF)治疗。在其他实施例中，如本文所述，利用抗VEGF治疗的先前治疗发生在用所要求保护的发明的方法治疗之前的前6个月期间。在其他实施例中，除了接受过利用抗VEGF治疗的先前治疗之外，DME、DR或AMD患者还在用所要求保护的发明的方法治疗之前呈现出≥350um的中央子域厚度(CST)，如通过SD-OCT在基线处所测量的。

在所要求保护的发明的一些实施例中，在用所要求保护的发明的方法治疗之前，用如上所述的治疗有效剂量的化合物-葡甲胺治疗的DME、DR或AMD患者在治疗前3个月具有在基线处<12％、在基线处<11％、在基线处<10％、在基线处<9％、在基线处<8％、在基线处<7％、在基线处<6％、在基线处<5％、在基线处<4％、在基线处<3％、在基线处<2％、在基线处<1％的血红蛋白A1C(HbA1C)。

在所要求保护的发明的一些实施例中，在用所要求保护的发明的方法治疗之前，用如上所述的治疗有效剂量的化合物-葡甲胺治疗的DME、DR或AMD患者具有在基线处≤23mmHg、在基线处≤22mmHg、在基线处≤21mmHg、在基线处≤20mmHg、在基线处≤19mmHg、在基线处≤18mmHg、在基线处≤17mmHg、在基线处≤16mmHg、在基线处≤15mmHg、在基线处≤14mmHg、在基线处≤13mmHg、在基线处≤12mmHg、在基线处≤11mmHg、在基线处≤10mmHg、在基线处≤9mmHg、在基线处≤8mmHg、在基线处≤7mmHg、在基线处≤6mmHg、在基线处≤5mmHg、在基线处≤4mmHg、在基线处≤3mmHg、在基线处≤2mmHg、在基线处≤1mmHg的眼内压(IOP)。

在所要求保护的发明的一些实施例中，在用所要求保护的发明的方法治疗之前，用如上所述的治疗有效剂量的化合物-葡甲胺治疗的DME、DR或AMD患者，该患者呈现出以下中央子域厚度(CST)：≥100μm，如通过SD-OCT在基线处所测量的；≥150μm，如通过SD-OCT在基线处所测量的；≥200μm，如通过SD-OCT在基线处所测量的；≥250μm，如通过SD-OCT在基线处所测量的；≥300μm，如通过SD-OCT在基线处所测量的；≥350μm，如通过SD-OCT在基线处所测量的。

施用：玻璃体内(IVT)是在将药物直接放入眼睛后部被称为玻璃体腔的空间的手术中药物(诸如本文描述的化合物-葡甲胺)的施用途径，该玻璃体腔充满了一种被称为玻璃体液凝胶的胶冻状流体。该手术通常由经过培训的视网膜专家在办公室环境中执行。在所要求保护的发明的一些实施例中，将如上所述的治疗有效剂量的用于治疗DME、DR或AMD的化合物-葡甲胺经玻璃体内施用至患者的眼睛中。在其他实施例中，将如上所述的治疗有效剂量的用于治疗DME、DR或AMD的化合物-葡甲胺以单次IVT剂量施用至患者的眼睛中。

在所要求保护的发明的一些实施例中，如上所述，在施用治疗有效剂量之前，首先将如上所述的化合物-葡甲胺以负荷剂量经玻璃体内施用至DME、DR或AMD患者的眼睛中。在这种情况下，如上所述，用于治疗DME、DR或AMD患者的化合物-葡甲胺的负荷剂量为每只眼睛约0.5μg、每只眼睛约1μg、每只眼睛约2μg、每只眼睛约2.5μg、每只眼睛约3μg、每只眼睛约4μg、每只眼睛约5μg、每只眼睛约6μg、每只眼睛约7μg、每只眼睛约8μg、每只眼睛约9μg、每只眼睛约10μg、每只眼睛约11μg、每只眼睛约12μg、每只眼睛约13μg、每只眼睛约14μg、每只眼睛约15μg、每只眼睛约16μg、每只眼睛约17μg、每只眼睛约18μg、每只眼睛约19μg、每只眼睛约20μg、每只眼睛约21μg、每只眼睛约22μg、每只眼睛约23μg、每只眼睛约24μg或每只眼睛约25μg。在其他实施例中，如上所述的化合物-葡甲胺的负荷剂量为每只眼睛50μl的总体积。

在所要求保护的发明的又一些实施例中，如上所述，在施用治疗有效剂量之前，首先将如上所述的化合物-葡甲胺以负荷剂量经玻璃体内施用至DME、DR或AMD患者的眼睛中。在这种情况下，如上所述，用于治疗DME、DR或AMD患者的化合物-葡甲胺的负荷剂量为每只眼睛0.5–2μg之间、每只眼睛2–4μg之间、每只眼睛3–5μg之间、每只眼睛4–6μg之间、每只眼睛5–7μg之间、每只眼睛6–8μg之间、每只眼睛7–9μg之间、每只眼睛8–10μg之间、每只眼睛10–15μg之间、每只眼睛15–20μg之间、每只眼睛20–25μg之间。在其他实施例中，本文所述的化合物-葡甲胺的负荷剂量为每只眼睛50μl的总体积。

在所要求保护的发明的一些实施例中，如下所述，在施用治疗有效剂量之前，首先将如上所述的化合物-葡甲胺以负荷剂量经玻璃体内施用至DME、DR或AMD患者的眼睛中。在这种情况下，将负荷剂量按以下方式经玻璃体内施用至DME、DR或AMD患者的眼睛中：每月一次IVT注射，持续2个月；或每月一次IVT注射，持续3个月；或2个月内至少一次IVT注射；或2个月内至少两次IVT注射；或2个月内至少三次IVT注射；或3个月内至少三次IVT注射；或3个月内至少两次IVT注射。在所要求保护的发明的其他实施例中，如下所述，在施用治疗有效剂量之前，首先将如上所述的化合物-葡甲胺以负荷剂量经玻璃体内施用至DME、DR或AMD患者的眼睛中，然后在施用治疗有效剂量之前采用至少2个月、至少3个月、至少4个月、至少5个月、至少6个月、至少7个月、至少8个月、至少9个月、至少10个月、至少11个月、至少12个月的治疗间隔。

