CN117203234A - 抗cntn4特异性抗体及其用途 - Google Patents
抗cntn4特异性抗体及其用途 Download PDFInfo
- Publication number
- CN117203234A CN117203234A CN202180097588.5A CN202180097588A CN117203234A CN 117203234 A CN117203234 A CN 117203234A CN 202180097588 A CN202180097588 A CN 202180097588A CN 117203234 A CN117203234 A CN 117203234A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- antibody
- antigen
- cntn
- binding fragment
- cells
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims abstract description 132
- 238000009739 binding Methods 0.000 claims abstract description 132
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 122
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 122
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 120
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims abstract description 120
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 91
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 71
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims abstract description 38
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 35
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 31
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 27
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 22
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 claims description 21
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 18
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 18
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 16
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 16
- 101000909504 Homo sapiens Contactin-4 Proteins 0.000 claims description 15
- 229940076838 Immune checkpoint inhibitor Drugs 0.000 claims description 12
- 102000037984 Inhibitory immune checkpoint proteins Human genes 0.000 claims description 12
- 108091008026 Inhibitory immune checkpoint proteins Proteins 0.000 claims description 12
- 239000012274 immune-checkpoint protein inhibitor Substances 0.000 claims description 12
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 11
- 102000054221 human CNTN4 Human genes 0.000 claims description 11
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 10
- 229940045513 CTLA4 antagonist Drugs 0.000 claims description 9
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 claims description 9
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 claims description 9
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 claims description 9
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims description 9
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 claims description 8
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 claims description 7
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 claims description 7
- 230000028327 secretion Effects 0.000 claims description 7
- 238000011319 anticancer therapy Methods 0.000 claims description 6
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 claims description 6
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 5
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 claims description 5
- 101000909511 Mus musculus Contactin-4 Proteins 0.000 claims description 4
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 3
- 108010003723 Single-Domain Antibodies Proteins 0.000 claims description 2
- 102100024340 Contactin-4 Human genes 0.000 claims 2
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 claims 1
- 101150033527 TNF gene Proteins 0.000 claims 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 abstract description 6
- 230000021633 leukocyte mediated immunity Effects 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 86
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 43
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 35
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 33
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 20
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 16
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 15
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 14
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 12
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 11
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 11
- 102000008096 B7-H1 Antigen Human genes 0.000 description 10
- 108010074708 B7-H1 Antigen Proteins 0.000 description 10
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 description 10
- 101000738771 Homo sapiens Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Proteins 0.000 description 10
- 102100037422 Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Human genes 0.000 description 10
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 10
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 10
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 10
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 10
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 9
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 9
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 9
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 9
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 9
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 9
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 9
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 8
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 8
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 8
- 102000037982 Immune checkpoint proteins Human genes 0.000 description 7
- 108091008036 Immune checkpoint proteins Proteins 0.000 description 7
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 7
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 7
- 208000012116 immunodeficiency-related disease Diseases 0.000 description 7
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- 108010021064 CTLA-4 Antigen Proteins 0.000 description 6
- 102000008203 CTLA-4 Antigen Human genes 0.000 description 6
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 6
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 6
- 101710089372 Programmed cell death protein 1 Proteins 0.000 description 6
- 102100040678 Programmed cell death protein 1 Human genes 0.000 description 6
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- 239000000611 antibody drug conjugate Substances 0.000 description 6
- 229940049595 antibody-drug conjugate Drugs 0.000 description 6
- 230000017188 evasion or tolerance of host immune response Effects 0.000 description 6
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 6
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 6
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 5
- 230000006044 T cell activation Effects 0.000 description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 5
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 5
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 5
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 5
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 5
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 5
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 5
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 5
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 5
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 5
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 5
- 238000002198 surface plasmon resonance spectroscopy Methods 0.000 description 5
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 4
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 4
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 4
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 4
- -1 i.e. Substances 0.000 description 4
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 4
- 238000002826 magnetic-activated cell sorting Methods 0.000 description 4
- 210000003071 memory t lymphocyte Anatomy 0.000 description 4
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 4
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 4
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 4
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 3
- 241000194035 Lactococcus lactis Species 0.000 description 3
- 229930012538 Paclitaxel Natural products 0.000 description 3
- 102100024952 Protein CBFA2T1 Human genes 0.000 description 3
- 235000014897 Streptococcus lactis Nutrition 0.000 description 3
- 229940124650 anti-cancer therapies Drugs 0.000 description 3
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 3
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 3
