CN117587118A - 一种湿证诊断试剂 - Google Patents
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Abstract
本发明属于生物医药领域，涉及一种湿证诊断试剂。本发明提供了基因检测试剂在制备湿证诊断试剂或试剂盒中的应用，所述的基因选自IGKV3‑20、TRAV 38‑2DV8或TRAV 20中的至少一种。本发明研究发现，所述的基因检测试剂可以很准确地将湿证和非湿证个体进行区分，从而可以针对性对一些患者的疾病治疗的同时，进行湿证治疗，可以促进相关疾病的治疗效果。
Description
技术领域
本发明属于生物医药领域，涉及一种湿证诊断试剂。
背景技术
湿证是中医病证名，中医认为湿生百病。因湿性重着、粘滞、易阻碍气机，损伤阳气，故其病变常缠绵留着，不易速去。其症候特点为头胀而痛，脘腹满闷，身重而痛，体倦，舌苔黏腻，脉缓或濡。湿证可分为内湿和外湿，内湿主要因摄食太多肥甘生湿食物，超过脾运化的负荷；外湿主要来源于感受外界环境中的湿邪。内湿和外湿可相互影响，说明内外湿有共同的发病机制。按现代研究，无论内湿外湿，均离不开致病微生物。内湿产生，是因为肥甘生湿食物滋助了肠道内致病微生物的定植、繁殖。外湿的产生，是因为空气或水源中致病微生物侵袭人体呼吸道、消化道粘膜。
近年来，随着气候环境、生活方式等变化，新的疾病不断出现，其中不乏与湿邪相关的新的疾病，如SARS、禽流感等疾病，有研究报道湿邪是SARS病毒依存的条件，英国伦敦卫生和热带医院的流行病学教授麦克迈克尔指出，在温暖及潮湿的情况下滋长的疾病，在未来二十年将会更加普遍门。湿邪害人最广，湿证牵涉到几乎所有的疾病的发生发展。
湿邪为六淫之一，也是内生五邪之一，湿邪可与风，寒，暑，热，毒等邪气相合为病，导致症候变化多端，疾病缠绵难愈，是中医重要的致病因素。我国中医药行业标准ZT/T001《中医病症诊断疗效标准》中397种病症中，涉及湿证的达130种，约占1/3.可见，湿证是临床常见证候。但是，作为中医学基本证候之一的湿证，目前并没有明确的诊断标准，在诊断过程中，往往与“痰湿”“湿热”“寒湿”等兼夹证候混淆；同时，还存在湿证相关的诊断条件条目缺乏权重等问题。目前湿证的诊断方法主要是通过湿证量表进行判断，仍无法做到湿证的精准、可量化的分子诊断。
发明内容
一些实施方案中，本发明提供了基因检测试剂在制备湿证诊断试剂或试剂盒中的应用，所述的基因选自IGKV3-20、TRAV 38-2DV8或TRAV 20中的至少一种。
一些实施方案中，所述基因为IGKV3-20、TRAV 38-2DV8和TRAV 20的组合。
一些实施方案中，所述基因为IGKV3-20、TRAV 38-2DV8和TRAV 20中的两两组合。
T细胞和B细胞在介导机体细胞免疫和体液免疫应答中，起到至关重要的作用。而T细胞、B细胞的功能异常，也促进了自身免疫性疾病、癌证等疾病的发生发展。经典免疫学研究证明，T细胞和B细胞是通过其表面的T细胞受体(TCR)和B细胞受体(BCR)来识别和结合抗原，从而发挥其在生理功能上识别并清除病原体，又或者在疾病状态下识别且攻击机体的作用。
TCR是高度多样化的异源二聚体，大多数由T细胞表达的α和β链(αβTCR)或者少部分由γδ链(γδTCR)组成。而TCRβ和γ链的可变区(Virable Domain,V区)由多个可变的V基因(Variable gene segment)、连接的J基因(Joining gene segment)以及多样性的D基因片段(Diversity gene segment)编码，而TCRα和δ链的可变区由多个V和J基因片段编码。类似的，BCR由重链(Heavy Chain,IgH)以及轻链(Light Chain，IgL)组成。BCR重链的可变区由V、D和J基因片段组成，而BCR轻链的可变区只有V基因片段和J基因片段。之前的研究证明，TCR和BCR可变区的可变的(V)、多样性(D)和连接(J)基因片段能发生各种多样性基因重排，每一种重排的V-D-J基因将赋予每一种T、B细胞独特的TCR、BCR序列，从而导致了机体TCR和BCR的功能多样性。