在所要求保护的发明的一些实施例中，将如上所述的治疗有效剂量的化合物-葡甲胺每2个月、每3个月、每4个月、每5个月、每6个月、每7个月、每8个月、每9个月、每10个月、每11个月、每12个月一次经玻璃体内施用至DME、DR或AMD患者的眼睛中。在其他实施例中，将如上所述的治疗有效剂量的化合物-葡甲胺每2–3个月、每3–4个月、每5–6个月、每6–7个月、每8–9个月、每9–10个月、每11–12个月一次经玻璃体内施用至DME、DR或AMD患者的眼睛中。在所要求保护的发明的其他实施例中，将如上所述的治疗有效剂量的化合物-葡甲胺以每2个月单剂量、每3个月单剂量、每4个月单剂量、每5个月单剂量、每6个月单剂量、每7个月单剂量、每8个月单剂量、每9个月单剂量、每10个月单剂量、每11个月单剂量或每12个月单剂量经玻璃体内施用至DME、DR或AMD患者的眼睛中。在其他实施例中，将如上所述的治疗有效剂量的化合物-葡甲胺以每2–3个月单剂量、每3–4个月单剂量、每5–6个月单剂量、每6–7个月单剂量、每8–9个月单剂量、每9–10个月单剂量、每11–12个月单剂量经玻璃体内施用至DME、DR或AMD患者的眼睛中。

在其他实施例中，将如上所述的治疗有效剂量的化合物-葡甲胺以单剂量经玻璃体内施用至DME、DR或AMD患者的眼睛中一次，与如上所述的先前负荷剂量结合，或者不与先前负荷剂量结合。

功效：在一些实施例中，本文描述的所要求保护的发明的方法导致DME、DR或AMD患者显示出如通过SD-CST测量的以下CST降低：用本发明的方法治疗后，距基线至少40μm；用本发明的方法治疗后，距基线至少50μm；用本发明的方法治疗后，距基线至少60μm；用本发明的方法治疗后，距基线至少70μm；用本发明的方法治疗后，距基线至少80μm；用本发明的方法治疗后，距基线至少90μm。

在其他实施例中，本文描述的所要求保护的发明的方法导致DME、DR或AMD患者在用本发明的方法治疗后显示出如通过SD-OCT所评估的与基线相比不存在黄斑流体。

在一些实施例中，本文描述的所要求保护的发明的方法导致DME、DR或AMD患者不需要超过2次抗VEGF治疗抢救，或不需要超过3次抗VEGF治疗抢救，或不需要超过4次抗VEGF治疗抢救，或不需要超过5次抗VEGF治疗抢救。在其他实施例中，本文描述的所要求保护的发明的方法导致患者根本不需要任何抗VEGF治疗抢救。

在一些实施例中，本文描述的所要求保护的发明的方法导致DME、DR或AMD患者显示出以下改善：BCVA较基线的至少5个ETDRS字母改善、或BCVA较基线的至少6个ETDRS字母改善、或BCVA较基线的至少7个ETDRS字母改善、或BCVA较基线的至少8个ETDRS字母改善、或BCVA较基线的至少9个ETDRS字母改善、或BCVA较基线的至少10个ETDRS字母改善、或BCVA较基线的至少15个ETDRS字母改善、或BCVA较基线的至少20个ETDRS字母改善。在其他实施例中，本文描述的所要求保护的发明的方法导致DME、DR或AMD患者显示出以下改善：BCVA较基线的介于5-7个ETDRS字母改善、BCVA较基线的介于6-8个ETDRS字母改善、BCVA较基线的介于7-9个ETDRS字母改善、BCVA较基线的介于10-15个ETDRS字母改善、BCVA较基线的介于15-20个ETDRS字母改善、BCVA较基线的介于20-25个ETDRS字母改善、BCVA较基线的介于25-30个ETDRS字母改善。

在一些实施例中，本文描述的所要求保护的发明的方法导致DME、DR或AMD患者显示出：眼部无血管面积较基线的至少0.10mm²减少，或眼部无血管面积较基线的至少0.20mm²减少，或眼部无血管面积较基线的至少0.30mm²减少，或眼部无血管面积较基线的至少0.40mm²减少，或眼部无血管面积较基线的至少0.50mm²减少，或眼部无血管面积较基线的至少0.60mm²减少，或眼部无血管面积较基线的至少0.70mm²减少，或眼部无血管面积较基线的至少0.80mm²减少，或眼部无血管面积较基线的至少0.90mm²减少，或眼部无血管面积较基线的至少1.0mm²减少，均通过荧光血管造影术(FA)或光学相干断层扫描血管造影术(OCT-A)进行测量。

在其他实施例中，本文描述的所要求保护的发明的方法导致DME、DR或AMD患者具有糖尿病性视网膜病变严重程度量表(DRSS)较基线的2步改善。

在其他实施例中，本文描述的所要求保护的发明的方法导致DME、DR或AMD患者显示出新血管形成相对于基线的消退，如通过例如FA或OCT-A所测量的。

实例

以下是本发明的方法和组合物的实例。应当理解，考虑到上文提供的一般描述，可以实践各种其他实施例。

实例1：评估式I化合物在患有糖尿病性黄斑水肿或新生血管性年龄相关性黄斑变性的患者中的安全性和耐受性研究

这是一项1期、开放标签、首次人体(FIH)、单次上升剂量(SAD)研究，由大约4个队列组成。每个队列的患者总数为至少3名，加上最大耐受剂量(MTD)队列中的3名额外患者。经玻璃体内施用式I化合物，并且对所有患者进行约6个月的随访。