- 230000006870 function Effects 0.000 description 3
- XKUKSGPZAADMRA-UHFFFAOYSA-N glycyl-glycyl-glycine Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)NCC(O)=O XKUKSGPZAADMRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 3
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 3
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 3
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 3
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 3
- 229960005386 ipilimumab Drugs 0.000 description 3
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 3
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 3
- 229960003301 nivolumab Drugs 0.000 description 3
- 229940127084 other anti-cancer agent Drugs 0.000 description 3
- 229960001592 paclitaxel Drugs 0.000 description 3
- 229960002621 pembrolizumab Drugs 0.000 description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 3
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 3
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 3
- 210000003289 regulatory T cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 241000894007 species Species 0.000 description 3
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 description 3
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000004565 tumor cell growth Effects 0.000 description 3
- HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoethan-1-ol Chemical compound NCCO HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011725 BALB/c mouse Methods 0.000 description 2
- 241000186016 Bifidobacterium bifidum Species 0.000 description 2
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 2
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 2
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 206010014733 Endometrial cancer Diseases 0.000 description 2
- 206010014759 Endometrial neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 2
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 2
- 229920001917 Ficoll Polymers 0.000 description 2
- 208000022072 Gallbladder Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- OYTPNWYZORARHL-XHNCKOQMSA-N Gln-Ala-Pro Chemical compound C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N OYTPNWYZORARHL-XHNCKOQMSA-N 0.000 description 2
- LCRDMSSAKLTKBU-ZDLURKLDSA-N Gly-Ser-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CN LCRDMSSAKLTKBU-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 2
- 206010062016 Immunosuppression Diseases 0.000 description 2
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 208000031422 Lymphocytic Chronic B-Cell Leukemia Diseases 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- 101100496557 Mus musculus Cntn4 gene Proteins 0.000 description 2
- ZDZOTLJHXYCWBA-VCVYQWHSSA-N N-debenzoyl-N-(tert-butoxycarbonyl)-10-deacetyltaxol Chemical compound O([C@H]1[C@H]2[C@@](C([C@H](O)C3=C(C)[C@@H](OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C=4C=CC=CC=4)C[C@]1(O)C3(C)C)=O)(C)[C@@H](O)C[C@H]1OC[C@]12OC(=O)C)C(=O)C1=CC=CC=C1 ZDZOTLJHXYCWBA-VCVYQWHSSA-N 0.000 description 2
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 2
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 2
- 208000015634 Rectal Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 2
- YMTLKLXDFCSCNX-BYPYZUCNSA-N Ser-Gly-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)NCC(O)=O YMTLKLXDFCSCNX-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 2
- 229940123237 Taxane Drugs 0.000 description 2
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 208000002495 Uterine Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 2
- 108010008685 alanyl-glutamyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 2
- 239000002256 antimetabolite Substances 0.000 description 2
- OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N azane;(2e)-3-ethyl-2-[(e)-(3-ethyl-6-sulfo-1,3-benzothiazol-2-ylidene)hydrazinylidene]-1,3-benzothiazole-6-sulfonic acid Chemical compound [NH4+].[NH4+].S/1C2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N(CC)C\1=N/N=C1/SC2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N1CC OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N 0.000 description 2
- VSRXQHXAPYXROS-UHFFFAOYSA-N azanide;cyclobutane-1,1-dicarboxylic acid;platinum(2+) Chemical compound [NH2-].[NH2-].[Pt+2].OC(=O)C1(C(O)=O)CCC1 VSRXQHXAPYXROS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940002008 bifidobacterium bifidum Drugs 0.000 description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 2
- 229960004562 carboplatin Drugs 0.000 description 2
- 238000005277 cation exchange chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 2
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 description 2
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 2
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 2
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 description 2
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 description 2
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 description 2
- 238000011038 discontinuous diafiltration by volume reduction Methods 0.000 description 2
- 229960003668 docetaxel Drugs 0.000 description 2
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 2
- VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N etoposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@H](C)OC[C@H]4O3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N 0.000 description 2
- 201000010175 gallbladder cancer Diseases 0.000 description 2
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 2
- SDUQYLNIPVEERB-QPPQHZFASA-N gemcitabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1C(F)(F)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 SDUQYLNIPVEERB-QPPQHZFASA-N 0.000 description 2
- 229960005277 gemcitabine Drugs 0.000 description 2
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 2
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 2
- 208000030776 invasive breast carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 description 2
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 2
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 description 2
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 239000007758 minimum essential medium Substances 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 2
- 210000000581 natural killer T-cell Anatomy 0.000 description 2
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 2
- 150000003057 platinum Chemical class 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 206010038038 rectal cancer Diseases 0.000 description 2
- 201000001275 rectum cancer Diseases 0.000 description 2
- 239000000333 selective estrogen receptor modulator Substances 0.000 description 2
- 229940095743 selective estrogen receptor modulator Drugs 0.000 description 2
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 2
- 206010041823 squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 2
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 2
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 2
- 206010046766 uterine cancer Diseases 0.000 description 2
- GBABOYUKABKIAF-GHYRFKGUSA-N vinorelbine Chemical compound C1N(CC=2C3=CC=CC=C3NC=22)CC(CC)=C[C@H]1C[C@]2(C(=O)OC)C1=CC([C@]23[C@H]([C@]([C@H](OC(C)=O)[C@]4(CC)C=CCN([C@H]34)CC2)(O)C(=O)OC)N2C)=C2C=C1OC GBABOYUKABKIAF-GHYRFKGUSA-N 0.000 description 2
- 229960002066 vinorelbine Drugs 0.000 description 2
- ZXNWYQOYBCUWKU-UHFFFAOYSA-M 2-(4-aminophenoxy)ethyl-trimethylazanium;bromide;hydrobromide Chemical compound [Br-].[Br-].C[N+](C)(C)CCOC1=CC=C([NH3+])C=C1 ZXNWYQOYBCUWKU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010000830 Acute leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 208000024893 Acute lymphoblastic leukemia Diseases 0.000 description 1
- 208000014697 Acute lymphocytic leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 208000031261 Acute myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 1
- YYSWCHMLFJLLBJ-ZLUOBGJFSA-N Ala-Ala-Ser Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YYSWCHMLFJLLBJ-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- BTYTYHBSJKQBQA-GCJQMDKQSA-N Ala-Asp-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](C)N)O BTYTYHBSJKQBQA-GCJQMDKQSA-N 0.000 description 1
- KXEVYGKATAMXJJ-ACZMJKKPSA-N Ala-Glu-Asp Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O KXEVYGKATAMXJJ-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- GGNHBHYDMUDXQB-KBIXCLLPSA-N Ala-Glu-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)N GGNHBHYDMUDXQB-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 1