一些实施方案中，所述的检测试剂检测所述基因的表达量。
一些实施方案中，所述检测试剂检测所述基因的mRNA表达量。
一些实施方案中，所述检测试剂检测所述基因的蛋白表达量。
一些实施方案中，所述检测试剂选自荧光定量PCR染料、荧光定量PCR引物、荧光定量PCR探针、抗体、抗体功能性片段或偶联抗体组成组中的至少一种。
一些实施方案中，所述试剂盒选自qPCR试剂盒、免疫印迹检测试剂盒、免疫层析检测试剂盒、流式细胞分析试剂盒、免疫组化检测试剂盒、ELISA试剂盒或电化学发光检测试剂盒组成组中的至少一种。
一些实施方案中，所述诊断所针对的样本选自体液、组织、排泄物或细胞，但又不限于此。
一些实施方案中，所述体液选自组织液、血液、淋巴液、脑脊液胸、膜腔积液、腹膜腔积液、关节腔积液或羊水，但又不限于此。
一些实施方案中，所述组织包括关节滑膜组织，但又不限于此。一些实施方案中，所述血液选自外周血。
一些实施方案中，所述血液选自血清或血浆，但又不限于此。
一些实施方案中，所述样本来源于患有银屑病或者类风湿性关节炎的患者。
一些实施方案中，本发明提供了一种湿证的诊断试剂盒，所述试剂盒包含基因IGKV3-20、TRAV 38-2DV8或TRAV 20中至少一种的检测试剂。
一些实施方案中，所述检测试剂检测为检测所述基因的表达量。
一些实施方案中，所述检测试剂为检测所述基因的mRNA表达量。
一些实施方案中，所述检测试剂为检测所述基因的蛋白表达量。
一些实施方案中，所述检测试剂选自荧光定量PCR染料、荧光定量PCR引物、荧光定量PCR探针、抗体、抗体功能性片段或偶联抗体组成组中的至少一种。
一些实施方案中，所述试剂盒选自qPCR试剂盒、免疫印迹检测试剂盒、免疫层析检测试剂盒、流式细胞分析试剂盒、免疫组化检测试剂盒、ELISA试剂盒或电化学发光检测试剂盒组成组中的至少一种。
一些实施方案中，所述试剂盒还含有说明书或者标签。
一些实施方案中，所述诊断所针对的样本选自体液、组织、排泄物或细胞，但又不限于此。
一些实施方案中，所述体液选自组织液、血液、淋巴液、脑脊液胸、膜腔积液、腹膜腔积液、关节腔积液或羊水，但又不限于此。
一些实施方案中，所述组织包括关节滑膜组织，但又不限于此。
一些实施方案中，所述血液选自外周血。
一些实施方案中，所述血液选自血清或血浆，但又不限于此。
一些实施方案中，所述样本来源于患有银屑病或者类风湿性关节炎的患者。
一些实施方案中，本发明提供了一种湿证的诊断系统，所述的诊断系统含有：检测构件：所述的检测构件用以检测基因的表达量；结果判断构件：所述的结果判断构件用于根据检测构件检测出的基因的表达量的结果，输出湿证结果；所述的基因为IGKV3-20、TRAV38-2DV8或TRAV 20中的至少一种。
一些实施方案中，所述的基因的表达量为mRNA表达量或蛋白表达量。
一些实施方案中，所述的结果判断构件含有输入模块、分析模块和输出模块；输入模块用于输入所述基因的表达量；分析模块用于根据所述基因的表达量，分析出湿证结果；输出模块用于输出分析模块的分析结果。
一些实施方案中，所述的检测构件选自qPCR试剂盒、免疫印迹检测试剂盒、免疫层析检测试剂盒、流式细胞分析试剂盒、免疫组化检测试剂盒、ELISA试剂盒、电化学发光检测试剂盒、qPCR仪、免疫印迹检测装置、流式细胞仪、免疫组化检测装置、ELISA检测装置、或电化学发光检测装置。
一些实施方案中，所述诊断所针对的样本选自血液或组织。
一些实施方案中，所述体液选自组织液、血液、淋巴液、脑脊液胸、膜腔积液、腹膜腔积液、关节腔积液或羊水，但又不限于此。
一些实施方案中，所述组织包括关节滑膜组织，但又不限于此。
一些实施方案中，所述血液选自外周血。
一些实施方案中，所述血液选自血清或血浆，但又不限于此。
一些实施方案中，所述样本来源于患有银屑病或者类风湿性关节炎的患者。
一些实施方案中，本发明提供了基因检测试剂在制备湿证诊断装置中的应用，所述的基因选自IGKV3-20、TRAV 38-2DV8或TRAV 20中的至少一种。
一些实施方案中，所述装置包括样本获取单元，包括样本提取试剂；检测单元，用于检测基因的表达量。