将DME患者招募到首次人体研究中的理由是，IVT注射是一种侵入性手术，并非没有风险。与FDA批准的其他IVT注射药物一样，由于IVT注射存在潜在风险，本试验招募了DME患者，以确定该药物在患病人群中的药理学、安全性和初步有效性。已使用建议的施用途径在目标人群中研究了单剂量毒性。此外，其目的是确定不同剂量的安全性，并确定是否存在任何剂量限制性毒性(DLT)。

入选FIH研究的患者是被诊断为患有DME(根据AAO PPP DME指南[2019]定义)的那些患者，其研究用眼的BCVA为35个ETDRS字母或更差(相当于斯内伦视力表上的20/200)并且非研究用眼的视力优于35个ETDRS字母(斯内伦视力表上的20/200)。入选的患者也可能患有伴有DME的非增殖性糖尿病性视网膜病变(NPDR)，研究者认为这些患者不太可能从当前的治疗选择中受益或治疗失败，因此预计不会造成重大的额外伤害。其他纳入和排除标准确保入选者没有除DME之外的视网膜疾病，这些疾病可能会损害BCVA、妨碍BCVA改善、在研究期间需要医疗或手术干预、混淆结果的解释或干扰研究用眼的眼科评估的毒性评估。入选的患者不得患有研究者认为构成参与研究的风险或禁忌症，或可能干扰研究目标、进行或评估，或妨碍患者全面参与研究各个方面的任何病症，包括实验室检查结果、病史结果或研究前评估结果。

从50μL注射体积中的0.5μg、1.0μg、2.5μg或5.0μg式I化合物的单剂量递增，旨在限制对剂量的FIH暴露，其中与小鼠中式I化合物的PAD相比，安全裕度大于5倍，并且与NOAEL相比，安全裕度不超过2倍。该设计允许检测哨点患者的意外急性毒性，然后在将额外的患者添加到剂量组中之前由安全评估委员会(SAC)仔细审查所有可用数据。参见图1。

纳入标准：

●患有DME的非增殖性糖尿病性视网膜病变(DR)患者或患有nAMD的患者。

●中心受累型DME，其中SD-OCT上的中央子域厚度(CST)≥350μm，并且对于nAMD，第1天的FA和SD-OCT证实了与年龄相关性黄斑变性相关的脉络膜新血管形成(CNV)活跃，包括存在视网膜内液或视网膜下液。

●筛选时和第1天的研究用眼(最受影响的眼睛)的BCVA为55个早期治疗糖尿病性视网膜病变研究(ETDRS)字母或更差。

●有能力给予知情同意并且愿意且能够遵守所有与研究相关的程序和评估的患者。

排除标准：

●任何一只眼睛的眼部/眼内/眼周感染或炎症。

●筛选之前2个月内研究用眼有玻璃体出血史，并且研究用眼有视网膜下出血且出血面积≥4个视盘面积。

●研究用眼中除DME或nAMD之外的任何视网膜血管疾病或视网膜变性。

●第1天之前6个月内有全身和眼内类固醇使用史。禁止使用玻璃体内不可生物降解的类固醇植入物(例如)。

●可能会干扰VA、毒性评估或眼底成像的严重间质混浊，包括白内障。

●研究者认为将妨碍参与本研究的任何不受控制的医疗状况。

在I期研究结束时，数据证明，在任何研究的剂量下均未显示由式I化合物引起的不良事件。至多10μg的式I化合物耐受性良好，在24周内具有良好的安全性。没有观察到剂量限制性毒性，也没有急性炎症、感染、IOP升高或出血的证据。报告了总共两例不严重的、非药物相关的AE。

总体而言，在所有研究剂量下，研究中的12名DME和nAMD患者中有10名在2周时显示出ETDRS字母较基线有所增加，并且12名患者中有9名在4周时显示出增加。12周时，12名DME和nAMD患者中有8名显示出ETDRS字母较基线有所增加。在5ug和10ug的较高剂量队列中，6名患者中有6名在2周时显示出ETDRS字母较基线有所增加，并且6名患者中有5名在4周、8周和12周时显示出增加。DME患者见图3，并且nAMD患者见图4。第24周时，12名DME患者中有8名显示出ETDRS字母持续增加，如通过BCVA平均变化所测量的。参见图8。单次注射式I化合物后这种持续的BCVA增加也在图9中以图形方式示出，如在4周、8周、12周和24周时所评估的。

在测试的AMD患者中，单次注射式I化合物后，观察到BCVA快速改善，并且似乎在注射后六个月内持续改善或稳定。参见图12和13。在接受抗VEGF抢救治疗的六名AMD患者中，平均BCVA变化很小，参见图12和13。值得注意的是，在图13中，意向性治疗(ITT)分析排除了一名接受抗VEGF抢救治疗的患者235-0020，其个体图如图12所示。

进一步，在所有研究剂量下，研究中的12名DME和nAMD患者中有6名在2周时显示出CST较基线下降，并且12名患者中有5名在4周时显示出下降，并且12名患者中有8名在8周时显示出下降，并且10名患者中有5名在12周时显示出下降。在5ug和10ug的较高剂量队列中，6名患者中有4名在2周时显示出CST较基线下降，并且6名患者中有3名在4周时显示出下降，并且6名患者中有5名在8周时显示出CST下降，并且5名患者中有3名在12周时显示出下降。DME患者见图5，并且nAMD患者见图6。24周时，较高剂量队列的8名DME患者显示出平均CST似乎回到了基线。参见图11。在分析的9名AMD患者中，包括六名接受抗VEGF抢救的患者和三名未接受抗VEGF抢救的患者，24周内平均CST变化最小，参见图14，这表明单次注射式I化合物后，24周内CST有所改善或趋于稳定。