- MNZHHDPWDWQJCQ-YUMQZZPRSA-N Ala-Leu-Gly Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(O)=O MNZHHDPWDWQJCQ-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- NINQYGGNRIBFSC-CIUDSAMLSA-N Ala-Lys-Ser Chemical compound NCCCC[C@H](NC(=O)[C@@H](N)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O NINQYGGNRIBFSC-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- HOVPGJUNRLMIOZ-CIUDSAMLSA-N Ala-Ser-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](C)N HOVPGJUNRLMIOZ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- REWSWYIDQIELBE-FXQIFTODSA-N Ala-Val-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O REWSWYIDQIELBE-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- 108010012934 Albumin-Bound Paclitaxel Proteins 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 101710137189 Amyloid-beta A4 protein Proteins 0.000 description 1
- 102100022704 Amyloid-beta precursor protein Human genes 0.000 description 1
- 101710151993 Amyloid-beta precursor protein Proteins 0.000 description 1
- 108020000948 Antisense Oligonucleotides Proteins 0.000 description 1
- VKKYFICVTYKFIO-CIUDSAMLSA-N Arg-Ala-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N VKKYFICVTYKFIO-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- HJDNZFIYILEIKR-OSUNSFLBSA-N Arg-Ile-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O HJDNZFIYILEIKR-OSUNSFLBSA-N 0.000 description 1
- AOHKLEBWKMKITA-IHRRRGAJSA-N Arg-Phe-Ser Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N AOHKLEBWKMKITA-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- RLHANKIRBONJBK-IHRRRGAJSA-N Asn-Met-Phe Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N RLHANKIRBONJBK-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- MKJBPDLENBUHQU-CIUDSAMLSA-N Asn-Ser-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O MKJBPDLENBUHQU-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- UGXYFDQFLVCDFC-CIUDSAMLSA-N Asn-Ser-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O UGXYFDQFLVCDFC-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- JBDLMLZNDRLDIX-HJGDQZAQSA-N Asn-Thr-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O JBDLMLZNDRLDIX-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- MNQMTYSEKZHIDF-GCJQMDKQSA-N Asp-Thr-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O MNQMTYSEKZHIDF-GCJQMDKQSA-N 0.000 description 1
- SFJUYBCDQBAYAJ-YDHLFZDLSA-N Asp-Val-Phe Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 SFJUYBCDQBAYAJ-YDHLFZDLSA-N 0.000 description 1
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 1
- 208000032791 BCR-ABL1 positive chronic myelogenous leukemia Diseases 0.000 description 1
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010005949 Bone cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000018084 Bone neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 206010006143 Brain stem glioma Diseases 0.000 description 1
- 210000001239 CD8-positive, alpha-beta cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 241000282465 Canis Species 0.000 description 1
- 206010007953 Central nervous system lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 241000282552 Chlorocebus aethiops Species 0.000 description 1
- 208000010833 Chronic myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 1
- 241000938605 Crocodylia Species 0.000 description 1
- NXQCSPVUPLUTJH-WHFBIAKZSA-N Cys-Ser-Gly Chemical compound SC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O NXQCSPVUPLUTJH-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 1
- 208000000461 Esophageal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 229940102550 Estrogen receptor antagonist Drugs 0.000 description 1
- 108091029865 Exogenous DNA Proteins 0.000 description 1
- 201000001342 Fallopian tube cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000013452 Fallopian tube neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102100027581 Forkhead box protein P3 Human genes 0.000 description 1
- 108700012941 GNRH1 Proteins 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- JFSNBQJNDMXMQF-XHNCKOQMSA-N Gln-Asp-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N)C(=O)O JFSNBQJNDMXMQF-XHNCKOQMSA-N 0.000 description 1
- FQCILXROGNOZON-YUMQZZPRSA-N Gln-Pro-Gly Chemical compound NC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(O)=O FQCILXROGNOZON-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- HLRLXVPRJJITSK-IFFSRLJSSA-N Gln-Thr-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O HLRLXVPRJJITSK-IFFSRLJSSA-N 0.000 description 1
- WZZSKAJIHTUUSG-ACZMJKKPSA-N Glu-Ala-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WZZSKAJIHTUUSG-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- NJCALAAIGREHDR-WDCWCFNPSA-N Glu-Leu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O NJCALAAIGREHDR-WDCWCFNPSA-N 0.000 description 1
- YQPFCZVKMUVZIN-AUTRQRHGSA-N Glu-Val-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O YQPFCZVKMUVZIN-AUTRQRHGSA-N 0.000 description 1
- PYTZFYUXZZHOAD-WHFBIAKZSA-N Gly-Ala-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)CN PYTZFYUXZZHOAD-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- GZUKEVBTYNNUQF-WDSKDSINSA-N Gly-Ala-Gln Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O GZUKEVBTYNNUQF-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- MIIVFRCYJABHTQ-ONGXEEELSA-N Gly-Leu-Val Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O MIIVFRCYJABHTQ-ONGXEEELSA-N 0.000 description 1
- PDUHNKAFQXQNLH-ZETCQYMHSA-N Gly-Lys-Gly Chemical compound NCCCC[C@H](NC(=O)CN)C(=O)NCC(O)=O PDUHNKAFQXQNLH-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- WNZOCXUOGVYYBJ-CDMKHQONSA-N Gly-Phe-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)NC(=O)CN)O WNZOCXUOGVYYBJ-CDMKHQONSA-N 0.000 description 1
- WCORRBXVISTKQL-WHFBIAKZSA-N Gly-Ser-Ser Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O WCORRBXVISTKQL-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- ZZWUYQXMIFTIIY-WEDXCCLWSA-N Gly-Thr-Leu Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O ZZWUYQXMIFTIIY-WEDXCCLWSA-N 0.000 description 1
- GNNJKUYDWFIBTK-QWRGUYRKSA-N Gly-Tyr-Asp Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O GNNJKUYDWFIBTK-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- 239000000579 Gonadotropin-Releasing Hormone Substances 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 208000017604 Hodgkin disease Diseases 0.000 description 1
- 208000010747 Hodgkins lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000861452 Homo sapiens Forkhead box protein P3 Proteins 0.000 description 1
- 101001117317 Homo sapiens Programmed cell death 1 ligand 1 Proteins 0.000 description 1
- 206010062904 Hormone-refractory prostate cancer Diseases 0.000 description 1
- OWSWUWDMSNXTNE-GMOBBJLQSA-N Ile-Pro-Asp Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N OWSWUWDMSNXTNE-GMOBBJLQSA-N 0.000 description 1
- 208000007766 Kaposi sarcoma Diseases 0.000 description 1
- PMGDADKJMCOXHX-UHFFFAOYSA-N L-Arginyl-L-glutamin-acetat Natural products NC(=N)NCCCC(N)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(O)=O PMGDADKJMCOXHX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000880493 Leptailurus serval Species 0.000 description 1
- AXZGZMGRBDQTEY-SRVKXCTJSA-N Leu-Gln-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O AXZGZMGRBDQTEY-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- FEHQLKKBVJHSEC-SZMVWBNQSA-N Leu-Glu-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 FEHQLKKBVJHSEC-SZMVWBNQSA-N 0.000 description 1
- QNBVTHNJGCOVFA-AVGNSLFASA-N Leu-Leu-Glu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O QNBVTHNJGCOVFA-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- KIZIOFNVSOSKJI-CIUDSAMLSA-N Leu-Ser-Cys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N KIZIOFNVSOSKJI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- FMFNIDICDKEMOE-XUXIUFHCSA-N Leu-Val-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O FMFNIDICDKEMOE-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 1
- GQZMPWBZQALKJO-UWVGGRQHSA-N Lys-Gly-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O GQZMPWBZQALKJO-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- OIQSIMFSVLLWBX-VOAKCMCISA-N Lys-Leu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O OIQSIMFSVLLWBX-VOAKCMCISA-N 0.000 description 1
- PDIDTSZKKFEDMB-UWVGGRQHSA-N Lys-Pro-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(O)=O PDIDTSZKKFEDMB-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- 239000012515 MabSelect SuRe Substances 0.000 description 1