一些实施方案中，所述装置还包括比对单元，用于将检测样本中基因的表达水平与参考值进行比对。
一些实施方案中，所述基因为IGKV3-20、TRAV 38-2DV8和TRAV 20的组合。
一些实施方案中，所述的检测试剂检测所述基因的表达量。
一些实施方案中，所述检测试剂检测所述基因的mRNA表达量。
一些实施方案中，所述检测试剂检测所述基因的蛋白表达量。
一些实施方案中，所述检测试剂选自荧光定量PCR染料、荧光定量PCR引物、荧光定量PCR探针、抗体、抗体功能性片段或偶联抗体组成组中的至少一种。
一些实施方案中，所述诊断所针对的样本选自体液、组织、排泄物或细胞，但又不限于此。
一些实施方案中，所述体液选自组织液、血液、淋巴液、脑脊液胸、膜腔积液、腹膜腔积液、关节腔积液或羊水，但又不限于此。
一些实施方案中，所述组织包括关节滑膜组织，但又不限于此。
一些实施方案中，所述血液选自外周血。
一些实施方案中，所述血液选自血清或血浆，但又不限于此。
一些实施方案中，所述样本来源于患有银屑病或者类风湿性关节炎的患者。
附图说明
图1A-C示出了IGKV3-20、TRAV38-2DV8和TRAV20三个基因的单个基因预测湿证的ROC曲线。
图2A-D示出了IGKV3-20、TRAV38-2DV8和TRAV20三个基因相互组合分别对湿证的预测结果。
图3示出了IGKV3-20、TRAV38-2DV8和TRAV20三个基因的组合进行湿证预测的准确率结果。
图4A-M为其余13个单个V基因诊断湿证的ROC曲线。
图5为16个V基因组合预测湿证的准确率结果。
具体实施方式
以下通过具体的实施例进一步说明本发明的技术方案，具体实施例不代表对本发明保护范围的限制。其他人根据本发明理念所做出的一些非本质的修改和调整仍属于本发明的保护范围。
本文中，TRAV20也可以为TRAV20，TCRAV20S1,TCRAV30S1，或TCR-alpha V20。
本文中，TRAV 38-2DV8也可以为TRAV38-2DV8,T Cell Receptor Alpha Variable38-2/Delta Variable 8,TRAV38-2/DV8,TRAV382DV8,TCRAV14S1,HADV38S2,T CellReceptor Alpha/DeltaVariable 38-2/DV8。
本文中，IGKV3-20也可以为Immunoglobulin KappaVariable 3-20,IGKV320。
本文中，阈值(或“Threshold”)也指cut off值；实验结果中涉及到的阈值指的是检测指标的最佳阈值。
本文中，术语“湿证”指的是由于外感湿邪，或体内水液运化失常而形成湿浊，阻遏气机与清阳，以身体困重、肢体酸痛、腹胀腹泻、纳呆、苔滑脉濡等为主要表现的证候。
V基因表达：V基因和J基因的基因组的重排决定了V(D)J接口，其中包括了CDR3区。所以免疫组的特征不光可以通过特异性CDR3的频率来描述，也可以通过V和J基因的使用频率，即特异V和J基因的表达来描述。这里我们通过计算特定V基因的使用频率(表达)来描述免疫组的特征。
数据处理：免疫组的数据应用SPSS for Windows Version 26.0和GraphPadPrism V 8.00软件进行分析和处理，以P<0.05表示差异具有显著性。正态分布的计量指标以均数±标准差表示，采用两独立样本使用Mann-Whitney U检验或t检验进行组间比较；非正态分布的计量指标以中位数(四分位间距)表示，组间比较采用秩和检验；计数指标组间比对采用卡方检验或费舍尔精确检验进行比较。
关于灵敏度、特异性、阳性预测值、阴性预测值的计算方法如表1所示:
表1灵敏度、特异性、阳性预测值、阴性预测值的计算方法
灵敏度计算方法为：检测结果数值高于cutoff值的湿证者数占全部湿证者者数的百分比。
标志物的特异性计算方法为：检测结果低于cutoff值的湿证者的数目占全部健康者数目的百分比。