进一步，图10表明，在单次注射式I化合物后，本研究中62.5％的DME患者在六个月内未达到抗VEGF疗法的2期DME抢救标准，该标准为+75um或-10个ETDRS字母。

经过12周和24周，单次IVT注射至多10μg的式I化合物在患有晚期DME或nAMD的患者中是安全的并且耐受性良好。在该患者人群中，通过BCVA增加、CST降低、视网膜内液和视网膜下液减少，观察到与疾病相关的生物活性。

实例2：评估在患有DME的患者中单次玻璃体内注射式I化合物后的安全性和生物活性

进行了一项2a期、概念验证(POC)、前瞻性、多中心、随机、单盲、假对照研究，以评估在患有DME的受试者中单次IVT注射式I化合物的安全性、耐受性和活性证据。共有约62名患者将按1:1的比例入选测试组或假研究组，以评估主要目标。所有患者将接受约24周的随访。参见图2。

主要功效终点是如通过SD-OCT所评估的第24周时CST相对于基线的变化。SD-OCT图像数据将由阅片中心进行评估。主要功效终点将通过重复测量混合模型(MMRM)进行分析。

患者将是被诊断为患有DME(根据AAO PPP DME指南2019定义)的那些患者，其研究用眼的BCVA为70至20个ETDRS字母(相当于斯内伦视力表上的20/40至20/400)并且非研究用眼的视力优于35个ETDRS字母(斯内伦视力表上的20/200)。

式I化合物的计划剂量为5μg，并且根据实例1中所述的1期SAD研究中有利的安全性数据，将递增至10μg。

纳入标准：要纳入本研究，每个个体都必须满足以下所有标准：

1.年龄在18岁及以上的患者。

2.患有DME的非增殖性DR患者，其在第1天之前的6个月内接受过至少3次抗VEGF治疗，最后一次抗VEGF治疗在第1天之前的3至5周之间进行。

3.中心受累型DME，其中筛选时SD-OCT上的中央子域厚度(CST)≥350μm。

4.在筛选时和第1天，研究用眼睛(最受影响的眼睛)的BCVA为70至20个ETDRS字母(相当于斯内伦视力表上的20/40至20/400)。如果双眼相同，则由研究者自行决定。

5.非研究用眼的BCVA为35个ETDRS字母(相当于斯内伦视力表上的20/200)

或更佳。

6.研究用眼的IOP≤23mmHg。

7.眼球介质清晰，瞳孔充分扩张，可进行CFP和充分BCVA评估。

8.有能力给予知情同意并且愿意且能够遵守所有与研究相关的程序和评估的患者。

排除标准：如果个体符合以下任何一项标准，则他或她没有资格参加本研究：

1.研究用眼中的并发疾病或结构损伤(除DME之外)，其可能会损害BCVA、妨碍BCVA改善、在研究期间需要医疗或手术干预、混淆结果的解释或干扰研究用眼的毒性或CFP评估。这包括但不限于以下各项：

·除糖尿病之外的病因引起的黄斑水肿

·具有临床意义的视网膜下纤维化

·视网膜中央凹下脂质

·在研究期间需要进行手术的白内障

·RPE萎缩或涉及黄斑的撕裂或裂口

·具有临床意义的黄斑裂孔

·具有临床意义的非感染性葡萄膜炎

·玻璃体黄斑牵引

·具有临床意义的视网膜前膜(ERM)

·无晶体眼

·前房型人工晶状体(A/C IOL)假晶状体眼

2.HbA1c≥12和/或近期有糖尿病不受控制的迹象

3.筛选之前4周内任何一只眼睛出现任何眼部/眼内/眼周感染或炎症(轻度睑缘炎是可以接受的)

4.筛选之前2个月内研究用眼有玻璃体出血史

5.筛选之前3个月内有IVT、结膜下或眼周类固醇病史

6.研究用眼有玻璃体切除术史

7.筛选之前3个月内研究用眼有眼内、眼周或角膜手术史，或预计在研究期间需要进行此类手术

8.给药之前研究用眼有全视网膜光凝术(6个月内)或黄斑激光光凝术(3个月内)史9.研究用眼有角膜移植史

10.同时使用超过2种药物治疗研究用眼中的青光眼和不稳定型青光眼(即IOP控制不足)

11.研究者认为构成参与研究的风险或禁忌症，或可能干扰研究目标、进行或评估，或妨碍患者全面参与研究各个方面的任何病症，包括实验室检查结果、病史结果或研究前评估结果

12.研究用眼存在严重近视(-8屈光度或更大)

13.第1天之前6个月内有全身和眼内类固醇使用史。禁止使用玻璃体内不可生物降解的类固醇植入物(例如)/>

14.可能会干扰视力、毒性评估或眼底成像的严重间质混浊，包括白内障

15.筛选前≤3个月，研究用眼接受眼内手术，包括白内障手术

16.已知对FA期间注射的染料过敏

17.已知对式I化合物中的任何组分(磷酸盐缓冲盐水和聚山梨醇酯80)过敏。

18.妊娠期、哺乳期或有生育能力的女性患者，其不同意在研究期间以及最后一剂式I化合物后3个月内使用高效节育方法(例如，仅黄体酮激素避孕、双重屏障或宫内节育器)。绝经后女性(>45岁且停经超过1年)和手术绝育的女性不受这些要求的约束。

19.如果与具有生育能力的女性伴侣发生性行为，则不同意在研究期间以及最后一剂式I化合物后3个月内使用高效避孕方法的男性患者。

20.筛选后3个月内曾接受或同时进行另一项研究药物或疫苗研究的患者，包括先前在使用式I化合物的研究中接受治疗的患者。

21.研究者认为将妨碍参与本研究的任何不受控制的医疗状况，包括但不限于过去3年内有恶性肿瘤病史(但允许非面部基底细胞癌)、过去6个月内有心肌梗塞病史，或同时接受治疗。