- 208000032271 Malignant tumor of penis Diseases 0.000 description 1
- 206010027480 Metastatic malignant melanoma Diseases 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 208000033761 Myelogenous Chronic BCR-ABL Positive Leukemia Diseases 0.000 description 1
- 208000033776 Myeloid Acute Leukemia Diseases 0.000 description 1
- AJHCSUXXECOXOY-UHFFFAOYSA-N N-glycyl-L-tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(NC(=O)CN)C(O)=O)=CNC2=C1 AJHCSUXXECOXOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000015914 Non-Hodgkin lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 108091005461 Nucleic proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010030155 Oesophageal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000012271 PD-L1 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 208000000821 Parathyroid Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000002471 Penile Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010034299 Penile cancer Diseases 0.000 description 1
- MCIXMYKSPQUMJG-SRVKXCTJSA-N Phe-Ser-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O MCIXMYKSPQUMJG-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- FGWUALWGCZJQDJ-URLPEUOOSA-N Phe-Thr-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O FGWUALWGCZJQDJ-URLPEUOOSA-N 0.000 description 1
- 208000007913 Pituitary Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 201000005746 Pituitary adenoma Diseases 0.000 description 1
- 206010061538 Pituitary tumour benign Diseases 0.000 description 1
- 208000006664 Precursor Cell Lymphoblastic Leukemia-Lymphoma Diseases 0.000 description 1
- OOLOTUZJUBOMAX-GUBZILKMSA-N Pro-Ala-Val Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O OOLOTUZJUBOMAX-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- BGWKULMLUIUPKY-BQBZGAKWSA-N Pro-Ser-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 BGWKULMLUIUPKY-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 1
- QEDMOZUJTGEIBF-FXQIFTODSA-N Ser-Arg-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O QEDMOZUJTGEIBF-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- BPMRXBZYPGYPJN-WHFBIAKZSA-N Ser-Gly-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O BPMRXBZYPGYPJN-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- QYSFWUIXDFJUDW-DCAQKATOSA-N Ser-Leu-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O QYSFWUIXDFJUDW-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- SRSPTFBENMJHMR-WHFBIAKZSA-N Ser-Ser-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O SRSPTFBENMJHMR-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- FHXGMDRKJHKLKW-QWRGUYRKSA-N Ser-Tyr-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)NCC(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 FHXGMDRKJHKLKW-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- 201000004283 Shwachman-Diamond syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000000453 Skin Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000021712 Soft tissue sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- 206010042971 T-cell lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 208000027585 T-cell non-Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 208000024313 Testicular Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010057644 Testis cancer Diseases 0.000 description 1
- IRKWVRSEQFTGGV-VEVYYDQMSA-N Thr-Asn-Arg Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O IRKWVRSEQFTGGV-VEVYYDQMSA-N 0.000 description 1
- CRZNCABIJLRFKZ-IUKAMOBKSA-N Thr-Ile-Asp Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)N CRZNCABIJLRFKZ-IUKAMOBKSA-N 0.000 description 1
- GXUWHVZYDAHFSV-FLBSBUHZSA-N Thr-Ile-Thr Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O GXUWHVZYDAHFSV-FLBSBUHZSA-N 0.000 description 1
- 208000024770 Thyroid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- SVGAWGVHFIYAEE-JSGCOSHPSA-N Trp-Gly-Gln Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O)=CNC2=C1 SVGAWGVHFIYAEE-JSGCOSHPSA-N 0.000 description 1
- ABRICLFKFRFDKS-IHPCNDPISA-N Trp-Ser-Tyr Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)N)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ABRICLFKFRFDKS-IHPCNDPISA-N 0.000 description 1
- RQKMZXSRILVOQZ-GMVOTWDCSA-N Trp-Tyr-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)NC(=O)[C@H](CC2=CNC3=CC=CC=C32)N RQKMZXSRILVOQZ-GMVOTWDCSA-N 0.000 description 1
- PKZIWSHDJYIPRH-JBACZVJFSA-N Trp-Tyr-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O PKZIWSHDJYIPRH-JBACZVJFSA-N 0.000 description 1
- MBLJBGZWLHTJBH-SZMVWBNQSA-N Trp-Val-Arg Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O)=CNC2=C1 MBLJBGZWLHTJBH-SZMVWBNQSA-N 0.000 description 1
- DANHCMVVXDXOHN-SRVKXCTJSA-N Tyr-Asp-Asn Chemical compound NC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 DANHCMVVXDXOHN-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- FQNUWOHNGJWNLM-QWRGUYRKSA-N Tyr-Cys-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O FQNUWOHNGJWNLM-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- 208000023915 Ureteral Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010046392 Ureteric cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000006593 Urologic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- HTONZBWRYUKUKC-RCWTZXSCSA-N Val-Thr-Val Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O HTONZBWRYUKUKC-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 1
- OWFGFHQMSBTKLX-UFYCRDLUSA-N Val-Tyr-Tyr Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CC2=CC=C(C=C2)O)C(=O)O)N OWFGFHQMSBTKLX-UFYCRDLUSA-N 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 206010047741 Vulval cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000004354 Vulvar Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 201000005188 adrenal gland cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000024447 adrenal gland neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000000246 agarose gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 108010069020 alanyl-prolyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010086434 alanyl-seryl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010087924 alanylproline Proteins 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 1
- 239000002168 alkylating agent Substances 0.000 description 1
- 229940100198 alkylating agent Drugs 0.000 description 1
- HFHDHCJBZVLPGP-RWMJIURBSA-N alpha-cyclodextrin Chemical compound OC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)CO)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1CO HFHDHCJBZVLPGP-RWMJIURBSA-N 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- DZHSAHHDTRWUTF-SIQRNXPUSA-N amyloid-beta polypeptide 42 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)[C@@H](C)CC)C(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)C(C)C)C(C)C)C1=CC=CC=C1 DZHSAHHDTRWUTF-SIQRNXPUSA-N 0.000 description 1
- 239000004037 angiogenesis inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000002280 anti-androgenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001772 anti-angiogenic effect Effects 0.000 description 1
- 229940046836 anti-estrogen Drugs 0.000 description 1
- 230000001833 anti-estrogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000340 anti-metabolite Effects 0.000 description 1
- 230000000708 anti-progestin effect Effects 0.000 description 1
- 239000000051 antiandrogen Substances 0.000 description 1
- 229940030495 antiandrogen sex hormone and modulator of the genital system Drugs 0.000 description 1
- 230000009830 antibody antigen interaction Effects 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 229940100197 antimetabolite Drugs 0.000 description 1
- 239000003418 antiprogestin Substances 0.000 description 1
- 239000000074 antisense oligonucleotide Substances 0.000 description 1
- 238000012230 antisense oligonucleotides Methods 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- 108010008355 arginyl-glutamine Proteins 0.000 description 1
- 239000003886 aromatase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229940046844 aromatase inhibitors Drugs 0.000 description 1
- 108010047857 aspartylglycine Proteins 0.000 description 1
- 108010068265 aspartyltyrosine Proteins 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 230000005907 cancer growth Effects 0.000 description 1
- 239000012830 cancer therapeutic Substances 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 210000004970 cd4 cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000022131 cell cycle Effects 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000033077 cellular process Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 1