以下实施例中，V基因对湿证的诊断测试方法步骤为：采用V基因的表达量进行特征选择和建模。采用随机森林、Lasso回归和OPLS-DA三种算法进行特征选择，而随机森林方法进一步应用于预测模型的构建。将V基因的数据集按7：3的比例随机划分为训练集和测试集。利用训练集中top选择的特征构建预测模型，并在测试集中进行验证。为了评估预测模型的性能，我们通过以不同的比例随机划分数据集并执行1000次运行来进一步验证它们。最后，我们绘制了ROC曲线，并使用R软件包pROC计算了最优特征和预测模型的AUC值。
实施例1样本来源与分析
银屑病和类风湿关节炎患者根据2010年版的成人银屑病/银屑病性关节炎和类风湿关节炎患者的诊断和治疗标准诊断为寻常型银屑病和类风湿关节炎。20例银屑病(包含10例湿证和10例非湿证)和19类风湿关节炎患者(包含10例湿证和9例非湿证)。湿证的诊断参见文献1(见文献1表2中医湿证评估量表)。
根据湿证量表，20例湿证患者的基本信息如下：
表2 20例湿证患者的基本信息
另外，19例非湿证患者的基本信息如下：
表3 19例非湿证患者的基本信息
| 编号 | 年龄 | 疾病情况 | 是否诊断为湿证 |
| 患者21 | 26 | 银屑病 | 非湿证 |
| 患者22 | 34 | 银屑病 | 非湿证 |
| 患者23 | 41 | 银屑病 | 非湿证 |
| 患者24 | 38 | 银屑病 | 非湿证 |
| 患者25 | 21 | 银屑病 | 非湿证 |
| 患者26 | 61 | 银屑病 | 非湿证 |
| 患者27 | 51 | 银屑病 | 非湿证 |
| 患者28 | 48 | 银屑病 | 非湿证 |
| 患者29 | 25 | 银屑病 | 非湿证 |
| 患者30 | 51 | 银屑病 | 非湿证 |
| 患者31 | 31 | 类风湿性关节炎 | 非湿证 |
| 患者32 | 69 | 类风湿性关节炎 | 非湿证 |
| 患者33 | 63 | 类风湿性关节炎 | 非湿证 |
| 患者34 | 53 | 类风湿性关节炎 | 非湿证 |
| 患者35 | 47 | 类风湿性关节炎 | 非湿证 |
| 患者36 | 61 | 类风湿性关节炎 | 非湿证 |
| 患者37 | 66 | 类风湿性关节炎 | 非湿证 |
| 患者38 | 44 | 类风湿性关节炎 | 非湿证 |
| 患者39 | 50 | 类风湿性关节炎 | 非湿证 |
实施例2 V基因的检测方法
1、RNA提取
所有血液样本均在患者知情同意的情况下收集。通过静脉采血将2毫升新鲜血液样本采集到PAXgene血液RNA管中(Qiagen)，并将样本放置于室温下4小时，然后转移到-80℃。随后使用PAXgene血液RNA提取试剂盒(Qiagen)，按照制造商的说明提取这些样本的总RNA。RNA质量要求:浓度≥15ng/μL；A260/280＝1.8～2.2；RIN≥5。RNA质量评估:使用Nanodrop测定所提取RNA的浓度、A260/280等参数；使用2％琼脂糖凝胶电泳系统评估RNA的完整性、DNA的污染情况；使用Agilent Bioanalyzer 2100进一步分析RNA的片段完整性和分布情况。
2.通过高通量测序测定样本中IGKV3-20、TRAV 38-2DV8或TRAV 20的表达情况
使用iR-Repseq+7链盒对上述RNA样本进行扩增。然后将这些文库汇集到IlluminaMiSeq平台上进行测序，检测各样本IGKV3-20、TRAV 38-2DV8或TRAV 20的表达情况。其表达情况如下表所示：
(1)TRAV 20的基因表达情况如表4所示：
表4
(2)TRAV 38-2DV8的基因表达情况如表5所示：
表5
/>
(3)IGKV3-20的基因表达情况如表6所示：
表6
/>
实施例3单个V基因对湿证的诊断测试
采用V基因的表达量进行特征选择和建模。采用随机森林、Lasso回归和OPLS-DA三种算法进行特征选择，而随机森林方法进一步应用于预测模型的构建。将V基因的数据集按7：3的比例随机划分为训练集和测试集。利用训练集中top选择的特征构建预测模型，并在测试集中进行验证。为了评估预测模型的性能，我们通过以不同的比例随机划分数据集并执行1000次运行来进一步验证它们。最后，我们绘制了ROC曲线，并使用R软件包pROC计算了最优特征和预测模型的AUC值。