通过IVT注射施用式I化合物。IVT注射后，将监测患者的IOP升高、视神经乳头灌注减少以及可能的注射并发症(例如，玻璃体出血、视网膜撕裂等)。此外，患者应立即报告任何提示眼内炎的症状，诸如眼部疼痛、肿胀、发红、浑浊和视力逐渐丧失。

对照将是接触研究用眼的表面的假手术(即，无针、空无菌注射器)，以模拟IVT注射。在研究或假手术后，可根据研究机构首选的实践模式给患者开具预防性抗生素眼药水，并记录在案。

允许的治疗：允许在研究用眼和假眼中同时进行的治疗包括：

·通过IVT注射预防性地施用局部抗生素，以及用于AE治疗的局部/全身抗生素。

·人工泪液

·仅在以下情况下才允许使用类固醇：

-局部(例如，用于特应性皮炎治疗)、吸入(例如，用于哮喘治疗)或局部注射(例如，用于硬膜外或关节注射)

-在对侧眼局部使用类固醇

-为治疗研究用眼的炎症(例如，葡萄膜炎)而局部使用类固醇。

允许在对侧眼同时进行玻璃体内疗法，但不能在使用掩蔽研究药物治疗后7天内施用。

禁止的治疗：对于施用式I化合物没有已知的禁忌症。一旦被随机分配到本研究中，患者将不被允许接受用于管理研究用眼中的DME的治疗，除非它是抢救治疗。除非用于不良事件(AE)治疗，否则不允许全身使用(口服、肌肉注射和静脉注射)类固醇。在研究药物施用前应停用所有全身性类固醇。患者不应接受任何妨碍IVT注射的治疗。禁止患者接受研究人员和/或医疗监察员认为可能会对研究结果产生影响的任何研究用眼药物。

实例3：在患有nAMD的患者中单次玻璃体内注射式I化合物后的安全性、耐受性和活性证据的2a期评估

这是一项2a期概念验证(POC)研究。患者总数约为40名患者，他们将被招募并按1:1的比例随机分入式I化合物组或假研究组，以评估主要目标。所有患者将接受约16周的随访。

本2a期研究的目的是在第8周和第16周评估单次IVT注射式I化合物与假手术相比的局部和全身安全性和耐受性。本2a期的主要终点是确定通过治疗紧急不良事件(TEAE)评估的式I化合物的单次IVT注射的眼部和全身安全性和耐受性。次要终点是评估单次IVT注射式I化合物后的生物活性、功效参数和视网膜结构改善。具体而言，该研究将调查8周和16周内需要2次或更多次抗VEGF抢救的患者的比例、效果持续时间(由研究者根据抢救标准确定的从随机分配到接受标准护理的时间来衡量)、BCVA从基线到第8周和第16周的变化、如通过SD-OCT所评估的CST从基线到第8周和第16周的变化、通过SD-OCT评估的视网膜液从基线到第8周和第16周的变化，以及不存在渗出物的患者的比例：视网膜下液(SRF)、视网膜内液(IRF)和/或囊样水肿。另一个终点是评估单次IVT注射式I化合物后患者的功效参数和视网膜结构改善，这是通过OCT-A和FA评估的毛细血管灌注从基线到第8周和第16周的变化，以及玻璃膜疣体积从基线到第8周和第16周的变化。

本研究将招募年龄≥50岁的nAMD患者，其最佳矫正视力(BCVA)在筛选时和第1天在70至20个早期治疗糖尿病性视网膜病变研究(ETDRS)字母之间(相当于斯内伦视力表上的20/40至20/400)。将向患者施用单次50μL IVT注射10μg式I化合物或假手术。参见图7。

纳入标准

要纳入本研究，每个个体都必须满足以下所有标准：

1.年龄≥50岁的患者。

2.第1天的FA和SD-OCT证实了与年龄相关性黄斑变性相关的脉络膜新血管形成(CNV)活跃，并经中央阅片中心确认存在视网膜内液或视网膜下液。

3.新生血管性AMD患者，其在第1天之前的6个月内接受过至少3次抗VEGF治疗，最后一次抗VEGF治疗在第1天之前的3至6周之间进行。

4.在筛选时和第1天，研究用眼睛(最受影响的眼睛)的BCVA为70至20个ETDRS字母(相当于斯内伦视力表上的20/40至20/400)。如果双眼相同，则由研究者自行决定。

5.非研究用眼的BCVA为35个ETDRS字母(相当于斯内伦视力表上的20/200)或更佳。

6.研究用眼的IOP≤23mmHg。

7.眼球介质清晰，瞳孔充分扩张，可进行CFP和充分BCVA评估。

8.有能力给予知情同意并且愿意且能够遵守所有与研究相关的程序和评估的患者。

排除标准

如果个体符合以下任何一项标准，则他或她没有资格参加本研究：

1.研究用眼中的并发疾病或结构损伤(除nAMD之外)，其可能会损害BCVA、妨碍BCVA改善、在研究期间需要医疗或手术干预、混淆结果的解释或干扰研究用眼的毒性或CFP评估。这包括但不限于以下各项：

·除nAMD之外的病因引起的黄斑水肿

·具有临床意义的视网膜下纤维化

·视网膜中央凹下脂质

·在研究期间需要进行手术的白内障

·RPE萎缩或涉及黄斑的撕裂或裂口

·具有临床意义的黄斑裂孔

·具有临床意义的非感染性葡萄膜炎

·玻璃体黄斑牵引

·具有临床意义的视网膜前膜(ERM)