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 208000024207 chronic leukemia Diseases 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000013066 combination product Substances 0.000 description 1
- 229940127555 combination product Drugs 0.000 description 1
- 230000009137 competitive binding Effects 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 230000009918 complex formation Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 208000035250 cutaneous malignant susceptibility to 1 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 1
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 1
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 1
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 1
- 230000002939 deleterious effect Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- 238000011037 discontinuous sequential dilution Methods 0.000 description 1
- 239000003534 dna topoisomerase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229940121647 egfr inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 1
- 210000000750 endocrine system Anatomy 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 201000004101 esophageal cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000000328 estrogen antagonist Substances 0.000 description 1
- 102000015694 estrogen receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010038795 estrogen receptors Proteins 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 1
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 1
- 108010078144 glutaminyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010067216 glycyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010001064 glycyl-glycyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010089804 glycyl-threonine Proteins 0.000 description 1
- 108010010147 glycylglutamine Proteins 0.000 description 1
- 108010084389 glycyltryptophan Proteins 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 201000010536 head and neck cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000014829 head and neck neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- ZFGMDIBRIDKWMY-PASTXAENSA-N heparin Chemical compound CC(O)=N[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](C(O)=O)O[C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](OS(O)(=O)=O)[C@@H](O[C@@H]3[C@@H](OC(O)[C@H](OS(O)(=O)=O)[C@H]3O)C(O)=O)O[C@@H]2O)CS(O)(=O)=O)[C@H](O)[C@H]1O ZFGMDIBRIDKWMY-PASTXAENSA-N 0.000 description 1
- 229960001008 heparin sodium Drugs 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 102000048776 human CD274 Human genes 0.000 description 1
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 229940088592 immunologic factor Drugs 0.000 description 1
- 239000002955 immunomodulating agent Substances 0.000 description 1
- 239000003022 immunostimulating agent Substances 0.000 description 1
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000000099 in vitro assay Methods 0.000 description 1
- 238000005462 in vivo assay Methods 0.000 description 1
- 239000005414 inactive ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000010212 intracellular staining Methods 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 108010044374 isoleucyl-tyrosine Proteins 0.000 description 1
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 1
- 229940043355 kinase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 210000005265 lung cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 description 1
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 1
- 230000002101 lytic effect Effects 0.000 description 1
- 208000020984 malignant renal pelvis neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000026045 malignant tumor of parathyroid gland Diseases 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 208000021039 metastatic melanoma Diseases 0.000 description 1
- 239000011325 microbead Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000001823 molecular biology technique Methods 0.000 description 1
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 208000002154 non-small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 238000011275 oncology therapy Methods 0.000 description 1
- 238000001543 one-way ANOVA Methods 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 229940121656 pd-l1 inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 229940124531 pharmaceutical excipient Drugs 0.000 description 1
- 108010070409 phenylalanyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 239000003757 phosphotransferase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000003504 photosensitizing agent Substances 0.000 description 1
- 208000021310 pituitary gland adenoma Diseases 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 1
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 1
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 208000016800 primary central nervous system lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 1
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 1
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 1
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 1
- 108010020755 prolyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 1
- 230000001603 reducing effect Effects 0.000 description 1
- 201000007444 renal pelvis carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000012146 running buffer Substances 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 238000003998 size exclusion chromatography high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 201000000849 skin cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 1
- 201000002314 small intestine cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 208000037959 spinal tumor Diseases 0.000 description 1
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 238000004114 suspension culture Methods 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 201000003120 testicular cancer Diseases 0.000 description 1
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 1
- 108010061238 threonyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 201000002510 thyroid cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 229940044693 topoisomerase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 231100000167 toxic agent Toxicity 0.000 description 1
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- 230000002463 transducing effect Effects 0.000 description 1
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 1
- 238000003151 transfection method Methods 0.000 description 1
- 238000003146 transient transfection Methods 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 230000005747 tumor angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 1
- 208000029729 tumor suppressor gene on chromosome 11 Diseases 0.000 description 1
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010046885 vaginal cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000013139 vaginal neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000002525 vasculotropin inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 108700026220 vif Genes Proteins 0.000 description 1
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 201000005102 vulva cancer Diseases 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
- A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
- C07K16/2818—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against CD28 or CD152
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
- G01N33/57407—Specifically defined cancers
- G01N33/57419—Specifically defined cancers of colon
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/31—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency multispecific
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Oncology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Mycology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
Abstract
本发明涉及抗CNTN4抗体或其抗原结合片段，以及其用于激活上调细胞介导的免疫反应的T细胞的用途，例如，其用于治疗癌症的用途。
Description
技术领域
本发明涉及抗CNTN4特异性抗体或其抗原结合片段、含有其的治疗组合物及其用于激活T细胞的用途，例如用于治疗癌症。
背景技术
人体有一个防御系统，其保护自身免受外部侵入物(病毒、毒素等)和内部有害变化(癌细胞突变)的侵害。与正常细胞不同，癌细胞在其表面上具有特异性抗原，并在癌症发展的早期阶段被免疫系统破坏。然后，当想要无限增殖的癌细胞和想要攻击癌细胞的免疫细胞的力量平衡崩溃时，癌细胞开始大量增殖。当癌细胞进一步生长时，它们会扰乱体内的免疫系统，并且一些癌细胞通过使用免疫细胞的免疫检查点来逃避免疫，而当免疫检查点抑制剂抑制免疫检查点时，免疫细胞的力量增加，从而杀伤癌细胞。
免疫检查点抑制剂是通过阻断参与T细胞抑制的免疫检查点蛋白的激活来激活T细胞来攻击癌细胞的药物，包括CTLA-4、PD-1、PD-L1抑制剂等。目前可市售获得的代表性药物包括作为CTLA-4单克隆抗体的伊匹单抗(产品名称：)，作为PD-1单克隆抗体的纳武单抗(产品名称：/>)和派姆单抗(产品名称：/>)，以及作为PD-L1单克隆抗体的阿特朱单抗(产品名称：/>)和德瓦鲁单抗(产品名称：)。