按70％构建测试集进行建模，然后将模型在30％构建的测试进行检验，分别测试1000次，获得IGKV3-20,TRAV38-2DV8和TRAV20单个基因预测湿证的准确率。
结果显示：(1)IGKV3-20预测湿证的准确率为0.778，OOB:0.220；(2)TRAV20预测湿证的准确率为0.615，OOB:0.380；(3)TRAV38-2DV8预测湿证的准确率为0.587，OOB:0.419。其ROC曲线如图1A-C所示。
实施例4多个V基因对湿证的诊断测试
随机把IGKV3-20,TRAV38-2DV8和TRAV20三个基因里的两个进行组合进行相关的训练，其结果如下：(1)IGKV3-20+TRAV20的预测准确率为0.770，OOB:0.224，其ROC曲线AUC为0.8839，阈值为0.88(图2A)；(2)IGKV3-20+TRAV38-2DV8的预测准确率为0.880，OOB:0.123，其ROC曲线的AUC为0.8875，阈值为0.11(图2B)；(3)TRAV20+TRAV38-2DV8的预测准确率为0.699，OOB:0.305，其ROC曲线的AUC为0.5273，阈值为1(图2C)。
最后我们把IGKV3-20,TRAV38-2DV8和TRAV20三个基因组合起来再次按70％的数据构建测试集进行建模，然后将模型在30％构建的测试进行检验，分别测试1000次。我们发现当采用三个基因的组合进行湿证预测，如图2D和图3所示，其准确率最高，OOB最低(准确率为0.900，OOB：0.1034)。
试验例1
通过随机森林模型，获得了其余13个单个基因与湿证相关的ROC曲线。13个单基因ROC曲线下面积的排名如下(图4A-M)：TRAV3(AUC:0.811),TRBV5-1(AUC:0.739),TRBV10-2(AUC:0.729),IGKV5-2(AUC:0.713),TRAV34(AUC:0.703),TRBV3-1(AUC:0.689),IGKV2-30(AUC:0.687),IGKV2D-24(AUC:0.687),TRAV9-2(AUC:0.687),TRBV6-9(AUC:0.684),TRBV16(AUC:0.657),TRAV8-6(AUC:0.616),IGHV3-6(AUC:0.614)。
试验例2
按70％构建测试集进行建模，然后将模型在30％构建的测试进行检验，分别测试1000次，我们发现这16个V基因组合预测湿证的准确率为75％(图5)。
文献1：路桃影，等.中医湿证评估量表的构建及初步优化[J].中医杂志，2021，62(19)：1677-1682。
Claims (10)
1.基因检测试剂在制备湿证诊断试剂或试剂盒中的应用，其特征在于，所述的基因选自IGKV3-20、TRAV 38-2DV8或TRAV 20中的至少一种。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述基因为IGKV3-20、TRAV 38-2DV8和TRAV20的组合。
3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的检测试剂检测所述基因的表达量；
优选地，所述检测试剂检测所述基因的mRNA表达量；
优选地，所述检测试剂检测所述基因的蛋白表达量。
4.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述检测试剂选自荧光定量PCR染料、荧光定量PCR引物、荧光定量PCR探针、抗体、抗体功能性片段或偶联抗体组成组中的至少一种。
5.如权利要求1-4任一所述的应用，其特征在于，所述试剂盒选自qPCR试剂盒、免疫印迹检测试剂盒、免疫层析检测试剂盒、流式细胞分析试剂盒、免疫组化检测试剂盒、ELISA试剂盒或电化学发光检测试剂盒组成组中的至少一种；
优选地，所述诊断所针对的样本选自体液、组织、排泄物或细胞；
优选地，所述体液选自组织液、血液、淋巴液、脑脊液胸、膜腔积液、腹膜腔积液、关节腔积液或羊水；