·无晶体眼

·前房型人工晶状体(A/C IOL)假晶状体眼

2.筛选之前4周内任何一只眼睛出现任何眼部/眼内/眼周感染或炎症(轻度睑缘炎是可以接受的)。

3.研究用眼有视网膜下出血，其中出血面积≥4个视盘面积。

4.研究用眼有玻璃体切除术史。

5.筛选之前3个月内研究用眼有眼内、眼周或角膜手术史，或预计在研究期间需要进行此类手术。

6.给药之前研究用眼有全视网膜光凝术(6个月内)或黄斑激光光凝术(3个月内)史。

7.研究用眼有角膜移植史。

8.同时使用超过2种药物治疗研究用眼中的青光眼和不稳定型青光眼(即IOP控制不足)。

9.研究者认为构成参与研究的风险或禁忌症，或可能干扰研究目标、进行或评估，或妨碍患者全面参与研究各个方面的任何病症，包括实验室检查结果、病史结果或研究前评估结果。

10.研究用眼存在严重近视(-8屈光度或更大)。

11.目前正在使用或曾经长期使用全身或局部眼部皮质类固醇(定义为在入组前6个月内的任何时间，连续3天或更长时间每天服用多个剂量)。禁止使用玻璃体内不可生物降解的类固醇植入物(例如)。

12.可能会干扰VA、毒性评估或眼底成像的严重间质混浊，包括白内障。

13.筛选前≤3个月，研究用眼接受眼内手术，包括白内障手术。

14.已知对式I化合物的任何组分(磷酸盐缓冲盐水和聚山梨醇酯80)过敏或对荧光素染料具有临床相关敏感性。

15.妊娠期、哺乳期或有生育能力的女性患者，其不同意在研究期间以及最后一剂式I化合物后3个月内使用高效节育方法(例如，仅黄体酮激素避孕、双重屏障或宫内节育器)。绝经后女性(>45岁且停经超过1年)和手术绝育的女性不受这些要求的约束。

16.如果与具有生育能力的女性伴侣发生性行为，则不同意在研究期间以及最后一剂式I化合物后3个月内使用高效避孕方法的男性患者。

17.筛选后3个月内曾接受或同时进行另一项研究药物或疫苗研究的患者，包括先前在针对式I化合物的研究中接受治疗的患者。

18.研究者认为将妨碍参与本研究的任何不受控制的医疗状况，包括但不限于过去3年内有恶性肿瘤病史(但允许非面部基底细胞癌)、过去6个月内有心肌梗塞病史，或同时接受治疗。

实例4：比较两种盐形式在新西兰白兔中IVT注射后的眼部药代动力学和耐受性

在新西兰白兔(非GLP)中进行单次IVT注射后，对式I化合物的两种盐形式(钠盐和葡甲胺盐)的眼药代动力学(PK)和耐受性进行评价，以了解葡甲胺盐形式(化合物葡甲胺)与钠盐形式的表现是相似还是不同。

两组32只新西兰白兔(总共64只动物)接受了8μg/眼的式I化合物的钠盐形式或葡甲胺盐形式(化合物葡甲胺)的单次IVT注射。在IVT注射后的不同时间点(2小时、24小时、72小时、120小时、168小时、336小时、504小时和672小时)处死动物。摘除眼睛并从耳静脉收集血浆。解剖或收集视网膜、晶状体和玻璃体液以及血浆，并储存在-20℃下直至使用。

通过LC-MS/MS分析收集的组织和流体样品。表1总结了PK结果。在两种盐形式之间，在玻璃体液和晶状体中观察到类似的暴露。视网膜中化合物的浓度主要低于所测试的两种盐形式的定量限(BLQ)(如“NC”所示)，因此预计两种盐形式在视网膜中的暴露没有差异。该化合物在所有时间点的血浆中均为BLQ。在每个测试的眼部组织中观察到钠盐形式和葡甲胺盐形式的相似分布。在玻璃体液中观察到的两种盐形式的最高暴露。没有发现任何一种盐形式的全身暴露。参见图15。

表1

尽管为了清楚理解的目的，已经通过说明和实例的方式对前述发明进行了一些详细描述，但这些描述和实例不应被理解为对本发明范围的限制。本文引用的所有专利和科学文献的公开内容均通过援引以其全文明确并入。

Claims (42)

1.一种治疗患有视网膜血管病变的患者的方法，所述方法包括向所述患者施用治疗有效剂量的式I化合物的结晶固体葡甲胺盐(化合物-葡甲胺)：

(R)-5-(4-氯苯基)-1-异丙基-2-甲基-4-(3-(4-(4-((4-((1-(苯硫基)-4-(4-((膦酰氧基)甲基)哌啶-1-基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰氨基)苯基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡咯-3-羧酸，

其中所述治疗有效剂量为每只眼睛至多25ug所述化合物-葡甲胺。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述式I化合物的所述结晶固体葡甲胺盐中的葡甲胺以1至3的化学计量比存在。

3.根据权利要求2所述的方法，其中所述式I化合物的所述结晶固体葡甲胺盐在2℃至8℃的温度下稳定12个月或更长时间。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述患者具有在70至20个早期治疗糖尿病性视网膜病变研究(ETDRS)字母之间的基线最佳矫正视力(BCVA)，或斯内伦视力表上的基线20/40至20/400。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述患者先前已在基线处接受过抗血管内皮生长因子(抗VEGF)治疗。