然而，仍然存在无法用现有免疫检查点抑制剂治疗的癌，因此需要开发新的抗癌治疗。
韩国专利申请公开号10-2019-0116930公开了CNTN4可以用作使用人免疫系统的癌症治疗的新靶点。以上韩国专利申请公开了CNTN4抑制T细胞活性。
[现有技术文献]
[专利文献]
韩国专利申请公开号10-2019-0116930。
发明内容
技术问题
本发明的目的是提供抗CNTN4抗体或其抗原结合片段，其与CNTN4蛋白特异性结合。特别是，本发明旨在提供抗体或其抗原结合片段，其与CNTN4蛋白结合以中和CNTN4的免疫逃逸机制。
本发明还旨在提供组合物，其用于预防或治疗由T细胞活性降低引起的疾病，如癌症，通过使用所述抗体或其抗原结合片段以阻断CNTN4的免疫逃逸机制并激活T细胞来进行。
本发明还旨在提供组合物，其使用所述抗体或抗原结合片段，用于分析或检测CNTN4蛋白。
问题的解决方案
本发明提供一种抗CNTN4抗体或其抗原结合片段，其与CNTN4蛋白特异性结合。所述抗体或抗原结合片段与CNTN4蛋白(例如人或小鼠CNTN4蛋白)特异性结合，以中和CNTN4的免疫逃逸机制。因此，本发明的抗体或抗原结合片段可以增加已被CNTN4抑制的T细胞(如CD4+T细胞或CD8+T细胞)的活性。
在实施方案中，本发明提供抗CNTN4抗体或其抗原结合片段，其包含：
轻链可变区，其包含SEQ ID NO：1的氨基酸序列；和
重链可变区，其包含SEQ ID NO：2的氨基酸序列。
在实施方案中，本发明的抗体可以是单克隆抗体。
在另一个实施方案中，本发明提供编码所述抗体或其抗原结合片段的核酸分子和包含所述核酸分子的重组表达载体。
本发明还提供用于预防或治疗癌症的组合物，所述组合物包含所述抗体或其抗原结合片段作为活性成分。药物组合物可以与另外的抗癌剂组合使用，如免疫检查点抑制剂或化学治疗剂，或者可以与放射疗法组合使用。
本发明还提供用于分析或检测CNTN4蛋白的组合物，所述组合物包含所述抗体或其抗原结合片段。
发明的有利效果
本发明的发明人已经证实，CNTN4蛋白是一种免疫检查点蛋白，并且由于抑制T细胞活性而引起的免疫逃避程度比已知为常规免疫检查点蛋白的PD-L1更强。
另外，本发明的新型抗CNTN4抗体或其抗原结合片段通过阻断CNTN4的免疫逃逸机制来激活T细胞，因此可以有效地用于预防或治疗由T细胞活性降低引起的疾病，特别是癌症。因此，当使用本发明的抗CNTN4抗体时，对于现有免疫疗法无法达到治疗效果的癌症，可以表现出优异的抗癌效果。
附图说明
图1是显示与PD-L1相比CNTN4抑制人T细胞活性的程度的图。
图2显示根据实施例2生产的单克隆抗体的轻链可变区和重链可变区的氨基酸序列。
图3显示单克隆抗体hAb-1与抗原蛋白人CNTN4和小鼠CNTN4的结合能力。
图4显示单克隆抗体hAb-1是否与CNTN4受体竞争性结合CNTN4。
图5显示单克隆抗体hAb-1有效中和CNTN4蛋白以增殖T细胞。
图6显示根据实施例6，单克隆抗体hAb-1在结直肠癌的CT26同基因小鼠模型中的抗肿瘤功效。虚线表示每个实验组在第0天、第3天、第6天和第9天药物处理。使用双因素方差分析检验用多重比较检验来确定统计显著性(*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001，****P<0.0001，相比于第1组(hIgG4))。
图7至图10显示根据实施例7，单克隆抗体hAb-1在结直肠癌的CT26同基因小鼠模型中增加脾T细胞活性的功效。图7至图9分别显示CD4+T细胞与CD45+细胞的百分比(即CD3+CD4+/CD45+)，CD8+T细胞与CD45+细胞的百分比(即CD3+CD8+/CD45+)，以及分泌IFNγ的细胞在CD8+T细胞中的百分比(即IFNγ/CD8+)。图10显示用于分析的每只小鼠肿瘤体积的减少程度。
图11显示根据实施例8，单克隆抗体hAb-1在乳腺癌的EMT6同基因小鼠模型中的抗肿瘤功效。虚线表示每个实验组在第0天、第3天、第6天和第9天药物处理。使用双因素方差分析检验用多重比较检验来确定统计显著性(*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001，****P<0.0001，相比于第1组(hIgG4))。
图12和图13显示根据实施例9，单克隆抗体hAb-1在乳腺癌的EMT6同基因小鼠模型中增加脾T细胞活性的功效。图12和图13显示分泌IFNγ的细胞分别在CD4+T细胞和CD8+T细胞中的百分比(即IFNγ/CD4+和IFNγ/CD8+)。
图14和图15显示根据实施例10，单克隆抗体hAb-1在肺癌的LLC-1同基因小鼠模型中增加脾T细胞活性的功效。图14显示分泌IFNγ的细胞在CD3+T细胞中的百分比(即IFNγ/CD3+)。图15显示用于分析的每只小鼠肿瘤体积的减少程度。
具体实施方式
抗CNTN4抗体或其抗原结合片段
本发明提供一种抗CNTN4抗体或其抗原结合片段，其与CNTN4蛋白特异性结合。
在实施方案中，本发明的抗CNTN4抗体或其抗原结合片段包含：轻链可变区，其包含SEQ ID NO：1的氨基酸序列；和重链可变区，其包含SEQ ID NO：2的氨基酸序列。
如本文所用，轻链可变区或重链可变区包含特定氨基酸序列是指所述轻链可变区或重链可变区包含整个氨基酸序列，具有整个氨基酸序列，或由该氨基酸序列组成。
在示例中，抗体或其抗原结合片段包含具有SEQ ID NO：1的氨基酸序列的轻链可变区，和具有SEQ ID NO：2的氨基酸序列的重链可变区。在另一个示例中，抗体或其抗原结合片段包含基本上由SEQ ID NO：1的氨基酸序列组成的轻链可变区，和基本上由SEQ IDNO：2的氨基酸序列组成的重链可变区。
作为另一个示例，抗体或其抗原结合片段包含由SEQ ID NO：1的氨基酸序列组成的轻链可变区，和由SEQ ID NO：2的氨基酸序列组成的重链可变区。
如本文所用，术语“包含”或其修改的词语是指开放的含义。作为示例，包含所列氨基酸序列的抗体或其抗原结合片段可以包含未列出的另外的氨基酸序列，无论是否必需。
如本文所用，术语“基本上由……组成”或其修改的短语包括任何所提及的元素，并且允许存在实质上不影响实施方案的基本特征和新颖或功能特征的元素。作为示例，基本上由所列氨基酸序列组成的抗体或其抗原结合片段可以包含实质上不影响抗体或其片段的特征的一个或多个氨基酸残基的替换。
如本文所用，术语“由……组成”或其修改的短语是指如本文所述的各组分不允许在该实施方案的描述中未陈述或列出的任何元素的情况。
如本文所用，术语“抗体”是指免疫球蛋白分子，其能够与靶标(如碳水化合物、多核苷酸、脂质、多肽、蛋白质等)特异性结合，所述结合通过位于免疫球蛋白分子的可变区的至少一个抗原识别位点进行。本文的术语“抗体”不仅涵盖完整的多克隆或单克隆抗体，还涵盖其抗原结合片段，和包含抗体片段的融合蛋白，以及包含抗原识别位点的免疫球蛋白分子的任何其他修饰构型。
抗体包括五类免疫球蛋白(Ig)M、IgD、IgG、IgA和IgE，其分别包含由重链恒定区基因μ、δ、γ、α和ε制造的重链。
抗体的轻链和重链分为可变区和恒定区，每种抗体的可变区具有不同的氨基酸序列，恒定区具有相同的氨基酸序列，并且重链恒定区包含CH1、H(铰链)、CH2和CH3结构域。每个结构域由两个β-片层组成，分子内二硫键在其之间连接。
包含由SEQ ID NO：1的氨基酸序列组成的轻链可变区和由SEQ ID NO：2的氨基酸序列组成的重链可变区的抗体在本文中称为“抗体hAb-1”。
在实施方案中，本发明的抗体可以是单克隆抗体。在另一个实施方案中，本发明的抗体可以是嵌合抗体、人源化抗体或人抗体。
如本文所用，术语“嵌合抗体”是指其中可变区序列源自一个物种且恒定区序列源自另一个物种的抗体，如其中可变区序列源自小鼠抗体且恒定区序列源自人抗体的抗体。
如本文所用术语“人源化抗体”是指其中源自另一个哺乳动物物种(如小鼠)种系的CDR序列已被移植至人框架序列上的抗体。例如，框架序列可以经由回复突变而进一步重新修饰。
如本文所用，术语“人抗体”是指其中框架区和CDR区均包含源自人免疫球蛋白序列的可变区的抗体。抗体的恒定区也源自人免疫球蛋白序列。
如本文所用，术语“抗原结合片段”或“抗体片段”是指抗体的抗原结合片段和类似物，其通常包含亲本抗体的至少一部分抗原结合区或可变区(例如一个或多个CDR)。抗体片段保留了亲本抗体的至少一些结合特异性。抗体片段的例子包括但不限于Fab、Fab'、Fab'-SH、Fv、F(ab')2片段、单链抗体scFv、单结构域抗体、双体抗体(dAb)或线性抗体。
具体地，Fab片段是指由VL、VH、CL和CH1结构域组成的单价片段。
Fab'片段与Fab片段的不同之处在于，在CH1结构域的羧基末端添加了数个残基，包含来自抗体铰链区的至少一个半胱氨酸。
Fab'-SH是指其中恒定结构域的半胱氨酸残基具有游离硫醇基团的Fab'。
F(ab')2抗体片段作为一对Fab'片段经由Fab'片段之间的铰链半胱氨酸生成。
Fv是含有完整抗原识别位点和抗原结合位点的最小抗体片段。该片段由紧密非共价关联的一个重链可变区和一个轻链可变区的二聚体组成。从这两个区的折叠中产生六个高变环(由重链和轻链各产生三个环)，其为抗原结合贡献氨基酸残基，并赋予抗体以抗原结合特异性。然而，即使是单个可变区也具有识别并结合抗原的能力，尽管亲和力低于整个结合位点。
单链抗体scFv是包含连接成单个多肽链的VH和VL抗体结构域的抗体片段。优选地，scFv多肽进一步包含VH和VL结构域之间的多肽接头，其使得scFv能够形成用于抗原结合的所需结构。本文中的scFv多肽也称为scFv抗体片段、scFv抗原结合片段、scFv抗体、抗体scFv或简称scFv。
双体抗体是指小的抗体片段，其通过在VH和VL结构域之间使用短接头(约5-10个残基)构建scFv片段来制备，使得V结构域实现链间而非链内配对，从而产生二价片段，即具有两个抗原结合位点的片段。双特异性双体抗体是由两个“交叉”scFv片段组成的异二聚体，其中两种抗体的VH和VL结构域存在于不同的多肽链上。
本发明的抗CNTN4抗体或其抗原结合片段可以特异性地与CNTN4蛋白(优选人或小鼠CNTN4蛋白)结合。
如本文所用，术语“与……特异性结合”或“对……具有特异性”是指可测量且可重现的相互作用，如靶标和抗体之间的结合，其决定了在异质分子群体(包括生物分子)的存在下靶标的存在。例如，与特定靶标(例如表位)特异性结合的抗体是相比于与其他靶标的结合，所述抗体与该靶标的结合具有更大的亲和力、亲合力、更容易和/或持续时间更长。
如本文所用，术语“与人CNTN4蛋白特异性结合”可以指与人CNTN4蛋白结合的解离常数(Kd)为1×10-7M或更小，或优选5×10-8M或更小的抗体。因此，本发明的抗CNTN4抗体或其抗原结合片段与人CNTN4蛋白结合的解离常数(Kd)可以为1×10-7M或更小，优选5×10-8M或更小。
如本文所用，术语“Kd”是指特定抗体-抗原相互作用的平衡解离常数，其中所述常数的单位为M。可以使用本领域广泛建立的方法来确定抗体的Kd值。确定抗体Kd值的优选方法是通过使用表面等离子体共振(SPR)，优选使用生物传感器系统，如系统。
在实施方案中，本发明的抗CNTN4抗体或其抗原结合片段是单一特异性的，并与单个表位(即CNTN4蛋白)特异性结合。
在另一个实施方案中，本发明的抗CNTN4抗体或其抗原结合片段是多特异性抗体分子，如双特异性或三特异性抗体分子。多特异性抗体分子包含多个可变区，每个可变区具有与不同表位的结合特异性。在实施方案中，双特异性抗体分子的第一可变区与第一表位(例如CNTN4蛋白)具有第一结合特异性，并且第二可变区与第二表位(例如CNTN4蛋白以外的靶标蛋白，例如包括但不限于CTLA-4、PD-1、或PD-L1)具有第二结合特异性。在一个具体的实施方案中，双特异性抗体分子与CNTN4特异性结合；以及与CTLA-4、PD-1或PD-L1中的任一种特异性结合。在另一个实施方案中，以上分子的任何组合可以用多特异性抗体分子制备，例如，三特异性抗体包括与CNTN4的第一结合特异性，以及与CTLA-4、PD-1或PD-L1中的至少两种结合的第二特异性和第三特异性。本发明的多特异性抗体分子可以使用本领域技术人员已知的标准分子生物学技术(例如重组DNA和蛋白质表达技术)来制备。
在另一个实施方案中，本发明的抗CNTN4抗体或其抗原结合片段可以形成抗体-药物缀合物(ADC)。如本文所用，术语“抗体-药物缀合物”或“ADC”可以用式M-[L-D]n表示，其中M表示抗体分子，即本发明的抗CNTN4抗体或其抗原结合片段，L是任选的接头或接头单元，D是合适的药物或前药，且n是约1至约20的整数。包含在ADC中的药物可以根据治疗或诊断用途进行适当选择，只要该药物不干扰本发明的抗体的特异性结合即可。在实施方案中，药物包括但不限于细胞毒性剂(例如化学治疗剂)、前药转化酶、放射性同位素或化合物、或毒素。可以包含在ADC中的药物和接头及其制备方法可以按照本领域已知的方法。
本发明的抗CNTN4抗体或其抗原结合片段表现出与CNTN4蛋白的优异竞争性结合能力，即使在CNTN-4受体的存在下也是如此。因此，本发明的抗CNTN4抗体或其抗原结合片段可以与CNTN-4蛋白特异性结合至基本相等的程度，即使当CNTN-4受体存在于体内时也是如此。
在另一个实施方案中，如通过ELISA测定所确定的，本发明的抗CNTN4抗体或其抗原结合片段与CNTN4蛋白(例如人或小鼠CNTN4蛋白)结合的EC50为5nM或更小，优选3nM或更小，更优选2nM，甚至更优选1nM或更小。
如本文所用，术语“EC50”是与使用抗体的体外或体内测定相关的术语，其是指诱导50％最大反应(即，在最大反应和基线之间的中等反应)的抗体浓度。
核酸分子和载体
本发明的另一方面涉及编码本发明的抗CNTN4抗体或其抗原结合片段的核酸分子。
核酸可以存在于整个细胞中，存在于细胞裂解物中，或以特异性纯化或基本上纯的形式存在。当通过标准技术(包括碱性/SDS处理、CsCl条带、柱色谱、琼脂糖凝胶电泳和本领域公知的其他技术)从其他细胞组分或其他污染物(例如其他细胞核酸或蛋白质)纯化分离时，核酸被“分离”或“变得基本上纯”。
本发明的核酸可以是例如DNA或RNA，并且可以含有或不含内含子序列。在优选的实施方案中，核酸是cDNA分子。
在实施方案中，本发明的核酸分子编码本发明的抗CNTN4抗体或其抗原结合片段的轻链区、重链区、或轻链区和重链区两者，并且优选编码轻链可变区、重链可变区、或轻链可变区和重链可变区两者。在实施方案中，本发明的核酸分子编码包含SEQ ID NO：1的轻链可变区，和/或编码包含SEQ ID NO：2的重链可变区，或编码抗体hAb-1。
一旦获得编码VL和/或VH区的DNA片段，就可以通过标准重组DNA技术进一步操作此类DNA片段，例如，从而将可变区基因转换为全长抗体链基因、Fab片段基因或scFv基因。在这些操作中，编码VL或VH的DNA片段与编码另一种蛋白质(例如抗体恒定区或柔性接头)的另一个DNA片段可操作连接。如本文所用，术语“可操作连接”是指两个DNA片段连接在一起，使得由所述两个DNA片段编码的氨基酸序列保持在框内(in-frame)。
可以通过使编码VH的DNA与编码重链恒定区(CH1、CH2和CH3)的另一个DNA分子可操作结合，将编码VH区的分离的DNA转换为全长重链基因。重链恒定区可以是IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA、IgE、IgM或IgD恒定区。
对于Fab片段重链基因，编码VH的DNA可以与仅编码重链CH1恒定区的另一个DNA分子可操作连接。
为了产生scFv基因，将编码VL和VH的DNA片段与编码柔性接头(例如编码氨基酸序列(Gly4-Ser)3)的另一个片段可操作连接，使得VL和VH序列可以表达为连续的单链蛋白质，VL和VH区通过柔性接头连接。
本发明的核酸序列(如RNA或DNA)可以从多种来源分离，进行基因工程改造，扩增和/或重组表达。可以使用任何重组表达系统，除了细菌系统以外，还包括例如酵母、昆虫或哺乳动物系统。例如，核酸的操作(如亚克隆至表达载体中、标记探针、测序和杂交)可以如本领域已知的那样进行。
因此，本发明提供包含所述核酸分子的重组表达载体。
如本文所用，术语“载体”是指能够在原核和/或真核细胞中自我复制的DNA分子，并且与重组载体、克隆载体或表达载体可互换使用，其通常用作将基因或DNA片段递送至细胞等的载体。载体通常包含但不限于：可以在原核和/或真核细胞中复制的复制起点，可以赋予对特定条件/物质(如抗生素降解酶)的抗性的选择标记基因，能够在真核或原核细胞中转录基因的启动子，以及可翻译序列。
一种类型的载体是“质粒”，其是指环状双链DNA环，另外的DNA片段可以连接至其中。另一种类型的载体是病毒载体，其中另外的DNA片段可以连接至病毒基因组中。某些载体能够在它们被引入的宿主细胞中自主复制(例如具有细菌复制起点的细菌载体和附加体哺乳动物载体)。
抗体或其抗原结合片段的制备
本发明的抗体或其抗原结合片段可以按照常规已知的方法制备。
在实施方案中，为了表达抗体或其抗原结合片段，将重组表达载体转染至宿主细胞中，所述重组表达载体包含编码部分或全长轻链和重链的核酸分子。作为一种转染方法，可以使用通常用于将外源性DNA引入原核宿主细胞或真核宿主细胞的技术，包括但不限于，例如，电穿孔、磷酸钙沉淀、DEAE-葡聚糖转染等。
用于表达本发明的抗体或其抗原结合片段的宿主细胞可以是原核细胞或真核细胞，并且优选可以是真核细胞，特别是哺乳动物细胞。
哺乳动物宿主细胞的示例包括但不限于人胚肾细胞(例如经亚克隆用于在悬浮培养物中生长的293细胞或293细胞)、Expi293FTM细胞、CHO细胞、幼仓鼠肾细胞(例如BHK、ATCCCCL 10)、小鼠塞尔托利氏细胞(例如TM4细胞)、猴肾细胞(例如CV1 ATCC CCL 70)、非洲绿猴肾细胞(例如VERO-76、ATCC CRL-1587)、人宫颈癌细胞(例如HELA、ATCC CCL 2)、犬肾细胞(例如MDCK、ATCC CCL 34)、布法罗(buffalo)大鼠肝细胞(例如BRL 3A、ATCC CRL 1442)、人肺细胞(例如W138、ATCC CCL 75)、人肝细胞(例如Hep G2、HB 8065)、小鼠乳腺肿瘤细胞(例如MMT 060562、ATCC CCL51)、TRI细胞、MRC 5细胞、FS4细胞、人肝癌细胞系(例如HepG2)和骨髓瘤细胞(例如NS0和Sp2/0细胞)。
可以在合适的介质中培养经转化的宿主细胞，以由引入宿主细胞中的重组表达载体产生根据本发明的抗体的重链、轻链或其抗原结合片段的多肽。可以根据本领域常用的方法适当选择用于培养宿主细胞的介质的组成、培养条件、培养时间等。例如，可以使用市售可获得的介质，如Ham's F10(Sigma-Aldrich Co.,St.Louis,M0)、最小必需介质(MEM，Sigma-Aldrich Co.)、RPMI-1640(Sigma-Aldrich Co.)和Dulbecco's改良eagle介质(DMEM，Sigma-Aldrich Co.)，但不限于此。在必要时，可以额外将激素、生长因子、盐、缓冲液、核苷酸、抗生素、微量元素等加入介质中。
可以通过诸如纯化的过程来获得宿主细胞中产生的抗体或其抗原结合片段。考虑宿主细胞中产生的抗体或其抗原结合片段的多肽的特征、宿主细胞的特征、表达方法或是否靶向多肽，可以适当选择获得方法。例如，可以通过获得培养宿主细胞的培养介质并离心所述介质以除去杂质的方法，来回收分泌至培养介质中的抗体或其抗原结合片段。此外，所获得的抗体可以进一步经过进一步除去杂质(通过诸如色谱、通过过滤器等过滤或透析的方法进行)并浓缩抗体的过程，以及两步的纯化方法，例如，可以使用首先通过蛋白质A亲和色谱纯化，然后其次通过阳离子交换色谱纯化的方法。