优选地，所述组织包括关节滑膜组织；
优选地，所述血液选自外周血；
优选地，所述血液选自血清或血浆；
优选地，所述样本来源于患有银屑病或者类风湿性关节炎的患者。
6.一种湿证的诊断试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含基因IGKV3-20、TRAV 38-2DV8或TRAV 20中至少一种的检测试剂；
优选地，所述检测试剂检测为检测所述基因的表达量；
优选地，所述检测试剂为检测所述基因的mRNA表达量；
优选地，所述检测试剂为检测所述基因的蛋白表达量。
7.如权利要求6所述的诊断试剂盒，所述检测试剂选自荧光定量PCR染料、荧光定量PCR引物、荧光定量PCR探针、抗体、抗体功能性片段或偶联抗体组成组中的至少一种；
优选地，所述试剂盒选自qPCR试剂盒、免疫印迹检测试剂盒、免疫层析检测试剂盒、流式细胞分析试剂盒、免疫组化检测试剂盒、ELISA试剂盒或电化学发光检测试剂盒组成组中的至少一种；
优选地，所述试剂盒还含有说明书或者标签；
优选地，所述诊断所针对的样本选自体液、组织、排泄物或细胞；
优选地，所述体液选自组织液、血液、淋巴液、脑脊液胸、膜腔积液、腹膜腔积液、关节腔积液或羊水；
优选地，所述组织包括关节滑膜组织；
优选地，所述血液选自外周血；
优选地，所述血液选自血清或血浆；
优选地，所述样本来源于患有银屑病或者类风湿性关节炎的患者。
8.一种湿证的诊断系统，其特征在于，所述的诊断系统含有：
检测构件：所述的检测构件用以检测基因的表达量；
结果判断构件：所述的结果判断构件用于根据所述检测构件检测出的基因的表达量的结果，输出湿证预测结果；
所述的基因为IGKV3-20、TRAV 38-2DV8或TRAV 20中的至少一种。
9.如权利要求8所述的诊断系统，其特征在于，所述的基因的表达量为mRNA表达量或蛋白表达量；
优选地，所述的结果判断构件含有输入模块、分析模块和输出模块；输入模块用于输入所述基因的表达量；分析模块用于根据所述基因的表达量，分析出湿证结果；输出模块用于输出分析模块的分析结果。
优选地，所述的检测构件选自qPCR试剂盒、免疫印迹检测试剂盒、免疫层析检测试剂盒、流式细胞分析试剂盒、免疫组化检测试剂盒、ELISA试剂盒、电化学发光检测试剂盒、qPCR仪、免疫印迹检测装置、流式细胞仪、免疫组化检测装置、ELISA检测装置、或电化学发光检测装置；
优选地，所述诊断所针对的样本选自体液、组织、排泄物或细胞；
优选地，所述体液选自组织液、血液、淋巴液、脑脊液胸、膜腔积液、腹膜腔积液、关节腔积液或羊水；
优选地，所述组织包括关节滑膜组织；
优选地，所述血液选自外周血；
优选地，所述血液选自血清或血浆；
优选地，所述样本来源于患有银屑病或者类风湿性关节炎的患者。
10.基因检测试剂在制备湿证诊断装置中的应用，所述的基因选自IGKV3-20、TRAV 38-2DV8或TRAV 20中的至少一种；
优选地，所述装置包括样本获取单元，包括样本提取试剂；检测单元，用于检测基因的表达量；
优选地，所述装置还包括比对单元，用于将检测样本中基因的表达水平与参考值进行比对；
优选地，所述基因为IGKV3-20、TRAV 38-2DV8和TRAV 20的组合；
优选地，所述的检测试剂检测所述基因的表达量；
优选地，所述检测试剂检测所述基因的mRNA表达量；
优选地，所述检测试剂检测所述基因的蛋白表达量；
优选地，所述检测试剂选自荧光定量PCR染料、荧光定量PCR引物、荧光定量PCR探针、抗体、抗体功能性片段或偶联抗体组成组中的至少一种；
优选地，所述诊断所针对的样本选自体液、组织、排泄物或细胞；
优选地，所述体液选自组织液、血液、淋巴液、脑脊液胸、膜腔积液、腹膜腔积液、关节腔积液或羊水；
优选地，所述组织包括关节滑膜组织；
优选地，所述血液选自外周血；
优选地，所述血液选自血清或血浆；
优选地，所述样本来源于患有银屑病或者类风湿性关节炎的患者。
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