6.根据权利要求5所述的方法，其中利用抗VEGF治疗的先前治疗发生在前6个月期间。

7.根据权利要求6所述的方法，其中所述患者还呈现出以下中央子域厚度(CST)：≥350um，如通过SD-OCT在基线处所测量的；≥150μm，如通过SD-OCT在基线处所测量的；≥200μm，如通过SD-OCT在基线处所测量的；≥250μm，如通过SD-OCT在基线处所测量的；≥300μm，如通过SD-OCT在基线处所测量的；≥350μm，如通过SD-OCT在基线处所测量的。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述患者具有在基线处<12％、在基线处<11％、在基线处<10％、在基线处<9％、在基线处<8％、在基线处<7％、在基线处<6％、在基线处<5％、在基线处<4％、在基线处<3％、在基线处<2％、在基线处<1％的血红蛋白A1C(HbA1C)。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中所述患者具有在基线处≤23mmHg、在基线处≤22mmHg、在基线处≤21mmHg、在基线处≤20mmHg、在基线处≤19mmHg、在基线处≤18mmHg、在基线处≤17mmHg、在基线处≤16mmHg、在基线处≤15mmHg、在基线处≤14mmHg、在基线处≤13mmHg、在基线处≤12mmHg、在基线处≤11mmHg、在基线处≤10mmHg、在基线处≤9mmHg、在基线处≤8mmHg、在基线处≤7mmHg、在基线处≤6mmHg、在基线处≤5mmHg、在基线处≤4mmHg、在基线处≤3mmHg、在基线处≤2mmHg、在基线处≤1mmHg的眼内压(IOP)。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中所述化合物-葡甲胺的所述治疗有效剂量为每只眼睛0.5ug、1ug、2ug、2.5ug、3ug、4ug、5ug、6ug、7ug、8ug、9ug、10ug、11ug、12ug、13ug、14ug、15ug、16ug、17ug、18ug、19ug、20ug、21ug、22ug、23ug、24ug或25ug。

11.根据权利要求1至10中任一项所述的方法，其中所述化合物-葡甲胺的所述治疗有效剂量为每只眼睛0.5μg-1μg之间、每只眼睛1μg-2μg之间、每只眼睛2μg-2.5μg之间、每只眼睛2.5μg-3μg之间、每只眼睛3μg-4μg之间、每只眼睛4μg-5μg之间、每只眼睛5μg-6μg之间、每只眼睛6μg-7μg之间、每只眼睛7μg-8μg之间、每只眼睛8μg-9μg之间、每只眼睛9μg-10μg之间、每只眼睛10μg-11μg之间、每只眼睛11μg-12μg之间、每只眼睛12μg-13μg之间、每只眼睛13μg-14μg之间、每只眼睛14μg-15μg之间、每只眼睛15μg-16μg之间、每只眼睛16μg-17μg之间、每只眼睛17μg-18μg之间、每只眼睛18μg-19μg之间、每只眼睛19μg-20μg之间、每只眼睛20μg-21μg之间、每只眼睛21μg-22μg之间、每只眼睛22μg-23μg之间、每只眼睛23μg-24μg之间或每只眼睛24μg-25μg之间。

12.根据权利要求1至11中任一项所述的方法，其中所述化合物-葡甲胺的所述治疗有效剂量为每只眼睛0.5–2ug之间、每只眼睛2–4ug之间、每只眼睛3–5ug之间、每只眼睛4–6ug之间、每只眼睛5–7ug之间、每只眼睛6–8ug之间、每只眼睛7–9ug之间、每只眼睛8–10ug之间、每只眼睛9-11ug之间、每只眼睛10–15ug之间、每只眼睛15–20ug之间、每只眼睛20–25ug之间。

13.根据权利要求1至12中任一项所述的方法，其中在施用所述治疗有效剂量之前，首先将所述化合物-葡甲胺以负荷剂量施用至所述患者的眼睛中。

14.根据权利要求13所述的方法，其中所述化合物-葡甲胺的所述负荷剂量为每只眼睛0.5μg-1μg之间、每只眼睛1μg-2μg之间、每只眼睛2μg-2.5μg之间、每只眼睛2.5μg-3μg之间、每只眼睛3μg-4μg之间、每只眼睛4μg-5μg之间、每只眼睛5μg-6μg之间、每只眼睛6μg-7μg之间、每只眼睛7μg-8μg之间、每只眼睛8μg-9μg之间、每只眼睛9μg-10μg之间、每只眼睛10μg-11μg之间、每只眼睛11μg-12μg之间、每只眼睛12μg-13μg之间、每只眼睛13μg-14μg之间、每只眼睛14μg-15μg之间、每只眼睛15μg-16μg之间、每只眼睛16μg-17μg之间、每只眼睛17μg-18μg之间、每只眼睛18μg-19μg之间、每只眼睛19μg-20μg之间、每只眼睛20μg-21μg之间、每只眼睛21μg-22μg之间、每只眼睛22μg-23μg之间、每只眼睛23μg-24μg之间或每只眼睛24μg-25μg之间。

15.根据权利要求13所述的方法，其中所述化合物-葡甲胺的所述负荷剂量为每只眼睛0.5–2ug之间、每只眼睛2–4ug之间、每只眼睛3–5ug之间、每只眼睛4–6ug之间、每只眼睛5–7ug之间、每只眼睛6–8ug之间、每只眼睛7–9ug之间、每只眼睛8–10ug之间、每只眼睛9-11ug之间、每只眼睛10–15ug之间、每只眼睛15–20ug之间、每只眼睛20–25ug之间。

16.根据权利要求13至15中任一项所述的方法，其中所述化合物-葡甲胺的所述负荷剂量为每只眼睛50ul的总体积。

17.根据权利要求1至13中任一项所述的方法，其中将所述治疗有效剂量的所述化合物-葡甲胺经玻璃体内施用至所述患者的眼睛中。

18.根据权利要求14至16中任一项所述的方法，其中将所述负荷剂量的所述化合物-葡甲胺经玻璃体内施用至所述患者的眼睛中。

19.根据权利要求1至12、17中任一项所述的方法，其中将所述治疗有效剂量的所述化合物-葡甲胺每2个月、每3个月、每4个月、每5个月、每6个月、每7个月、每8个月、每9个月、每10个月、每11个月、每12个月一次经玻璃体内施用至所述患者的眼睛中。

20.根据权利要求1至12、17中任一项所述的方法，其中将所述治疗有效剂量的所述化合物-葡甲胺每2–3个月、每3–4个月、每5–6个月、每6–7个月、每8–9个月、每9–10个月、每11–12个月一次经玻璃体内施用至所述患者的眼睛中。