用途和方法
本发明的抗体或其抗原结合片段恢复了被CNTN4蛋白的结合抑制的免疫反应。CNTN4蛋白抑制T细胞(特别是CD4+T细胞和CD8+T细胞)的增殖。通过与CNTN4蛋白特异性结合从而增加T细胞活性(特别是CD4+T细胞或CD8+T细胞的活性)，本发明的抗体或其抗原结合片段可以用于治疗与免疫抑制有关的疾病。
在实施方案中，本发明的抗体或其抗原结合片段增加了T细胞活性。
如本文所用，术语“T细胞”是指一种白细胞，其可以通过细胞表面上T细胞受体的存在而与其他白细胞区分。有数种T细胞的亚群，包括但不限于辅助T细胞(也称为TH细胞或CD4+T细胞)和亚型(包括TH1、TH2、TH3、TH17、TH9和TFH细胞)；细胞毒性T细胞(也称为TC细胞、CD8+T细胞、细胞毒性T淋巴细胞、T杀伤细胞、杀伤性T细胞)、记忆T细胞和亚型(中央记忆T细胞(TCM细胞)、效应记忆T细胞(TEM和TEMRA细胞)和驻留记忆T细胞(TRM细胞))、调节T细胞(也称为Treg细胞或抑制性T细胞)和亚型(包括CD4+FOXP3+Treg细胞、CD4+FOXP3-Treg细胞、Tr1细胞、Th3细胞和Treg17细胞)；自然杀伤T细胞(也称为NKT细胞)、粘膜相关恒定T细胞(MAIT)和γδT细胞(γδT细胞)(包括Vγ9/Vδ2T细胞)。在本发明中，优选地，T细胞是CD4+T细胞或CD8+T细胞。
如本文所用，术语“T细胞激活”是指一种细胞过程，其中在其表面表达抗原特异性T细胞受体的成熟T细胞识别其同源抗原，并通过进入细胞周期的成熟T细胞作出反应，分泌细胞因子或裂解酶，并开始执行T细胞的效应功能。
因此，本发明的抗体或其抗原结合片段可以激活T细胞，特别是CD4+T细胞或CD8+T细胞。在实施方案中，本发明的抗体或其抗原结合片段可以增加已被CNTN4抑制的T细胞的增殖。本发明的抗体或其抗原结合片段具有优异的中和CNTN4的能力。
因此，本发明涉及通过使用抗CNTN4抗体或其抗原结合片段来诱导T细胞激活。在实施方案中，本发明提供诱导或增强T细胞激活的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的抗CNTN4抗体或其抗原结合片段。在另一个实施方案中，本发明提供抗CNTN4抗体或其抗原结合片段用于诱导或增强T细胞激活的用途。
在另一个实施方案中，本发明提供用于诱导或增强T细胞激活的药物组合物，所述组合物包含抗CNTN4抗体或其抗原结合片段。
在另一个实施方案中，本发明涉及通过使用抗CNTN4抗体或其抗原结合片段来预防、改善或治疗免疫抑制相关疾病。
在实施方案中，本发明提供预防、改善或治疗免疫抑制相关疾病的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的抗CNTN4抗体或其抗原结合片段。
在另一个实施方案中，本发明提供抗CNTN4抗体或其抗原结合片段用于预防、改善或治疗免疫抑制相关疾病的用途。
在另一个实施方案中，本发明提供用于预防、改善或治疗免疫抑制相关疾病的药物组合物，所述药物组合物包含抗CNTN4抗体或其抗原结合片段。
如本文所用，术语“受试者”意指包括人和非人动物。非人动物包括所有脊椎动物，例如哺乳动物和非哺乳动物，包括非人灵长类动物、绵羊、狗、猫、牛、马、鸡、两栖动物和爬行动物，但是例如，优选非人灵长类动物、绵羊、狗、猫、牛和马。优选的受试者是需要激活或增强免疫反应的人。
优选地，本发明的抗CNTN4抗体或其抗原结合片段阻断CNTN4蛋白的结合，从而在癌症患者中激活T细胞和/或增强对癌细胞的免疫反应，从而可以抑制癌细胞的体内生长，因此可以有效地用于预防、改善或治疗癌症。
当使用本发明的抗体时，其生长可以被抑制的优选癌症包括通常对免疫疗法有反应的癌症。例如，本发明中的癌症包括但不限于胃癌、胰腺癌、子宫内膜癌、肝癌、胆囊癌、前列腺癌(例如激素难治性前列腺腺癌)、黑色素瘤(例如转移性恶性黑色素瘤或皮肤和眼部恶性黑色素瘤)、肾癌(例如透明细胞癌)、乳腺癌(例如浸润性乳腺癌、非浸润性乳腺癌)、结直肠癌、直肠癌、结肠癌和肺癌(例如非小细胞肺癌)。癌症的具体示例可以包括胃癌、胰腺癌、子宫内膜癌、肝癌、胆囊癌、前列腺癌或黑色素瘤。此外，本发明的待治疗受试者包括难治性或复发性恶性肿瘤，当使用本发明的抗体时，所述恶性肿瘤的生长可以被抑制。
可以使用本发明的方法治疗的其它癌症的示例包括骨癌、皮肤癌、头颈癌、子宫癌、卵巢癌、直肠癌、肛门区域癌、睾丸癌、子宫癌、输卵管癌、宫颈癌、阴道癌、女性外阴癌、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、食道癌、小肠癌、内分泌系统癌、甲状腺癌、甲状旁腺癌、肾上腺癌、软组织肉瘤、尿道癌、阴茎癌、慢性或急性白血病(包括急性髓系白血病、慢性髓系白血病、急性淋巴母细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病)、儿童实体瘤、淋巴细胞性淋巴瘤、膀胱癌、肾癌、输尿管癌、肾盂癌、中枢神经系统(CNS)肿瘤、原发性CNS淋巴瘤、肿瘤血管生成、脊柱肿瘤、脑干胶质瘤、垂体腺瘤、卡波西肉瘤、表皮样癌、鳞状细胞癌、T细胞淋巴瘤或这些癌症的组合。
可以体内测试本发明的抗CNTN4抗体或其抗原结合片段的抗肿瘤活性。为此，可以使用本领域已知的同基因肿瘤模型，例如结直肠癌的CT26肿瘤模型、乳腺癌的EMT6肿瘤模型或肺癌的LLC-1肿瘤模型。
在另一个实施方案中，所述癌症可以是表达CNTN4的癌症。
在另一个实施方案中，所述癌症可以是难治性的或对常规免疫检查点抑制剂耐药(例如对PD-1途径抑制剂、PD-1途径抑制剂或CTLA-4途径抑制剂耐药)。
本发明的抗体或抗原结合片段可以单独使用或与其他抗癌疗法组合使用。其他抗癌疗法可以包括例如标准癌症疗法(例如化学疗法、放射疗法或手术)；或其他抗癌剂，如细胞毒性剂、细胞抑制剂、抗血管生成剂或抗代谢物剂、肿瘤靶向剂、免疫刺激剂或免疫调节剂，或与细胞毒性剂、细胞抑制剂或其他毒性剂、免疫检查点抑制剂缀合的抗体等。
优选地，本发明的抗体或抗原结合片段可以与其他抗癌剂(如免疫检查点抑制剂、化学治疗剂或放射疗法)组合使用。免疫检查点抑制剂可以是例如抗CTLA-4抗体(例如伊匹单抗)、抗PD-1抗体(例如派姆单抗、纳武单抗)或抗PD-L1抗体(例如阿特朱单抗、阿维鲁单抗、德瓦鲁单抗)。化学治疗剂包括但不限于烷化剂、抗代谢物剂、激酶抑制剂、纺锤体毒植物生物碱、细胞毒性/抗肿瘤抗生素、拓扑异构酶抑制剂、光敏剂、抗雌激素剂和选择性雌激素受体调节剂(SERM)、抗孕酮剂、雌激素受体下调剂(ERD)、雌激素受体拮抗剂、促黄体生成素释放激素激动剂、抗雄激素剂、芳香酶抑制剂、EGFR抑制剂、VEGF抑制剂、抑制牵涉异常细胞增殖或肿瘤生长的基因表达的反义寡核苷酸。本发明的化学治疗剂的具体示例包括吉西他滨、长春瑞滨、依托泊苷(VP-16)；铂类似物，如顺铂或卡铂；紫杉烷类，如紫杉醇、白蛋白结合紫杉醇和多西他赛等。其他癌症治疗剂包括表现出抗癌效果的益生菌，如乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)GEN3013菌株(KCTC13426BP)、乳酸乳球菌GEN3033菌株(KCTC13684BP)、两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum)MG731菌株(KCTC13452BP)等。
当本发明的抗体或抗原结合片段与其他抗癌剂组合使用时，它们可以分开施用，或者也可以以组合产品的形式应用，其中多种活性成分存在于单一药物制剂中。当它们作为分开的制剂施用时，两种制剂可以顺序施用或同时施用。对于同时施用，将它们一起给予患者。对于顺序施用，可以在不长的时间间隔内给予它们，例如可以在12小时或更短的时间内，或6小时或更短的时间内将这些制剂施用于患者。
在实施方案中，本发明提供预防、改善或治疗免疫抑制相关疾病(如癌症)的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的抗CNTN4抗体或其抗原结合片段与另外的抗癌剂的组合。
该实施方案不仅包括将含有抗CNTN4抗体或抗原结合片段以及另外的抗癌剂的单一组合物同时施用于有需要的患者，而且还包括将分开且分别含有抗CNTN4抗体或抗原结合片段以及另外的抗癌剂的组合物同时或顺序施用于有需要的患者。
在另一个实施方案中，本发明提供抗CNTN4抗体或其抗原结合片段用于与另外的抗癌剂组合的用途，用于预防、改善或治疗免疫抑制相关疾病，如癌症。
在另一个实施方案中，本发明提供用于预防、改善或治疗免疫抑制相关疾病(如癌症)的药物组合物或组合，所述组合物或组合包含抗CNTN4抗体或其抗原结合片段以及另外的抗癌剂。本文中的药物组合物或组合包含抗CNTN4抗体或其抗原结合片段以及另外的抗癌剂，不仅包括两种组分以单一制剂的形式物理上一起存在的情况，而且还包括两种组分在分开的制剂中同时施用或顺序施用的情况，其中两种药物可以分开提供或在单个试剂盒中一起提供。因此，本发明提供用于预防、改善或治疗免疫抑制相关疾病(如癌症)的试剂盒，所述试剂盒包含抗CNTN4抗体或其抗原结合片段以及另外的抗癌剂。
另外的抗癌剂可优选为免疫检查点抑制剂，更优选为抗CTLA-4抗体(例如伊匹单抗)、抗PD-1抗体(例如派姆单抗和纳武单抗)或抗PD-L1抗体(例如阿特朱单抗、阿维鲁单抗和德瓦鲁单抗)。
另一种优选的另外的抗癌剂可以包括化学治疗剂，如吉西他滨、长春瑞滨、依托泊苷(VP-16)；铂类似物，如顺铂或卡铂；紫杉烷类，如紫杉醇、白蛋白结合紫杉醇或多西他赛。
与本发明的抗体或其抗原结合片段一起使用的另一种优选的另外的抗癌疗法可以包括放射疗法。
本发明还提供了检测样品中CNTN4蛋白的存在或测量抗CNTN4抗体量的方法，通过使用抗CNTN4抗体或其抗原结合片段作为活性成分来进行。所述方法包括在抗体或其抗原结合片段可以与CNTN4蛋白结合以形成复合物的条件下，使抗体或其抗原结合片段与样品和对照样品接触。然后，检测复合物是否已经形成，其中样品之间复合物形成程度与对照样品相比的差异是样品(例如血液)中存在人血液抗原的证据。
因此，本发明提供用于诊断癌症的组合物，所述组合物包含抗CNTN4抗体或其抗原结合片段。
药物组合物
本发明提供包含抗CNTN4抗体或其抗原结合片段的药物组合物。所述组合物可以含有非活性成分，即药学上可接受的赋形剂(参见药用赋形剂手册等)。可以通过将制剂与生理上可接受的载剂、赋形剂或稳定剂混合，以例如冻干粉末、浆液、水溶液或悬浮液的形式制备治疗制剂和诊断制剂的组合物。
合适的施用途径包括肠胃外施用，如肌内、静脉内或皮下施用。用于本发明的药物组合物或用于实施本发明的方法的抗体的施用可以通过多种常规方法进行，如局部应用，或皮内、皮下、腹膜内、肠胃外、动脉内或静脉内注射。在实施方案中，本发明的抗体静脉内或皮下施用。
在下文中，将参考实施例更详细地描述本发明。对于本领域技术人员将显而易见的是，这些实施例仅旨在更详细地描述本发明，并且本发明的范围不受根据本发明主题的这些实施例的限制。
实施例
实施例1：确认CNTN4抑制人T细胞活性的能力
在本实施例中，确认了与已知为免疫检查点蛋白的PD-L1相比，CNTN4抑制人T细胞活性的程度。
将浓度为4μg/mL的α-CD3抗体和浓度各自为50、100、150和200nM的人PD-L1和人CNTN4重组蛋白制备为最终50μL，并放入96孔板中。在37℃孵育96孔板约16小时，同时注意不在96孔板的底部产生气泡。
每个供体50mL血液(包含在用肝素钠处理的采血管中)和PBS以1:1的比例混合，15mL的Ficoll先前容纳于50mL管中，并将30mL稀释的血液小心地置于其上并堆叠，使得Ficoll层和血层分离。在20℃以1800rpm离心(加速和减速速度设置为0)25分钟，并除去上清液，使得白色血沉棕黄层不上升。将血沉棕黄层转移至新的50mL管中，并用PBS将管填充至50mL，并在4℃以1800rpm离心5分钟。加入10mL的1×RBC裂解缓冲液，充分溶解，并置于室温5分钟。用PBS填充至50mL后，在4℃以1800rpm离心5分钟，除去上清液，并用PBS溶解沉淀，然后通过显微镜观察细胞(PBMC)并计算细胞数。
每2×108个在以上实验中获得的PBMC细胞中加入1000μL的MACS缓冲液，然后重悬。将溶液分成两半，其中一半放入CD4管中，另一半放入CD8管中。将每组每1×108个PBMC的50μL抗体混合物(cocktail)重悬并在室温储存10分钟。将每1×108个PBMC的100μL抗生物素微珠重悬并在室温储存10分钟。同时，对MACS磁场进行消毒并置于洁净的工作台中，并安装两个LS柱(用于CD4和CD8)。使3mL的MACS缓冲液流入每个柱后，弃去通过每个柱的缓冲液。反应完成后，将每组的细胞分别加载至安装在磁场上的两个LS柱上。当没有更多的细胞溶液落下时，允许3mL的MACS缓冲液流入每个柱中。此后，通过显微镜观察从每个柱落下的溶液中的细胞并计算细胞数。
将18μL的DMSO加入50μg的CFSE中并用移液器吸取以产生5mM的浓度并使用细胞。将1mL的MTM培养介质加入以上实验中获得的CD4细胞和CD8细胞中，加入CFSE至终浓度达到5μM，悬浮，然后在37℃的水浴中储存10分钟。在4℃以1800rpm离心溶液5分钟，并除去上清液。然后，将1mL的MTM培养介质加入其中并重悬，然后在4℃以1800rpm再次离心5分钟，并除去上清液。最后，用MTM培养介质重悬细胞以达到每孔2×105个细胞/200μL，以待用于实验。
用200μL的PBS洗涤经孵育的板两次，每孔加入200μL的T细胞，然后在37℃的5％CO2培养箱中储存3天。3天后，获得T细胞并转移至FACS管中，并使用FACS仪器观察用CFSE染色的细胞分化程度。结果示于图1中。
如图1所示，确认了PD-L1和CNTN4重组蛋白抑制CD4+T细胞和CD8+T细胞的增殖。在两个供体中均观察到该结果，并且特别是将200nM的CNTN4处理与200nM的PD-L1处理相比，可以看出CNTN4处理组中T细胞的增殖显著被抑制，并且CNTN4抑制T细胞活性的能力比被已知为常规免疫检查点蛋白的PD-L1更强。
结果表明，如果CNTN4蛋白的功能受到抑制，则其免疫逃逸机制被阻断，从而CNTN4重组蛋白可以用作疾病治疗剂。
实施例2：产生CNTN4单克隆抗体
在表达载体中克隆图2和表1的轻链和重链区。将DNA瞬时转染至Expi293FTM细胞中并培养至50％的活力或直至第6天以进行IgG表达，并使培养介质与蛋白质A亲和色谱柱(MabSelect SuRe LX，Cytiva)结合以洗脱并首次纯化IgG。然后，为了去除具有大分子量的聚集体和杂质，使首次纯化的IgG与阳离子交换色谱柱(Capto SPImpRes，Cytiva)结合，并使用乙酸缓冲溶液(pH 5.0)和氯化钠的浓度梯度洗脱并二次纯化IgG。通过该方法，制备了在SEC-HPLC上纯度为95.9％的抗CNTN4 IgG4-S228P(下文称为“hAb-1”)。
[表1]
实施例3：确认单克隆抗体hAb-1的结合能力
3.1根据ELISA确认单克隆抗体hAb-1与抗原蛋白的结合能力
对实施例2中制备的单克隆抗体hAb-1进行ELISA测试。用20nM的抗原(人CNTN4-10×His或小鼠CNTN4-10×His)包被ELISA板。对于抗体结合，将抗体hAb-1从最大1μM连续稀释至0.0001nM，从而与抗原结合。HRP缀合抗人κ抗体用作抗体检测的二抗。使用显色试剂ABTS进行显色，并测量405nm处的吸光度。所得的结合能力示于图3和表2中。
[表2]
| EC50，nM | 人CNTN4 | 小鼠CNTN4 |
| hAb-1 | 0.17 | 0.12 |
3.2根据表面等离子体共振(SPR)确认hAb-1与抗原蛋白的结合能力
对实施例2中制备的单克隆抗体hAb-1进行SPR测试。更具体地，为了使用胺偶联来结合抗人IgG Fc(捕获抗体)，安装CM5芯片，允许运行缓冲液流动，激活芯片，然后使捕获抗体附着于其上。使用乙醇胺灭活未附着捕获抗体的糊精，然后使用3M氯化镁进行再生以清除捕获抗体以外的分析物。允许以0.05μg/mL的浓度制备的hAb-1以10μL/min的速率流动30秒以结合。此后，允许通过顺序稀释制备的人CNTN4(400nM至0.78nM)作为抗原以30μL/min的速率流动3分钟以结合，并进行解离5分钟。
然后，为了清除附着于捕获抗体的所有分析物，允许再生溶液(3M氯化镁)以20μL/min的速率流动30秒，并进行再生。对于每种浓度的抗原，按顺序重复hAb-1的结合、抗原的结合、解离和再生。结果示于表3中。
[表3]
| 抗原 | 解离常数Kd |
| 人CNTN-4蛋白 | 3.56×10-8M |
由此，确认了本发明的抗体以高亲和力与人CNTN4蛋白结合。
实施例4：确认单克隆抗体hAb-1是否与CNTN4受体竞争性结合CNTN4
用20nM的抗原人CNTN4-10×His包被ELISA板。对于抗体结合，使稀释至终浓度为0至1000nM的抗体hAb-1和稀释至0或500nM的人CNTN4受体(淀粉样前体蛋白，APP)的混合物与抗原结合。HRP缀合抗人κ抗体用作抗体检测的二抗。使用显色试剂ABTS进行显色，并测量405nm处的吸光度。
结果示于图4和表4中。即使当将本发明的抗体与CNTN-4受体一起孵育时，与CNTN-4蛋白的结合程度也几乎没有改变。
这表明本发明的抗体在CNTN-4受体存在下与CNTN-4蛋白竞争性结合，并具有优异的结合能力。
[表4]
| CNTN-4受体浓度(共孵育) | EC50，nM |
| 0nM | 0.17 |
| 500nM | 0.24 |
因此，本发明的抗体特异性结合CNTN-4蛋白，即使当CNTN-4受体存在于体内时也是如此，因此可以有效抑制CNTN-4蛋白的免疫抑制能力。
实施例5：使用人T细胞测试hAb-1抗体的CNTN4中和能力
与实施例1中关于CNTN4抑制T细胞活性的能力的实验类似，将浓度为4μg/mL的α-CD3抗体和浓度为150nM的CNTN4重组蛋白制备为最终50μL并放入96孔板中，并在37℃孵育约16小时。然后，用200μL PBS洗涤经孵育的板两次，并在CNTN4处理孔中将0.375、0.75、1.5、3和6μM的hAb-1抗体各自制备为最终50μL并放入96孔板中。在37℃进行孵育约4小时。与实施例1中关于CNTN4抑制T细胞活性的能力的实验类似地进行随后的过程。
如图5所示，确认了CNTN4重组蛋白抑制CD4+T细胞和CD8+T细胞的增殖。观察到已被CNTN4抑制的T细胞的增殖以处理的hAb-1的浓度依赖性方式增加。这显示本发明的hAb-1抗体表现出显著优异的中和CNTN4的能力。
由此，确认了本发明的CNTN4抗体有效中和CNTN4并抑制其T细胞抑制功能。
实施例6：确认在结直肠癌的CT26同基因小鼠模型中的抗肿瘤功效(体内)
在该实施例中，旨在确认本发明的抗CNTN4抗体在荷瘤小鼠(具体地，结直肠癌的CT26同基因小鼠模型)中的抗肿瘤功效。
在BALB/c小鼠的右胁接种1×106个CT26细胞。移植细胞后，选择肿瘤大小为75mm3≤肿瘤体积≤150mm3的小鼠，并随机分为四组，每组八只小鼠(第0天)，并在第0天、第3天、第6天和第9天向各组腹膜内(i.p.)施用10、20和40mg/kg抗体hAb-1和作为对照的20.4mg/kg hlgG4。开始施用后每周两次测量肿瘤大小，并且基于第12天的肿瘤大小，将与对照的大小差异表示为TGI(％)。使用Graphpad PRISM 8.0进行数据的统计分析，使用双因素方差分析进行统计处理，并通过统计双尾学生t检验进行分析(*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001，****P<0.0001，相比于第1组(hIgG4))。