21.根据权利要求1至12、17、19至20中任一项所述的方法，其中将所述治疗有效剂量的所述化合物-葡甲胺以每2个月单剂量、每3个月单剂量、每4个月单剂量、每5个月单剂量、每6个月单剂量、每7个月单剂量、每8个月单剂量、每9个月单剂量、每10个月单剂量、每11个月单剂量或每12个月单剂量经玻璃体内施用至所述患者的眼睛中。

22.根据权利要求1至12、17、19至20中任一项所述的方法，其中将所述治疗有效剂量的所述化合物-葡甲胺以每2–3个月单剂量、每3–4个月单剂量、每5–6个月单剂量、每6–7个月单剂量、每8–9个月单剂量、每9–10个月单剂量、每11–12个月单剂量经玻璃体内施用至所述患者的眼睛中。

23.根据权利要求1至12、17、20至22中任一项所述的方法，其中将所述治疗有效剂量的所述化合物-葡甲胺以单剂量经玻璃体内施用至所述患者的眼睛中一次。

24.根据权利要求23所述的方法，其中将所述治疗有效剂量的所述化合物-葡甲胺以单剂量经玻璃体内施用至所述患者的眼睛中一次，不与之前的负荷剂量结合。

25.根据权利要求13至16、18中任一项所述的方法，其中将经玻璃体内施用至所述患者的眼睛中的所述负荷剂量按以下方式施用：每月一次IVT注射，持续2个月；或每月一次IVT注射，持续3个月；或2个月内至少一次IVT注射；或2个月内至少两次IVT注射；或2个月内至少三次IVT注射；或3个月内至少三次IVT注射；或3个月内至少两次IVT注射。

26.根据权利要求25所述的方法，其中在施用所述治疗有效剂量之前，所述负荷剂量之后有至少2个月、至少3个月、至少4个月、至少5个月、至少6个月、至少7个月、至少8个月、至少9个月、至少10个月、至少11个月、至少12个月的治疗间隔。

27.根据权利要求1至26中任一项所述的方法，其中所述患者显示出自基线至少40μm、自基线至少50μm、自基线至少60μm、自基线至少70μm、自基线至少80μm、自基线至少90μm的CST降低，如通过SD-OCT所测量的。

28.根据权利要求1至27中任一项所述的方法，其中所述患者进一步显示出与基线相比不存在黄斑流体，如通过SD-OCT所评估的。

29.根据权利要求1至27中任一项所述的方法，其中所述患者进一步显示出与基线相比不存在渗出物，如通过SD-OCT所评估的。

30.根据权利要求1至29中任一项所述的方法，其中所述患者不需要超过2次抗VEGF治疗抢救，或不需要超过3次抗VEGF治疗抢救，或不需要超过4次抗VEGF治疗抢救，或不需要超过5次抗VEGF治疗抢救。

31.根据权利要求30所述的方法，其中所述患者不需要任何抗VEGF治疗抢救。

32.根据权利要求1至31中任一项所述的方法，其中所述患者显示出以下改善：BCVA较基线的至少5个ETDRS字母改善、或BCVA较基线的至少6个ETDRS字母改善、或BCVA较基线的至少7个ETDRS字母改善、或BCVA较基线的至少8个ETDRS字母改善、或BCVA较基线的至少9个ETDRS字母改善、或BCVA较基线的至少10个ETDRS字母改善、BCVA较基线的至少15个ETDRS字母改善、或BCVA较基线的至少20个ETDRS字母改善。

33.根据权利要求1至32中任一项所述的方法，其中所述患者显示出以下改善：BCVA较基线的介于5-7个ETDRS字母改善、BCVA较基线的介于6-8个ETDRS字母改善、BCVA较基线的介于7-9个ETDRS字母改善、BCVA较基线的介于10-15个ETDRS字母改善、BCVA较基线的介于15-20个ETDRS字母改善、BCVA较基线的介于20-25个ETDRS字母改善、BCVA较基线的介于25-30个ETDRS字母改善。

34.根据权利要求1至33中任一项所述的方法，其中所述患者显示出：眼部无血管面积较基线的至少0.10mm2减少，或眼部无血管面积较基线的至少0.20mm²减少，或眼部无血管面积较基线的至少0.30mm²减少，或眼部无血管面积较基线的至少0.40mm²减少，或眼部无血管面积较基线的至少0.50mm²减少，或眼部无血管面积较基线的至少0.60mm²减少，或眼部无血管面积较基线的至少0.70mm²减少，或眼部无血管面积较基线的至少0.80mm²减少，或眼部无血管面积较基线的至少0.90mm²减少，或眼部无血管面积较基线的至少1.0mm²减少，均通过荧光血管造影术(FA)或光学相干断层扫描血管造影术(OCT-A)进行测量。

35.根据权利要求1至34中任一项所述的方法，其中所述患者具有糖尿病性视网膜病变严重程度量表(DRSS)较基线的2步改善。

36.根据权利要求1至35中任一项所述的方法，其中所述患者显示出新血管形成相对于基线的消退，如通过FA或OCT-A所测量的。

37.根据权利要求1至36中任一项所述的方法，其中所述视网膜血管病变是糖尿病性黄斑水肿(DME)。

38.根据权利要求1至36中任一项所述的方法，其中所述视网膜血管病变是糖尿病性视网膜病变(DR)。

39.根据权利要求1至36中任一项所述的方法，其中所述视网膜血管病变是年龄相关性黄斑变性(AMD)。

40.根据权利要求1至36中任一项所述的方法，其中所述视网膜血管病变是地图状萎缩(GA)。

41.根据权利要求38所述的方法，其中所述患者在基线处还呈现出非增殖性糖尿病性视网膜病变。

42.根据权利要求38所述的方法，其中所述患者在基线处还呈现出增殖性糖尿病性视网膜病变。