计算每个实验组中八只小鼠的数据值的平均值，且结果示于表5和图6中。施用10mg/kg抗体hAb-1显示出优异的肿瘤减少效果。随着剂量增加至20mg/kg和40mg/kg，肿瘤减少效果也随之增加。
[表5]
由此，确认了本发明的抗CNTN4抗体表现出抑制结直肠癌肿瘤细胞生长的效果。
实施例7：确认结直肠癌的CT26同基因小鼠模型中T细胞活性增加的功效(体内)
在该实施例中，旨在确认本发明的抗CNTN4抗体对荷瘤小鼠(具体地，结直肠癌的CT26同基因小鼠模型)中T细胞水平的效果。
将根据实施例6所述方法接种CT26结直肠癌细胞的小鼠分成四组，每组五只小鼠，并在第0天、第3天和第6天向各组腹膜内施用10、20和40mg/kg抗体hAb-1和作为对照的20.4mg/kg hlgG4(每3天施用，共3次；Q3DX3)。在第7天收获脾脏以获得脾细胞。使用在研磨并离心脾脏后从中除去红细胞的细胞。为了检测细胞中与免疫因子相关的指数，将分离的细胞分成两组，一组用免疫细胞激活材料处理，从而使得能够检测指数材料。经分离的细胞分别与抗体抗CD3-PerCP/Cy5.5、抗CD4-PE/Cy7、抗CD45-APC/Cy7和抗IFNγ-FITC一起孵育以针对CD3+、CD4+、CD45+和IFNγ，用缓冲液洗涤细胞，并测量荧光强度。在CD3、CD4和CD45的情况下，对细胞表面上表达的标志物进行表面染色，而在IFNγ的情况下，使用细胞内染色方法对细胞中表达的标志物进行染色。染色时，使用每种荧光物质的同种型以防止误判。染色完成后，用缓冲液洗涤细胞以除去剩余的荧光物质，然后用流式细胞仪(FACS CantoII)分析细胞内标志物和细胞外标志物的表达。通过Graphpad PRISM 8.0程序确认了数据的统计分析，使用单因素方差分析进行统计处理，并通过Dunnett多重比较检验来验证统计显著性。(*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001，****P<0.0001)。
结果示于图7至图10中。
图7至图9分别显示脾脏中CD4+T细胞与CD45+细胞的百分比(即CD3+CD4+/CD45+)，CD8+T细胞与CD45+细胞的百分比(即CD3+CD8+/CD45+)，以及分泌IFNγ的细胞在CD8+T细胞中的百分比(即IFNγ/CD8+)。由此，确认了当使用抗体hAb-1时，与对照(hlgG4)相比，CD4+T细胞和CD8+T细胞的水平几乎相等或增加，并且特别地，与对照相比，CD8+T细胞的细胞因子分泌显著增加。
图10显示了分析中使用的肿瘤体积的减少程度，并且在使用抗体hAb-1的所有情况下，与对照相比，肿瘤体积减少。
由此，确认了本发明的抗CNTN4抗体表现出通过增加T细胞活性(特别地，CD8+T细胞活性)和增加细胞因子分泌来抑制肿瘤细胞生长的效果。
实施例8：乳腺癌的EMT6同基因小鼠模型中抗肿瘤功效的确认(体内)
在该实施例中，旨在确认本发明的抗CNTN4抗体在荷瘤小鼠(具体地，乳腺癌的EMT6同基因小鼠模型，称为免疫冷淡(cold)肿瘤)中的抗肿瘤功效。
以与实施例6中相同的方式进行实验，不同之处在于在BALB/c小鼠的右胁接种1×106个EMT6乳腺癌细胞。
计算每个实验组中八只小鼠的数据值的平均值，且结果示于表6和图11中。施用10mg/kg抗体hAb-1显示出优异的肿瘤减少效果，并且随着剂量增加至20mg/kg和40mg/kg，肿瘤减少效果也随之增加。
[表6]
由此，确认了本发明的抗CNTN4抗体表现出抑制乳腺癌肿瘤细胞生长的效果。
实施例9：确认乳腺癌的EMT6同基因小鼠模型中T细胞活性增加的功效(体内)
在该实施例中，旨在确认本发明的抗CNTN4抗体在荷瘤小鼠(具体地，乳腺癌的EMT6同基因小鼠模型)中对T细胞水平的影响。
以与实施例7中相同的方式进行实验，不同之处在于小鼠接种1×106个EMT6乳腺癌细胞，并且每个实验组使用四只小鼠。对于用于检测的标志物CD4+、CD8+和IFNγ+，分别使用抗体抗CD4-APC/Cy7、抗CD8-PerCP/Cy5.5和抗IFNγ-FITC。
结果示于图12和图13中。
图12和图13分别显示脾脏中分泌IFNγ的细胞在CD4+T细胞和CD8+T细胞中的百分比(即IFNγ/CD4+和IFNγ/CD8+)。由此，确认了当使用抗体hAb-1时，与对照(hlgG4)相比，CD4+T细胞和CD8+T细胞的细胞因子分泌显著增加。
由此，确认了本发明的抗CNTN4抗体表现出通过增加T细胞活性和增加细胞因子分泌来抑制肿瘤细胞生长的效果。
实施例10：确认肺癌的LLC-1同基因小鼠模型中T细胞活性增加的功效(体内)
在该实施例中，旨在确认本发明的抗CNTN4抗体在荷瘤小鼠(具体地，肺癌的LLC-1同基因小鼠模型)中对T细胞水平的影响。
以与实施例7中相同的方式进行实验，不同之处在于小鼠接种1×106个LLC-1肺癌细胞，并且每个实验组使用三至四只小鼠。
对于用作可检测标志物的CD3+和IFNγ+，分别使用抗体抗CD3-PerCP/Cy5和抗IFNγ-FITC。
结果示于图14和图15中。
图14显示分泌IFNγ的细胞在分布于脾脏中的T细胞中的百分比(即IFNγ/CD3+)。由此，确认了当使用抗体hAb-1时，与对照(hlgG4)相比，T细胞的细胞因子分泌显著增加。
图15显示了分析中使用的肿瘤体积的减少程度，并且在使用抗体hAb-1的所有情况下，与对照相比，肿瘤体积减少。
由此，确认了本发明的抗CNTN4抗体表现出通过增加T细胞活性(特别地，CD8+T细胞活性)和增加细胞因子分泌来抑制肿瘤细胞生长的效果。
序列表
<110> 韩国亿诺生物有限公司
<120> 抗CNTN4特异性抗体及其用途
<130> S20P-0033-WO
<160> 2
<170> KoPatentIn 3.0
<210> 1
<211> 102
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> hAb-1轻链可变区（VL）
<400> 1
Glu Leu Thr Gln Asp Pro Ala Val Ser Val Ala Leu Gly Gln Thr Val
1 5 10 15
Arg Ile Thr Cys Ser Gly Ser Ser Gly Ser Tyr Gly Trp Tyr Gln Gln
20 25 30
Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Ile Tyr Asp Asn Thr Asn Arg
35 40 45
Pro Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Ser Ser Gly Asn Thr
50 55 60
Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Ala Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr
65 70 75 80
Tyr Cys Gly Gly Tyr Asp Gly Ser Thr Asp Val Phe Gly Gly Gly Thr
85 90 95
Lys Leu Thr Val Leu
100
<210> 2
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> hAb-1重链可变区（VH）
<400> 2
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe
20 25 30
Asn Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Glu Ile Ser Gly Gly Gly Gly Ser Thr Trp Tyr Ala Pro Ala Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Ser Ala Asp Thr Trp Ser Tyr Gly Ala Ala Thr Ile Asp Ala
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
Claims (25)
1.一种抗CNTN4抗体或其抗原结合片段，其包含：
轻链可变区，其包含SEQ ID NO：1的氨基酸序列；和
重链可变区，其包含SEQ ID NO：2的氨基酸序列。
2.根据权利要求1所述的抗CNTN4抗体或其抗原结合片段，其与人或小鼠CNTN4蛋白特异性结合。
3.根据权利要求1所述的抗CNTN4抗体或其抗原结合片段，其与人CNTN4蛋白结合的解离常数(Kd)为1×10-7M或更小。
4.根据权利要求1所述的抗CNTN4抗体或其抗原结合片段，其增加T细胞活性。
5.根据权利要求4所述的抗CNTN4抗体或其抗原结合片段，其中所述T细胞是CD4+T细胞或CD8+T细胞。
6.根据权利要求1所述的抗CNTN4抗体或其抗原结合片段，其增加细胞因子的分泌。
7.根据权利要求6所述的抗CNTN4抗体或其抗原结合片段，其中所述细胞因子是IL-2、TNFα、IFNγ或其组合。
8.根据权利要求1所述的抗CNTN4抗体或其抗原结合片段，其中所述抗原结合片段选自Fab、Fab'、Fab'-SH、Fv、单链抗体scFv、(Fab')2片段、单结构域抗体、双体抗体(dAb)和线性抗体。
9.根据权利要求1所述的抗CNTN4抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体是单克隆抗体。
10.根据权利要求1所述的抗CNTN4抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体是嵌合抗体或人源化抗体。
11.根据权利要求1所述的抗CNTN4抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体是多特异性抗体。
12.根据权利要求1所述的抗CNTN4抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体与药物缀合。
13.根据权利要求1所述的抗CNTN4抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体是IgG1、IgG2、IgG3或IgG4。
14.一种核酸分子，其编码权利要求1至13中任一项所述的抗体或其抗原结合片段。
15.一种重组表达载体，其包含权利要求14所述的核酸分子。
16.一种用于预防或治疗癌症的药物组合物，所述组合物包含权利要求1至13中任一项所述的抗CNTN4抗体或其抗原结合片段作为活性成分。
17.根据权利要求16所述的药物组合物，其中所述癌症是表达CNTN4的癌症。
18.一种用于预防或治疗癌症的药物组合物，所述组合物包含根据权利要求1至13中任一项所述的抗CNTN4抗体或其抗原结合片段；以及另外的抗癌剂。
19.根据权利要求18所述的药物组合物，其中所述另外的抗癌剂是免疫检查点抑制剂或化学治疗剂。
20.根据权利要求19所述的药物组合物，其中所述免疫检查点抑制剂是选自抗CTLA-4抗体、抗PD-1抗体和抗PD-L1抗体中的一种或多种。
21.根据权利要求18所述的药物组合物，其中所述抗CNTN4抗体或其抗原结合片段以及所述另外的抗癌剂作为单一制剂同时施用，或作为分开的制剂同时或顺序施用。
22.一种用于预防或治疗癌症的药物组合物，所述药物组合物包含权利要求1至13中任一项所述的抗CNTN4抗体或其抗原结合片段，并且与另外的抗癌疗法组合使用。
23.根据权利要求22所述的药物组合物，其中所述另外的抗癌疗法是选自免疫检查点抑制剂、化学治疗剂和放射疗法中的一种或多种。
24.一种用于诊断癌症的组合物，所述组合物包含权利要求1至13中任一项所述的抗CNTN4抗体或其抗原结合片段。
25.一种用于检测样品中的CNTN4蛋白的方法，其通过使用权利要求1至13中任一项所述的抗CNTN4抗体或其抗原结合片段作为活性成分来进行。
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PCT/KR2021/005449 WO2022231032A1 (ko) | 2021-04-29 | 2021-04-29 | 항-cntn4 특이적 항체 및 그의 용도 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN117203234A true CN117203234A (zh) | 2023-12-08 |
Family
ID=83846973
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202180097588.5A Pending CN117203234A (zh) | 2021-04-29 | 2021-04-29 | 抗cntn4特异性抗体及其用途 |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20240209081A1 (zh) |
| EP (1) | EP4332116A1 (zh) |
| JP (1) | JP2024516384A (zh) |
| KR (1) | KR20220148699A (zh) |
| CN (1) | CN117203234A (zh) |
| WO (1) | WO2022231032A1 (zh) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110468061B (zh) * | 2018-05-11 | 2024-03-08 | 韩国亿诺生物有限公司 | 具有预防或治疗癌症的效果的新型菌株 |
| KR20240127523A (ko) * | 2023-02-15 | 2024-08-23 | 주식회사 지놈앤컴퍼니 | 항-cntn4 항체 및 그의 용도 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP7088572B2 (ja) | 2018-04-05 | 2022-06-21 | ゲノム アンド カンパニー | 抗がんおよび免疫増強用新規ターゲット |
| US20200263258A1 (en) * | 2019-02-15 | 2020-08-20 | Mayo Foundation For Medical Education And Research | Assessing and treating mammals having polyps |
-
2021
- 2021-04-29 EP EP21939415.2A patent/EP4332116A1/en active Pending
- 2021-04-29 US US18/288,268 patent/US20240209081A1/en active Pending
- 2021-04-29 JP JP2023563837A patent/JP2024516384A/ja active Pending
- 2021-04-29 WO PCT/KR2021/005449 patent/WO2022231032A1/ko active Application Filing
- 2021-04-29 CN CN202180097588.5A patent/CN117203234A/zh active Pending
- 2021-08-06 KR KR1020210103584A patent/KR20220148699A/ko active Search and Examination
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2024516384A (ja) | 2024-04-15 |
| EP4332116A1 (en) | 2024-03-06 |
| KR20220148699A (ko) | 2022-11-07 |
| US20240209081A1 (en) | 2024-06-27 |
| WO2022231032A1 (ko) | 2022-11-03 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN108124445B (zh) | Ctla4抗体、其药物组合物及其用途 | |
| JP2018532383A (ja) | ヒトｔ細胞免疫グロブリン及びｉｔｉｍドメイン（ｔｉｇｉｔ）に特異的な抗体 | |
| IL261200B (en) | Antibodies specific for the human poliovirus receptor | |
| CN110305210A (zh) | 新型抗体分子、其制备方法及其用途 | |
| TWI835061B (zh) | 抗ｔｎｆｒ２人源化抗體及其用途 | |
| US20230183342A1 (en) | Antibodies to nkp46 and constructs thereof for treatment of cancers and infections | |
| EP4321535A1 (en) | Anti-cntn4 antibody and use thereof | |
| CN117203234A (zh) | 抗cntn4特异性抗体及其用途 | |
| CN110546165A (zh) | 抗-pd-l1-抗-tim-3双特异性抗体 | |
| CN117098780A (zh) | 单域pd-l1抗体 | |
| CN113321735B (zh) | 一种多功能融合蛋白 | |
| EP4410840A1 (en) | Bispecific antibody and application thereof | |
| JP2021526013A (ja) | 抗ヒトｌａｇ−３モノクローナル抗体とその応用 | |
| CN114616245B (zh) | 一种抗cd38的抗体及其用途 | |
| CN116234559A (zh) | 抗cd22单结构域抗体和治疗性构建体 | |
| US20240209112A1 (en) | Anti-bcam antibody or antigen-binding fragment thereof | |
| CN113166264B (zh) | 一种分离的抗原结合蛋白及其用途 | |
| WO2023030311A1 (zh) | 靶向Siglec15的抗原结合蛋白及其用途 | |
| WO2023195532A1 (ja) | ヒトｔｉｍ－３およびヒトｃｄ３９に対する二重特異性抗体およびその用途 | |
| WO2023098785A1 (zh) | 抗4-1bb抗体及其用途 | |
| CN115181180A (zh) | 抗人程序性死亡配体-1（pd-l1）的抗体及其应用 | |
| KR20240127523A (ko) | 항-cntn4 항체 및 그의 용도 | |
| CA3231649A1 (en) | Multispecific binding moieties comprising pd-1 and tgf-brii binding domains | |
| CN117866091A (zh) | 抗cd100抗体及其用途 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |